PMSF及常用试剂的配制方法

P M S F及常用试剂的配制方

法

Prepared on 22 November 2020

PMSF

英文全称：Phenylmethanesulfonylfluoride

中文名称：苯甲基磺酰氟

分子式：C7H7FO2S

分子量：

CAS号：[329-98-6]

PubChem号：4784

结构示意图：

分类：

OrganicChemicals

SulfurCompounds

Sulfones

PhenylmethylsulfonylFluoride

使用介绍：

1）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）；

2）10mg/ml溶于异丙醇（或无水乙醇）中；

3）在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.；

4）工作浓度：17~174ug/ml（~1mM），储存液浓度为100或200mM；

5）在水液体溶液中不稳定，30分钟就会降解一半，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF，样品处理超过1h,补加一次。（见水分解，使用前加入）

【注意事项】

剧毒，严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为时，20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。PMSF的储存：2-8℃可以存放数月之久。欲长期保存，可冻存在-20℃

例:100mMPMSF

称量(针状结晶固体)溶于10ml异丙醇,震荡混匀，保存在-20度或４度.

工作浓度我一般用1mM,1:100(V/V)加入即可.样品处理超过1h,补加一次.

(PMSF剧毒,为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作．PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了

PMSF，应立即用大量水冲洗之。）

PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH 值为时，20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

用异丙醇溶解PMSF成ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达ml的贮存液（100mmol/L）。

常用试剂的配制：

1、30%丙烯酰胺

(1)配制方法：将29G丙烯酰胺和1gN，N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中，加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml，用Nalgene滤器（孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于，置之不理棕色瓶中保存于室温。

（2）说明：小心丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具螺积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。

一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman1号滤纸以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酸和双丙烯酸。

2、10%过滤酸铵

（1）配制方法：把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。

3、1mol/L氯化钙

（1）配制方法：在20ml纯水中（Milli-Ce水或相当级别的水）溶解

54gCacl26H2O用滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。

（2）说明：制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用纯水稀释至100ml，用Nalgene滤器（孔径）过滤除菌，然后聚冷至0℃。

4、1mol/L二硫苏糖醇（DTT）

（1）配制方法：用L乙酸钠溶液（）溶解，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

（2）说明：DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

5、LEDTA（）

（1）配制方法：在800ml水中加入=水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-

Na2H2O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至（约需20gNaoh颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。

（2）说明：EDTA二钠盐需加入NaoH将溶液的pH值调至接近时，才能完全溶解。

回到页首

6、10mg/ml溴化乙锭

（1）配制方法：在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容光焕发器或转移至棕色瓶中，保存于室温。

（2）说明：小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。这些溶液使用后应按附录E提供的方法之一进行净化处理。

7、100mmol/LIPTG

配制方法：IPTG为异丙基硫式-β-D-半乳糖苷（分子量为），在8ml蒸馏水中溶解2gIPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

8、1mol/L硫酸酶

（1）配制方法：在800ml水中溶解四水乙酸镁，用水定容至1L，过滤杀菌。

9、β巯基乙醇（BME）

（1）配制方法：一般得到的是L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃；

（2）说明：BME或含有BME的溶液不能高压处理

10、酚/氯仿

（1）配制方法：一般得到的是LTrisCl（）抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的LTrisCl（）液层，保存于4℃。

（2）说明：小心，酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

11、10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）

（1）配制方法：用异丙醇溶解PMSF成ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃，如有必要可配成浓度高达ml的贮存液（100mmol/L）。

（2）说明：小心：PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸和，吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触3PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣服应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定，应在使用前从贮存液中现用现加入裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率高于4℃。pH值为时，20umol/L的PMSF溶液的半寿期大约为35分钟（James，1978），这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

回到页首

12、磷酸盐缓冲溶液（PBS）

（1）配制方法：在800ml蒸馏水中溶解8gNacl、、和，用HCL调节溶液的pH 值至加水定容至IL，在1516f/in2（×105Pa）高压下蒸汽灭菌20分钟，保存于室温。

13、乙酸钾溶液（用于碱裂解）

（1）配制方法：在60ml5mol/L乙酸钾溶液中加入冰乙酸和水，即成钾浓度为3mol/L，而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。

14、3mol/L乙酸钠

（1）配制方法：在800ml水中溶解三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至或同稀乙烯调节pH值至，加水定容到1L，分装后高压灭菌。

