微波加热分光光度法在磷酸根含量测定中的应用
2002年 6月河南农业大学学报Jun. 2002第36卷 第2期Journal of Henan Agricultural University Vol.36No.2
文章编号:1000-2340(2002)01-0195-04
微波加热分光光度法在磷酸根含量测定中的应用
高 岐1,李玉华2,张泽志1
(11河南农业大学,河南郑州450002;21河南省医药学校,河南开封475001)
摘要:在密闭条件下,研究了微波加热后水中总磷酸根含量的各种影响因素,建立了快速测定其含量的新方法.讨论了微波功率、微波时间、酸度等因素对分析测定的影响.用高档功率微波加热6min,用分光光度分析法进行测定,结果与标准方法相对照,经t—检验法及F—检验法检验,没有显著性差异,多次加标回收率在97.9%～108%之间,相对标准偏差≤113%.关键词:磷酸根;交变磁场;微波加热;分光光度法
中图分类号:O656132 文献标识码:A
Application of microw ave heating spectrophotometry in the
determination of the total phosphate content
G AO Qi1,LI Y u2hua2,ZH ANG Z e2zhi1
(1.Henan Agricultural University,Zhengzhou450002,China;2.Medical School of Henan
Province,K aifeng475001,China)
Abstract:A new method was established to determine rapidly the total phosphate content in water sam ples,based on microwave heating under the pressure in a closed vessel,and by determing the various factors,and discussion was con2 ducted on the effect of microwave power,time,acidity on analysis determination.The microwave power was at top grade,and the time of microwave heating was6minutes.The determination was conducted by using the spectropho2 tometry,contrasting with standard method,and using t-test and F-test to check up the result,there was no sig2 nificant difference.The results showed the recovery rate is97.9%～108%,and RS D≤1.3%.
K ey w ords:phosphate;alternating magnetic field;microwave heating;spectrophotometry
磷是人体和生物体必需的营养元素之一,但水中磷含量过高(>0.2mg?L-1),则会使水体营养化富集,造成藻类及其它水生植物公害的过度繁殖,致使水质恶化,给水体带来异味,造成污染.水中的磷一般以无机和有机磷酸盐的形式存在,按水样中磷酸盐总量的标准分析法[1,2],需要在高压消毒器中,保持温度为120℃,加热30min处理样品,工作效率较低.微波是一种使分子在高频电磁场中发生剧烈振动、彼此相互摩擦、发生极化而达到加热作用的一种电磁波.样品通过对微波辐射的吸收,样品内的微观粒子可以产生4种类型介电极化[3,4],由于微波这种内部深层辐射的作用,大大加快了反应速度,缩短了测定时间.本试验利用微波技术,在微波炉内,用耐酸、碱腐蚀、耐高温(-180～250℃)的聚四氟乙烯密封生料带密封容器,对水样进行密闭微波消解后,将水体中存在的各种形态的有机磷和无机磷均转化为正磷酸根后进行测定,从而大大地缩短了样品前处理的时间,提高了分析速度,6min内可一次性完成近40个样品的消解工作,与标准方法相比,大大简化了操作方法,节省了人力、物力和时间.充分显示了微波技术在分析化学中的独特优点.
收稿日期:2001-10-16
基金项目:河南省科技攻关资助项目(961190320)
作者简介:高岐(1955-),男,河南开封人,河南农业大学副教授,从事分析化学方面的研究工作.
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1 材料与方法
1.1 主要仪器和试剂制备
声乐牌NN5250型微波炉(日本松下公司),721型分光光度计(上海第三分析仪器厂),SY Z —A 型石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏金坛医疗仪器厂),聚四氟乙烯密封带(广州永盛密封带有限公司).
钼酸盐溶液制备:将13g 钼酸铵[(NH 4)6M o 7O 24?4H 2O ]溶于100m L 水中,将0.35g 酒石酸锑钾[K S 2bC 4H 42O 7?1/2H 2O ]溶于100m L 水中,把钼酸铵溶液加到300m L 硫酸溶液(1+1)中,再加入酒石酸锑钾溶液,混合均匀,储存于棕色瓶中.过硫酸钾溶液:50g ?L -1.抗坏血酸溶液:100g ?L -1.磷贮备液:称取(0.2197±0.0001)g 于110℃干燥2h 后,在干燥器中放冷的磷酸二氢钾,溶解后,转入1000m L 容量瓶中,加水约800m L ,加硫酸溶液(1+1)5m L ,用水稀释至刻度,摇匀,此溶液含磷50.00mg ?L -1.磷标准溶液:将磷贮备液10.00m L 定容于250m L 容量瓶中,此溶液含磷2.0mg ?L -1,临用时配制.本试验所用试剂均为G R 或AR 级,所用水均为石英亚沸高纯水蒸馏器制备的二次蒸馏水.1.2 方法原理
在中性条件下,用过硫酸钾消解试样,将各种形态的磷转化为正磷酸根.在酸性介质中,正磷酸根与钼酸铵反应,在锑盐的存在下,生成磷钼杂多酸后,用抗坏血酸还原,生成蓝色配合物,该配合物对700nm 波长光吸收最多.1.3 试样的测定准确吸取水样25.00m L 于50m L 容量瓶中,加入过硫酸钾溶液4.00m L ,摇匀.用聚四氟乙烯密封带密封瓶口,用橡皮筋紧固,置于微波炉内转盘上,于高档功率微波加热6min ,冷却至室温,去掉密封带,用蒸馏水冲下密封带内壁附着试液于容量瓶中,加入1.00m L 抗坏血酸溶液,摇匀,30s 后,加入2.00m L 钼酸盐溶液,加水至刻度,摇匀.15min 后,在721型分光光度计上,以700nm 波长、3cm 比色皿进行测定,读取吸光度值,并由标准曲线上查得水样中的总磷量(m ),由下式求出样品中的PO 43-含量:
PO 43-含量/(mg ?L -1)=m ×3.066/V
式中,3.066—P 与PO 43-换算的化学因数;V —水样的体积/L.1.4 标准曲线的绘制
准确吸取磷标准溶液0,0.50,1.00,3.00,5.00,10.00,15.00m L 于洁净的50m L 容量瓶中,加水至25m L ,其余与待测试液同样处理,分别测定其吸光度,并绘制校准曲线,如图1所示
.
