实验二 722型分光光度计的性能检查

实验二722型分光光度计的性能检查

一、目的

1、了解722型分光光度计的性能

2、熟悉仪器的技术指标及一般检查方法

3、掌握仪器的正确使用方法

二、原理

722型分光光度计是采用单光束自准式光路，色散元件为衍射光栅，能在近紫外，可见光谱内对样品进行分析，根据被测物质在可见光区范围内（360~800nm）吸收特性及吸光的程度（吸光定律：A=-lgT=εbc）对物质进行定性和定量测定的仪器。

为保证分析的灵敏度和准确性，国家计量局规定：对仪器应定期进行检查，检查周期为一年。

检查的主要技术项目有：仪器外观、波长精密度和重现型、分辨率、吸收值精密和仪器的线型范围。对于符合闭耳定律的溶液测量时溶液的浓度与吸光值之间有良好的线性；一套比色皿之间应互相匹配以及仪器的绝缘等。上述各项性能应符合仪器所规定的技术指标（见操作步骤），本实验采用规定方法对上述各项目进行检查。

三、试剂和器皿

1、K2Cr2O7标准溶液：1mg?ml-1

2、CoCl2标准溶液：10mg?ml-1

3、CuSO4标准溶液：10mg?ml-1

4、0.1mol/LHCl

5、0.05mol/LH2SO4

6、4只比色皿、10支10ml比色管、1支2ml移液管和4支10ml移液管

四、实验步骤

1、仪器外观检查仪器所有紧固件应紧固良好，各调节器能正常工作，仪器之余

平稳工作台上操作时不得有摆动现象，比色皿座应推动自如，无松动、卡住的现象。光束透过各透光孔应畅通无阻。

仪器所配比色皿的透光面应光洁，无表面刮痕、擦毛和斑点，任何一面不得有裂

纹。

2、 波长精度的检查 在波长标度上的波长标度值误差，应符合以下规定： 波长范围 420～500nm 510～600nm 610～700nm 允许误差 ≦±3nm ≦±5nm ≦±6nm

检查方法：使用仪器配备的镨钕玻璃片，该片对不同波长的光透光率不同。在分光光度计上测定其透光率－波长曲线，从曲线上找出镨钕玻璃片的透光率峰值，则该仪器的波长误差Δλ＝λ－λ0。 Δλ=± 2nm λ0等于529nm （或808nm ） 3、 线型误差的检查 在吸光度为0.1～0.8（透光率为80％～16％）的范围内，将符合比耳定律的溶液进行测定，在不同的吸光度值范围测量溶液浓度的线型误差应符合以下规定：

吸光度范围 0.1～0.3 0.3～0.6 0.6～0.8 线性误差 ≦±6％ ≦±3％ ≦±4％

检查方法：配制K 2Cr 2O 7；CoCl 2；CuSO 4溶液，每种溶液配置以下三个浓度： 以重蒸馏水为空白，用仪器分别测量以上各个溶液的吸光度，每一浓度的溶液必须重复测量3次，取其平均值。将记录的吸光度与对应浓度，按下列公式计算各点的线性误差。

3

213

21C C C A A A K ++++=

C 1K ＝A 1’； C 2K ＝A 2’； C 1K ＝A 3’

％）

－（的线性误差＝100A A A '

1

'

111?A ％）

－（的线性误差＝100A A A '

2

'222?A ％）

－（的线性误差＝100A A A '

3

'

333?A 式中：C 1、C 2 、C 3是同一种溶液的三个浓度；A 1、A 2、A 3是测得的相应的吸光度

溶液名称 溶液浓度（×103μg ?ml -1） 测定波长 备注 K 2Cr 2O 7 0.0300 0.0900 0.150 440nm 浓度以Cr 计量 CoCl 2 2.00 6.00 10.00 510nm 浓度以Co 计量 CuSO 4

2.00

6.00

10.00

690nm

浓度以Cu 计量

4、灵敏度的检查仪器的灵敏度是度变化值与相应溶液浓度变化值之比，其比值

应符合下表规定：

溶液名称灵敏度（A/μg?ml-1）测定波长

K2Cr2O7≥0.012/3440nm

CoCl2≥0.014/200510nm

CuSO4≥0.014/200690nm

检查方法：配制如下浓度的溶液：

溶液名称溶液浓度（×103μg?ml-1）测定波长备注

K2Cr2O70.0300与0.0330 440nm 浓度以Cr计量CoCl2 2.00与2.20 510nm 浓度以Co计量CuSO4 2.00与2.20 690nm 浓度以Cu计量在指定波长下分别测量各溶液吸光度，设每种溶液的两个浓度间变化值为ΔC，测得的相应的吸光度为ΔA，则灵敏度S=ΔA/ΔC。

5、重现性检查仪器在同一工作条件下，用同一种溶液连续重复测定7次其吸光

度最大读数与最小读数之差不应大于0.5%

检查方法，将波长固定在690nm，用含Cu 2.00×103μg?ml-1硫酸铜溶液连续测定7次，计算其吸光度最大读数与最小读数之差。

6、吸收池（比色皿）匹配性的检查在同一波长下，配套使用的吸收池之间透光

率之差要求不大于0.5%。

检查方法：将波长固定在440nm，用含Cr 0.0300×103μg?ml-1的K2Cr2O7溶液分别注入一套吸收池，将其中一只推入光路中，调节至95%（T值可选小于100%而又尽量大的任一值），然后将各吸收池一一推入光路，记录各吸收池同第一只吸收池之间的透光率差值，差值不大于0.5%即可配对或配套使用。

五、仪器的外形和使用方法

1、722型分光光度计仪器外形图

2、使用方法：

（1）将灵敏度旋转置“1”档（放大倍数最小）

（2）开启电源，指示灯亮，仪器预热20分钟，选择开关置于“T”

（3）打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0%T”旋钮，使数字显示为“00.0”