15、5mol/L氯化钠

（1）配制方法：在800ml水中溶解加水定容至1L，分装后高压灭菌。

16、10%十二烷基硫酸钠（SDS）

（1）配制方法：在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至，加水定容至1L，分装备用。

（2）说明：SDS的微细晶粒易于扩散，因此称量时要戴口罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10%SDS溶液无须灭菌。

回到页首

17、20×SSC

（1）配制方法：在800ml水中溶解和柠檬酸钠，加入数滴10mol/LNach溶液调节pH值至加水定量至1L，分装后高压灭菌。

18、100%三氯乙酸

（1）配制方法：在装有500gTCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%（W/V）TCA。

19、1mol/LTris

（1）配制方法：在800ml水中溶解碱，加入浓HCL调节pH值至所需值。

应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。（2）说明：如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃，并置备质量更好的Tris。尽管多种类型的电级均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得适合的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低.03个单位。例如：L的溶液在5℃、25℃和37℃时的pH值分别为、和。20、Tris缓冲液溶液

（1）配制方法：在800ml蒸馏水中溶解8gNacl、和3gTris碱，加入酚红并用Hcl调pH值至，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2（×105Pa)高压下蒸汽灭菌20分钟，于室温保存。

21、X-gal

（1）配制方法：X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal 溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃，X-gal溶液无须过滤除菌。

试剂配制方法

试剂的配制 1、酚酞指示剂：酚酞1g+无水乙醇100ml混合液0.5+50mL 2、淀粉指示剂：淀粉0.5g + 100ml水（加热100℃保持2-3分钟），冷却至室温备用。 随配随用，6天失效。 3、冰乙酸氯仿（三氯甲烷）混合液：冰乙酸60ml + 三氯甲烷40ml 4、树脂粉二硫化碳饱和溶液：纯净的树脂粉2-3g + 二硫化碳100ml，摇晃几分钟使 其成为饱和溶液，再用滤纸过滤后即可。 5、碘化钾KI饱和溶液：碘化钾10g + 蒸馏水5ml 6、乙醇乙醚混合液：无水乙醇100ml + 无水乙醚100ml + 5滴1%的酚酞指示剂 7、KOH-甲醇溶液配制：K（OH）11.2 g + 甲醇100ml 8、KOH配制：KOH称取14g + 2000ml蒸馏水，放置一个月标定 KOH标准溶液的标定及浓度： 清洗2个瓶子→称重（取平均值误差小于0.00005g）→邻苯二甲酸氢钾0.6g（烘105℃90分钟）→加蒸馏水80ml完全溶解→加2-3滴1%酚酞指示剂. 用上面配制好的邻苯二甲酸氢钾溶液来滴定待标定的KOH标准溶液， 滴加到变为微红色（30秒不变色）即可。记下滴定体积V。 邻苯二甲酸氢钾重量M KOH标准溶液的浓度= 滴定体积V ×邻苯二甲酸氢钾分子量（0.2042） 9、硫代硫酸钠溶液：硫代硫酸钠26g + 碳酸钠0.2g（或硼砂3.8g）+ 蒸馏水 至1000ml ，放置一周标定。 标定：称取0.15g在120℃干燥的重铬酸钾，置于500ml碘量的瓶中，加入50ml蒸馏水使之溶解，加入2g碘化钾使之溶解，再加入（1+8）比例的硫酸溶液20ml（10ml的浓硫酸+80ml 蒸馏水），密塞摇匀。放置阴暗处10分钟后加250ml蒸馏水。 用硫代硫酸钠的溶液滴至浅黄色， 再加入0.5%的淀粉指示剂3ml,继续滴定滴至蓝色消失而显亮绿色。 重铬酸钾M 硫代硫酸钠溶液的浓度= 滴定体积V ×重铬酸钾分子量（0.04903） 4. 硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）

常用试剂的配制.

常用试剂的配制 1．无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO 3 0.175g Na 2HPO 4 ·12H 2 O 0.076g KH 2PO 4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO 3调整 pH 值至7.4，4℃冰箱保存备用。 2．甲基红试剂 （1）成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95％乙醇 300ml （2）用途：测定甲基红反应。 3．Hanks液（原液） 原液甲： NaCl 160g KCl 8g MgSO 4·7H 2 O 2g MgCl 2·6H 2 O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl 2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 原液乙： Na 2NPO 4 ·12H 2 O 3.04g KH 2PO 4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水，溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO 3 调整PH值。 4．0.4%酚红溶液 称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒

几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5．pH7.2 Tris-NH 4 CI溶液(红细胞崩解液） Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH 4 Cl（氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4℃保存。 6．0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。 7．磷酸盐缓冲液(PB) A 液：为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH 2PO 4 ·H 2 O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最 后补加蒸馏水至 1000ml 。 B 液：为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na 2HPO 4 .7H 2 O 3.6g（或 Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g, 或Na 2HPO 4 · 2H 2 O 35.6g ）, 加蒸馏水溶解，最后加水至 1000ml。若再加 蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。 8．0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS） 硼酸钠（Na 2B 4 O 7 .10H 2 O） 0.46g 硼酸（H 2BO 3 ） 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。9．PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法一： 0.2mol/L Na 2HPO 4 （ Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g加蒸馏水至1000ml） 0.2mol/L NaH 2PO 4 （NaH 2 PO 4 ·2H 2 O 35.6g加蒸馏水至1000ml） 取0.2mol/L Na 2HPO 4 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2 PO 4 19ml,再加1900mlH 2 O和 17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。 PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。 配制方法二： 甲液（0.1mol/LKH 2PO 4 溶液）：KH 2 PO 4 13.608g，加蒸馏水至1000ml。 乙液（0.1mol/L Na 2HPO 4 溶液）：Na 2 HPO 4 35.814g，加蒸馏水至1000ml。 取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。

实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱

常用实验试剂配制

1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0）柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖（Ficoll 400）0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白（BSA）0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性，随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween（吐温） 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer

各实验试剂配制方法

NOx的测定试剂配制 1、1.00g/L盐酸萘乙二胺贮备液：称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C10H7NH(CH2)NH2·2HCl)于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中，在冰箱中冷藏可稳定三个月。 2、显色液：称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H)，溶解于约200ml热水中，将溶液冷却至室温，全部移入1000ml容量瓶中，加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸，用水稀释至标线。此溶液于密闭的棕色瓶中，在25℃以下暗处存放，可稳定三个月。若呈现淡红色，应弃之重配。 3、吸收液：临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合，即为吸收液。吸收液的吸光度不超过0.005(540nm，lcm比色皿，以水为参比)。否则，应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。 4、亚硝酸钠标准贮备液：准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02，优级纯，预先在干燥器内放置24h)溶解于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线。贮于密闭的棕色试剂瓶中，可稳定三个月。此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。 5、亚硝酸钠标准使用液：吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至标线。临用前现配。此溶液每毫升含2.5μg亚硝酸根。 6、硫酸溶液C(1/2H2S04)＝lmol/L：取15ml硫酸(ρ＝1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。 7、酸性高锰酸钾溶液：称取25g高锰酸钾，稍微加热使其全部溶解于500ml水中，然后加入lmol/L硫酸溶液500ml，混匀，贮于棕色试剂瓶中。

