白蛋白钴结合力法检测缺血修饰白蛋白的建立与评价
缺血修饰白蛋白测定试剂盒(白蛋白-钴结合法)产品技术要求meigaoyi
缺血修饰白蛋白测定试剂盒（白蛋白-钴结合法） 适用范围：用于体外定量检测血清中缺血修饰白蛋白的浓度。 1.1 包装规格 a) 试剂1：2×45ml，试剂2：2×15ml； b) 试剂1：1×60ml，试剂2：1×20ml； c) 试剂1：2×150ml，试剂2：2×50ml； d) 试剂1：1×45ml，试剂2：1×15ml； e) 试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml； 1.2试剂主要组成成分 试剂1主要组成成分： 氯化钴(CoCl2) 5mmol/L 表面活性剂 0.5ml/L Proclin300 0.5ml/L 试剂2主要组成成分： 二硫苏糖醇（DTT） 0.1g/L Proclin300 0.5ml/L 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.1.2 试剂1应为无色或浅粉色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。 2.1.3 试剂2应为无色或淡黄色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。 2.2 净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 试剂空白吸光度，应≤0.3； 2.4 分析灵敏度 测试70U/mL的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.15. 2.5 准确性 与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本，样本浓度在[1,152]U/mL范围内，其相关系数（r）≥0.975；测定浓度在[1,50)U/mL范围内绝对偏差不超过±7.5U/mL；测定浓度[50,152]U/mL范围内相对偏差不超过±15%。 2.6 重复性 变异系数（CV）应不超过10%。 2.7 线性 2.7.1在[1,152]U/mL范围内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2 在[1,50)U/mL范围内绝对偏差不超过±5U/mL；[50,152]U/mL范围内相对偏差不超过±10%。 2.8 批间差 批间相对极差≤10%。 2.9 稳定性 该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为18个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
新项目缺血修饰蛋白
缺血修饰白蛋白(IMA)的临床意义 胸痛是急诊室第二大常见症状。约1/5的胸痛病人最终被诊断急性冠脉综合征（ACS）。绝大多数临床指南有如何处理ACS的建议。但在急诊室如何迅速准确排除ACS，特别对ECG、肌钙蛋白均阴性的胸痛病人如何正确处理是更大的挑战。常规AMI检测项目多为心肌坏死后产物，往往出现比较晚，阳性时病人往往失去第一救助时间。缺血修饰白蛋白(IMA)是一种新的较为理想的缺血标志物,它是第一个被美国食品药品管理局(FDA)批准销售的心肌缺血标志物。利用白蛋白-钴结合试验检测缺血修饰白蛋白含量,作为检测早期心肌缺血的指标。多方面研究证明,IMA可敏感的反映心肌缺血状况,在急性冠状动脉综合征的早期诊断、危险分层、指导治疗等方面有重要意义,是目前较为理想的检测心肌缺血的生化标志物. IMA检测的临床意义: 1．IMA是检测早期心肌缺血的敏感指标，故能更早发现急性心肌缺血，更早预测心脏事件的相对危险。 IMA是急性冠脉综合征(ACS)诊断的生物标志。ACS具有发病急、变化快、临床表现与危险性不均一等特征，早期诊断困难。传统的生物标志物如肌钙蛋白(cTn)、肌红蛋白(Myo)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)只有在心肌发生坏死时才升高，但这时已给患者带来了不可逆的病理损害。因此，急需一种可以反映心肌缺血的早期敏感的生化指标用于早期诊断，而IMA 是近年来的研究热点，为ACS早期诊断的研究开辟了新的道路。IMA对ACS患者心肌缺血检出的灵敏度是ECG的2倍、cTn的4倍。 2．IMA是检测冠脉痉挛导致缺血的生化标志物。 IMA是一个缺血标志物，而不是一个坏死诊断标志物。 3．IMA不仅可以用于ACS患者的早期诊断，还可以用于冠脉事件即PCI术后判断指标。无侧支循环患者的IMA值明显高于有侧支循环者，IMA值升高与病变严重程度相关。 4．IMA值可作为早期辨别急性脑卒中生化标志物——脑出血发作初期，其中位数水平增加。 IMA 与心肌缺血: （1）IMA 在心肌缺血后5~10 min 即可升高,缺血持续进行时则持续上升. （2）血管造影术或球囊扩张术所致的缺血现象时IMA 会快速上升，且上升程度和扩张的数目、压力、时间有关，数小时后回复正常。 IMA 与急性冠脉综合征: （1）IMA 对预测近期发生急性心肌损伤的阳性率达94.4%. （2）对于诊断ACS，IMA 有相当高的灵敏度（>80%），但是特异性较差；联合ECG 与cTNs 能提高对ACS早期诊断的敏感度；IMA 高的阴性率可以作为ACS 排除诊断的指标. （3）IMA 检测有助于ACS 患者不良预后的判断 IMA与心肌钙蛋白(cTn)的关系: 1．心肌坏死后6 hrs cTn释放入血，而IMA在心肌缺血数分钟后即可释放入血。因此，单纯靠cTn等心脏标志物作出ACS诊断将迟于ACS的实际病程，早期可能漏诊。