图1 校准曲线
Fig.1 Correction curve 2 结果与分析
2.1 微波功率对样品消解的影响
由于微波具有很强的穿透能力,对试样有非常有效地瞬时深层加热作用,样品通过对微波能的吸收,发生极化,使反应能顺利、快速进行完全.但若使用低功率微波,费时较长且难以消解完全,用高功率微波,可以大大缩短消解时间.作者对郑州市熊耳河水试样进行了不同微波功率的试验,消解时间为6min ,结果如表1所示.由表1可以看出,
用中高档功率微波消解6min 基本可消解完全,本试验采用高档功率6min.2.2 微波时间对样品消解的影响
于一定微波功率消解时,时间越长,则消解越完全.作者选用高档功率对郑州市熊耳河水试样进行了不同微波消解时间的试验,结果如表2所示.用高档功率微波消解5min ,即可基本可消解完全,本试验采用微波消解时间6min.2.3 消解容器和密封材料的选择
消解容器选用50m L 容量瓶,瓶口小,便于用生料带密封.消解完毕,不需转移消解液,冷却后,即可直接定容.用6～8层耐酸、碱腐蚀,耐高温的聚四氟乙烯生料带密封瓶口,还可起到一定的缓冲内压的作用,
第2期高 岐等:微波加热分光光度法在磷酸根含量测定中的应用197
表1 微波消解功率试验
T able1 Experiment of microw ave pow er
功率P ower
低档
Lower power
中档
M iddle power
中高档
M edium high power
高档
T op power
PO3-4含量/(mg?L-1)
C ontent
1.136 1.327 1.935 1.943
表2 微波消解时间试验
T able2 Experiment of microw ave time 时间/min
T ime
234567
PO3-4/(mg?L-1)
C ontent 0.7040.926 1.754 1.937 1.943 1.943
使消解得以平稳、顺利的进
行.若用玻璃塞密封,会因瓶
内压力过大而导致容量瓶炸
裂.容量瓶及生料带在使用
前,均需用稀硝酸浸泡后,依
次用自来水、蒸馏水冲洗干
净.
2.4 干扰离子及酸度对测
定结果的影响
砷、铬等离子对测定干
扰的排除及消解、显色反应
过程中酸度的控制,均按标准方法处理,结果理想.
2.5 测定结果及检验
对郑州轻工业学院家属院井水(试样1)、郑州市熊耳河水(试样2)、贾鲁河水(试样3)、金水河水(试样4),分别用微波加热方法和标准方法做了对照测定,并做了回收率试验,结果如表3所示.将测定结果按参考文献[5]进行的t检验及F检验,结果没有显著性差异,置信度为95%.
表3 PO3-4测定结果比较及回收率
T able3 Comp arison determination results and recovery
样品Sam ple 测定方法
M ethod
单次测得值
/(mg?L-1)
F ound
平均值及置信区间
Average and
con fidence interval
RS D
/%
加入量
/(mg?L-1)
Added
测得加入量
/(mg?L-1)
F ound
回收率
/%
Recovery
试样1 Sam ple1
标准方法0.6740.6680.687
0.674±0.006 1.30.490.53108 S tandard method0.6720.6810.662
微波方法0.6840.6870.693
0.681±0.006 1.30.490.52106 M icrowave method0.6680.6810.674
试样2 Sam ple2
标准方法 1.956 1.922 1.925
1.936±0.0160.820.490.4795.9 S tandard method 1.922 1.944 1.948
微波方法 1.959 1.927 1.954
1.943±0.0180.480.490.4897.9 M icrowave method 1.925 1.963 1.932
试样3 Sam ple3
标准方法 3.996 3.945 3.942
3.969±0.0180.650.490.50102 S tandard method 3.999 3.989 3.944
微波方法 3.978 3.981 3.948
3.965±0.0120.660.490.53108 M icrowave method 3.954 3.977 3.950
试样4 Sam ple4
标准方法 2.652 2.689 2.689
2.678±0.0090.740.490.51104 S tandard method 2.699 2.655 2.686
微波方法 2.622 2.659 2.678
2.681±0.0080.670.490.52106 M icrowave method 2.694 2.698 2.697
3 结语
由于微波加热消解样品具有快捷、方便、安全、节能、完全等特点,受到了越来越多的人们的重视.密闭微波消解样品的主要优点是时间短、耗能低、耗用试剂少、污染少且能防止易挥发组分的损失.利用微波加热消解测定磷酸盐时,应注意以下几个问题.
1)微波炉内可一次性同时放置近40个样品,因炉腔内中心有热点效应,为保证结果的精密度,炉盘中心不要放置样品.
2)微波消解样品时,炉盘中心要放置水150～200m L,以缓冲微波能.
3)用生料带密封瓶口,以6～8层为宜,若层数太少,会因其瓶内压力过大,冲破生料带而导致结果失败.
4)为使显色反应快速、完全,显色时的温度应为15～30℃,若低于15℃,可在20～30℃的水浴上显色15min.
198河 南 农 业 大 学 学 报第36卷
参考文献:
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[5] 张友楚.分析结果中系统误差存在的判据[J].化学通报,1984,(2):44-48.
超高产、优质、多抗小麦新品种
———豫麦68号荣获国际名牌产品
1 品种来源
国麦牌豫麦68号系河南农业大学农学院张清海等育成的小麦新品种,是用百农3217/豫麦3号∥冀8425418/豫麦10号复交F0经60C o辐射选育而成,原名豫农015,2000年9月经河南省农作物品种审定委员会审定,并命名为豫麦68号.该品种已通过植物新品种保护(专利),2001年11月在北京举办的2001中国国际农业博览会上被认定为名牌产品,是河南省省直农作物育种单位惟一获得此荣誉的新品种.
2 特征特性
豫麦68号属偏冬至弱春之间类型,生育期222d左右.幼苗半匍匐,叶色浓绿,耐寒性好.苗期长势旺,发育快,分蘖力较强,成穗率高.穗大粒多,长势壮,产量三要素构成为:成穗数610×106个?hm-2左右,穗粒数38粒,千粒重40g以上;株型紧凑,叶片上冲,芽鞘绿色,茎秆粗壮,弹性较好,一般株高78～82cm,个别年份可达90cm;成熟前,秆、叶、穗黄亮,抗干热风能力强;穗长方形,长芒、白壳,无茸毛;小穗排列适中,中部小穗一般结实4粒,个别5粒.护颖长方形,穗长达10cm以上.背明显,嘴锐形,颖壳松紧适中;子粒椭圆,粒色白,光泽亮,全玻璃质,腹沟窄浅;子粒粗蛋白(干基)15113%,容重814g?L-1,湿面筋3318%,干面筋1019%,沉降值4110m L,吸水率6210%,形成时间410min,稳定时间1012min;面包重量150g,面包体积887cm3,面包评分9116.该品种高抗条锈、秆锈和白粉病,中抗叶锈.对条锈病菌小种HY23和水213免疫,高抗条中30号和混合菌系.
3 产量表现
1995—1996年度参加河南省超高产春水组区域试验,7个试点汇总平均产量795415kg?hm-2,比对照豫麦18号增产2116%,居第1位.1996—1997年度继续参加河南省超高产春水组区试,9个试点平均产量788815kg?hm-2.1997—1998年度第3年参加河南省超高产春水组区试,8个试点平均产量673615 kg?hm-2.1998—1999年度参加河南省晚播早熟组生产试验,南片5个试点汇总,平均产量445312 kg?hm-2,比对照豫麦18号增产4183%,居第1位;北片6个试点汇总,平均产量656418kg?hm-2,比对照豫麦18号增产5106%,居第2位.1999—2000年度继续参加河南省晚播早熟组北片生产试验,11个点平均产量674215kg?hm-2,比对照豫麦18号增产6142%,居第1位.
