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检验科标本采集手册

第一部分

一、标本采集的一般要求

1. 检验申请单的正确填写。

1.1 正确清晰的书写姓名和住院号,错误、不清楚的姓名或姓名与住院号不符者检验科将拒收拒检标本。住院患

者不要使用患者的姓名给其家属或其他患者开化验,出现此

情况检验科拒发报告。

1.2 正确填写或盖章注明门诊或科别、床号及申请医师,以

便检验人员在出现危急值时及时回报结果,或在对标本和结

果有质疑时及时联系临床核对情况,以免延误结果报告和临

床诊疗。

1.3 正确填写患者的性别、年龄,可以提示结果是否与生理状态相符,以帮助检验人员作出判断;更为重要的是部分项目报告的参考范围随性别和年龄的改变而不同。

1.4 患者的临床诊断及治疗状态(如是否抗凝治疗、是否正

在输液、透前、透后、术后等)可以帮助检验人员判断结果

是否与临床相符,降低复检率,减少成本支出。

1.5 正确填写标本类型,部分项目报告的参考范围随标本类

型的改变不同。如有特殊说明,如标本采集位置及采集时间

等,也应清楚注明。

1.6 正确标识申请检验项目,若用空白检验单填写检验项目

名称及英文缩写应规范。门诊患者申请单左侧收费通知单应同时标识申请检验项目,以便收费。

1.7 正确填写申请日期及(标本)采取时间,可以帮助检验人员判断标本是否合格,是否因超出正确的保存时间而影响检验结果的准确性。

2. 患者准备

2.1 病人在采血前24h 内应避免运动和饮酒,避免情绪激动,注意合理饮食除了急诊或其它特殊原因外,一般主张正常饮食3 天后采血,应避免暴饮暴食及刻意控制饮食。静脉血

标本采集最好在起床后1h 内进行。应在空腹10~14 小时后第二天清晨采血。餐后或延长空腹时间(饥饿)均可引起血液化学成分的改变。门诊病人提倡静坐15 分钟后再采血。另外饮食的量及质对检验结果也有影响,如高蛋白饮食可使血清尿素氮、血氨、尿酸升高;高脂肪饮食引起乳糜微粒血症,导致血清脂血(混浊);饮水过多或过少可使血清稀释或浓缩;含咖啡因的饮料可使儿茶酚胺释放等。

2.2 采血时间:有些血液成份日间生理变化较大,因此应相对固定采血时间,一般以清晨空腹抽血为宜〈急症项目除外〉。

2.3 患者体位:体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆

红素、Tch 及TG 等浓度增高;Hb、HCT、RBC 等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的相对一致性。

2.4 药物影响:很多药物进入人体后可使某些化验项目的结果增高或降低,如咖啡因可使血糖和胆固醇增高;冠心平可使甘油三酯和乳酸脱氢酶降低;维生素C 可使乳酸脱氢酶降低;口服避孕药可使转氨酶升高等。故病人在化验前应尽可能停服对检验有干扰的药物。

2.5 输液的影响:不能在静脉输液同侧臂或输液三通处进行

采血。输液时应在输液的另一侧手臂取血。

2.6 生活方式的影响:烟、酒、咖啡及高脂、高糖饮食,可使血液中某些成份高于正常,需与一般病理情况相区别,取血前几日应注意避免。

2.7 生理差别的影响:不同年龄组的个体及妇女的妊娠期、月经期,血液成份有一定的生理差异,应注意与病理情况区别。

3. 标本运送流程

3.1 门诊标本:一律实行先交费后采血,患者交费后,持检验申请单到门诊二楼检验科,血液标本到采血窗口采血后,由检验科当班人员分类运送人员负责运送到相应部门。尿液、体液标本到相应检验窗口取一次性采样杯,采样后由患者本人或家属与申请单一起送相应检验窗口。其它标本(如阴道分泌物、精液、前列腺液等)由医生协助采样,由患者本人或家属与申请单一起送相应检验窗口。微生物检验标本取样后由患者或家属与申请单一起送检验科。收到标本的检验人员负责签收标本并告知患者报告单领取时间。门诊患者凭缴费发票在规定时间内领取报告单。