SO 2的测定试剂配制 1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)＝0.0050mol/L ：称取1.82g 反式-l ，2-环己二胺四乙酸((trans-1，2-Cyclohexylenedinitrilo)tetraacetic acid ，简称CDTA)，加入1.50mol/L 的氢氧化钠溶液6.5ml ，溶解后用水稀释至100ml 。 2、甲醛缓冲吸收液贮备液：吸取36%～38%的甲醛溶液5.5ml ，0.050mol/L 的CDTA-2Na 溶液20.0ml ；称取2.04g 邻苯二甲酸氢钾，溶解于少量水中；将三种溶液合并，用水稀释至100ml ，贮于冰箱，可保存10个月。 3、甲醛缓冲吸收液：用水将甲醛缓冲吸收液贮备液稀释100倍而成，此吸收液每毫升含0.2mg 甲醛，临用现配。 4、氢氧化钠溶液C(NaOH)＝1.50mol/L 。 5、0.60％(m/V)氨磺酸钠溶液：称取0.60g 氨磺酸(H 2NSO 3H)于烧杯中，加入1.50mol/L 氢氧化钠溶液4.0ml ，搅拌至完全溶解后稀释至100ml ，摇匀。此溶液密封保存可使用l0d 。 6、碘贮备液C(1/2I 2)＝0.10mol/L ：称取12.7g 碘(I 2)于烧杯中，加入40g 碘化钾和25ml 水，搅拌至完全溶解后，用水稀释至1000ml ，贮于棕色细口瓶中。 7、碘使用液C(1/2I 2)＝0.05mol/L ：量取碘贮备液250ml ，用水稀释至500ml ，贮于棕色细口瓶中。 8、0.5％(m/V)淀粉溶液：称取0.5g 可溶性淀粉，用少量水调成糊状，慢慢倒入100ml 沸水中，继续煮沸至溶液澄清，冷却后贮于试剂瓶中。临用现配。 9、碘酸钾标准溶液C(1/6KIO 3)＝0.1000mol/L ：称取3.5667g 碘酸钾(KIO 3，优级纯，经110℃干燥2h)溶解于水，移入1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。 10、盐酸溶液(1+9)。 11、硫代硫酸钠贮备液C(Na 2S 2O 3)＝0.10mol/L ：称取25.0g 硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3·5H 2O)，溶解于1000ml 新煮沸并已冷却的水中，加入0.20g 无水碳酸钠(Na 2CO 3)，贮于棕色细口瓶中，放置一周后备用。如溶液呈现混浊，必须过滤。 12、硫代硫酸钠标准溶液C(Na 2S 2O 3)＝0.05mol/L ：取250.0ml 硫代硫酸钠贮备液，置于500ml 容量瓶中，用新煮沸并已冷却的水稀释至标线，摇匀。 标定方法：吸取三份0.1000mol/L 碘酸钾标准溶液10.00m1分别置于250ml 碘量瓶中，加入70ml 新煮沸并已冷却的水，加入1g 碘化钾，摇匀至完全溶解后，加入(1+9)盐酸溶液10ml ，立即盖好瓶塞，摇匀。于暗处放置5min 后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色，加入2ml 淀粉溶液，继续滴定溶液至蓝色刚好褪去为终点。硫代硫酸钠标准溶液的浓度按下式计算： V C 00 .101000.0?= （2-1-1） 式中：C ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L ； V ——滴定所消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，ml 。 13、0.05％(m/V)乙二胺四乙酸二钠盐(Na 2EDTA)溶液：称取0.25gNa 2EDTA(C 10H 14N 2O 8Na 2·2H 2O)，溶解于500ml 新煮沸但已冷却的水中，临用现配。 14、二氧化硫标准溶液：称取0.200g 亚硫酸钠(Na 2SO 3)，溶解于200mlNa 2EDTA 溶液中，缓缓摇匀以防充氧，使其溶解。放置2～3h 后标定。此溶液每毫升相当于320～400μg 二氧化硫。 标定方法：吸取三份20.00ml 二氧化硫标准溶液，分别置于250ml 碘量瓶中，加入50ml 新煮沸但已冷却的水、20.00ml 碘使用液及lml 冰乙酸，盖塞，摇匀。于暗处放置5min 后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色，加入2ml 淀粉溶液，继续滴定至溶液蓝色刚好

实验室常用生化试剂配方

实验室常用生化试剂配方 1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版） 抗生素 英文名称及缩写 抗性基因 贮藏液浓度(mg/ml) 100 25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35 25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配) 50 50 MM 使用终浓度（μg/ml）链霉菌 2CM YEME 大肠杆菌 LA或LB 氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMP Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph －* 10 10 2 5 10 5 100 10 －－ 25 25 20 25 10 － 50 －－－－－－ 2.5 － 5 50-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30

注意事项： (1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请 确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装； （2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并 设置阴性对照； （3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio （4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并 分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确 保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水 乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易 挥发，有剧毒； （5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存； （6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整； (7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次 性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂 对自身的损伤及对工作环境的污染。 注意事项： (1)表中所列酶均可以用无菌水配制，也可以用相应的缓冲液配制，缓冲液配制方法 参考《分子克隆实验指南（第3版）》： 蛋白酶 K缓冲液：50 mM Tris（pH 8.0），1.5 mM 乙酸钙； RNase A缓冲液：TE （pH 7.6）：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA；溶菌酶缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH 8.0）； (2) RNase A配制好后沸水浴处理5 min，取出贮存RNase A后首次使用时也需沸水 浴处理5 min后再使用； （3）制备原生质体时使用的溶菌酶配制时需过滤除菌，其他情况一般无需过滤除菌； （4）所有酶均应在-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，配制过程中尽量避免外界 污染。 （1）IPTG用无菌水配制，0.22μm一次性滤膜过滤除菌，分装保存于-20℃；

实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml □组份浓度100mg/ml Ampicillin □配制量50mL □配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。 2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 3.用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 Kan（卡那霉素）50mg/ml □组分浓度50mg/ml卡那霉素 □配制量50mL □配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。 2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml □组份浓度24mg/L IPTG □配制量50mL □配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。 X- Gal 20mg/m □组份浓度20mg/L X-Gal □配制量50mL □配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。 2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解， 定容至50mL。 3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。 LB培养基 □组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl □配制量1L □配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中 Tryptone（胰化蛋白胨）10g Yeast Extract（酵母提取物）5g NaCl（氯化钠）10g 2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。 3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。