4 栽培要点
适宜黄淮南片广大麦区种植,一般产量7500kg?hm-2,超高产水肥地产量可达9000kg?hm-2.播期一般10月10～20日,晚播可延迟到10月底.适期播量11215kg?hm-2,晚播时适当加大播量.应施足底肥,适量增加磷、钾肥,生育前、中期视苗情追施化肥,后期注意喷施微肥,并及时防治蚜虫等.于小麦扬花后5～7d用丰优素(河南省农科院小麦所化控室研制)进行喷洒,用量为300m L原液兑水30～40kg,喷洒以麦穗和上部叶片为主,一般可提高千粒重1～3g,灾害发生年份千粒重可提高5～7g;能减少子粒败育,增加穗粒数2～4粒;还可增加子粒全氮含量,有效改善小麦加工品质,增加面团稳定时间3～5min.
(国家小麦工程技术研究中心 刘万代)
第20章 比色法和分光光度法
第20章比色法和分光光度法 【20-1】将下列百分透光度值换算为吸光度： （1）1% （2）10% （3）50% （4）75% （5）99% 解：A＝2－lg T% （1）A=2－lg 1 = 2.000 （2）A=2－lg 10 = 1.000 （3）A=2－lg 50 = 0.301 （4）A=2－lg 75 = 0.125 （5）A=2－lg 99 = 0.0044 【20-2】将下列吸光度值换算为百分透光度： （1）0.01 （2）0.10 （3）0.50 （4）1.00 解：lgT%=2－A （1）lgT1%=2－0.01 = 1.99 T1%=97.7 % （2）lgT2%=2－0.10 = 1.90 T2%=79.4 % （3）lgT3%=2－0.50 = 1.50 T3%=31.6 % （4）lgT4% =2－1.00 =1.00 T4%=10.0 % 【20-3】有一有色溶液，用1.0 cm 吸收池在527 nm 处测得其透光度T = 60%，如果浓度加倍，则（1）T值为多少？ （2）A 值为多少？ （3）用5.0 cm 吸收池时，要获得T = 60%，则溶液的浓度为原来浓度的多少倍？ 解：A＝－lg T =εbc －lg 0.60 = 0.222 浓度增倍时： （1）lg T =－0.444 T= 36 % （2）A＝－lg T = 0.444 （3）1.0cm时：c1 = 0.222 5.0cm时：c2 = 0.222 c2/c1= 1.0 /5.0 = 0.2倍 【20-4】有两种不同浓度的KMnO4溶液，当液层厚度相同时，在527nm处透光度T分别为（1）65.0%，（2）41.8%。求它们的吸光度A各为多少？若已知溶液（1）的浓度为6.51×10-4mol·L-1，求出溶液（2）的浓度为多少？ 解：（1）A＝εbc =－lgT＝－lg 0.650 = 0.187 （2）A＝－lg 0.418 = 0.379 （3）当c1= 6.51×10-4 mol ? L-1时，
酸碱滴定练习题(1)
酸碱滴定练习题 一、单选题 1、用基准无水碳酸钠标定L盐酸，宜选用（）作指示剂。 A、溴钾酚绿—甲基红 B、酚酞 C、百里酚蓝 D、二甲酚橙 2、配制好的HCl需贮存于( )中。 A、棕色橡皮塞试剂瓶 B、塑料瓶 C、白色磨口塞试剂瓶 D、白色橡皮塞试剂瓶 3、用c（HCl）= mol?L-1 HCl溶液滴定c（NH3）= mol?L-1氨水溶液化学计量点时溶液的pH值为（） A、等于； B、小于； C、等于； D、大于。 4、欲配制pH=缓冲溶液应选用的一对物质是（） A、 HAc(Ka=×10-5)～NaAc B 、HAc～NH4Ac C、NH3?H2O (Kb=×10-5)～NH4Cl D、KH2PO4-Na2HPO4 ( )5、欲配制pH=缓冲溶液应选用的一对物质是： A、HAc(Ka=×10-5)～NaAc B 、HAc～NH4Ac C、NH3?H2O (Kb=×10-5)～NH4Cl D、KH2PO4-Na2HPO4 6、在酸碱滴定中,选择强酸强碱作为滴定剂的理由是（） A、强酸强碱可以直接配制标准溶液; B、使滴定突跃尽量大; C、加快滴定反应速率; D、使滴定曲线较完美. 8、(1+5)H2SO4这种体积比浓度表示方法的含义是（） A、水和浓H2SO4的体积比为1：6 B、水和浓H2SO4的体积比为1：5 C、浓H2SO4和水的体积比为1：5 D、浓H2SO4和水的体积比为1：6 10、用LHCl滴定L NA2CO3至酚酞终点，这里NA2CO3的基本单元数是（） A、 NA2CO3 B、2 NA2CO3 C、1/3 NA2CO3 D、1/2 NA2CO3 11、下列弱酸或弱碱（设浓度为L）能用酸碱滴定法直接准确滴定的是（） A、氨水(Kb=×10-5) B、苯酚(Kb=×10-10) C、NH4+ D、H3BO3(Ka=×10-10) 12、用L HCl滴定L NaOH时的pH突跃范围是，用L HCl滴定L NaOH的突跃范围是（） A、 B、 C、 D、 13、某酸碱指示剂的KHn=×105，则从理论上推算其变色范围是（） A、4-5 B、5-6 C、4-6 D、5-7 14、用NaAc?3H2O晶体，来配制PH为的HAC-NaAc缓冲溶液1升，其正确的配制是（）（Ka=×10-5）A、将49克NaAc?3H2O放入少量水中溶解，再加入50ml ２.0mol/LHAc溶液，用水稀释１升 B、将98克NaAc?3H2O放少量水中溶解，再加入50ml lHAc溶液，用水稀释至1升 C、将25克NaAc?3H2O放少量水中溶解，再加入100ml LHAc溶液，用水稀释至1升 D、将49克NaAc?3H2O放少量水中溶解，再加入100ml LHAc溶液，用水稀释至1升 17、用酸碱滴定法测定工业醋酸中的乙酸含量，应选择的指示剂是：（） A、酚酞 B、甲基橙 C、甲基红 D、甲基红-次甲基蓝 18、已知邻苯二甲酸氢钾（用KHP表示）的摩尔质量为 g/mol，用它来标定L的NaOH 溶液，宜称取KHP质量为（） A、左右； B、1g左右； C、左右； D、左右。 20、双指示剂法测混合碱，加入酚酞指示剂时，消耗HCl标准滴定溶液体积为；加入甲基橙作指示剂，继续滴定又消耗了HCl标准溶液，那么溶液中存在（） A、NaOH + Na2CO3 B、Na2CO3 + NaHCO3 C、NaHCO3 D、Na2CO3. 21、双指示剂法测混合碱，加入酚酞指示剂时，消耗HCl标准滴定溶液体积为；加入甲基橙作指示剂，继续滴定又消耗了HCl标准溶液，那么溶液中存在（） A、NaOH + Na2CO3 B、Na2CO3 + NaHCO3 C、NaHCO3 D、Na2CO3. 22、下列各组物质按等物质的量混合配成溶液后，其中不是缓冲溶液的是（） A、NaHCO3 和Na2CO3 B、NaCl和 NaOH C、NH3和NH4Cl D、HAc和NaAc 23、在HCl滴定NaOH时,一般选择甲基橙而不是酚酞作为指示剂,主要是由于（） A.甲基橙水溶液好; B.甲基橙终点CO2影响小; C. 甲基橙变色范围较狭窄 D.甲基橙是双色指示剂. 25、既可用来标定NaOH溶液，也可用作标定KMnO4的物质为（） A、 H2C2O4?2H2O； B、 Na2C2O4； C、 HCl；D H2SO4 。 26、下列阴离子的水溶液，若浓度(单位：mol/L)相同，则何者碱性最强（） A、 CN-(KHCN=×10-10)； B、 S2-(KHS-=×10-15，KH2S=×10-7)； C、 F-(KHF=×10-4)； D 、 CH3COO-(KHAc=×10-5)； 27、以甲基橙为指示剂标定含有Na2CO3 的NaOH标准溶液，用该标准溶液滴定某酸以酚酞为指示剂，则测定结果（） A、偏高 B、偏低 C、不变 D、无法确定
紫外分光光度法测定蛋白质含量
