土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

[基础全练]

1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成()

A．尿素酶B．脲酶

C．蛋白酶D．肽酶

解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够使土壤中的尿素分解为氨。

答案：B

2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将() A．变蓝色B．变红色

C．变黑色D．变棕色

解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。

答案：B

3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()

A．筛选出能分解尿素的细菌

B．对分离的菌种做进一步鉴定

C．作细菌的营养成分

D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的是对分离的菌种做进一步的鉴定。

答案：B

4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

D．接种了的选择培养基

解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。

答案：C

5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是()

A．采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数

B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数

D．显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法

解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。

答案：C

6．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括()

A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物

B．倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同

C．所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致

D．对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养

解析：对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，作为空白对照，A不符合题意；倒平板时，对照组培养基的用量与实验组不一定要完全相同，B符合题意；培养基成分、pH为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH大小应与实验组保持一致，C不符合题意；对照组和实验组都要置于相同且适宜的条件下培养，D不符合题意。

答案：B

7．某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2 760、295和16，则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)()

A．2.76×104个/mL

B．2.95×105个/mL

C．4.6×104个/mL

D．3.775×104个/mL

解析：为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此只有295符合要求。其稀度倍数为102，所用稀释液体积为0.1 mL，代入计算公式得菌落总数为2.95×105个/mL。

答案：B

8．土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请据图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌属于________(填“自养”或“异养”)型微生物，为获得该种细菌，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用____________________的培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。

(3)因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要________以减少误差。将稀释103～107倍的稀释液分别吸取0.1 mL加入固体培养基上，用________将菌液铺平，这种接种方法称为____________________________。

(4)将接种的培养皿放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计平板上的菌落数，选择菌落数在______之间的平板进行计数。实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。

解析：(1)能分解尿素的细菌需利用现成的有机物，属于异养型微生物。(2)分离

土壤中分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的培养基进行分离，分解尿素的细菌在分解尿素时产生氨气，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别。(3)取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将稀释103～107倍的稀释液分别吸取0.1 mL加入固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。(4)估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板；为防止微生物污染环境和操作者，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理，而后再倒掉。

答案：(1)异养(2)以尿素为唯一氮源酚红(3)摇匀涂布器稀释涂布平板法(4)30～300灭菌

9．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于______________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是______________。

(2)步骤③中，实验组的操作是_________________________________。

(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了______________现象。若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法__________(填“正确”或“不正确”)。

解析：(1)依据配制培养基的成分可知，该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨。因为该实验是“用平板收集教室空气中的微生物”，所使用的培养基应为固体培养基，配制时，需加入凝固剂，据此推知，该培养基中的成分X

通常是琼脂。(2)依题意可知，该实验的目的是，用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。所以步骤③中，实验组的操作是，将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，以收集教室不同高度空气中的微生物。(3)设置的空白对照组，在整个实验过程中没有用来收集空气中的微生物，若空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基的配制是不成功的，在此次调查中出现了污染现象，所以若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确。

答案：(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂

(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

(3)污染不正确

[素养提升]

10．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除含尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于()

A．空白对照B．自身对照

C．相互对照D．条件对照

解析：本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。

答案：D

11．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106倍稀释培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因不可能有()

A．由于土样不同B．由于培养基污染

C．由于操作失误D．没有设置对照

解析：实验结论是否正确与是否设置对照有直接关系，但实验结果与是否设置对照无关。

答案：D

12．下列关于微生物培养的叙述，错误的是()

A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物一般要按不同的稀释倍数进行分离

B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同

C．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数

D．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落

解析：稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物进行计数。

答案：C

13．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后，计算菌落数，结果如下表。下列选项不正确的是()

A.

