磁珠分选CD8+T细胞
1.显微镜下观察PBMC,生长良好。计数细胞为1.0×107个。以300g离心10min,完全弃
去上清。
2.加入2ml buffer重悬,再次洗涤,以300g离心10min,完全弃去上清。
3.加入40 ul buffer重悬PBMC。
4.加入10ul CD8+T细胞Biotin-抗体,充分混匀,并放在4℃培养10分钟。
5.加入30ul buffer。
6.加入20ul CD8+T细胞 MicroBead Cocktail。
7.混匀后放在4℃培养15分钟。
8.(可选)加入标记抗体,例如:10 ul CD8-FITC(#130-080-601),并在4℃暗箱中培养5分
钟。
9.加入2ml buffer 洗涤细胞,以300g离心10min,完全弃去上清。
10.加入500 ul buffer 重悬细胞。
11.用自动磁珠分选仪进行分选。