精子形态学分析
精子形态学分析
正常形态精子百分率是评价精子受精能力的重要指标之一。目前，用于精子形态学分析的染色方法有：改良巴氏染色法、苏木精-伊红（HE）染色法、瑞氏染色法、瑞-吉氏染色法、Diff-Quik染色法和Shorr染色法。
1 涂片的制备
一般用新鲜的液化精液或生理盐水洗涤过的精子悬液进行涂片，通常每份标本涂双份片子，以备染色或操作出问题。载玻片应洁净，可用70%酒精洗涤并干燥后使用；涂片的厚薄应根据精子密度而定，精子密度高者涂片应薄些，而精子密度低者涂片应尽可能厚些。涂片的方法有多种，WHO推荐的方法有拉薄技术和滴管法，拉薄技术即用另一张载玻片的边缘拖拉载玻片上的一滴精液；滴管法即水平持滴管使一滴精液沿载玻片的表面展开。由于精液有一定粘稠度，这两种方法都很难涂成均匀的涂片。可建议用以下方法涂片：用滴管将一滴精液置于载玻片上，然后从液滴中央向周围循环吸净多余的精液，注意滴管的头要平整，滴管与载玻片垂直，缓慢吸去多余的液体。低密度、粘稠的、或充满碎屑的标本，建议先离心去除精浆，沉淀的精子团重新悬浮在适当体积中，以获得尽可能高的密度，但不应超过80×106/ml。正常精子密度且液化良好的精液标本亦可以洗涤后用精子悬液进行涂片，但离心操作对精子形态分析有无影响，尚需要进一步验证。
精子涂片可进行空气干燥并固定。固定程序取决于染色方法。
2 改良巴氏染色法
这是WHO手册推荐的方法。它可以使精子和其他细胞很好地染色，可使精子头部的顶体和顶体后区、胞浆小滴、中段和尾部着色。染液中的俾士麦棕为盐基性染料，伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，能与细胞中具有相反电荷的蛋白质结合，而染成各种不同的颜色，从而能清楚地区分各种细胞成分。以往用巴氏染色法进行染色时，操作步骤繁琐，目前已有改良的单一的巴氏染色液出售，操作非常简单，只需在自然干燥的精子涂片上滴加1~2滴巴氏染液，染15分钟即可。流水冲洗后自然晾干，显微镜油镜下观察精子形态。
3 HE染色
带正电荷的碱性染料苏木素能与细胞核中带负电荷的核酸结合而使核染成紫蓝色，伊红为酸性染料，能与细胞质中具有相反电荷的蛋白质结合，使胞质呈红色。HE染色为医院病理科的常用染色方法，操作比较繁琐，对于可以借助病理科染色的医疗单位可以选用此法对精子进行染色。
4 瑞氏和瑞-吉氏染色法
瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，细胞染色后可用于观察内部结构；吉氏染料是由天青、伊红组成的染料，天青对细胞核着色较好，结构显示更清晰。因此，瑞-吉氏染色法比瑞氏染色法效果稍好些，两种染液均可自行配制或购买，操作都比较简单。
①瑞氏染液：取瑞氏染料0.1 g放入清洁干燥的研钵中，边加少量甲醇边磨至染料完全溶解，加甲醇到60 ml，倒入棕色瓶中，室温下放置1周以后即可用。②Giemsa染液：取Giemsa 染料0.5 g，置于33 ml甘油中，60℃水浴2小时，使其溶解，再加入60℃预热的甲醇33 ml，混匀后置棕色瓶中，室温下放置数周后方能使用（最好放置半年以上）。③30.1 mol/L pH6.9磷酸盐缓冲液：称取NaH2PO4?2H2O 1.4 g、Na2HPO4?12H2O 3.94 g，加蒸馏水至100 ml。染色时，将单独瑞氏染液或瑞氏∶吉氏（10∶1）混合染液滴加于精子涂片上，静置10秒后，滴加等量pH6.9磷酸盐缓冲液，染色10分钟后自来水冲洗，自然干燥，置于油镜下观察。
5 Shorr染色法
精子涂片空气干燥后，用苏木精染色1~2分钟；流水浸洗后置42℃温水中蓝化5分钟（或浸入乙醇铵中蓝化）；Shorr染剂（BDH Shorr粉4 g溶于220 ml 50%温乙醇中，冷却，加入
2.0 ml冰醋酸，过滤即可）染3~5分钟；流水冲洗，晾干后镜检。
6 Diff-Quik染色法
精子涂片先置于固定液（1.8 mg二芳基甲烷加至1 L甲醇中而成）中固定5分钟；将玻片直立于吸水纸上以去除多余的液体；将玻片在溶液1（1 g氧甲蒽加至1 L叠氮钠防腐液中）中染色10秒钟，然后在溶液2（0.625 g天蓝A和0.625 g亚甲基蓝加至1 L缓冲液中）中染色5秒钟，各步骤之间均除去多余的液体；在流水中浸洗10~15次以除去多余的染料；将玻片垂直竖立以去除水分，使之完全干燥；显微镜下观察。
7 六种染色方法的评价
目前使用的精子形态学分析的6种方法，对精子头大小的影响不同，瑞-吉氏和瑞氏染色法的精子头的长轴和短轴最高，其次为Diff-Quik染色法，它们均显著高于其他三种染色方法，可能与精子头发生肿胀有关；巴氏染色法的精子头的长轴和短轴最低，而HE和Shorr染色法的精子头长轴和短轴介于巴氏染色法和Diff-Quik染色法之间。不同染色方法对精子头大小产生显著影响的原因尚不清楚，可能与不同化学物质的特性和不同染色液的渗透压等有关。6种精子染色方法的染色效果亦不同，Diff-Quik和Shorr染色法可以很清楚地区分顶体和核，其次为HE染色法，而巴氏、瑞氏和瑞-吉氏染色的精子顶体和核分界不很明显。基于不同染色方法对精子头大小的影响、染色效果以及操作的简易与否，Diff-Quik和Shorr 染色法值得推荐。
目前，评估精子形态学的标准有：一般标准，正常生育男性精液中正常形态精子比例应大于30%；严格标准，正常生育男性精液中正常形态精子比例应大于10%。
在评估精子正常形态时，应采用严格标准。只有头、颈、中段和尾部都正常的精子才正常。精子头的形状必须是椭圆形的。考虑到固定和染色所致的轻度收缩，精子头部长度为4.0~5.0 μm，宽为2.5~3.5 μm，长宽之比应在1.50~1.75之间。这些范围是巴氏染色精子头部测量值的95%可信区间范围。顶体的界限应是清晰的，占头部的40%～70%。中段应细，宽度<1 μm，大约为头部长度的1.5倍，并且在轴线上紧贴头部。胞浆小滴应小于正常头部大小的一半。尾部应是直的、均一的，比中段细，非卷曲的，其长约为45 μm。这个分类标准，要求将所有形态学处于临界状态的精子均列为异常。利用这些分类标准，可得到对体外受精有价值的精子形态学方面的数据。
精子形态学观察时，应注意下列精子缺陷的类型：
①头部缺陷：大头、小头、锥形头、梨形头、圆头、无定形头、有空泡的头（未染色的空泡区域占头部的20%以上）、顶体过小的头（小于头部的40%）、双头以及上述缺陷的任何组合。
②颈部和中段的缺陷：颈部“弯曲”（颈和尾形成的角度大于头部长轴的90%）、中段非对称地接在头部、粗的或不规则的中段、异常细的中段（即无线粒体鞘）和上述缺陷的任何组合。
③尾部缺陷：短尾、多尾、发卡形尾、尾部断裂、尾部弯曲（>90度）、尾部宽度不规则、尾部弯曲或上述缺陷的任何组合。
④胞浆小滴大于正常精子头部的一半。此小滴通常位于中段。
只有带有尾部的可辨认精子，才考虑进行不同形态精子计数；未成熟精子细胞包括圆形精子
细胞阶段，不能作为精子进行计数。精子头脱落或无精子头的不作为精子计数，无尾精子亦不作为头部缺陷计数，但应分开记录。卷尾的精子可能与精子活力低相关，或提示精子已暴露于低渗透压。偶尔，许多精子可能有特异的结构缺陷，例如，顶体发育失败，导致“小圆头缺陷”或“球形精子症”。