B．该实验采用稀释涂布平板法接种

C．Ⅰ和Ⅱ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子

D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类

解析：Ⅰ与Ⅱ对照，Ⅰ缺少生长因子，菌落数少于Ⅱ，说明大肠杆菌的生长需要生长因子。

答案：C

14．某研究小组按如图1所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题：

图1

图2

(1)步骤②是________。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一氮源为________，这种培养基属于________(填“鉴别”或“选择”)培养基。

(2)用平板划线法接种细菌时，不需用如图2哪种器具？________(填字母)。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是_______________________。

(3)将接种后的培养基和作为对照的________________培养基同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种做进一步的鉴定，可在培养基中加入________指示剂，若指示剂变成________色，则说明该菌种能够分解尿素。

解析：图1所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌，实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。因此，图中①是土壤取样，②是样品稀释，③是将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上。图2：A是接种环，B是酒精灯，C是涂布器，D 是试管。

答案：(1)样品稀释(或“系列稀释”“梯度稀释”)尿素选择

(2)C避免温度过高的接种环把菌种杀死

(3)一个未接种的酚红红

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

土壤中分解尿素细菌的分离与计数 课题背景 尿素是一种重要的农业肥。但是，尿素 (能，不能)直接被农作物吸收。尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成。 分解尿素方程式：。 一、研究思路 (一)筛选菌株 1.实验室中微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于生长的 条件（包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 2.实例：PCR技术利用的耐高温的是从生活在热泉中的细菌中提取的,之所以能从热泉中筛选出该菌是因为。 3.选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长， 同时和其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。 (二)统计菌落数目 1.测定微生物数量的常用方法有和。 2.稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。通过统计平板上的数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。每克样品中的菌株数= 。 3.统计的菌落数往往比活菌实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在 一起时，平板上观察到的只是一个。因此，统计结果一般用数而不是数来表示。 (三)设置对照 设置对照的目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。 二、实验设计 关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下： 1．土壤取样： 土壤中的微生物绝大多数分布在距地表约 cm的土壤层。土壤取样时一

般铲去土3cm左右。再取样，将样品装入事先准备好的信封中。2．制备培养基： 准备牛肉膏蛋白胨培养基和。 将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 （多于，少于）选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为（对照组，实验组），用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 3．微生物的培养与观察 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，此时将10g土样相当于稀释倍；吸取上清液 mL，转移至盛有 ml的无菌水大试管中，吹吸三次，充分混匀，这时将土样相当于稀释倍；依次等比稀释至107稀释度，并按照由103～107稀释度的顺序分别吸取 mL进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基，将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。 三、操作提示 无菌操作 做这个实验前，复习学习过的无菌操作。此外，还须注意以下几点。 1.取土样用的和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 2.应在旁称取土壤。 3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在旁操作。 四、课题延伸 初步鉴定细菌原理： 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的酶将尿素分解成了。 会使培养基的增强，pH 。 初步鉴定细菌方法： 以为唯一氮源的培养基中加入，培养某种细菌后， 如果升高，指示剂。

(完整版)高二生物土壤中分解尿素的细菌的分离与计数知识点梳理

高二生物土壤中分解尿素的细菌的分离与 计数知识点梳理 1.培养基一般都含有、、、四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。 2.培养基的分类：按照物理性质可以分为、、;按照化学性质分为和;按照用途分为和。 3.尿素可以为农作物提供肥，但是只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。 4.以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是： ⑴; ⑵。 (一)筛选菌株 1.原理: 人为提供有利于生长的条件(包括等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 2.方法：选择培养基 (1)定义：在微生物学中，将允许的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 (2)配制的的依据：

①在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，加入可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。 ②培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物 的目的。如培养基中缺乏源时，可以分离固氮微生物。 ③当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。 ④改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在环境中培养只能得到耐高温的微生物。 (二)统计菌落数目 (1)测定微生物数量的常用方法有和。 (2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置个平板，选择菌落数在的平板进行计数，并取。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。 (三)实验设计 实验设计包括，所需、、用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。

2.课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 理一理 判一判 1.选择培养基只允许特定的微生物生长，而抑制或阻止其他微生物的生长。(√) 2．稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数。(√) 3．平板划线法只能纯化细菌，不能计数。(√) 4．从土壤中取样时，土层越浅越好。(×) 5．来自土壤的微生物稀释倍数越大越好。(×) 6．测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同。(×) 7．菌落特征是鉴别菌种的重要依据。(√) 8．以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基。(√) 9．可用含酚红指示剂的培养基对筛选出的尿素分解菌作进一步鉴定。(√) 悟一悟 1.可利用分离对象对某种营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养物质的唯一供给者，如筛选能分解尿素的细菌，就将尿素作为培养基中的唯一氮源。 2．可利用分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微生物生长受到抑制，而该分离对象却可大量增殖，在数量上占据优势。 3．显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞

的个数来进行活菌数的统计。 4．对照实验中除测试因素(自变量)不同外，其他因素要保证和实验组相同且适宜，并遵循单一变量原则。 5．在培养基制作和保存过程中，都易出现培养基被污染、样品被污染等情况，从而对实验结果造成影响，因此必须要设置空白对照或相互对照。 感悟体会： 练一练 1.[2019·平遥县第二中学高二月考]在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于() A．空白对照B．条件对照 C．相互对照D．标准对照 解析：生物实验中的实验可以分为空白对照，条件对照，自身对照，相互对照等。①空白对照是指不给予对照组任何处理的对照；②条件对照是指虽给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的处理因素；③自身对照是指对照和实验都在同一研究对象上进行。④标准对照是指生物生理、生化的某些项目也都有相应的标准，将观察测定的实验数值与规定的标准值相比较，以确定其正常与否的对照方法。理清题目中的实验的相关条件，分析对照实验的类型。根据以上分析可知，乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。综上所述，B正确，A、C、D错误。 答案：B 2．[2019·新绛县第二中学高二月考]以下关于分解尿素的细菌的说法，正确的是() A．能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶

土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 教学设计

专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计 金堂县竹篙中学谭善财2013-3-16 一．本节课内容的总体目标 二、教学重点与难点 课题重点：对土样的选取和选择培养基的配制课题难点：对分解尿素的细菌的计数 三、课时： 1h 四、本课题内容标准 1、研究培养基对微生物的选择作用，“研究”属于知识性领域的目标动词，应用水平 2、进行微生物的分离，“进行”属于技能性领域目标动词，独立操作水平 3、测定某种微生物的数量，“测定”属于技能性领域目标动词，独立操作水平。 五、本课题研究思路

六、教学思路： 七、教学流程 八、教学过程 教学内容 教师活动 学生活动 设计意图 复习提问 1.微生物最常用的两种接种方法是什么？ 2.什么稀释涂布平板法？其目的是什么？ 学生回忆 为细菌计数原 理、操作做好铺 垫 导入课题 引导学生阅读“课题背景”知识，提出的问题。 学生自主学习 回答问题 创设情景，引入 新课，使学生明 确分解尿素的细 菌的重要性，突出课题的必要性

研究思路 1、筛选 菌株 1、教师让学生阅读课本P21，讲解：DNA 聚合酶作用，发现过程。引导学生得到启示根据它对生存环 境的要求，到相应的环境中去寻找（即自然界筛 选）。 2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为提 供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、p H 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 3、教师展示各种筛选菌株方法的多媒体图片： 黄石公园热泉 海底火山 大肠杆菌显色培养基 实验室筛选SARS 菌株 4、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿 1、DNA 聚合酶发现过程，同学们得到什么启示？ 2.学生讨论为什么Taq 细菌能从热泉中筛选出来吗？ 3、学生阅读课本P22侧边栏关于本课题使用的培养基成分相关内容，讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物质。 4.学生分析讨论，以尿素为唯一 氮源的培养基能否筛选出分解尿素的细菌 3、学生观看教师展示的多媒体图片。 4、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。 引导学生对知识进行迁移学习，培养学生的逻辑迁移思维。 通过观看图片， 使学生由感性认 识过渡到理性认 识。培养学生的学科素养。

分解尿素

五华县田家炳中学高二生物自主学案 选修1第二章第二节土壤中分解尿素的细菌的分离与技术（1课时）尿素是重要的农业氮肥，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用，那么怎么分离土壤中分解尿素的细菌呢？ （一）学习任务 一、理论基础 1．筛选菌株 (1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。 (2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 〖思考1〗根据本课题使用的培养基配方，请回答课本22的小字体内容的问题。 （3）配制选择培养基的依据 根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。 2．统计菌落数目 （1）测定微生物数量的常用方法有和。 （2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。 〖思考2〗请回答课本22的小字体内容的相关问题 〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是？ 〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是什么？ 3．设置对照，仔细阅读课本23页右上角，找出什么是对照试验 设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。 〖思考5〗根据课本23页关于对照实验小字体的内容，请设计本实验的对照实验组。