3.2 住院标本:由各科室标本转送人员按照规定时间运送到检验科,由检验科人员签收后双方签字确认。

3.3 急诊标本:急诊患者可直接到检验科采血,行动不便者可由急诊科护士采血后家属连同检验单立即送到急诊化验室。住院急诊标本采样后,由标本转送人员或家属立即送到检验科。临床医生或护士在打印条码后请用红色笔在条码单上标明“急诊”字样,标本转送人员或家属应口头告知检验科标本接受人员,检验人员对符合接受要求的急诊样本进行登记、处理,并在规定的时间出具报告单。

4. 不合格及拒收标本

出现以下情况,视为不合格标本,检验人员可以拒收标本并通知患者或临床医生,同时做好相关记录。

4.1 申请单填写不符合要求,如信息不全或填写错误等。4.2 检验单与标本管上标识信息不相同。

4.3 采样容器与检验项目不相符。

4.4 送检样本与申请单标注样本类型不相符者。

4.5 标本容器有破损,或外部有明显的血渍、污渍者。

4.6 标本量不足够做检测。标本量过多或过少不符合检测要求。

4.7 采检时间不在可接受范围内。

4.8 标本严重溶血或脂血、标本采集不符合试验要求等。4.9 送微生物培养的样本被污染。

4.10 一些特殊检测的特殊要求,视具体情况而定。

5. 添加检验项目申请:(标本采集送出后需添加检验项目)5.1 急诊标本立即电话通知实验室,并在1 小时内将补开的申请单送至实验室。

5.2 住院标本应在标本采集当天上午12 点以前电话通知实验室,并在1 小时内将补开的申请单送至实验室。

5.3 门诊标本需患者补开申请单并缴费后将申请单送至实验室。

6. 重新采集标本:

如出现以下情况,实验室工作人员在与患者或医护人员沟通并同意后,可要求重新采集标本。

6.1 患者结果与历史记录有较大出入者。

6.2 患者结果与申请单信息明显不符者。

6.3 实验室人员怀疑标本被污染者。

6.4 因水、电、仪器、环境等因素导致分析失败,剩余样本不够再次检验者。

二、样本采集

1. 静脉血液采集

1.1 采血注意事项:严格按照无菌技术操作,无论医生、护士、检验人员除穿戴工作服外,还应戴帽子、口罩和一次性医用乳胶手套,同时严格做好采血者手和患者采血部位的消毒,防止患者采血部位感染。保证一人一针一管一带,杜绝交叉感染。真空采血过程如有血液外溢和污染,立即用0.2%消毒灵或其它消毒液进行消毒处理。对所有的采血材料严格执行使用前再次检查,保证安全。采血人员对所采集的标本做好登记工作,并签名。样品采集完后,对所使用的材料做好无害化处置,保证环境和人员安全。

1.2 采集流程

1.2.1 门诊静脉血采集流程

检验人员收取检验申请单→审查合格(核对检验单上费用,姓名、科别、检验项目等是否填写清晰,能正确辨认)→

按申请单上的病人姓名呼唤其姓名再次确认病人→确认采血静脉并严格消毒→按照采血管顺序采取静脉血→采血完成嘱咐患者用棉签压迫伤口→采血人员充分混匀样品→送至相关部门检测(由运送部人员完成)。

1.2.2 住院部静脉血采集流程

护士收取检验申请单→审查合格(核对检验单上姓名、住院号、科别、床号、检验项目等是否填写清晰,能正确辨认)→按申请单上的病人姓名呼唤其姓名以再次确认病人→确认采血静脉并消毒→按照采血管顺序采取静脉血→采血完成用棉签压迫伤口→充分混匀样品(在采血单上填上采血时间)→送至检验科检测(由临床医护人员完成)。

