烟草黑胫病菌0号小种不同条件下培养特性的研究
烟草黑胫病菌0号小种不同条件下培养特性的研究
苏振刚王静周佳等
(1.中国农业科学院烟草研究所，青岛266101；2.中国农业科学院研究生院，北京100081)
摘要：研究了烟草黑胫病菌0号小种的若干培养性状，为进一步展开与之相关的研究和综合防治提供试验依据。本实验用培养基、光照、菌龄、诱导剂和诱导时间等不同因素来研究烟草黑胫病菌0号小种的生长速度、产孢量和游动孢子释放量等培养特性。结果表明：将0.1%KNO3和1%葡萄糖混合液加入在燕麦培养基上避光培养21d的培养皿中，经26℃恒温培养72h后，突降12℃培养0.5h，最易产生孢子囊和释放游动孢子。
关键词：烟草；黑胫病菌；培养特性；不同因素
中图分类号：S435.72
Study on the Cultural Characteristics Under Different Conditions of Phytophthora Nicotianae var. nicotianae, Pathogen of Tobacco Blank Shank No.0
Su Zhengang Wang Jing Zhou Jia
(1.Tobacco Research Institute of CAAS, Qingdao 266101, China; 2.Graduate School of CAAS,
Beijing 100081,China)
Abstract:The study was conducted to observe cultural characteristics of Phytophthora nicotianae var. nicotianae, pathogenic of tobacco blank shank No.0, were studied to provide more information for relation study and integrated management of the disease. The study uses experimental medium, light, bacteria age, inducing agents and induction time to observe cultural characteristics of Phytophthora nicotianae Breda de Haan var. nicotianae No.0, such as the growth rate of tobacco, sporangium production and tour dynamic spores release ect. The results showed that: The 0.1% KNO3 and 1% glucose solution are added to cultured 21d oats culture medium dish in the dark by 26 ℃ constant temperature, after 72h culture, dump 12 ℃, 0.5h, most likely to produce sporangia and release of tour dynamic spore.
Key words: Tobacco; Phtoph thora parasitica; Culture characteristics; Different factors 烟草黑胫病于1986 年Breda de Haan 在印度尼西亚的爪哇首次发现，此后1
该病迅速传播蔓延，1934 年在山东鉴定出烟草黑胫病[1]。可以侵染烤烟、晾烟、晒烟、白肋烟、香料烟等所有的栽培烟草，破坏性极强[2]，平均发病率为5%-12%，严重田块发病率高达75%，甚至造成绝收。烟草是我国重要的经济作物之一，吸烟是亿万烟民文化生活中不可缺少的一部分，也是国家和地方财税收入的重要来源。研究烟草黑胫病病原菌的生物学特性、病害发生机制等有利于从植物保护、抗病育种和耕作栽培等方面来抑制或减少烟草病害的发生，从而可以减少农药的用量，提高烟叶质量和安全性，同时也有利于环境保护。
1 材料和方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌株烟草黑胫病0号小种由中国农业科学院烟草研究所植物保护研究室提供。
1.1.2 供试培养基燕麦培养基（OA）:燕麦片30 g ，琼脂18 g，去离子水1 000ml；马铃薯培养基(PDA)：马铃薯200g ，葡萄糖15g，琼脂18g，去离子水1 000ml；玉米粉培养基(CMA)：玉米粉200g，琼脂17g，去离子水1 000mL；番茄汁培养基(TJA)：番茄汁50ml，牛肉膏10g，乳糖20g，酵母提取液5g，琼脂17g，蒸馏水1 000ml；烟草汁培养基：新鲜烟叶200g ，琼脂20g ，蒸馏水1 000ml。
1.2 实验设计
1.2.1 不同培养基和光照处理对菌丝生长的影响
（1）接菌培养将上述5种培养基经121℃高压灭菌20min后，分别倒入无菌培养皿（直径88mm），挑取生长良好的黑胫病菌0号小种0.5cm2大小的菌丝块转接到培养皿中央部位。将转接菌丝的培养皿平均分成两份，分别倒置于光照和黑暗条件下28℃恒温培养。
（2）试验方法从第24h起，每隔1d测量一次菌落直径（设5个重复求平均值），至菌丝长满培养皿为止。
1.2.2 培养基和菌龄对孢子囊数量的影响
（1）实验方案用0.1%硝酸钾溶液浸泡培养7d的菌丝，镜检孢子囊数量，此后，第14d、21d、28d、35d、42d各镜检一次。
（2）实验方法在超净工作台下，向不同菌龄且长满菌丝的培养皿中分别加入6ml无菌的0.1%KNO3溶液，用封口膜封住培养皿，放置于26℃恒温条件下避光培养，分别将培养12、24、48、72h的培养皿转移至温度突然降低12℃的环境下，恒温培养0.5h。然后，吸取50ul的硝酸钾浸泡液转移到干净的载玻片上，挑取有代表性约1cm2大小的菌丝放入载玻片的溶液里，制成孢子囊悬浮液，在显微镜下(10×40)随机观察3个视野，计数每个视野的孢子囊数量。
1.2.3 不同诱导剂和诱导时间对孢子囊和游动孢子数量的影响
