《现代生物学技术》实验指导

《现代生物学技术》实验指导手册

适用专业：保护区15

北京林业大学生物科学与技术学院

实验课程要求

（１）实验课前，请仔细预习实验，提前准备好实验中的相关知识如实验原理、实验仪器试剂、实验流程，做到心中

有数，实验前检查预习情况。

（２）实验课上，遵守各实验室的具体规定，注意人身安全和仪器的安全使用，严格按任课老师和试验老师的指导进

行实验。

（３）实验课上请带写有北京林业大学实验报告纸（统一A4格式大小纸张），在实验过程中有间隙时间可以用于实

验报告的完成。

（４）需要使用显微镜的实验，请按照学号使用，并填写使用记录。用毕请擦拭干净，低倍物镜或者空镜头对准通光

孔，降下物台，关闭计算机，盖好防尘罩。

实验一培养基配制及灭菌

一、实验目的

1、学习诱导烟草叶片愈伤组织和植株再生培养基的配置方法

2、学习培养基高压灭菌法

二、实验原理

相对高的生长素浓度有利于细胞增殖和不定根的分化，而相对高的细胞分裂浓度有利于不定芽的分化，生长素浓度与细胞分裂素浓度相当有利于愈伤组织的诱导。通过改变激素的种类和浓度，有效地调节培养组织的器官化。

三、实验用具及药品

1、仪器与器械：超净工作台、高压灭菌锅、光照培养箱、烧杯、三角瓶、培养皿、镊子、剪刀。

2、材料与试剂：烟草叶片、NAA储液0.05 mg/mL、6-BA储液0.05 mg/mL、MS基本培养基粉末、肌醇、蔗糖、琼脂。

四、实验方法及步骤

1、取少量的蒸馏水加入烧杯中。

2、按母液顺序和规定量，用移液管取母液，依次放入烧杯中。

3、细胞分裂素6-BA和生长素NAA等根据具体而定。愈伤诱导培养基吸取6-BA 0.5mg 和NAA 0.5mg，放入烧杯中。不定芽诱导培养基吸取6-BA 1.0 mg 和NAA 0.1 mg，放入烧杯中。

4、称取肌醇0.1g 、蔗糖30g，放入烧杯中。

5、定容至1000 mL。

6、用1M的NaOH调pH至6.3后，倒入三角瓶中。

7、称取琼脂7g，放入三角瓶。

8、用封口膜包扎瓶口，放入高压灭菌锅中，在121℃下灭菌15min。

9、灭菌后的培养基倒入平皿中，parafilm封板。

五、思考题

1. 是否所有激素都可以直接高压灭菌？

2. 思考培养基的硬度会受到哪些因素影响？

实验二叶片愈伤诱导及叶片再生培养

一、实验目的

学习并掌握叶片愈伤组织与叶片再生的方法与基本操作技术；

分析生长素和细胞分裂素对烟草叶片离体培养的作用，了解植株组织在离体培养条件下脱分化和再分化的特点。

二、实验原理

叶片再生：器官外植体如茎、叶等，可以诱导不定芽,一种是叶片背面接触培养基表面。再生形成完整植株。此外,从器官外植体也可以诱导出愈伤组织，经愈伤组织再分化成植株。受伤的叶片在无菌条件以及生长调节物质的作用下具有再生的能力,叶片再生是常用的器官发生途径之一。

愈伤诱导：植物细胞全能性，通过脱分化，使植物器官形成愈伤组织。

三、实验用具及药品

超净工作台、镊子、剪刀、高温消毒器、电磁炉、试管、培养皿等。已准备好的培养基。烟草等的组培苗。

四、实验方法及步骤

1. 第一种方法为沿组培苗叶片的垂直叶脉方向平行剪切2-4刀，均刚好剪断主脉为止，注意不要剪断这个叶片。第二种方法将叶片剪成0.5cmX0.5cm的小块。

2. 将剪切过的叶片水平放入上次已经配好的叶片再生培养基与愈伤诱导培养基中。

3. 封好瓶(皿)口、作好标记、放入培养室中进行培养(可暗培养)、观察。

4. 准备下次实验烟草转基因实验用的预培养培养平板(MS+BA 1.0mg/L+NAA 0. 1mg/L＋0.6%琼脂＋3%糖)及选择培养培养基(MS+BA 1.0mg/L++NAA 0.

1mg/L＋300 mg/L Cef+100 mg/L Kan +0.6%琼脂＋3%糖)，高压灭菌后以备下次实验使用。

6. 准备下次实验用的空瓶、无菌水及无菌滤纸的灭菌。

五、思考题及作业

1.观察几周后叶片的变化情况，统计愈伤组织诱导率、不定芽诱导率。

2.叶片培养必经愈伤组织阶段吗?

实验三农杆菌介导的目的基因转化

一、实验目的

通过农杆菌介导等基因转化方法获得转基因烟草植株。

二、实验原理

农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，整合型的根癌农杆菌Ti质粒是最常用的一种载体。在Ti质粒上有一段T区，T-DNA能从该质粒转移到敏感植物的核基因组中。T-DNA边界有25 bp正向序列可能接受某种酶识别切割，进而形成环状中间体。此外，Ti质粒上还有一个约50 bp的Virlence区，简称Vir区，约有十几个基因，Vir区不在T-DNA内，Vir基因产物是一种跨膜蛋白。可以接受植物信号的诱导而发生构象的改变，成为活性蛋白。其中VirA基因可能是决定Ti宿主范围的基因。根据Vir质粒的基本构造，通常认为由根癌农杆菌介导的外源DNA转移和转化要具备三个因素:1）位于农杆菌染色体上的Chra和Chrb基因，这两个基因细菌细胞对植物细胞的识别和吸附有关；2）T-DNA边界序列对于T-DNA整合到植物染色体的过程是必要的；3）Vir基因的活化可以启动DNA向植物细胞的转移。农杆菌介导的基因转移是双子叶植物中最为广泛而有效的遗传转化体系。

三、实验器具、材料和试剂

无菌烟草苗、根癌农杆菌EHA105、LBA4404或GV3101、含有目的基因的植物表达载体质粒、MS母液(大量元素、微量元素、铁盐、有机)、植物激素6-BA，NAA(0.1mg/m L)?、卡那霉素(50mg/m L)、头孢霉素(300mg/m L)、琼脂(5g/L)、白砂糖、限制性内切酶?、T4 DNA连接酶、凝胶DNA回收试剂盒、YEB培养基、无菌去离子水。

冰箱（-20°C、4°C）、离心机、摇床、水浴锅、培养皿、剪刀镊子、三角瓶、接种针、枪头、移液枪、滤纸等。

表1 YEB培养基配方（1000 mL）

药品名称称取量／g

牛肉膏 5

酵母提取物 1

蛋白胨 5

蔗糖 5

MgSO4·7H2O 0.493

注：用1N NaOH调节pH为7

四、实验方法及步骤

（一）农杆菌培养

1．农杆菌的活化

从-20度冰箱里取出保存的农杆菌，在无菌操作台上吸取少量放入YEB 液体培养基中或者划线培养，挑取单菌落接种到液体YEB培养基中，加入50mg/l 的Kan, 200 rpm，28°C摇菌过夜。需准备的物品及试剂:LB 液体培养基、灭菌的三角瓶(50-100m L)、灭菌的枪头。?

