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TCID50与moi值的计算

实验四病毒感染力的滴定(TCID

的测定)

50

一、实验目的

了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID

50

的操作步骤、计算方法及含义。

二、测定病毒感染力的方法

( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测

半数致死量LD

50

(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测

半数鸡胚感染量EID

50

(50% tissue culture infective dose):用细胞半数细胞培养物感染量TCID

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来检测

蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测

三、材料

1、长满单层的细胞1瓶

2、胰酶、吸球、吸管、生长液

3、96孔细胞培养板

4、加样器、枪头

5、病毒液(PRV)

的操作步骤

四、TCID

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1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。

2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,

每孔接种100µl。

3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。

4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。(100µl生长液+100µl细胞悬液)

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