组织构建-骨性关节炎-卵巢切除联合过度运动制作骨性关节炎大鼠模型
中国组织工程研究第16卷第15期2012–04–08出版
Chinese Journal of Tissue Engineering Research April 8, 2012 Vol.16, No.15
1Department of
Orthopedics,
2Department of
Ophthalmology,
Affiliated Zhongshan
Hospital of Dalian
University, Dalian
116001, Liaoning
Province, China
Su Yun☆, Doctor,
Associate chief
physician,
Department of
Orthopedics,
Affiliated Zhongshan
Hospital, Dalian
University, Dalian
116001, Liaoning
Province, China
suyunll@https://www.wendangku.net/doc/9f3453252.html,
Supported by: the
Staring Foundation of
Dalian University for
Doctors
Received: 2011-09-24
Accepted: 2011-10-26
大连大学附属中
山医院，1骨科，
2眼科，辽宁省大
连市 116001
苏云☆，男，1977
年生，吉林省公主
岭市人，汉族，
2007 年吉林大
学毕业，博士，副
主任医师，主要从
事骨关节创伤、骨
病和骨科人工材
料方面的研究。
suyunll@sina.
com
中图分类号:R318
文献标识码:B
文章编号:1673-8225
(2012)15-02772-04
收稿日期：2011-09-24
修回日期：2011-10-26
(20110810016/GW·
LX)
卵巢切除联合过度运动制作骨性关节炎大鼠模型*☆
苏云1，孟祥俊2
A rat osteoarthritis model established by ovariectomy and excessive exercise
Su Yun1, Meng Xiang-jun2
Abstract
BACKGROUND: Osteoarthritis is commonly seen in postmenopausal women. Therefore, establishing an osteoarthritis model in
postmenopausal animals will contribute to the research of osteoarthritis.
OBJECTIVE: To establish a postmenopausal rat model of osteoarthritis．
METHODS: Female SD rats, aged 4 months, were randomly divided into normal control group and experimental group. The backs
of experimental rats were cut open and the both ovaries were removed. The experimental rats were forced to walk in a rolling
wheel for 10 minutes twice daily after the incision healed. Rats in normal control group received no treatment.
RESULTS AND CONCLUSION: The cell layers in the articular cartilage were clear in the normal control group, and the cell shape
was normal. The articular cartilage in the experimental group became thinning and degeneration. The cartilage surface became
roughness and some of the surface layer lost. The cell number decreased and the cartilage cell layers became disorder. The
trabecula was sparse and arranged in disorder. The femur bone mineral density in experimental group was significantly decreased
compared with that in the control group (P < 0.05). It demonstrates that the osteoarthritis model is successfully established by
ovariectomy and excessive exercise in postmenopausal rats.
Su Y, Meng XJ.A rat osteoarthritis model established by ovariectomy and excessive exercise. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu.
2012;16(15): 2772-2775. [https://www.wendangku.net/doc/9f3453252.html, https://www.wendangku.net/doc/9f3453252.html,]
摘要
背景：骨性关节炎多见于绝经期妇女，因此成功地建立一个动物绝经期骨性关节炎模型将为研究此类疾病提供帮助。
目的：建立大鼠绝经期骨性关节炎动物模型。
方法：取4月龄雌性SD大鼠，随机分为正常对照组与实验组。实验组经背部切口切除双侧卵巢，切口愈合后，每天驱使大
鼠在滚轮上运动，10 min/次，2次/d；正常对照组大鼠不作任何处理。
结果与结论：正常对照组大鼠关节软骨中细胞层次清楚，细胞形态正常。实验组关节软骨变薄、退变，软骨面粗糙，表层有
缺失，细胞数量减少，软骨细胞层次紊乱，骨小粱稀疏，排列紊乱。实验组大鼠股骨骨密度较正常对照组大鼠明显下降
(P < 0.05)。说明卵巢切除联合过度运动可成功建立大鼠绝经期骨性关节炎动物模型。
关键词：骨性关节炎；绝经期；动物模型；卵巢；大鼠
doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.024
苏云，孟祥俊. 卵巢切除联合过度运动制作骨性关节炎大鼠模型[J].中国组织工程研究，2012，16(15):2772-2775.
[https://www.wendangku.net/doc/9f3453252.html, https://www.wendangku.net/doc/9f3453252.html,]
0 引言
骨性关节炎是一种慢性退行性关节疾病[1]，
发病率较高，多见于中老年人，其主要病理改
变是关节软骨的退变和继发性骨质增生，但其
具体发病机制还没有被充分阐明，治疗上也呈
现出多样性。动物实验是研究骨性关节炎发病
机制和观察疗效等所必须的手段之一，而一个
良好的骨性关节炎动物模型则是整个动物实验
的基础。流行病学研究显示，骨性关节炎患者
女性多于男性，特别是绝经后妇女[2-4]。
目前骨性关节炎模型的制作方法主要为如
下几种：①关节制动法：如Okazaki等[5]将兔膝
关节制动于伸直位五六周即可得到骨性关节炎
模型。②关节内药物注射法：将具有破坏关节
软骨或分解基质的药物注射入关节腔制作骨性
关节炎模型，如Badger等[6]通过关节腔内注射
破坏软骨的药物建立了大鼠骨关节炎动物模
型。③关节内手术法：是目前制作骨性关节炎