2．农杆菌的稀释及二次摇菌

农杆菌培养物稀释到液体MS 培养基中；二次摇菌需6-10 小时，OD600为0.2~0.5 时可用于转化。需准备的物品及试剂：灭菌的三角瓶、枪头、2ml 的离心管。

（二）转化烟草

1．培养基配置及准备

配置以下实验所用的培养基。培养皿、剪刀镊子等、滤纸等需要提前灭菌。2．预培养

取烟草无菌苗的幼嫩叶片用剪刀剪成0.5 cm×0.5 cm大小，接种于预培养培养基MS+BA1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L中2天，待切口处刚刚开始膨大时即可进?行农杆菌侵染。

3. 共培养

于超净台上将经预培养的烟草叶片在农杆菌稀释液中浸5-10 min, 期间轻微震荡，用灭菌的滤纸吸去多余菌液后, 继续放置在预培养培养基中。之于25 °C 条件下黑暗条件下共培养2-4天。

4．选择培养

将共培养的叶片转移至烟草再生培养基并附加300 mg/L头孢霉素（Cef）、100 mg/L 卡那霉素（Kan）。转移至光下在16 h 白天、8 h 黑夜的光周期和25°C 条件下选择培养。

5. 继代与生根

选择培养2~3 周后，将分化的抗性不定芽转入选择培养基中进行继代增殖，形成许多丛生芽。抗性芽生长至长1~1.5 cm时，从基部将芽切下，转移到含MS+ 300 mg/L Cef+50 mg/L Kan的生根培养基上诱导生根。约2-3 周后可见根的形成，检测后获得具有卡那霉素抗性的完整转基因植株。

五、思考题及作业

1. 观察农杆菌与烟草共培养中两者的生长情况（拍照观察）。

2. 哪些抗生素可以在基因转化中用于抑制农杆菌的生长，通常使用多大浓度？

实验四植物原生质体的分离、融合

一、实验目的

了解植物原生质体分离、融合的基本原理及其过程

二、实验原理

通过酶解法分离原生质体，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、果胶酶等能降解细胞壁成分，除去细胞壁。

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。在自然情况下，体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象，人工诱导的细胞融合开始于50年代。目前, 诱导细胞融合的方法有三种：病毒介导法、聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)介导法、电融合法。细胞融合目前已成为研究核质关系、体细胞的遗传和发育、免疫作用、肿瘤及细胞工程等的重要手段。

PEG由于含有醚键而具负极性，与水、蛋白质和碳水化合物等一些正极化基团能形成氢键。当PEG分子足够长时，可作为邻近原生质表面之间的分子桥而使之粘连。PEG也能连接Ca2＋等阳离子。Ca2＋可在一些负极化基才和PEG之间形成桥，因而促进粘连。在洗涤过程中，连接在原生质体膜上的PEG分子可被洗脱，这样将引起电荷的紊乱和再分布，从而引起原生质体融合。高Ca高pH由于增加了质膜的流动性，因而也大大提高了融合频率。洗涤时的渗透压冲击对融合也可能起作用。

三、实验器具、材料和试剂

1.实验器具：台式离心机、离心管、显微镜、天平、载玻片、滴管、盖片、200目滤网、小三角瓶等

2.实验材料：菠菜或者烟草

3.实验试剂：

酶液：

1％纤维素酶

1％果胶酶

0.7mol/L甘露醇

0.7mmol磷酸二氢钾

10mmol CaCl2·2H2O

pH6.8—7.0

●PEG融合液

40% PEG (MW1500－6000)

0.3 mol 葡萄糖

3.5m mol 二水合氯化钙

0.7mol 磷酸二氢钾

●13%洗液：

27.2 mg/L磷酸二氢钾

101.0 mg/L硝酸钾

1480.0 mg/L二水合氯化钙

246.0 mg/L七水合硫酸镁

0.16 mg/L碘化钾

0.025 mg/L五水合硫酸铜

13% W/V甘露醇

pH 6.0

●Ca洗涤液：

CaCl2·2H2O 0.1mol

山梨醇0.1mol

Tris 0.05mol

pH 10.5

四、实验方法及步骤

1.将菠菜叶撕去表皮，切成小块置于酶液中（若叶片不易撕下下表皮，可用锋利的解剖刀将叶片切成约0.5 mm宽的小条，放入酶液，每10 m L酶液约放2g叶片），在25℃—28℃黑暗条件下，酶解1～2小时，在显微镜下检查，直到产生

足够的原生质体。用200目网过滤除去未完全消化的叶片等残渣。

2.600 rpm条件下离心5分钟，弃上清液。

3.加入3～4m L13%的洗液，相同条件下离心2分钟，弃上清，留1m L洗液。

4.用滴管将混有原生质体的1 m L洗液吸出，轻轻铺于20％蔗糖溶液上（5ml离心管装3 m L 20％蔗糖溶液），在600 rpm条件下离心5～10分钟，由于密度梯度离心的作用，生活力强、状态好的原生质体悬浮在20％蔗糖溶液与13％的洗液之间，破碎的细胞残渣沉于管底。

5.用移液器轻轻将状态好的原生质体吸出（注意尽可能不要吸入下层的蔗糖溶液），放入另一干净的离心管中，加入4 m L 13％的洗液，600rpm离心2分钟，弃上清，用血球计数板调整原生质体密度为105－106之间。

6. 吸取1-2滴原生质体悬液滴入小培养皿，静置8—10分钟，使其停止流动，缓缓加2滴40％的PEG溶液，静置10分钟，逐渐加Ca洗涤液，使其混匀，并用吸水纸吸去多余水份，观察聚集细胞团的融合过程。

五、作业

1．什么是细胞融合？细胞融合的方法主要有哪些？

2．哪些因素会影响原生质体融合?

3．请图示实验的结果。

实验五动物细胞培养技术

一、实验目的

学习和初步掌握细胞冻存与复苏的基本方法和操作过程。

二、实验原理

细胞保存过程中，常用的是细胞冻存方法，可以将细胞置于-196oC的液氮罐中，需要时再进行复苏以用于实验。在一般低温条件下，活细胞内外冰的结晶可造成其机械损伤，且随着细胞处冰晶的增多，细胞出现脱水现象及盐类浓度上升等，对细胞造成损伤。通过向培养基中加入保护剂——终浓度5%-15%的甘油或者二甲亚枫，可以降低溶液的冰点，使细胞内水分在缓慢冻结条件下透出，减少冰晶的形成，避免细胞的损伤。细胞复苏时可以采用“快融”的方法，直接将装有细胞的冻存管投入40oC的水中迅速解冻。

三、实验仪器、材料和试剂

1. 实验仪器：-80℃冰箱，液氮罐，水浴锅、离心机。

2. 实验材料：冻存管，冻存盒，Eppendorf

3. 实验试剂：DMEM培养基（含10%胎牛血清和青霉素100U/mL、链霉素100μg/mL），磷酸盐缓冲液（PBS，NaCl 137 mmol/L，KCl 2.7 mmol/L，Na2HPO4 10 mmol/L，KH2PO4 2 mmol/L，pH=7.4），0.25%胰蛋白酶，冻存液（含10% DMSO），异丙醇，液氮

四、实验方法及步骤

（一）培养细胞的冻存

1.取待冻存的细胞用胰酶消化，用培养基将细胞冲洗下来。

2.将细胞悬液移入无菌离心管中，加盖，平衡后以800转/分离心10分钟。弃去上清液。

3.加入适量冻存液（10%的DMSO+90%培养基）混匀制成细胞悬液，细胞浓度调到105-107/mL。

4.将细胞悬液分装在无菌冻存管内，盖紧冻存管瓶盖，用胶布封好。

5.在冻存管上做好标记，放入冻存盒（装有异丙醇）中，放入-80℃冰箱放置24小时后迅速浸于液氮(-196℃)冻存。

（二）培养细胞的复苏

1. 从液氮中迅速取出所需冻存管，立即投入盛有40℃温水的有盖容器内，摇动

冻存管使其内容物完全融化成悬液。

2.800转/分离心10分钟，弃去上清液。用无血清的培养基悬浮，800转/分离心10分钟，弃去上清液。

3.加入新鲜培养基，转移到培养瓶中进行培养，置二氧化碳培养箱培养24小时，待大部分细胞贴壁后，更换新的培养基继续培养。

五、思考题

冻存液的作用是什么？

实验六柠檬酸摇瓶发酵及提取

一、实验目的

1、学习掌握柠檬酸（C6H8O7）液体发酵工艺

2、了解柠檬酸提取工艺

二、实验原理

生产柠檬酸用的黑曲霉菌在发酵时需要适量的氮源,辅料中有机氮源以米糠为最好,数皮次之,也可用无机氮源。提取采用钙盐法，其理论依据主要是在所提取的柠檬酸溶液中加入钙离子（如石灰乳等），形成柠檬酸钙沉淀、过滤，沉淀物再与浓硫酸反应生成硫酸钙沉淀，经过滤，滤液浓缩结晶便可得到柠檬酸。提取：中和（CaCO3）→酸解(H2SO4)→浓缩结晶。

