抗核抗体、抗双链-DNA及核抗原抗体联合检测对系统性红斑狼疮临床诊断的价值
抗双链DNA抗体检测标准操作规程(胶体金法)
抗双链DNA抗体检测标准操作规程(胶体金法) 1.目的： 规范抗双链DNA抗体检测的操作标准，确保检测结果的准确性 2. 原理： 斑点反应板上的固相纯化ds-DNA抗原特异地与血清中抗ds-DNA抗体结合形成复合物，胶体金标记的抗人IgG 单抗或SPA 再与复合物结合，形成肉眼可见的红色圆斑 3. 标本要求： （1）标本采集：静脉抽血3ml，不抗凝。 （2）标本保存：2-8℃可保存3天，不易反复冻融。 （3）特殊样本：溶血，高脂血等特殊样本在检测时会使背景偏深影响结果判断，可尝试用生理盐水稀释血清样本后检测。 4. 检验方法 （1）将待测血清样本和试剂盒恢复室温； （2）取出反应板，与反应板中滴入试剂A二滴，静置，待试剂A完全吸入； （3）用吸管吸取待测血清样本，滴四滴（约150微升）于反应板孔中，静置，待血清完全吸入； （4）取下反应板上的蓝色耳盖，滴入试剂B三滴，静置，待试剂B完全吸入； （5）再滴入试剂A二滴，静置，待试剂A完全吸入，在5分钟内观察反应板孔中的现象； 5. 结果判断 （1）阳性：反应孔中显现清晰的红色质控线和红色圆斑的为阳性； （2）阴性：反应孔中只显现清晰的红色质控线为阴性； （3）无效：反应孔中未显现红色质控线，表示操作失误或试剂无效。 6. 检验结果的解释 检验结果为阳性者即为抗双链DNA抗体检出阳性，阴性者即为抗双链DNA抗体未检出。若检测为无效结果，则应进行重复检测，并及时与生产厂家联系。 7.注意事项 （1）本品仅用于体外诊断。 （2）本品的检测结果仅可作为疾病的辅助诊断指标。 8. 临床意义： 本法用于快速检查血清中的ds-DNA 抗体，适用于SLE 的诊断和病情监测以及其它自身免疫性疾病的鉴别诊断。
化学发光法定量检测抗双链DNA+抗体的临床应用
垦堕坌堕堕堂壅查垫塑生！旦釜塑鲞箜！塑坠』！生！丛型：』塑些翌塑！：ｙ丛翌：№！ ?临床研究? 化学发光法定量检测抗双链ＤＮＡ抗体的临床 应用 凡瞿明刘炳张国元程吉兵卢晓岚李薇 【摘要】目的探讨定量枪测抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）抗体对系统性红斑狼疮（ＳＩ。Ｅ）疾病诊疗的 价值。方法将ＳＬＥ疾病患者６８例分为Ｓｕ！疾病活动组４３例和ＳＬＥ无明显疾病活动组２５例；非 ＳＬＥ的其他自身免疫性疾病３３例，健康对照组２６例。采用化学发光法检测各组血清中抗ｄｓＤＮＡ抗 体，比较该抗体在４组研究对象血清中的差异，探讨抗ｄｓＤＮＡ抗体定量检测在ＳＬＥ疾病活动组与 ＳＩ，Ｅ无明显疾病活动组问的应用。结果抗ｄｓＤＮＡ抗体在ＳＬＥ疾病活动组、ＳＬＥ无明显疾病活动 组、非ｓＩ。Ｅ的其他自身免疫性疾病组和健康对照组间均值分别为１２６．４１±９９．６２，３６．５７士６５．１０、 １０．８７±２２．３７和６．８２士１１．０９ＩＵ／ｍＬ；疾病活动组抗ｄｓＤＮＡ抗体水平与其他组之间差异有统计学 意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；该抗体在ＳＬＥ中与血沉，疾病活动指数晕正相关，与补体ｃ。、Ｃ。水平呈负相关。结 论抗ｄｓＤＮＡ抗体定量检测对于ＳＩ，Ｅ疾病活动性判断具有良好的应用价值，但不适合临床病程监 测，即诊断的价值大于其监测价值。 【关键词】红斑狼疮，系统性；化学发光测定法；抗体 中图分类号：Ｒ４４６．６１；Ｒ５９３．２４１文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２００９）０卜００４卜０３ Ｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｉｎｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡａｎ。 ｔｉｂｏｄｙＦＡＮＱ“一ｍｉｎ９１，ＬＩＵＢｉｎｇ２，ＺＨＡＮＧＧｕｏ－ｙｕａｎｌ，ｅｔａｌ．１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａ— ｔｏｒｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡ｛｛ｔｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮｏｒｔｈＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｄｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ６３７０００，Ｃｈｉｎａ、 ２．Ｇｒａｄｅ２００２，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＮｏｒｔｈＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｄｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ ６３７０００，Ｃ＾ｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｖａｌｕｅｏｆａｎｔｉ—－ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃ‘。 ｔｉｏｎｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ（ＳＬＥ）．ＭｅｔｈｏｄｓＳｉｘｔｙ－ｅｉｇｈｔＳＬＥｐａ— ｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐ（ｎ＝４３）ａｎｄｔｈｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐ（ｎ＝２５）；ｂｅｓｉｄｅｓ，３３ｐａｔｉｅｎｔｓ ｓｕｆｆｅｒｅｄｆｒｏｍｏｔｈｅｒａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅ。ａｎｄ２６ｈｅａｌｔｈｙｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙ．Ａｎｔｉ－ ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｉｎｓｅｒａｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（ＣＬＩＡ）．Ｔｈｅｎｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｗａｓｃｏｍｐａｒｅｄｉｎ４ｇｒｏｕｐｓａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｂｌｅｖａｌｕｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐ ａｎｄｔｈｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐｗａｓａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｉｎＳＩ，Ｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐ， ＳＩ。Ｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐ，ｏｔｈｅｒａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅｇｒｏｕｐａｎｄｈｅａｌｔｈｙｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅ１２６．４１士９９．６２， ３６．５７土６５．１０，１０．８７士２２．３，６．８２±１１．０９ＩＵ／ｍＩ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎＳＩ。Ｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａ— ｔｅｄｗｉｔｈＥＳＲａｎｄＳＬＥｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｅｉｎｄｅｘ（ＤＡＩ），ｗｈｉｌｅｎｅｇａｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＣ３ａｎｄＣ４．Ｃｏｎｃｌｕ－ ｓｉｏｎＴｈｅｑｕａｎｔｉｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｌａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｈａｓｇｒｅａｔｖａｌｕｅｉｎｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＳＬＥａｃｔｉｖｉ— ｔｙ，ｂｕｔｎｏｔｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｃｏｕｒｓｅ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔｓｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｅｘｃｅｅｄｓｍｏｎｉ— ｔｏｒｉｎｇｖａｌｕｅ． ［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ，ｓｙｓｔｅｍｉｃ；Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ＳＵＳ’系统性红斑狼疮（ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｈｏ—ＳＩ。Ｅ）是一种常见的累及全身多系统的自身免疫 性疾病，正确判断ＳＩ。Ｅ疾病活动性对治疗有重要意义。迄今，与疾病活动有关的指标达６０余种，常用的 ＤＯＩ：１０．３７６０／ｅｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２００９．０１．０１６ 作者单位：６３７０００四川南充。四川省川ｉ北医学院附属医院检验科（凡瞿明、张国元、程吉兵、卢晓岚、李薇）；６３７０００四ＪＩＩ南充，ＪＩＩ北医学院医学检验系２００２级（刘炳）有抗双链ＤＮＡ（ｄｅｕｂｌｅｓｔｒａｎｄＤＮＡ，ｄｓＤＮＡ）抗体、补体Ｃ。、Ｃ。等。其与ＳＩ。Ｅ疾病活动的相关性也有不同的报道ｎ｛］，可能与其检测方法和试剂的不同有关。本组采用全自动化学发光法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍ—ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＣＩ。ＩＡ）定量检测抗ｄｓＤＮＡ抗体，探讨其对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）疾病诊疗的价值。 资料与方法 １．一般资料６８例ＳＬＥ患者来自该院风湿科
抗双链DNA抗体IgG(Anti-dsDNA IgG)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求
抗双链DNA抗体IgG（Anti-dsDNA IgG）测定试剂盒（磁微粒化学发光免疫分析 法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中的抗双链DNA抗体IgG（Anti-dsDNA IgG）的含量。 1.1 产品规格 100测试/盒 1.2 主要组成成分 1.2.1 Anti-dsDNA IgG试剂1号（Anti-dsDNA IgG-R1）：5mL/瓶×1瓶， 含有生物素标记的dsDNA抗原（约0.25μg/mL）、牛血清白蛋白（0.5%）的Tris缓冲液（0.1mol/L，pH8.0）。 1.2.2 Anti-dsDNA IgG试剂2号（Anti-dsDNA IgG-R2）：15mL/瓶×1瓶， 含有ALP标记的羊抗人多克隆抗体（约0.25μg/mL）、牛血清白蛋白（3.0%）的Tris缓冲液（0.1mol/L，pH7.5）。 1.2.3 Anti-dsDNA IgG磁分离试剂（Anti-dsDNA IgG-M）：5mL/瓶×1瓶， 含有链霉亲和素标记的磁性微粒（约0.5mg/mL）、牛血清白蛋白（0.5%）的Tris缓冲液（0.1mol/L，pH8.0）。 1.2.4 Anti-dsDNA IgG校准品（Anti-dsDNA IgG-STD）（选配）：6个水 平的液体校准品，0.5mL/瓶×6个水平，含一定浓度抗dsDNA抗体IgG和牛血清白蛋白（3.0%）的Tris缓冲液（0.1mol/L，pH7.5），目标浓度分别为0、10、100、200、400和800 IU/mL，具体浓度详见校准品条码。 1.2.5 Anti-dsDNA IgG质控品（Anti-dsDNA IgG-QC）（选配）：2个水平 的液体质控品，1mL/瓶×2个水平，含一定量抗dsDNA抗体IgG和牛血清