（1）实验方案用0.1%KNO3、0.1%KNO3和1%葡萄糖混合液分别浸泡不同菌龄的菌丝，以无菌水作为对照(CK)，设置三个重复，镜检孢子囊和游动孢子的数量。
（2）实验方法同1.2.2，并用血球计数板法计算游动孢子的浓度。
2 结果
2.1 菌落及菌丝形态特征
选择燕麦培养基（OA）上的供试菌株进行观察，菌丝生长旺盛，菌落质地均匀。在显微镜下观察（图1）显示，菌丝粗细不均，无隔膜，有分枝，局部有菌丝膨大体，其上有若干条放射状菌丝。孢子囊卵圆形、近球形或不规则形，通常1个、少数2个呈半球形的乳突；部分孢子囊上有丝状附属物，在条件适合时可释放游动孢子。游动孢子椭圆形或圆形，可在水中游动，遇寄主时萌发产生芽管侵入；当条件不适宜时，孢子囊可直接长出芽管侵入寄主；厚垣孢子是烟草黑胫病赖以度过不良环境的主要形态，本实验并没观察到。
2.2 菌丝生长与培养基和光照的关系
由表1可以看出，黑胫病0号小种菌丝在5种不同培养基上28℃恒温培养生长趋势基本一致，黑暗条件下以OA培养基上的病菌平均生长速度最快，生长的菌丝最丰厚、浓密，其次是烟叶汁培养基，CMA培养基、TJA培养基和PDA培养基差别不大。光照条件下各培养基中菌丝的平均生长速度与避光条件下相似，然而，在同一种培养基上黑暗条件下培养的菌丝平均生长速度比光照条件下的稍快。在本研究提供的5种培养基中，黑胫病0号小种最适于在OA培养基上生长，光照不利于菌丝的生长。
表1 避光条件下不同培养基上菌丝生长速率
菌种培养基类型测定
数量
平均菌落直径/mm 菌丝平均生长
速率(mm·d-1) 1d 2d 3d 4d 5d
烟草黑胫病0号小种
OA培养基 5 10.6 38.3 69.5 82.4 88.0 ≥17.6烟叶汁培养基 5 9.3 28.5 56.9 71.6 83.1 16.62 CMA培养基 5 7.1 20.8 39.5 50.2 65.3 13.06 TJA培养基 5 8.4 21.6 37.2 49.8 62.7 12.54 PDA培养基 5 9.2 19.7 36.5 48.3 60.2 12.04
2.3 各培养基上不同光照处理病菌的产孢量
供试菌株在5种不同的培养基上均能产生孢子囊，在同一种培养基上不同光照处理的产孢量存在差异，光照下相对产孢量少，孢子囊的大小也有所不同。相同光照处理下，OA培养基上产生的孢子囊数量最多，其次是烟叶汁培养基和CMA培养基，TJA培养基和PDA培养基上产孢数量相对较少。黑暗条件下培养的
菌丝产孢量普遍比光照条件下产孢量多，因此，黑暗培养有助于孢子囊的产生。
2.4 菌龄和产孢量的关系
菌株在OA培养基上生长7d、14d、21d、28d、35d和42d后的镜检结果显示，以21d菌龄的菌丝产孢量最多，产孢能力最强；其次是14d和28d菌龄的菌丝；35d、42d和7d的菌丝产孢量依次递减。14d和28d菌龄的菌丝产孢量无明显差异，且与21d菌龄的菌丝产孢量存在差异；原因可能是，7d菌龄的菌丝处于旺长期，不适于产生孢子囊；21d以后，随着培养时间的延长，菌丝逐渐老化，产孢能力逐渐退化。考虑到实际操作、试验周期等因素，选取21d菌龄的菌丝催孢效果最佳。
2.5 不同菌龄的菌丝产孢量和游动孢子释放量与诱导剂和诱导时间的关系
用0.1%KNO3（A液）、0.1%KNO3和1%葡萄糖混合液（B液）分别浸泡不同菌龄的菌丝，以无菌水作为对照(CK)，经过12h、24h、48h和72h的26℃恒温培养，以及0.5h、14℃的诱导培养，结果如表2所示。
表2 不同诱导剂和诱导时间对菌丝的作用
固定项时间项孢子囊数量游动孢子数量
菌龄相同处理时
间不变
A、B两者孢子囊数量基本一致B液处理的菌丝产生的游动孢子多
处理时
间增加
A、B两者产孢数量均增加且基
本一致，随处理时间的延长产孢
量增多，浸泡72h菌丝产孢量最
多
A、B两者均增加，B液处理的菌
丝产生的游动孢子多
A液处理时
间不变
随菌龄增加孢子囊数量先增后
减，21d菌龄产孢量最多；相同
菌龄孢子囊数量基本一致
随菌龄增加游动孢子数量先增后
减，21d菌龄的孢子释放量最多；相
同菌龄游动孢子数量基本一致
处理时
间增加
随菌龄增加孢子囊数量先增后
减，21d菌龄产孢量最多；菌龄
相同，产孢数量随处理时间的延
长而增加，72h孢子囊数量最多
随菌龄增加游动孢子数量先增后
减，21d菌龄的孢子释放量最多，游
动孢子释放量随处理时间的延长而
增加
B液处理时
间不变
同A液处理时间不变有关孢子
囊的实验结果
同A液处理时间不变有关游动孢子
的实验结果
处理时
间增加
同A液处理时间增加有关孢子
囊的实验结果
同A液处理时间增加有关游动孢子
的实验结果
附注：在相同菌龄和相同处理时间下，经A液浸泡的菌丝和对照相比较，无菌水的菌丝产生的孢子囊数量相对较少，结果显示，0.1%KNO3溶液可促使孢子囊的产生；经A、B两液浸泡的菌丝产生孢子囊数量基本一致，但是，经B液浸泡的菌丝释放的游动孢子数较多，
说明1%葡萄糖溶液具有诱导孢子囊释放游动孢子的作用。
3 讨论
烟草黑胫病发现至今已有110多年的历史，本研究关于烟草黑胫病菌0号小种培养性状的研究结果与前人的研究[3-8]基本一致，初步认为，生态环境的改变没有导致烟草黑胫病菌的培养性状发生较大变异，即烟草黑胫病菌的培养性状是较为稳定的[9]。
从本实验提供的5种供试培养基来看，烟草黑胫病菌0号小种在燕麦培养基上生长最好，说明菌株对培养基的要求存在差异，可能是病菌长期进化致使生理机能在一定程度上对营养有选择性的结果。郑小波等曾指出烟草疫霉菌部分孢子囊上有附属丝[8,10]，但有关烟草黑胫病菌的文献[11-13]中鲜有报道。本研究发现部分着生附属丝的孢子囊，附属丝的作用还有待于进一步研究。人工注射接种法是吸取游动孢子溶液直接注射到植株茎基部，游动孢子在侵染过程中起主要作用，其作用机理还有待于研究。
4 结论
本研究的结果表明，烟草黑胫病菌0号小种对培养基有选择性，燕麦培养基较适于其生长；用0.1%KNO3溶液浸泡菌丝有助于孢子囊的产生，1%葡萄糖溶液可促使孢子囊释放游动孢子；综合各因素，选用21d菌龄的菌丝为素材，加入0.1%KNO3和1%葡萄糖溶液于26℃避光诱导72h，然后突降12℃培养0.5h，可获取大量游动孢子。
鉴于本研究有关黑胫病菌培养特性的实验结果与Waterhouse、Newhook、Ho、Stamps 等记述的基本一致[9]，初步认为，本所鉴定保存数十年的黑胫病0号小种的培养性状较为稳定。