1）2C6H8O7·H2O + 3CaCO3→Ca3(C6H5O7)2·4H2O + 3CO2↑+ H2O

2）Ca3(C6H5O7)2·4H2O + 3H2SO4 + 4H2O→2C6H8O7·H2O + 3CaSO4·2H2O

三、实验材料及用品

实验材料：黑曲霉（Aspergillus niger）、PDA培养基；发酵培养基（土豆200g 煮汁、蔗糖20g、NH4NO3 2g，KCl 0.15g，MgSO4 0.25g，水1000ml；pH5（总糖100 g/L；基础20 g/L +补糖80 g/L ））；40%蔗糖溶液;标定用NaOH标准溶液；酚酞指示剂；碳酸钙；10% 硫酸；无菌水等。

实验用品：培养皿，培养瓶，棉塞或纱布，接种环，酒精灯，电炉，小烧杯等。

四、实验步骤

1、斜面菌种制备（已备好）

将黑曲霉（Aspergillus niger）接种到PDA培养基上，28℃，培养3～4 d。

2、培养基和试剂配制及分装

按照配方配制培养基，每小组2瓶，每瓶100 mL，瓶口装填棉塞或8层纱布；灭菌：将培养基置于0.08Mpa条件下，20 min。准备一瓶无菌水。

40%蔗糖溶液：配制200 mL，分装于2个250 mL三角瓶。

标定用NaOH标准溶液：0.1429～0.1430 mol/L，配制200 mL，装蓝盖瓶。

酚酞指示剂：0.1g溶于250 mL 70%～90%酒精，装蓝盖瓶。

3、制备孢子悬液及接种（以小组为单位）

向每支斜面菌种加入3 mL无菌水，用接种环刮菌苔表面或用无菌tip头轻轻吹打制备孢子悬液；将悬液接入灭菌并冷却至室温的培养基。

注：勿接入过多孢子，否则菌丝过于浓密，影响产酸和后处理中的过滤。

4、摇瓶发酵、补料及参数检测

摇瓶条件：200 rpm，32℃；发酵4天

补料：发酵48 h后需要补充糖分，每瓶（100 mL）加入灭菌40%蔗糖液27ml。参数检测：接种后每24 h取样测定、记录发酵液pH。

5、发酵液酸度测定

酸度：是指100 mL发酵液所含柠檬酸的克数。

方法：取发酵液滤液或离心液1mL，以酚酞为指示剂，用标准NaOH溶液滴定至淡粉红色，所消耗的NaOH毫升数即为发酵液酸度。

6、柠檬酸提取

（1）菌丝过滤

发酵液经2～4层纱布过滤（如需要可再用滤纸过滤一次）或经离心（菌丝球很小的过滤太慢）取滤液，测量滤液体积，将发酵液倒于小烧杯，置70℃水浴加热。加热的作用：1）终止发酵；2）使蛋白变性凝固，降低发酵液黏度；3）使菌体中的柠檬酸释放。

（2）中和

根据酸度测定结果计算出滤液中所含柠檬酸克数，并计算出与柠檬酸反应所需的CaCO3的量，称取CaCO3。（C6H8O7·H2O分子量210.14，Ca3(C6H5O7)2·4H2O 分子量570.50，CaCO3，分子量100.1，硫酸分子量98，比重1.84。例：1g柠檬酸→0.714g碳酸钙→1.357g柠檬酸钙→3.8 mL 10% 硫酸）。

趁热慢慢将CaCO3加入发酵液中，轻轻摇动烧杯，反应至不再有气泡产生，调节pH6.0～6.5。用滤纸过滤，得白色柠檬酸钙；柠檬酸钙结晶呈成簇的针状。如果发现所得结晶有杂色（如发黄），可将柠檬酸钙结晶从滤纸上刮至小烧杯，加适量水，洗后再次过滤。

（3）酸解

将柠檬酸钙结晶从滤纸上刮至小烧杯，加适量水调成“糊”，将小烧杯放85 ℃水浴中加热（在此温度下各种变体石膏的溶解度均最小，并有利于形成片状的半水石膏，便于过滤）。

根据计算，向小烧杯中慢慢加入所需10% H2SO4，边加边轻轻摇动烧杯，使反应进行彻底。将反应产物过滤，将滤液收集到大试管（过滤时可将试管插在试管架上），滤液即为柠檬酸溶液，用于下一步浓缩结晶。滤纸上的白色物为硫酸钙结晶，显微镜下呈片状或针状。

（4）浓缩与结晶

将大试管中的柠檬酸液倒入小烧杯，置电炉（加石棉网）上加热，煮沸浓缩。待观察到浓缩液中有少许白色晶体出现（此时已为过饱和，浓缩液易向外喷溅），即可停止加热，令浓缩液冷却；在冷却过程中，柠檬酸逐渐从浓缩液中结晶析出。用滤纸过滤，得柠檬酸结晶；柠檬酸结晶显微镜下呈针状。

五、思考题：

1、何为柠檬酸酸度？如何测定？

2、如何从发酵液中提取柠檬酸（原理及步骤）？

实验七PCR法克隆目的基因

一、实验目的

通过PCR 法分离克隆目的基因；掌握PCR、凝胶电泳、DNA 回收纯化、PCR 产物与T载体连接、连接产物转化、重组子筛选等一系列基因克隆相关的技术。

二、实验原理

利用PCR法获取目的基因：PCR，聚合酶链式反应的缩写，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。这项技术是由穆里斯等人于1988年发明，为此，穆里斯于1993年获得了若贝尔化学奖。其用于基因克隆的基本原理为，基于已知序列或已知同源基因序列，设计基因特异引物或简并引物，以DNA 或cDNA为模板进行PCR扩增，扩增产物电泳后回收纯化，与T载体连接，将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞, 经抗性筛选和PCR检测、质粒酶切鉴定获得重组子。

三、实验仪器、材料和试剂

1. 仪器耗材：PCR仪、电泳装置、离心机、恒温箱、水浴锅、摇床、凝胶成像仪、移液器、PCR管、离心管、吸头、研钵和杵子、培养皿等

2. PCR 反应试剂(Taq DNA polymerase, 10×PCR Buffer，2.5mM dNTPs, Primers) 1×TAE, CaCl2, 无水乙醇、LB 培养基，RNA提取试剂盒，反转录试剂盒、质粒DNA提取试剂盒，DNA marker, T-Vector，T4-DNA ligase，质粒DNA提取试剂盒，限制性核酸内切酶

四、实验步骤

（一）GFP基因的克隆

1．按以下(表1)次序，将各物质加入一只无菌的0.2 mL 离心管中:

表1. 反应体系

10X 扩增缓冲液 5 μL

4×dNTP(每种浓度为2mM) 5 μL

引物1 (表2) 2 μL

引物2 (表2) 2 μL

模板DNA 1 μL

ddH2O34μL

Taq DNA 聚合酶 1 μL (2－3U)

总体积50 μL

注：体系可减半为25μL

表2. 引物

基因名引物名位置引物序列（5’—3’）

GFP 引物1上游ATGGTAGATCTGACTAGTAAA

引物2下游TCACACGTGGTGGTGGTG

2、混匀，于94℃ 5 分钟，

3、94℃变性反应30s

58℃退火反应45s

72℃延伸反应60s

共循环反应35 轮，

4、72 ℃延伸反应7 分钟，

5、4 ℃保存

5、1％琼脂糖凝胶电泳检测结果（目的片断约为850bp）

（二）回收

1、从琼脂糖凝胶上切下所需DNA片段，放入1.5 ml Eppendorf管中

2、加入3倍体积（约400ul）的溶胶液(6mol/L NaI)