精子形态分析要求在100×的油镜亮视野下进行计数，应系统地选择涂片上多个区域进行形态学的评估。不应评估重叠的精子和头部位于边缘的精子，后者可通过上下调整焦距加以识别。用目镜上的微标尺测量精子的大小是必要的。应至少连续计数200个精子（一次计数200个优于两次计数100个）。当病人的诊断和治疗主要依赖于正常形态精子的百分比时，应计数两次200个精子，以增加精确性。
（九）精子凝集
精子凝集是指活动精子以不同方式，如头对头、头对尾、尾对尾或混合型，彼此粘在一起。不活动精子之间、活动精子与粘液丝之间、非精子细胞成分或细胞碎片等粘在一起，为非特
异性聚集而非凝集，这种情况应如实记录。
凝集的存在可能提示，但不足以说明不育是免疫因素引起的。凝集在测定精子活动力时评估。精子凝集的类型应当记录，如头对头、尾对尾或混合型。可采用一种半定量的分级方法：从没有凝集到所有可动的精子凝集到一起（＋＋＋）。
三计算机辅助的精液分析
手工精液分析往往带有很大的主观性，不同的技术人员分析的结果有时相差甚远，对精子运动能力的判断缺少严格的量化指标。计算机辅助的精液分析（computer-aided semen analysis,CASA）是80年代发展起来的新技术，现已逐步应用于男科实验室常规分析。CASA 具有客观、高效、高精度的特点，尤其能分析与精子运动功能相关的多种参数。CASA系统识别精子是根据人为设定的大小和灰度来判断的，准确性受精液中细胞成分和非细胞颗粒的影响。计算精子活动率时，精子只有产生了一定的位移，CASA系统才认为是活动精子，而对原地摆动的精子则判为不活动精子，测出的值低于实际结果。CASA系统参数的设置、阈值的设定、视屏取像率等都可以影响最终结果。CASA对精子密度有一定的限制，在（20~50）×106/ml范围内检测结果较理想。精子密度过高时，标本需要适当稀释，一般采用同份精浆标本稀释。精子密度过低时应多选几个视野采样。随着软件系统的不断改进，目前新的CASA 系统可检测较大精子密度范围的精液标本。用于CASA系统的精子计数板有Macro计数板、Makler板、MicroCell计数池、Cell-VU等。由于CASA系统的设置缺乏统一的国际标准，不同厂商和型号的CASA分析结果可比性差，尤其是分析精子密度和活动率。因此，建立标准化的CASA操作系统很有必要。
CASA系统用于分析精子运动能力有一套术语：①轨迹速度（VCL）：也称曲线速度，即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度（V AP）：精子头沿其空间平均轨迹的运动速度，这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的，可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度（VSL）：也称前向运动速度，即精子头部直线移动距离的速度。④直线性（LIN）：也称线性度，为精子运动曲线的直线分离度，即VSL/VCL。
⑤精子侧摆幅度（ALH）：即精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度，可以是平均值，也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致，因此相互之间不可直接比较。⑥前向性（STR）：也称直线性，计算公式为VSL/V AP，即精子运动平均路径的直线分
离度。⑦摆动性（WOB）：即精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度，计算公式为V AP/VCL。⑧鞭打频率（BCF）：也称摆动频率，即精子头部跨越其平均路径的频率。
⑨平均移动角度（MAD）：即精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度：每毫升精液中V AP>0 µm/s的精子数。这些参数可综合反映精子的运动状况，在评价精子获能和顶体反应中也有一定意义。
CASA系统一般包括下列几个部分（图4）：①相差显微镜、恒温装置和专用计数板（Makler 板、Macro板或Microcell计数池等）组成的摄像系统。②高速、高分辨率的摄像机和电视监视器组成的摄像系统。③计算机分析处理系统及打印机打印输出。
不同厂家不同型号的CASA系统应根据其说明书具体操作。
精子形态学染色液(巴氏法)
精子形态学染色液(巴氏法) 简介： 细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。 Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。 组成： 自备材料： 1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液) 2、 系列乙醇 3、 0.5%盐酸乙醇分化液 操作步骤(仅供参考)： 1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。 2、 80%的乙醇浸泡1min 。 3、 70%的乙醇浸泡1min 。 4、 50%的乙醇浸泡1min 。 编号 名称 DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液 20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml 100ml RT 避光 使用说明书 1份
精子形态学分析用于不育诊断的意义探析
精子形态学分析用于不育诊断的意义探析 摘要：目的：探究精子形态学分析用于不育诊断的意义。方法：抽选2016年3 月至2017年1月期间本院收治的不育男性患者的精液标本55例作为本次研究的 观察组，另抽选同期在本院开展健康体检的男性精液标本30例为对照组，对两 组精液标本的精子形态学进行比较分析。结果：观察组患者的精子形态异常概率 为89.09%，相比于对照组，明显较高，P＜0.05。结论：精子形态学分析是临床 对男子不育进行检测较为重要的一项指标，在诊断男性生育能力低下或不育方面 具有较为重要的指导作用，值得今后临床广泛应用。 关键词：精子形态学；不育；诊断；精液标本 伴随男性生殖学科进一步的发展，临床逐渐意识到仅对精液标本开展常规的 分析无法对临床诊治的需求给予满足，还应当通过其他的精子功能检查相关试验 对男性生育能力进行诊断[1]。近年来逐渐受临床重视的一种对精子功能进行评价 的一项试验即为精子形态学分析，其为对男性的生育能力进行评价的一项重要指 标[2]。本次研究主要分析精子形态学分析在不育诊断当中的意义与价值，旨在为 今后临床不育的诊断提供指导，特抽选部分男性精液标本进行比较研究，其具体 研究内容如下文所示。 1 资料和方法 1.1 资料 抽选在本院接受治疗的不育男性患者的精液标本55例作为本次研究的观察组，时间均在2016年3月至2017年1月期间，另选取同期本院健康体检男性的 精液标本30例为对照组，两组观察对象的具体资料见下： 对照组：年龄为（24-35）岁之间，平均年龄为（26.69±2.12）岁。 