缺血修饰白蛋白(IMA)测定试剂盒(游离钴比色法)产品技术要求北京利德曼
缺血修饰白蛋白（IMA）测定试剂盒（游离钴比色法） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中缺血修饰白蛋白（IMA）的含量。 1.1包装规格 试剂1（R1）:1×45mL、试剂2（R2）:1×15mL； 试剂1（R1）:4×60mL、试剂2（R2）:4×20mL； 试剂1（R1）:5×60mL、试剂2（R2）:5×20mL； 试剂1（R1）:3×45mL、试剂2（R2）:3×15mL； 试剂1（R1）:2×60mL、试剂2（R2）:2×20mL。 校准品（选配）：两个水平2×0.5mL；2×1mL。 质控品（选配）：两个水平2×0.5mL；2×1mL。 1.2 主要组成成分
注：校准品和质控品浓度具有批特异性，具体数值见瓶标签。 2.1外观 试剂1：无色澄清液体，试剂2：无色澄清液体。 校准品：无色或淡黄色澄清液体。 质控品：无色或淡黄色澄清液体。 2.2净含量 液体试剂和校准品、质控品的净含量不得低于标示体积。 2.3试剂空白吸光度 试剂空白吸光度应不小于0.6 。 2.4分析灵敏度 浓度为78U/mL时，吸光度差值（△A）应不小于0.15 。 2.5线性 在[40，120]U/mL线性范围内，线性相关系数r应不小于0.995。在[40，120]U/mL 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.6重复性 2.6.1 试剂重复性 测试（78.0±5.0）U/mL区间样本时，所得结果的变异系数CV应不大于5%。2.6.2校准品和质控品重复性 校准品和质控品的变异系数CV应小于10%，零值校准品的绝对偏差应不超过±0.2U/mL。 2.7批间差 测试（78.0±5.0）U/mL区间样本时，所得结果的相对极差R应不大于10%。
缺血修饰白蛋白测定试剂盒(ACB法)产品技术要求beijian
缺血修饰白蛋白测定试剂盒（ACB法） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中缺血修饰白蛋白的含量。 1.1 规格 具体产品规格见下表:
1.2 组成成分 1.2.1 试剂的组成 试剂1：Tris缓冲液 30mmol/L CoSO 1mmol/L 4 试剂2：DTT 1mmol/L 1.2.2 校准品的组成（选配） 水平1：缺血修饰白蛋白 0.0 U/ml 该校准品为水基质液体校准品 水平2：缺血修饰白蛋白（40.0～85.0）U/ml 该校准品为血清基质液体校准品 1.2.3质控品的组成（选配） 水平1：缺血修饰白蛋白（20.0～75.0）U/ml 该质控品为血清基质质控品 水平2：缺血修饰白蛋白（75.1～100.0）U/ml
该质控品为血清基质质控品 校准品、质控品有批特异性，具体靶值见靶值表。 2.1 外观 2.1.1 外包装完整无破损； 2.1.2 试剂1：无色澄清透明液体； 2.1.3 试剂2：无色澄清透明液体； 2.1.4 校准品：无色或浅黄色透明液体； 2.1.5 质控品：无色或浅黄色透明液体。 2.2 净含量 净含量不低于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在主波长505nm、副波长700nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不小于0.6。 2.4 线性 2.4.1 线性范围 [20.0，100.0]U/ml，相关系数r＞0.990。 2.4.2 线性偏差 (50.0，100.0]U/ml线性范围内，相对偏差不超过±10%； [20.0，50.0]U/ml线性范围内，绝对偏差不超过±5.0U/ml。 2.5 分析灵敏度 检测浓度为78.0U/ml的样本时，吸光度变化不小于0.002。 2.6 重复性 2.6.1 试剂重复性
延边地区健康人群缺血修饰白蛋白参考区间的建立
延边地区健康人群缺血修饰白蛋白参考区间的建立 发表时间：2015-07-21T09:53:38.633Z 来源：《医药前沿》2015年第9期供稿作者：李晓庆1 邵薇1 贾碧野1 姜春善1 魏清2 尤昕[导读] 急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes, ACS)是冠心病最常见的表现形式。ACS是临床常见的造成急性心肌缺血性死亡的主要原因。 李晓庆1 邵薇1 贾碧野1 姜春善1 魏清2 尤昕1（通迅作者）（1延边大学附属医院检验科吉林延边 133000）（2吉林大学口腔医院检验科吉林长春 130021）【摘要】目的：建立延边地区健康人群血清缺血修饰白蛋白(IMA)的参考区间。方法：采用白蛋白钴结合(ACB)方法检测386例健康人群血清IMA含量，按民族、性别和年龄分组进行比较，建立本地区的IMA参考区间。