上海百贺仪器科技有限公司提供ｗｗｗ．ｓｏｕｔｈｈｋ．ｃｎ 紫外分光光度法测定蛋白质含量 摘要： 考马斯亮兰G250与蛋白质结合，在0－1000ug/ml范围内，于波长595nm 处的吸光度与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250 与蛋白质结合迅速，结合产物在室温下10分钟内较为稳定，是一种较好的蛋白 质定量测定方法。 1.实验部分 1.1仪器与试剂： Labtech UV POWER紫外分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250； 牛血清蛋白；超纯水。 1.2试液的制备： 牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备称取100mg牛血清蛋白置100ml 容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。 考马斯亮兰G250试剂称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙 醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。 2.结果与讨论 2.1校正曲线的绘制 准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml 分别加入到6只10ml试管中，然后用超纯水补充到0.1ml，各试管分别加入5ml 考马斯亮兰G250试剂，混合均匀后，即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度 为横坐标，吸光度为纵坐标绘制校正曲线如下图，校正曲线方程为 A=0.613556C+0.001008，R=0.9994。
上海百贺仪器科技有限公司ｗｗｗ．ｓｏｕｔｈｈｋ．ｃｎ 2.2精密度 配制0.6mg/ml牛血清蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的 相对标准偏差。 表1精密度测定结果 次数123456RSD% A0.26260.26220.26200.26280.26290.26260.13 2.3稳定性 取1mg/ml牛血清蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化 如下表2。 表2稳定度测定结果 时间（min）A1A2A3A平均 00.55110.55230.55160.5517 100.52040.51840.51680.5185 200.49100.49010.49030.4905 300.47650.47160.47210.4734 400.45240.44750.44400.4480 500.39820.39350.40310.3983 3.结论 该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定 的紫外分光光度法。
紫外分光光度法计算
第20章 吸光光度法 思 考 题 1. 什么叫单色光复色光哪一种光适用于朗伯－比耳定律 答：仅具有单一波长的光叫单色光。由不同波长的光所组成光称为复合光。朗伯--比耳定律应适用于单色光。 2. 什么叫互补色与物质的颜色有何关系 答：如果两种适当的单色光按一定的强度比例混合后形成白光，这两种光称为互补色光。当混合光照射物质分子时，分子选择性地吸收一定波长的光，而其它波长的光则透过，物质呈现透过光的颜色，透过光与吸收光就是互补色光。 3. 何谓透光率和吸光度 两者有何关系 答：透光率是指透射光强和入射光强之比，用T 表示 T = t I I 吸光度是吸光物质对入射光的吸收程度，用A 表示，A εbc =，其两者的关系 lg =-A T 4. 朗伯-比耳定律的物理意义是什么 什么叫吸收曲线 什么叫标准曲线 答：朗伯--比耳定律是吸光光度法定量分析的理论依据，即吸光物质溶液对光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。数学表达式为 lg A T εbc =-= 吸收曲线是描述某一吸光物质对不同波长光的吸收能力的曲线，即在不同波长处测得吸光度，波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图即可得到吸收曲线。 标准曲线是描述在一定波长下，某一吸光物质不同浓度的溶液的吸光能力的曲线，吸光度为纵坐标，浓度为横坐标作图即可得到。 5. 何谓摩尔吸光系数质量吸光系数两者有何关系 答：吸光系数是吸光物质吸光能力的量度。摩尔吸光系数是指浓度为 mol ·L ，液层度为1cm 时，吸光物质的溶液在某一波长下的吸光度。用ε表示，其单位 11cm mol L --??。 质量吸光系数是吸光物质的浓度为1g 1L -?时的吸光度，用a 表示。其单位 11cm g L --?? 两者的关系为 εM a =? M 为被测物的摩尔质量。 6. 分光光度法的误差来源有哪些 答：误差来源主要有两方面，一是所用仪器提供的单色光不纯，因为单色光不纯时，朗伯—比耳定律中吸光度和浓度之间的关系偏离线性；二是吸光物质本身的化学反应，其结果同样
酸碱滴定练习题(III)
酸碱滴定练习题（III ） 一、选择题 1.称取纯一元弱酸HA 1.250g 溶于水中并稀释至50mL ，用0.100mol·L －1NaOH 滴定，消耗NaOH50mL 到等量点，计算弱酸的式量为（ ）。 A. 200 B.300 C.150 D.250 2. 酸碱滴定突跃范围为7.0～9.0，最适宜的指示剂为（ ） A.甲基红（4.4～6.4） B.酚酞（8.0～10.0） C.中性红（6.8～8.0） D.甲酚红（7.2～8.8） 3.某酸碱指示剂的pK Hln =5，其理论变色范围是（ C ）pH A.2~8 B.3~7 C.4~6 D.5~7 4.酸碱滴定中选择指示剂的原则是（ ） A 指示剂的变色范围与化学计量点完全相符 B 指示剂应在pH=7.00时变色 C 指示剂变色范围应全部落在pH 突跃范围之内 D 指示剂的变色范围应全部或部分落在pH 突跃范围之内 5.下列弱酸或弱碱能用酸碱滴定法直接准确滴定的是（ ）。 A.0.1mol·L －1苯酚K a =1.1×10－10 B.0.1mol·L －1H 3BO 3 K a =7.3×10－10 C.0.1mol·L －1羟胺K b =1.07×10－ 8 D.0.1mol·L －1HF K a =3.5×10－4 6.下列各物质中，哪几种能用标准NaOH 溶液直接滴定 A.(NH 4)2SO 4(NH 3的K b θ＝1.8×10-5) B.邻苯二甲酸氢钾（邻苯二甲酸的2 K a θ＝2.9×10-6） C.苯酚（K a θ＝1.1×10-10） D.NH 4Cl(NH 3的K b θ＝1.8×10-5) 7.多元酸准确分步滴定的条件是（ ）。 A.K ai ＞10－5 B.K ai /K ai ＋1≥104 C.cK ai ≥10－8 D. cK ai ≥10－ 8、K ai /K ai ＋1≥104 8.在氨溶液中加入氢氧化钠，使：（ ）。 A. 溶液OH － 浓度变小 B. NH 3的K b 变小 C.NH 3的α降低 D. pH 值变小 9. 某碱样以酚酞作指示剂，用标准HCl 溶液滴定到终点时耗去V 1mL ，继以甲基橙作指示剂又耗去HCl 溶液V 2mL,若V 2＜V 1，则该碱样溶液是 A.Na 2CO 3 B.NaOH C.NaHCO 3 D.NaOH+Na 2CO 3
紫外-可见分光光度法测定有色溶液 (2)