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1.菌丝；
2.孢子囊（含附属丝）；
3.释放游动孢子的孢子囊；
4.游动孢子
1. Mycelium;
2. Sporangium (including appendage);
3. the sporangium has released tour dynamic
spore; 4. tour dynamic spore
图1.烟草黑胫病菌0号小种的形态
Fig. 1 Morphology of the tobacco blank shank No.0
鸡枞菌种植技术是什么
鸡枞菌种植技术是什么 一、菇棚的建造 二、母种的扩繁 1、母种培养基的制作，配制一千毫升母种培养基需要去皮土豆200克，麸皮100克，葡萄糖20克，琼脂20克，硫酸镁0.5克， 磷酸二氢钾2克，蛋白胨5克，清水一千毫升。首先选择质量较好 的土豆将皮削掉，称取200克，切成块状，加入锅中，在加入一千 毫升的清水，在称取100克麦麸，在放之前为了防止麦麸散乱在锅里，要先用纱布把麦麸包起来，文火煮沸，沸腾后小火保持30分钟。待土豆煮成浆状用1000目的纱布过滤煮好的土豆液，如果不够一千 毫升可以加入50摄氏度的温水补足。然后在将过滤好的土豆液继续 放在锅中煮3分钟左右，这时候将称量好的葡萄糖、琼脂、蛋白胨、磷酸二氢钾和硫酸镁放入锅中文火煮20分钟。为了防止锅底烧焦， 要边煮边搅拌。直到琼脂等原料完全溶化，在将煮好的溶液倒入量 水杯中，母种培养液就做好了。 2、分装，因为母种培养基的温度降到45度以下时会凝固，所以制备好的培养基要尽快乘热分装入试管。试管规格为直径20毫米， 长200毫米。分装时使每支试管的分装量相当于试管长度的四分之 一左右，分装好后还要进行封口，可以用未经脱脂的原棉，塞入的 松紧度以用手抓棉塞不脱落为标准。 4、接种。接种要在无菌室中的操作台上进行，接种前首先要准 备好以下工具，酒精灯，酒精棉，接种铲和接种耙。 接种时接种人员的手和接种针要用75%的酒精棉球擦洗，之后点 燃酒精灯，使火焰周围空间形成无菌区。接着一手拿着接种铲在火 焰上进行灼烧灭菌，一手拿着培养基试管和母种试管，试管口也要 在火焰上稍微烤一下以杀来管口上的杂菌。把试管上的棉塞取下， 用接种铲取一块体积大约为1立方厘米的母种，迅速放入母种培养
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鸡枞菌栽培介绍 一、介绍 鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是着名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由於鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。然而在大陆，鸡肉丝菇人工栽培已初获成功。 [学名] Termitomyces eurrhizus(Berk.) Heim [别名]鸡肉丝菇、桐菇、鸡菌。鸡菌、鸡枞、伞把菇、三坛菌。日本人称为姬白蚁菌。 [习性]约在5-8月间，气温於26℃以上时可於黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus)的旧蚁巢上发现。 [分布] 江苏、浙江、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、海南、四川、贵州、云南、台湾、西藏等地。 (一)形态特徵 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，後伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟後辐射状开裂。菌肉厚，白色； 菌褶稠密，不等长，白色，老後变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 图1. 鸡枞菌之形态 图2. 鸡肉丝菇与白蚁巢 (二)鸡枞菌与白蚁的关系： 鸡枞菌是与白蚁共生的真菌，其共生关系主要可从两方面探讨： 1.白蚁筑巢、管理真菌花园以抑制鸡肉丝菇之外的其它真菌过度生长。另外， 白蚁粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，可为菌丝体生长和子实体生成提供氮源 和营养。 2.白蚁取食活菌丝体，并在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助於白蚁将吞食的 植物残体进行消化、排泄；又白蚁的活动和繁殖可将鸡枞菌之担孢子得以传 播。 图3. 鸡枞菌与环境互动示意图 图4. A、长在野地的鸡枞菌子实体。B、由黑翅土白蚁的地下巢穴中取出约13 公分宽 的真菌花园。C、用显微镜放大真菌花园的一小部份可见到晶莹剔透的小菌球 (fungal nodules)。D、在更高倍的显微镜下可见到小菌球内混合着圆球形细胞与透 明、长椭圆形的分生孢子。 (三)用途 1.食用：菌肉细嫩，气味香浓，味道鲜美。鸡肉丝菇营养丰富，尤其蛋白质的 含量较高，蛋白质中含有20多种氨基酸，其中人体必需的8种胺基酸种类 齐全。100g干鸡枞中，含蛋白质、碳水化合物、热量286千卡、灰分、钙 23mg、磷750 mg、核黄素、尼古酸。100克鲜鸡枞中含维生素C 2.药用：据《本草纲目》记载有益胃、清神、治痔的功效。 3.其他：菌丝可以深层发酵制造各种调味品和保健食品。