动物模型较为流行的方法，包括膝关节内半月
板切除、前后交叉韧带切断，Hulth法以及关节
划痕法等[7]。④动物自发性骨性关节炎模型，
Wei等[8]采用9月龄豚鼠进行研究，发现豚鼠的
骨性关节炎与人类的骨性关节炎相似，其进程
缓慢，软骨基质的病变程度与负荷呈正相关。
在这些动物模型中，自发性骨性关节炎模型制
作难度大、成本高，且只适合于研究骨性关节
炎的某一遗传倾向，因此应用范围有限。关节
制动法将关节长期制动于某一位置，类似于临
床上骨折患者长期制动肢体所造成的邻近关节
僵硬过程，对关节的正常生理状态干扰明显。
关节内手术法制作骨关节炎模型成功率高，但
均是对关节的外科干预，造成了关节的创伤，其
苏云，等. 卵巢切除联合过度运动制作骨性关节炎大鼠模型
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.org
病理过程为创伤性关节炎形成的过程，与退行性骨性关节炎的发生发展仍存在较多的不同。
据此，本文通过制作绝经期大鼠模型并使之过度运动，以期建立一种更加接近于人类中老年女性自然发展状态下而形成的骨性关节炎模型。
1 材料和方法
设计：随机对照动物实验。
时间及地点：于2009-03/2010-05在大连大学附属中山医院完成。
材料：
实验动物：4月龄SD 雌性大鼠20只，体质量(215±
13) g ，由大连医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证：SCXK (辽)2008-0002。实验对动物的处理方法符合中华人民共和国科学技术部颁发的《关于善待实验
动物的指导性意见》[3]
。适应性饲养1周，自然光照，动
物房温度维持在20 ℃左右。随机分为正常对照组与实验组(骨性关节炎组)。
主要仪器：共聚焦显微镜(Nikon Eclipse Ti ，日本)。
双能X 射线骨密度仪(DEXA)(DMS ，法国)。
实验方法：
绝经期大鼠骨性关节炎模型的制作：以2%戊巴比妥钠
腹腔麻醉，以末根肋骨所对应之椎体为中点做背部正中纵行切口，向两侧牵拉切口，分别于脊柱两侧切开肌层，显露两侧肾脏，于其下找到卵巢并切除，止血后缝合切口。术后3 d 内每日给予80×104 U 青霉素肌注预防感染。切口愈合后将动物置于电动滚轮上，驱使动物行走， 10 min/次，2次/d 。正常对照组不做处置。
取材：术后3个月采取颈椎脱臼法处死大鼠，进行如
下处置及检测。
大体观察：取材时对新鲜膝关节标本的关节软骨色泽
以及光滑度等进行大体观察。
大鼠股骨骨密度测量：取左侧股骨标本，采用双能X
射线骨密度测量仪测量股骨近段骨密度(g/cm 2
)。
组织学观察：取胫骨平台关节面的软骨及骨组织，体
积分数10%甲醛固定48 h ，5%硝酸锐钙48~72 h ，乙醇脱水，将胫骨内侧平台沿矢状线切成厚度约0.2 cm 的组织片，行石蜡纵向包埋，常规切片，苏木精-伊红染色。每组选择来源于不同标本的8张切片，于光学显微镜下进行观察，每张切片取3个视野，进行Mankin 评分。
Mankin 评分标准：①表面结构：正常0分，不规则1
分，粗糙2分，大溃疡或缺损3分。②细胞数量：正常0分，轻微减少1分，严重减少2分，细胞消失3分。③细胞克隆：正常0分，偶见双细胞的克隆1分，两三个细胞一组的克隆2分，出现细胞巢3分。④基质染色：正常0分，轻度减少1分，重度减少2分，未着色3分[4]。
主要观察指标：两组关节软骨大体观察、光镜观察及股骨近段骨密度测量。
统计学分析：数据采用x _
±s 表示，利用SPSS 10.0统计软件，采取t 检验对数据进行处理，以P < 0.05表示差异有显著性意义。
2 结果
2.1 动物术后一般情况观察 实验组术后5 d 及1周时，各有1只动物死亡，发现有死亡鼠后立即造模补充，并相应延长补充大鼠的饲养时间。术后6~8 d 切口愈合，不需拆线，动物单笼饲养，自由活动及饮食。 2.2 两组大鼠膝关节软骨大体观察结果 正常对照组大鼠膝关节可见软骨表面光滑、有光泽、形态均匀规则，见图1a 。实验组大鼠可见软骨面光泽度减低，有些呈淡黄色或暗红色，部分触之较软，关节面不均匀、平滑度差甚至粗糙感，有些负重区关节软骨开裂甚至剥脱，关节边缘有骨赘形成，见图1b 。
2.3 两组大鼠股骨近段骨密度测量结果 实验组大鼠股骨密度值(0.15±0.04) g/cm 2，差异低于正常对照组(0.23±0.12) g/cm 2，差异有显著性意义(P < 0.05)。 2.4 两组大鼠股骨远端组织学观察结果 正常对照组关节软骨中细胞层次清楚，表层、移行层、放射层及钙化层各层次清晰可见，潮标明显，细胞形态正常，基质着色均匀，未见炎性细胞浸润，见图2a 。实验组关节软骨面粗糙，表层有缺失，细胞数量减少，软骨细胞层次紊乱，排列不规则，软骨基质着色不均匀，见图2b ；软
Figure 1 Gross observation of the knee joint cartilage in
rats
图1 两组大鼠膝关节软骨大体观察
b: Experimental group a: Control group
苏云，等. 卵巢切除联合过度运动制作骨性关节炎大鼠模型
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骨下骨内局部区域骨小梁变细，排列较紊乱，稀疏，可见多个的断点，连续性较差。Mankin 评分结果为实验组8.10±1.22，正常对照组为1.67±0.32，两组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。
3 讨论
绝经后妇女多发退行性骨性关节炎，此类骨性关节炎有两个特点，一是月经停止，二是多伴有骨质疏松。有报道55~64岁人群中骨性关节炎发病率达40%，而绝经后妇女约有30%患有骨质疏松症[9]。为此，建立一个符合绝经期中老年女性退行性骨性关节炎的动物模型，将为此类疾病的研究提供一个合理的基础平台。
雌激素缺乏是引起骨质疏松症的主要原因，切除大鼠双侧卵巢是一个模仿人类绝经后骨质疏松症的公认模型，该模型最快可在15 d 出现骨质疏松，至少在12个月内骨代谢改变与人类绝经后骨质疏松症的高转换型骨代谢过程有非常相似之处
[10]
。本实验中卵巢切除3个
月后对动物股骨进行骨密度测量，发现实验组动物股骨密度明显低于正常对照组。由此可证明女性绝经是骨质疏松症发生的一个重要原因，亦佐证本实验卵巢切除的成功。
本实验中骨性关节炎动物模型的制作方法与其他制作方法相比，该模型是以人类绝经期中老年女性退行性骨性关节炎为目标，除了将卵巢切除以模仿绝经期生理状态外，不对关节采取固定、药物或外科手术干预等措施，尽量维持关节的日常状态，而是驱使动物正常负
重下活动，此点也与人类的日常生活劳动相似。在术后3个月通过大体及组织学观察结果表明，大鼠卵巢切除联合过度运动可成功制作骨性关节炎模型。
采用本实验方法制作骨性关节炎模型，其机制可能与雌激素的急剧降低，骨质疏松及关节过度活动有关。有报道17β雌二醇可抑制软骨细胞增生，增强软骨细胞RNA 的表达，促进其蛋白多糖和胶原的合成，以及碱性磷酸酶和肌酸激酶的特异性表达。雌激素通过传统的核受体和膜介导途径作用于软骨细胞。雌激素的特异性受体在关节软骨、生长板和骨痂中均有发现。还有研究发现切除卵巢可导致雌性大鼠膝骨性关节炎模型内肉芽组织白细胞介素1产生明显增多。而白细胞介素1能减少关节软骨中蛋白多糖和胶原的合成，还能诱导金属蛋白酶的形成和释放，导致基质降解[11]。1995年国际骨性关节炎专题会议认为，骨性关节炎是在力学和生物学因素的共同作用下，软骨细胞、细胞外基质及软骨下骨三者降解与合成的正常偶联失衡的结果[12]。软骨下骨的结构和生物力学性能及生物学方面的变化与骨性关节炎密切相关[13-14]。由此可以看出，本方法造成骨性关节炎形
成的可能机制至少包括：①卵巢切除后雌激素水平的急剧下降，通过不同途径引起软骨细胞的过度凋亡，使关节软骨失去更多的保护而发生退变。②雌激素的减少使骨的质量下降，软骨下骨质疏松形成，生物力学性能下降，膝关节的局部平衡被破坏，在不断的运动中加剧了骨性关节炎。
