当前位置：文档库 › 各类培养基的成分及成分浓度

各类培养基的成分及成分浓度

1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)

Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g

CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g

Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8

适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种

2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)

Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g

NaCl 5g Agar (琼脂) 15g

Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2

[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .

It is favorable to promote spore formation .

适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌

3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)

KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g

MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇ

Ｎa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g

Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)

Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g

Adjust (调) pH to 7.2

适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌

4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)

Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g

Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml

[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。)

5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基I )

Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g

Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g

Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml

Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0

适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌

6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基Ⅱ)

Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g

Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g

Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g

Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g

MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g

Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8

适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）

7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）Peptone（蛋白胨）10g Yeast extract （酵母膏）5g

Glucose （葡萄糖）1g Distilled water （蒸馏水）1L

8. Glycerol Agar （甘油琼脂）

Peptone （蛋白胨）5g Beef extract （酵母膏）3g

Glycerol （甘油）20g Top water （自来水）1000ml

Agar （琼脂）15g pH 7.0-7.2

9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9

Yeast eztract （酵母膏）1g Soil eztract （土壤浸提液）200ml

Mannitol （甘露醇）10g Agar （琼脂）15g

Distilled water （蒸馏水）800ml pH 7.2

[Note]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、

大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌

10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂)

Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g

Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g

Distilled water (蒸馏水) 1000ml

11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）

Glucose （葡萄糖）10g Asparagine （天门冬素）0.5g

K2HPO4 0.5g Water （水）1000ml

pH 7.2-7.4

适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）

12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）

KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉）20g

K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g

NaCl 0.5g FeSO4 0.01g

Agar （琼脂）20g water （水）1000ml

pH 7.2-7.4

适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌

13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）

Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵

啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。15磅灭菌30分钟。) 适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、贝雷丝孢酵母、皮状丝孢酵母、糙孢曲霉、无壳曲霉、鲜橙曲霉、红曲霉、紫红曲霉、红色红曲霉、红曲霉菌

14. Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)

Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20g

Agar (琼脂) 20g

[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。）

适用范围：酵米面假单胞菌（酵米面黄杆菌）、白色链霉菌、烬灰链霉菌、青色链霉

菌、球孢链霉菌、灰色链霉菌、龟裂链霉菌、伞枝梨头霉、雅致放射毛霉、棒曲霉、

米曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛壳、长刺毛壳、橄榄包

毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、束状刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地

生翅孢壳、串珠镰孢、尖镰孢、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、玉蜀黍长蠕

孢、深黄被孢霉、小被孢霉、多头被孢、拉曼被孢霉、葡萄色被孢霉、生香毛霉、卷

枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状

毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟

青霉、拟青霉、球形阜孢、白腐菌、少根根霉、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、日本根霉、爪哇根霉、米根霉、点头根霉、绿穂霉、簇孢匍柄霉、雅致枝霉、康宁木霉、绿色木霉、黄萎轮枝孢、大丽花轮枝孢

15. Czapek′s Agar（察氏琼脂）

Sucrose （蔗糖）30g NaNO3 3g

MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g

FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g

Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

pH 7.2

适用范围：红霉素链霉菌、洋葱曲霉、金头曲霉、泡盛曲霉、泡盛曲霉烟色变种、亮白曲霉、炭黑曲霉、鹿皮色曲霉、棒曲霉、无花果曲霉、黄柄曲霉、黄曲霉、烟曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、赭曲霉、米曲霉、寄生曲霉、酱油曲霉、土曲霉、宇佐美曲霉、焦曲霉、杂色曲霉、温特曲霉、阿达青霉、产黄青霉、黄绿青霉、桔青霉、顶青霉、园弧青霉、绳状青霉、灰黄青霉、岛青霉、淡紫青霉、特异青霉、赭绿青霉、产紫青霉、娄地青霉、小刺青霉、荨麻青霉、

16. Concentrated Sucrose Czapek′s (浓糖察氏琼脂)

Sucrose (蔗糖) 200g NaNO3 3g

MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g

FeSO4.4H2O 0.01g K2HPO4 1g

Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

适用范围：谢瓦曲霉

17. Synthetic Potato Medium (综合马铃薯培养基)

20%Potato extract (马铃薯汁) 1L Glucose (葡萄糖) 20g

KH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5g

Vitanib B1 (硫胺素) Trace (微量) Agar (琼脂) 15g

pH 6

适用范围：米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、长刺毛壳、球毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、

多主枝孢、束状刺盘孢、葫芦科刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、蚀脉镰孢霉、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、瓶毛壳、金龟子绿僵菌、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、淡紫色拟青霉、拟青霉、白腐菌、少根根霉、根霉属的菌、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、台湾根霉、日本根霉、爪哇根霉、黑根霉、雪白根霉、少根根霉、米根霉、点头根霉、三宝垄根霉、根霉属的种、绿穂霉、康宁木霉、木素木霉、拟康氏木霉、木霉、粉红木霉、绿色木霉、黄萎轮枝孢、大丽花轮枝孢、双孢蘑菇、大肥菇、发光假蜜环菌、木耳、皱木耳、毛木耳、大秃马勃、长根菇、金针菇、棘托竹荪、短裙竹荪、短裙竹荪东北变种（暂定）、长裙竹荪、白鬼笔、无裙竹荪、宽鳞大孔菌、凸圆灵芝（白芝）、紫芝、灵芝（红芝，赤芝，日本灵芝，韩国灵芝）、灰树花、猴头菌、香菇、粗毛斗菇、洁丽香菇、豹皮菇、玉蕈、真姬菇、安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌、尖顶羊肚菌、圆锥羊肚菌、高羊肚菌、黑脉羊肚菌、羊肚菌、滑菇、光帽黄伞、尖鳞黄伞、金顶側耳、榆黄磨、金顶磨、白黄側耳、紫孢平菇、姬菇、裂皮側耳、拟囊体側耳（鲍鱼菇）、真线側耳短孢变种、真线側耳、扇形平菇、扁形平菇、佛罗里达无孢子側耳、佛罗里达側耳、蚝菇、糙皮側耳、平菇、贝形側耳、鹰翅菌、肺形側耳、柳树菌、树窝、扁柄側耳、美味側耳、紫孢側耳、粉褶側耳、粉红側耳、凤尾菇、漏斗状側耳、榆干側耳、大榆磨、側耳、茯苓、黑菇、烟色红菇、裂褶菌、鸡纵、金耳、黄木耳、银耳、白木耳、紫晶口磨、银丝菇、丝盖小包脚菇、草菇

18. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)

Mix corn meal with water [20:100(W/V)] well . Distribute the mixture into 100ml bottles , each bottle contains about 30ml of the mixture . Autoclave at 121℃ for 30minutes . (20%玉米粉装瓶，15磅灭菌30分钟。)

19. Filter Paper Medium （滤纸培养基）

（NH4）2SO4 1g KH2PO4 1g

MgSO4.7H2O 0.7g NaCl 0.5g

Distilled water （蒸馏水）1000ml A strip of filter paper （滤纸条）6ⅹ1cm （厘米）

20. Soybean Cake Meal Agar (黄豆饼粉琼脂)

10% infusion of soybean cake meal (10%黄豆饼粉浸汁) 1000ml

Glucose (葡萄糖) 10g NaCl 2.5g

21. Sawdust，Wheat-bran Medium （木屑、麸皮培养基）

Sawdust of broad leaf tree 75g Wheat bran 25g

Preparation：Mix these two ingredients well . Add appropriate water and blend (the amount of water added may be becided by kneading with fingers ). Fill the mixture into broad mouth of bottles . Stick a hole on the filling, put the cotton pulg in bottle mouth .