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ABSTRACT Cordyceps militaris growth optimum growth must be in the artificial cultivation of the process of suitable nitrogen source, carbon source, temperature, PH, mineral element comparative observation ofcommon elements of nitrogen, carbon source, temperature, PH,mineralstrain the quality of mycelial growth conditions, made thesituation in bacteria. The results showed that the nitrogen source,carbon source, different the PH, the different mineral elements in themoderate temperature mycelial can grow, pepton e, glucose, 24 ° C,PH6.7, potassium dihydrogen phosphate and grown undermagnesium sulfate combination. Keywords: Cordyceps militaris; artificial cultivation; nitrogen; carbon source; temperature; the PH; mineral elements
植物组织培养必须的条件
1.2研究的目的和意义 为什么要做这样的研究？？看前言 棉花是我国主要的经济作物,随着世界经济的一体化,棉纤维出口量增加,对棉纤维质量和种类的要求也越来越高,但我国棉花主要推广品种的纤维品质中等,纤维强度偏低,绒长偏短且类型单一,纺高支纱的优质棉仍需大量进口[1]。因而,在提高棉纤维产量的同时,改良棉纤维品质也成为棉花育种的主要目标。海岛棉以优良的纤维品质著称于世,但产量较低;陆地棉产量高,但品质较差。研究证明利用海陆种间杂交F1代优势是利用海岛棉优质纤维基因资源生产优质纤维的有效途径[2-4]。这一工作亲本选择很重要,而亲本各性状配合力是指导亲本选配的重要依据[5,6]。本文旨在通过对海陆种间杂交各亲本不同性状配合力研究,为海陆杂种优势利用亲本选配提供依据。 纤维品质是棉花生产的重要目标, 海岛棉棉纤维具有长细强等突出特点, 是纺织高支 精梳纱和特种织物不可缺少的原料[ 7] 。国内外对陆地棉配合力的研究已有较多报道[ 8 ] , 但有关海岛棉品种间配合力的研究目前还很少, 通过对海岛棉产量与品质性状的配合力及 遗传组分进行分析, 为明确海岛棉杂种优势的利用和新品种选育提供依据。 二．本课题所涉及的问题在国内外研究现状及分析 看摘要 配合力是自交系的一种内在属性，受多种基因效应支配，为自交系组配杂交种的一种潜在能力。配合力分为一般配合力（GCA)和特殊配合力(SCA)。一般配合力是指一个被测自交系和其它自交系组配的系列杂交组合的产量(或其它性状)的平均表现，由基因的加性效应决定，是可以遗传的部分。因此，一般配合力的高低是由自交系所含的有利基因位点的多少决定的。一个自交系所含的有利基因的位点越多，其一般配合力越高;否则，一般配合力越低。特殊配合力是在特定的组合中的F1产最(或其它性状)与双亲的一般配合力平均数的差数。配合力作为描述亲本材料性状遗传特征的重要遗传参数，是育种工作亲本选配的主要依据之一。大多数高产的杂交组合的两个亲本系都具有较高的一般配合力，双亲间又有较高的特殊配合力。 杂种优势(Heterosis)是指用两个具有不同性状和特点的亲本杂交，所产生的杂种后代，在生活力、生长势、繁殖力、抗逆性或产量、品质、对不良环境的适应性等方面有超过其双亲的现象。在作物杂种优势利用实践中，以杂种一代(F1)表现的杂种优势较为常见。虽然杂种优势的表现可能是多方面的，但在作物育种实践中，主要以提高产量、改良品质、增强抗性和提高经济效益为主要目标。如果亲本性状优良，组合选配得当，则有可能获得高优势杂交组合，其某些性状会明显优于亲本。 随着经济发展和纺织工业技术进步，人们对高档纺织品的需求日益增长，海岛棉（33-35㎜）和超级海岛棉（＞35㎜）占世界棉花总产份额从20世纪初的3%上升到20世纪末的6%左右。 我国改革开放以来海岛棉已从过去用于纺织少数特种产品拓展到衬衣、内衣等高档民用织物，这对提高我国纺织产品档次，增强行业竞争力发挥了重要的作用。 新疆塔里木盆地和吐鲁番盆地是我国一年生海岛棉的重要基地。据新疆年鉴统计 1960-2001年共生产65余万吨，其中80%以上供应国内纺织企业使用，基本满足特纺工业对海岛棉纤维的需求，80年代中期到90年代初国产海岛棉一度几乎完全替代进口海岛棉。我国海岛棉生产规模起伏剧烈，多数年份种植面积在1.3万-2.0万公顷，总产0.5万-1.5万吨，分别占全国同期棉花种植面积的0.5%和总产的0.3%，虽在我国植棉业中占比重很小，但填补了我国原来不能生产海岛棉的空白，丰富了棉花种植业结构，也为当地农村经济的发展发挥了重
鸡纵菌栽培技术要点
鸡枞菌栽培技术要点 鸡枞，又名鸡菌、鸡肉丝菇、伞把菇、三坛菌等，日本人称为姬白蚁菌。鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是我国云、贵、川等省区最著名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由于鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。通过我国广大食用菌科研工作者的多年努力，鸡枞菌人工栽培已初获成功。现将鸡枞菌的生物学特性及栽培技术要点介绍如下： 一、形态特征 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，后伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟后辐射状开裂。菌肉厚，白色；菌褶稠密，不等长，白色，老后变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 二、生物学特性 1．温度与湿度菌丝生长、原基分化适温为12～24℃，最适温为20℃；培养料含水量65%左右。子实体形成温度为25～35℃，最适温25～30℃；子实体生长发育期空气相对湿度85％～95%。 2．光照与空气菌丝生长阶段不需要光线；子实体的形成和发生均对光照和空气要求不严，且能抗高浓度二氧化碳。子实体开伞是则需要一定的散射光和充足的氧气。 