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葛根异黄酮提取工艺研究_国海东(1)

葛根异黄酮提取工艺研究_国海东(1)
葛根异黄酮提取工艺研究_国海东(1)

葛根异黄酮提取工艺研究

国海东,上官新晨*,尹忠平

江西农业大学食品科学与工程学院,江西省高校天然产物研究与开发重点实验室(南昌 33 0045)

摘要对葛根异黄酮提取工艺进行筛选与优化, 通过加热回流提取法、微波辅助提取法和 超声辅助提取法对葛根异黄酮 提取效果的比较, 得出微波辅 助提取方法最佳。最佳工艺参数为: 微波功率400 W, 提取时间 80 s, 提 取温度80 ℃, 乙醇体积分数75%。采用反相高效液相色谱法测得 葛根样品中3种异黄酮含量分别为: 葛根素30.49 mg /g, 大豆苷3.40 mg/ g, 大豆苷元0.80 mg/g。

关键词葛根; 异黄酮; 提取; 优化

Extraction of Radix Puerariae Isoflavones

Guo Hai-dong, Shangguan Xin-chen*, Yin Zhong-ping

Key Laboratory of Natural Product Research and Development, College of Food Science and Engineering,

Jiangxi Agricultural University (Nanchang 330045)

Abstract To optimize the extraction of pueraria iso? avones, ethanol re? ux extraction, microwave assisted extraction and ultrasonic assisted extraction were compared, then conclude that microwave assisted extraction was the best. The optimum technological parameters were that microwave power 400 W, irradiation time 80 s, the extraction temperature 80 ℃, the ethanol concentration 75%. Using reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) method to detect 3 kinds of iso? avones content in radix puerariae samples, the results were as follows: puerarin 30.49 mg/g, daidzin 3.40 mg/g, daidzein 0.80 mg/g.

Keywords radix puerariae; iso? avones; extraction; optimization

葛根为豆科植物野葛(Pueraria lobata (Willd))的干燥根,属药食同源类植物,含有丰富的功能性异黄酮类化合物,其中主要为葛根素、大豆苷、大豆苷元[1-6]。我国葛根资源丰富,开发前景广阔,但目 前对其主要功能成分——异黄酮的开发利用较少,提取工艺单一,导致葛根利用率较低,这就需要探究简单易行适合大规模生产的提取工艺。

以乙醇为溶媒,通过加热回流提取、超声辅助提取及微波辅助提取进行对比[7-10],确定葛根异黄酮的最佳提取方法与工艺,并采用反相高效液相色谱法测定3种异黄酮含量,为葛根异黄酮的充分开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

葛根粉:葛根(产自湖南省张家界)60℃恒温烘干,粉碎过40目筛备用;标品葛根素(HPLC≥97%)、大豆苷(HPLC≥97%)、大豆苷元(HPLC≥97%):上海同田生物技术股份有限公司;甲醇(色谱纯)、乙醇(分析纯)、冰乙酸:天津永大试剂厂。

1.2 仪器与设备

安捷伦1260 型高效液相色谱仪:美国安捷伦科技公司;SYMMETRY C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm):美国WATERS公司;XH-100B 电脑微波催化合成/萃取仪:北京祥鹄科技发展有限公司;TDL-5-A 低俗大容量离心机:上海安亭科学仪器厂。

1.3 检测方法

以反相高效液相色谱法测定葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元的含量。

1.3.1 色谱条件

SYMMETRY C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温40 ℃,流动相A相0.2%醋酸水-B相纯甲醇,梯度洗脱,洗脱梯度如表1,流速1 mL/min,检测波长250 nm,进样量10 μL[11-15]。