1.3 静脉采血时,止血带离抽血扎针部位上方约5cm 距离,注意袖筒不要太紧。通常选择手肘中央部分较粗的静脉血管,用食指触摸,是否为有弹性的血管(肌肉较无弹性),若该部位不明显,可改用手背处静脉(请患者手轻握)。确定穿刺部位后,以安尔碘或者爱尔碘等混合消毒液作为消毒剂,以选定之静脉穿刺部位为中心点,由内往外以环状涂拭消毒,消毒直径约7.5 cm 左右,稍待干躁后进行标本采集。

消毒后用一次性采血针穿刺,回血后将另一端的硬插管插入

真空定量采血管内,松开止血带,采血足量后,拔出硬插管,

可插入另一支真空采血管继续采血。整个采血过程无血液溢

出和污染,采血完成后,请病人手指压住棉签,手伸直抬高

于心脏,保持5 分钟,有出血倾向者(如紫癜,ITP,血液

病等)宜按压10 分钟以上至无血液渗出。把针头放入专用

利器废弃桶内。

1.4 静脉采血的注意事项:

1.4.1 在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质(含钾、钠、氯离子)的液体时,建议3小时以后采集静脉血标本进行这

些项目的检验,以防止上述检验项目因输液引起的假性升

高。如因抢救等原因需要在输液同时采血的,一定要在输液

对侧采集标本,医生应正确评价检测结果。禁止从中心静脉

插管、肝素帽等保留的治疗通道中采集血液标本。

1.4.2 止血带使用时间应少于1 分钟(建议在针头穿刺进入血管后即放松止血带),以免引起血液淤滞,局

部组织缺氧,造成血液某些成分的改变,特别是测定乳酸时

不可使用止血带,否则结果偏高。

1.4.3 血标本应防止溶血。引起溶血的原因有:容器不清洁、不干燥;淤血时间过长;穿刺不顺利;组织损伤过多;抽血速度过快;血液注入容器时未取下针头或注入速度过快时产

生大量泡沫;震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后,未取下针头直接将血液注入真空管内,也易造成溶血。

1.4.4 必须正确选择采血管。不同检验项目对采血管有各自要求,错误的使用采血管可能导致检验结果较大出入。采集凝血管和血沉管时注意抗凝剂与血液的比例,具体使用情况参照本手册。

1.4.5 采血后,同一病人不同抗凝剂之间的血液禁止相互倾倒,否则可能造成难以解释的检验结果。

1.4.6 采完血后,无抗凝剂的管无需颠倒,有抗凝剂或分离胶的血标本采集后立即轻轻混匀。

手法:上下完全颠倒5~8 次,手法轻柔,迅速。勿左右晃动、勿剧烈震荡,以防凝血发生。

1.5 真空管采血顺序:血标本采集时建议的真空管使用顺序如下

血培养(先需氧瓶,后厌氧瓶)凝血管(蓝)→血清管(红)→肝素管(绿)→EDTA管(紫)→血沉管(黑)→ACD 管(灰)→其它管。

2. 末梢血采集

2.1 常用选择无名指(婴幼儿可自拇指或足跟两侧采血),先用酒精棉球消毒,然后用一次性采血针穿刺,让血液自然流出,用消毒棉球轻拭去第一滴后,将血液收集在0.5 毫升eppendorf 离心管(内加EDTAK2 抗凝剂),约0.2-0.3 毫升。

2.2 用干棉球压住穿刺部位,嘱采血对象按压2-3 分钟。2.3 用手指轻弹离心管底部8 至10 次,或在微型震荡器混匀,让血液与抗凝剂充分混匀。

3. 尿液标本采集

3.1 尿液标本类型。

3.1.1 首次晨尿:即留取清晨第一次尿,能真实的反映肾脏病情况,尿液化学成分的检测最好采用晨尿。

3.1.2 随机尿:不为条件所限,适于门诊、急诊病人,但受多种因素,如饮水量、饮食等的影响。收集首次晨尿排泄后2-4 小时内的尿液标本作为第二次晨尿有利于尿液有形成分的检测。