实验中采取术后3个月取标本观察是参考了大量文献制定的时间点，一般的制模方法在处置3个月后均能成功制作中晚期骨性关节炎模型。实验中实验组有3只动物标本的大体及组织学观察显示软骨损伤的改变轻微，属于骨性关节炎较早期的改变。可见此方法造模的成功率尚不稳定，还需要改进方法。此外，在下一步研究中应将整个实验周期分为若干时间点，并设立多个组别进行观察，以有助于进一步阐明病变过程及发生机制。总之，本方法成功制作了大鼠骨性关节炎模型，更加类似于人类绝经期中老年女性退行性骨性关节炎的发生过程，从而为此类疾病的研究提供了一个新的模型平台。
致谢：对大连大学附属中山医院中心实验室及实验
动物室在实验过程中给予的指导和帮助表示感谢。
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Figure 2 Histological observation of the distal femurs in two
groups (Hematoxylin-eosin staining, ×200)
图2 两组大鼠股骨远端组织学观察(苏木精-伊红染色，
×200)
b: Experimental group
a: Control group
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大鼠系统解剖简述
大鼠系统解剖简述
第一章皮肤 一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。 二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。 1、皮脂腺分布在毛囊周围。口角部、肛门、包皮 和乳头周围有特化的皮脂腺。 2、汗腺，大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。 3、乳腺 数量大鼠的乳腺共有6对，胸部3对，腹部1对，鼠蹊部2对。个别的大 鼠有5对或者7对。 大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。 部位包埋在皮下组织中，由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。 第 二章骨 一．脊柱大鼠的脊柱由57－61块脊椎骨组成，包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、 尾锥27－31块。锥式C7T13L6S4Cy27 －31。骨性标志为第二胸椎，其棘突最 高，超过其它脊椎骨。 1、颈椎和其它哺乳动物一样，恒为7块，全无 肋骨相连，横突上具有横突孔，供锥动 脉通过。 2、胸椎13块，椎骨的长度由前向后逐渐增加（由 2毫米增加到4毫米），锥管的直径平 均为3.3毫米，较颈部的锥管为狭窄。 3、腰椎6块，每块锥体的长度比较一致，约6
－7毫米。锥管直径由前面的4毫米向 后逐渐缩小至2毫米。 二、胸骨 共分为6节，最前一节为胸骨柄，第二到第五 节称为胸骨体，最后一节为剑突，棒状 的剑突后面接一盘状的剑状软骨。胸骨 柄长约10毫米。 第三章肌 肉系统（省略） 第四章消 化系统 消化系统包括消化管及附属消化器官。消化管可 分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。 附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和 胰。 第一节消化管 一、口腔 1、舌全长约30毫米，不具有正中系带， 但是有两条侧系带。 一、食管 分为颈、胸、腹三部。成年大鼠食管的颈－胸段长度约75毫米，腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米，食管外径约2毫米。 位置：食管主要是沿气管背侧走行，仅在颈部稍偏左侧。 一、胃 位置：横位于腹腔的左前部，其壁 面几乎完全为肝的左叶所覆盖。 大小：胃重为体重的0.5％，属单室 胃。
骨关节炎动物模型研究进展
课程论文 题目：骨关节炎动物模型研究进展 姓名：郑硕 学号：2014010418017 学院：应用文理学院 专业：生物技术 201 5年6月30日 摘要：骨关节炎是一种常见的随着年龄增加的退行性疾病之一。随着社会人口不断老龄化，其发病率逐年增加，它严重危害人类的健康，同时也对社会经济造成
极大的负担。骨关节炎动物模型是研究骨关节炎发病机制、危险因素及其治疗方法的一种重要手段。骨关节炎是一种慢性多因素的疾病，其动物模型的制作往往是通过模拟一种或数种致病因素诱发关节软骨的退变来实现。建立动物模型是寻找有效治疗措施的重要途径动物自发模型适合骨关节炎的病理机制及防治骨关 节炎的研究；而非手术方法诱发动物模型主要用于软骨病变用药物研究；通过手术方法人工诱发的动物模型可能会引起关节其他损伤。现就骨关节动物模型做以下分析。 关键词：骨关节炎动物模型研究进展 1 实验模型动物的选择 针对人类疾病的研究，实验模型动物的选择要具有同质性: 实验动物模型能够体现出该疾病的遗传因素、自然病程、诱发因素、治疗干预，并能够用于科学研究。 在一个骨关节炎动物实验开始之前，选择模型动物需要考虑到以下的原则［1］: (1)基因的同质性;(2)运动和营养同质性及可应用性;(3)实验动物的生存时间、疾病时间、发病年龄、发病率等;(4)能够匹配的对照群体的可获得性;(5)解剖学及生理学特性,数量上:考虑关节组织是否足够研究? 能否获得足够的关节液、关节滑膜;质量上:与人类组织的相似性,为负重关节或非负重关节;(6)标准动物来源充分、动物是否易于控制;(7)费用以及伦理问题。 2 动物模型的分类 各种骨关节炎模型的制作方法千变万化，骨关节炎的动物模型可以大致分为两大类:自发性模型和人工诱导性模型。自发模型即实验动物未经过任何有意识的人为处理，在自然情况下所发生的骨关节炎症。Arlet等［2］根据病理特点将试验诱导性模型又分为机械性及结构性模型。人工诱发模型可通过手术和非手术方法诱导骨关节炎产生。 2.1 自发性模型 不仅人类，其他动物也有可能自发形成关节炎。主要是由于自身关节软骨退变形成骨关节炎。通常能用于研究的自发性骨关节炎的动物为实验室饲养的小鼠、大鼠、豚鼠、狗,也有可能用到恒河猴。经研究发现小鼠很少发生骨性关节炎，大鼠终身保持骺软骨也是如此。然而,有学者在研究CD/BR大鼠踝关节时发现，26个月的大鼠就开始出现软骨细胞坏死，软骨纤维及软骨下骨重［1］。它在组织学上特性与骨关节炎相似。这证明了老龄大鼠更容易引发骨关节炎，然而，相对于人类疾病而言，踝关节产生关节炎的情况很少产生。YamamotoK [3]通过观察黑鼠关节软骨组织病理学改变发现，黑鼠骨关节炎发病率以及严重程度随年龄增加
常用疾病动物模型
常用疾病动物模型 上海丰核可以为广大客户提供各种疾病动物模型定制服务，同时提供相关疾病模型的药物敏感性实验分析服务。 客户只需要提供疾病模型的用途及建模方法的选择，我们会根据客户的具体要求量身定做各种动物模型服务。
小鼠或裸 鼠 加贴近实际（八）心血管疾病模型 1. 动脉粥样硬化（高脂高胆固醇+维生素D喂养）兔高脂、高胆固醇饲喂兔造模，成 膜后血脂变化显著，为伴高血脂 症的动脉粥样硬化 4月血管组织病 理切片染色 2. 主动脉粥样硬化（高脂高胆固醇+主动脉球囊损伤）兔此模型用大球囊损伤加高脂饲 养方法成功建立兔主动脉粥样 硬化狭窄的动物模型，为相关基 础研究提供可靠模型。 2月动物实验模型病理切片展示 一、CCl4诱导的肝脏纤维化 简介：肝纤维化是肝细胞坏死或损伤后常见的反应，是诸多慢性肝脏疾病发展至肝硬化过程中的一个中间环节。肝纤维化的形成与坏死或炎症细胞释放的多种细胞因子或脂质过氧化产物密切相关。CCl4为一种选择性肝毒性药物，其进入机体后在肝内活化成自由基，如三氯甲基自由基，后者可直接损伤质膜，启动脂质过氧化作用，破坏肝细胞的模型结构等，造成肝细胞变性坏死和肝纤维化的形成。通过CCl4复制肝纤维化动物模型通常以小鼠或大鼠为对象，染毒途径主要为灌胃、腹腔注射或皮下注射。 动物模型图. 经过3个月的CCl4注射造模，小鼠的肝脏在中央静脉区形成了比较明显的肝纤维化，中央静脉之间形成了纤维桥接。（Masson染色） 二、CXCL14诱导的急性肝损伤动物模型