3．酸碱度鸡枞菌适宜偏酸性生态环境。要求培养料及覆土材料PH值在4～5，最适PH值为4.5。 4．鸡枞菌与白蚁的关系鸡枞菌是与白蚁共生的真菌。一方面，白蚁建筑蚁巢、为鸡枞菌生长提供营养，为子实体的形成和发生创造条件；另一方面，白蚁取食鸡枞菌的活菌丝体，两者互助互利，同栖于一个生活环境，白蚁取食的鸡枞菌的活菌丝，在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助于白蚁将吞食的植物残体进行消化，并排出大量的粪便。其粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，为鸡枞菌的菌丝体生长和子实体生成提供氮源和营养。白蚁的活动和繁殖又将鸡枞菌担孢子得以传播。人工栽培可取白蚁巢土。 三、菌种生产 1．母种制作培养基配方：去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、白蚁巢浸出液1000毫升（白蚁巢土250克于1200毫升水中煮沸5分钟或浸泡48小时，取滤液1000毫升）。制作方法按常规。 2．原种和栽培种制作培养基配方：①木屑78%，麸皮20%，白糖和石膏各1%。②阔叶树落叶40%，木屑35%，米糠22%，过磷酸钙、白糖、石膏各1%。③棉籽壳45%，木屑30%，麦麸22%，白糖1.5%，碳酸钙1%，硫酸镁0.5%。各配方加蚁巢滤液120%～140%（含水量65%左右）。制作方法按常规。 四、栽培要点 1．栽培季节安排当气温稳定在12～24℃之间时，可安排制袋，经40～60天培养菌丝长满袋后植入土中。此时气温巳回升至25℃以上，为最佳催蕾出菇季节。 2．培养基的制备①堵养基配方：木屑75%，麸皮20%，石膏1.5%，白糖1%，白蚁巢土3%，水140%。②配制方法：将配料分别称量后翻拌均匀、堆闷2小时后检查，含水量约65%左右，即用手抓培养料紧握指缝间有水珠形成却不下滴为度。③装袋接种：用17×
烟草黑胫病
烟草黑胫病 中文名称:烟草黑胫病 拉丁学名:Phytophthora parasitica var nicotianae 为害作物:烟草 病原菌形态特征:所引起的病害。菌丝无隔膜，孢子囊顶生或侧生，梨形或椭圆形，顶端有乳状突起。内生游动孢于，圆形或肾形，有侧生鞭毛两条。厚膜孢子圆形或卵形，萌发时产生芽管形成菌丝．卵孢子球形，黄色、厚膜 发病特点:黑胫病的流行主要由病菌特性，烟草的抗病性和环境条件三因素所制约。寄主除不同烟草品种的抗性不同外，随株龄的增加其抗性增加，在现蕾期以前，茎基部组织柔嫩，为感病阶段，至现蕾后基部己本质化，即进入抗病阶段。高温、多湿有利于此病流行，24．5~32℃为侵染适温。在适温条件下，如雨后相对湿度保持在80％以上，连续3-5天，田间即可出现发病高峰。 防治方法:1) 种植抗病品种 中烟14、5008、革新一号G140、G28、NC82、NC89、金星6007、 (2)轮作换茬苗床地和烟田至少实行三年轮作。前作以禾本科为宜不要与切科蔬菜科轮作 (3)平整土地,越垅培土 (4)药剂防治苗期喷洒1:1:120波尔多液二三次,移栽时用95%敌克松350克,对细土15-25公斤拌匀,于移栽封高窝前及起垅培土前,把药土洒在烟株周围,立即覆土避免药剂光解。 (5)在培土后也可用500倍的70％敌克松液喷茎基或浇灌，效果更好。也可用40％三乙膦酸铝(乙磷铝)可湿性粉剂，亩施1公斤，或25％甲霜灵可湿性粉剂50克对水50公斤，每株浇药液20~3~毫升，或于茎基部喷洒，隔10~15天再施药一次，可控制此病。 (4)药剂防治用25%甲霜灵可湿性粉剂10g/m2，拌10-12kg干细土，播种时1/3撒在苗床表面，播种后其余2/3覆盖在种子上。移栽前用此药500-800倍液喷一次，做到带药移栽。移栽时用药50g/667m2与干细土拌匀，撒入穴窝。也可用95%敌克松可湿性粉剂，每667m2350-400g穴施。烟株培土后发病前采用局部保护的灌根方法向茎部及其土表施用58%甲霜灵·锰锌可湿性粉剂600-800倍液或40%甲霜铜可湿性粉剂600倍液、64%杀毒矾M 可湿性粉剂400-600倍液、90% 8 三乙膦酸铝可湿性粉剂400倍液、70%甲霜灵·福美双可湿性粉剂600-800倍液、1：1：150-200倍式波尔多液喷淋，隔15天喷一次。 烟草黑胫病及其综合防治 烟草黑胫病又称疫病，是我省烟草生产中主要病害之一。该病从苗期到成株期均可发生，主产烟区一般发病率为5％一25％，严重田块高达60％以上，甚至成片死亡，严重威胁我省的烟草生产。
植物组织培养的培养条件
植物组织培养的培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、PH值、渗透压等各种化学环境条件都会影响组织培养育苗的生长和发育。 一、温度(temperature) 因为温度是植物组织培养中的重要因素，所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在23～27℃之间进行，一般采用 25±2℃。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。但是，不同植物培养的适温不同。白鹤非的最适温度是20℃、月季是25～27℃、番茄是28℃。温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。 不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25%以下的高。桃胚在2～5℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3～5d，可得到无病毒苗。 二、光照(light) 组织培养中光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光照时间方面： 1、光照强度(light intensity) 光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。 2、光质(light wave) 光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，8周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15天后，在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细。 3、光周期(light period) 试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养，最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种的器官组织，在短日照下易分化，而