壳斗科植物或阔叶树的木屑75克麸皮25克

制法：加水适量充分混匀，水量以手捏时指间有水珠为宜，装瓶并压紧，在中心处扎一小洞，堵上棉塞，20磅灭菌1小时。

22. Pine Block or Pine Sowdust Medium （松木条或松木屑培养基）

1. Cut 1021 cm pine biocks and immerse them in 1-2% sucrose solution . Alow the biocks fully absorbing suger solution .Fill the biocks into broad month of bottle . Park the bottle with paper . Autoclave at 20 lbs for 1 hr . (将10ⅹ2ⅹ1厘米的松木条浸泡在1-2%的蔗糖水中。使木条吸足糖水，装瓶不宜过紧，用纸包好，20磅灭菌1小时。)

2. Pine Sawdust Medium

Pine Sawdust (松木屑) 75% Rice bran (米糠) 23-24%

Socrose (蔗糖) 1-2% Water (appropriate)水（适量）

Autoclave at 20 lbs for 1 hr.(20磅灭菌1小时）

23. Rice Straw. Dung Medium (稻草、马粪培养基)

Dried horse dung (or cow dung) （干马粪或牛粪）65%

Died straw （干稻草）35% Urea （尿素）0.5%

Calcium superhosphate （过磷酸钙）0.7% Gypsum powder（石膏粉）1%

Ammonium sulphate （硫酸铵）0.3%

[Note]: Add appropriate water, pile them up and cause them fermentation. （水适量进行堆积发酵）

24. Straw Rice Bran Medium （稻草、米糠培养基）

Dried straw （干稻草）75-80% Rice bran （米糠）20-25%

[Note]：Select no mouldy straw and cut them about 3 cm in length. Immerse them in fresh water for 12 hr. Allow the straw fully (the amount of water added may be decided by kneading with fingers. It is right when a drop of water appeared between fingers). ( [注]：选无霉稻草，切成长约3厘米的小段，用清水浸泡12小时，使充分吸水，然后倾去水，加米糠和水，水量以用手捏时指间有水珠为宜。)

25. Rice Medium (米饭培养基)

Fill 10g of rice into a 50ml of Erlenmeyer flask. Add 20-30ml water. Autoclave at 121℃ for 30 minutes (or fill 2g of rice into a 15ⅹ150mm tube). Add 6 ml of water. Autoclave at 121℃ for 30 minutes. (取大米10克，入50毫升椎形瓶中，水20-30毫升于15磅灭菌30分钟即成，或取大米2克，装入15ⅹ150毫米试管中，加水6毫升，于15磅灭菌30分钟。)

26. Filter Paper Medium (滤纸条培养基)

(NH4)2SO4 1g KH2PO4 1g

MgSO4.7H2O 0.5g Yeast Extract (酵母膏) 0.1g

Distilled Water (蒸馏水) 1000ml

Strip of filter paper 1ⅹ7 cm (滤纸条1ⅹ7 厘米)

[Note]：Siddolve the above ingredients. Distribute the liqid medium into tubes (each tube contains 1ml of the broth). Autoclave at 121℃ for 30 minutes. Then put one or two sterilized strips of filter paper into a tube aseptically. (将上述溶液分配成溶液后分装入试管，每管1毫升，15磅灭菌30分钟。再将灭菌的滤纸条（1条或2条）投入试管中即好使用。)

27. Yeast Extract-Medium Extract Agar I (酵母膏、麦芽膏琼脂)

Yeast extract (酵母膏) 10g Mall extract (麦芽膏) 10g

Glucose (葡萄糖) 4g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

Agar (琼脂) 20g pH 7.0

适用范围：红霉素链霉菌

28. Yeast Extract Peptone （酵母膏、蛋白胨琼脂）

Yeast extract （酵母膏）1g Multi-peptone（多蛋白胨）2g

Beef extract （牛肉膏）1g Glucose （葡萄糖）10g

Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L

pH 7.0

29. Glucose Yeast Extract Starch Agar （葡萄糖、酵母、淀粉琼脂）

Glucose （葡萄糖）10g Yeast extract （酵母膏）10g

Starch （淀粉）10g NaCl 5g

CaCO3 3g Agar （琼脂）20g

Distilled water （蒸馏水）1L pH 7.0

30. Wheat Bran Medium （麸皮培养基）

Wheat bran （麸皮）36g （NH4）2HPO4 10g

K2HPO4 0.2g MgSO4。7H2O 0.1g

Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L

pH 7.0

31. Yeast Sporulation Medium (酵母菌产生子囊孢子培养基)

(1) Kleyn Medium

KH2PO4 0.012% K2HPO4 0.02%

Sodium acetate (醋酸钠) 0.5% Glucose (葡萄糖) 0.062%

NaCl 0.062% Peptone (蛋白胨) 0.25%

Biotin (生物素) 2μg% Agar (琼脂) 2%

Trace element solution (混合盐类) 1ml/100ml

[Note]: Trace element solution （混合盐类溶液）：MgSO4.7H2O 0.4%, NaCl 0.4%, CuSO4.5H2O 0.002%, MnSO4.4H2O 0.2%, FeSO4.4H2O 0.2%

(2) Gorodkowa Medium

Glucose (葡萄糖) 0.1% Peptone (蛋白胨) 1%

NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2%

(3) McClary Medium

Glucose (葡萄糖) 0.1% KCl 0.18%

Yeast juice (酵母汁) 0.25% Sodium actate (醋酸钠) 0.82%

Agar (琼脂) 1.5%

32. BPY Medium (BPY 培养基)

Beef extract (牛肉膏) 5g Prptone (蛋白胨) 10g

NaCl 5g Yeast extract (酵母膏) 5g

Glucose (葡萄糖) 5g Agar (琼脂) 1-2%

Distilled (蒸馏水) 1000ml pH 7.0

适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、恶臭假单胞菌

33. LB Medium (LB 培养基)

Yeast extact (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 10g

NaCl 10g Agar (琼脂) 1-2%

Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.0

适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）

34. Penssay Broth (Penssay 肉汤)

Beef extract (牛肉膏) 1.5g Yeast extract (酵母膏) 1.5g

Tryptone (胰蛋白胨) 5g NaCl 3.5g

Glucose (葡萄糖) 1g K2HPO4.3H2O 4.8g

Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.2

35. Blond Agar (血琼脂培养基)

Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g

NaCl 5g NaH2PO4 2.5g

Sodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800ml

Pig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10%

pH 7.2

[Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion：

（1）Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml;

（2）Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml;

（3）Keep the two infusions at 50℃ for 1 hr , then boil for 15 minutes;

（4）Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50℃保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。

36. Cellulose﹣decomposing Bacteria Synthetic Medium (纤维细菌合成培养基)

NaCl 6g MgSO4.7H2O 0.1g

KH2PO4 0.5g CaCl2 0.1g

K2HPO4 2.0g Yeast extract (酵母膏) 1.0g

(NH4)2SO4 2.0g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

Filter paper strip: one strip (滤纸条：一片) pH 7.0-7.4

[Note]: So;id medium for cellulose-decomposing bacteria: Carboxymethyl Cellulose 2% Agar 2%. （斜面培养基去滤纸条用2%琼脂及2%羧甲基纤维素钠CMCNa ）