结果：不同民族、不同性别和年龄分组之间IMA含量均无明显差异(P>0.05)，延边地区IMA的参考区间为≥61.47U/mL。结论：建立了延边地区血清缺血修饰白蛋白(IMA)的参考区间，为临床结果 分析提供依据。 【关键词】缺血修饰白蛋白；白蛋白钴结合试验；参考区间【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）09-0026-02 Yanbian area the establishment of a healthy crowd ischemia modified albumin reference range Li Xiaoqing, Shao Wei, Jia Biye, Jiang Chunshan, You Xin. The Affiliated Hospital of Yanbian University, Jilin Province, Yanbian 133000, China; Wei Qing. Stomatological Hospital of Jilin University, Jilin Province, Changchun 130021, China 【Abstract】Objective: To establish the yanbian region health crowd serum ischemia modified albumin (IMA) reference range. Methods: Using albumin cobalt binding (ACB) method, IMA content detected 386 cases of healthy human serum. According to the comparison, nationality, gender and age group IMA reference interval in the region is established. Results: Between different nationalities, different gender and age group IMA content had no obvious difference (P > 0.05), the yanbian area IMA reference range for acuity 61.47 U/mL. Conclusion: The established the yanbian area serum ischemia modified albumin (IMA) reference range, provide the basis for the clinical results. 【Key words】 Ischemia modified albumin; Albumin cobalt test; Reference range 缺血修饰白蛋白(ischemia-modified albumin, IMA)，又称钴结合蛋白(albumin cobalt binding, ACB)，是血清白蛋白在流经组织缺血处时N末端氨基酸改变形成的。Bar-Or等[1]首先报告急性冠脉综合征(acute coronary syndromes, ACS)患者血清白蛋白结合外源性钴的能力降低，并应用ACB比色分析法测定IMA，用于检测心肌缺血。Chek等[2]通过实验证明了虽然IMA不能评估心肌梗死患者心肌缺血的程度，但能排除心肌缺血的诊断。不同地区、不同民族、不同性别和不同年龄人群的参考区间可能存在差异。我们应用日立7600全自动生化分析仪，采用浙江伊利康生物技术有限公司提供的检测试剂在延边地区建立本实验室的参考区间。 1.对象与方法 1.1检测对象 血清标本来自延边州延边大学附属医院体检中心386例健康体检者，健康者为经体检医生筛选出肝肾功能正常，心肺脑功能正常，血压正常，近期无过量饮酒、吸烟，无服药、手术及住院治疗，无肥胖症，无遗传病史的成年男女。朝鲜族192例，男101 例，女91例，年龄20～76岁；汉族194例，男104 例，女90例，年龄20～84岁。空腹安静状态下采集静脉血，3000 r/min离心10分钟，2小时内完成检测。 1.2仪器与方法 日立7600全自动生化分析仪，按照浙江伊利康生物技术有限公司提供的检测试剂说明书设置参数：样品20?l；R1：150?l；R2：50? l；主波长505nm。检测原理是血清中白蛋白与钴离子结合后，加入显色剂与剩余的游离钴离子反应，生成的产物通过与同样处理的IMA校准品进行比较，即可计算出样品中IMA的含量。 1.3统计学处理 数据采用SPSS11.5统计学软件处理，IMA数据为近似正态分布，两独立样本比较采用t检验统计，多组间样本均数比较应用One-Way ANOVA检验，P<0.05为有统计学差异。 2.结果 2.1不同民族、不同性别以及年龄分组IMA(U/mL)含量分析朝鲜族与汉族比较血清IMA含量无明显差异(t=1.158,P=0.248,P>0.05)；男性与女性比较血清IMA含量无明显差异(t=1.43,P=0.153,P>0.05)；各年龄组男性与女性比较亦均无明显差异(P>0.05)。不同民族、不同性别的各年龄组之间IMA含量均无统计学差异(P>0.05)，见表。 表不同民族、不同性别各年龄段IMA(U/mL)含量分析
白蛋白钴结合试验测定缺血修饰白蛋白方法学评价