简述：CCl4是最经典的药物性肝损伤造模毒素之一，其在肝内主要被微粒体细胞色素P450氧化酶代谢，产生三氯甲烷自由基和三氯甲基过氧自由基，从而破坏细胞膜结构和功能的完整性，引起肝细胞膜的通透性增加，可溶性酶的大量渗出，最终导致肝细胞死亡，并引发肝脏衰竭。根据CCl4代谢和肝毒性机制可复制不同的肝损伤模型，其中给药剂量和给药方法是其技术关键。对于复制急性肝衰竭动物模型，往往采用大剂量一次性灌胃或腹腔注射给药。 图. (A) CCl4注射后0.5 d的HE染色表明CXCL14过表达增加了肝脏组织的嗜酸性变性面积(在照片中用虚线标记)(p < 0.05)。 (B) 1.5天组织样本的HE染色表明CXCL14过表达造成了比对照组更大面积的细胞坏死(p < 0.05)。 (C)同时还造成了中央静脉周围肝细胞中明显的脂肪滴积累。图中P和C分别表示动物模型的门静脉和中央静脉。KU指凯氏活性单位。 细胞凋亡检测结果 TUNEL标记没有显示CXCL14免疫中和小鼠和对照小鼠在凋亡细胞数量上的差异。C0, C1和C2分别是对照组0 d，1 d,和2 d样本，T1
骨关节炎动物实验模型的研究进展
骨关节炎动物实验模型的研究进展 骨关节炎(Osteoarthritis)是一组有不同病因但有相似的生物学、形态学和临床表现的疾病。该病不仅发生关节软骨损伤，还累及整个关节，包括软骨下骨、韧带、关节囊、滑膜和关节周围肌肉，最终发生关节软骨退变，纤维化，断裂，溃疡及整个关节面的损害。 本病的病理过程是以应力较高部位的关节软骨接触面广泛纤维化为特点，并伴有软骨下骨的骨质象牙化和硬化，关节边缘常常出现骨赘形成和骨的改建活动，关节滑膜囊的纤维化，与常见的滑膜非特异性炎症[1]。但是骨关节炎的致病机理仍然是一个充满争议和需要继续探索的课题，为了澄清骨关节炎发病和病程进展过程中，在关节组织中细胞分子水平的变化，这就需要使用实验动物模型观察。通过动物实验可以确定软骨基质的降解方式以及滑膜、软骨中的生物合成作用是如何被抑制的，同时还可以用来评价潜在的拮抗药物，为发现新的抗骨关节炎药物奠定基础。现就常用的骨关节炎实验动物模型的制备方法，应用优缺点和意义讨论如下。 1 关节腔内注射化合物诱导骨关节炎 多种化合物以关节内注射方式注入动物关节以后，可以出现许多类似于骨关节炎的病理改变。木瓜蛋白酶引起实验动物骨关节炎的机制可能在于其对软骨基质中蛋白多糖的分解作用，并能除去软骨细胞膜上有丝分裂抑制因子[2]。向C57Bl10小鼠关节内注射细菌源性胶原酶诱导骨关节炎的实验研究证实，在关节不稳定的程度与软骨损伤的严重程度（数量）和形成骨赘的大小之间，存在着显著的相关性[3]。关节内注射IL-1模型已经成功的用于确定某些蛋白酶抑制剂，但是否有抗骨关节炎药物的潜力有待研究。 2 骨关节炎制动造模方法 保证关节的正常活动和负重才能维持关节软骨的构成成分、结构和功能。固定肢体使关节制动可以诱发关节软骨萎缩，致使软骨变薄、水肿，蛋白聚糖含量下降，结构改变以及合成数量的下降，同时还有胶原合成及含量的增加。因为这些软骨改变与我们所见的人类骨关节炎病理改变相似，所以这种模型特别用于软骨退变过程的研究。但在着重软骨基本形态学的研究差别上，这一模型的使用逐
_骨性膝关节炎的针灸治疗方法
Environ M ed,2006,48(5):455-4611 [25]Fri d l yand LE,Ph ili pson LH1Reacti ve speci es and early m an ifes- tati on of i n s u li n resist ance i n t yp e2d iabet es[J]1D i abetes Obes M etab,2006,8(2):136-1451 [26]ChooH J,K i m J H,Kw on OB,et al1M i tochondria are i m paired i n the ad i pocytes of t ype2d i ab eti c m ice[J]1D i ab etologia,2006, 49(4):784-7911 [27]Hajl und K,M ogensen M,Sah li n K,et al1M itoc h ondri a ldysf un c- ti on i n typ e2d i abetes and obes it y[J]1Endocri nolM etab C li n North Am,2008,37(3):713-7311[28]Ozcan U,Cao Q,Y il m az E,et al1Endop las m ic reti cu l um stress li nks obesit y,i n s u li n action,and typ e2d i abetes[J]1S ci en ce, 2006,306(5695):457-4611 [29]Oza w a K,M i yazak iM,M ats uh isaM,et a l1The endop l as m i c re- ti cu l um chap eron e i m p roves i n s u li n res i s t an ce i n type2d i abetes [J]1D i abetes,2005,54(3):657-6631 (收稿日期:2010-04-19;修回日期:2010-09-29) (本文编辑:潘雪飞) 骨性膝关节炎的针灸治疗方法 丁勤能1综述,徐兰凤2审校 [摘要]本文从针灸的方法及取穴特点两方面综述近十年来针灸治疗骨性膝关节炎的临床研究现状,并作了展望,为今后进一步研究针灸治疗骨性膝关节炎提供努力的方向。 [关键词]骨性膝关节炎;针灸 中图分类号:R68413文献标志码:A文章编号:1672-271X(2010)06-0529-03 骨性膝关节炎是骨关节炎(osteoarthritis,OA)中最常见的疼痛、僵硬及活动受限,影响患者生活能力。祖国医学把本病归入/痹证0、/骨痹0、/筋伤0、/劳损0等范畴,历代医家对病因的认识基本一致,认为主要与年老体衰,长期劳损,外感风寒湿邪有关。病因主要为年老肝肾亏虚,筋骨失养,长期劳损,血瘀气滞。而风寒湿邪杂至、痹阻经络是本病发生、发展的根本。治疗方法有中医、西医、中西结合等。以针灸为主的治疗方法对该病取得了较好的疗效,有关针灸治疗膝骨性关节炎的报道日益增多,有用不同的治疗方法观察临床疗效,亦有对其治疗作用机制的研究,目的在于探讨如何能提高疗效的最佳方法。现将针灸治疗骨性膝关节炎的方法综述如下。 1针灸方法 111传统针刺这是目前临床上治疗骨性膝关节炎最常用的方法,一般使用单纯针刺的治疗方法比较少,常与其他辅助治疗配合使用。何庆勇等[1]采用以痛为俞、局部取穴的原则,针刺血海、梁丘等穴,辨证加减,配合自制中药,治疗33例,总有效率96197%。张小玲等[2]报道使用常规针刺后,紧接着 作者简介:丁勤能(1978-),女,江苏宜兴人,医学硕士,从事针灸、康复临床工作 作者单位:11210002江苏南京,南京军区南京总医院康复医学科;21210029江苏南京,南京中医药大学 第二临床医学院在相关穴位上做中频治疗(高级电脑中频治疗仪YK-2000B/C型),每次治疗20m i n,总有效率9610%,同时认为针灸配合中频治疗的效果优于单用针灸。 112温针灸温针灸是针刺与艾灸相结合的一种方法,又称针柄灸,即在留针过程中,将艾绒搓团捻裹于针柄上点燃,通过针体将热力传入穴位,现在一般使用艾柱为多。李永红等[3]将100例随机分为治疗组和对照组各50例,治疗组采用针刺膝三针(阳陵泉、内外膝眼)等穴位,行捻转手法,得气后将115 c m长艾条插在针柄上点燃施灸,每针燃尽3段艾条,各穴均留针20m in。对照组取穴、留针同治疗组,不加艾条灸,10次为一疗程,连续观察两个疗程,结果显示治疗组的总有效率9117%,明显优于对照组的总有效率8319%。王学普[4]采用温针配合刮痧治疗48例,采用长约1c m,直径约015c m的梭型艾绒捏在针柄上,点燃直到燃尽为止,使热力传入患处,经过1~3个疗程,总有效率9719%。 113灸法李宁等[5]使用艾条悬灸腰阳关和犊鼻后再配合运动疗法,对止痛和关节稳定度的疗效明显优于采用的物理远红外线治疗仪,总有效率100%。廖钰等[6]将150例随机分为三组,分别是双艾条加手法组、单艾条不加手法组、温针灸组,观察3组疗法对膝关节炎近期和中长期疗效,结果显示双艾条加手法组和温针灸组明显优于单艾条不加手法组,同时研究认为不同的艾灸方法、刺激量治疗膝