37. Clostridium Pasreurianum Synthetic Medium （巴氏梭状芽孢杆菌合成培养基）

Glucose （葡萄糖）1% MnSO4 0.001%

KH2PO4 0.05% FeSO4 0.001%

K2HPO4 0.05% Yeast extract（酵母膏）0.1%

MgSO4.7H2O 0.02% Peptone (蛋白胨) 0.01%

NaCl 0.001% CaCO3 0.5%

Distille water (蒸馏水) 100% pH 7.0

38. Yeast Extract-Medium Extract Agar Ⅱ (酵母膏、麦芽膏琼脂Ⅱ)

Yeast extract （酵母膏）4g Mall extract （麦芽膏）10g

Glucose （葡萄糖）4g Agar （琼脂）17g

Distilled water （蒸馏）1000ml pH 7.3

39. Oatemeal Agar （燕麦粉琼脂）

Oatemeal（infusion）[燕麦粉浸液] 20g Agar （琼脂）18%

Trace element solution （迹量盐溶液）1ml

Distilled water up to （用蒸馏水补充至1000毫升）1000ml pH 7.2

[Note]：Trace element solution (迹量盐溶液)：

FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g

ZnSO4.7H2O 0.1g Distilled water (蒸馏水) 100ml

40. Calcium Malate Agar (苹果酸钙琼脂)

Calium malate (苹果酸钙) 10g K2HPO4 0.5g

NH4Cl 0.5g Glycerol (甘油) 10g

Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

41. Thiobacillus Ferrooxidans Medium (氧化亚铁硫杆菌培养基)

(NH4)2SO4 0.15g KH2PO4 0.05g

KCl 0.05g MgSO4.7H2O 0.5g

Ca(NO3)2.4H2O 0.01g FeSO4.7H2O 50g

Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 2.0

42. Thiobacillus Thiooxidans Medium (氧化硫硫杆菌培养基)

(NH4)2SO4 0.3g KH2PO4 3-4g

CaCl2 (anhydrous) [无水] 0.25g MgSO4.7H2O 0.5g

FeSO4.7H2O 0.001g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

pH 3.5-4

43. Plasma Substitute Medium (代血浆培养基)

Sucrose (蔗糖) 12.5-15% Peptone (蛋白胨) 0.5%

KH2PO4 0.03% Na2HPO4.12H2O 0.14%

pH 7.0-7.2

44. Skim Milk Medium (脱脂牛奶培养基) ATCC 183

脱脂牛奶100g 去离子水1000ml

适用范围：保加利亚乳杆菌、嗜热乳酸链球菌

45. Pea Agar (豌豆琼脂)

Glucose (葡萄糖) 1% Peptone (蛋白胨) 0.5%

NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2.0%

Pea infusion (counted by NH2) [豌豆浸汁(以NH2计)] 12-14 mg∕100

pH (before sterilization) [消前] 7.2-7.5

[Note]: Preparetion of pea infusion (豌豆浸汁的制法) :

Preparetion 900g of pea. Put them into a 5L bottle, and add 3L of tap water. Adjust pH to 4.3-4.5 by using of sulphuric acid. Add 30ml of chloroform for antisepsis. Plug with rubber stopper and bind up the bottle mouth with gauge in order to avoid that the stopper fall off due to gas pressure.

Place the bottle at 37℃ for 7-10 days. Filter the infusion, then boil the filtrate to escape the chloroform. Filter again Distribution and autoclave at 120℃ for 30 minutes. Store at cool contition . (称取白豌豆900克，置于5公升广口瓶中，加自来水3公升，用硫酸调pH至4.3-4.5，再加氯仿30毫升（防腐），加胶塞并用纱布扎口（防止冲脱），放37℃恒温室7-10天。取出用滤纸过滤，滤液煮沸20分钟，以除氯仿，并再次以滤纸过滤，除沉淀。滤液分装，于120℃30分钟灭菌。后冷藏备用。)

The standard quality of pea infusion as following (豌豆浸汁质量标准)：

Aminonitrogen（氨基酸）: 160-200 mg∕100ml

Soluble phosphoruse（溶磷）: 400-600 μg∕ml

Color（色泽）: auratus,transparent （金黄、透明）

46. Wheat Bran Medium (麦麸琼脂)

Wheat bran (麦麸) 3.6% (NH4)2HPO4 0.3%

K2HPO4 0.02% MgSO4.7H2O 0.01%

Agar (琼脂) 2% pH 7.0

适用范围：金霉素链霉菌、红霉素链霉菌

47. Glucose Yeast Extract Agar (葡萄糖、酵母膏琼脂)

Glucose (葡萄糖) 10g Yeast extract (酵母膏) 10g

Water (水) 1000ml Agar (琼脂) 15g

pH 7.2

48. MMN Medium (MMN培养基)

CaCl2 0.05g MgSO4 0.15g

NaCl 0.025g FeCl3 (1%) 1.2ml

KH2PO4 0.5g Vitamib B1 (硫胺素) 100μg

(NH4)2HPO4 0.25g Wort (12 Be′) 100ml

Glucose (葡萄糖) 10-15g Citric acid (柠檬酸) 0.2g

Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 5.5 (左右)

适用范围：蜜环菌

49. Starch Agar (淀粉琼脂)

Soluble starch (可溶性淀粉) 10g NaNO3 1g

MgCO3 1g K2HPO4 0.3g

NaCl 0.5g Agar (琼脂) 20g

Distilled water (蒸馏水) 1000ml

50. 5 Be′Wort Agar (5 Be′麦芽汁琼脂)

适用范围：园弧青霉、少根根霉、日本根霉、爪哇根霉

51. 5 Be′Koji Extract Agar (5 Be′米曲汁琼脂)

适用范围：华根霉、三宝垄根霉

52. 发根农杆菌培养基（YEB）

Beef extract (牛肉浸膏) 5g/L Yeast extract (酵母膏) 1g/L Peptone (蛋白胨) 5g/L Sucrose (蔗糖) 5g/L

MgSO4.7H2O 0.4g/100ml Agar (琼脂) 1.5g/100ml

pH 7.4

适用范围:青枯假单胞菌

53. 青枯菌培养基(Tm)

Peptone (蛋白胨) 10g Casein (干酪素水解物产) 1g Glucose (葡萄糖) 5g Ddhro (纯水) 1000ml

Agar(琼脂) 15g pH 7.0

54. YM (Yeast Malt Agar)

酵母膏3.0g 麦芽汁3.0g

蛋白胨5.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml

55. ISP 4

可溶性淀粉10.0g K2HPO4 1.0g

MgSO4.7H2O 1.0g NaCl 1.0g

(NH4)2SO4 2.0g CaCO3 2.0g

FeSO4.7H2O 0.001g MnCl2.7H2O 0.001g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

56. Trypton Soy Agar

胰蛋白胨17.0g 大豆胨3.0g

葡萄糖2.5g 琼脂20.0g

NaCl 5.0g K2HPO4 2.5g

蒸馏水1000ml

57. NA (Nutrient Agar)

牛肉膏3.0g 蛋白胨5.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 6.6-7.0

58. 甘露(糖)醇琼脂(A TCC 1)

酵母膏5.0g 蛋白胨3.0g

甘露(糖)醇25.0g 琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

59. Marine琼脂2216 (ATCC 2)

蛋白胨5.0g 酵母膏1.0g

柠檬酸铁0.1g 溴化钾0.08g

NaCl 19.45g MgCl2 8.8g

Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g

KCl 0.55g NaHCO3 0.16g

NH4NO3 0.0016g Na2HPO4 0.008g

氯化锶0.034g 硼酸0.022g

硅酸钠0.004g 氟化钠0.0024g

琼脂15.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.4-7.8

60. 兔血琼脂(ATCC 4)

牛心(取其浸液) 500.0g 胰蛋白胨(Tryptose) 10.0g NaCl 5.0g 琼脂15.0g

蒸馏水1000ml pH 6.6-7.0

61. 孢子形成培养基(ATCC 5)

酵母膏1.0g 牛肉膏1.0g

胰蛋白胨2.0g 葡萄糖10.0g

FeSO4 微量琼脂15.0g

蒸馏水1000ml pH 7.2

62. Trypticase Soy Agar (ATCC 18)

Trypticase Soy Broth 30.0g 琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