3、60℃水浴5min，其间轻摇Eppendorf管数次使胶完全融化

4、取一个离心柱，套上收集管，将溶液转移到离心柱中，室温静置5min

5、离心8000rpm数秒，弃收集管的溶液

5、加入250μl漂洗液(20mmol/Tris.Cl.PH=7.4,1mmol/lEDTA，100mmol/lNaCl,加入等体积的无水乙醇)。

6、8000rpm离心数秒，弃收集管的溶液，

《模拟电子技术实验》实验指导书

北方民族大学 Beifang University of Nationalities 《模拟电子技术实验》课程指导书 北方民族大学教务处

北方民族大学 《模拟电子技术实验》课程指导书 编著杨艺丁黎明 校审杨艺 北方民族大学教务处 二〇一二年三月

《模拟电子技术实验》课程是工科类大学二年级学生必修的一门实践类课程。实验主要设备包括模拟电子技术实验箱、信号发生器、示波器、数字万用表、交流毫伏表和直流电源等。 课程教学要求是：通过该课程，学生学会正确使用常用的电子仪器，掌握三极管放大电路分析和设计方法，掌握集成运放的使用及运算放大电路各项性能的测量，学会查找并排除实验故障，初步培养学生实际工程设计能力，学会仿真软件的使用，掌握工程设计的概念和步骤，为以后学习和工作打下坚实的实践基础。 《模拟电子技术实验》课程内容包括基础验证性实验，设计性实验和综合设计实践三大部分。 基础验证性实验主要包括仪器设备的使用、双极性三极管电路的分析、负反馈放大电路的测量等内容。主要培养学生分析电路的能力，掌握电路基本参数的测量方法。 设计性实验主要包括运算电路的实现等内容。主要要求学生掌握基本电路的设计能力。 综合设计实践主要包括项目的选题、开题、实施和验收等过程，要求学生能够掌握电子产品开发的整个过程，提高学生的设计、制作、调试电路的能力。 实验要求大家认真做好课前预习，积极查找相关技术资料，如实记录实验数据，独立写出严谨、有理论分析、实事求是、文理通顺、字迹端正的实验报告。 本书前八个实验项目由杨艺老师编写，实验九由丁黎明老师编写。全书由丁黎明老师提出课程计划，由杨艺老师进行校对和排版。参与本书课程计划制订的还有电工电子课程组的全体老师。 2012年3月1日

细胞生物学实验指导(植物版)

细胞生物学实验 实验一不同显微镜的使用及细胞一般形态结构的观测[实验目的] 通过本实验，使学生巩固普通光学显微镜的使用，学习相差显微镜、暗视野显微镜和荧光显微镜的使用方法，学习显微测量及显微摄影的操作方法，增强对细胞的形态和真实大小的感性认识。 通过本实验操作，要求学生掌握细胞形态结构的基本观测方法与技术，为进一步的细胞生物学研究打好基础。 [实验原理] 应用显微镜的成像原理(详见翟中和等主编《细胞生物学》，第三章第一节)，同时借助显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺，两尺配合使用，进行测量和运算，观察细胞形态，得出细胞的大小。 该实验完成需时6学时。 [实验材料、试剂和仪器] 一、仪器 普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、显微拍摄系统、37℃温箱、镜台测微尺、目镜测微尺等。 二、材料 洋葱根尖切片标本，念珠藻永久装片，兔肝细胞标本，夹竹桃花丝毛细胞，人口腔上皮细胞等。 三、试剂 生理盐水，10μg/mL罗丹明123染液（溶于甲醇，避光于4℃保存） [实验步骤] 一、暗视野显微镜观察夹竹桃花丝毛细胞 1、取一张清洁的载玻片，滴上一滴生理盐水。用镊子轻轻夹下一根夹竹桃花丝，置生理盐水中，盖上盖玻片，略微压片，用滤纸条吸去盖玻片四周多余的水分。 2、将上述装片置于显微镜载物台上，在10×物镜下找到夹竹桃花丝毛细胞清晰的图像。 3、换上暗视野聚光器，调节至最佳位置，通过聚光器上的调中螺旋调节聚光器的中心位置，得到最好的暗视野图像效果。 4、观察夹竹桃花丝毛细胞内部的显微结构和细胞质环流现象，并拍照。 5、换用高倍物镜观察时，要换用与高倍镜相匹配的暗视野聚光器，重复以上调节步骤。 二、相差显微镜观察夹竹桃花丝毛细胞 1、取一张清洁的载玻片，滴上一滴生理盐水。用镊子轻轻夹下一根夹竹桃花丝，置生

细胞生物学常用研究方法

Southern杂交: 是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。 将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。 RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。 Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。 扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。 细胞显微分光光度计：用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。 免疫荧光技术：将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。 电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。 Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。 放射自显影技术：放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。 核磁共振技术：可以直接研究溶液和活细胞中相对分子质量较小(20，000 道尔顿以下)的蛋白质、核酸以及其它分子的结构，而不损伤细胞。 DNA序列分析：在获得一个基因序列后，需要对其进行生物信息学分析，从中尽量发掘信

组织学与胚胎学实验报告

组织学与胚胎学 实验报告 专业班级 学号姓名 教师实验室 遵义医学院组织胚胎学教研室

目录 前言 (2) 实验一显微镜的正确使用和维护 上皮组织、固有结缔组织 (3) 实验二软骨与骨、血液 (7) 实验三肌组织、神经组织 (10) 实验四循环系统、免疫系统 (13) 实验五内分泌系统、眼和耳※ (17) 实验六消化系统 (20) 实验七呼吸系统、泌尿系统 (24) 实验八生殖系统、皮肤 (28) 实验九胚胎学总论 (31) ※实验十心脏发生 (34) ※为护理学、药剂、药检、影像医学等专业免修内容

前言 （一）书写实验报告，是组织学和胚胎学实验课教学的重要内容，也是对学生进行能力训练的基本手段。为了帮助学生了解、掌握组织学和胚胎学实验报告的规范式书写要求，克服过去使用单页实验报告纸易丢失、难保存、考核内容单一等缺点，我们根据《组织学和胚胎学实验教学大纲》的要求，帮助学生掌握人体细微结构和人胚发育的基本理论、基本知识及相应的基本技能，开发学生的智力，培养和训练学生独立观察、独立思考和独立工作的能力，提高学生分析问题和解决问题的能力。通过实验报告使用，希望能对本课程的学习起到积极作用。 （二）绘图是组织学实验的重要环节，认真观察组织切片后，准确绘出简图，加深对组织结构的理解，便于复习记忆，绘图时要注意各部结构之间的大小比例关系，一般用红、兰铅笔描绘常规染色的结构，用红色描绘嗜酸性结构，如：细胞质和纤维；用兰色描绘嗜碱性结构：如细胞核。注意色调的深浅，笔道均匀，正确反映镜下的结构特点，图中注字要规整；引线要平行、对齐；最后在图下注明标本名称、染色方法和放大倍数。 （三）每次课实验报告要求在课内完成，下课前交实验指导教师批改。本实验报告是评定学生平时成绩的重要依据，请同学们妥善保管，期末统一收回给予评分。 （四）本实验报告可供我院各专业本、专科医学生及研究生学习组织学和胚胎学实验课时选用，以训练和培养学生对实验内容的分析、整理、综合、归纳的能力，为今后的学习和科学研究，书写科研论文打下一定的基础。 （五）组织学与胚胎学考分比例：实验部分：35 % 理论部分：65% 2006年8月

模拟电子技术实验

实验2 单管放大电路 1.1 实验目的 (1) 熟悉电子元件和模拟电路实验箱。 (2) 掌握放大器静态工作点的调试方法及其对放大器性能的影响。 (3) 学习测量放大器Q点，A v，r i，r o的方法，了解共射极电路的特性。 (4) 学习放大器的动态性能。 1.2 实验仪器与设备 示波器，信号发生器，交流毫伏表，数字万用表，模拟/数字电路实验箱。 1.3 预习要求 (1) 熟悉分压式偏置放大器的工作原理，了解元器件参数对放大器性能的影响。 (2) 熟悉放大器的动态及静态测量方法。 1.4 实验内容与步骤 （一）、连接直流电路，测量静态工作点 1．连接直流电路 (1)用万用表判断实验元件（三极管、电解电容、电阻、电位器）及实验所用导线的好坏。 (2) 连接分压式偏置放大器的直流通路，电路如图1-1所示，将R W的阻值调到最大100K。 图1-1 分压式偏置单管放大器的直流通路