紫外-可见分光光度法测有色溶液最大吸收波波长 一、实验目的 1.学习紫外-可见分光光度法的原理； 2.掌握紫外-可见分光光度法测定的实验技术； 3.了解掌握U-3010型紫外-可见分光光度仪的构造及使用方法。 二、实验原理 1.紫外-可见吸收光谱法(称紫外-可见分光光度法)以溶液中物质的分子或离 子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析法。根据最大吸收波长可做定性分析；根据朗伯-比尔定律（标准曲线法和标准加入法）可做定量分析。紫外-可见分光光度法定性分析原理：根据吸收曲线中吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状进行定性分析。 2.紫外-可见分光光度法定量分析原理，根据朗伯－比耳定律：A=εbc，当入 射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。 3.仪器由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示记录装 置。 三、仪器与试剂 日立U-3010型紫外-可见分光光度仪；吸量管；乙醇；待测溶液；烧杯等。 四、实验步骤 1.接通电源，启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器，预 热半小时。 2.在工作接口上选择测量项目为光谱扫描，设置扫描参数（起点：650nm，终 点：250nm，速度：中，间隔：1.0nm，单次扫描） 3.将两个均装有无水乙醇的1cm石英比色皿放入测量池中，进行基线扫描。 4.基线做好后，按下面的顺序进行操作：做Baseline→换样（换上待测样品置 于Sample池）→进入Analysis Method对相关的参数进行设定→Sample命名→Ready→Measure进行测量，寻找待测溶液的最大吸收波长，再在最大吸收波长处分别测定待测溶液的吸光度。
紫外可见分光光度法含量测定word版本
紫外可见分光光度法 含量测定
精品文档 【含量测定】照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。 1.仪器与测定条件：室温：____℃相对湿度：____% 分析天平编号：；水浴锅编号：； 紫外可见分光光度计编号：； 2.对照品溶液的制备： 取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液，即得。 3. 供试品溶液的制备： 取本品粉末(过三号筛)约______g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时。加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液至刻度，摇匀,即得。 4.标准曲线的制备： 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加水5ml、再精密加0.05％溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g，用0.2mol／L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释至100ml，即得)2ml，密塞，剧烈振摇，转移至分液漏斗中，放置30分钟。取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白。 5.测定法： 照紫外-可见分光光度法 (附录Ⅴ A），在nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量，计算，即得。 6.结果与计算 6.1 标准曲线制备： 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除
滴定分析练习题
# 第十二章滴定分析练习 一、选择题（单选题） 1. 根据有关数据，判断下列浓度为·L-1的弱酸或弱碱中，能被直接准确滴定的是（） (A) HF (pK a=(B) HCN (pK a= (C) NaAC (pK b= (D) NH4Cl (pK a= 2. 滴定管的读数误差为± mL。欲使读数的相对误差不大于%，使用50 mL的滴定管，则消耗滴定剂 的体积应为（） (A) 10mL(B)大于10 mL (C) 20 mL (D) 20~25 mL # 3. 以下关于偶然误差的叙述中，正确的是 ( ) (A)大小误差出现的几率相等 (B)正负误差出现的几率相等 (C)正误差出现的几率大于负误差 （D）负误差出现的几率大于正误差 4. 下列方法中可减、免分析测定中的系统误差的是 ( ) (A) 进行仪器校正 (B) 增加测定次数 (C) 认真细心操作 (D) 保持实验室温度、湿度稳定 】 5. 下列各表述中，最能说明偶然误差小的是 ( ) (A) 高精密度 (B) 与已知含量的试样多次分析结果的平均值一致 (C) 标准偏差大 (D) 仔细校正天平砝码和容量仪器 6. 今有 mol·L-1 HCl溶液1升，欲配制为 mol·L-1，需加入 mol·L-1HCl多少毫升( ) (A) 300(B) 150 (C) 100 (D) 200 7. 若动脉血的pH为，[HCO3-]=·L-1，已知pK a1=, pK a2=，则[H2CO3]为( ) (A) ×10-2mol·L-1 (B) ×10-3 mol·L-1 { (C) ×10-2 mol·L-1 (D) ×10-3 mol·L-1 8. 已知HCOOH的pK a=，由它及其共轭碱所组成的缓冲液能控制的适宜pH缓冲范围为（ ) (A) ~ (B) ~ (C)~(D) ~ 9. 采用酸碱滴定法，用NaOH标准溶液滴定mol·L－1等浓度的HCl和H3PO4的混合溶液，在滴定曲线 上，可能出现几个滴定突跃 (H3PO4的各级pK a为，，（） (A) 1 (B) 2 (C)3 (D)不能确定 10. 选择酸碱指示剂时可以不考虑的因素是（） (A) 滴定突跃范围(B) 指示剂的颜色变化和滴定方向
常用紫外分光光度法测定蛋白质含量
6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法 样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1) 2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2) (nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3) 反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。 为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。 计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白 氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。 二、双缩脲法（biuret法） （一）实验原理 双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。 此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 （二）试剂与器材 1. 试剂： （1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正
酸碱中和滴定练习题及答案