微藻培养条件研究
微藻培养条件浅析 摘要:微藻利用光和CO 合成蛋白质、糖类、脂类以及色素等大分子物质并放出O2，在人 2 类食品、保健、医药、环保和生物炼制领域具有广阔的应用前景。本文针对目前微藻培养中存在的生产成本高、产率低的问题，主要从营养盐方面入手,浅析了碳、氮、磷等营养元素对微藻生长的影响，并在此基础上，概述了开放式及封闭式两种微藻培养系统。 关键词：微藻；营养盐；培养系统 1引言 藻类是地球上最早进行光合作用的生物体，具有太阳能利用效率高、适应环境能力强等特点。微藻细胞富含蛋白质、多糖、脂类以及色素等，在食品、饲料、医药、精细化工及染料领域己得到广泛的应用。目前，由于培养技术不成熟导致的生产成本高、效率低是限制微藻产业化培养的主要因素。高效、低成本、规模化的微藻培养技术，是实现微藻产业化培养的关键。降低微藻生产成本主要有两种途径:一是降低培养原材料成本，二是提高产量。营养盐成本占微藻培养原料成本比重很大，是影响微藻生长及产物积累的重要因素。在微藻培养中，通过优化营养盐的种类，监控培养中营养盐的水平，能够提高藻细胞或目标产物的产量，同时提高营养盐的利用率，是高效、低成本、规模化微藻培养的基础。 2微藻概述 微藻是指一些微观的单细胞群体，是最低等的、自养的水生生物。微藻能够利用阳光和CO2进行光合作用，合成有机物质并释放出O2，是自然界中光合效率最高、生长最为迅速的原始生物种类之一，其种类繁多，分布广泛。微藻富含蛋白质、氨基酸、多糖、维生素、不饱和脂肪酸和色素等多种高附加值的生物物质，可以概括为以下四类:蛋白质、糖类、脂类、核酸及各种矿物质[1]。不同种类的微藻，各种组分的含量不同。 3营养盐对微藻生长的影响 碳、氮、磷等营养元素是微藻细胞合成的基础。微藻光合作用的底物为CO2和水，产物除了糖类之外，还合成蛋白质、核酸及脂类等一系列生物活性物质，因此，需要氮、磷等元素的参与。碳源、氮源、磷源以及一些微量元素的种类和供应水平，在一定程度上影响着微藻光合作用的能力和水平，从而直接影响微藻的生长。营养盐的形态会影响微藻的生长。Chu 等[2]分别在BBM培养基中添加0.1%的乙酸钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠作为碳源培养卷曲纤维藻（Ankistrodesmus convolutus），发现添加乙酸钠作为碳源有利于藻细胞的生长，而添加柠檬酸钠和碳酸氢钠作为碳源对藻细胞的生长没有促进作用。Berman等[3]采用N03-N，NH3-N 以及次黄嘿吟、尿素、赖氨酸等有机氮源培养微藻，发现当使用尿素作为氮源时，蓝藻的生长最快且氮源得率系数最高。 许多研究表明，培养基中碳源、氮源、磷源的水平是影响微藻营养组成的主要因素。微藻对碳源的需求量很大，碳源主要影响藻细胞生长和脂类、糖类等物质的积累。Tang等[4]研究了不同CO2浓度对斜生栅藻(Scenedesmyus obliquus)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)总脂含量的影响，发现高CO2水平(30%～50%)有利于总脂和不饱和脂肪酸的积累。然而，Chen等[5]研究异养小球藻(Chorella sorokiniana )在不同的碳氮比(C/N )下细胞内总脂含量和脂肪酸组成时发现:碳源限制或者氮源限制均能促进细胞内油脂合成，且前者更为
植物组织培养实验基本步骤。。
植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称
FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
鸡枞
山野菜鸡枞的开发利用 【综述】鸡枞又名鸡宗、鸡松、鸡脚菇、蚁枞等，是一种美味山珍，称之为菌中之王，其肉肥硕壮实，质细丝白，味鲜甜脆嫩，清香可口，可与鸡肉媲美，故名鸡枞。它含有钙、磷、铁、蛋白质等多种营养成份。鸡枞吃法很多，生熟炒煮作煲汤皆宜，滋味均极鲜美。其安全、营养、无公害,是出自最佳生态坏境无污染的食品。从生态坏境到原料的生产、加工、包装、储运等都经过卫生监督、环境监测等机构的严格监测。 （一）鸡枞简介 【学名】Collybia albuminosa （Berk.）Petch 【分类】真菌类担子菌纲伞菌目伞菌科 【别名】鸡枞蕈、鸡菌、鸡堫、鸡宗、鸡肉丝菇、伞把菌、鸡枞菌、鸡脚麟菇、蚁枞、伞把菇等。 【科属】真菌植物门真菌鸡的子实体 【形态特征】根据鸡枞的颜色和形态特点，分为黑皮、白皮、黄皮、花皮等许多类型。味道以黑皮（青皮）鸡枞最好。此外，还有鸡枞花等真菌的子实体，味道同鸡枞一样鲜美。田雯在《黔书》中写道："鸡枞菌，秋七月生浅草中，初奋地则如笠，渐如盖，移晷纷披如鸡羽，故名鸡，以其从土出，故名枞。"鸡枞是一种野生菌的名称。知道这个的，多半是云贵两省的人。7、8月份雨天过后，鸡枞就出来了，在黔西南及黔西南周边的地区是最多的，这个季节的兴义，菜市场里一定有山民用南瓜叶子托着一包一包的新鲜鸡枞叫卖，或是在产鸡枞的地方，省道国道边都会看到当地的山民将从山里采到得鸡枞摆在路边叫卖，一束一束地，有粗有细，形如鸡腿，颜色一般为棕灰，菌脚还糊着泥，这主要是为了保鲜。黔西南的鸡枞又分独鸡枞和窝鸡枞，独鸡枞就是生长出来只有单独的一朵的那种，而窝鸡枞生长则是成片的，故当地人管这种鸡枞叫窝鸡枞。独鸡枞不但难以寻觅而且数量稀少，又独鸡枞要比窝鸡枞香，所以独鸡枞比窝鸡枞价格更高，但是无论独鸡枞还是窝鸡枞煮成了汤以后，那一口鲜甜没什么能比，哪怕是真正的鸡汤。古人赵翼曾说鸡枞：“无骨乃有皮，无血乃有肉，鲜于锦雉膏，腴于锦雀腹”这个形容一点也不夸张。独鸡枞最好的还是伞盖开繁以后带有一种叫做鸡枞虫的那种，这时候的鸡枞老远就能闻到一种特殊的香味，这种鸡枞若是拿来煲汤的话，那就是极品中的极品了，但由于此种独鸡枞的保鲜时间极短，所以少有人能够品尝得到。无论独鸡枞还是窝鸡枞都不易保鲜，一旦被摘下来，味道就迅速坏了。如果当年杨贵妃喜欢吃的是鸡枞，那一定不会有“一骑红尘妃子笑”之说，鸡枞比荔枝更不容易保鲜，她哪里笑得起来！