（4）将装有溶液的比色皿放置比色架中

（5）旋动仪器的波长手轮，把测试所需的波长调节至刻度线处

（6）盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节通过率“100%T”旋钮，使数字显示为“100.0T”（如果显示不到100%T，则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复“3”调整仪器的“00.0”。

（7）蒋被测溶液置于光路中，数字表上直接读出被测溶液通过率T值。

（8）吸光度的测量，按照“3”，“6”调整仪器的“00.0”和“100.0”，将选择开关置于A 旋动吸光度调零旋钮，使得数字显示为000，然后移入被测溶液，显示值即为试样的吸光度A值。

（9）浓度C的测量：选择开关由A旋至C，将以标定浓度的溶液移入光路，调节浓度旋钮，使数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，可读出相应的浓度值。（10）如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可工作。

六、注意事项

①使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋或之功能。

②仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。

③仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。

④每台仪器所配套的比色皿不能与其他仪器上的比色皿单个调换

⑤当仪器停止工作时，切断电源，电源开关同时切断，并罩好仪器。

⑥如果大幅度改变测试波长时，须等数分钟后才能正常工作。

（因波长由长波向短波或短波向长波移动时，光能量变化急剧，管电管受光相应慢，需一段平衡时间）。

七、思考题

1、同组比色皿透光性的差异对比色有何影响？

2、检查分光光度计的下列性能，有什么实际意义：

波长精度、稳定度、灵敏度、重现性、线性

下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也。

兴复汉室，还于旧都。此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。至于斟酌损益，进尽忠言，则攸之、祎、允之任也。

愿陛下托臣以讨贼兴复之效，不效，则治臣之罪，以告先帝之灵。若无兴德之言，则责攸之、祎、允等之慢，以彰其咎；陛下亦宜自谋，以咨诹善道，察纳雅言，深追先帝遗诏。臣不胜受恩感激。

今当远离，临表涕零，不知所言。

药物分析设计性实验

logo 药物分析设计性实验 研究报告 学院：xx学院 班级： 组号： 成员： 指导教师: 时间：

鉴别试验实验设计 实验目的： 1.掌握药物结构与分析方法间的关系 2.掌握分析方法基本操作与含量计算 3.熟悉专业文献的查阅,信息检索 4.了解药品分析的全过程 5.了解如何根据文献资料进行实验设计 实验原理： 葡萄糖: (1) 单糖分子中都含有羰基或醛基——还原性。 (2).单糖在水溶液中主要呈半缩醛的环状结构。 阿莫西林: (1)具有酚羟基可以与三氯化铁反应 (2) 具有手性碳,比旋度为+290°至+310° SMZ: (1) 具有磺酰氨基,可以金属离子络合 (2)本品具有芳伯胺基团,显芳香第一胺类的鉴别反应 对乙酰氨基酚: (1)具有酚羟基可以与三氯化铁反应 (2)具有隐性芳伯氨基,水解显芳香第一胺类的 实验药品：葡萄糖、阿莫西林、SMZ、对乙酰氨基酚 实验试剂和仪器： 仪器:旋光仪,IR,超声机,水浴锅,一般玻璃仪器 试剂：蒸馏水、碱性酒石酸铜试液、0.4％氢氧化钠溶液、硫酸铜试液、三氯化铁试液、稀盐酸、亚硝酸钠试液、碱性β-萘酚试液。 实验步骤:

葡萄糖： (1)取本品约0.2g，加水5ml 溶解后，缓缓滴入微温 的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。 (2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。 分别称取一定比例干燥的葡萄糖和溴化钾 (1.0:100)，置玛瑙研钵中，在红外灯下研匀，取适量置于压模中，均匀铺布后，抽真空 2 m i n ，加压至 20~30MPa并保持2min，取出制成的供试片，置于红外光谱仪的样品光路中，录制光谱图。 中国药典葡萄糖红外光谱图 ( 光谱号码 7 0 2 ) 阿莫西林： (1)取阿莫西林适量，研细，加pH=7.0磷酸盐缓冲液溶解（必要时冰浴超声助溶10分钟）制成阿莫西林的溶液，静置，滤过，取滤液作为供试品溶液加三氯化铁试液3滴，即显深橘红色。 (2)取本品精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中1mg的溶液，依法测定(除另有规定外，本法系采用钠光谱的D线（589. 3nm)测定旋光度，测定管长度为ldm(如使用其他管长，应进行换算）,测定温度为20°C。使用读数至0. 01°并经过检定的旋光计。测定旋光度时，将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各品种项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度。 )，比旋度为+290度至+310度。 SMZ: (1) 取本品约0.1g，加水与0.4％氢氧化钠溶液各3ml，振摇使溶解.滤过，取滤液，加硫酸铜试液1滴，即生成草绿色沉淀. (2)取供试品约50mg,加稀盐酸lml,必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0. lmol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 对乙酰氨基酚:

紫外-可见分光光度计的检测实验报告

分子光谱实训报告 班级：———— 学号： 姓名： 指导教师： 2015年10月 紫外-可见分光光度计的检测

实训日期______年_____月_____日教师评定：______________ 【仪器概况】 仪器名称：紫外-可见分光光度计 型号：UV1801 厂家：北京瑞利分析仪器公司 编号：090953 二、【仪器结构】 三、【实验项目】 波长准确度检查 仪器零点稳定性检查 光电流稳定度检查 吸光度准确度检查 紫外区透色比检查 杂散光合格性检查 吸收池配套性检查 皿差 四、【仪器及试剂准备单】 1、试剂清单（以1个小组6人为例） H2SO3、K2Cr3O7、HClO4、碘化钠、蒸馏水、亚硝酸钠、无水乙醇、苯、硫酸铜。 2、仪器清单（以1个小组6人为例） UV1801紫外分光光度计、烧杯14个、容量瓶9个、玻璃棒、滤纸、洗瓶、镨钕滤光片、比色皿、胶头滴管、洗耳球、移液管、表面皿、移液管架。