3.1.3 午后尿:午餐后2h 尿中尿胆原和糖含量高,适于这两种成分的检验,可提高阳性检出率。

3.1.4 中段尿:微生物检验的样本应取中段尿并立即送检。

采集方法:女性病人先以肥皂水冲洗外阴部及尿道口;男性病人应翻转包皮,用肥皂水冲洗或消毒尿道口,再用灭菌纱布擦干,让病人排尿,弃去前段尿,收集中段尿10-20ml,盛于无菌容器内立即加盖送检3.1.5 12h 尿:需甲醛防腐(患者到门诊二楼化验室领取),100ml 尿液中加0.5ml。头晚8 时排空膀胱并弃去此次尿液,再收集至翌晨8 时前的全部尿液,适用于Addis 尿沉渣计数。

3.1.6 24h 尿:适于代谢产物24h 定量测定,如尿蛋白、糖、钠、钾、氯、钙、尿酸等。应准确的收集24h 尿液,采集方法:早上8 点到第二天早上8 点,早上8 时排空膀胱并弃去此次尿液,再收集,直到第二天早上8 点将小便全部收集在容器中,并测尿量,从混匀尿液中采集30ml 送检。收集24h 尿液根据检验目的加入适当防腐剂。24h 尿液沉渣还可用于找抗酸杆菌。收集24 小时尿液,原则上应首选0~4℃冷藏,必要时可添加化学防腐剂。

3.1.7 特殊体位采集标本:如分别采集直立或运动后尿标本与平卧8h 后尿标本,对体位性蛋白尿、运动性血尿诊断有帮助。

3.1.8 午2 点钟至4 点钟留取尿标本:适于尿胆原检查。3.1.9 清洁尿(中段尿、导尿、膀胱穿刺尿等):适于细菌培养,应注意无菌操作。

3.2 注意事项

3.2.1 应用清洁、有盖、干燥的一次性容器,防止日照与污染。

3.2.2 采集尿液量:尿常规与一般定性检查留取尿液约30ml。

3.2.3 容器应贴上标签,标签内容应包括:姓名/科室/床号/标本采集时间。

3.2.4 一般尿液检查要求标本要新鲜,留取后立即送检。放置2h 以上尿中成分可发生变化,如红细胞、白细胞溶解等。

3.2.5 尿标本要防止月经血、白带、精液、前列腺液、粪便、烟灰等异物混入。为此应尽量避免月经期检验尿。

3.2.6 尿胆原等化学物质因光分解或氧化,需要避光。

4 粪便标本采集

4.1 标本采集

4.1.1 用专用的一次性大便标本采集瓶采集粪便标本。避免受到尿液及其它污染。

4.1.2 一般检查留取约5g 左右的新鲜便即可。采集时应该采集有脓液、粘液、血液等异常的部分。

4.2 注意事项和要求

4.2.1 标本采集后需要密闭保存并立即送检。

4.2.2 检查阿米巴滋养体,应该采集后立即送检,立即检查。冬季需采取保温措施。血吸虫毛蚴孵化需全量新鲜标本(不少于30g)。

4.2.3 对粪便标本放置时间>2 小时,拒绝接收,在申请单注明“标本放置时间过长,请重留标本送检”。

5 阴道分泌物常规检查标本采集

5.1 标本采集

5.1.1 分泌物清洁度及微生态检查时,由临床医生操作,用灭菌拭子或吸管从阴道穹隆粘膜采取分泌物。

5.1.2 线索细胞及加德纳菌检查时要采集阴道壁表面的分泌物送检。

5.2 注意事项

5.2.1 取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道冲洗和上药。

5.2.2 标本采集后尽快送检,如果做滴虫检查时冬季要注意保暖。

6. 前列腺液采集

6.1 标本采集:由临床医生采用前列腺按摩术,采集前列腺液于清洁玻片上(或容器内)立即送检。

6.2 注意事项:标本采集时尽量避免精液的混入,采集后标本应立即送检。

7. 精液采集

7.1 标本采集采集精液的最好方法是让患者本人手淫采集,如有困难可用取精器(电按摩法)采集。将一次射出的全部精液直接排入清洁、干燥容器内。

7.2 注意事项:

7.2.1 采集精液标本前必须禁欲3 天,25~35 岁禁欲5 天,35~45 岁禁欲7 天。

7.2.2 禁止用性交中断法采集精液,因为这种方法会失掉射精前的一部分。

7.2.3 不能用乳胶避孕套采集,因避孕套内含有滑石粉可影响精子活力。

7.2.4 精液标本留取后应立即送检(如送检时间过长,超过2 小时或容器有溢漏,均不能作精液检查)。

8. 脑脊液采集

8.1 采集方法

8.1.1 标本由临床医生按照脑脊液采集相关规范要求进行采集。

8.1.2 收集脑脊液2-5ml 至红头空白管(无添加剂)送检;一般脑脊液采集三管,第一管用于细菌培养检查(无菌操作),第二管用于常规检查,第三管用于生化检查。

8.1.3 术毕,将针芯插入后一起拔出穿刺针,覆盖消毒纱布,胶布固定。

8.1.4 去枕平卧4~6 小时,以免引起术后低颅压头痛。

8.2 注意事项

8.2.1 严格掌握禁忌症。

8.2.2 收集标本后,必须立即送检。久置可致细胞破坏,葡萄糖分解,病原菌破坏或溶解。

细胞计数标本应注意防止凝集。

8.2.3 用于细菌培养的标本不可置冰箱冷藏或低温保存,否则会使病原微生物死亡,尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。

9. 浆膜腔积液(胸、腹水)采集

9.1 标本采集

9.1.1 标本由临床医生按照胸、腹水采集相关规范要求进行采集。

9.1.2 收集胸或腹水2-5ml 至红头空白管(无添加剂)送检。

9.2. 注意事项

9.2.1 严格无菌操作

9.2.2 收集标本后,为防止细胞变性出现凝固或细菌破坏溶解等,必须立即送检。

9.2.3 用于微生物检验标本不应置于冰箱内,以免细菌死亡而使培养阴性。

10. 滑膜液采集

10.1 标本采集

10.1.1 标本由临床医生按照采集相关规范要求进行采集。10.1.1 显微镜镜检应用肝素抗凝标本,每毫升约肝素钠25 单位(不可采用肝素锂、草酸盐或EDTA 干粉),采集标本1-2ml,颠倒混匀5-8 次,防止标本凝固。

10.2 注意事项

收集标本后,必须立即送检。

11. 骨髓采集

11.1 标本采集

11.1.1 骨髓细胞涂片需临床医生与检验科血液病诊断实验室事先预约,检验科人员到场后方可进行。

11.1.2 骨髓采集由临床医生按照相关操作规程进行。

11.1.3 骨髓涂片检查的骨髓液量不宜过多,一般不超过0.2ml,取出后由检验科人员迅速涂片,避免骨髓液凝固,每份标本涂片5~8 张。。

11.1.4 用于流式细胞术分析的骨髓标本一般不超过1ml,取下针头后注入EDTA-K2 抗凝管,

充分混匀。

11.1.5 骨髓活检标本采集后立即放置于固定液中。

11.2 注意事项

11.2.1 取材过程中如遇取材不佳或干抽,可换位取材。必要时应多部位取材,以便全面了解骨髓造血情况。

11.2.2 骨髓涂片由检验科人员带回实验室。

11.2.3 于流式细胞术分析的标本在采样后及时送检。若不能马上送检,室温可放置24 小时,不能冷冻或冷藏保存。11.2.4 骨髓活检标本由检验科人员带回实验室。若取材时无检验科人员在场,可由临床科室工作人员或患者、患者家属与申请单一起送至实验室。