骨性关节炎痛的动物模型-AmazonS3
?FACT SHEET No. 4 骨性关节炎痛的动物模型 Victoria Chapman, BSc, PhD 动物模型，不仅帮助科学家们深入研究骨性关节炎（osteoarthritis, OA）的疼痛机制，并且为寻找新的治疗方法提供基础。然而，以往的OA模型，主要是用来反映结构病理学变化。直到最近，OA模型用于研究人类OA痛的有效性，才被详细的阐明。OA痛模型的不同，反应OA患者个体之间痛体验的差异。 动物OA是逐渐发展形成的。例如，Dunkin-Hartley豚鼠、STR/ort小鼠、狗和马。然而，动物OA的发展过程很难预测的，且缺乏有效的控制措施。动物OA模型包括2大类：（1）手术模型：半月板和/或交叉韧带的横断术，或关节失稳术等。（2）化学模型：关节腔注射碘代乙酸钠盐等。上述模型已经用来研究OA病理学和OA疼痛的机制。动物模型和人类OA，尽管早期病理改变可能不同，但在晚期都出现类似的特征性病理改变（如骨刺、软骨的破坏、软骨下骨的重建、痛行为）。 OA是一种慢性疾病。所以，急性炎症痛的模型（如，足底或者关节腔内注射角叉菜胶）与人类OA 痛相似性小。慢性关节炎模型，包括单关节模型（关节内注射完全弗氏佐剂CFA或甲基化牛血清白蛋白）和多关节模型（系统性FCA或胶原诱导的关节炎模型）。这些慢性关节炎模型引起的疼痛，与人类OA痛类似，常用于研究关节痛的机制。 鼠科或大鼠的膝关节OA模型，负重不对称，类似于OA病人患侧关节不敢承重。另外，这些模型的机械缩足阈值降低，这一点，与OA患者也很类似。 动物模型的其它行为，包括后肢的握力减少、固有的行为改变（如挖掘行为）、关节施压或扭矩引发的嘶叫，都是评价痛行为的指标。实验犬和其它大型实验动物的关节炎痛行为，主要通过步态分析进行评价，尽管量化的痛感觉评分在这些动物模型中的应用有所增加。虽然动物模型的行 _____________________________________________________________________________________________ ?国际疼痛研究学会2016年版权。版权所有。
大鼠系统解剖简述概要
第一章皮肤 一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。 二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。 1、皮脂腺分布在毛囊周围。口角部、肛门、包皮和乳头周围有特化的皮脂腺。 2、汗腺，大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。 3、乳腺 数量大鼠的乳腺共有6对，胸部3对，腹部1对，鼠蹊部2对。个别的大鼠有5对或者7对。 大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。 部位包埋在皮下组织中，由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。 第二章骨 一．脊柱大鼠的脊柱由57－61块脊椎骨组成，包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、尾锥27－31块。锥式C7T13L6S4Cy27－31。骨性标志为第二胸椎，其棘突最高，超过其它脊椎骨。 1、颈椎和其它哺乳动物一样，恒为7块，全无肋骨相连，横突上具有横突孔，供锥动脉通过。 2、胸椎13块，椎骨的长度由前向后逐渐增加（由2毫米增加到4毫米），锥管的直径平均为3.3毫米，较颈部的锥管为狭窄。 3、腰椎6块，每块锥体的长度比较一致，约6－7毫米。锥管直径由前面的4毫米向后逐渐缩小至2毫米。 二、胸骨 共分为6节，最前一节为胸骨柄，第二到第五节称为胸骨体，最后一节为剑
突，棒状的剑突后面接一盘状的剑状软骨。胸骨柄长约10毫米。 第三章肌肉系统（省略） 第四章消化系统 消化系统包括消化管及附属消化器官。消化管可分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和胰。 第一节消化管 一、口腔 1、舌全长约30毫米，不具有正中系带，但是有两条侧系带。 一、食管 分为颈、胸、腹三部。成年大鼠食管的颈－胸段长度约75毫米，腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米，食管外径约2毫米。 位置：食管主要是沿气管背侧走行，仅在颈部稍偏左侧。 一、胃 位置：横位于腹腔的左前部，其壁面几乎完全为肝的左叶所覆盖。 大小：胃重为体重的0.5％，属单室胃。 形态：胃小弯朝向背前方，食管在其中部入胃。胃大弯朝向腹后方，其边缘有双层的口袋状大网膜。贲门部外观呈半透明状，内壁有粘液腺。 三、小肠 1、十二指肠 长度：长约100毫米。 位置：从幽门发出向右后行，再折向前终于右侧。可分为降支（向右后行）、横支（水平部）、升支(向前行)，它们构成一个不完全的环，包围着部分胰腺。
膝骨关节炎康复计划
膝骨关节炎康复计划 存在问题： 1.关节疼痛大腿，膝关节。关节负重或活动较多，天气变化加剧。 2.关节僵硬早晨起床时膝关节僵硬，持续时间15-30分钟。 3.关节变形膝关节活动受限。 4.肌肉萎缩长期关节活动受限出现废用性萎缩 5.关节弹响 6.关节腔积液浮髌试验阳性。 7. 近期目标： 1、缓解关节水肿和疼痛。 2、强化下肢肌力包括股四头肌锻炼。 3、学会预防并发症及继发性损坏的方法。 4、解决长期疾病引发的心理疾病 远期目标： 1、增加膝关节活动范围。 2、增强膝关节稳定性。 3、延缓病变发展。 4、提高ADL，改善生活质量。 康复措施： 1.调整和改变生活方式控制体重，减少活动量。 2.保护关节，避免有害动作。 3.功能性电刺激。 4.运动疗法：关节活动度维持训练，牵伸训练。 5.神经肌肉促进技术。 6.矫形器具设计。 7.针刺治疗。 8.心理治疗。 9.手术治疗。 治疗处方： 1、休息和运动相集合①急性期：限制关节活动，减轻关节炎性反应，并行下肢肌力的锻炼（股四头 肌收缩锻炼），避免关节制动带来的肌肉萎缩。②非急性期：适当关节活动能改善血液循环，促进局部炎症的吸收，包括关节的被动活动、不负重主动运动、关节功能牵引。 2、药物治疗西医：非甾体镇痛抗炎药，对抗炎症反应；静滴红花注射液或七叶皂甙钠、缓解关节水 肿和疼痛，对关节腔积液的患者需抽取液体培养或涂片，排除感染，若有感染的 患者根据细菌培养采用抗生素。若有其它基础疾病根据基础疾病用药。 中医：鸡鸣散加减：牛膝10g 槟榔15g苡仁30g 吴萸6g苏叶9g桔梗15g苍术20g白 蔻仁9g ；寒湿重的患者加木瓜15g防己20g桑枝20g；血瘀加忍冬腾15g关节 疼加白花蛇一条；肝肾亏虚加巴戟天10g锁阳15g；脾虚加山药15g茯苓20g炒 扁豆15g；关节腔感染加金银花20g、连翘15g、黄柏15g；关节腔积液加泽泻 20g、大腹皮15g；皮肤过敏的患者加地肤子15g、虫蜕10g； 3、物理因子治疗①功能性电刺激（中频）：每次20分钟，（控制体重，减少活动量，下肢：股四头肌， 胫前肌），每天二次，每周六天，星期天休息。②针刺治疗，每次留针30分钟，每天一次，每周六次，星期天休息。③热疗中药熏洗或膝关节深部热疗机治疗，促进血液循环，缓解局部肌肉痉挛，加大关节活动度，减轻炎症及疼痛反应。④膝关节中药鸡鸣膏外敷，活血化瘀，缓解关节肿胀及疼痛。 4、使用矫形器或助行器。 5、心理治疗心理治疗有助减轻关节疼痛。 6、手术治疗①臭氧消融加玻璃酸钠灌注：1）氧化作用2）抗炎作用3)抑制免疫反应4）镇痛5）关 节软骨润滑保护作用。
大鼠卵巢培养