（3）调节直流稳压电源电压输出调节旋钮，使其输出+12V(方法：用万用表直流电压档监测直流稳压电源输出端口，调节旋钮使万用表显示＋12 V) 2．调节静态工作点 接通稳压电源（方法：用红色导线连接直流稳压电源的正极与R W R C的公共点，用黑色导线连接直流稳压电源的负极与R B2 R E的公共点），调节R W使U CE=1/2 U CC，V BE=0.7V 测量晶体管各极对地电压U B、U C和U E，将测量结果和计算所得结果填入表1-1中。 U CE =U C-U E U BE =U B-U E I C = I E= U E /R E 表1-1 静态工作点实验数据 （二）、连接完整电路，测量动态参数 1.连接完整电路 图1-2 分压式偏置单管放大器原理图 注意：电解电容的极性。 3．电压放大倍数的测量 （1）接通函数信号发生器电源，调节函数信号发生器的频率调节旋钮和幅度调节旋钮，使函数信号发生器输出频率 f =1 kHz ，输出电压U S=10 mV （有效值）的交流信号（若输出不能达到10 mV，可调节输出衰减旋钮20～60 dB和幅度调节旋钮即可）。 注意：信号发生器输出交流信号的频率通过数码管显示即可读出来，输出交流信号的幅度必须使用晶体管毫伏表检测方可读出电压有效值。 （2）将信号发生器、示波器、晶体管毫伏表按图1-3接入。信号发生器的正极、示波

细胞生物学实验指导(精)

细胞生物学实验指导 细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步,所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。 实验一普通显微镜及其使用（装片观察） 一、目的要求： 1、掌握显微镜的构造、油浸系的原理、使用方法、保护要点。 2、参观了解其他各类显微镜。 二、材料：普通光学显微镜及其他显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸。 三、方法和步骤： 1、介绍普通光学显微镜的构造 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、调焦螺旋。 光学部分：接目镜、物镜、反光镜、聚光器。 2、油镜的原理及使用方法 原理：油镜头的晶片细小，进入镜中的光线亦少，光线经聚光器，通过载玻片进油镜时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射而损失，使视野更暗。在载玻片和油镜之间加上和玻璃折光系数相同的香柏油，光线直接进入镜头，不发生折射，视野明亮，便于观察。 3、如何维护显微镜：机械部分的维护，光学部分的维护。 4、注意事项： （1）观察油镜载片时，先在载片上有菌影的地方滴1-2滴香柏油，然后放载物台中央，眼侧面看，慢慢降低油镜浸入香柏油中，镜头几乎接触标本。再用左眼在接目镜观察，同时慢慢旋动粗螺旋提起镜筒至能模糊看到物象时，再转动微调螺旋，直至看清晰为止。注意镜头离开油，就不能看清，重新按刚才的步骤进行。 （2）油镜使用过后，立即用擦镜纸擦拭镜头，如油渍已干，则可用香柏油粘二甲苯擦拭镜

头，再用干净擦镜纸擦去二甲苯。 5、观察几种细菌标本片。 6、示教看相差显微镜和荧光显微镜。 四、作业及思考题： 1、油镜的原理是什么？ 2、光线强弱如何调节？与哪些部件有关？ 实验二、细胞膜的渗透性 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 实验原理 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血，由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。 实验用品 一、器材 50ml烧杯, 试管（1～10cm）, 10ml移液管, 试管架。 二、材料 羊血。 三、试剂0.17mol/L氯化钠，0.17mol/L氯化胺，0.17mol/L醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠，0.12mol/草酸胺，0.12mol/硫酸钠，0.32mol/葡萄糖，0.32mol/甘油，0.32mol/乙醇，0.32mol/丙酮。 实验方法 一、羊血细胞悬液 取50ml小烧杯一个，加1份羊血和10份0.17mol/L氯化钠，形成一种不透 明的红色液体，此即稀释的羊血。

细胞生物学实验指导

细胞生物学实验指导

细胞生物学实验指导目录 一．显微镜的使用 实验一、几种光学显微镜的使用 实验二、参观电子显微镜及生物超薄切片标本制备 二．细胞形态结构 实验三、细胞大小的形态观察——测微尺的使用 实验四、细胞活体染色技术 实验五、植物细胞骨架光学显微观察 实验六、胞间连丝观察 三．细胞化学 实验七、鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet反应 实验八、DNA显色的观察——Feulgen反应 实验九、固绿染色法鉴定细胞内酸性蛋白与碱性蛋白 实验十、多糖及过氧化酶的显示 实验十一、核仁组成区的银染显示与观察 四．细胞生理 实验十二、细胞膜的通透性 实验十三、细胞电泳 五．细胞和组织培养技术 实验十四、植物原生质体的分离和融合 实验十五、植物细胞的培养与观察 实验十六、动物细胞融合 实验十七、动物细胞的培养与观察 六．细胞化学成分的分离 实验十八、细胞器的分离、纯化——细胞分级分离 实验十九、荧光的细胞化学测定 实验二十、细胞活力的鉴别 实验一几种光学显微镜的使用

一、实验目的 了解几种光学显微镜的结构、工作原理、主要用途和使用方法；掌握使用普通显微镜提高分辨力的方法。 二、实验原理 (一)基本原理 一般实验室经常使用的光学显微镜都是由物镜、目镜、聚光器和光阑组成，普通显微镜它们的放大原理及光路图如下： AB物体．A1B l第一次成像，A2B2第二次成像，O l目镜．O2物镜， F1为O l的前焦点，F2为O2的前焦点 各种光学显微镜的光学放大原理基本相同，各种特殊用途的光镜不过只是在光源、物镜、聚光器等方面作了改动，或在其它方面增设了某些特殊的设备。 (二)几种光学显微镜 l、普通光学显微镜： 普通光学显微镜也叫复式显微镜，是最常见，最简单的显微镜。它适于观察一般固定的，有色的透明度较高的标本。其最大分辨力一般为0.2微米，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。 2、暗视野显微镜： 暗视野显微镜是以丁达尔现象(Tyndall phenomenon)(即光的微粒散射现象)为基础设计的,它使用了特殊的聚光器进行斜射照明,因光源中心束不直入物镜，所以视野黑暗，而被检细胞器因斜射照明发生衍射和反射，所以发亮可见。暗视野显微镜可用增加光照方法增加物体与背景的反差，因而可观察到0．2—0．004微米直径的微小粒子，但它分不清被检物的细微构造，它常用于观察物体的存在与运动。而暗视野显微镜与普通光学显微镜的区别，主要在于聚光器的不同，致使照明方法有别。确切地说，称暗视野显微镜为暗视野照明更为贴切。它是照明光线仅照亮被检样品而不进入物镜。使视野背景暗黑，样品明亮的照明方法。 3、相差显微镜： 相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位是指在某一时间上，光的波动所达到的位置。

2011.12.30(修改)电路与模拟电子技术实验指导书

电路与模拟电子技术 实验指导书 王凤歌 （修改于2011.12.30） 1

实验一直流网络定理 一、实验目的 1、加深对基尔霍夫和迭加原理的内容和适用范围的理解。 2、用实验方法验证戴维南定理的正确性。 3、学习线性含源一端口网络等效电路参数的测量方法。 4、验证功率输出最大条件。 二、实验属性（验证性） 三、实验仪器设备及器材 1、电工实验装置（DG011T、DY031T、DG053T） 2、电阻箱 四、实验要求 1. 所有需要测量的电压值，均以电压表测量的读数为准，不以电源表盘指示值为准。 2. 防止电源两端碰线短路。 3. 若用指针式电流表进行测量时，要识别电流插头所接电流表时的“ +、－”极性。倘若不换接极性，则电表指针可能反偏（电流为负值时），此时必须调换电流表极性，重新测量，此时指针可正偏，但读得的电流值必须冠以负号。 4.用电流插头测量各支路电流时，应注意仪表的极性，及数据表格中“ +、－”号的记录。 五、实验原理 1、基尔霍夫定律是集总电路的基本定律。它包括电流定律和电压定律。 基尔霍夫电流定律：在集总电路中，任何时刻，对任一节点，所有支路电流的代数和恒等于零。即 ∑I = 0 基尔霍夫电压定律：在集总电路中，任何时刻，沿任一回路内所有支路或元件电压的代数和恒等于零。即 ∑U = 0 2、迭加原理是线性电路的一个重要定理。 独立电源称为激励，由它引起的支路电压、电流称为响应，则迭加原理可简述为：在任意线性网络中，多个激励同时作用时，总的响应等于每个激励单独作用时引起的响应之和。 3、戴维南定理指出，任何一个线性含源一端口网络，对外部电路而言，总可以用一个理想电压源和电阻相串联的有源支路来代替，如图1-1所示，其理想电压源的电压等于原网络端口的开路电压U OC，其电阻等于原网络中所有独立电源为零值时的入端等效电阻R0。 图1-1 2