观察组：年龄为（23-34）岁，平均年龄为（26.63±2.09）岁。 以上两组观察对象的资料对比，未有明显差异存在，统计学不具有意义。 1.2 方法 精液收集标本法方法：叮嘱首检人员禁欲三天至一周，随后嘱其手淫取精液，将精液装入至一次性干燥的消毒杯内，随后立即将标本存放至温度为37摄氏度 的保温箱当中，静置液化以后，对其开展检测。 染色方法：精液静置液化以后，在洁净的玻片中滴入精液并将其推制成薄片。根据试剂盒的说明书开展相关检验操作；待标本自然干燥以后，使用固定液对其 进行长达5-15分钟的固定。将标本依次浸入至乙醇、苏木精染液、酸性乙醇、乙醇当中，经过上述操作以后，最后在油镜之下对其进行观察。对200个精子进行 观察，随后根据以下标本分类精子的形态，同时对检查结果分别进行记录，精子 大小的测量使用目镜测微尺进行。 以上所有检验均应当由2名或以上专业医务人员进行，以保证检验的准确率。 1.3 观察指标 观察并统计上述两组观察对象的精子形态学分析情况。 标本观察标准：（1）正常的精子通常头部呈现椭圆形，长度约4.0-5.0um， 宽度为2.5-3.5um，长宽比为1.5-1.75之间；顶体有清晰的界限，约头部40%左右；中段较细，中段的宽度在1.0um以上，长度较头部大1.5倍，在轴线上与头部紧贴。（2）精子头部缺陷：主要包括大小头、锥形头、梨形头、无定型头，双头、无头或多头等；精子颈部或精子中段存在缺陷，主要包括颈部存在弯曲，精子中 段有非对称性与头部相接、精子中段增粗或变细；精子尾部存在缺陷：多尾、短
须正确看待精子畸形率的态度
须正确看待精子畸形率的态度 精子畸形率检查的报告单显示精子畸形率80%左右，会不会以后生的孩子可能是畸形的？其实这个跟孩子的畸形是无关的，是与生育及体外受精相关的。 精子畸形率是如何来的？根据WHO第四版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册，对精液常规推片，采用改良巴氏染色法进行染色，在光镜下计数200条精子，分析精子形态。WHO将经染色后畸形精子分为：头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷和胞浆小滴异常4类。检查报告通常分为：头部缺陷、中段缺陷、尾部缺陷。其计算例如以下过程： 计数的精子数：200 正常精子数：78 正常精子百分比：(78/200×100%)39% 缺陷精子数：(200-78) 122(61%) 头部缺陷精子数：110(55%) 中段缺陷精子数：18 (9%) 尾部缺陷精子数：16 (8%) 缺陷总数：(122+18+16) 144 畸形精子指数(TZI)(缺陷总数/缺陷精子数)=144/122 1.18 精子畸形指数(SDI)(缺陷总数/所数精子总数)=144/200 0.72 畸形精子指数(teratozoospermia index，TZI)的数值介于1.00(每个异常精子只有一种缺陷)和3.00(每个异常精子都有头、中段及尾部缺陷)，有报道提示，TZI>1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且精子畸形指数(sperm deformity index，SDI )1.6是体外受精失败的阈值。TZI和SDI预示精子在体内和体外的功能情况。 因为WHO第4版手册中未给出正常参考值，仅说明当正常形态精子率<15%时体外受精率显著降低，所以报告的正常参考值为：正常精子形态>15%，TZI0~1.5，SDI 0~1.5。其临床意义：正常形态精子率>15%；精子畸形率越高，生育机会越低，而流产、死胎的可能性就越大，当精子畸形率>85%或TZI>1.6时，可引起生育障碍，导致不育症。如果正常形态<15%或SDI>1.6时体外受精降低。 通过上述分析，应该知道精子畸形率跟婴儿畸形是不相关，婴儿的畸形应该是与遗传相关。对于一份精子畸形率报告，我们所要看的是：精子正常形态、TZI、SDI，通过这几项指标及综合精液分析报告来说明精子在体内和体外的功能情况，对男性不育症的诊断及治疗具有辅助意义。
男科学各项检查的正常值
男科学各项检查的正常值 一、精液常规分析正常值 （一）理化性状 颜色：为乳白色或灰色，长期未排精者可呈浅黄色； 量：为2~6ml; PH：为7.2~8.0； 液化：少于60分钟（一般5~20分钟）； 气味：有栗子花味，也有描述罂粟碱味； 比重：1.033； 渗透压：（356.17±32.13）mosm/kg·H2O。 （二）精液常规检查 精子密度≥20×10⒍/ml； 精子总数≥40×10⒍/每份精液： 活动精子数（采集后60分钟内），前项运动（a级和b级）的精子比率≥50%；或存活率≥30%正常形态（巴氏染色法）； 白细胞数＜1×10⒍/ml； 培养：菌落数＜1000/ ml； 黏度：（40.21±19.11）秒（管径0.672mm,长93mm毛细管黏度计）； SVT：（33.49±12.56）um/秒。 二、精液生化成分正常值 1、中型糖苷酶：每份精液≥20MU； 2、酸性磷酸酶：总量每份精液≥200U； 3、锌（总量）：每份精液≥2.4umol; 4、柠檬酸（总量）：每份精液≥52umol； 5、果糖（总量）：每份精液≥13umol； 6、肉毒碱（DTNB法）：0.319mmol/L； 7、精子顶体素酶（BAEE法）：5.2～8.9Miu/10⒍精子（顶体酶活性是代表每10 ⒍精子每毫克蛋白每分钟水解BAEE的微克分子量）； 8、透明质酸酶：45～89mIU/mg蛋白； 9、前列腺素（放免法）：411.5mg/ml; 10、镁Eliasson1972:13～430ug/ml； 11、精氨酸Tanimura1967：925ug/ml; 12、甘油磷酸胆碱Frenkel1974:0.85mmol/l. 三、精子功能实验正常值 1、精子低渗肿胀试验（HOS） 精子尾部低渗肿胀百分率，60%为正常； 精子尾部低渗肿胀百分率，49%为不正常； 精子尾部低渗肿胀百分率，59%～50%为可疑。
精子活力测定