白蛋白钴结合试验测定缺血修饰白蛋白方法学评价 论著 李美忠 姜庆波(常州市第一人民医院检验科 江苏 常州 223200) 【摘要】 目的 白蛋白钴结合(A C B )试验测定缺血修饰白蛋白(I M A ),并确定参考正常范围。方法 应用日立7600-120E 型全自动生化分析仪,采用A C B 法测定I M A 。结果 A C B 法批内变异系数(C V )为1.43%,批间C V 为1.70%。不同浓度的I M A 结果线性相关,回归方程为Y=-13.752X +83.835,r =0.9586。脂血(T G ≤20.5m m o l /L )、黄疸(T B I L ≤259.6),对测定无影响,溶血对I M A 测定影响较大。健康人群的参考范围为≥62.84U /m l ,心肌缺血患者为54.49U/m l 。结论 I M A 是诊断心肌缺血的有效工具,应用全自动生化分析仪检测I M A 快速、准确、简便。 【关键词】 心肌缺血 缺血修饰白蛋白 白蛋白钴结合试验 D e t e c t i o no f I s c h e mi a -m o d i f i e d a l b u m i nb y C o b a l t b i n d i n g t e s t .L I M e i -z h o n g ,J I A N GQ i n g -b o .D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,C h a n -g z h o uF i r s t P e o p l e H o s p i t a l ,C h a n g z h o uJ i a n g s u 223200,C h i n a . 【A b s t r a c t 】 O b j e c t i v e I n t h e p r e s e n t s t u d y ,t h e i s c h e m i a -m o d i f i e d a l b u m i n(I M A )i n s e r u ms a m p l e s w a s d e t e c t e d b y t h e A C Bm e t h o d ,a n d i t s r e f e r e n c e r a n g e w a s a l s o d e t e r m i n e d .Me t h o d s I M Aw a s d e t e r m i n e db y t h e a l b u m i n c o b a l t b i n d i n g (A C B )t e s t u s i n g t h e H i t a c h i 7600-120Ea u t o m a t i c b i o c h e m i c a l a n a l y z e r .R e s u l t s C o e f f i c i e n t o f v a r i a t i o n (C V )f o r w i t h i n -r u n a s s a y s w a s 1.43%;C Vf o r b e t w e e n -r u n a s s a y s w a s 1.70%.M e a s u r e m e n t o f A C Bu s i n gd i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f I M Aw a s l i n e a r ,r e g r e s s i o ne q u a t i o nw a s Y=-13.752X+83.835,r =0.9586,P >0.05.T h e r e w a s n o s i g n i f i c a n t i n t e r f e r e n c e o b s e r v e d f o r t r i g l y c e r i d e s (T G≤20.5m m o l /L)o r b i l i r u b i n (T B I L≤259.6μm o l /L ).H a e m o -g l o b i nh a d i n t e r f e r e n c e o nt h e A C Bt e s t .H e a l t h y i n d i v i d u a l 's r e f e r e n c e v a l u e w a s ≥62.45U/m l .C o n c l u s i o n I M Am a y b e a n e f f e c t i v e b i o m a r k -e r f o r t h e d i a g n o s i s o f m y o c a r d i a l i s c h e m i a .A u t o m a t i c b i o c h e m i c a l a n a l y z e r p r o v i d e s ar a p i d ,c o n v e n i e n t a n de a s y w a y f o r t h e d e t e c t i o no f I M A . 