模拟电子技术实验报告

姓名：赵晓磊学号：1120130376 班级：02311301 科目：模拟电子技术实验B 实验二：EDA实验 一、实验目的 1.了解EDA技术的发展、应用概述。 2. 掌握Multisim 1 3.0 软件的使用，完成对电路图的仿真测试。 二、实验电路

三、试验软件与环境 Multisim 13.0 Windows 7 (x64) 四、实验内容与步骤 1.实验内容 了解元件工具箱中常用的器件的调用、参数选择。 调用各类仿真仪表，掌握各类仿真仪表控制面板的功能。 完成实验指导书中实验四两级放大电路实验（不带负反馈）。 2.实验步骤 测量两级放大电路静态工作点，要求调整后Uc1 = 10V。 测定空载和带载两种情况下的电压放大倍数，用示波器观察输入电压和输出电压的相位关系。 测输入电阻Ri，其中Rs = 2kΩ。 测输出电阻Ro。 测量两级放大电路的通频带。 五、实验结果 1. 两级放大电路静态工作点 断开us，Ui+端对地短路

2. 空载和带载两种情况下的电压放大倍数接入us，Rs = 0 带载： 负载： 经过比较，输入电压和输出电压同相。 3. 测输入电阻Ri Rs = 2kΩ，RL = ∞ Ui = 1.701mV

Ri = Ui/(Us-Ui)*Rs = 11.38kΩ 4. 测输出电阻Ro Rs = 0 RL = ∞，Uo’=979.3mV RL = 4.7kΩ，Uo = 716.7mV Ro = (Uo’/Uo - 1)*R = 1.72kΩ 5. 测量两级放大电路的通频带电路最大增益49.77dB 下限截止频率fL = 75.704Hz 上限截止频率fH = 54.483kHz 六、实验收获、体会与建议

细胞生物学实验指导书09年

实验一普通光学显微镜的构造和使用 一、目的要求 1了解显微镜的基本构造和使用方法 2 掌握油镜的原理和使用方法 二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 1．显微镜的基本构造 光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。 2．显微镜的放大倍数和分辨率 放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力3．油镜的使用原理 当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 三、器材 1．永久切片 2. 溶液或试剂：香柏油、二甲苯。 3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸等。 四、操作步骤 1．观察前的准备 （1）显微镜的安置，检查零件是否齐全，镜头是否清洁。 （2）调节光源 2．显微镜观察

（1）低倍镜观察 （2）高倍镜观察 （3）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。3．显微镜用毕后的处理 观察完毕，上升镜筒，用擦镜纸和二甲苯清洗镜头，后将镜体全部复原。 五、思考题 1．用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间滴加什么油？起什么作用？ 2．为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？ 实验二胞间连丝的观察 一、实验目的 观察植物细胞的胞间连丝，加深对胞间连丝功能的认识． 二、实验原理 植物细胞的细胞壁上有许多原生质的细丝，称胞间连丝。相邻细胞的胞间连丝相互联接，在细胞间的物质运输与信息传递中起桥粱作用，并使细胞的各种生理活动协调一致，使植物体成为统一的有机体。用合适的植物细胞为材料，经简单处理，即能方便地看到胞间连丝。 三、实验材料 红辣椒表皮细胞临时装片、柿胚乳细胞间胞间连丝切片 四、实验步骤

模拟电子技术实验

实验一共射极单管放大电路的研究 1. 实验目的 （1）学会放大器静态工作点的调试方法，分析静态工作点对放大器性能的影响； （2）掌握放大器电压放大倍数、输入电阻、输出电阻及最大不失真输出电压的测试方法； （3）熟悉常用电子仪器及模拟电路实验设备的使用。 2. 实验设备与器材 实验所用设备与器材见表1.1。 表1.1 实验4.1的设备与器材 序号名称型号与规格数量备注 1 实验台1台 2 双踪示波器0～20M 1台 3 电子毫伏表1只 4 万用表1只 5 三极管1只 6 电阻1kΩ/0.25W 1只R e 7 电阻 2.4kΩ/0.25W 2只R S、R c、R L 8 电阻20kΩ/0.25W 1只R b1、R b2 9 电阻500kΩ/0.25W 1只R b2 10 铝电解电容10μF/25V 2只C1、C2 11 铝电解电容50μF/25V 1只C e 3. 实验电路与说明 实验电路如图1.1所示，为电阻分压式工作点稳定单管放大器实验电路图。它的偏置电路采用R B1和R B2组成的分压电路，并在发射极中接有电阻R E，以稳定放大器的静态工作点。当在放大器的输入端加入输入信号u i后，在放大器的输出端便可得到一个与u i相位相反，幅值被放大了的输出信号u0，从而实现了电压放大。安装电路时，要注意电解电容极性、直流电源正负极和信号源的极性。 图1.1 共射极单管放大器实验电路

I c/mA U ce/V u0波形失真情况管子工作状态 2.0 (5) 测量最大不失真输出电压的幅度 置R C＝2.4kΩ，R L＝2.4kΩ，调节信号发生器输出，使U s逐渐增大，用示波器观察输出信号的波形。直到输出波形刚要出现失真而没有出现失真时，停止增大U s，这时示波器所显示的正弦波电压幅度，就是放大电路的最大不失真输出电压幅度，将该值记录下来。然后继续增大U s，观察输出信号波形的失真情况。 5. 实验总结与分析 （1）用理论分析方法计算出电路的静态工作点，填入表1.2中，再与测量值进行比较，并分析误差的原因。 （2）通过电路的动态分析，计算出电路的电压放大倍数，包括不接负载时的A u、A us以及接上负载时的A u、A us。将计算结果填入表1.3中，再与测量值进行比较，并分析产生误差的原因。 （3）回答以下问题： ①放大电路所接负载电阻发生变化时，对电路的电压放大倍数有何影响？ ②怎样用测量信号电压的方法来测量放大电路的输入电阻和输出电阻？ （4）心得体会与其他。

细胞生物学实验指导

实验一显微镜的结构及使用 [实验目的] （一）熟悉显微镜的结构及各部件性能。 （二）掌握显微镜的使用方法。 （三）了解显微镜的维护方法。 [实验原理] 虽然显微镜的目镜和物镜的结构很复杂，但它的作用相当于一个凸透镜，其成像原理和光路图如图1所示，被检物体AB放在物镜（O1）下方的1—2倍焦距之间，则在物镜（O1）后形成一个倒立的放大实像A1B1，这个实像正好位于目镜（O2）的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛的明视距离处，即25cm,使所看到的物体最清晰，也就是说虚像A2B2是在眼球晶状体的两倍焦距之外，通过眼球后在视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3。 [实验器材]擦镜纸字母装片羊毛交叉擦片普通光学显微镜二甲苯香柏油 三内容与方法： 普通光学显微镜(Microscope)的外形和结构因类型不同略有差异，但基本结构和功能是相似的。（图2） （一）微镜的基本结构及功能：光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分构成。1.机械部分： （1）镜座：位于底部的金属座。一般为马蹄形，用以支持和稳定整个镜体。 （2）镜柱：镜座与镜臂相连的短柱。 （3）镜臂：镜柱上方弯曲部分，是取用显微镜时握拿的部位。 （4）镜筒：在镜臂的上方倾斜的金属园筒，上端装有目镜、下端转折处装有棱镜，使光线转折450。其上有一固定螺钉将镜筒连接于镜臂上方。 （5）调节器：在镜柱两侧有大小两个螺旋，大螺旋为粗调节器，转动时能使载物台快速升降。调节范围较大，适于低倍镜调焦用。小螺旋为细调节器，转动是载物台仅缓慢升降，调节范围较小，适于调节物象的清晰度。此外，在右侧粗调节器内侧有一窄环，称粗调松紧调节轮，用以调节粗调节器的松紧度。向外转时偏紧，向内转时偏松。左侧粗调节器内侧有一粗调限位调节环凸柄，向上推紧时，镜台上的最高点被固定（这两个环一般不需调节）。（6）旋转盘：又称物镜转换器，安装在镜筒下端，为一可旋转的圆盘，上有4个圆孔，