63. YPAD (ATCC 109)

酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g

葡萄糖20.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml pH 7.0

64. SP (ATCC 432)

棉子糖1.0g 蔗糖 1.0g

半乳糖1g 可溶性淀粉5g

水解酪蛋白2.5g 琼脂20.0g

MgSO4.7H2O 0.5g K2HPO4 0.25g

蒸馏水1000ml pH 自然

65. 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)

胰蛋白胨15.5g 大豆蛋白胨5.0g

NaCl 5.0g 酵母膏6.5g

琼脂15.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.3

66. A TCC 20

蛋白胨5.0g 酵母膏15.0g

K2HPO4 3.0g 葡萄糖2.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.3-7.5

67. TY (Yeast Tryptone Agar)

蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g

葡萄糖1.0g NaCl 5.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.0

68. 硫醇(Thiol)培养基(A TCC 49)

示蛋白胨(Proteose Peptone No.3,Difco) 10.0g 酵母膏5.0g 葡萄糖1.0g NaCl 5.0g

硫醇复合物8.0g 琼脂 1.0g

p-氨基苯甲酸0.05g pH 6.9-7.3

69. Czapek＇Dox 琼脂培养基(ATCC 134) Czapek＇Dox Broth 35.0g 琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

70. MG/L

蛋白胨5.0g 甘露醇5.0g

谷氨酸钠1.15g 生物素0.0001g

K2HPO4 0.25g NaCl 0.1g

MgSO4.7H2O 0.1g 酵母膏2.5g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

氯霉素(终浓度) 50μg/ml

pH 7.0

71. Eclb Broth

蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g

NaCl 5.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml 氨苄青霉素(终浓度) 300μg/ml pH 7.0

72. Bennetts Agar (IFO 228)

酵母膏1.0g 牛肉膏1.0g

NZ Amine,type A 2.0g 葡萄糖10.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.3

73. Harroldˊs M40Y (ATCC 319)

麦芽膏20.0g 酵母膏 5.0g

蔗糖400.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml

74. PSA (Potato Sucrose Agar)

土豆200g 蔗糖20g

蒸馏水1000ml 琼脂20g

pH 6.0-6.5

75. 培养基

牛肉膏300g 水解酪蛋白17.5g

可溶性淀粉1.5g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml 磺胺嘧啶(终浓度) 100μg/ml

氨苄青霉素(终浓度) 100μg/ml pH 7.3-7.4

76. 马铃薯牛肉汁培养基

麦芽糖20.0g 牛肉膏 5.0g

蛋白胨3.0g 马铃薯200.0g

pH 7.0-7.2

77. ISP 2

酵母膏4.0g 麦芽汁10.0g

葡萄糖4.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml pH 7.0

78. BHI (Brain Heart Infusion)

牛脑200.0g 牛心浸出汁250.0g

蛋白胨10.0g 葡萄糖 2.0g

NaCl 5.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml pH 6.8-7.2

79. YPG （Yeast Peptone Glucose）

酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g

葡萄糖20.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml pH 7.0

80. 兔食琼脂培养基（A TCC 340）

兔食（商店出售）25.0g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml

*煮沸兔食，并浸泡1/2小时，用多层纱布过滤，加琼脂于滤液中。

81. 土豆琼脂(ATCC 423)

200克去皮土豆切成小块于1000ml自来水中煮沸1小时,用细棉布过滤.加进5.0mgMnSO4,pH 调至6.8,用自来水定容至1000ml。加进15.0g琼脂，溶化，分装并灭菌。

82. 土豆浸汁加无机盐培养基(A TCC 470)

土豆2000g MnSO4.5H2O 0.02g

MgSO4.7H2O 0.4g ZnSO4.7H2O 0.01g

CuSO4. 5H2O 0.01g FeSO4.7H2O 0.1g

CaCl2.2H2O 0.1g K2HPO4 0.5g

* 称取200g去皮块状土豆,加入1000ml蒸馏水煮沸30分钟,多层纱布过滤,滤液中加入以上成分,溶解后定容至1000ml。

83. 无机盐淀粉琼脂培养基（A TCC 527）

可溶性淀粉10.0g K2HPO4 1.0g

MgSO4 1.0g NaCl 1.0g

（NH4）2SO4 2.0g CaCO3 2.0g

FeSO4.7H2O 0.001g MnCl2.7H2O 0.001g

ZnSO4.7H2O 0.001g 琼脂20.0g

pH 7.0-7.4

84. (AS125)

新鲜鸡蛋15-16 蒸馏水375ml

2%孔雀(石)绿10.0g K4HPO4 1.5g

MgSO4.7H2O 0.375g 天冬酰胺2.25g

甘油7.5ml 土豆粉18.8g

85. 燕麦片(Oatmeal)琼脂培养基

燕麦片60.0g 琼脂12.5g

蒸馏水1000ml

* 将燕麦片加600ml水中，制成匀浆，加热至45-50oC，然后加入已溶化琼脂的另400ml水，121oC灭菌90分钟。

86. 细菌培养基（A TCC 573）

（NH4）2SO4 1.3g K2HPO4 0.37g

MgSO4.7H2O 0.25g CaCl2.2H2O 0.07g

FeCl3 0.02g 葡萄糖1.0g

酵母膏1.0g 蒸馏水1000ml

用10N H2SO4 调pH至4.0。若配制固体培养基，为增强上述溶液的强度，pH需调至3.5，琼脂水溶液浓度为40g/L。两者分别高压灭菌，冷却至约50oC，无菌操作将两种溶液等体积混合，这一过程可避免琼脂被酸水解。

87. 碎肉培养基（A TCC 593）

牛肉（去脂肪）500.0g 蒸馏水1000ml

NaOH 25.0ml

* 所用瘦牛肉或马肉（碾）磨碎前需去脂肪和周围的组织。将肉、水、NaOH混合后边搅拌边加热，冷至室温，去掉表面油脂，过滤，留下肉末和滤液。滤液加蒸馏水至1000ml。滤液中加下列成分：

蛋白胨30.0g 酵母膏 5.0g

K2HPO4 5.0g 0.025%刃天青（Resazurin）溶液4.0ml

然后煮沸，冷却，加0.5g L-半胱氨酸HCl。H2O，pH调至7.0。在氧气、氮气（O2-freenitrogen）和3%氢气条件下，按1份碎肉加4-5份以上溶液的比例分装于每支试管。在氮气和氢气条件下，使用橡皮塞，快排气，高压灭菌15分钟。

88. YMPG

酵母膏3.0g 麦芽汁3.0g

蛋白胨5.0g 葡萄糖10.0g

FeSO4.7H2O 0.1g 琼脂20.0g

蒸馏水1000ml pH 6.8

灭菌：110oC，35分钟

89. TGYM培养基(ATCC 679)

胰蛋白胨5.0g 葡萄糖1.0g

酵母膏3.0g 蒸馏水1000ml

DL-蛋氨酸(DL-Meth 0.5g

90. TYG培养基(A TCC 741)

胰蛋白胨3.0g 酵母膏3.0g

葡萄糖3.0g K2HPO4 1.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.4

91. M9

Na2HPO4 12.8g KH2PO4 3.0g

NaCl 0.5g NH4Cl 0.5g

葡萄糖(单独灭菌) 10.0g 维生素B1(单独灭菌) 1μg/ml

pH 自然

92. ISP3 (IFO 245)

燕麦粉20.0g 微量元素溶液1ml

pH 7.2

微量元素：

FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g

ZnSO4.7H2O 0.1g

93. Oatmeal Agar

琼脂5.0g 蒸馏水500ml

加热溶化速溶燕麦粉40.0g 蒸馏水250ml

加热溶化后与琼脂液混合加水至1000ml pH 5.8

94. V8-Juice Agar (AYCC 343)

V-8 果汁200g CaCO3 3.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 5.8

95. Czapek-Dox Agar (A TCC 312)

NaNO3 3.0g K2HPO4 1.0g

MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g

FeSO4.7H2O 0.01g 蔗糖(单独灭菌) 30.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 5.6