1．材料和方法 1.1实验动物 1）采用健康性成熟为交配过的雌性SPF级Wistar大鼠，鼠龄（60±5）d，每只体质量200～250g，试验期间提供足量自来水及普通饲料，动物是温度保持在22℃左右，自动通风，光照周期8:00～18:00,适应3d后用于实验。《被动吸烟对大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体表达的影响》解剖学杂志201 1年第34卷第l期 2）雌性SD大鼠90只，日龄50-60d，体质量145-165g，普通喂养，自由进食，给予12h的亮暗间隔。《大鼠胚胎卵巢原位移植的生殖内分泌研究》南方医科大学报 3）成年雌性Wistar大鼠清洁级39只，体重（186.76±9.33）g。上海实验动物中心提供。成年雌性SD大鼠清洁级16只，体重（243.93±17.4）g。福建医科大学实验动物中心提供。《镉对大鼠卵巢性激素分泌功能的影响》毒理学杂志2005年12月第19卷第四期 4）未交配过成年雌性SD大鼠，经阴道细胞学检查，证实动情周期正常者作为受体，随机分成4组，每组20只。供体分别为成年雌性sD大鼠和出生2～3天雌性SD大鼠，各20只。《大鼠卵巢组织移植的实验研究》中华器官移植杂志1996年7月第17卷第三期 5）受体为SD成年雌性大鼠(购于浙江大学医学院实验动物中心)，体重220～250 g。卵巢来源：出生24 h以内的SD新生大鼠(购于浙江大学医学院实验动物中心)卵巢。《微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植》细胞生物学杂志 1.2实验试剂 1)兔抗大鼠ERa、PR多克隆抗体购自Santa-Cruz公司；SP免疫组织化学试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。《被动吸烟对大鼠卵巢雌激素受体α、孕激素受体表达的影响》解剖学杂志201 1年第34卷第l期 2)孕马血清促性腺激素（PMSG),杭州动物药品厂;人绒毛膜促性腺激素（HCG)，安徽新力药业股份有限公司。孕酮（P)、雌二醇（E2）放免测定药盒，北京北方生物制品研究所，DME/F-12 1:1细胞孵育盒，Hyclone公司。《镉对大鼠卵巢性激素分泌功能的影响》毒理学杂志2005年12月第19卷第四期 3)海藻酸钠f中国医药集团上海化学试剂公司)；聚左赖氨酸分子量为27400(Sigma公司，美国)；RPMI 1640培养基(上海吉诺生物医药技术有限公司)；胎牛血清(FBS，杭州四季青生物制品所)；Estradiol Test Units(美国Beckman Coulter公司)；PGN Test Units(美国Beckman Coulter公司)；其余试剂均为分析纯。《微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植》细胞生物学杂志
温针灸治疗膝关节骨性关节炎
温针灸治疗膝关节骨性关节炎 摘要】目的：探讨对膝关节骨性关节炎患者实施温针灸治疗的效果。方法：选 取院内2016年9月至2017年11月期间收治的膝关节骨性关节炎患者72例为观 察目标，按照患者入院顺序进行随机分组，对照组36例给予玻璃酸钠关节腔内 注射联合中医推拿治疗，研究组36例在此基础上实施温针灸治疗，就两组患者 膝关节功能及疼痛情况、治疗效果等进行评价对比。结果：治疗后两组患者膝关 节功能及疼痛情况均显著改善，研究组LKSS评分显著高于对照组（P＜0.05），VAS评分显著低于对照组（P＜0.05），且研究组治疗有效率达100％，显著高于 对照组（P＜0.05）。结论：膝关节骨性关节炎患者在常规治疗的基础上，联合温针灸治疗能够显著提高临床疗效，在相同治疗时间内，显著提高膝关节功能，改 善临床症状。 【关键词】膝关节骨性关节炎；温针灸；玻璃酸钠；中医推拿 膝关节骨性关节炎是以膝关节软骨退化、新骨形成为特征的慢性病症[1]，多因局限性、 进行性软骨破坏及关节边缘骨赘形成所致。临床主要以膝关节肿胀疼痛甚至畸形为主要表现，本病的发展及进行性发展对患者生存质量的负面影响较大，临床治疗以解除症状、改善关节 功能为主，玻璃酸钠关节腔内注射、中医推拿是较常见的治疗方式，本次研究在此基础上联 合温针灸治疗，临床疗效较为显著，现做如下报告。 1 资料与方法 1.1、一般资料 选取院内2016年9月至2017年11月期间收治的膝关节骨性关节炎患者72例为观察目标，男43例，女29例，年龄42~68岁，平均（52±2.04）岁，病程4~31个月，平均（17.29±4.30）个月，均符合《膝关节骨关节炎循证医学指南（第二版）》相关诊断标准[2]，按照患者入院 顺序随机分为研究组及对照组各36例，两组患者临床资料比较无显著差异（P＞0.05）。纳 入标准：治疗依从性高者；未合并血液系统疾病者；未合并严重器质性疾病者；认知功能正 常能够自主完成功能评定者。 1.2、方法：对照组患者仰卧屈膝行患侧膝关节消毒穿刺，吸尽关节积液后注入玻璃酸钠 注射液，每周注射一次，注射完毕后用无菌敷料包扎24h左右，同时帮助患者适量活动膝关节。患者取卧位，治疗医师为患者进行患肢的放松按摩，辅以足三里、阳陵泉、委中、承山、梁丘等腧穴的按压。研究组在此基础上联合温针灸治疗，主穴：髌中（内外膝眼连线的中点）、膝眼、阳陵泉、血海、足三里、梁丘等，选用合适的毫针行针刺治疗，髌中直刺，向 委中方向缓慢进针至2寸深左右，捻转提插后留针。内、外膝眼直刺入1.5-2寸左右，捻转 得气。其余四穴向膝眼方向进针，用导气法，使针感尽量放射至膝盖。髌中或膝眼穴加用温针，以1寸长之纯艾段，插于针柄上自下方点燃，燃尽更换，一般2至3壮。留针20-30分钟。疼痛明显者，可在血海和梁丘穴加拔罐15分钟，以出现紫黑色瘀斑为度。 1.3、观察指标 1.3.1、膝关节功能[3]：对所有患者治疗前后实施膝关节功能评定，采用Lysholm膝关节 康复量表（LKSS）评分，分值范围0~100分，分值与膝关节功能呈正相关。 1.3.2、疼痛情况：采用疼痛视觉模拟评分法（VAS）对所有患者治疗前后的疼痛情况进行评分。 1.3.3、治疗效果[4]：治愈：关节炎相关症状消失，关节功能恢复正常，随访期间无复发；显效：膝关节功能显著改善，疼痛症状显著缓解；有效：膝关节功能有所改善，疼痛有所缓解；无效：疼痛症状及膝关节功能无改善。 1.4、统计学分析：本次研究相关数据采用SPSS20.0软件进行处理，其中计量资料采用t 检验，计数资料采用?2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。
实验动物(大鼠、小鼠、兔)原代卵巢颗粒细胞
实验动物（大鼠、小鼠、兔）原代卵巢颗粒细胞 产品编号：RAT/MIC/RAB-iCELL-f004 产品规格：>5×105细胞数 产品价格：4050/4050/4500 包装规格：1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶 细胞详述： 卵巢是雌性动物的生殖器官。卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。 卵巢是分泌雌激素的主要器官。卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。卵巢中颗粒细胞是合成雌激素的场所。其产生过程是使雄烯二酮转变成雌激素：内膜细胞在LH的作用下，使胆固醇转变为雄烯二酮；颗粒细胞在FSH的作用，发育过程中产生芳香化酶，它使雄烯二酮转变成雌激素。形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。 细胞特性: 1)组织来源于实验动物的正常卵巢组织。 2)细胞鉴定：卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养。 产品的运输和保存： 视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进 行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生 长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 推荐培养基： 我们推荐使用iCell原代肾系膜细胞培养体系（产品编号：PriMed-iCELL-021）作为体外培养原代卵巢颗粒细胞的培养基。 产品使用： 1)本产品仅能用于科研 2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核 3)本产品未通过用于活体诊断的审核