药剂配制方法

化学需氧量的药剂配制方法 1.重铬酸钾标准溶液： 浓度为C=0.2500mol/L的重铬酸钾标准溶液：将13g（25g）的重铬酸钾在105℃干燥箱里烘干，时间为2小时放置干燥器内空气冷却（冷却时，要用定性滤纸把口盖住烧杯口，以防潮气），再用精细天平称重（称后的重量为12.258g[24.516g],当天烘干，当天称量），放置烧杯中用纯水稀释，随放随搅，保证完全溶解，然后放入容量瓶中，稀释至1000ml(2000ml)。 2.硫酸-硫酸银试剂：向2.5L硫酸中加入25g硫酸银，放置3-4 天使之溶解，并混匀，使用前小心摇动。 3.硫酸亚铁铵标准滴定溶液： a:称40g(80g)硫酸亚铁铵放入大烧杯中。 b:加入700ml(1400ml)纯水。 C:加入20ml(40ml)浓硫酸。 d:搅棒搅匀，放24小时。 e:最后稀释至1000ml(2000ml). 4.试亚铁林指示剂： 溶解0.7g七水合硫酸亚铁于50ml的水中，加入1.5g邻菲罗啉，搅动加热至完全溶解，冷却后加水稀释至100ml。

阴离子表面活性剂试剂配制方法 1.4%氢氧化钠溶液： 取4g氢氧化钠用水定容至100ml。 2.3%硫酸 取3ml硫酸用水定容至100ml. 2.亚甲蓝溶液：称取50g一水合磷酸二氢钠（56.5g二水合磷酸 二氢钠）置于烧杯中，溶于水，慢慢岩壁加入6.8ml浓硫酸，混匀，转移入1000ml容量瓶中。另称取30mg亚甲蓝（指示级），用50ml水溶解后也移入容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。 3.酚酞指示剂溶液： 将1g酚酞溶于50ml乙醇，然后边搅拌边加入50ml水，滤去沉淀物。

实验室药品的取用和溶液的配制

实验室药品的取用和溶液的配制 1 固体试剂的取用规则 （1）要用干净的药勺取用。用过的药勺必须洗净和擦干后才能再使用，以免沾污试剂。 （2）取用试剂后立即盖紧瓶盖。 （3）称量固体试剂时，必须注意不要取多，取多的药品，不能倒回原瓶。 2 液体试剂的取用规则 （1）从滴瓶中取液体试剂时，要用滴瓶中的滴管，滴管绝不能伸入所用的容器中，以免接触器壁而沾污药品。从试剂瓶中取少量液体试剂时，则需要专用滴管。装有药品的滴管不得横置或滴管口向上斜放，以免液体滴入滴管的胶皮帽中。 （2）使用胶头滴管“四不能”：不能伸入和接触容器内壁，不能平放和倒拿，不能随意放置，未清洗的滴管不能吸取别的试剂。 （3）配制一定物质的量溶液时，溶解或稀释后溶液应冷却再移入容量瓶。 （4）配制一定物质的量浓度溶液，要引流时，玻璃棒的上面不能靠在容量瓶口，而下端则应靠在容量瓶刻度线下的内壁上（即下靠上不靠，下端靠线下）。 （5）容量瓶不能长期存放溶液，更不能作为反应容器，也不能互用。（一般用于配制标准溶液的容量瓶最好专用） 3 溶液的配制 （1）配制溶质质量分数一定的溶液 计算：算出所需溶质和水的质量。把水的质量换算成体积。如溶质是液体时，要算出液体的体积。 称量：用天平称取固体溶质的质量；用量筒量取所需液体、水的体积。 溶解：将固体或液体溶质倒入烧杯里,加入所需的水,用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解。（2）配制一定物质的量浓度的溶液 计算：算出固体溶质的质量或液体溶质的体积。 称量：用托盘天平称取固体溶质质量，用量筒量取所需液体溶质的体积。 溶解：将固体或液体溶质倒入烧杯中，加入适量的蒸馏水用玻璃棒搅拌使之溶解，冷却到室温后，将溶液引流注入容量瓶里。 转移：用适量蒸馏水将烧杯及玻璃棒洗涤2－3 次，将洗涤液注入容量瓶，振荡，使溶液混合均匀。