五、【检测步骤】 开机自检（5个ok） （一）、波长准确度 可见分光光度（空气） 1、按1、波长扫描；按F1，参数设置（E、波长范围460--680nm、间隔0.1nm、换灯点800nm）按返回键。 2、按F2，根据显示屏提醒，确定键；出现两个峰，分别记录两个峰值的波长和吸光值。（重复3次；参比和样品都是空气）。 镨钕滤光片 1、按F1，参数设置（A、波长范围500--540nm、间隔1nm、换灯点360nm)按返回键。 2、把镨钕滤光片放在第二格，关盖；按F2，根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现一个峰，记录读数。 紫外分光光度 1、按F1，参数设置（A、波长范围200--270nm、间隔0.1nm、换灯点360nm）按返回键。 2、加3滴苯在石英比色皿中，盖上比色皿盖，放在第二格，关盖；按F2，根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现五指峰，分别记录五个不同峰的波长和吸光值。 （二）、透射比的准确度 将参比溶液0.001mol/L高氯酸加入石英比色皿3/4处（润洗3次）放在第一格；将测定液重铬酸钾加入石英比色皿3/4处（润洗3次）放在第二格；调节测量方式T；返回主页面，按2，光度测量；按F1，参数设置（换灯点360nm、波长数4个，入分别调到235nm、257nm、313nm、350nm）；按F2，根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；记录读数。 （三）、吸光度准确度

722S型分光光度计操作规程

722S型分光光度计操作规程 ×××××××××检测中心 作业指导书 文件代号 HNCDC/ QTD××-×××× 第4版第0次修订第1页共2页 722S型分光光度计操作规程 实施日期 ××××年××月××日 1 目的 为保证722S型分光光度计的正常运转，确保其出具的数据准确、可靠，特制定本规程。 2 适用范围 本实验室现有722S型分分光光度计的使用和维护。 3 职责 仪器操作人员需严格按照此规程进行。 4．技术特性 4.1 使用环境： 4.1.1 仪器应放在干燥的房间内，室温5～35 ℃，室内相对湿度小于85%。 4.1.2 使用时放置在坚固平稳的工作台上，避免震动，并避免阳光直射及强烈电磁场干扰，避免灰尘及腐蚀性气体。 4.1.3 电源电压：（220±22）V 频率（50±1）Hz。 4.1.4 仪器表面宜用温水擦试，请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁。 4.2 主要技术参数 4.2.1 光学系统：衍射光栅C-T单色器。 4.2.2 波长范围：340-1000 nm。 4.2.3 光源：卤素灯20 W/12 V。 4.2.4 波长准确度：±2 nm。 4.2.5 波长重复性：1 nm。 4.2.6 透射比准确度：±0.5%（τ）（SRM930D） 4.2.7 透射比重复性：0.3%（τ） 4.2.8 光谱带宽：6 nm。

4.2.9 杂散光：≤0.5%（τ）（360 nm，NaNO2） 4.2.10 显示标尺：（T）：0.0%～199.9% （A）：-0.3～2.999 （F）：1～9999 （C）：0～9999 5 操作方法 5.1.1 预热：仪器开机后灯及电子部门需热平衡，故开机预热30分钟才能进行工作，如紧急应用时请注意随时调节0%T，调100%T。 5.1.2 调零： 目的：校正基本读数标尺两端（配合100%T调节），进入正确测试状态； 调整：开机预热后，改变测试波长时或测试一段时间，以及作高精度测试前； 操作：打开试样盖（关闭光门或用不透光材料在样品室中遮断光路），然后按0%键，即能自动调整零位。 5.1.3 调整100%T 目的：校正基本读数标尺两端（配合调零），进入正确测试状态； 调整：开机预热后，更换测试波长或测试一段时间后，以及作高精度测试前。（一般在调零前应加一次100%T调整以使仪器内部自动增益到位）； 操作：将用作背景的空白样品置入样品室光路中，盖上试样盖（同时打开光门）按下100%键即能自动调整100%T（一次有误差时可加按一次）； 注：调整100%T时整机自动增益系统重调可能影响0%T，调整后请检查0%T，如有变化可重调0%键一次。 5.1.4 调整波长 使用仪器上唯一的旋钮，即可方便地调整仪器当前测试波长，具体波长由旋钮左侧的显示窗显示，读出波长时目光垂直观察。 注：本仪器因采用机械联动切换滤光片装置，故当旋钮转动经过480 nm时会有金属接触声，如在480-1 000 nm间存在轻微金属摩擦声，属正常现象。 5.1.5 改变试样槽位置让不同样品进入光路 试样槽架是四位置的，用仪器前面的试样槽拉杆来改变，打开样品室盖以便观察样品槽中的样品位置最靠近测试者的为“0”位置，依次为“1”、“2”、“3”位置。对应拉杆推向最内为“0”位置，依次向外拉出相应为“1”、“2”、“3”位置，当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推动一下以确保定位准确。 5.1.6 确定滤光片位置 本仪器备有减少杂光，提高340-380 nm波段光度准确性的滤光片，位于样品室内部左侧，用一拨杆来改变位置。 当测试波长在340-380 nm波段内如作高精度测试可将拨杆推向前（见机内印字指示），通常可不使用此滤光片，可将拨杆置在400-1000nm位置。 注：如在380-1000nm波段测试时，误将拨杆置在340-380nm波段，则仪器将出现不正常现象。（如噪声增加，不能调整100%T等） 5.1.7 改变标尺 本仪器有四种标尺： 透射比：用于对透明液体和透明固体测量透射特点； 吸光度：用于采用标准曲线法或绝对吸收法定量分析，在动力学测试时亦能利用本系统；浓度因子：用于在浓度因子法浓度直读时设定浓度因子； 浓度直读：用于浓度直读时，作设定和读出，亦用于设定浓度因子后的浓度直读；

邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计

可见分光光度法测定铁的条件实验 可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计 院系：检验学院 班级：12 级生物技术班 指导老师：杨琴 小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、 郑祥、谭诗航、苏曼、 邱丽莎、殷良俊、易柳