实验三精液品质的感观检查精子活率、 密度检查 一、实验目的 掌握检查精子密度、活率的方法；熟悉感观检查精液品质的方法。 二、实验材料 1. 精液选用牛、羊、猪、马、犬、兔任意一种动物的新鲜精液。 2. 药械用品显微镜、显微镜保温箱（或显微镜恒温台）、载玻片、盖玻片、搪瓷盘、温度计、滴管、擦镜纸、纱布、蒸馏水、3%和0.9%氯化钠溶液、2%煤酚皂溶液、1/3000新洁尔灭溶液、75%酒精。 3. 其他精子密度挂图及有关图表。 三、实验内容 （一）精液的感观检查 观察测定下列各项结果并记入登记表内。 1. 测定射精量将采得的精液倒入有刻度的试管或集精杯中，测量其容量。各家畜的射精量平均为：马70（30—100）ml，驴50（10—80）ml，牛4（2—10）ml，羊1.0（0.7— 2.0）ml，猪250（150—500）ml。 2. 色泽、气味观察观察精液的色泽并嗅闻气味。 3. 云雾状的观察观察牛、羊精液翻腾滚动的云雾状态，并按以下符号记入表内，云雾状显著者以“+++”表示，有云雾状者以“++”表示，云雾状不明显或无云雾状者以“+”表示。 （二）精子密度检查及活率评分 1. 精子的密度取1小滴精液在清洁的载玻片上，加上盖玻片，使精液分散成均匀一薄层，不得存留气泡，也不能使精液外流或溢于盖玻片上，置于显微镜下放大400—600倍观察，按下列等级评定其密度。 密——在整个视野中精子密度很大，彼此之间空隙很小，看不清楚各个精子运动的活动情况，这一级属于“密”，每毫升精液含精子数约在10亿个以上，登记时记以“密”字。 中——精子之间的空隙明显，精子彼此之间的距离约有一个精子的长度，有些精子的活动情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”，每毫升所含精子数约在2—10亿个之
精子数量和形态检查及医学意义
精子数量和形态检查及医学意义 一、精子数量 通过精子计数可求得精子浓度，乘以精液量还可求得一次射精排出的精子总数。正常成年男性，精子数量个体间的差异较大，精子浓度为（50～100）×109/L。＜20×109/L为少精症；正常人一次射精排出精子总数为≥40×106。精子数量减低可见于： ①精索静脉曲张； ②有害金属和放射性损害； ③先天性和后天性睾丸疾病（如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等）； ④输精管、精囊缺陷； ⑤老年人在50岁以上者精子生成减少。 二、精子活动力和存活率 1．活动力：精子活动力（sperm motility）是指精子向前运动的能力。世界卫生组织（WHO）将其分为四级： a级：精呈前向运动； b级：慢或呆滞的前向运动； c级：非向前运动； d级：不动。 精子活动力受温度和保存时间的影响。精液射出后于37摄氏度条件下放置8小时，全部精子将失动活动力。因此必须使用液化后的新鲜标本检查。 活动力正常值：射精后60分钟内，精子50%或更多具有前向运动，25%或更多具有快速前向运动。精子活动力减弱或死精子过多是导致不育的主要原因。 2．精子存活率以“活”精子比率表示，若不活动的精子较多（＞50%），应进行体外活体染色检查，以鉴别其死活。活精子的细胞膜能阻止伊红Y、台盼蓝等染色剂进入细胞内，故不被染色；死精子细胞膜完整性受损。失去屏障功能，可被染色成橘红或蓝色。有生育力男性伊红染色法的活精子率≥75%。 3．检测精子活动力的临床意义 精子活动力与受精的关系十分密切。精子活动力低下，难以抵达输卵管或无力与卵子结合而不能完成受精过程。a级活动力的精子量不足也会影响受精率。若连续检查，精子存活
精子形态学异常与复发性流产的关系探讨
·临床研究· 精子形态学异常与复发性流产的关系探讨 徐广立，张富青，孙宏跃 （郑州市妇幼保健院，河南 郑州450000） 摘要：目的探讨精子形态学异常与复发性早期流产的关系。方法回顾性分析发生复发性早期流产患 者丈夫精液，同时选取正常妊娠孕妇丈夫的精子作为对照组，精子检测方法采用第四版WHO 精液分析技术规范。结果 精液的常规动态分析与精子的总畸形率与流产无显著相关性，但精子畸形的空泡畸形与复发性流产有相关性。结论精子形态学检测对孕前检查有一定指导意义。关键词：复发性流产；精液质量分析；形态学分析中图分类号：R714．21 文献标识码： B 近几年，复发性流产的发病率逐年上升，关于病因的研究也较深入。目前研究较明确的病因有解剖因素（女性生殖系统畸形）、内分泌因素、生殖系统感染、染色体异常、抗磷脂 抗体异常、免疫紊乱（封闭抗体缺乏）等几个方面［1］ 。但是作为胚胎的另一半－男性精子质量，一直有较大的争议。有研究认为男性精液质量与流产有相关，也有文献分析未发现精液质量与不良妊娠有相关性［2，3］ 。作为人类胚胎的另一半，其质量好坏一定与胚胎的发育有关系，只是可能用常规的动态分析或畸形率检测无法提供足够的信息来了解精子质量与流产的关系。因此，采用何种检测手段在受孕前提供精子的确切状况来指导受孕显得非常必要，尤其是在辅助生殖时，如何通过检测精子的状态来选择受精时机或在ICSI 时指导选择精子，是提高受精率关键的步骤。我们通过对复发性流产的妇女丈夫与正常妊娠的妇女丈夫精子的分析，来探讨精子形态学异常与复发性流产的关系。1资料与方法1．1 一般资料 回顾性选择2010年2月至2011年4月在 郑州市妇幼保健院就诊的复发性早期流产患者，排除受孕前有感染、内分泌、解剖、染色体、免疫抗体等因素的复发性流产患者的丈夫的精液检查记录96份（流产组），条件要求孕 前半年内有两次动态及形态分析且结果一直（活率波动在 10%内，畸形率波动在3%以内），同时选取在门诊围产保健 的受孕3个月以上的，未发现胎儿异常的孕妇丈夫的孕前精 液检查指标共141，条件要求如流产组，两组孕妇年龄均在20 35岁之间，男性在20 40岁之间，年龄无统计学差异。1．2方法按照《WHO 人类精液及精子－宫颈粘液相互作用实验室检验手册》标准进行。 精液采取的方法：禁欲3 7天，用手淫的方法取精到专用的取精杯内，置于37?培养箱内液化，每隔5min 观察液化情况并记录液化时间、精液pH 值。动态分析用清华紫光自动精子分析仪进行，形态学检测采用苏木素－伊红染色，按标准分为头部畸形（锥形、梨形、圆形、无定形、空泡、小顶体）、颈部和中段畸形（颈部弯曲、非对称插入、粗、细）、尾部畸形（短、弯曲、卷曲、胞浆小滴）。每例分析200个精子。1．3统计学方法用SPSS13．0软件对数据进行分析，先进行正态分析，对正态分布计量资料采用表示，两组间差异用t 检验，α=0．05。2结果 2．1 精液常规参数比较流产组、对照组的精液量、密度、 液化时间、pH 值、精活率、活力差异无统计学意义（P ＞0． 05）。流产组a 级精子比例低于对照组但无统计学意义，流 产组的c 级精子比例高于对照组的c 级精子，差异有统计学意义（P =0．001）， 见表1。表1 两组常规动态分析比较（?s ） 组别 密度（?106）液化时间（min ）总活率（%）a 级（%）b 级（%）c 级*（%）活力（%）流产组44．46?5．3835?5．5777．33?11．2126．38?2．1531．49?6．5519．86?3．6955．26?6．33对照组 51．23?7．11 30?3．19 80．56?9．88 29．46?5．36 33．58?4．13 12．11?2．65 60．25?7．99 *：P =0．001。 2．2 精子畸形率参数比较两组总的畸形率差异无统计学意义（P =0．069），但对分类对比发现，头部空泡畸形流产组 比对照组高，两组差异有统计学意义（P =0．001），其它各畸形类别间无明显差异（P ＞0．05）。 表2 头部畸形率分类（x ?s ） 组别头部畸形（%） 锥形梨形圆形无定形空泡＊＊小顶体流产组 11．23?1．256．22?0．153．21?0．0044．38?8．9210．51?1．293．25?0．00对照组 13．21?2．10 7．82?0．26 4．18?0．00 41．26?6．99 4．21?0．15 4．11?0．01 ＊＊：P =0．001。 收稿日期：2012－01－15 3讨论 3．1 精子形态学检测的现状 目前的精子动态分析大多数 采用计算机辅助精子分析系统（CASA ）， 结果比较稳定可靠，室内、室间差异不大。但是形态学检测的应用情况一直不尽人意。有不少实验室尚未进行形态分析，或者应用计算机随机携带的软件而非染色分析法，其准确性较差。王一飞教授 · 44·第20卷第4期2012年4月 中国医学工程 China Medical Engineering Vol．20No．4Apr ，2012