胶质芽孢杆菌的培养条件研究
科技创新基金项目申报表项目名称：胶质芽孢杆菌培养条件的研究
一、项目基本情况 项目名称胶质芽孢杆菌培养条件的研究 项目类别自然科学类学术论文 研究期限5个月申请经费500元 项目简介 胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)是一种能分解硅酸盐矿物的细菌，也称为硅酸盐细菌。本项目通过从硅酸盐菌肥中分离获得试验菌株，通过形态鉴定，筛选获得胶质芽孢杆菌；利用单因子实验探讨培养碳源和氮源、温度、pH、装液量、不同接种量等条件对胶质芽抱杆菌培养的影响；分析比较得到胶质芽孢杆菌的最佳培养条件。为胶质芽孢杆菌菌肥的生产提供科学参考。
二、立论依据（项目的意义、现状分析、参考文献等） 项目的研究意义 胶质芽孢杆菌能够分解含钾硅酸盐矿物，因此以此菌剂为主要活性成分的生物钾肥在国内外被广泛地应用[1-4]。研究表明胶质芽孢杆菌能够分解土壤中的硅酸盐矿物，释放被矿物晶格包裹着的K离子和SiO2[5]。而且，土壤矿物K 一般占土壤全K的90 % -98 %[6]，实验也证明胶质芽孢杆菌对棉花等植物有明显的增产效果[7]。因此开发以胶质芽孢杆菌为主要成份的生物K肥具有很大的应用前景。作为微生物肥料，其在根际的定殖及在作物生长周期保持较多数量的成活，这是人工接种菌剂能否有效提高作物产量的重要因素。此课题通过对胶质芽孢杆菌的培养条件的研究，筛选出最适于胶质芽孢杆菌生长的条件。 通过对胶质芽孢杆菌发酵培养基的优化试验，我们可以找出最佳的适合于胶质芽孢杆菌生长的液体培养环境，提高原料的利用率，增加效益。对胶质芽孢杆菌生长条件改善之后，还能够为我们对于它的进一步研究提供很好的条件，如对矿物质的分解作用，处理活性淤泥[8]，处理污水，净化水质，多糖、有机酸和蛋白质等代谢产物的研究[9]等。 国内外现状分析 由于胶质芽孢杆菌在生产中的广泛应用，因此为降低成本，提高产量，许多人在菌体发酵方面进行了研究。李华的研究表明，在分别以葡萄糖、甘露糖、淀粉、蔗糖四种为碳源的培养液中细菌在葡萄糖中生长最快；在以鼓皮汁、豆饼粉汁、酵母膏、牛肉膏四种为氮源的培养液中，鼓皮汁为最佳氮源。另外他还认为金属离子、培养温度、pH、气液比也对菌株的生长有一定影响[10]。俄国学者Glukhova通过硅酸盐细菌在液体培养液中发酵实验发现，在以蔗糖为碳源，以铵盐为氮源时，代时最短，生物量最高[11]。Erygin则在接种前用磁场处理培养基，发现此处理后，经对照在生长速率、生物量方面均有较大增加[12]。Krinarii则发现芽孢杆菌核糖核酸酶的加入，会明显地促进营养细胞的生长和芽孢的萌发[13]。殷永娴的研究表明该菌为好氧细菌，摇床培养比静置培养的菌量多；在有氮培养基中的菌量明显多于无氮培养基，故生产菌肥应采用有氮培养基，而在淀粉培养基中可形成较多的芽孢，适于制干菌粉[14]。以上研究只涉及对培养基的碳、氮源的探究，未能从整个培养基的营养配比上进行探讨。本文通过从硅酸盐菌肥中分离筛选得到一株细菌，并通过单因子实验对其
组织培养的培养条件
组织培养的培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、PH值、渗透压等各种化学环境条件都回影响组织培养育苗的生长和发育。 一、温度（temperature) 因为温度是植物组织培养中的重要因素，所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在23～27℃之间进行，一般采用25±2℃。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。但是，不同植物培养的适温不同。白鹤非的最适温度是20℃、月季是25～27℃、番茄是28℃。温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。 不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25%以下的高。桃胚在2～５℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3～５d，可得到无病毒苗。 二、光照（light)
组织培养中光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光照时间方面： 1、光照强度（light intensity) 光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。 2、光质（light wave) 光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，8周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15天后，在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细。 3、光周期（light period) 试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养，最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种的器官组织，在短日照下易分化，而在长日照下产生愈伤组织，有时需要暗培养，尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。如红花、乌饭树的愈伤组织。 三、湿度（humidity)
鸡枞菌菌丝体液体培养对氮源的要求