【K e yw o r d s 】 M y o c a r d i a l i s c h e m i a ;I s c h e m i a -m o d i f i e da l b u m i n ;C o b a l t b i n d i n g t e s t 缺血修饰白蛋白(i s c h e m i a -m o d i f i e da l b u m i n , I M A )是一种对心肌缺血敏感的新型标记物。I M A 是急性冠状动脉综合征(A C S )中心肌缺血发生数分钟后,导致白蛋白受损,其N 末端2～4个氨基酸发生改变而形成,其与过渡金属结合能力较正常白蛋白为低。其表现为I M A 在心肌缺血发生6h 内能检测到钴结合力明显低于非缺血者。因此,I M A 是早期反映心肌缺血的一个 新灵敏指标。2000年B a r -O r 等[1] 用手工法进行I M A 的白蛋白钴结合(a l b u m i n c o b a l t b i n d i n g ,A C B )试验,手工法操作较繁琐,不适合工作量较大时使用,且血清用量较大(200μl )。鉴于全自动生化分析仪具有加样量少(10～30μl ),且快速、准确、简便的特点,现通过全自动生化分析仪来对A C B 法进行方法学验证,并建立一个适合本试验室的I M A 的参考范围。1 材料与方法 1.1 一般资料 实验组:常州市第一人民医院2008年4月份内科住院患者,均系急性胸痛入院,临床体征和心电图检查有心肌缺血的证据,就诊时距胸痛发生均<12h ,且最后出院确诊为A C S ,共75例,其中男性48例,年龄31～85岁;女性27例,年龄33～87岁。均在就诊当时采集血标本,在室温下充分凝集,离心分离血清,确保血清中无纤维蛋白、红细胞和其它微粒,在 2.5h 内完成测定或血清标本快速冷冻至-20℃,冷冻于采血后1h 内完成冻存。另从中收集17份乙二胺四乙酸二钾(E D T A K 2) 抗凝全血,分离血浆后冰冻保存。对照组:同一批次体检人员50例,其中男性30例,年龄28～79岁,女性20例,年龄26～65岁。另选150例作为健康人群,以确立本试验室的参考范围。均除外 心脏疾病、胃肠、免疫系统疾病及其他缺血性疾病。均 抽血后在室温下充分凝集,离心分离血清,确保血清中无纤维蛋白、红细胞和其它微粒,于-20℃冰冻保存。1.2 仪器 日本日立7600-120E 型全自动生化分析仪。1.3 试剂 长沙颐康科技开发有限公司生产的I M A 测定试剂盒[湘食药监械生产许(2005)第0101号,产品 注册号:湘食药监械(准)字2006年第2400022号,注册 产品标准号:Y Z B /湘0010-2006]批号S J 1102;I M A 标准品(标准值为:70U /m l ,批号:20071009),I M 质控品(标准值:51±470U /m l ,批号:20071009),试剂盒检测线形范围可达180U /m l 。1.4 方法1.4.1 A C B 试验检测I M A 在待测样品中加入适当浓度的氯化钴溶液,正常对照的血清中白蛋白以活性形式 存在,加入的钴离子可以较牢固地与这种白蛋白结合,溶液中游离的钴离子浓度较低;而心肌缺血患者血清中的白蛋白N 末端结构发生变化,形成I M A ,钴离子与I M A 的结合能力较弱,此时溶液中游离的钴离子浓度就会增高。加入二硫苏糖醇(D T T )试剂可以与游离钴离子结合产生红褐色反应,I M A 含量与颜色深浅呈正比,在510n m 处检测吸光度变化,即可间接对I M A 进行定量测定。单位(U /m l )定义每毫升血清中的白蛋白,在510n m 波长下吸附1μg 的钴离子为一个单位。1.4.2 标准品的定值 先测试剂1(R 1)钴离子浓度,加入标准品血清和试剂2(R 2)后,再测钴离子浓度改变量,推算每毫升血清中的白蛋白吸附钴离子的量,即为标准品的浓度。 · 492·J o u r n a l o f C l i n i c a l a n dE x p e r i m e n t a l M e d i c i n e V o l .9,N o .7 A p r .2010
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)检测试剂盒说明书
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)检测试剂盒说明书 该试剂盒以 HRP 标记的链霉亲和素复合物（HRP Streptavidin Conjugate，HRP-SA）为基础，可用于检测血液,细胞、组织内的特异性 CD40 抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的CD40 一抗与相应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，最后加入HRP-SA，形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA 复合物，显微镜下观察成像。 