表1 梯度洗脱条件

时间/min A相: (0.2%醋酸水)/%B相: 甲醇/% 01000

107030

303070

351000

1.3.2 标准曲线的绘制

分别精确配制0.2 mg/mL葛根素、0.1 mg/mL大豆苷、0.02 mg/mL大豆苷元标准品溶液,过0.22 μm滤膜,利用高效液相色谱仪自动进样检测,进样量为1,5,9,13,17 μL,利用峰面积与样品含量的线性关系绘制标准曲线,得出回归方程。

1.3.3 异黄酮得率计算

异黄酮得率=

异黄酮总量(mg)

原料质量(g)

(1)

*通讯作者;基金项目:国家863计划项目(2013BDA10B04);江西

省高等学校科技落地计划(KJLD12021)

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1.4 提取方法的比较

1.4.1 加热回流提取

称取葛根粉2.00 g,置于圆底烧瓶中,加入30 mL 体积分数为75%的乙醇溶液,80 ℃水浴回流提取两次,每次2 h,在4 000 r/min的条件下离心过滤,合并滤液,即得葛根异黄酮粗提液[16-17]。粗提液经0.22 μm 滤膜过滤,以高效液相色谱法进行检测。

1.4.2 微波辅助提取

称取葛根粉2.00 g,置于三口烧瓶中,加入30 mL 体积分数为75%的乙醇溶液,利用微波辅助提取装置进行两次提取,设定微波功率为400 W,提取温度80 ℃,当达到预设温度后开始计时,微波时间为60 s,在4 000 r/min的条件下离心过滤,合并滤液,即得葛根异黄酮粗提液[18-20]。粗提液经0.22 μm滤膜过滤,以高效液相色谱法进行检测。

1.4.3 超声波辅助提取

称取葛根粉2.00 g,置于圆底烧瓶中,加入30 mL 体积分数为75%的乙醇溶液,在80 ℃的条件下超声提取两次,每次40 min,在4 000 r/min的条件下离心过滤,合并滤液,即得葛根异黄酮粗提液[21-23]。粗提液经0.22 μm滤膜过滤,以高效液相色谱法进行检测。

1.5 微波辅助提取单因素试验

分别研究乙醇体积分数(15%,35%,55%,75%,95%)、微波功率(200 W,300 W,400 W,500 W,600 W)、提取温度(50 ℃,60 ℃,70 ℃,80 ℃,90 ℃)、提取时间(20 s,40 s,60 s,80 s,100 s)等因素,对葛根异黄酮提取率的影响。

1.6 微波辅助提取正交优化试验

在单因素试验的基础上,对乙醇体积分数、微波功率、提取温度、提取时间4因素进行正交优化设计,采用L9(34)水平表,各因素及水平设置如表2所示。

表2 微波辅助提取正交试验因素水平表

水平

因素

乙醇体积分数/%微波功率/W提取温度/℃提取时间/s

1553006060

2754007080

39550080100

2 结果与分析

2.1 异黄酮测定标准曲线的建立

采用HPLC法同时测定样品中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量,标准品及样品测定的色谱对照图如图1所示,所建立的回归方程如表3所示,3个回归方程的相关系数均达到了0.999 9,测定结果可靠。

表3 3种异黄酮测定回归方程与相关系数

标准样品回归方程相关系数r线性范围/μg 葛根素Y=3 569.6x+15.4810.20~3.40

大豆苷Y=4 335.2x+57.310.999 90.10~1.70

大豆苷元Y=6 982.2x+19.850.999 9

0.02~0.34图1 标准品(A)及葛根样品(B)高效液相色谱图2.2 提取方法对异黄酮提取率的影响

对加热回流提取、微波辅助提取和超声辅助提取进行了比较研究,结果如图2所示。由图可知异黄酮提取得率最高的为微波辅助提取工艺,加热回流提取次之,而超声辅助提取得率最低。另外,微波辅助提取效率远远高于加热回流提取和超声辅助提取,节能省时,适合大规模工业化生产,因此选择微波辅助提