最新选修一2.2-土壤中分解尿素的细菌的分离与计数习题案

选修一第二章 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 制作人 张洪芬 审核人 高三生物组 适用范围 高三实验班 使用日期： 1、在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（ ） A ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基 B ．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基 C ．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基 D ．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基 ２、某实验小组欲从被石油污染过的土壤中筛选出能分解石油的细菌，下列操作中错误的是（ ） A ．利用平板划线法可对细菌进行计数 B ．以石油为唯一碳源的培养基可用于筛选 C ．目的菌不能利用无机碳源合成有机物 D ．稀释土壤时需在火焰旁的目的是防杂菌污染 B ．甲培养基适于选择培养毛霉 C ．乙培养基适于选择培养自养型自生固氮菌 D ．乙培养基适于选择培养酵母菌 ４、下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5五个区域依次进行。下列叙述正确的是（ ） A ．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B ．划线操作时打开皿盖，划完立即盖上 C ．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的 D ．第1区和第5区的划线最终要相连接起来，以便比较前后的菌落数 ５、下列是对四种微生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是（ ） ６、下列有关微生物的实验室培养相关叙述，正确的是（ ） A ．对实验操作空间、操作者衣着和手，进行灭菌 B ．培养基配制好应先灭菌，然后立即倒平板 C ．接种操作应在酒精灯火焰附近进行 D ．培养细菌时，需将pH 调至酸性 ７、对分解尿素细菌的初步筛选中，加入酚红指示剂的目的是（ ） A ．指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素 B ．对菌种进一步鉴定 C ．筛选分解尿素的细菌 D ．培养基中缺乏酚红作营养物质 ８、请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题： (1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及 (2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰1～2次，其目的是 。 (3)分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到 培养基上、挑选菌落。 （4）在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵，其反应方程式为：___ ______；在果醋制作中，在缺少糖原，氧气充足时，其反应方程式为：___ ______ ９、根据有关微生物的知识，分析回答问题： (1)当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为________。 (2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成分包括____________________(供选：葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH 4)2SO 4、KNO 3、无机盐、琼脂、伊红美蓝染料、H 2O)，制备培养基时，灭菌与调pH 的先后顺序是____________________。 (3)如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成分是__________________，菌落特征为________。 (4)将采自养殖池中的水样1 mL 稀释100倍，然后吸取稀释后的水样1 mL ，接种于上述硝化细菌选择培养基上培养，接种所使用的工具是________。一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图所示。该养殖池每毫升水含有硝化细菌________个。 １０、下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，乙图表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：

土壤中分解尿素细菌的分离与计数经典练习

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 班级姓名 1．能够测定样品活菌数的方法是（） A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．重量法 D．平板划线法 2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水 3．分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落，影响最大的是A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层 B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌 C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源 D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒 4．下列有关微生物培养的叙述，不正确的是 ( ) A．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数 B．在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌 C．酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用 D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源 5．下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（） A．以尿素作为唯一碳源 B．能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶 C．环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性 D．以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红 6．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（） A．在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液 B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》知识梳理

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．研究培养基对微生物的选择作用。 2．进行微生物数量的测定。 一、研究思路 1．筛选菌株 尿素是一种重要的农业____肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成______。 （1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的______生长的条件（包括营养、______、pH等），同时______或______其他微生物生长。 （2）选择培养基：在微生物学中，将允许________的微生物生长，同时______或______其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。 2．统计菌落数目 （1）常用来统计样品中______数目的方法是________。即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的________。通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数。 统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用________来表示。 （2）____________也是测定微生物数量的常用方法。 （3）细菌的数目还可以通过______法来测定。例如，测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将________的水过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现____色，可以根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。 3．设置对照 （1）设置对照的主要目的是排除实验组中__________对实验结果的影响，提高实验结果的________。 （2）对照实验是指除了________的条件以外，其他条件都______的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。 二、实验设计 实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的________以及时间安排等的综合考虑和安排。关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样 土壤中的微生物70%～90%是_____，绝大多数分布在距地表______ 的近____性土壤中。 2．样品的稀释 样品的________将直接影响平板上生长的菌落数目。通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在________之间、适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用____________倍的稀释液进行平板培养。第一次实验时，可将稀释范围放宽一点，以保证能从中选择出适于计数的平板。 3．微生物的培养与观察 不同种类的微生物，往往需要不同的培养______和培养______。细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d，放线菌一般在25～28 ℃的温度下培养5～7 d，而霉菌一般在25～28 ℃的温度下培养3～4 d。 在菌落计数时，每隔24 h统计一次菌落数目。选取____________时的记录作为结果，