2017年(AAOS)膝骨性关节炎治疗指南
2017年（AAOS）膝骨性关节炎治疗指南 推荐1 对于症状性膝关节骨关节炎患者，建议参与自我管理项目，包括力量训练、低强度有氧运动、神经肌肉训练和参与与国家指南一致的体力活动。推荐等级：强烈推荐含义：除非出现一个明确且令人信服的替代方案，临床医生应遵循该项建议。 推荐2 对于症状性膝关节骨关节炎患者，如果体重指数超过25，建议减肥。推荐等级：中度推荐含义：临床医生应该遵循该项建议，但如果有其他方法符合患者偏好，可以适当调整治疗方案。 推荐3a 对于症状性膝关节骨关节炎患者，我们不建议使用针灸疗法。推荐等级：虽然我们没有进行有害性分析，但我们仍然强烈推荐。含义：除非出现一个明确且令人信服的替代方案，临床医生应遵循该项建议。推荐3b 对于症状性膝关节骨关节炎患者，我们既不赞成也不反对他们使用物理疗法（包括电刺激疗法）。推荐等级：不确定含义：医生应根据自己经验决定是否采用这种结果“不确定”的治疗，但应时刻关注评估这类治疗损益比的最新研究以帮助临床决策。患者的意愿是决定治疗的关键因素。 推荐3c 对于症状性膝关节骨关节炎患者，我们既不赞成也不反对他们使用按摩治疗。推荐等级：不确定含义：医生应根据自己经验决定是否采用这种结果“不确定”的治疗，但应时刻关注评估这类治疗损益比的最新研究以帮助临床决策。患者的意愿是决定治疗的关键因素。 推荐 4 对于症状性膝关节骨关节炎患者，我们既不赞成也不反对他们使用外翻应力支具（使膝内侧间室不负重）。推荐等级：不确定含义：医生应根据自己经验决定是否采用这种结果“不确定”的治疗，但应时刻关注评估这类治疗损益比的最新研究以帮助临床决策。患者的意愿是决定治疗的关键因素。 推荐 5 对于症状性膝关节骨关节炎患者，不建议使用外侧楔形鞋垫。推荐等级：中度推荐含义：临床医生应该遵循该项建议，但如果有其他方法符合患者偏好，可以适当调整治疗方案。 推荐 6 对于症状性膝关节骨关节炎患者，我们不建议使用氨基葡萄糖和软骨素。推荐等级：虽然我们没有进行有害性分析，但我们仍然强烈推荐。含义：除非出现一个明确且令人信服的替代方案，临床医生应遵循该项建议。
针灸治疗膝骨关节炎的经验小结
针灸治疗膝骨关节炎的经验小结 发表时间：2011-06-15T09:51:48.390Z 来源：《中外健康文摘》2011年第10期供稿作者：邓玉金[导读] 膝骨关节炎是临床常见疾病之一，尤其在中老年人群中常见。 邓玉金（四川省南充市中医院 637000） 【中图分类号】R245【文献标识码】B【文章编号】1672-5085 (2011)10-0407-02 【摘要】膝骨关节炎是临床常见疾病之一，尤其在中老年人群中常见。由于其致残率高，病程长等特点，越来越受到医疗界的重视。针刺已被证实对于膝关节炎的治疗有效，本院也在近五年做了多方面的尝试，本文将对经验进行总结。【关键词】膝骨关节炎针灸 膝骨关节炎是一种慢性关节疾病，亦称膝关节退行性关节炎，多由膝关节软骨的变性，骨质增生等导致。一般临床表现为膝关节疼痛，行走困难，关节废用等，严重影响病人的健康和生活质量，其病理变化为软骨退变滑膜炎症、软骨退变、骨内压升高[1]等。近些年来由于肥胖等疾病，该病的发病率逐渐增高[2]。有调查显示25岁以下人群中发病一般不超过5%，但在80岁人群中90%以上人皆有之[3]。针灸可使患者膝骨局部的血液循环加快，组织代谢率增加，进而促进局部炎症吸收，改善疾病症状及关节功能。多种针灸疗法被应用到临床，如温针灸、火针、电针、刺血、穴位注射等，都取得了很好的疗效。我院采用针刺与艾灸并用，并辅以穴位注射的治疗方案，取得了良好的效果，治愈率达到97.4% (诊断参照1986年美国风湿病协会推荐的膝OA诊断标准[4]：①膝关节痛在就诊的前1个月内≥14天；②膝关节活动时有摩擦响声；③X线片示膝关节骨端边缘有骨刺或唇样增生；④膝关节周围有肿胀；⑤晨僵≤30分钟；⑥年龄≥40岁。具备①③或①②④⑤⑥即可诊断为膝OA)，针灸治疗膝骨关节炎的方法总结如下： 1．针刺 选用40-50mm长、0.35 mm粗的不锈钢毫针，采用局部选穴，及长针透刺的方法。局部选取膝眼、阴陵泉、阳陵泉、梁丘、血海等。长针透刺选取犊鼻透内膝眼、阳陵泉透阴陵泉。 针刺可在一定程度上降低神经末梢兴奋性，有效缓解肌肉的痉挛，改善局部血液循环障碍及缺氧状态，改善炎症水肿、粘连，并具有很好的镇痛作用，减轻患者的痛苦。我们本着“不通则痛”的理念，选取适当的主穴与配穴进行治疗，从而起到疏通经络，散寒止痛的效果。我院曾选取60例膝骨关节炎患者随机分为治疗组和对照组各30例，分别采用针刺治疗和常规药物治疗，疗程为一个月，之后评定疗效，结果显示治疗组有效率为96.3%，对照组有效率为87.5%，可见疗效有明显的差异。证实针刺确对膝骨关节炎有独特的功效。 2．艾灸 采取瘢痕灸的疗法，我院采用了黄静[5]的灸法治疗方案，用麦粒大实心艾柱施灸于足三里、悬钟穴至形成灸疮。对于不愿施用瘢痕灸治疗的患者，选用局部施灸加改善身体机能的组合配穴疗法。 《灵枢·官能》云：“针所不为，灸之所宜”。艾灸集热疗、光疗、药物刺激于一体，并且作用于特定穴，能很好地发挥温经通络，改善局部血循环的功能。且现代医学认为艾灸可以增强机体免疫力、消炎镇痛。艾灸瘢痕灸不仅发挥艾灸温通经脉、祛风除湿、温补气血等功效，且局部灸疮对穴位产生持续刺激，不断发挥经穴调节作用，在治疗疾病的同时使人体达到阴阳平衡的良好状态。 3．针刺加艾灸 针刺选穴：内外膝眼、鹤顶、梁丘、血海、阳陵泉、阴陵泉及补肾的太溪等穴，针刺得气后留针时插上2cm艾条并点燃，每日一次。 针刺加艾灸即为温针灸，近些年对此项治疗方法的研究很多，如林国华等[6]用温针治疗膝关节骨性关节炎，证实有效且复发率低，优于单纯的针刺疗法。针刺结合艾灸的温热效应、艾的药性等多种因素，增强了温经散寒、通络止痛、补益气血、调和阴阳的作用。温针灸具备了针刺与艾灸的双重作用。 4．穴位注射 选用地塞米松或复方丹参注射液[7]进行穴位注射，选穴以局部选穴为主，参见针刺部分。 穴位注射是穴位和药物相结合的一种治疗方法，是新型的有效治疗途径，在起到针刺治疗作用的同时，有了药物的消炎，镇痛、扶正等功能，更好的发挥疗效，减少复发。 在中医学中，膝骨关节炎属“痹症”的范畴，由于人体肝肾亏虚、气血不足，加之感受风寒湿邪，外邪痹阻筋脉，使气血不畅，关节失于濡养所致。中医认为本病正虚为本，邪实为标，应标本同治，但应以解除疾病的疼痛症状，改善关节功能，防止关节的进一步受损为先。再结合中医的整体观念，调整机体的防御、修复等功能，我院充分发挥中医药的优势进行综合治疗，采用多种中医疗法，使患者症状显著改善。很多患者同时配合适当的功能锻炼，以增进膝关节周围软组织的力量，加强稳定性，巩固了疗效。五年来，我们在临床治疗中以因人治宜为原则，选取个性化的方案，最大程度的减少患者的痛苦，增强疗效并减少复发，得到患者及家属的广泛肯定。随着科学技术的进步和临床实践的不断开展，一定会诞生更好的治疗方案，服务于广大患者。 参考文献 [1] 柴华,黎波,杜元灏.针灸对照西药治疗膝骨性关节炎的疗效分析[J]辽宁中医杂志, 2009,(07) . [2] 银波,张锡智. 中医综合疗法治疗老年性膝骨关节炎30例[J]实用中医内科杂志, 2008,(02) . [3] 王敏,王敏华,江勇,徐磊. 针灸治疗膝骨性关节炎临床疗效观察[J]光明中医, 2007,(07) . [4] 盛鹏杰,胡士平,程聪,田锦鹰,李月霞,林海苗. 电温针治疗膝骨关节炎的临床观察[J]湖北中医杂志, 2008,(10) . [5] 钟国存,陈振虎. 温针灸治疗膝骨关节炎30例临床观察[J]江苏中医药, 2008,(10) . [6] 涂世玉, 韩晓强, 王祖安, 卜明. 针灸推拿结合中药治疗膝骨性关节炎60例[J]. 现代中医药, 2010, (05) . [7] 阮经文, 王楚怀. 针灸配合功能训练治疗膝骨性关节炎的临床研究[J]. 中国康复医学杂志, 2003, (10).