取作为最佳提取方法。

图2 不同提取方法对异黄酮提取率的影响

2.3 微波辅助提取单因素试验结果分析

2.3.1 乙醇体积分数对葛根异黄酮提取效果的影响

设定微波功率为400 W,提取温度80 ℃,微波时间60 s,考察乙醇体积分数对异黄酮提取效果的影响,结果如图3所示。由图可知,随着乙醇体积分数的提高异黄酮溶出率增加,体积分数为75%时溶出率达到最大值,当乙醇体积分数继续增加时异黄酮溶出率随之减小,因此确定最佳乙醇体积分数为75%。2.3.2 微波功率对异黄酮提取效果的影响

设定微波温度为80 ℃,提取时间为60 s,乙醇体积分数为75%,考察不同微波功率对异黄酮提取效果的影响,结果如图4所示。由图可知,当功率为400 W 时提取效果最佳,随着微波功率继续升高异黄酮提取率不再增加,因此选择400 W作为最佳提取功率。2.3.3 温度对异黄酮提取效果的影响

设定微波功率为400 W,乙醇体积分数为75%,

88

89

提取时间为60 s,考察不同提取温度对异黄酮提取效果的影响,结果如图5所示。由图可知,随着温度的升高异黄酮提取率随之增加,在80 ℃的条件下提取效果最佳;当温度继续升高,异黄酮提取率不再增加,而乙醇溶液剧烈沸腾,消耗较大,因此选择最佳提取

温度为80 ℃。

图3 乙醇体积分数对提取率的影响

图4 微波功率对提取率的影响

图5 提取温度对提取率的影响

2.3.4 提取时间对异黄酮提取效果的影响

设定微波功率为400 W,提取温度为80 ℃,乙醇体积分数为75%,当达到预定温度后开始计时,考察不同提取时间对异黄酮提取效果的影响,结果如图6所示。由图可知,随着提取时间的延长提取率增加,提取时间为80 s的时候提取率达到最大值,当时间继续增加提取率略有降低,原因可能是微波处理时间过长导致部分异黄酮氧化,因此选择最佳提取时间为80 s。

2.4 正交试验设计

按照L 9(34)正交设计表,对乙醇体积分数、微波功

率、提取温度、提取时间4因素进行正交优化试验,以葛根异黄酮提取率为参考指标,确定微波辅助提取工艺的最佳提取条件,试验设计及结果见表4,方差分析见表5。

从正交试验结果极差分析可以得出微波辅助提取各因素对3种异黄酮提取效果的影响程度依次为:A(乙醇体积分数)>C(提取温度)>D(提取时间)>B(微波功率),最佳提取工艺参数组合为A 2B 2C 3D 2,即乙醇体积分数75%,微波功率400 W,提取温度80 ℃,提取时间80 s。从方差分析表可以看出4个因素对异黄酮提取效果的影响差异极显著,即最

佳水平对异黄酮提取得率的影响优于其他水平。

图6 提取时间对提取率的影响表4 微波辅助提取正交试验结果

试验号 A B C D 3种异黄酮总量/

(mg?g -1)

1

111126.332122227.983133328.194212328.715223129.866231227.857313223.258321321.009332120.76

k 127.5026.1025.0625.65k 228.8126.2825.8226.36k 321.6725.6027.1025.97R

7.14

0.68

2.04

0.71

表5 正交试验结果方差分析表

因素偏差平方和自由度F 值p 值乙醇体积分数173.212 1 297.480.000 1微波功率 1.48211.120.003 7提取温度12.77295.720.000 1提取时间 1.51211.34

0.003 5

误差

0.60

8

注: p >0.05, 差异不显著; 0.01

2.5 验证试验

因最佳工艺不在正交试验处理内,进行验证试

验,在最佳工艺条件下进行3组平行试验,每组试验重复3次,检测得到各组均值如表6所示。

从结果可以看出,以最佳工艺A2B2C3D2进行提取,结果明显优于正交试验中其他处理,最终总提取得率达到34.69 mg/g,一次提取率占到三次提取总量的89.4%,提 取工艺稳定可行。