模拟电子实验思考题及答案 学时

设备的使用 1、示波器的使用 0-20MHz范围内的信号都可测量。 三个校准旋钮顺时针拧到底； 五个按钮全要释放； 触发源要与输入通道一致；双通道输入时（DUAL），则触发源CH1和CH2都可； “LEVEL”旋钮的使用（波形水平移动，不稳定时）； “垂直衰减旋钮”要合适，尤其是数值和波形的幅值相比小太多时，波形太大，出了屏幕，会看不到波形； Y轴校准方法； DC和AC档位的区别。 2、交流毫伏表的使用 测量10-2MHz正弦信号的有效值。频带比示波器小，比万用表大。 一定要选择合适的量程，否则误差大。比如：正弦信号Ui=1V，要选3V量程档，用30V的话，误差大！ 数字万用表 万用表 3、数字 测直流电压、电流信号，电阻值。 测交流信号不如交流毫伏表精度高，模拟电子技术实验室的交流信号有效值都用交流毫伏表测量！ 4、模拟万用表 在本实验室只用于单管放大时测静态工作点的电流I B和I C。 5、信号发生器 正弦信号输入是有效值，切记！要注意分清题目给的条件是指正弦信号的有效值（示例Ui =1V）和最大值（示例Ui m=1V）。 6、集成运算放大器的使用 +12V、地、-12V这三个电源必须接上，运放才能工作。同时注意要打开电源开关。

输入信号不是电源，切记！ 共地：“输入信号的地”、“示波器的地”一定要和“电源的地”可靠地接在一起。 开环过零检查运放的好坏。 比例运算电路要闭环调零减少误差。 实验板 7、单管放大电路 单管放大电路实验板 +12V和地要可靠连接； 共地：“输入信号的地”、“示波器的地”一定要和“电源的地”可靠地接在一起。 线要连好，不要落了接某些线。

组织学与胚胎学实验考试图及答案

组织学与胚胎学实验考试图及答案照片名称：14平滑肌 照片名称：15尼氏体 照片名称：16轴丘 照片名称：17郎飞结 照片名称：21淋巴小结 照片名称：19小静脉小动脉 照片名称：18毛细血管 照片名称：1单层柱状上皮 照片名称：22皮质 照片名称：23淋巴小结生发中心 照片名称：24脾白髓 照片名称：28皮肤 照片名称：27腺垂体 照片名称：26肾上腺皮质

照片名称：25甲状腺滤泡照片名称：29胃(四层) 照片名称：31主细胞 照片名称：30胃 照片名称：32壁细胞 照片名称：36粘液性腺泡照片名称：35潘氏细胞照片名称：34小肠绒毛照片名称：33小肠 照片名称：37浆液性腺泡照片名称：39胰岛 照片名称：40肝 照片名称：38胰腺 照片名称：44肺泡 照片名称：43肝门管区

照片名称：42肝血窦 照片名称：41中央静脉 照片名称：45肾小体 照片名称：46近曲小管（近端小管曲部）照片名称：48致密斑 照片名称：52生精小管 照片名称：51滤过屏障 照片名称：49足细胞 照片名称：56初级卵泡 照片名称：55精子 照片名称：54支持细胞 照片名称：53精原细胞 照片名称：60胚泡 照片名称：59卵丘

照片名称：58次级卵泡 照片名称：57原始卵泡初级卵泡照片名称：61胚泡 照片名称：62二胚层胚盘 照片名称：63二胚层胚盘 照片名称：64脐带 照片名称：3杯状细胞 照片名称：红细胞白细胞 照片名称：65胎盘 照片名称：5浆细胞 照片名称：7嗜酸性粒细胞 照片名称：6中性粒细胞 照片名称：4肥大细胞 照片名称：12骨骼肌 照片名称：10单核细胞

模拟电子技术实验指导书

河海大学文天学院 电子技术实验指导书 模拟电子技术 王飞 2014.2

实验一 晶体管单管放大电路 一、实验目的 1．学习放大电路静态工作点调试方法，分析静态工作点对放大电路性能的影响。 2．学习放大电路电压放大倍数及最大不失真输出电压的测量方法。 3．测量放大电路输入、输出电阻。 4．进一步熟悉各种电子仪器的使用。 二、实验原理 图1－1为电阻分压式静态工作点稳定放大电路，它的偏置电路采用R B1 = R W1 + R 3和R B2 = R W2 + R 4组成的分压电路，并在发射级中接有电阻R E = R 6，用来稳定静态工作点。当在放大电路输入端输入信号U i 后，在放大电路输出端便可得到与U i 相位相反、被放大了的输出信号U 0，实现了电压放大。R 1和R 2组成输入信号的分压电路，其目的是防止输入信号过大，损坏三极管。 图1－1 在电路中静态工作点为： CC B B B B U R R R U 2 12 += E E E BE B E R U R U U I = -= )(E C C CC CE R R I U U +-= 动态参数： 电压放大倍数k 3.3//50==-== R R R R U U A C be L C i U γβ

其中) mA () mv (26) 1(300E be I r β++= 输入电阻：若开关合上，即R 7短接 be B B i r R R r ////21= 输出电阻：5R R r C o == 放大电路输入电阻测试方法：若输入信号源U S 经R 1 = 5.1k 与C 1串联后再接到三极管 V 1的基极，测得U S 和'i U ，即可计算出1' ' R U U U r i S i i ?-= 输出电阻可用下式计算：L R U U r )1(0 '00-= 其中' 0U 为R L 未接入时（R L = ∞）U 0之值，U 0为接入R L 时U 0之值。 1．静态工作点的测试 1）静态工作点的测量 放大电路的静态工作点是指在放大电路输入端不加输入信号U i 时，在电源电压V CC 作用下，三极管的基极电流I B ，集电极电流I C 以及集成极与发射极之间的电压U CE 等。测量静态工作点时，应使放大电路输入信号U i = 0，即将信号源输出旋钮旋至零（通常需将放大电路输入端与地短接）。然后测出I C ，或测出R E 两端电压，间接计算出I C 来，I B = I C / β, U BE , U CE 用数字式直流电压表进行测量，在测试中应注意： a) 测量电压U BE 、U CE 时，为防止引入干扰，应采用先测量B 、C 、E 对地的电位后进行计算，即： U BE = U B – U E U CE = U C – U E b) 为了测量I B 、I C 和I E ，为了方便起见，一般先直接测量出U E 后，再由计算得到： E E E C R U I I == β C B I I = 总之，为了测量静态工作点只需用直流电压表测出U C 、U B 、U E 即可推算出。 2）静态工作点的调试： 放大电路的基本任务是在不失真的前提下，对输入信号进行放大，故设置放大电路静态工作点的原则是：保证输出波形不失真并使放大电路具有较高的电压放大倍数。 改变电路参数U CC 、R C 、R B 都将引起静态工作点的变化，通常以调节上偏置电阻取得一合适的静态工作点，如图1－1中调节R W1。R B1减小将引起I C 增加，使工作点偏高，放大电路容易产生饱和失真，如图1－2－a 所示，U 0负半周被削顶。当R B1增加，则I C 减小，使工作点偏低，放大电路容易产生截止失真，如图1－2－b 所示。U 0正半周被缩顶。适当调节R b1可得到合适的静态工作点。

组织胚胎学实验报告

组织学与胚胎学实验报告 专业临床五年制 班级 2012级8班 姓名路海燕 学号 6 电子信箱 完成日期

实验一上皮组织 报告主题：假复层纤毛柱状上皮 主题属性：指定 标本号：27# 染色：HE 材料：豚鼠气管横切片 教学要求：掌握假复层纤毛柱状上皮的侧面形态结构 杯状细胞 柱状细胞 纤毛 基膜 假复层纤毛柱状上皮（豚鼠气管切片，HE染色，40×10） 假复层纤毛柱状上皮由柱形细胞、梭形细胞、锥体形细胞和杯状细胞组成。光镜下杯状细胞最多，游离面有大量纤毛。所有细胞基底面均附着在基膜上，细胞高矮不一，核的位置高低不齐地排列在不同水平面上，垂直切面观形似复层，实为单层。此种上皮以保护功能为主。