小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)检测试剂盒所含试剂： 试剂 A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（选用） 试剂 B 封闭缓冲液（封闭用） 20 mL 试剂 C （原装进口分装）已稀释的即用型 CD40 一抗（2.5ml） 试剂 D （原装进口分装）生物素化羊抗兔 IgG 1 支 （浓度 1.5 mg/mL，稀释比为 1:300~1:500）50 μL+抗体稀释液 20ml 试剂 E HRP-SA 复合物 1 支（浓度 1 μM，稀释比 1:50~1:200）100 μL 试剂 F DAB 显色液 5ml 用户自备试剂： 1．10mM TBS（pH7.2~7.4）三羟基氨基甲烷 1.21g氯化钠 7.6g加蒸馏水 800mL，浓盐酸调 pH 值至 7.2~7.4，最后定容至 1000mL TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%体积比） 2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液檬酸 0.38g 柠檬酸三钠 2.45g加蒸馏水 900mL，浓盐酸调 pH 值至 6.0，最后定容至 1000mL或：0.5M EDTA 修复液（pH8.0） EDTA·2H2O 186.1g加蒸馏水 700mL，用 10mM NaOH 调 pH 值至 8.0，最后定容至 1000Ml 3.缓冲甘油封固剂 10 mL 4.Tween 20 5 mL 石蜡包埋组织切片免疫染色实验步骤（建议方案）： 石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 1.烤片：将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 2.脱蜡：切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min； 3.水化：切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min； 4.抗原修复：根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2× 2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，直接进入第 5 步封闭。 5.封闭：滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min； 6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜； 7.洗涤：TBS-T 洗涤（3×5 min）； 8.封闭：滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min； 9.加二抗：滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育30 min；
缺血修饰白蛋白测定试剂盒(DTE比色法)产品技术要求艾威德
缺血修饰白蛋白测定试剂盒（DTE比色法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中缺血修饰白蛋白的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1：1×15mL 试剂2：1×5mL b) 试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mL c) 试剂1：4×60mL 试剂2：4×20mL d) 试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L ） 1 mmol/L 硫酸钴（CoSO 4 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L 1,4-二硫代赤藓糖醇（DTE） 1 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色至浅红色液体；试剂2应为无色至浅红色液体。 2.2 试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白吸光度 在505nm波长处测定试剂空白吸光度，应≤0.1。
2.4 分析灵敏度 测定IMA含量为80 U/mL样本时，其△A应≥0.005。 2.5 线性范围 2.5.1在（5，150）U/mL范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990； 2.5.2测试浓度在（5，15] U/mL范围内，线性绝对偏差应不超过±1.5 U/mL；测试浓度在（15，150）U/mL范围内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性：用两个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过5％。 2.6.2批间差：抽取3个不同批号试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品，计算回收率，应在85%～115%范围内。 2.8 稳定性 取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
缺血修饰白蛋白测定试剂盒(白蛋白-钴结合法)产品技术要求baiding