摘要 (1) 引言 (2) 正文 (3) 1 分光光度技术 (3) 2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况 (3) 3 分光光度法测定铁的6种方法 (3) 3.1 邻二氮菲分光光度法 (3) 3.1.1 方法原理 (3) 3.1.2 化学反应式 (3) 3.2 BPT-OP分光光度法 (3) 3.3 硫氰酸盐分光光度法测铁含量 (3) 3.3.1 方法提要 (3) 3.3.2 主要反应 (3) 3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量 (3) 3.4.1 方法原理 (3) 3.5 固相萃取分光光度法测铁含量 (3) 3.5.1 方法原理 (4) 3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 (4) 3.6.1 方法原理 (4) 4 邻二氮菲分光光度法测铁含量 (4) 4.1 邻二氮菲法简介 (4) 4.2 邻二氮菲法的优点 (4) 5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 (4) 5.1 如何确定适宜的条件 (4) 5.2 最适波长的选择 (4) 5.3 显色剂用量的选择 (4) 5.4 显色时间的选择 (4) 5.5 溶液pH的选择 (4) 5.6 显色温度的选择 (5) 6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 (5) 参考文献 (6) 实验设计部分 (7)

本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件，找出处理方法的良好条件和良好效果。本法灵敏、可靠，便于推广。 【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量

722N可见分光光度计使用维护操作规程

标准操作规程-SOP 722N可见分光光度计使用维护操作规程 1.0目的 本操作规程为正确使用及维护722N可见分光光度计提供指南。 2.0 范围 适用于化验室的722N可见分光光度计和使用操作人员。 3.0 职责 确保化验室每个使用人员都能正确使用和维护722N可见分光光度计。 4.0 规程指引 4.1 使用限制条件 4.1.1 仪器应放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35℃，相对湿度不超过85%。 4.1.2 使用时放置在坚固平稳的工作台上，避免强烈的震动，避免阳光直射及直接吹风，远 离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备，以免影响仪器的正常使用。 4.2 安全注意事项（无） 4.3 使用步骤与操作方法 4.3.1 插上电源，打开开关，打开试样室盖，按“A（吸光度）/T（透射比）/C（浓度）/F （斜率）”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热30分钟。 4.3.2 用参比液润洗比色皿（装样品的比色皿要用样品液润洗），装样到比色皿的3/4处（以 确保光路通过被测样品中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体，将比色皿的光面对准光路放入比色皿架，用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。 4.3.3保持在“T%”状态，将装有参比液的比色皿拉入光路，当关上试样室盖时，屏幕应显 示“100.0”，如否，按“OA/100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复2－3次。 4.3.4 关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调到“Abs”状态，屏幕应显示“0.000”，如否， 按“OA/100%”键，打开试样室盖，再关上试样室盖，屏幕应继续保持显示“0.000”，重复2－3次。 4.3.5 拉动拉杆，将其余测试样品一一拉入光路，记下测量数值。 4.3.6测量完毕后，将比色皿清洗干净，擦干，放回盒子，关上开关，拔下电源，罩上防尘 罩。 4.4 使用注意事项 4.4.1 开关试样室盖及拉动拉杆时动作要轻缓。 4.4.2 使用比色皿时手指应拿磨砂玻璃面。 4.4.3 不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器。 4.4.4 一定要将比色皿外部所沾样品擦干净，才能放进比色皿架进行测定。 4.4.5 每次调整波长后，应重新调零，调百。 4.4.6 仪器工作数月或搬动后，要检查波长准确度，以确保仪器的使用和测定精度。 4.5 日常维护与保养 4.5.1 为确保仪器稳定工作，电源电压一定要稳定。 4.5.2 为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作的时间里，用防尘罩罩住仪器，同时在罩子内 放置数袋防潮剂，以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或沾污，影响仪器日后的工作。4.5.3 每次测定结束后都要用蒸馏水将比色皿清洗干净。

722型可见分光光度计的操作

722型可见光分光光度计的操作编制：刘文玖 1适用范围 本规程适用于722型可见光分光光度计的操作。 2操作步骤 检查仪器电源接线牢固，接地良好，将仪器灵敏度钮置于“1”（放大倍数小），选择开关置于“T”。 插上电源插头，开启电源开关，指示灯亮。调节波长手轮至所需波长，调节T ＝100％钮至显示投射比T＝（70～100）％。仪器在此状态下预热15分钟（说明书是20分钟），显示数字稳定后即可进行下一项工作。 打开样品室盖（光门自动关闭，光电管不受光），调节T＝0％钮，使数字显示为“00.0”。 盖上样品室盖，将参比池推入光路，调节T＝100％钮，使数字显示“100.0”，增大灵敏度档，再调整0％和100％。 重复开样品室盖调T＝0％和盖上样品室盖调T＝100％的操作，至仪器显示稳定。 2，6 将选择开关置于“A”，调节吸光度调零钮，使数字显示为“0.000”，将样品池推入光路，数字显示值即为吸光度值。 直接读出被测物浓度的操作方法：装一份标准溶液于吸收池中，将选择开关置于“C”，将标准溶液推入光路，调节浓度钮，使数字显为标准液浓度值，将样品推入光路，数字显示即为样品的浓度值。 读完数以后应立即打开样品室盖。 测量完毕，取出吸收池，洗净。各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，切断电源。 3、注意事项 各旋钮、拉杆要按规定的方向平稳的移动，不可用力过猛。 样品室要保持干燥，如将比色液洒落其中，应及时清理干净。 不得用手接触吸收池的透光面，只能用镜头纸或脱脂棉轻轻擦拭，避免硬的物