12. 宫颈脱落细胞标本采集

12.1 标本采集由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈,最好在取样前先用棉签擦去宫颈分泌物;将宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5 圈;慢慢取出宫颈刷,将其放入标有病人姓名的取样管中,取样管内已加有专用细胞保存液,拧紧瓶盖。

12.2 注意事项

12.2.1 不可在碘试验和醋酸试验之后采集样本

12.2.2 采样前24 小时内不应有性生活

12.2.3 采样前3 天不要使用用避孕药膏等阴道内药物或对阴道进行冲洗。

12.2.4 月经期不可采集标本

13. 临床微生物标本采集

13.1 血(骨髓)培养标本的采集:

13.1.1 采集容器根据患者使用抗生素情况选用相应的血培养瓶。未使用抗生素的患者:蓝瓶(需氧)+红瓶(厌氧);使用过抗生素的患者:绿瓶(需氧)+红瓶(厌氧)。婴幼儿患者血及骨髓标本、成人骨髓标本均只选用黄瓶(需氧)。

13.1.2 皮肤消毒程序同血液常规采集消毒方法。骨髓采集由临床医生按照相关操作规程进行。

13.1.3 培养瓶用消毒剂檫拭血培养瓶橡皮塞,作用60 秒,

然后将采集的血液或骨髓注入瓶内,并轻轻摇匀,以防凝固。

13.1.4 采血量:成人患者一般以5~10ml/瓶为宜,婴幼儿患者一般不少于2ml,骨髓量一般为1~2ml。

13.1.5 血培养份数和采血时间

13.1.5.1 患者在采集血液标本时最好是在使用抗生素之前;若已用药而又不能停药的患者,也应在下次用药之前。13.1.5.2 对怀疑菌血症的成人患者,推荐同时采集2 套(不同部位,如左、右手各采一套)血培养标本。

13.1.5.3 婴幼儿患者,推荐同时采集2 次(不同部位,如左、右手各采一次)血培养标本。

13.1.5.4 一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份培养或一套血培养。多次采血不应在同一部位进行,应更换部位。对于间歇性寒颤或发热应在寒颤或体温高峰到来之前0.5-1 小时采集血液。

13.1.5.5 对于某些全身性和局部感染患者采血培养的建议:

a) 急性发热怀疑菌血症者,应尽量在抗菌药使用之前,在

10 分钟内于不同部位采集两套血标本,每一套血标本接种需氧和厌氧培养瓶各一个。

b) 对于非急性感染,怀疑有菌血症者,应在24h 内于不同部位采集2-3 套血标本,每次采血的间隔不应小于3h,并应于抗菌给药前或两次用药间隔期间采血。

c) 急性细菌性心内膜炎患者,应在1-2 小时内采集3 套血标本,并尽量在使用抗菌药前采血;如果24 小时培养阴性,可再采集3 套以上的血标本。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3 天,每天采集2 套,可选用中和或吸附抗菌药物的培养瓶。

d) 亚急性细菌性心内膜炎患者,在24 小时内不同部位采集血液标本2 或3 套,每次间隔大于1h;如果24 小时培养阴性,可再采集2 或3 套以上的血标本进行培养。

e) 不明原因发热,可在24 小时内不同部位采集血液标本2 或3 套,每次间隔大于1h;如果24-48 小时培养阴性,可再采集2 或3 套以上的血标本。

f) 可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,改变血培养条件和方法,以获得罕见的或苛养的微生物。

g)儿童菌血症患者在24 小时只需要采一次血标本进行培养,需特别注意穿刺部位的消毒,以区别感染菌和污染菌。由于儿童厌氧菌菌血症罕见,常规血培养不做厌氧培养。13.1.6 注意事项

13.1.6.1 采血后立即送检,如不能立即送检,应室温保存,有条件最好置35-37℃孵箱中,切勿冷藏。

13.1.6.2 申请单上应注明抗生素使用情况以及采血部位(如静脉、导管)。

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