精子形态与精子活力活率的关系
精子形态与精子活力活率的关系 【摘要】目的：探讨精子形态与精子活力、活率的关系。方法：应用精子质量自动检测系统（CASA）进行精子活力、活率分析，采用精子形态检测系统下人工修正方法分析精子形态。结果：活力异常组形态正常精子百分率低于活力正常组，两组比较差异有显著性（P＜0.05）；活率异常组形态正常精子百分比亦明显低于活率正常组（P＜0.05）。结论：精子形态与精子活力、活率有密切关系。 【关键词】精子；精子形态；精子活力；活率 精子形态（strict criteria）是评价男性生育力一个重要参数，随着男性学的发展而日益受到临床的重视。目前，许多资料显示精子形态是体外授精主要预测参数，形态正常精子比例高低可脂解影响受孕[1]。精子运动能力也是评价受精能力重要参数之一，快速运动精子所占比例与受精能力、受精率密切相关[2]。 本文探讨了精子形态与精子活力、活率及密度的关系，旨在从精子形态方面为临床评价男性生育力提供实验依据。现报道如下： 1 研究方法 1.1 研究对象：386例男性不育患者均来自遵义医学院生殖中心男科实验室，年龄21～46岁，婚后正常性生活2年以上不育，无外伤及遗传性疾病家族史，体检未发现明显睾丸、附睾及输精管异常。 1.2 精液标本收集：禁欲3～7 d后手淫取精液于干燥消毒量杯内，置37℃水浴箱内液化。进行精子形态分析，精子活力、活率及精子密度检测。 1.3 精子活力检测：采用国产WLJY-9000型伟力彩色精子质量检测系统进行精子活力分析。以a+b级活力50％分为活力正常组和活力异常组。 1.4 精子活率测定：采用伊红－Y染色法分析精子活率。按精子活率50％将精子分为活率正常组和活率异常组。 1.5 精子形态分析：每份标本分别采用国产WLJY-9000型彩色精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。按WHO规定的标准分为形态正常精子和形态异常精子。形态异常精子中包括大头精子、小头精子、锥形头精子、犁形头精子、无定形头精子、空泡样头精子、双头精子、颈部和中段缺陷精子、尾部缺陷精子。
正常形态精子率低于4怎么办
正常形态精子率低于4怎么办 在每个人的一生中结婚生子是不可避免的，但是可能会因为种种因素而不容易有孩子，其中有女性方面的因素，同时也有男性的因素。其中男性可能因为不注重保护睾丸，而使正常形态精子率过低也会给生孩子这件事带来重重障碍，那么，正常形态精子率低于4怎么办？在这里小编就和大家介绍一下吧。 正常形态精子率低于4怎么办 （1）改善睾丸血供：改善血液流变功能，睾丸动、静脉管腔内径缩小，增加动脉血流量，降低静脉回流速度，以达到提高睾丸组织中的血流量； （2）促进睾丸生精细胞生长发育：使曲细精管内生精细胞、精子细胞和精子生长发育活跃，细胞数大量增加。曲细精管横径变长、管腔内细胞层数增多，生精细胞增殖活跃，初级精母细胞减数分裂增多，精子畸形数减少，精子密度增加、活力提高； （3）促进雄性激素睾酮的分泌：促进睾丸Leydig细胞生长发育、分泌睾酮增多，而睾酮增加促进生精细胞发育成熟，促进精子的生长； （4）通过调节神经递质促进精子发育：机体内神经递质中DA恢复正常生理水平；间接调节睾丸生殖细胞生存的生理环境，以适应精子生长发育； （5）促进前列腺和精囊腺分泌功能增加； 精子畸形的原因 正常精子的形态率应该不低于90%,活力要高于60%,正常的精子形态才4%,说明大部分的精子是畸形的精子,这是直接影响受孕的,这样受孕胎儿的畸形率比较高,引起畸形精子症的原因有泌尿生殖道感染,腮腺炎并发的睾丸炎,附睾结核,精索静脉曲张等,它们均可导致畸形精子增加,典型的是双头精子,影响精子的质量;生殖腺受到放射线照射,可引起精子的突变;阴囊局部长期高热,长期酗酒（特别是高浓度的烈性酒）,均可使精子发生畸变。 以上就是正常形态精子率低于4怎么办的简要介绍，小编也向大家介绍了精子畸形的几个主要因素。希望广大男性同胞们在这方面多上点心，一定要注重睾丸的保护且不要长期饮酒醉酒，烈性酒尽量不要喝，毕竟这是建立幸福婚姻的前提和基础。
精子形态对宫腔内人工授精妊娠率的影响
精子形态对宫腔内人工授精妊娠率的影响 目的探讨正常形态精子比率对宫腔内人工授精（IUI）临床妊娠率的影响。方法回顾分析328个周期宫腔内人工授精临床资料，根据男方精子形态学检查结果分为三组：正常形态精子百分率≥4%、2%～0.05），处理后精子浓度、活力、前向运动精子总数各组间比较有显著性差异（P＜0.05），≥4%、2%～1年；女方无全身性疾病及传染病；子宫输卵管造影或者宫腔及腹腔镜检查至少一侧输卵管通畅；所有患者均符合卫生部颁布的人工授精适应证的指征。其中，女方平均年龄为（32.7±3.9）岁，男方平均年龄为（34.4±5.6）岁。 按照第5版《WHO人类精液检查与处理实验室手册》[5]（以下简称第5版《WHO》）的标准对男方精液进行检查，根据男方精液形态学检查的结果分为三组：正常形态精子百分率≥4%、2%～<4%、<2%。 1.2 方法 1.2.1 精子形态学检验待精液液化后，将精液滴于洁净载玻片上，推片，自然风干后采用Diff-Quik快速染色法染色。在光学显微镜油镜1000倍下每片读取200个精子，按第5版《WHO》严格标 准法进行判别，计数正常形态及畸形精子，只有头和尾都正常的精子才认为是正常的，精子缺陷的类型包括：头部缺陷、颈部和中段缺陷、主段缺陷、过量残留胞浆。 1.2.2 根据不同病因利用自然周期或促排卵周期进行IUI B超监测卵泡直径结合血E2、尿LH测定确定诱发排卵时机，肌注HCG 5000～10000IU后24～36h 行IUI。 1.2.3 精液收集及处理方法男方禁欲3～7d，手淫法采集精液于广口无菌无毒容器中，采用密度梯度离心法分离精子，将液化后充分混匀的精液加于平衡好的90%、45% SpermGrad（瑞典Vitrolife公司）上层，300g离心20min，移去上层的精浆和分离液，将锥形管底层的精子团混匀，移至平衡好的SpermRinse中，混匀后300g离心5min，弃上清，视底层精子的多少留取0.3～0.6mL培养液，将精子混匀，记录处理前后精子浓度、活力、前向运动精子比例。精子活力分级参照《WHO》第5版实验室标准。 1.2.4 IUI方法将精子悬液注入宫腔，抬高臀部休息30min，术后用黄体酮支持黄体。 1.3 临床妊娠的判定 IUI后17d，通过尿妊娠试验或血β-HCG检测确定是否妊娠。IUI后5周复查B超，检测到孕囊、卵黄囊及心脏搏动者确定为临床妊娠。