品划伤透光面。 不同仪器的吸收池不要混用，以免引起测定误差。 为延长光源使用期限，要尽量减少开关次数，在短时间的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启，要等其冷却到室温后再开。仪器连续使用时间不得超过3个小时，若需长时间使用，最好间隙30分钟。更换光源时，不要用手接触灯的窗口，以免再窗口玻璃上留下痕迹。 单色器不可随意拆动。注意定期更换内装的干燥剂。 吸收池被有色物质污染时，用3mol/L的盐酸和等体积的乙醇混合液洗涤吸收池，再用自来水、蒸馏水冲洗。 检测器要保持干燥，光电元件必须避免不必要的曝光，在测定过程中要随时关闭光闸，光电池在不用时要遮断光源，整台仪器避免在阳光下照射。 十四.分光光度计维护保养规程 1.保持室内干燥。 2.保持外表洁净 3.干燥剂有一半变白时及时更换。 4.不能放在阳光直射的地方。 5.不得长时间闭合试样室盖，以延长光电管寿命。 6.大幅度改变测试波长时，在调整0和100后稍待片刻，当数字稳定后重新调整0 和100后即可工作。 7.不能随意挪动位置，以保证测试的准确性。

分光光度计 原理

72型分光光度计原理 72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。其光学系统如图5-11所示。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从

紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告

紫外分光光度法测定蛋白质含量 一、实验目的 1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理； 2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。 二、实验原理 1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。 2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。 利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。 三、仪器与试剂 TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl 溶液、试样蛋白质溶液。 10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。 四、实验步骤 1.绘制吸收曲线 用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在190~400nm间每隔5nm测一次吸光度Abs，记录数据并作图。 2.绘制标准曲线 用吸量管分别吸取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在波长280nm处分别测其吸光度，记录数据并作图。 3.样品测定 取适量浓度试样蛋白质溶液，在波长280nm处测其吸光度，重复三次。在已经得到标准曲线的情况下，为了使测量结果准确度高，待测溶液的浓度需在标准曲线的线性范围内，所以，先测定试样蛋白质原液的吸光度（1.363），估算浓度为2.0960 mg·mL-1，再将原试液稀释至5倍（即取2mL试液，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀），估算浓度为0.4192 mg·mL-1，测吸光度，重复三次 五、数据处理与结果分析

设计实验

燕麦中Cd（隔）元素的测定 一、前言 地球上的各种生命体都是由多种化学元素组成的。就生命的化学及分子生物学的本质而言，人的生长发育、繁殖、遗传、生化反应、能量转换、新陈代谢等重要生理功能的物质基础，都是人体与外环境进行多种元素交换，以及不同元素在机体内进行复杂的合成和分解代谢的生物学过程。 一次大量吸入镉可引起急性肺炎和肺水肿；慢性中毒可致肺纤维化和肾脏病变。痛痛病也是一种慢性锖中毒。由长期摄食被硫酸镉污染的水源中生物或饮食污染的水造成。镉冶炼、喷镀，焊接、切割和浇铸轴承表面、核反应堆的镉棒或覆盖镉的石墨棒作为中子吸收剂，镉蓄电池和其池镉化合物制造的作业工人接触镉。有急性、慢性中毒之分。吸入含镉气体可致呼吸道症状，经口摄入镉可致肝、肾症状。 镉不是人体的必需元素。人体内的镉主要通过食物、水和空气而进入体内蓄积下来。肝脏和肾脏是体内贮存镉的俩大器官，进入体内的镉主要通过肾脏经排出，镉的排出速度很慢，因此会在体内慢性累积而危害到肝脏和肾脏。镉已经成为食品安全监控的重要卫生指标之一。 由于金属、类金属元素在粮油食品中与有机物结合成稳定而牢固的难溶、难解离的化合物，从而失去原有的特性，一般不能直接测定。如需测定这些无机成分的含量，需要在测定前破坏有机结合体，释放出待测组分[1]。本实验运用低温灰化法进行燕麦样品前处理、石墨炉原子吸收法测定燕麦中镉元素的含量。 二、实验原理和方法 a)低温灰化法[2] 低温灰化是相对于高温灰化法而言的，是在相对低的温度下进行灰化。低温灰化的速度与等离子体的流速、时间、功率和样品的体积等因素有关。等离子体消化装置是有消化室、供应系统、真空系统和高频电源组成。此法是将样品放在低温灰化炉中，先将炉内抽至近真空（10Pa左右），然后再不断通入氧气，氧气的流速为0.3～0.8L/min，再用微波或高频激发光源照射，使氧气活化而产生活化氧，这样在低于150℃的温度下便可使样品缓慢地完全灰化（以mg/h计），从而克服哦了高温灰化的缺点，氧化分解是在特殊设计的反应室进行的，内部压力为67～133Pa，试样量一般控制在0.2～10mg范围。 低温灰化必须在专用的低温灰化器中进行（图1.1.1）。O2在低温灰化器中，受高频或超频电场激发产生氧等离子体。氧等离子体由O+、O2+、O-、O2-、O组成，其中O+和O-具有很强的氧化能力，使样品在100～150℃，有时也在60～70℃下缓慢氧化，出去有机物，金属元素留在灰分中。但是，低压的氧气使灰化速度较慢，这也与灰化室活性气体的组成、氧等离子体流速、电场功率、样品表面积和厚度、容器底面积和深度、搅拌因素有关。当O2中含O3或CF2时灰化较快。样品厚2～3mm易灰化完全，样品太轻会因带电使灰分飞扬损失，增加高频功率