96. GC培养基(ATCC 814)

A 液

琼脂5.0g GC琼脂培养基(BBL 11275) 36.0g

蒸馏水500.0ml

B 液

干燥色牛血红蛋白(BBL 11871) 10.0g 蒸馏水500.0ml Iso Vitale X (BBL 11876) 10.0ml

97. 固氮螺菌培养基(ATCC 838)

K2HPO4 0.1g KH2PO4 0.4g

MgSO4.7H2O 0.2g NaCl 0.1g

CaCl2 0.02g FeCl3 0.01g

NaMoO4.2H2O 0.002g 苹果酸钠(Na malate) 5.0g 酵母膏0.05g 蒸馏水1000ml

pH 7.2-7.4

98. BG-11

NaNO3 1.5g K2HPO4 0.04g

MgSO4.7H2O 0.075g CaCl2.7H2O 0.036g

Na2CO3 0.02g 柠檬酸0.006g

柠檬酸铁0.006g *微量元素溶液A5 1ml

氨苄青霉素(终浓度) 50μg/ml 蒸馏水1000ml 琼脂20.0g

* 微量元素溶液A5

H3BO4 2.86g MnCl2.4H2O 1.81g

ZnSO4 0.222g Na2MoO4 0.39g

CuSO4.5H2O 0.079g Co(NO3)2.6H2O 49.4g

99. (Marine Agar)

蛋白胨5.0g 酵母膏1.0g

柠檬酸铁0.1g NaCl 19.45g

MgSO4.7H2O 5.9g KCl 0.55g

Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g

NaHCO3 0.16g KI 0.08g

微量元素10ml pH 7.0-7.6

* 微量元素溶液：

氯化锶0.034g 硅酸钠0.004g

蒸馏水1000ml H3BO4 0.022g

NaCl 0.0024g NaNO3 0.0016g

NaHPO4 0.008g 蒸馏水1000ml

100.(Yeast Starch Agar)

酵母膏2.0g 可溶性淀粉10.0g

琼脂20.0g 蒸馏水1000ml

pH 7.2-7.4

101.GYMC

葡萄糖4.0g 酵母膏2.0g

麦芽汁20.0g 琼脂20.0g

CaCO3 1.5g 蒸馏水1000ml

培养基成分及其作用

培养基成分及其作用植物生长发育需要多种营养和生长调节物质，当其缺乏时，生长发育受阻，形态不正常。在植物组织快繁过程中，培养物生长发育所需的营养和生长因子，主要靠培养基供给。因此，完全培养基的成分除了水分外，还要包括无机营养、有机物营养、生长调节物质及其他附加物等。一、无机营养物无机营养物即无机盐是植物生长发育所必需的，根据植物对无机盐需要的多少，将其分为大量元素和微量元素。 1. 大量元素大量元素在植物体内含量占干物重的0.1-10%，其浓度一般大于0.5mmol/L，包括氮(N)、磷(P)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、硫(S)，若加上碳(C)、氢(H)、氧(O)，则有9种元素。在离体培养中，其C、H、O三元素是从人工加入的糖类获得的，H、O元素也可以从培养基所含的水分中获得，而其余6种矿质元素要从加入的适量的无机盐类来获取。无机氮常以硝态氮(如KNO3)和铵态氮(如NH4NO3)两种形式供应，多数培养基都是二者兼而有之。 2. 微量元素植物所需的微量元素包括铁(Fe)、硼(B)、锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)、钼(Mo)、氯(Cl)等，植物对其需要量极微，在植物体内含量占干物重的0.01%以下，起生长发育所需的浓度一般小于0.5mmol/L，稍多则产生毒害。碘(I)虽不是植物生长的必需元素，但几乎在所有的培养基中都含有碘元素，有些培养基还加入了钴(Co)、镍(Ni)、钛(Ti)、铍(Be)，甚至铝(Al)等元素。 3. 铁盐铁是用量较多的一种微量元素，是许多重要氧化还原酶的组成成分，在植物叶绿素的合成过程中起到重要的作用。若以硫酸铁和氯化铁为供铁源，培养基的pH值会达到5.2以上，形成氢氧化铁沉淀，使培养物无法吸收而出现缺铁症，故在培养基配制时，常用硫酸亚铁和EDTA二钠配成螯合态铁，成为有机态铁方被培养物吸收和利用;也可用EDTA铁盐，作为铁的供应源。这些元素参与培养物机体的建造，构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。二、有机营养成分

植物组培培养基的成分

植物组培培养基的成分培养基是人工配制的，满足不同材料生长，繁殖或积累代谢产物的营养物质。在离体培养条件下，不同种类植物对营养的要求不同，甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养要求也不相同。筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容，是决定成败的关键因素之一。大多数植物组织培养基的主要成分是无机营养物质（大量营养元素和微量营养元素）、碳源、有机添加物、植物生长调节剂和凝胶剂。一些组织可以生长在简单的培养基上，这些培养基只含无机盐和可利用的碳源（蔗糖），但大多数组织必须在培养基中添加维生素、氨基酸和生长物质，而且经常还将一些复合的营养物质加入到培养基中，这种由“化学定义”的化合物组成的培养基称为“合成”培养基。人们已设计了许多培养基用于特殊组织和器官的培养。怀特培养基是最早的植物组织培养基之一，最初作为根培养的培养基。为了诱导培养组织器官发生和再生植株，广泛使用含有大量无机盐成分的MS（Murashige和Skoog，1962）和LS(Linsmaier 和Skoog，1965)培养基。原本为细胞悬液或愈伤组织培养而设计的B5培养基，经过改良后，被证实有利于原生质体培养。同时，B5培养基也被用于诱导原生质体再生植株。尽管Nitshch(1969)为花药培养设计的培养基仍然使用频繁，但另一个称为N6的培养基，专门用于禾谷类花药培养和其他组织培养。类似的，N6培养基越来越多地

用于大豆、红三叶草和其他豆科植物的培养。该培养基营养成分促进胚性细胞和原生质体再生细胞快速生长。使用这些培养基成功的原因很可能是营养元素的比例和浓度基本上满足不同培养体系中细胞或组织生长和分化的最适需要。植物组织培养基中无机和有机成分的浓度用质量浓度（mg/L 或ppm，但现在习惯用mg/L）或物质的量浓度(mol/L)表示。按照国际植物生理学协会的推荐，应该用mol/L表示大量营养元素和有机营养成分浓度，用μmol/L表示微量营养元素、激素、维生素和有机成分浓度。用物质的量浓度的优点是，每一种化合物每一摩尔的分子数是常数，所以按照特定培养基配方配制培养基时，无论无机盐化合物的水分子数为多少，原物质的量浓度都可以使用。但是，用质量浓度来表示浓度的话，就不能不考虑无机盐化合物的水分子数目了。 1、水分水分是植物体的主要组成部分，也是一切代谢过程的介质和溶媒，在植物生命活动过程中不可缺少。配制培养基母液时要用蒸馏水或纯水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储藏过程中发霉变质。研究培养基配方时尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。而在大规模工厂化生产时，为了降低生产成本，常用自来水代替蒸馏水。如自来水中含有大量的钙、镁、氯和其他离子，最好将自来水煮沸，经过冷却沉淀后再使用。

微生物培养基成分及其用途

[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1ｇＮa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量) Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g Adjust (调) pH to 7.2 适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml [Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ(乳酸菌培养基Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌） 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）Peptone（蛋白胨）10g Yeast extract （酵母膏）5g Glucose （葡萄糖）1g Distilled water （蒸馏水）1L 8. Glycerol Agar （甘油琼脂） Peptone （蛋白胨）5g Beef extract （酵母膏）3g Glycerol （甘油）20g Top water （自来水）1000ml Agar （琼脂）15g pH 7.0-7.2 9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9 Yeast eztract （酵母膏）1g Soil eztract （土壤浸提液）200ml Mannitol （甘露醇）10g Agar （琼脂）15g