酸碱中和滴定练习题及答案 一、酸碱中和反应的概念 定义：用已知________ 酸（或碱）来测定_____________ 物质的量浓度的碱（或酸）的方法. 二、指示剂 （1）用已知浓度的强酸滴定未知浓度的强碱时若选用_酚酞，溶液由 ________ 色变__________ 色. （2）用已知浓度的强碱滴定未知浓度的强酸时若选用_酚酞，溶液由 ________ 色变__________ 色. 三、酸碱中和滴定的原理： （1）中和反应的实质：_________________________________________ （2）中和反应中量的关系：___________________________________ 四、中和滴定的误差分析（用标准液滴定待测液，待测液放在锥形瓶中） （1）装标准液的滴定管未用标准液润洗，则测得待测液的浓度偏 ___________ （2）装待测液的滴定管未用待测液润洗，则测得待测液的浓度偏________ （3）锥形瓶用待测液润洗，则测得待测液的浓度偏________ （4）滴定过程中锥形瓶中有少量待测溶液溅出则测得待测液的浓度偏 _____ （5）在酸碱中和滴定中润洗滴定管的目的是________________________ 五、选择题（基础） 1、把PH=3 （[H+]=0。001mol/L ）的HSO和PH=10的NaOH溶液混合，如果混合液的PH=7 贝U HSO 和NaOH 溶液的体积比是 A．1 ：1 B、1 ：10 C、1：2 D、1：20 2、混合0.1mol/L盐酸和0.05mol/L氢氧化钡溶液，配制成200mlPH=11的溶液，所需盐酸的体积是 A、9.9ml B、10.1ml C、99ml D、101ml 3、要准确量取25.00ml 的稀盐酸，可用的仪器是 A、25ml 的量筒 B、25ml 的酸式滴定管 C、25ml 的碱式滴定管 D、25ml 的烧杯 4、中和滴定时，用于量取待测液体积的仪器是 A、烧杯 B、量筒 C、滴定管 D、胶头滴管 5、用标准浓度的氢氧化钠溶液来滴定末知浓度的盐酸，在滴定操作时，盐酸应放在 A、锥形瓶中 B、烧杯中 C、滴定管中 D、量筒中 6、进行中和滴定时，事先不应该用所盛溶液洗涤的仪器是 A、锥形瓶 B、酸式滴定管 C、碱式滴定管 D、移液管 7、下列仪器中，没有“ 0”刻度线的是 A、量筒 B、温度计 C、酸式滴定管 D、托盘天平游码刻度尺 8、在室温下进行中和滴定，酸和碱恰好完全反应时，以下说法一定正确的是 A、参加反应的酸和碱的物质的量相等 B、参加反应的酸中氢离子的总量和碱中氢氧根离子的总量相等 C、反应后，混合液PH=7 9、中和滴定时需要润洗的仪器有 A、滴定管E、锥形瓶C、烧杯D、移液管 10、下列有关滴定的操作正确的顺序是 ①用标准液润洗滴定管②往滴定管中注入标准溶液③检查滴定管是否漏水④滴定 ⑤洗 涤
紫外可见分光光度法含量测定
【含量测定】照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。 1.仪器与测定条件：室温：____℃相对湿度：____% 分析天平编号：；水浴锅编号：； 紫外可见分光光度计编号：； 2.对照品溶液的制备： 取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液，即得。 3. 供试品溶液的制备： 取本品粉末(过三号筛)约______g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时。加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液至刻度，摇匀,即得。 4.标准曲线的制备： 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加水5ml、再精密加0.05％溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g，用0.2mol／L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释至100ml，即得)2ml，密塞，剧烈振摇，转移至分液漏斗中，放置30分钟。取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白。 5.测定法： 照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA），在nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量，计算，即得。 6.结果与计算 6.1 标准曲线制备：
对照品批号 纯 度 S 对照品来源 干燥条件 对照品称重W 对(mg) 各浓度点稀释倍数f 对 溶液浓度C 对(ug/ml) 吸光度A 对 线性回归方程 A=( )C ＋/-（ ） r ＝（ ） 计算公式： W S C f ?= 对对对 C 对= 6.2 样品测定： 水分Q 取样量W 样（g ） 样品稀释倍数f 样 样品吸光度A 样 样品平均吸光度A 样 浓度C(ug/ml) 含量X （%） 平均含量X （%） 计算公式：() %100Q 110W f C X 6 ?-???= 样样 样 X 1= X 2= 7.本品按干燥品计算，含总生物碱以西贝母碱(C 27H 43NO 3)计，不得少于0.050％。 结果: 规定 检验人： 检验日期： 复核人： 复核日期:
紫外分光光度法计算
第20章吸光光度法 1?什么叫单色光？复色光？哪一种光适用于朗伯一比耳定律？ 答：仅具有单一波长的光叫单色光。由不同波长的光所组成光称为复合光。朗伯--比耳定律应 适用于单色光。 2?什么叫互补色？与物质的颜色有何关系？ 答：如果两种适当的单色光按一定的强度比例混合后形成白光，这两种光称为互补色光。当 混合光照射物质分子时，分子选择性地吸收一定波长的光，而其它波长的光则透过，物质呈现透过光的颜色，透过光与吸收光就是互补色光。 3?何谓透光率和吸光度？两者有何关系？ 答：透光率是指透射光强和入射光强之比，用T表示T=X 10 吸光度是吸光物质对入射光的吸收程度，用A表示，A b e，其两者的关系 A lgT 4.朗伯-比耳定律的物理意义是什么？什么叫吸收曲线？什么叫标准曲线？ 答：朗伯--比耳定律是吸光光度法定量分析的理论依据，即吸光物质溶液对光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。数学表达式为 A lgT be 吸收曲线是描述某一吸光物质对不同波长光的吸收能力的曲线，即在不同波长处测得吸 光度，波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图即可得到吸收曲线。 标准曲线是描述在一定波长下，某一吸光物质不同浓度的溶液的吸光能力的曲线，吸光度 为纵坐标，浓度为横坐标作图即可得到。 5?何谓摩尔吸光系数？质量吸光系数？两者有何关系？ 答：吸光系数是吸光物质吸光能力的量度。摩尔吸光系数是指浓度为1.0 mol L,液层度为1em 时，吸光物质的溶液在某一波长下的吸光度。用&表示，其单位L mol 1 cm 1。 质量吸光系数是吸光物质的浓度为1g L 1时的吸光度，用a表示。其单位L g 1 cm 1 两者的关系为 e M a M为被测物的摩尔质量。 6. 分光光度法的误差来源有哪些？ 答：误差来源主要有两方面，一是所用仪器提供的单色光不纯，因为单色光不纯时，朗伯一比耳定律中吸光度和浓度之间的关系偏离线性；二是吸光物质本身的化学反应，其结果同样
酸碱滴定法测试题