常用试剂配制及显色方法

https://www.wendangku.net/doc/a317739927.html, 常用试剂配制及显色方法 （一）通用显色剂 1．重铬酸钾——硫酸 一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至150o C斑点出现。2．碘：检查一般有机物 （1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高 显色的灵敏度。 （2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。3．碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。 4．5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后120o C烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。 5．20%磷酸乙醇溶液：喷后120o C，还原性物质显兰色。 6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶液。 溶液II：5%碳酸钠溶液。 溶液I和溶液II等量混合使用。 7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8．硝酸银——氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105o C烤5~10分钟，还原性物质显黑色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液。溶液II：氢氧化铵溶液。 临用前溶液I和溶液II以1：5混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9．硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。临用前配制。 溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。 10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。 溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II：6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。 11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。 溶液I：1%铁氰化钾溶液。溶液II：2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II

分子实验常用试剂配制(精)

氨苄青霉素 ﹡组分浓度 100mg/ml 氨苄青霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 5g Ampicillin置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。卡那霉素 (可配 25mL ﹡组分浓度 50mg/ml卡那霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 2.5g 卡那霉素置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。RNase A ﹡组分浓度 10mg/ml RNase A ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.取 0.5g RNase A置于 50ml 塑料离心管中。

2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 100℃煮沸 15min, 缓慢冷却至室温,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。IPTG ﹡组分浓度 24mg/ml IPTG ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1.2g IPTG置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 X-Gal ﹡组分浓度 20mg/ml X-Gal ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1g X-Gal置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40mlDMF (二甲基甲酰胺 ,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3.小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 DTT ﹡组分浓度 1M DTT ﹡配制量 10ml

各种化学试剂标准溶液的配制

常用试剂的配制一、标准溶液的配制 1、硫酸（H 2SO 4 ）溶液的配制： 1000mL浓度c（1/2H 2SO 4 ）=0.1mol/L，即c（H 2 SO 4 ）=0.05mol/L的硫酸溶液的配制： 取3mL左右的浓硫酸缓缓注入1000mL水中，冷却，摇匀。 新配制的硫酸需要标定，其标定方法如下： 称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠0.2g，溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验（取50mL水，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，同样用硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色）。计算公式为： 式中： m：无水碳酸钠的质量，g； V 1 ：滴定时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：无水硫酸钠的相对分子质量，g/mol，[M（1/2Na 2CO 3 ）=52.994）]。 测定氨氮时，氨氮含量的计算： 式中： 氨氮：氨氮含量，mg/L； V 1 ：滴定水样时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：硫酸溶液的浓度，mol/L； V：水样的体积，mL。 2、重铬酸钾（K 2Cr 2 O 7 ）溶液的配制 1000mL浓度c（1/6K 2Cr 2 O 7 ）=0.2500mol/L，即c（K 2 Cr 2 O 7 ）=0.0417mol/L的重铬酸钾溶液的配 制： 称取12.258g于120℃下干燥2h的重铬酸钾溶于水中，并移入容量瓶中，定容至1000mL，摇匀，备用。 3、硫酸亚铁铵标准溶液的配制：

实验室常规试剂的配制方法

目 录 蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 30% (W/V) Acrylamide 1 40% (W/V)Acrylamide 1 10% (W/V) 过硫酸铵 1 5×Tris-Glycine Buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液) 1 5×SDS-PAGE Loading Buffer 1 考马斯亮蓝R-250染色液 2 考马斯亮蓝染色脱色液 2 凝胶固定液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 凝胶处理液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 凝胶染色液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 显影液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin (100 mg/ml) 4 IPTG (24 mg/ml) 4 X-Gal (20 mg/ml) 4 LB培养基 4 LB/Amp培养基 4 TB培养基 5 TB/Amp培养基 5 SOB培养基 5 SOC培养基 5 2×YT培养基 6Φb×broth 6 NZCYM培养基 6

NZYM培养基 6 NZM培养基 7 一般固体培养基的配制 7 LB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基 7 TB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基 7 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)9 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 9 10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0) 9 3 M 醋酸钠 (pH5.2) 9 PBS Buffer 9 10 M 醋酸铵 10 Tris-HCl平衡苯酚 10 苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1) 10 10% (W/V) SDS 10 2 N NaOH 10 2.5 N HCl 10 5 M NaCl 11 20% (W/V) Glucose 11 Solution I (质粒提取用) 11 Solution II (质粒提取用)11 Solution III (质粒提取用) 11 0.5 M EDTA (pH8.0)11 1 M DTT1 2 10 mM ATP 12 核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 50×TAE Buffer (pH8.5)13 10×TBE Buffer (pH8.3)13 10×MOPS Buffer 13溴乙锭（10mg/ml） 13 Agarose 凝胶 13 6×Loading Buffer (DNA电泳用)14