几种常见培养基作用

1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。 2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因子X因子和V因子。其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。 3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。 4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落． SS培养基 2.原理培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。因大肠埃希菌等能迅速分解乳糖产酸并与胆盐结合成胆酸,故形成中心混浊的粉红色菌落;病原菌不能分解乳糖。菌落呈透明无色,枸橼酸铁能指示硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色。硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺菌及沙门菌的有害作用并中和煌绿和中性红染料的毒性作用,且能使大肠埃希菌的红色菌落颜色鲜明。 3.用途用于分离肠道致病菌。 SS琼脂培养基是分离沙门菌及志贺菌属的强选择性培养基,它对大肠埃希菌有较强的抑制作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用。因此,可以增加粪便等标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,是目前公认比较满意的培养基。附注:大肠埃希菌属细菌在此培养基虽不易生长,但亦不被杀灭,故挑选病原菌菌落时,应仅挑取菌落的中心部分,否则易将其四周的杂菌一并挑入,影响结果。

药剂学试题及答案(三)

药剂学试题及答案第三章灭菌制剂与无菌制剂一、单项选择题【A型题】 1.下列哪一术语是判断热压灭菌过程可靠性的参数（） A Z值 B D值 C F0值 D F值 E K值 2.用热压灭菌器灭菌时所用的蒸汽是（） A流通蒸汽 B 过热蒸汽 C湿饱和蒸汽 D饱和蒸汽 3.以下关于热原的叙述正确的是（） A 脂多糖是热原的主要成分 B 热原具有滤过性因而不能通过过滤除去 C 热原可在100℃加热2h除去 D热原可通过蒸馏避免 4.在注射剂中具有局部止痛和抑菌双重作用的附加剂是（） A 盐酸普鲁卡因 B 盐酸利多卡因 C 苯酚 D 苯甲醇 E 硫柳汞 5.制备注射剂的环境区域划分哪一条是正确的（）

A 精滤、灌封、灭菌为洁净区 B 精滤、灌封、安瓿干燥灭菌后冷却为洁净区 C 配制、灌封、灭菌为洁净区 D 灌封、灭菌为洁净区 E 配制、精滤、灌封、灯检为洁净区 6.氯化钠的等渗当量是指（） A 与1g药物呈等渗效应的氯化钠量 B 与1g氯化钠呈等渗效应的药物量 C 与1g药物呈等渗效应的氯化钠克当量 D 与1g氯化钠呈等渗效应的药物克当量 E与1mg氯化钠呈等渗效应的药物毫克当量 7.注射剂质量要求的叙述中错误的是（） A．各类注射剂都应做澄明度检查 B．调节pH应兼顾注射剂的稳定性及溶解性 C．应与血浆的渗透压相等或接近 D．不含任何活的微生物 E．热原检查合格 8.关于热原的叙述中正确的是（） A．是引起人的体温异常升高的物质 B．是微生物的代谢产物 C．是微生物产生的一种外毒素 D．不同细菌所产生的热原其致热活性是相同的E．热原的主要成分和致热中心是磷脂 9.对热原性质的叙述正确的是（）

微生物培养基种类大全

摘要：1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。用途：作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养 1、营养琼脂（普通琼脂) 成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定) 制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。用途：作普通琼脂平皿。 2、血琼脂平板（BA) 制法：取营养琼脂（PH7．6)，加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。 2．尿液，脓液 3．分离细菌标本用。 3、基础培养基（肉膏汤BB) 成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。 2 作普通琼脂斜面。 4、血液培养基（大管肉汤培养基) 成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升 2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升 3 MgSO 4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升 4 枸椽酸钠0．3g 制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。用途：作血，骨髓培养用。 5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂) 成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升 0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟)，冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。（高压以后方可再加乳糖) 用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。 1 6、罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克纯甘油（丙三醇) 12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤) 2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿)。可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，高压灭菌。 2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。 3 将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。 4 间歇灭菌第一次90℃1小时，第二次80℃半小时，第三次80℃半小时（或放85℃烤箱内连续二次)。质控标准： 1 灭菌试验合格。 2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。用途：作结核分枝杆菌培养用。

第六章热原的去除及验证

热原的去除及验证热原(Pyrogens)是微生的代谢产物。大多数细菌都能产生，致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原。霉菌甚至病毒也能产生热原。含有热原的输液注入人体，大约半小时以后，就使人体发冷、寒战、体温升高、身痛、出汗、恶心呕吐等不良反应，有时体温可升至40℃，严重者出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。热原反应的温度变化曲线，因热原种类不同而有差异。一般先经过一个短的潜伏期后，温度略微上升，然后又略微下降，接着又很快上升，并出现一个高峰，根据这种现象而导致一个假设：即细菌性热原本身不引起发热反应。但热原使多型核白细胞(polymorphonucler leucocyte)及其他细胞释放一种内源性热原(endogenous pyrogen)，虽然有人提出内源性热原可能是蛋白质或脂蛋白(lipoprotein)组成，但其确切组成尚未肯完，它作用于视丘下部体温调节中枢，可能引起5-羟色胺的升高而导致发热[1]，热原的致热量因菌种而异，由于注射途径不同，引起发热反应的程度也有差异。 1.热原的组成热原是微生物的一种内毒素，它存在于细菌的细胞膜和固体膜之间。内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖(lipopolysaccharide)是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性，因而大致可以认为内毒素=热原=脂多糖。脂多糖的化学组成因菌种不同而异，从大肠杆菌分出来的脂多糖中有68%～69%的糖(葡萄糖、半乳糖、庚糖、氨基葡萄糖、鼠李糖等)，12～13%的类脂化合物，7%的有机磷和其它一些成分。热原的分子量一般为10 105 左右。热原的结构

2.热原的性质(1)耐热性一般说来，热原在60℃加热1小时不受影响，100℃也不会发生热解，在180℃3～4小时，250℃30～45分钟或650℃1分钟可使热原彻底破坏。虽然已经发现某些热原具有热不稳定性，但在通常注射剂灭菌的条件下，往往不足以使热原破坏，这点必须引起注意； (2)滤过性热原体积小，约在1～5nm之间，故一般滤器均可通过。即使微孔滤膜，也不能截留。但活性炭可以吸附热原； (3)水溶性热原能溶于水； (4)不挥发性热原本身不挥发，但在蒸馏时，往往可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水，故应设法防止； (5)吸附性热原对许多分子有亲和性，优其是蛋白质类，因此较难去除。 (5)其它热原能耐受酸碱和化学试剂的处理，但热原能被强酸、强碱破坏，也能被强氧化剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，超声波也能破坏热原。热原对干涸的耐受性较强。 3.污染热原的途径(1)从溶剂中带入这是注射剂出现热原的主要原因。蒸馏器结构不合理，操作不当，注射用水贮藏时间过长都会污染热原。故应使用新鲜注射用水，最好随蒸随用； (2)从原料中带入容易滋长微生物的药物，如葡萄糖因贮存年久包装损坏常致污染热原。用生物方法制造的药品如右旋糖酐、水解蛋白或抗生素等常因致热物质未除尽而引起发热反应； (3)从容器、用具、管道和装置等带入因此在生产中对这些容器用具等物要认真处理，合格后方能使用； (4) 制备过程中的污染制备过程中，由于室内卫生条件差，操作时间长，装置不密闭，均增加污染细菌的机会，而可能产生热原； (5)从输液器带入有时输液本身不含热原，但仍发现热原反应。这往往是由于输液器具(如输液吊瓶、胶皮管等)污染所致。