酸碱滴定法测试题 姓名＿＿＿＿＿＿得分＿＿＿＿＿＿ 一、选择题（40%） 1.称取纯一元弱酸HA 1.250g溶于水中并稀释至50mL，用0.100mol·L－1NaOH滴定，消耗NaOH50mL到等量点，计算弱酸的式量为（） A. 200 B.300 C.150 D.250 2. 酸碱滴定突跃范围为7.0～9.0，最适宜的指示剂为 A.甲基红（4.4～6.4） B.酚酞（8.0～10.0） C.中性红（6.8～8.0） D.甲酚红（7.2～8.8） 3.某酸碱指示剂的pK Hln=5，其理论变色范围是（）pH A.2～8 B.3～7 C.4～6 D.5～7 4. 配制好的HCl需贮存于( )中。 A.棕色橡皮塞试剂瓶 B.塑料瓶 C.白色磨口塞试剂瓶 D.白色橡皮塞试剂瓶 5.下列弱酸或弱碱能用酸碱滴定法直接准确滴定的是（） A.0.1mol·L－1苯酚K a=1.1×10－10 B.0.1mol·L－1H3BO3 K a=7.3×10－10 C.0.1mol·L－1羟胺K b=1.07×10－8 D.0.1mol·L－1HF K a=3.5×10－4 6.下列酸碱滴定反应中，其化学计量点pH值等于 7.00的是（） A.NaOH滴定HAc B.HCl溶液滴定NH3·H2O C.HCl溶液滴定Na2CO3 D.NaOH溶液滴定HCl 7.下列各组组分中不属于共轭酸碱对的是 ( ) A.H2CO3和CO32- B. NH3和NH2- C.HCl和Cl- D. HSO4- 和SO42- 8.标定HCl和NaOH溶液常用的基准物质是（） A.硼砂和EDTA B.草酸和K2Cr2O7 C.CaCO3和草酸 D.硼砂和邻苯二甲酸氢钾 9. 某碱样以酚酞作指示剂，用标准HCl溶液滴定到终点时耗去V1mL，继以甲基橙作指示剂又耗去HCl溶液V2mL,若V2＜V1，则该碱样溶液是（） A.Na2CO3 B.NaOH C.NaHCO3 D.NaOH+Na2CO3 10.Na2CO3和NaHCO3混合物可用HCl标准溶液来测定，测定过程中用到的两种指示剂是（）。 A.酚酞、百里酚蓝 B.酚酞、百里酚酞 C.酚酞、中性红 D.酚酞、甲基橙 11.欲配制pH=5.0缓冲溶液应选用的一对物质是（）
紫外分光光度法测定未知物
紫外分光光度法测定未知物 1.仪器 1.1紫外分光光度计（UV-1801型）；配石英比色皿（1cm）2个 1.2容量瓶（100mL）：10个；容量瓶（250mL）1个 1.3吸量管（10mL、5mL）：各1支 1.4移液管（20mL、25mL、50mL）：各1支 2.试剂 2.1标准溶液（1mg/mL）：维生素C、水杨酸、苯甲酸、山梨酸、邻二氮菲分别配成1mg/mL的标准溶液，作为储备液。 2.2未知液：浓度约为（40~60ug/mL）。（其必为给出的五种物质之一） 3.实验操作 3.1比色皿配套性检查 石英比色皿装蒸馏水，以一只比色皿为参比，在测定波长下调节透射比为100%，测定其余比色皿的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用。 3.2未知物的定性分析 将五种标准储备液均稀释成10ug/mL的试液（配制方法由选手自定）。以蒸馏水为参比，于波长200~350nm范围内扫描五种溶液，绘制吸收曲线，根据所得到的吸收曲线对照标准谱图，确定被测物质的名称，并依据吸收曲线确定测定波长。五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参考考考考附图附图附图附图。。。。 3.3未知物定量分析 根据未知液吸收曲线上测定波长处的吸光度，确定未知液的稀释倍数，并配制待测溶液3份，进行平行测定。 推荐方法 3.3.1维生素C含量的测定：准确吸取1mg/mL的维生素C标准储备液50.00mL，在250mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为200ug/mL）。再分别准确移取1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为2、4、8、12、16、20 ug/mL）。准确移取20.00mL维生素C未知液，在100mL容量瓶中定容，于
纳氏试剂比色法
水质铵的测定纳氏试剂比色法 1适用范围 1.1本标准适用于生活饮用水、地面水和废水。 1.2样品中含有悬浮物、含氯、钙镁等金属离子、硫化物和有机物时，会产生干扰，含有此类物质时，要作适当的预处理，以消除对测定的影响。 1.3范围 最大试份体积为50m l时，铵氮浓度C N可达2m g /L。 1.4最低检出浓度 1.4.1目视法 试份体积为50m l时，最低检出浓度为0.02m g /L。 1.4.2分光光度法 试份体积为50m l，使用光程长为10m m比色皿时，最低检出浓度为0.05m g / L。 1.5灵敏度 使用50m l试份，光程长为10m m比色皿,C N =1.0m g / L，给出的吸光度约为0.2个单位。 2原理 游离态的氨或铵离子等形式存在的铵氮与纳氏试剂反应生成黄棕色络合物，该络合物的色度与铵氮的含量成正比，可用目视比色或者用分光光度法测定。 3试剂 分析中只使用公认的分析纯试剂和按3.1制备的水。 3.1水：无氨，按下述方法之一制备。 3.1.1离子交换法 将蒸馏水通过一个强酸性阳离子交换树脂（氢型）柱，流出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶中。每升流出液中加人10g 同类树脂，以利保存。 3.1.2蒸馏法 在1000m l蒸馏水中，加人0.1m l硫酸（p=1.84g/m l)，并在全玻璃蒸馏器中重蒸馏。弃去前50m l馏出液，然后将约800m l馏出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶中。每升收集的馏出液中加人10g 强酸性阳离子交换树脂（氢型），以利保存。 3.2纳氏试剂。 3.2.1二氯化汞一碘化钾一氢氧化钾（H gC l2一K I一K O H) 称取15g 氢氧化钾（K O H)，溶于50m l水中，冷至室温。 称取5g 碘化钾〔K I )，溶于10m l水中，在搅拌下，将2.5g 二氯化汞（H gC l2）粉末分次少量加人于碘化钾溶液中，直到溶液呈深黄色或出现微米红色沉淀溶解缓慢时，充分搅拌混和，并改为滴加二氯化汞饱和溶液，当出现少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加。 在搅拌下，将冷的氢氧化钾溶液缓慢地加人到上述二氯化汞和碘化钾的混合液中，并稀释至100m l于暗处静置24h，倾出上清液，贮于棕色瓶中，用橡皮塞
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告.docx
紫外分光光度法测定蛋白质含量 一、实验目的 1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理； 2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。 二、实验原理 1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。 2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。 利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。 三、仪器与试剂 TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl 溶液、试样蛋白质溶液。 10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。 四、实验步骤 1.绘制吸收曲线 用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在190~400nm间每隔5nm测一次吸光度Abs，记录数据并作图。 2.绘制标准曲线 用吸量管分别吸取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在波长280nm处分别测其吸光度，记录数据并作图。 3.样品测定 取适量浓度试样蛋白质溶液，在波长280nm处测其吸光度，重复三次。在已经得到标准曲线的情况下，为了使测量结果准确度高，待测溶液的浓度需在标准曲线的线性范围内，所以，先测定试样蛋白质原液的吸光度（1.363），估算浓度为2.0960 mg·mL-1，再将原试液稀释至5倍（即取2mL试液，用0.9%NaCl 溶液稀释至刻度，摇匀），估算浓度为0.4192 mg·mL-1，测吸光度，重复三次五、数据处理与结果分析