精子常规检查步骤
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 精子常规检查步骤 导语：男性在进行精子检查的时候，一定要积极配合，有很多男性在进行精子检查的时候，都是不怎么配合，这样对自身身体情况不会有很好掌握，而且身 男性在进行精子检查的时候，一定要积极配合，有很多男性在进行精子检查的时候，都是不怎么配合，这样对自身身体情况不会有很好掌握，而且身体出现异常情况，都是不能及时发现，使得对自身生育会有严重影响，那精子常规检查步骤都有什么呢，下面就详细的介绍下。 精子常规检查步骤： 1、精液量正凡人的每次射精量约2-6毫升，1-2毫升为可疑异常，少于1毫升或大于7毫升的均考虑异常。精液量测定与标本采取前的禁欲时间有关，禁欲时间长，精液量相对较多，一般以禁欲3-7天为宜。 在病理情况下，一次射精量多于7ml时，不但精子密度降低，而且易从阴道中流出，以致精子总数降低，常见于精囊炎;小于2ml为精液量过少，但通常以1ml以下为过少。此时精液与女性生殖道接触面积小，或因粘稠不利于精子进入女方宫颈口而导致不育，常见于严重的副性腺炎症、睾酮水平低下、射精管阻塞、逆行射精等。 2、精子密度一般以每毫升精液中的精子数表示。正凡人的精子密度为2千万-1点5亿/毫升，个体差异很大。少于2千万/毫升者，为少精子症，见于各种原因导致的生精功能障碍等，可因精子进入子宫腔及输卵管的机会减少而致生养力低下或不育;大于2点5亿/毫升的为多精子症，精子活动力受到影响;假如多次检查或经离心后检查在精液中没发现精子，则为无精子症。以上三者均为不育因素。需要说明的是，有的人少于2千万/毫升，而由于其精子活动力强，畸形率低也可 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
精子畸形率高吃什么
精子畸形率高吃什么 【导读】畸形精子症是指异常形态的精子数比例过多的一种病症。畸形精子不具备正常的活动能力和受孕能力，是引起男性不育的主要原因之一.一般有如下病因可引起：（1）生殖道感染；（2）精道部分梗阻；（3）先天性畸形；（4）原发性睾丸功能衰竭；（5）免疫因素，如：自身抗精子抗体等；（6）长期接触有毒化学物质，电离辐射；（7）空气、水质、环境污染及吸烟、酗酒等；（8）长期穿紧身裤及热水坐浴等因素有关。那么男人精子畸形率高吃什么好呢，吃什么可以最好最快补精子？精子是衡量健康好坏的重要标准,一旦出问题,可能发展成男性不育。所以补精子行动志在必行。所以吃什么补精子并且可有效提高精子质量进而有效的防治男性不育是至关重要的。 男人吃什么可以改善精子畸形率过高呢？其实在需要补充维生素，平时多吃水果之外还有以下方法哦。 一、富含优质蛋白质的食物 蛋白质是构成抗体、激素、酶和各种组织器官的基本成分，男人体内缺乏蛋白质将对生殖健康产生重要影响。蛋白质是雄性激素的营养来源，蛋白质摄入不足会导致雄性激素分泌受阻，此外，蛋白质也是构成精液的基本原料，它的匮乏将使体内的氨基酸浓度无法得到均衡，影响精液的生成。 二、含硒高的食物 男性体内的硒有20%——40%集中在生殖系统，硒也因此被称为“男人的体内黄金”。它参与了男性睾丸酮的合成和运载活动，帮助提高精子活力以及受精等生殖活动，硒还是影响精子生产和代谢的一系列酶的重要组成，男人缺硒可致精子生成不足、精子活性变低、精子出现畸形等。 三、含锌高的食物 锌对男人的作用想必很多人都知道，睾丸、前列腺、精液都含有很高浓度的锌，它被誉为男性的“生命之花”，是合成人体抗氧化酶的必要营养素，对维系男性健康、加快新陈代谢、增强免疫能力有很大的作用。补锌可改善少精、弱精、精子不液化，还能有效防治前列腺炎等男科疾病。 另外提醒处于正在备孕男性应戒烟戒酒，规律生活，按时作息，而适当运动有利于精子的代谢和生成，帮助提高精子质量。 精子畸形率高的原因 通常情况下，男性精子畸形率高常常会导致一些婴儿出现畸形，那么是什么原因导致精子畸形率高呢。专家介绍，在我们的日常生活中，精子畸形率高的原因有很多，而男性的生殖器感染疾病是导致此现象的主要原因之一。 精子畸形率高的原因有很多，一般多见于泌尿生殖道感染（如：支原体、衣原体、淋菌、G+球菌、G-杆菌等）、先天性睾丸发育不全、腮腺炎并发的睾丸炎、附睾结核、慢性中毒、营养不良、精神过度紧张、性交过频、精索静脉曲张等；以上疾病均可影响精子的发生过程。据有关专家介绍，男性精子的畸形率高具体是指正常形态的精子少于50%，即精液中畸形精子超过50%。畸形精子是指头、体、尾的形态变异，头部畸形有巨大头、无定形、双头等;体部畸形有体部粗大、折裂、不完整等; 尾部畸形有卷尾、双尾、缺尾等。然而引起男性精子的畸形率比较高的原因有泌尿生殖道感染、腮腺炎并发的睾丸炎、附睾结核、精索静脉曲张等，它们均可影响男性精子的质量;使用激素或某些化学药物，如抗癌药、利血平、马利兰、呋喃类等，可使精子发育不成熟;生殖腺受到放射线照射，可引起精子的突变;阴囊局部长期高热、长期酗酒(特别是高浓度的烈性酒)，均可使精子发生畸变。
男性生殖学精子功能检测的实验进展
[6] von Schoultz E,Hanss on LO,D jureen E,et al.Pr ognostic value of serum analyses of S2100beta p r otein in malignant melanoma[J]. Melanoma Res,1996,6(2):1332137. [7] K rnell R,von Schoultz E,Hanss on LO,et al.S100B p r otein,52S2 cysteinyldopa and62hydr oxy252methoxyindole222carboxylic acid as bi oche m ical markers for survival p r ognosis in patients with malig2 nant melanoma[J].Melanoma Res,1997,7(5):3932399. [8] Bonfrer J M,Korse C M,N ie weg OE,et al.The lum inescence i m mu2 noassay S2100:a sensitive test t o measure circulating S2100B:its p r ognostic value in malignant melanoma[J].B r J Cancer,1998,77 (12):221022214. [9] Hauschild A,M ichaelsen J,B renner W,et al.Pr ognostic signifi2 cance of serum S100B detecti on compared with r outine bl ood pa2 ra meters in advanced metastatic melanoma patients[J].Melanoma Res,1999,9(2):1552161. [10] Hauschild A,Engel G,B renner W,et al.S100B p r otein detecti on in serum is a significant p r ognostic fact or in metastatic melanoma [J].Oncol ogy,1999,56(4):3382344. [11] Kr hn G,Kaskel P,Sander S,et al.S100beta is a more reliable tumor marker in peri pheral bl ood f or patients with ne wly occurred melanoma metastases compared with M I A,album in and lactate2de2 hydr ogenase[J].Anticancer Res,2001,21(2B):131121316.