tiangen产品DP323-动物源性植物饲料基因组提取试剂盒

产品简介

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，可从多种动物源性植物饲料中提取基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA 片段大，纯度高，质量稳定可靠。

使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR等实验。

产品特点

简单快速：1 h内即可获得超纯的基因组DNA。

广泛：适用于动物源性植物饲料、多种动物细胞和动物组织等。

超纯：获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切等分子生物学实验。

注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，并摇匀后使用。

2．所有离心步骤均为室温下离心。操作步骤

使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 处理材料：

50 mg研磨粉碎的动物源性饲料加入320 μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。

注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100 mg/m l）（客户自备，目录号：RT405-12）溶液，振荡15 sec，室温放置5 min。

2. 加入20 μl Proteinase K溶液，混匀。在65℃放置20-30 min，其间混匀样品2-3次。

3. 加入340 μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，65℃放置10 min，其间混匀样品2-3次。

注意：如果第2、3步中65℃温浴期间离心管底出现沉淀，请将沉淀振荡至彻底悬浮后再进行65℃水浴操作。

4. 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min，取440 μl上清至新管中。

注意：若所取上清中有可见悬浮颗粒，请重复步骤4一次，否则颗粒物质会堵塞吸附柱。

5. 向上清中加入220 μl无水乙醇，充分颠倒混匀6-8次，此时可能会出现絮状沉淀。

注意：若所取上清体积小于或大于440 μl，则无水乙醇应加到上清体积的1/2。例如：取500 μl上清，加入250 μl 无水乙醇。

6. 将上一步所得溶液和絮状沉淀全部加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），

12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。

注意：离心时间请不要少于2 min，否则可能会导致吸附柱堵塞，如果离心时出现吸附柱堵塞情况时，请再次12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min。

7. 向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm

(~13,400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。

Order: 010-********

Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD

本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

8. 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm

(~13,400×g)离心30 sec ，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。9. 重复操作步骤8。

10. 将吸附柱CB3放回收集管中，12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min ，倒掉废液。将吸附柱

CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR 等）实验。

11. 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl 洗脱缓

冲液TE ，室温放置2-5 min ，12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min 。

注意：为增加基因组DNA 的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min ，12,000 rpm(~13,400×g )离心2 min 。洗脱缓冲液体积不应少于50 μl ，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH 2O 做洗脱液应保证其pH 值在7.0-8.5范围内，pH 值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA 产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。

DNA 浓度及纯度检测

得到的基因组DNA 片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。

DNA 应在OD 260处有显著吸收峰，OD 260值为1相当于大约50 μg/ml 双链DNA 、40 μg/ml 单链DNA 。

OD 260/OD 280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH 2O ，比值会偏低，因为pH 值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

版本号: DP121221

产品内容

产品组成

DP323-02 DP323-03

(50 preps) (200 preps) 缓冲液GA （Bu ff er GA ） 30 m l 2×50 m l 缓冲液GB （Bu ff er GB ） 30 m l 2×50 m l 缓冲液GD （Bu ff er GD ） 13 m l 52 m l 漂洗液PW （Bu ff er PW ） 15 m l 50 m l 洗脱缓冲液TE （Bu ff er TE ）

15 m l 60 m l Proteinase K

1 m l 4×1 m l 吸附柱CB3（Spin Co l umns CB3） 50个 200个 收集管（

2 m l ）（Co ll ection Tubes 2 m l ）

50个

200个

选配试剂

RNase A （100 mg /m l ）（目录号:RT405-12）。

储存条件

该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min ，以溶解沉淀。

TIANamp Feedstuff Animal DNA Kit

动物源性植物饲料

基因组DNA 提取试剂盒

（离心柱型）目录号：DP323