酸碱滴定法课后练习及参考答案
酸碱滴定法课后练习及参考答案 一、选择题 1．共轭酸碱对的Ka与Kb的关系是（） （A）KaKb = 1 （B）KaKb =Kw （C）Ka/Kb =Kw （D）Kb /Ka =Kw 2．H2PO4－的共轭碱是（） （A）H3PO4 （B）HPO42－（C）PO43－（D）OH－ 3．NH3的共轭酸是（） （A）NH2－（B）NH2OH2－（C）NH4+ （D）NH4OH 4．下列各组酸碱组分中，属于共轭酸碱对的是（） （A）HCN－NaCN （B）H3PO4－Na2HPO4 （C）+NH3CH2COOH－NH2CH2COO－（D）H3O+－OH－ 5．下列各组酸碱组分中，不属于共轭酸碱对的是（） （A）H2CO3－CO32－（B）NH3－NH2－（C）HCl－Cl－（D）HSO4－－SO42－6．下列说法错误的是（） （A）H2O作为酸的共轭碱是OH－ （B）H2O作为碱的共轭酸是H3O+ （C）因为HAc的酸性强，故HAc的碱性必弱 （D）HAc碱性弱，则H2Ac+的酸性强 7．按质子理论，Na2HPO4是（） （A）中性物质（B）酸性物质（C）碱性物质（D）两性物质 8．浓度为0.1 mol/L HAc(pKa=4.74)溶液的pH是（） （A）4.87 （B）3.87 （C）2.87 （D）1.87 9．浓度为0.10 mol/LNH4Cl (pKb=4.74)溶液的pH是（） （A）5.13 （B）4.13 （C）3.13 （D）2.13 10．pH 1.00的HCl溶液和pH 13.00的NaOH溶液等体积混合后pH是（） （A）14 （B）12 （C）7 （D）6 11．酸碱滴定中选择指示剂的原则是（） （A）指示剂变色范围与化学计量点完全符合 （B）指示剂应在pH 7.00时变色 （C）指示剂的变色范围应全部或部分落入滴定pH突跃范围之内 （D）指示剂变色范围应全部落在滴定pH突跃范围之内 12．将甲基橙指示剂加到无色水溶液中，溶液呈黄色，该溶液的酸碱性为（）（A）中性（B）碱性（C）酸性（D）不定 13．将酚酞指示剂加到无色水溶液中，溶液呈无色，该溶液的酸碱性为（）（A）中性（B）碱性（C）酸性（D）不定 14．浓度为0.1 mol/L的下列酸，能用NaOH直接滴定的是（） （A）HCOOH(pKa=3.45) （B）H3BO3(pKa=9.22) （C）NH4NO2(pKb=4.74) （D）H2O2(pKa=12) 15．测定(NH4)2SO4中的氮时，不能用NaOH直接滴定，这是因为（） （A）NH3的Kb太小（B）(NH4)2SO4不是酸 （C）NH4+的Ka太小（D）(NH4)2SO4中含游离H2SO4
实验一 紫外分光光度法测定苯甲酸
实验一紫外分光光度法测定苯甲酸 一、实验目的 学习、了解紫外分光光度法原理 了解紫外分光光度计的结构和使用方法 二、实验原理 当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的PH等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。 根据朗伯－比尔定律，在一定的条件下，吸光物质的吸光度A 与该物质的浓度C和液层厚度成正比。即A＝ LC 因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是紫外－可见分光光度计的基本原理。 在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长为225nm。因此，采用紫外分光光度计测定苯甲酸在225nm处的吸收度就能进行定量分析。 三、仪器与主要试剂 TU-1810紫外可见分光光度计1cm石英比色皿 0.1M氢氧化钠溶液 苯甲酸(AR) 四、实验步骤 1、苯甲酸标准溶液的制备 称取苯甲酸(105℃烘干)100mg,用0.1M氢氧化钠溶液100ml溶解后,转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度.此溶液1ml含0.1mg 苯甲酸. 2、制作苯甲酸吸收曲线,选择最大吸收波长 ①移取苯甲酸标准溶液4.00ml于50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀,此溶液1ml含苯甲酸8ug. 以氘灯为光源,用0.01M氢氧化钠溶液作为参比,改变测量波长(从210-240nm)测量8ug/ml苯甲酸的吸光度. ②以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线,并找出最大的吸收波长 (是否是225nm). 3﹑样品的测定 ①取10.00ml苯甲酸样品,放入50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠
比色法及分光光度法
比色法及分光光度法 第一节 一、填空题。 1.比色法及分光光度法同化学分析法比较具有___________、_____________、_____________、_______________等四个特点。 2.光的波长范围在___________称为可见光，波长小于__________称为紫外光，波长大于___________称为红外光。 3.____________通过三棱镜就可分解为____________________，这种现象称为光的色散。 4.光吸收程度最大外的波长叫做_____________，用_________表示。 5.同物质不同浓度的溶液λmax不变，具有____________的吸收曲线，不同物质具有__________的吸收曲线，可以此进行物质的___________。 6.物质呈现一定的颜色是由于___________。 7.同一物质不同浓度在一定波长处吸光度随浓度增加而________,这个特性可作为_________的依据。 二、选择题。 1.已知光的波长λ=800nm，则它应属于（） A、红光 B、紫光 C、红外光 D、紫外光 2.Fe（SCN）3溶液（红色）的吸收光颜色为（） A、红色 B、黄色 C、蓝色 D、蓝绿色 3.绿光的互补色为（） A、紫红色 B、橙色 C、绿蓝 D、蓝绿色 4.二苯硫腙的CCl4溶液吸收580~600nm范围的光，它显（）色。 A、绿色 B、蓝色 C、紫色 D、黄色 三、判断题。 1.白光是一种可见光。（） 2.同一物质不同浓度的有色溶液λmax不变。（） 3.在λmax处测定吸光度则灵敏度最高。（） 4.比色法及分光光度法同化学分析比较，准确度高，灵敏度低。（） 5.硫酸铜溶液因吸收了白光中的红色而呈现蓝色。（） 第二节光吸收定律 一、填空题。 1.光吸收定律又称_______，它表明当_______________垂直通过______________，溶液的吸光度A与______________及____________成______。其数学表达式为_______________。 2.偏离朗伯—比耳定律的因素有________、_________、_________、_______等四方面。 二、选择题。 1.某有色溶液，其他测定条件相同，若增加液层厚度，则其吸光度A( ) A、增加 B、不变 C、减小 D、不确定 2.某有色溶液，其他测定条件相同，若增加液层厚度，则其透射比T（） A、增加 B、不变 C、减小 D、不确定 3.若某有色溶液透射比为0.333，则其吸光度为（） A、0.333 B、0.500 C、0.666 D、0.478 4.若某溶液ε=1.1×104L\（mol·cm），с=3.00×10－5mol/L,b=2.0cm，则A为（） A、0.10 B、0.32 C、1.30 D、0.66 三、判断题。