分光光度计的检验和维护

分光光度计的检验和维护 （一）分光光度计的检验 为保证测试结果的准确可靠，新制造、使用中和修理后的分光光度计都应该定期进行检定。国家技术监督局批准颁布了各类紫外、可见及近红外分光光度计的坚定规程。我们在验收仪器时应按照仪器说明书及检验合同进行验收。检定规程规定，检定周期为半年，两次检定合格的仪器检定周期可延长至一年。下面简单介绍分光光度计的检验方法。 1．波长的准确度 波长准确度是指单色光最大强度的波长值与波长指示值之差。可以用汞灯较强光谱线253.65、296.73、313.16、365.02、404.66、435.83、546.07nm或氢灯（486.13）、氘灯486.00nm 的谱线来检验。 稀土玻璃如镨钕玻璃、钬玻璃在相当宽的波长范围内有特征吸收峰。由仪器生产厂作为附件提供。镨钕滤光片的吸收峰为528.7nm和807.7 nm 。 如果经检验仪器的波长准确度不合格，应按照仪器说明书进行调整。 2．稳定度 在光电管不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3min，读取透射比（透过率）的变化，即为零点稳定度。 在光谱范围两端向中间靠10nm处，例如721型仪器的370nm和790nm处，调整零点后，打开光门，使光电管受光，调节透过率为95％（数显仪器调至100％）处，观察3min读取透过率的变化，即为光电流稳定度。 3.投射比正确度 投射比的校正的方法中有中性玻璃滤光片法（可见光区）和标准溶液法。 经常使用的使标准溶液法，具体操作为：配置质量分数0.06000/1000（即1000g溶液中含K2Cr2O70.06000g）的K2Cr2O7的0.001mol/LHClO4的标准溶液。以0.001mol/LHClO4为参比，以1cm的石英吸收池分别在235、257、313、350nm波长处测定透射比，与表13－4所列标准溶液的标准值比较，根据仪器级别其差值应在0.8％－2.5％之内。 溶液的透射比 表13－4质量分数0.06000/1000 K 4.杂散光 不属于单色器给定波长，由于反射或散射等射到检测器的光称为杂散光。杂散光的检验是在较短波长下，测定某透过溶液的投射比。根据仪器的级别不同，有的T>0.001%，有的到 T<0.6%。 光栅式仪器用1cm配套合格的吸收池，在380nm处，以蒸馏水为参比，测定50.0g/L的亚硝酸钠标准溶液的透射比（透射信号和入射信号之比），即为仪器在相应波长处的杂散光。 5.吸收池的配套性 在定量工作中，尤其是在紫外光波长测定时，需要对吸收池作校准及配对工作，以消除吸收池的误差。 配套性检验方法是：石英吸收池在220nm处，装蒸馏水；在350nm处，装K2Cr2O7的0.001mol/L HClO4溶液。玻璃吸收池在600nm处，装蒸馏水；在400nm处，装K2Cr2O7溶液（配法同上）；以一个吸收池为参比，调节T为100.0％测定其它各池的透射比。透射比之差小于0.5％的池可配对成一套。

722N分光光度计使用方法

722N可见分光光度计使用说明书 目次 1仪器的主要用途--------------------------------------------------1 2仪器的工作环境--------------------------------------------------1 3仪器的主要技术指标及规格----------------------------------------1 4仪器的工作原理--------------------------------------------------2 5仪器的光学原理--------------------------------------------------2 6仪器的安装、使用与维护------------------------------------------3 7 仪器的调校和故障分析--------------------------------------------5 8 仪器的成套性----------------------------------------------------6 9 仪器的保管及免费修理期限----------------------------------------7 制造计量器具许可证编号： 产品执行标准的编号：Q/YXLZ50-2004

1仪器的主要用途 722N可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定 量的分析。该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一。 2仪器的工作环境 仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃～35℃，相对湿度不超过 85%。 使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。 电扇不宜直接向仪器吹风，以免影响仪器的正常使用。 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 供给仪器的电源电压为AC220V22V，频率为50Hz1Hz，并必须装有良好的接地线。 推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。 3仪器的主要技术指标及规格 仪器类别：2类 光学系统：单光束、衍射光栅。 波长范围：330nm～800nm。 光源：钨卤素灯12V30W。 接收元件：光电池。 波长准确度：2nm。 波长重复性：≤1nm。 光谱带宽： 5nm。 杂光：≤%（在360nm处）。 透射比测量范围：%～%。 吸光度测量范围：～。 浓度直读范围：0000～1999。 透射比准确度：%。 透射比重复性：≤%。 噪声：100%噪声≤%，0%噪声≤%。 稳定性：亮电流≤%/3min， 暗电流≤%/3min。 电源：AC220V22V， 50Hz1Hz。

分光光度法测量溶液色素含量实验方案设计报告

实验方案报告 实验课程：电子科技专业实验 实验项目：分光光度法测量溶液色素含量 班级：学号：姓名： 实验方案报告成绩：教师签名： 实验类型设计性 综合设计性 综合性 验证性 一、实验内容 使用分光光度计测出溶液中柠檬黄、日落黄、和胭脂红的浓度。 二、实验条件 仪器： 紫外可见分光光度计，电子天平；容量瓶、移液管、烧杯等玻璃仪器。 试剂： 柠檬黄、日落黄、胭脂红（试剂说明见附录2）；乙酸铵；光学纯水； 三、实验方案（方法、步骤） 一、先各称取100mg的柠檬黄、日落黄、胭脂红，用三个100ml容量瓶配置成1mg/ml的母液，在分别将每种母液用量筒量取4ml、6ml、8ml、12ml、16ml 到100ml容量瓶稀释成40ug/ml、60ug/ml、80ug/ml、120ug/ml、160ug/ml的子溶液，则有15瓶标准溶液。 二、分别测量80ug/ml（中间浓度）的柠檬黄、日落黄、胭脂红标准溶液的吸光度曲线，记录三者吸光度最大时的波长λ1、λ2、λ3。 λ1λ2λ3 426 nm 482 nm 508 nm

三、分别测量15瓶标准溶液和待测溶液在波长λ1、λ2、λ3时的吸光度。 λ1λ2λ3 柠檬黄40ug/ml0.119 0.036 0.003 60ug/ml0.199 0.061 0.006 80ug/ml0.285 0.087 0.008 120ug/ml0.482 0.146 0.012 160ug/ml0.675 0.204 0.015 日落黄40ug/ml0.050 0.114 0.098 60ug/ml0.080 0.185 0.160 80ug/ml0.121 0.282 0.243 120ug/ml0.222 0.512 0.441 160ug/ml0.320 0.739 0.634 胭脂红40ug/ml0.035 0.094 0.116 60ug/ml0.056 0.153 0.188 80ug/ml0.091 0.231 0.281 120ug/ml0.139 0.366 0.447 160ug/ml0.195 0.526 0.645 待测溶液0.593 0.713 0.624