常用试剂配制方法

常用试剂配制方法 氨试液 取浓氨水200ml，置1000ml量杯中，加水稀释至500ml。 碱性酒石酸铜试液：配600ml。 （1）取硫酸铜结晶20.8g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml试剂瓶中备用。（可长期保存） （2）取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml 试剂瓶中备用。（需新鲜配制） 临用前将两液等量混合，即得。 0.2％酚酞指示液：配500ml。（可长期保存） 粗称酚酞1g，置500ml量杯中，加95％乙醇500ml，使溶解，即得。 0.02mol/l氢氧化钠滴定液：配500ml。（可长期保存） 取氢氧化钠0.4g，置500ml量杯中，加水使溶解成500ml。 稀硝酸：配4000ml。（可长期保存） 取硝酸（16mol/L）210ml，置3000ml烧杯中，加水稀释至2000ml。配2次。 标准氯化钠溶液（10ug/ml）：配1000ml。（可长期保存） 精称氯化钠16.5mg，置100ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。（100μg/ml）临用前，精密量取储备液100.0mL，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 8．硝酸银试液：配500ml。（需新鲜配制） 取硝酸银8.75g，置500ml量杯中，加水溶解至500ml。 9．稀盐酸：配3000ml。（可长期保存） 取盐酸（12.5mol/L）702ml，置5000ml烧杯中，加水稀释至3000ml。 10．标准硫酸钾溶液（100ug SO4-2/ml）：配500ml。（可长期保存） 精称硫酸钾90.5mg，置100ml烧杯中，加水溶解后，转移至500ml量瓶中。 11．25%氯化钡：配3000ml。（可长期保存，第二年如混浊，过滤） 粗称BaCl2750g，置5000ml烧杯中，加水超声溶解并稀释至3000ml（澄清）。 12．标准铅溶液（10ugPb/ml）：配600ml 。 精称硝酸铅16mg，置50ml烧杯中，加硝酸0.5ml与水5ml溶解后，转移至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。（100ugPb/ml）（放冰箱长期保存） 临用前，精密量取储备液10.0ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 13．稀醋酸：配2000ml 。（可长期保存） 粗量冰醋酸（17.5mol/L）60ml，置1000ml量杯中，加水稀释至1000ml，调pH3.5。 14．醋酸盐缓冲液（PH3.5）：配2000ml。（包括阿司匹林的重金属检查，需新鲜配制） 粗称醋酸铵250g，置1000ml量杯中，加水250ml溶解后，加7mol/L 盐酸溶液380ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5（电位法指示），用水稀释至1000ml，即得。 15．硫代乙酰胺试液：配1200ml。（需新鲜配制） （1）粗称硫代乙酰胺8g，置500ml烧杯中，加水200ml超声溶解，转移至试剂瓶中（硫代乙酰胺液），置冰箱中保存。（需新鲜配制） （2）配制1mol/L NaOH 1000ml：粗称NaOH 40g，置1000ml量杯中，加水溶解至1000ml。取600ml NaOH，200ml水，800ml丙三醇在3000ml烧杯中混匀（混合液）。转移至试剂瓶中，置冰箱中保存。（可长期保存）临用前取混合液1000ml，硫代乙酰胺液200ml，置80℃水浴上加热30秒，冷却，分装。

常用试剂配制及显色方法详解

常用试剂配制及显色方法详解 (一)通用显色剂 1.重铬酸钾--硫酸 一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至150oC斑点出现。 2.碘:检查一般有机物 (1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高显色的灵敏度。 (2)0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。 3.碘--碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。 4.5%--磷钼酸乙醇溶液:喷后120oC烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。 5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120oC，还原性物质显兰色。 6碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶液。 :5%碳酸钠溶液。溶液II 溶液I和溶液II等量混合使用。 7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8.硝酸银--氢氧化铵(Tollen's--zoffaronl)试剂，喷后105oC烤5~10分钟，还原性物质显黑色。