[12] Ha mberg AP,Korse C M,Bonfrer J M,et al.Serum S100B is suit2 able f or p redicti on and monit oring of res ponse t o che moi m muno2 therapy in metastatic malignant melanoma[J].Melanoma Res, 2003,13(1):45249. [13] Hauschild A,Engel G,B rennerW,et al.Predictive value of serum S100B for monit oring patients with metastatic melanoma during chemotherapy and/or i m munotherapy[J].B r J Der mat ol,1999, 140(6):106521071. [14] Jury CS,Mc A llister EJ,MacKie R M.R ising levels of serum S100 p r otein p recede other evidence of disease p r ogressi on in patients with malignant melanoma[J].B r J Der mat ol,2000,143(2): 2692274. [15] Zissi m opoul os A,Kar pouzis A,Karaitianos I,et al.Serum levels of S2100b p r otein after f our years f oll ow2up of patients with melanoma [J].Hell J NuclMed,2006,9(3):2042207. [16] Henze G,Dummer R,Joller2Je melka H I,et al.Serum S1002a mark2 er f or disease monit oring in metastatic melanoma[J].Der mat ol ogy, 1997,194(3):2082212. [17] Bánfalvi T,Udvarhelyi N,O r osz Z,et al.Heter ogenous S2100B p r o2 tein exp ressi on patterns in malignant melanoma and ass ociati on with serum p r otein levels[J].Oncol ogy,2003,64(4):3742379. 收稿日期:2007209206 修回日期:2008204216 男性生殖学精子功能检测的实验进展 庞伟鸿,刘红杏,陈 忠 (广东湛江中心人民医院检验科,广东湛江524037) 中图分类号:R698.2 文献标识码:A 文章编码:100622084(2008)1021558203 摘要:人精子功能检测对男性不育症的病因诊断具有重要意义。有关精子功能的检测越来越受到人们的重视,如对精子运动特征检测、形态学分析、体外存活试验、精子膜完整性试验、顶体状态测定、精子2宫颈黏液相互作用试验等。这些试验均为男性不育症的诊断提供帮助,但要全面评价精子功能必须进行综合的检测。 关键词:男性生殖;精子功能;不育症 Exper im en t a l D evelpom en t of Sper m Functi on Tests i n M a le Genesi ology PANG W ei2hong,L I U Hong2xing,CHEN Zhong.(D epart m ent of D oci m ology,Zhanjiang Central People′s Hospital,Zhanjiang 524037,China) Abstract:Human s per m functi on test has such an essential r ole on the eti ol ogic diagnosis of male infer2 tility that it attracts more and more attenti on.Many tests have offered indis pensable app r oaches t o diagnose the male infertility such as s per m move ment character,mor phol ogical analysis,survival test in vitr o,integrity of s per m me mbrane,acr os om ic status,interacti on bet w een s per m and cervical mucus and s o on.To evaluate the s per m functi on,comp rehensive test is critical. Key words:Male rep r oducti on;Sper m functi on;I nfertility 男性不育的发病率呈逐渐增加的趋势,约占男女不育不 孕的一半。男性生殖过程包括精子的生成、成熟、转运、精卵 结合及受精卵的发育等一系列复杂的环节,男性不育与生育 的临床评估和基础研究的一项重要试验是精子功能检测。精 液常规检查了解精液、精子和精浆的一般性状,精子功能评价 则是检测精子执行某个特定功能的状态。因此,在常规精液 检查的基础上,还需借助一组精子功能试验来了解男性不育 的可能病因和综合评价男性生育潜力。现就当前有关精子功 能的检测方法予以综述。 1 精子运动特征的检测 运动是精子的特征。精子必须做生理性运动,才能在女 性生殖道迁移到达受精部位和完成受精过程。精子运动是一 个复杂的过程,检测精子运动的传统方法是肉眼在显微镜下 对精子活动率和活力等级进行估计,这种方法简便易行,但对精子运动的定性和定量存在一定程度的主观误差。