实验报告-紫外-可见分光光度法测铁的含量-

一、实验目的： 了解朗伯-比尔定律的应用，掌握邻二氮菲法测定铁的原理；了解分光光度计的构造；掌握分光光度计的正确使用方法；学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。 二、实验原理 邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。在pH＝2～9 的条件下，邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，其反应式如下： Fe3+能与领二氮菲生成淡蓝色配合物（不稳定），故显色前加入还原剂：盐酸羟胺使其还原为Fe2+。。 三、仪器及试剂 紫外可见分光光度计、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL、0.1%邻菲罗啉水溶液、10%盐酸羟胺水溶液、1mol/lNaAc缓冲溶液（pH4.6）。 四、实验步骤 1．吸收曲线的绘制和测量波长的选择 吸取0.0mL和6.0mL 铁标准溶液分别注入两个50 mL容量瓶中，依次加入5mlNaAc溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔0.5nm测吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。 2、标准曲线的绘制

分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在其最大吸收波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度，以铁含量(mg/50ml)为横坐标，溶液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 五、实验记录及数据处理 波长/nm 吸光度 标准溶液（0.01g/L）未知液容量瓶编号 1 2 3 4 5 6 7 吸取的体积0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 吸光度A （1）绘制曲线图。

可见分光光度计常见故障的维修技巧

723可见分光光度计常见故障的维修技巧 723型可见分光光度计是采用单片微机控制的普及型智能化仪器。仪器能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量分析，仪器波长精度高，读数稳定，具有自动调整“100”、调整“0”、四孔校正、自动扫描、自动绘图、打印及浓度计算等功能，广泛用于医学临床、无机分析、酶分析、药品检验、三废检测、环境保护、金属分析等等。 笔者是一名从事仪器维修的工程师，通过近十年来对723可见分光光度计的操作应用和实际维修，了解和总结了一些该型仪器的常见故障和维修技巧，在此列举一二。 故障一：仪器开机显示波长为320.0后，不进行波长扫描，而是显示Errl 原因分析：仪器显示Errl表示仪器在能量检测过程中检测到的能量过低或能量检测不到。可能的原因有： 1. 试样槽位置没有准确定位，挡住了部分或全部单色光； 2. 反射镜灰尘太多或发生霉变，导致反射光光强太弱； 3. 钨卤灯不亮或亮度不足； 4. 单色器能量低或光电管端部能量低，灵敏度差，输出信号小； 5. 前置放大电源正负15伏电压或前置放大电路本身故障。 故障解决程序:对于1、2两种情况,一般凭视觉即可看出,重新对试样槽定位、清扫反射镜即可排除故障。而对于其它三种可能，则本着先易后难的原则，逐步排除： 1. 检查滤光片和光路，一般情况下不应该有什么问题； 2. 检查灯电源是否在10.5至11.0伏之间,不正常调整到正常值,如果钨卤灯不亮则更换钨卤灯； 3. 检查前置放大电源正负15伏电压是否正常, 不正常则予以维修 (一般情况下3DD15容易损坏)。 4. 在开机显示320.0时检查前置放大CA3140的输出信号,若信号大于25毫伏则表明前置放大电路故障,维修或更换; 若信号小于25毫伏则表明: (1) 单色器能量低,重新调整。 （2）光电管端部能量低，更换光电管。 注意事项:在更换钨卤灯时： 1． 必须在关掉电源待整机冷却后进行；

722S型可见分光光度计操作规程

722S型可见分光光度计操作规程 一、目的 规范722S型可见分光光度计操作程序，正确使用仪器，保证检测工作顺利进行，操作人员人身安全和设备安全。制定本作业指导书。 二、适用范围 适用于722S型可见分光光度计的使用操作。 三、职责 1 722S型可见分光光度计操作人员按照本规程操作仪，对仪器进行日常维护，作使用登记。 2 722S型可见分光光度计保管人员负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期维护、保养, 确保使用的仪器处于检定有效期内。 3 科室负责人负责仪器综合管理。 四、性能指标 波长范围：340nm-1000nm 波长精度：≤±2nm 波长重复性：≤1nm 光谱带宽：6nm 透射比范围：0.0-199.9%(T) 吸光度范围：-0.3-2.999（A） 浓度显示范围：0-9999（C） 透射比准确度：±0.5%（T） 透射比重复性：0.3%（T） 杂光:<0.5%（T）(在360nm处，以NaNO2测定) 五、基本操作 1、预热 为使仪器内部达到热平衡，开机后预热时间不小于30 分钟。开机后预热时间小于30 分钟时，请注意随时操作置0%(T)、100%(T)，确保测试结果有效。 注意：由于仪器检测器（光电管）有一定的使用寿命，应当尽量减少对光电管的光照，所以在预热的过程中应打开样品室盖，切断光路。 2、改变波长 通过旋转波长调节手轮可以改变仪器的波长显示值(顺时针方向旋转波长调节手轮波长显示值增大，逆时针方向旋转则显示值减少)。调节波长时，视线一定要与视窗垂直。 3、置参比样品和待测样品 （1）选择测试用的比色皿； （2）把盛好参比样品和待测样品的比色皿放到四槽位样品架内； （3）用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置。当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推拉一下以确保定位正确。 4、置0%(T)

微区紫外-可见分光光度计的设计与应用

实验7微区紫外-可见分光光度计的设计与应用 利用物质分子或者离子对某一波长范围的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析、以及结构分析，所依据的光谱是分子或者离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按照所吸收的波长区域不同可以分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外－可见分光光度法。物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过实验掌握紫外－可见吸收光谱分析所依据的物理原理，初步掌握微区紫外-可见分光光度计的设计方法，并利用实验室设备搭建测量光路。初步掌握利用吸收谱分析染料的能级结构和光学参数的方法。 一、实验目的 1.掌握紫外－可见吸收光谱分析所依据的物理原理 2.初步掌握微区紫外-可见分光光度法测量物质吸收谱的光路设计 方法，并利用实验室设备搭建测量光路。 3.初步掌握利用吸收谱分析染料的能级结构和光学参数的方法。 二、实验原理 光谱分析可以分为发射光谱分析和吸收光谱分析两大类。当构成物质的分子或原子受到激发而发光，产生的光谱称为发射光谱，发射光谱的谱线与组成物质的元素及其外围电子的结构有关。吸收光谱是指光通过物质被吸收后的光谱，吸收光谱则决定于物质的化学结构，