鸡枞菌菌丝体液体培养对氮源的要求 发表时间：2012-03-22T15:40:29.930Z 来源：《教育学文摘》2012年3月总第51期供稿作者：李怡 [导读] 采用不同的液体培养基,在相同的温度和PH值下研究鸡枞菌人工培养的最适氮源，这为人工利用和栽培鸡枞菌提供了一条可能的途径。 李怡重庆市綦江县古南中学401420 摘要：采用不同的液体培养基,在相同的温度和PH值下研究鸡枞菌人工培养的最适氮源，这为人工利用和栽培鸡枞菌提供了一条可能的途径。 关键词：鸡枞菌液体培养氮源 鸡枞菌俗称“伞把菇”，属担子菌纲，伞菌目，口蘑科，蚁巢伞属，是一种营养丰富、风味独特的珍贵食用菌，自古以来就是名高誉重的厨珍。它的生长与白蚁有密切关系，生态习性较复杂，培养难度大，迄今为止对人工栽培技术没有得到确切的报道。长期以来，鸡枞菌的驯化栽培是野生食用菌驯化中难度最大的课题之一。 为了早日实现人工栽培以及为工业化生产提供科学依据，本文以鸡枞菌菌丝体生长所需的液体培养基的氮源要求进行了研究。 一、材料与方法 1.合成培养基 蔗糖3%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%，水1000ml，加入不同的氮源（分别用20种氨基酸单独培养，再选用最佳的一种进行定量测试，最后将20种氨基酸随机分为5组进行培养）。 2.测试方法 菌体干重的测定：发酵液经滤纸过滤，菌丝体在60℃烘干恒重，用电子天平称重。 3.方法 （1）菌种活化。先在原种中取出一环，接种在母种培养基中，22℃恒温培养5天，即活化。每次活化试管长度均为 15cm，培养基斜面生长度为6cm。 （2）接种量。往母种培养基加入5ml无菌水，洗下菌丝倒入装有45ml无菌水和玻璃珠的三角瓶中，充分振荡，打碎菌丝混匀。每次取出1ml菌悬液接入装有100ml液体培养基的三角瓶，即控制接种量在1%。 （3）培养。加完氮源后，分别用0.5N的盐酸和1N的NaOH调节PH至4.5，各取100ml，121℃湿热灭菌30min，置于22℃、145r/min振荡培养箱中恒温培养72h。重复3次。 二、结果与讨论 1.不同氮源下菌丝生长的结果（见表１） 从表1中可以看出,在以谷氨酸为单一氮源、浓度为0.3%的条件下,菌丝体的得率最高。 2.鸡枞在谷氨酸的不同浓度下生物量的比较（见表2） 从表2中可以看出，在以谷氨酸为单一氮源、浓度为0.37%的条件下，菌丝体的得率最高。也就是说在这种培养条件下，鸡枞菌菌丝体的代谢活动旺盛，将营养物质转化为自身细胞，而增加了个体体重。 3.鸡枞在随机组合的各组氮源中生物量的比较（见表3） 从表3中可以看出，在以亮氨酸0.05%、丝氨酸0.05%、谷氨酸0.093%、赖氨酸0.075%的组合为氮源的条件下，菌丝体的得率最高。
烟草常见病虫害及防治方法
烟草常见病虫害及防治方法 烟草是我国主要的经济作物之一，南北各省区广为栽培，烟草在种 植过程中，极易出现病虫害，且防治较难。而近几年随着植保无人机的 发展，烟草渐渐用上无人机施药。天鹰兄弟小编就来介绍一下烟草病虫 害防治的措施，给大家一些参考。 一、烟草黑胫病 危害特征 烟草黑胫病以侵染茎基部和根为主。 大田成株发病一般在茎基部呈现水渍状黑斑，可扩张到地上十几厘米，纵剖病茎可见髓部显黑褐色，呈片层状；茎基部受害后向髓部扩展，病株叶片自下而上依次变黄，大雨过后遇烈日高温，则全株叶片突然调
萎，然后枯死；黑胫病的感染可发生在中下部叶片上，受到感染的叶上会形成绿褐至黄色的大病斑（达10cm左右），状如“黑膏药”。 药剂防治：用68%精甲霜锰锌可湿性粉剂1000倍液、72.2%普力克水剂1000倍液或50%敌可松可湿性粉剂800倍液喷施、灌根。 二、烟草根黑腐病 危害特征 主要发生于烟株根系，使根呈黑色腐烂。 苗期至成株期均可受害。烟苗发病后，幼茎、子叶和根尖发黑、腐烂；重者病根全部变黑腐烂，这是该病的主要特征。病株地上部呈现生长缓慢，色黄，矮化。 药剂防治：发病初期，可选用：甲基硫菌灵；多菌灵；或福美双，每株l00~200ml浇灌防治。 三、烟草赤星病 危害特征 烟草赤星病主要在烟叶近成熟时开始发生，一般从烟株下部叶片开始自下而上逐步发展，初期呈水平扩散，以后垂直扩散，后期多发生于成熟叶片。 最初在叶片上出现黄褐色圆形小斑点，后扩大变成褐色、边缘明显、有同心轮纹的病斑，有黄晕。病斑中心有深褐色或黑色霉状物，天气干旱时，病斑质脆、易破。病害严重时，许多病斑相互连接合并，致使病斑枯焦脱落，进而造成整个叶片破碎而无使用价值。
微藻培养条件研究
微藻培养条件研究 【摘要】微藻因其特定的生理习性，在能源、环保、食品等领域有巨大的应用潜力，但目前大规模、高纯度培养微藻在实际中难于实现。因此，对微藻培养条件需要进行深入研究。本文根据近几年国内外对微藻的研究，对各种因子（N、P、光照、CO2等）对微藻生长过程及副产物产量的影响进行分析，为优化微藻培养条件改进垫定基础。 【关键词】微藻；培养条件 前言 微藻种类繁多、生长方式独特、产物丰富多样，使其在食品、医药、能源等领域有广泛的应用前景。但目前大规模、高纯度培养微藻在实际中难于实现。因此，对微藻培养条件需要进行深入研究。本文根据近几年国内外对微藻的研究，对各种因子（N、P、光照、CO2等）对微藻生长过程及副产物产量的影响进行分析，为优化微藻培养条件改进垫定基础。 1.微藻概况 微藻在陆地、海洋广泛分布，其生长周期短、速度快、繁殖能力强、个体较小，通常呈单细胞、丝状体或片状体，结构简单、以单细胞或集群生活，大部分能进行自养光合作用，少部分为异养生长，营水生、陆生、气生、共生的低等植物。微藻营养丰富、光能利用度高，可将H2O、CO2和无机盐转化为有机源，是地球有机资源的初级生产力。 2.培养条件对微藻生长繁殖的影响 2.1氮源对微藻生长的影响 2.1.1氮浓度对微藻的影响 谢仁荣通过单因子分析法测定不同浓度的KNO3对丛粒藻生长的影响，得出当KNO3浓度为0时，葡萄藻几乎无生长。随着KNO3浓度的提高，丛粒藻的生长速率逐渐增大；当KNO3浓度大于200mg/L时，继续增加KNO3的浓度，其生长速率增大已不太明显，但可延长葡萄藻的对数生长期，导致最后生物量的增加[1]。因此，在对数生长期添加适量氮源对获得较高的生物量是有利的。 2.1.2不同类型的氮源对微藻的影响 叶林超等研究了NH4HCO3、（NH4）2SO4、NaNO3、NH2CONH2、NH4C1和NH4H2PO4 6种氮源对小球藻生长的影响，得出在第3—5d时小球藻的生长指标达到最大值，添加NH4HCO3对小球藻生长的促进作用最明显，其细胞密度、