细胞培养基种类及用途

基础细胞培养基通常指基础合成培养基，主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质（核酸降解物、氧化还原剂等）。据不同细胞和研究目的，选用合适培养基,?还可补加新成分。?如杂交瘤中常用DMEM加丙酮酸钠、2-巯基乙醇（相当于胎牛血清可透析组分的作用）。合成培养基使用时加5-30%血清。 1． 199细胞培养基及其改良品种 1950年Morgan等设计，除BSS外，含有53种成分，为全面培养基，广用于各类细胞培养，广泛用于病毒学、疫苗生产。 2． BME细胞培养基基础Eagle培养基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle设计，BSS＋12种氨基酸＋谷氨酰胺＋8种维生素。简单、便于添加，适于各种传代细胞系和特殊研究用，在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMEM等。 3． MEM细胞培养基低限量Eagle培养基（Minimal Essential Medium），1959年修改，删去赖氨酸、生物素，氨基酸浓度增加，适合多种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基，但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时，并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。 4． DMEM细胞培养基及其改良品种 DMEM由Dulbecco改良的Eagle培养基，各成份量加倍，分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)。生长快，附着稍差肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。 5． IMEM细胞培养基 IMEM由Iscove's改良的Eagle培养基，增加了几种氨基酸和胱氨酸量。 6． RPMI-1640细胞培养基 Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，针对淋巴细胞培养设计，BSS＋21种氨基酸＋维生素11种等，广泛适于许多种正常细胞和肿瘤细胞，也用做悬浮细胞培养 7．Fischer’s细胞培养基用于白血病微粒细胞培养。 8． HamF10、F12细胞培养基 1963年、1969年Ham设计，含微量元素，可在血清含量低时用，适用于克隆化培养。F10适用于仓鼠、人二倍体细胞，特适于羊水细胞培养。 9． DMEM/F12细胞培养基 DMEM和F12细胞培养基按照1:1比例混合效果最佳，营养成分丰富，且可以使用较少血清，或作为无血清培养基的基础培养基。 10． McCoy5A培养基 1959年MeCoy为肉瘤细胞设计，

培养基的几大分类

按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。 (1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。养基三类。 (1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。 (2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。 (3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。

培养基和霉菌培养基等四类。常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和察氏培养基等。养基。 (1)加富培养基。是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。 (2)选择性培养基。是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。 (3)鉴别培养基。是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。

主要培养基配方

培养基培养基是植物组织培养的重要基质。在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。一主要培养基配方: 1．CC培养基(mg/L) 2．NB培养基 3．N6培养基是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。

4．MS培养基是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 5．MSM培养基 6.改良怀特培养基是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，

提高了MsSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。二培养基的配置在植物组织培养工作中，配制培养基是日常必备的工作。为简便起见，通常先配制一系列母液，即贮备液。所谓母液是欲配制液的浓缩液，这样不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。一般母液配成比所需浓度高10-100倍。母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。配制时注意一些离子之间易发生沉淀，如Ca2+和S042+，Ca2+、Mg2+和PO43-一起溶解后，会产生沉淀，一定要充分溶解再放入母液中。配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。药品应选取等级较高的化学纯或分析纯。药品的称量及定容都要准确。各种药品先以少量水让其充分溶解，然后依次混合。一般配成大量元素、微量元素、铁盐、维生素等母液，其中维生素、氨基酸类可以分别配制，也可以混在一起。母液配好后放人冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。母液的配制方法： ?单配法：将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓度的母液。一般用a:b表示，即每b 毫升溶液中含有a毫克溶质。 ?混配法：将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍数称量，分别溶解后每一类混合在一起定容到一定体积配成混合母液，浓度可用a mg/L表示，即配制一升培养基吸取该母液a ml. ?生长素配制时可先用少量95%酒精助溶。2，4—D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶，加入温水定容。生长素常配成1mg／ml的溶液贮于冰箱中备用。 ?细胞分裂素类一般先用少量1N盐配溶解后，再加入温水冷却后定容， ?铁盐配法（MS为例）：在装有400ml 蒸馏水的烧杯中加入2粒苛性钠，溶解后加入3.73g EDTA-Na2，加热使其全部溶解，然后边搅拌边慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解，冷却后定容至500ml，置于冰箱中备用。

热原和细菌内毒素的区别

热原和细菌内毒素一、热原(progon) 医院临床在使用药品注射剂时，常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡，这种症状称为热原反应。为提高药品质量和用药安全，人们对热原进行了广泛的研究，直到1923年Seibert提出了用家兔检测热原的方法。在1942年美国药典首先将家兔热原检查项收入药典成为法定方法，中国药典1953年版开始收载该方法，随后的世界各国药典都以动物热原检查法作为药品质量监测的方法之一。家兔热原检查法的优点，可在规定时间里观察到家兔的体温变化，相应反应了热原质引起哺乳类动物复杂的体温反应过程。所以，在半个多世纪以来热原检查法，为保障药品质量和用药安全发挥了重要作用。但随着制药工业的发展和临床用药的要求，该方法的局限性越来越明显。这种热原检查法，只局限于某种药物进入体内（血循环）是否能引起体温变化或热原反应作为判断药品是否污染热原的方法，已不能满足医药工业发展的需要。其缺点： ①标准化程度低，无法判断检查样品中存在的热原质到底是什么或是哪一种物质。 ②由于试验动物家兔是处在被细菌污染的环境中，通过吸入或皮肤感染细菌内毒素而被免疫，导致动物的个体差异较大。 ③试验动物受到药品的药理活性干扰，而影响体温变化（如放射性药品、抗生素、生物制品等），实验结果难以判断。 ④设备及实验费用昂贵（如建设动物房、水电、动物饲料等耗费），做一种药品需要几百元/次，而鲎试剂仅几十元/次。综上情况分析，鲎试验法可避免以上动物热原检查法的不足，该技术的成功和应用真可谓是药品质量监控一场大革命。什么是热原？目前国内外仍未有统一的认识，但从国内外文献报道中，一个共同的意见，都普遍认为：它是指细菌内毒素的脂多糖。欧洲药典委员会副主席J.Van Noordwijk提出：“严格地讲，不是每一种热原都具有脂多糖的结构，但所有已知的细菌内毒素脂多糖都有热原活性”。在药品生产质量管理规范（GMP）条件下，药品生产的质量控制一般可以接受的观点是：不存在细菌内毒素意味着不存在热原。二、细菌内毒素（Endotoxin）细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（Lipoply Saccharide）和微量蛋白（Protein）的复合物，它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。其化学成分广泛分布于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、布氏杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、沙门氏菌等）及其它微生物（如衣原体、立克次氏体、螺旋体等）的细胞壁层的脂多糖，其化学成份主要是由O-特异性链、核心多糖、类脂A 三部分组成。(附图1) <一>、O—特异性链：位于脂多糖分子最外层的多糖链，是由3—5个单糖（一般不多于25个）连成为一个多糖链。其单糖包括戊糖、氨基戊糖、已糖、氨基已糖、脱氧已糖等，单糖的种类、位置和排列顺序和空间构型，因菌种不同而异。因此，它决定菌体热原的特异性。 <二>核心多糖：核心多糖的变异性较小，位于类脂A和0—特异性链（内层）之间，在结构上分为内核心和外核心。外核心含有数种己糖，包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等组成。内核心含有庚糖及特殊的酮糖（3-脱氧-D-甘露糖-辛酮糖KDO）。这部分结构对不同菌株的LPS基本相似，而且KDO是以不耐酸的酮糖链与类脂A的氨基葡萄糖连接，是构成内毒素脂多糖的核心部分。