人教版选修一 专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业

人教版选修一专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数作业 [基础全练] 1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成( ) A．尿素酶B．脲酶 C．蛋白酶D．肽酶 解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够使土壤中的尿素分解为氨。 答案：B 2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将( ) A．变蓝色B．变红色 C．变黑色D．变棕色 解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。 答案：B 3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( ) A．筛选出能分解尿素的细菌 B．对分离的菌种做进一步鉴定 C．作细菌的营养成分 D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素 解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的是对分离的菌种做进一步的鉴定。 答案：B 4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( ) A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

D．接种了的选择培养基 解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。 答案：C 5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( ) A．采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数 B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D．显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法 解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。 答案：C 6．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括( ) A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物 B．倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同 C．所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致 D．对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养 解析：对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，作为空白对照，A不符合题意；倒平板时，对照组培养基的用量与实验组不一定要完全相同，B符合题意；培养基成分、pH为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH大小应与实验组保持一致，C不符合题意；对照组和实验组都要置于相同且适宜的条

最新人教版 选修一 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业

课题2 土壤中分解尿 素的细菌的分离与计数 题型一选择培养基的作用及配制方法 1．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括( ) A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基 B．根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增减不同的特殊营养物质 C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素 D．根据微生物耐热性的不同，利用高温、高压消灭不需要的杂菌 答案 D 解析利用高温、高压消灭不需要的杂菌的同时也会将需要筛选的微生物杀死，因此不能通过该方法得到目的微生物，D错误。 2．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用( ) A．天然培养基 B．稀释涂布平板法 C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D．用显微镜直接观察、寻找，再培养

解析在培养过程中可以通过选择该微生物能生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖，C正确。 3．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( ) A．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 答案 A 解析分解尿素的细菌与其他细菌的重要区别是分解尿素的细菌能以尿素为氮源，该细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH 升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，我们可以准确地鉴定出该种细菌能够分解尿素。 题型二菌落数目的统计方法 4．下列不属于菌种计数方法的是( ) A．平板划线法B．稀释涂布平板法 C．镜检法D．滤膜法 答案 A 解析平板划线法可用于菌种的纯化和分离，不能用于计数，A错误；稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌数目，镜检法也是测定微生物数量的常用方法，B、C正确；滤膜法常用于检测水样中大肠杆菌数目，通常是将已知体积的水样过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌数量，D正确。 5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( ) A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数在30～300间且差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

(完整word版)高中生物土壤中分解尿素的细菌的计数公式的思考

土壤中分解尿素的细菌的计数公式的思考 关键词【教材缺陷 误差分析 细菌计数 m 倍稀释法】 在人民教育出版社出版的《生物》（选修一）中，讲解了计数土壤中菌落数 的相关实验。右图为实验中样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。 在教材中，实验采用的结论为每克土壤中的菌株数M v c ?= ，其中“c ”代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，“v ”代表稀释平板时所用稀释液的体积（mL ），M 代表稀释倍数。 教材中将10g 土样分散于90mL 无菌水中，近似认为形成100mL 菌液，细菌均匀地分布在这100mL 溶液中，假论细菌总数为N ，则在锥形瓶中1mL 菌液含有 的细菌数为 100 N ，从锥形瓶中取出1mL 菌液加入到9mL 无菌水中，则在“210”试管中，在理想条件下，1mL 菌液含细菌数为 10 1 100?N ；…以此类推，在“n 10”试管中，1mL 菌液中细菌数为：