与分子中的双键有关。物质对光的吸收，与其分子结构有密切关系，因而不同物质因结构的差异，产生不同的吸收光谱，亦即吸收曲线。 （一）分子吸收谱的产生 分子吸收谱的形成机理是由于能级之间的跃迁所引起的，在分子中除了电子相对于原子核的运动外，还有原子核的相对振动和分子作为整体绕其质心的转动。分子的这三种运动状态都对应一定能级，它们之间的关系为：elec vib rot E E E ?>?>? 处在同一电子能级的分子，可能由于振动能量的不同，处在不同的振动能级上。分子处在同一电子能级和振动能级时，可能由于转动能级的不同而处在不同的转动能级上。所以分子的总能量是三种能量的总和 mol elec vib rot E E E E =++ （1） 当用频率为v 的光照射分子，而该分子的较高能级与较低能级之差E ?恰好等于hv 时，此时在微观上出现分子由较低能级跃迁到较高能级，在宏观上体现为光的强度变弱。若用一连续频率的光照射分子，将照射前后光强度的变化变为电信号记录下来，就可以得到一张光强度变化对波长的关系曲线。即分子吸收光谱图。 图1是双原子分子的能级示意图。从图中可看出，在同一电子能级中有几个振动能级，而在同一振动能级中又有几个转动能级。电子能级间的能量差一般为l ～20电子伏特(eV)。因此，由电子能级

紫外分光光度计实验报告

UV-2550紫外分光光度计的使用和分光光度法测定对苯二酚姓名：XXX 专业：有机化学学号：312070303004 时间：2012.10.21 1.目的 （1）了解UV-2550紫外光谱仪的基本使用方法。 （2）了解测定对苯二酚的紫外光谱实验方法。 2. 试剂和仪器 2.1试剂： 标准溶液0.10m g/mL，准确称取0.25g对苯二酚溶于250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，从中取出10ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液。 2.2 仪器： UV-2550型分光光度计。 3. 实验步骤 3.1 测量波长的选择 用吸量管吸取5.0ml对苯二酚标准溶液于25ml容量瓶中，加入0.5ml pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏水定容，振荡混匀。15分钟后用1cm比色皿，275-330nm波长范围, 进行扫描。从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax。 3.2 对苯二酚含量的测定 (1)标准曲线的制作 在6个25ml容量瓶中，用吸量管分别加入0，1.0, 2.0, 3.0,4.0,5.0ml 对苯二酚标准溶液，加入0.5ml pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏水定容，振荡混匀。用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在最大吸收波长处，用光度模块作标准曲线。 (2)试样中对苯二酚含量的测定 准确吸取一定体积的样品于40ml容量瓶中，加入0.5ml pH=4.1乙酸-乙酸钠，用水稀释至刻度，摇匀。在光度模块中直接读出试样中对苯二酚含量。 4. 实验结果 4.1 测量波长的选择 从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax=288.80。 见图1 吸收曲线 4.2 对苯二酚含量的测定 (1)标准曲线的制作 见图2 标准曲线 (2)试样中对苯二酚含量的测定 对苯二酚含量0.354 相对误差为11.5%

紫外可见分光光度计使用、维护保养标准操作规程

紫外可见分光光度计使用、维护保养标准操作规程 1 范围 适用于UV1000型紫外可见分光光度计使用、维护保养。 2 引用标准 《紫外可见分光光度计操作手册》 3 职责 QC使用人：负责按本规程进行操作。 4 内容 4.1 接通电源 打开仪器电源开关，仪器显示屏将进入初始化前的任务选项界面。仪器上电后，进入下图所示的界面。

等流程。仪器的设置界面如下图所示。 一般情况下，仪器上电后应首先进行仪器的基本参数设置，然后仪器按当前的设置进行自检。若测试条件不变，一般情况下可直接点击“自检”键，进入自检过程。但若用户更改了样池类型设置、语言设置，则必须在设置完成后按“C”键退出，然后切断仪器电源、重新上电启动、自检。自检过程大约需要6分钟。 若自检过程中出现“氘灯波长定位错误”，可按“C”键退出错误提示，将钬玻璃标准块插入2号样池，然后进行仪器波长校正。若样池设置为单样池，在校正过程中根据屏幕提示将钬玻璃标准块插入单样池。 自检通过后，仪器进入测试状态，主菜单如下图所示。点击菜单序列号对应的数码键，或使用键盘上的▲▼光标控制键使光标移动到相应的功能选项上,然后按ENTER键即可进入所选的功能;按C键可返回上一级目录.

主菜单中功能选项共有六项： ◎光度测量：在此功能下,可进行吸光度或透过率的测量。 ◎定量测量：包括单标样分析法、工作曲线法。 ◎光谱扫描：可进行光谱扫描，并具备相当强的的谱图分析功能。 ◎动力学测量：可进行时间扫描，并具备一定的谱图分析功能。 ◎附加功能：包含一些常用的特殊检测流程，比如DNA的检测、水质总氮的测定。 ◎历史数据库：在此功能下，可查阅或打印仪器内部存储的以往分析数据或谱图。 ◎参数设置：在此功能下，重新设置仪器参数,包括带宽、换灯点、日期时间、样池类型、界面语言等。 若用户需要重新进行仪器参数设置、自检、校正等操作，可点击主菜单左下角的“返回”功能键，进入开始界面。 4.2 定量测量 在主菜单界面上点击1号键、或使用键盘上的▲▼光标控制键将光标移动到定量测量功能选项上,随后按ENTER键便可进入如下图所示的定量测量主菜单。