缺血修饰白蛋白测定试剂盒（白蛋白-钴结合法）适用范围：用于体外定量测定人血清中缺血修饰白蛋白的含量。 1.1规格 校准品(选配)：水平1：1×1mL，水平2：1×1mL； 质控品(选配)：水平1：1×1mL，水平2：1×1mL。 1.2组成
注：校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。 2.1 外观
2.1.1试剂1：无色至淡粉色液体，无浑浊，无不溶物。 2.1.2试剂2：无色至淡黄色液体。 2.1.3校准品：无色至淡黄色液体。 2.1.4质控品：无色至淡黄色液体。 2.1.5包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不低于标示体积。 2.3 试剂空白吸光度 试剂空白吸光度≥0.3。 2.4 分析灵敏度 样本浓度为60 U/ml时，△A≥0.05。 2.5 线性区间 在[20，100] U/mL范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[20，50] U/mL时，绝对偏差不超过±5 U/mL，测试浓度在（50，100] U/mL时，相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1 批內精密度 用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于8%。 2.6.2 批间差 用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度 回收率在85%-115%范围内。 2.8 质控品赋值有效性 测试结果在质控范围内。 2.9 瓶内均匀性 校准品水平2和质控品瓶内均匀性（CV）应不大于8%。 2.10 量值溯源 校准品量值溯源至公司内部工作校准品，并与北京九强生物技术股份有限公司生产的缺血修饰白蛋白测定试剂盒（白蛋白-钴结合法）比对验证。 2.11 稳定性 2.11.1校准品开瓶稳定性 校准品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。稳定期过后4小时内进行测试，测试结果与靶值的相对偏差不超过±10%。 2.11.2质控品开瓶稳定性 质控品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。稳定期过后4小时内进行测试，应满足2.8的要求。 2.11.3效期稳定性 原包装试剂盒在2℃～8℃避光保存条件下有效期为12个月。有效期满后3个月内测试，应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7和2.8的要求。
心肌缺血,缺血修饰蛋白蹿升
龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/941191197.html, 心肌缺血,缺血修饰蛋白蹿升 作者：袁红霞 来源：《大众健康》2011年第07期 前不久，美国食品药品管理局批准缺血修饰蛋白作为第一个心肌缺血的生化标志物，用于对低危患者辅助急性冠脉综合征的诊断。 调查数据显示，我国急性冠脉综合征的发病率和死亡率均呈快速增长趋势，每年新发心肌梗死患者50万，现患心肌梗死患者200万，占所有心脏病死亡的47％。近些年，世界卫生组织进行的MONICA研究对全世界范围内的急性冠脉事件进行了监测，结果发现女性的事件发生率和死亡率分别为37/10万人年和26/10万人年；男性事件平均发生率为445/10万人年，死亡率为45/10万人年。因此，如何早期快速诊断急性冠脉综合征对及早治疗和良好的预后至关重要。 最近研究发现，在急性冠脉综合征患者发病早期，当现有的生化标志物如肌钙蛋白、肌酸激酶同工酶、肌红蛋白等均为阴性时，缺血修饰白蛋白却表现出极高的敏感性。这是由于缺血修饰白蛋白在心肌缺血损伤发生后5~10分钟即迅速升高，6~12小时达到高峰。这些特点为早期诊断急性冠脉综合征提供了可靠的客观指标。 缺血修饰蛋白是人血清白蛋白流经缺血组织时产生的。当组织缺血和再灌注时，组织局部的血液供应和供氧减少, 细胞进行无氧代谢消耗能量，同时代谢产物如乳酸堆积，导致组织局部反应性氧产物增多、酸中毒、细胞膜上各种离子泵破坏等变化，引起白蛋白结构发生改变，与过渡金属钴的结合能力下降，这种因结构改变而与过渡金属离子结合能力下降的白蛋白转变为缺血修饰白蛋白，所有这些反应在急性缺血数分钟内就可发生，使得缺血修饰蛋白迅速升高。 美国学者Sinha对208名疑似急性冠脉综合征患者进行临床研究，为评价缺血修饰蛋白检测的临床意义，同时比较了缺血修饰蛋白、心电图、肌钙蛋白对急性冠脉综合征的诊断效能。结果表明，在整个患者群体中，缺血修饰蛋白的敏感性为82%，心电图为45%，肌钙蛋白为20%；证实了缺血修饰蛋白单独用于急性冠脉综合征诊断具有敏感性高的特点。也正因为此，前不久，美国食品药品管理局批准缺血修饰蛋白作为第一个心肌缺血的生化标志物，用于对低危患者辅助急性冠脉综合征的诊断。 此外，缺血修饰蛋白还可用于急诊室胸痛患者的危险分层评价。美国科学家将251 例因胸痛症状就诊于急诊室的患者的心脏危险性评价与就诊时检测的缺血修饰蛋白水平比较，不考虑缺血修饰蛋白水平时，66例患者被评为极低危险；考虑缺血修饰蛋白水平时，236例患者被评