实验二软骨和骨 报告主题：骨单位 主题属性：指定 标本号：6# 染色：Schmorl式染色 材料：脱钙骨切片 教学要求：掌握光镜下骨组织的结构特点 骨陷窝 骨单位骨板 中央管 骨小管 骨单位（骨切片，Schmorl氏法块染，40×10） 骨单位是长骨起支持作用的主要结构单位，光镜下可见骨单位中央为圆形的中央管，多层骨板围绕中央管呈同心圆排列，骨单位间还有一些不规则的间骨板，骨板之间或骨板中可见可见棕黄色的小腔，为骨陷窝。骨陷窝之间有细小的骨小管相连通，最内层的骨小管开口于中央管。

实验三肌组织 报告主题：心肌 主题属性：指定 标本号：12# 染色：HE染色 材料：人心肌切片 教学要求：掌握人心肌纤维纵断面和横断面的结构特点 闰盘 心肌（人心肌切片，HE染色，40×10） 心肌分布于心壁和邻近心脏的大血管壁上，光镜下可见心肌纤维走向无一定规则，心肌纤维连接处为闰盘，闰盘染色深。心肌纤维也呈明暗相间的周期性横纹。

参考答案--模拟电子技术实验指导书(2012)

参考答案--模拟电子技术实验指导书(2012)

实验一常用电子仪器的使用 一、实验目的 1．熟悉示波器，低频信号发生器和晶体管毫伏表等常用电子仪器面板，控制旋钮的名称，功能及使用方法。 2．学习使用低频信号发生器和频率计。 3．初步掌握用示波器观察波形和测量波形参数的方法。 二、实验原理 在电子电路实验中，经常使用的电子仪器有示波器、低频信号发生器、直流稳压电源、交流毫伏表及频率计等。它们和万用电表一起，可以完成对电子电路的静态和动态工作情况的测试。 实验中要对各种电子仪器进行综合使用，可按照信号流向，以连线简捷，调节顺手，观察与读数方便等原则进行合理布局，各仪器与被测实验装置之间的布局与连接如图1—1所示。接线时应注意，为防止外界干扰，各仪器的共公接地端应连接在一起，称共地。信号源和交流毫伏表的引线通常用屏蔽线或专用电缆线，示波器接线使用专用电缆线，直流电源的接线用普通导线。

图1—1 模拟电子电路中常用电子仪器布局图 1．低频信号发生器 低频信号发生器按需要输出正弦波、方波、三角波三种信号波形。输出电压最大可达20V（峰-峰值）。通过输出衰减开关和输出幅度调节旋钮，可使输出电压在毫伏级到伏级范围内连续调节。低频信号发生器的输出信号频率可以通过频率分档开关进行调节。 低频信号发生器作为信号源，它的输出端不允许短路。 2．交流毫伏表 交流毫伏表只能在其工作频率范围之内，用来测量正弦交流电压的有效值。为了防止过载而损坏，测量前一般先把量程开关置于量程较大位置上，然后在测量中逐档减小量程。 3．示波器 示波器是一种用途极为广泛的电子测量仪器，它能把电信号转换成可在荧光屏幕上直接观察的图象。示波器

模拟电子技术实验指导书

《模拟电子技术》实验教学指导书课程编号：1038181007 湘潭大学 信息工程学院电工与电子技术实验中心 2007年11月30日

前言 一、实验总体目标 通过实验教学，使学生巩固和加深所学的理论知识，培养学生运用理论解决实际问题的能力。学生应掌握常用电子仪器的原理和使用方法，熟悉各种测量技术和测量方法，掌握典型的电子线路的装配、调试和基本参数的测试，逐渐学习排除实验故障，学会正确处理测量数据，分析测量结果，并在实验中培养严肃认真、一丝不苟、实事求是的工作之风。 二、适用专业年级 电子信息工程、通信工程、自动化、建筑设施智能技术等专业二年级本科学生。 三、先修课程 《高等数学》、《大学物理》、《电路分析基础》或《电路》。 网络化模拟电路实验台：36套（72组） 主要配置：数字存储示波器、DDS信号发生器、数字交流毫伏、模块化单元电路板等。 六、实验总体要求 本课程要求学生自己设计、组装各种典型的应用电路，并用常用电子仪器测试其性能指标，掌握电路调试方法，研究电路参数的作用与影响，解决实验中可能出现各种问题。 1、掌握基本实验仪器的使用，对一些主要的基本仪器如示波器、、信号发生器等应能较熟练地使用。 2、基本实验方法、实验技能的训练和培养，牢固掌握基本电路的调整和主要技术指标的测试方法，其中还要掌握电路的设计、组装等技术。 3、综合实验能力的训练和培养。 4、实验结果的处理方法和实验工作作风的培养。

七、本课程实验的重点、难点及教学方法建议 本课程实验的重点是电路的正确连接、仪表的正确使用、数据测试和分析； 本课程实验的难点是电路的设计方法和综合测试与分析。 在教学方法上，本课程实验应提前预习，使学生能够利用原理指导实验，利用实验加深对电路原理的理解，掌握分析电路、测试电路的基本方法。

细胞生物学实验实验报告

细胞生物学实验 班级：生科142 姓名：旷江 学号：10143131 组号： 2 小组成员：旷江、韦立尧、莫霞指导老师：范立强、李鹏飞 华东理工大学 应用生物学系

摘要 本次细胞生物学实验通过细胞形态与结构的观察技术，细胞化学，细胞生理，细胞培养与分析，细胞周期分析，细胞成分分离与分析，细胞增殖与染色等技术对动植物细胞进行细胞形态结构的观察、细胞生理过程的研究、细胞培养与细胞分析、细胞冻存与复苏等，以此来研究动植物细胞的结构、功能和各种生命规律。 关键词：细胞增殖、细胞染色、冻存复苏、生理过程、形态结构

Abstract The cell biology experiment was carried out by cell morphology and structure observation technique, cytochemistry, cell physiology, cell culture and analysis, cell cycle analysis, cell fractionation and analysis, cell proliferation and staining. Observation of cell physiological processes, cell culture and cell analysis, cell cryopreservation and resuscitation, in order to study the structure of animals and plants, functions and a variety of laws of life. Key words: cell proliferation, cell staining, cryopreservation, physiological processes, morphological structur

(完整版)细胞生物学学习心得

细胞生物学学习体会 通过网络课程学习,有幸聆听到王金发教授对《细胞生物学》课程的讲授，使我不仅学到了细胞生物学专业新的知识与研究技术、方法,而且在教学方面也受益非浅。下面就我的学习谈一些体会。 一、全面学习了细胞生物学的专业知识 《细胞生物学》是一门包容量大、发展迅速的学科。内容涉及生物膜的结构与功能；内膜系统区室化形成及各种细胞器的结构与功能；细胞信号转导；细胞核、染色体以及基因表达；细胞骨架体系；细胞增殖及其调控；细胞分化、癌变及其调控；细胞的衰老与程序性死亡；细胞的起源与进化；细胞工程技术等多个方面。 (一)对细胞生物学的专业知识有了更深的认识。 1、细胞通讯方面 记得第一次听王老师的课就是讲授细胞的通讯，在多细胞生物中，细胞不是孤立存在的，而是生活在细胞社会中，它们必须协调一致，才能维持机体的正常生理机能，它们的协调是通过细胞通讯来完成的。细胞通讯是通过信号分子与受体的识别，从而在靶细胞内产生一系列反应的过程。信号分子有第一信使和第二信使之分，第二信使位于细胞内，由第一信使与受体识别后最先在胞内产生的，它主要与细胞内受体作用，所以受体也可分为表面受体和胞内受体。信号分子与受体的识别作用具有特异性。细胞信号传递所发生的反应有快速反应和慢速反应。快速反应是信号分子与受体作用后直接引起细胞内的一系列代谢反应；慢速反应则需要引起基因表达，再表现出各种代谢反应。细胞通讯过程是个复杂的过程，一个细胞的周围有上百种不同的信号分子，细胞要对这些信号分子进行分析，做出正确的反应。信号转换的研究在近年很热门，但进展缓慢，主要是因为信号转换的复杂性，不同信号的组合产生的效应是不一样的。 2、蛋白质的合成和分选机理 蛋白质的合成是在核糖体上，有两种合成体系，一种是在细胞质中游离的核糖体上，另一种是在膜旁核糖体上合成，它们合成的蛋白质将分布到不同的部