大鼠生物学特征和解剖生理特点
大鼠生物学特征和解剖生理特点 一．大鼠的基本特征 1. 大鼠性哺乳钢，啮齿目，鼠科，大鼠属动物。 2. 繁殖快。大鼠2月龄时性成熟，性周期4天左右，妊娠期20（19～22），哺乳期21天，每窝产仔平均8只，为全年、多发情性动物。 3.喜啃咬、夜间活动、肉食，白天喜欢挤在一起休息，晚上活动量大，吃食多，因此白天除实验必须抓取外，一般不要抓弄它。食性广泛，喜吃各种煮熟的动物肉。对光照较敏感。 4. 性情较凶猛、抗病力强。大鼠门齿较长，激怒、袭击抓捕时易咬手，尤其是哺乳期的母鼠攻击性更强，常会主动咬工作人员喂饲时伸入鼠笼的手。对外界环境适应性强，成年鼠很少患病。 5. 一般情况下侵袭性不强，可在一笼内大批饲养，也不会咬人。 6. 无胆囊：大鼠、鸽、鹿、马、驴、象等动物没有胆囊，它们的总胆肝管括约肌的阻力很少，肝分泌的胆汁通过总胆管进入十二指肠，受十二指肠端括约肌的控制。 7. 不能呕吐：因此药理实验时应予注意。 8. 垂体一肾上腺系统功能发达，应激反应灵敏。行为表现多样，情绪敏感。 9. 视觉、嗅觉较灵敏，做条件反射等实验反应良好，但对许多药物易产生耐药性。 10. 大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感，但对强心甙的作用较猫敏感性低671倍。 11. 肝脏再生能力强，切除60～70%的肝叶仍有再生能力。 12. 对营养、维生素、氨基酸缺乏敏感，可发生典型的缺乏症状。体内可以合成维生素Ｃ。 13. 对炎症反应灵敏。它的眼角膜无血管。 14. 生长发育期长，长骨长期有骨骺线存在，不骨化。 15. 成年雌鼠在动情周期不同阶段，阴道粘膜可发生典型变化，采用阴道涂片法（Yaginal Smear Test）来观察性周期中阴道上皮细胞的变化，可推知性周期各个时期中卵巢、子宫状态与垂体激素的变动。 16. 大鼠（包括小鼠）心电图中没有S-T段，甚至有的导联也不见T波，如有T波也是与S 波紧挨着，或在R波降支上即开始，以致看不到等电线的S-T段。但心电图其他成分稳定，重复性好。豚鼠以上较大的动物均有明显的S-T段，在选择动物品种时应以注意。 17. 大鼠垂体较脆弱地附着在漏斗下部，不需要很大的吸力就可以除去而不破坏鞍膈和脑
大鼠踝关节骨关节炎动物模型的建立
目录 中文摘要 ........................................................... I 英文摘要 .......................................................... I II 常用缩写词中英文对照表 ............................................ V 前言 . (1) 1材料与方法 (2) 1.1主要实验仪器 (2) 1.2主要实验试剂及耗材 (2) 1.3实验动物 (3) 1.4手术方法 (3) 1.5小动物X线成像系统 (4) 1.6荧光分子断层成像系统 (4) 1.7番红O染色及评分 (5) 1.8免疫组织化学 (5) 1.9实时荧光定量PCR (6) 1.10酶联免疫吸附试验 (7) 1.11统计学方法 (8) 2结果 (9) 2.1小动物X线成像系统结果 (9) 2.2荧光分子断层成像系统结果 (10) 2.3番红O染色及评分结果 (10) 2.4免疫组织化学结果 (11) 2.5实时荧光定量PCR结果 (14) 2.6酶联免疫吸附试验结果 (16) 3讨论 (17) 4结论 (19) 参考文献 (20) 综述 (22) 致谢 (35)
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果 (36) 个人简历 (37)
山西医科大学硕士学位论文 大鼠踝关节骨关节炎动物模型的建立 摘要 目的： 世界成年人口中有1%人群患有踝关节的骨关节炎（osteoarthritis，OA）。病因学显示78%的踝关节OA由创伤引起，其中内踝骨折较为常见。临床上以内踝骨折伴脱位最为常见。为了更好的诊断、治疗踝关节OA，研究者需要一个合适的踝关节OA动物骨折模型，而目前国际上仍缺乏这一模型。设计一个简单可行的造模方法，对于临床踝关节炎的诊断治疗有着至关重要的意义。 方法： 38只8周龄成年雄性SD大鼠，体重约200g，分为骨折脱位组及单纯骨折组各19只，每组右侧踝关节为手术侧，非手术侧作为对照组。手术方式：1. 10%水合氯醛腹腔注射麻醉，取仰卧位，术侧屈膝90°，充分外展髋关节，消毒铺单。2.于内踝处自下而上切开皮肤，切口长1cm左右，钝性分离皮下筋膜及肌腱，暴露内踝。3.小骨凿与角度固定器（37°）组合后置于胫骨远端，中等力度将骨凿敲入内踝，感受到明显的落空感后，即为内踝骨折。4.3-0线缝合伤口。脱位组另需使足部内翻，之后立即复位。5.使用小动物X线成像系统拍摄踝关节正位片确认骨折累及关节面。8周后通过X线、荧光分子断层成像系统（fluorescence molecular tomography ，FMT)、组织切片染色、免疫组化、实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）等检测方法观察OA症状是否出现。统计学分析采用配对t检验，两个实验组之间的番红O染色评分选用独立样本t检验，统计结果采用均数±标准误表示，P<0.05认为有统计学意义。 结果： 1.X线可以观察到8周时实验组踝关节间隙变窄并出现软骨下骨硬化。 2.FMT显示8周时两个实验组基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）的信号强度高于对照组（即对侧）。 3.番红O染色评分（改良OARSI 法）：骨折脱位组分数为12.45±1.21，其对侧为1.73±0.33，P<0.05；单纯骨折组分数为11.45±0.85，其对侧为 1.27±0.27,P<0.05；但是两组之间无显著