培养基的类型及应用

培养基的类型及应用培养基种类繁多,根据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。 1．按成份不同划分 (1)天然培养基(complexmedium) 这类培养基主要以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成,牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。基因克隆技术中常用的LB(Luria-Bertani)培养基也是一种复合培养基,其组成见表4-10。常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4-11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡罗卜汁、椰子汁等,嗜粪微生物(coprophilousmicroorganisms)可以利用粪水作为营养物质。复合培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。 (2)合成培养基(syntheticmedium) 合成培养基是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemicallydefinedmedium),高氏1号培养基和查氏培养基就属于此种类型。配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。 2．根据物理状态划分根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少,可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。 (1)固体培养基(solidmedium) 在液体培养基中加入一定量凝固剂即为固体培养基。理想的凝固剂应具备以下条件:1.不被所培养的微生物分解利用;2.在微生物生长的温度范围内保持固体状态。在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;3.凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;4.凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;5.凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;6.透明度好,粘着力强;7.配制方便且价格低廉。常用的凝固剂有琼脂(agar)、明胶(gelatin)和硅胶(silicagel)。表4-12列出琼脂和明胶的一些主要特征。对绝大多数微生物而言,琼脂是最理想的凝固剂,琼脂是由藻类(海产石花菜)中提取的一种高度分支的复杂多糖；明胶是由胶原蛋白制备得到的产物,是最早用来作为凝固剂的物质,但由于其凝固点太低,而且某些细菌和许多真菌产生的非特异性胞外蛋白酶以及梭菌产生的特异性胶原酶都能液化明胶,目前已较少作为凝固剂；硅胶是由无机的硅酸钠(Na2SiO3)及硅酸钾(K2SiO3)被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶体,它不含有机物,适合配制分离与培养自养型微生物的培养基。除在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外,一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基。例如,由马铃薯块、胡罗卜条、小米、麸皮及米糠等制成固体状态的培养基就属于此类。如生产酒的酒曲，生产食用菌的棉子壳培养基。在实验室中,固体培养基一般是加入平皿或试管中，制成培养微生物的平板或斜面。固体培养基为微生物提供一个营养表面,单个微生物细胞在这个营养表面进行生长繁殖,可以形成单个菌落。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。

培养基大全

培养基大全 2009-12-03 13:33:15 阅读30 评论0 字号：大中小 1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，。制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。 2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，。制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。 3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O ，MnSO4 4H2O ，（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至~，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。 4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。 5．培养基A 成分：蛋白胨，酵母提取物，葡萄糖，，琼脂，水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至~，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。 6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐，盐溶液4mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至~，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。盐溶液制备：无水氯化钙，K2HPO4 ，KH2PO4 ，MgSO4 。7H2O ，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。

培养基成分知识

146种培养基成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 [Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H 2O may be added . It is favorable to promote spore formation .

培养基的主要成分及其作用

培养基的主要成分及其作用培养基是用人工方法配制而成，适合微生物生长繁殖需要的混合营养基质。适宜的培养基不仅用于细菌的分离、纯化、传代及菌种保存等，还可用于研究细菌的生理、生化特性。因此，掌握培养基的制备技术及其原理，是进行细菌学检验的重要环节和必不可少的手段。细菌的生长繁殖除需要一定的营养物质，如含氮化合物、糖类、盐类、类脂质及水外，有的还需加入特殊营养物质，如维生素的辅助生长因子或某些其他特殊因子；有的则需加入指示剂或抑制剂，以利于细菌的分离和鉴定。 1．营养物质营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用。细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子。 (1)蛋白胨：是由动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而产生的中间产物，是培养基中最常用的成分之一，主要供给细菌氮源，合成菌体蛋白质、酶类等，另外还具有缓冲作用。由于蛋白质的来源和消化程度不同，因而制得的蛋白胨质量相差很大。按照生产原料的性质，蛋白胨可分为植物胨和动物胨两类。蛋白胨经喷雾干燥成粉末，吸水性较强，保存时应干燥密封，防止潮解结块。 (2)肉浸液：系用新鲜牛肉(去掉脂肪、肌膜及肌腱等)浸泡煮沸制成的肉汤。肉浸液中包括含氮和非含氮两类浸出物，还有一些生长因子。作为细菌生长所需要的氨源和碳源，由丁加热后大部分蛋白质凝固，仅留少部分氨基酸和其他含氮物质，不能满足细菌生长需要，故在制作培养基时，一般需加1％～2％蛋白胨和％的NaCl。 (3)牛肉膏：又称牛肉浸膏，是肉浸液加热浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。其中不耐热的物质如糖类已被破坏，故其营养价值不及肉浸液，但因无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。 (4)糖(醇)类：含有细菌所需的碳源。制备培养基所应用的糖(醇)类很多，常用的糖类有单糖(如葡萄糖、阿拉伯糖等)、双糖(如乳糖、蔗糖等)、多糖(如菊糖、淀粉等)：醇类有甘露醇、卫矛醇及侧金盏花醇等。在培养基中加入糖(醇)类物质，除提供细菌作为碳源和能源外，主要利用细菌对糖(醇)类利用能力的差异鉴别细菌。 (5)血液：血液除能增加培养基中蛋白质、多种氨基酸、糖类及无机盐等营养成分外，尚能提供辅酶、血红素等特殊生长因子。此外，还可以观察细菌的溶血现象。

药剂学中药药剂学试卷(上半学期)试卷

《中药药剂学试卷》（上半学期）试卷一、选择题（40分） A型题(20分) 1现行中华人民共和国药典颁布使用的版本为( ) A.1994年版 B．1990年版 C．2000年版 D．1995年版 2药筛筛孔目数习惯上是指( ) A．每厘米长度上筛孔数目 B．每平方厘米面积上筛孔数目 C．每英寸长度上筛孔数目 D．每平方英寸面积上筛孔数目 3. 一般注射液的pH值应为( ) A．3—8 B．3—10 C．4—9 D．5一10 4.关于表面活性剂的叙述中哪一条是正确的( ) A. 能使溶液表面张力降低的物质 B. 能使溶液表面张力增加的物质 C．能使溶液表面张力急剧下降的物质 D．能使溶液表面张力急剧上升的物质 5.聚氧乙烯脱水出梨醇脂肪酸酯的商品名称是( ) A.吐温类 B.司盘类 C.洁尔灭 D.新洁尔灭 6.下列药物中有起昙现象的是( ) A .肥皂类 B.硫酸化物 C.磺酸化物 D.吐温类 7.热原的主要成分是 ( ) A蛋白质 B胆固醇 C脂多糖 D磷脂 8. 表面活性剂作为O/W型乳化剂其HLB值应为：( ) A 1.5—3 B 3.5—6 C 7—9 D 10—18 9. 由于加入第三种物质，而形成复盐、分子缔合物、络合物增加难溶性药物的溶解度，这种现象称（） A、助溶 B、增溶 C、润湿 D、乳化 10. 注射用水应于制备后（）小时内使用 A．4 B．8 C．12 D．24 11. 以下制备注射用水的流程最合理的是（） A．自来水→滤过电渗析→蒸馏→离子交换→注射用水 B．自来水→滤过→离子交换→电渗析→蒸馏→注射用水 C．自来水→滤过→电渗析→离子交换→蒸馏→注射用水 D．自来水→离子交换→滤过→电渗析→蒸馏→注射用水 12.浸提药材时,选择浸出溶媒的最主要依据是( ) A溶媒性质稳定 B溶媒的溶解范围广 C溶媒价廉易得 D依据药材中化学成分性质 13.制备静脉注射用乳剂,最佳的乳化剂是( ) A阿拉伯胶B Tween-80C 月桂醇硫酸钠D 卵磷脂 14.影响药材中有效成分浸出的最主要因素是( ) A搅拌 B时间 C浓度梯度