计算机辅助精子分析系统可快速地给出精子运动轨迹参数,直观地观察精子的运动图像,较人工法具有两个优点:①高精确度;②提供精子动力学的量化数据。研究表明,不育组的精子直线速率、曲线速率、平均路径速率、精子头侧摆动幅度、精子尾鞭打幅度等参数明显低于正常生理组[1]。部分文献报道,精子运动的速度对预测精子在体 外的受精能力有显著统计意义[2]。实际应用计算机辅助精子分析时,精液标本性状(如非精子成分、液化状态、精子密度高低等),系统灰度、阈值的确定,标本取样,检验人员对仪器原理及操作熟练程度等,都会影响测定的准确性。 2 精子形态学分析 精子形态是精子的重要特征,近年来国际上非常重视人类精子的形态学分析。体外受精研究表明,正常形态精子数量与受精率呈正相关,畸形精子很少能结合到卵透明带上。常见的精子功能缺陷是精子的形态异常,而大部分畸形的精子都是顶体异常,圆形无顶体的精子可以确定为完全不育[3]。很多头畸、颈畸或尾畸的精子可运动,但在正常情况下不能受精或受精潜力低下。 精子形态学分析以精子涂片染色为基础。世界卫生组织(WHO)从精液分析手册的第1版(1980)至第4版(1999),一
精子形态
精子形态 文章目录*一、精子形态的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、精子形态的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、精子形态的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、精子形态的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、精子形态的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应 精子形态的基本信息 1、定义精子形态学检查是为了了解正常精子与生理及病理范围内的变异精子所占的比例,是反映男性生育能力的一个重要指标。 正常精子形态:头部呈椭圆形,无头部、颈部、中段和尾部缺陷。异常形态精子可出现各种缺陷,如头部形态异常(大头、小头、锥形头、梨形头、无定形头、空泡样头和双头等),颈、中段缺陷(肿胀的中段、不规则中段、弯曲的中段和异常薄的中段等),尾部的异常形态(短尾、无尾、双尾、卷尾和断尾等)。 2、专科分类男科检查 3、检查分类精液及前列腺液检查
4、适用性别男性 5、是否空腹非空腹 精子形态的正常值和临床意义 1、正常值正常形态精子超过0.30。 2、临床意义如正常形态精子数少于0.30,称为畸形精子症,见于精索静脉曲张、生殖系统感染、激素水平异常和药物影响。 结果偏低可能疾病:精液不液化、女性不孕症。 精子形态的检查过程及注意事项 1、检查过程进行精液采集时,使用软皂或者石蜡对生殖器官进行按摩,待射精,把精液收集到无菌的试管中。交给医生进行染色检查。因为精子涂片染色染色是分析精子形态的主要手段,正常精子和生理及病理范围内的变异精子也只能通过染色加以分析。常用的有HE(苏木精-伊红)染色法或瑞-姬氏染色法,形态的特殊鉴别可用改良巴氏染色法。染色后,直接在显微镜下观察精子的形态。 2、注意事项在进行精液采集前,需禁欲3至5天,以确保能采集到准确的精子数量,禁欲时间过长或者过短都会影响检查结
精子形态学分析
精子形态学分析 正常形态精子百分率是评价精子受精能力的重要指标之一。目前，用于精子形态学分析的染色方法有：改良巴氏染色法、苏木精-伊红（HE）染色法、瑞氏染色法、瑞-吉氏染色法、Diff-Quik染色法和Shorr染色法。 1 涂片的制备 一般用新鲜的液化精液或生理盐水洗涤过的精子悬液进行涂片，通常每份标本涂双份片子，以备染色或操作出问题。载玻片应洁净，可用70%酒精洗涤并干燥后使用；涂片的厚薄应根据精子密度而定，精子密度高者涂片应薄些，而精子密度低者涂片应尽可能厚些。涂片的方法有多种，WHO推荐的方法有拉薄技术和滴管法，拉薄技术即用另一张载玻片的边缘拖拉载玻片上的一滴精液；滴管法即水平持滴管使一滴精液沿载玻片的表面展开。由于精液有一定粘稠度，这两种方法都很难涂成均匀的涂片。可建议用以下方法涂片：用滴管将一滴精液置于载玻片上，然后从液滴中央向周围循环吸净多余的精液，注意滴管的头要平整，滴管与载玻片垂直，缓慢吸去多余的液体。低密度、粘稠的、或充满碎屑的标本，建议先离心去除精浆，沉淀的精子团重新悬浮在适当体积中，以获得尽可能高的密度，但不应超过80×106/ml。正常精子密度且液化良好的精液标本亦可以洗涤后用精子悬液进行涂片，但离心操作对精子形态分析有无影响，尚需要进一步验证。 精子涂片可进行空气干燥并固定。固定程序取决于染色方法。 2 改良巴氏染色法 这是WHO手册推荐的方法。它可以使精子和其他细胞很好地染色，可使精子头部的顶体和顶体后区、胞浆小滴、中段和尾部着色。染液中的俾士麦棕为盐基性染料，伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，能与细胞中具有相反电荷的蛋白质结合，而染成各种不同的颜色，从而能清楚地区分各种细胞成分。以往用巴氏染色法进行染色时，操作步骤繁琐，目前已有改良的单一的巴氏染色液出售，操作非常简单，只需在自然干燥的精子涂片上滴加1~2滴巴氏染液，染15分钟即可。流水冲洗后自然晾干，显微镜油镜下观察精子形态。 3 HE染色 带正电荷的碱性染料苏木素能与细胞核中带负电荷的核酸结合而使核染成紫蓝色，伊红为酸性染料，能与细胞质中具有相反电荷的蛋白质结合，使胞质呈红色。HE染色为医院病理科的常用染色方法，操作比较繁琐，对于可以借助病理科染色的医疗单位可以选用此法对精子进行染色。 4 瑞氏和瑞-吉氏染色法 瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，细胞染色后可用于观察内部结构；吉氏染料是由天青、伊红组成的染料，天青对细胞核着色较好，结构显示更清晰。因此，瑞-吉氏染色法比瑞氏染色法效果稍好些，两种染液均可自行配制或购买，操作都比较简单。 ①瑞氏染液：取瑞氏染料0.1 g放入清洁干燥的研钵中，边加少量甲醇边磨至染料完全溶解，加甲醇到60 ml，倒入棕色瓶中，室温下放置1周以后即可用。②Giemsa染液：取Giemsa 染料0.5 g，置于33 ml甘油中，60℃水浴2小时，使其溶解，再加入60℃预热的甲醇33 ml，混匀后置棕色瓶中，室温下放置数周后方能使用（最好放置半年以上）。③30.1 mol/L pH6.9磷酸盐缓冲液：称取NaH2PO4?2H2O 1.4 g、Na2HPO4?12H2O 3.94 g，加蒸馏水至100 ml。染色时，将单独瑞氏染液或瑞氏∶吉氏（10∶1）混合染液滴加于精子涂片上，静置10秒后，滴加等量pH6.9磷酸盐缓冲液，染色10分钟后自来水冲洗，自然干燥，置于油镜下观察。 5 Shorr染色法 精子涂片空气干燥后，用苏木精染色1~2分钟；流水浸洗后置42℃温水中蓝化5分钟（或浸入乙醇铵中蓝化）；Shorr染剂（BDH Shorr粉4 g溶于220 ml 50%温乙醇中，冷却，加入