1110101100101101101100+-=?=????n n N N N Λ，即为上述公式中的“v c ” （每mL 稀 释液中的细菌数）。按照公式计算每克土壤中的细菌数（在稀释浓度足够高的情况下，平板上的一个菌落由一个活细菌生长繁殖成）为： 1 101010n n c N N M v +??==，计算结果与实际情况完全吻合，在忽略诸如移液管上残留细菌，细菌死亡等因素时，没有丝毫误差。然而，在这种理想条件下，10g 土壤的体积为10cm 3，分散于90mL 无菌水相当于10mL 液体，即把土壤的密度当成1g ·cm -3；假设现在我们把土壤实际的密度代入计算，那又会怎么样呢？ 同上，设10g 土壤中细菌总数为N ，土壤中菌落分布均为的条件下，每克土壤中细菌数为 10 N ；土壤的密度为土ρ（最后计算时取2.75g ·cm -3，摘至百度）。 在锥形瓶中，菌液总体积为（90+ 土 ρ10 ）mL （未考虑溶解对土壤体积的影响， 在教材中也忽略了这一因素，现推算的方法与教材中的方法唯一自变量是土壤的密度是可以忽略，符合生物学实验中的单一变量原则）。1mL 菌液中含细菌 ) 19(10109010 90+= += + 土土土土土 ρρρρρN N N 在“210”式中，1mL 菌液含细菌 ) 19(100101 )19(10+=?+土土土土ρρρρN N 在“n 10” 式中，1mL 菌液含细菌 ) 19(10101 101101)19(10+=????+土土 土土ρρρρn N N Λ 按照教材中的计算公式可得实验结果：每克土壤中细菌数为 1010(91)91n n N c M N v ρρρρ???==++土土土土，而实际每克土壤中含细菌数10N ，那么误差会怎样？ 以 每 克 样 品 中 细 菌 数 结 论 误 差 为 10 11个 -n

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案 一、研究培养基对微生物的选择作用 1.筛选菌株 (1)自然界中目的菌株的筛选 ①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 ②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。 (2)实验室中目的菌株的筛选 ①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 ②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。 ③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。 2.选择培养基 (1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 (2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。 1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基 下面是本课题使用的培养基的配方，请分析并回答下列问题： KH2PO4 g Na2HPO4 g MgSO4·7H2O g 葡萄糖 g 尿素 g 琼脂 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质 答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的 答案该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 (3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长 答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。 2.设计对照实验 (1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌 答案增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。 (2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染 答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。 归纳总结选择培养基的分类 (1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。 (2)利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。 (3)利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件(如高温、特殊pH等)，筛选特定微生物。 1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是( ) A.用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌 B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株 C.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株 D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌 答案A 解析全营养牛肉膏蛋白胨培养基常用于大肠杆菌的培养，该培养基对微生物无选择作用，A 项错误；抗盐突变菌株具有耐高盐的能力，因此可以利用高NaCl的选择培养基进行选择培养，B项正确；分解尿素的菌株能将尿素分解成氨，使培养基pH升高，因此可以利用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株，C项正确；利用高温条件可以筛选耐热的Taq细菌，D 项正确。 2.下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是( )

分解尿素的细菌

绝密★启用前 2015-2016学年度???学校1月月考卷 试卷副标题 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I 卷（选择题） 请点击修改第I 卷的文字说明 一、选择题（题型注释） 1．能够测定样品活菌数的方法是（ ） A ．稀释涂布平板法 B ．直接计数法 C ．重量法 D ．比浊法 【答案】A 【解析】利用稀释涂布平板法能够不影响生活的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来，并可以繁殖形成菌落，可根据菌落数测定出测定样品活菌数，故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。答案是A 。 【考点定位】测定某种微生物的数量 【名师点睛】知识拓展：统计细菌数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数，在统计菌落数目时，采用（平板划线、稀释涂布平板法）来培养细菌。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个细菌，但菌落数往往比活菌的试剂数目低，为了保证结果准确，一般选择菌落数在．30-300的平板进行计数。另一种方法是直接计数法，这种方法要借助显微镜，且统计的数目也包括死亡的细菌。 2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 A ．KH 2PO 4、Na 2HPO 4、MgSO 4·7H 2O 、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B ．KH 2PO 4、Na 2HPO 4、MgSO 4·7H 2O 、葡萄糖、琼脂、水 C ．KH 2PO 4、Na 2HPO 4、MgSO 4·7H 2O 、尿素、琼脂、水 D ．KH 2PO 4、Na 2HPO 4、MgSO 4·7H 2O 、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水 【答案】A 【解析】能合成脲酶的细菌才能分解尿素,选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。该选择培养基应只含尿素一种氮源并能让该类细菌生长,需有碳源。分离微生物要用固体培养基;分解尿素的细菌属于异养微生物,需要加葡萄糖作为碳源。B 无氮源、C 无碳源,D 中牛肉膏、蛋白胨可作为氮源。答案是A 。 【考点定位】微生物的分离和培养 3．分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是 A ．制备浸出液的土壤取自土壤的表层 B ．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