溶液I:0.1N硝酸银溶液。溶液II:氢氧化铵溶液。 临用前溶液I和溶液II以1:5混合。注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9硝酸银--高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。临用前配制。 溶液II:高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。 10.四唑试剂:还原性物质，在室温或微加热时显紫色。 溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II:6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。 11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。 溶液I:1%铁氰化钾溶液。溶液II:2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II 等量混合。 12.浓硫酸:甲醇(1:1)溶液，或5%硫酸的乙醇溶液，喷后100oC烤15分钟，各种不同物质显不同颜色。 13.萤光显色剂溶液:试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其他萤光斑点。 A:0.2%2.7--二氯萤光素乙醇溶液。 B:0.01萤光素乙醇液 C:0.1%桑色素乙醇溶液 D:0.05罗丹明B乙醇溶液 E:萤光素一溴，检不饱和化合物。 萤光素乙醇溶液 (1)0.1%

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0) ■组份浓度 1 M Tris-HCl ■配制量 1 L ■配制方法 1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70 ml 7.6 约60 ml 8.0 约42 ml 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的 pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液 的pH值大约降低0.03个单位。 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 10×TE Buffer (pH7.4，7.6，8.0) ■组份浓度 1.5 M Tris-HCl ■配制量 1 L ■配制方法 1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的 pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液 的pH值大约降低0.03个单位。 ■组份浓度 100 mM Tris-HCI，10 mM EDTA ■配制量 1 L ■配制方法 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer（pH 7.4,7.6,8.0）100 ml 500 mM EDTA (pH 8.0) 20 m l 2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。 4. 室温保存。

化学试剂配制方法全解

电厂化学试剂配制 1、硬度： 一种测定硬度大于0.5me/L的水样； 二种测定硬度在1-0.5ue/L的水样。 ⑴、氨-氯化铵缓冲溶液：称取20g氯化铵溶于500高纯水中，加150ml浓氨水，用高纯水稀释至1000ml混匀；取50ml按第二方法测定其硬度，根据测定结果往其余950ml缓冲溶液加所需EDTA溶液抵消其硬度。 ⑵、（高硬度）氨-氯化铵缓冲溶液：称取67.5克氯化铵，加570ml浓氨水，加1gEDTA用高纯水稀释至1000ml混匀； ⑶、硼砂缓冲溶液：称取40g硼砂溶于80ml高纯水中，加入10g氢氧化钠，溶解后用高纯水稀释至1000ml，按上述方法抵消硬度。 ⑷、0.5﹪铬黑T指示剂（乙醇溶液）：称取0.5g铬黑T 与4.5g盐酸羟胺在研钵中磨匀，混合后溶于100ml95﹪乙醇中，转入棕色瓶中。使用期限不超过1个月。 ⑸、酸性铬蓝K指示剂（乙醇溶液）：称取0.5g酸性铬蓝K与4.5盐酸羟胺混合，加10ml氨-氯化铵缓冲溶液（硼砂也可）和40ml高纯水，溶解后用95﹪乙醇稀释至100ml. 使用期限不超过1个月。 2、磷酸盐： ⑴、磷酸盐储备液（1ml=1mgPO），称取在105℃干燥过的优级纯磷酸二氢钾1.433g溶于少量除4盐水中，并稀释至1000ml。 ⑵、磷酸工作溶液：（1ml=0.1mgPO4），取上述储备液10ml稀释至100ml ⑶、钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色液（酸性钼酸铵）：（A）称取50g钼酸铵和2.5g偏钒酸铵，溶于400ml除盐水中；（B）取195ml浓硫酸，在不断搅拌下徐徐加入到250ml除盐水中，并冷却至室温。将（B）配置的溶液倒入（A）配置的溶液中，用除盐水稀释至1000ml。 3、二氧化硅： ⑴、酸性钼酸铵溶液： A.称取50g钼酸铵溶于500ml高纯水中； B.取42ml浓硫酸，在不断搅拌下加入到300ml高纯水中，并冷却至室温。 C.将A加入到B中，然后用高纯水稀释至1000ml。 ⑵、10﹪酒石酸溶液（质量/体积） ⑶、1、2、4酸还原剂： A．称取1.5g1、2、4酸和无水亚硫酸钠溶于200ml高纯水中 1 B. 称取90g 亚硫酸氢钠，溶于600ml高纯水中。 C.将A加入到B中，然后用高纯水稀释至1000ml。 4、碱度： ⑴、1﹪酚酞指示剂： 称取1g酚酞，加100ml95﹪乙醇溶解，再以0.05mol/LNaoH中和至稳定的微红色。 ⑵、0.1﹪甲基橙指示剂：称取0.1g甲基橙溶于100ml除盐水中。 ⑶、甲基红-亚甲基蓝指示剂：准确称取0.125g甲基红和0.085g亚甲基蓝置于研钵研磨均