分解尿素的细菌的分离与计数

课题：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 学号： 姓名： 编写人： 审核人： 审批人： 使用时间： 【考纲要求及解读】 【阅读教材，基础检测】 （1）原则： （2）土壤中分解尿素的细菌筛选原理 a.选择培养基的成分： 作为唯一氮源 b.鉴定方法：在培养基中加入 指示剂，若pH 升高，指示剂变红，说明细菌能分解尿素。 3.统计菌落数目的方法 （1） 法（计活菌、间接计数） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 活菌，通过统计平板菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式：每克样品中菌株数= ，其中，C 代表某一稀释度下平板上生长的平均 菌落数，V 代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL ），M 代表稀释倍数。 ③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的 平板进行计数。 ④值得注意的是：统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为 。 （2）显微镜直接计数法（不能区分死菌和活菌） 原理：利用特定细菌计数板或 ，在显微镜下计算一定容积的样品中微生 物的数量。 （【提炼精讲】 1.易混淆选择培养基与鉴别培养基 （1）选择培养基：允许特定的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。土壤中分解尿素的细菌的分离利用的是选择培养基。 （2）鉴别培养基是在培养基加入某种特殊的化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来的培养基。用于筛选纤维素分解菌的培养基就是鉴别培养基。 2.微生物的鉴别方法 1．（2016.四川）图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA 部分序列。

分解尿素的细菌分离与计算

专题2 微生物的培养与应用 课题2 分解尿素的细菌的分离与计算 一、课时重难点 【重点】对土样的选取和选择培养基的配制。 【难点】对分解尿素的细菌的计数。 二、典型例题： 1．下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（） A．以尿素作为唯一碳源B．能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶 C．环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性 D．以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红 2．原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是 A．用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃）为唯一碳源 B．培养基配制完成之后需进行消毒处理 C．在选择培养基上形成的菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种 D．筛选出目的菌种后，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数 3．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（） A．在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液 B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养 C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功 D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带） 4．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时（） A．葡萄糖在培养基中越多越好B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案答案教学内容

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案答案

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案 一、研究培养基对微生物的选择作用 1.筛选菌株 (1)自然界中目的菌株的筛选 ①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 ②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。 (2)实验室中目的菌株的筛选 ①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 ②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。 ③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。 2.选择培养基 (1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 (2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。 1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基 下面是本课题使用的培养基的配方，请分析并回答下列问题： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？ 答案该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 (3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？ 答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。 2.设计对照实验 (1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌？ 答案增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。 (2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染？ 答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。 归纳总结选择培养基的分类 (1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。 (2)利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。 (3)利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件(如高温、特殊pH等)，筛选特定微生物。 1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是() A.用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌 B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株 C.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株 D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌 答案 A 解析全营养牛肉膏蛋白胨培养基常用于大肠杆菌的培养，该培养基对微生物无选择作用，A项错误；抗盐突变菌株具有耐高盐的能力，因此可以利用高NaCl的选择培养基进行选择培养，B项正确；分解尿素的菌株能将尿素分解成氨，使培养基pH升高，因此可以利用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株，C项正确；利用高温条件可以筛选耐热的

第五节 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(一)

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（一） 主讲：黄冈中学优秀生物教师王小敏 课题背景： 1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 2、细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2)2＋H2O CO2＋2NH3 3、常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4、课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。 一、研究思路 （一）筛选菌株 1、实例：DNA多聚酶链式反应（PCR)是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（93℃）的DNA聚合酶。该酶存在于水生嗜热菌（Thermus aquaticus)中。

问题：为什么Taq 细菌能从热泉中被筛选出来呢？ 原因：因为热泉温度70～80℃，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 2、实验室中微生物的筛选原理： 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等； 方法： （1）抑制大多数微生物不能生长； （2）造成有利于该菌生长的环境。 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。 3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基： KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖10.0g 尿素 1.0g 琼脂15.0g ①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基