表6 微波辅助提取最佳工艺结果

葛根素/ (mg?g-1)大豆苷/

(mg?g-1)

大豆苷元/

(mg?g-1)

总量/

(mg?g-1)

一次提取27.13 3.120.7531.00

二次提取 3.020.280.05 3.35

三次提取0.34000.34

总量/(mg?g-1)30.49 3.400.8034.69

3 结论与讨论

1) 比较了乙醇回流提取、微波辅助提取、超声辅助提取三种提取方法对葛根异黄酮的提取效果,结果显示微波辅助提取高效、节能,三种异黄酮总提取得率达到34.69 mg/g,其中葛根素30.49 mg/g、大豆苷3.40 mg/g、大豆苷元0.8 mg/g,均高于其他两种提取工艺。

2) 通过正交优化试验得到微波辅助提取最佳工艺参数为:乙醇体积分数75%,微波功率400 W,提取温度80 ℃,提取时间80 s。据已有相关文献报道,加热回流最佳提取时间在2 h以上[16-17],超声辅助提取最佳提取时间在40 min以上[21-23],然而,优化后的微波辅助提取工艺最佳提取时间仅为80 s。由此可见,微波辅助提取极大的提高了葛根异黄酮的生产效率,并节约能耗,在实际生产过程中具有很好的应用前景。

参考文献:

[1] ZHAI XUEJIA, QU HAIBIN, SHAO QING, et al.

Simultaneous quantification of puerarin and daidzein in rat plasma by High-Performance Liquid Chromatography with post-column modification and fluorescence detection[J].

Chromatographia, 2007(66): 43-47.

[2] KIM J M, LEE Y M, LEE G Y, et al. Constituents of the

Roots of Pueraria Iobata Inhibit Formation of Advanced Glycation End Products (AGEs)[J]. Arch Pharm Res, 2006, 29(10): 821-825.

[3] 尹丽红, 李艳枫, 孟繁琳. 葛根的化学成分、药理作用和

临床应用[J]. 黑龙江医药, 2010, 23(3): 371-373.

[4] 赵莹莲. 葛根素的药理作用及临床应用进展[J]. 安徽医药,

2010, 14(12): 1377-1379.

[5] KEUNG WM, KLYOSOV AA, VALLEE BL. Daidzin

inhibits mitochondrial aldehyde dehydrogenase and suppresses ethanol intake of Syrian golden hamsters [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1997(94): 1675-1679.

[6] ZHANG ZAIJUN, LI SHA, JIANG JIE, et al. Preventive

effects of flos perariae (gehua) water extract and its active ingredient puerarin in rodent alcoholism models[J]. Chinese Medicine, 2010, 5: 36-43.

[7] 汤晓, 朱建华. 三种葛根总黄酮提取工艺的比较及优化[J].

辽宁农业职业技术学院学报, 2008, 10(5): 1-4.

[8] 公衍玲, 黄山, 于慧荣. 葛根提取方法的比较研究及其工

艺条件优化[J]. 青岛科技大学学报, 2009, 10(5): 415-417.

[9] 甘琳, 周芳, 张越非, 等. 葛根总黄酮提取工艺的比较[J].

时珍国医国药, 2010, 21(4): 929-931.

[10] 吴玲玲, 韩墨, 黄真, 等. 葛根素提取及分离纯化的研究

进展[J]. 中华中医药学刊, 2011, 29(3): 569-571.

[11] 周红英, 王建华, 闫凤云. RP-HPLC分离测定甘葛藤茎

叶中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量[J]. 中国中药杂志, 2007, 32(10): 937-939.

[12] 金文姗, 谈钰元, 陈有根, 等. 高效液相色谱法测定不同

产地葛根中葛根素、大豆苷及大豆苷元的含量[J]. 中国中药杂志, 2003, 28(1): 49-51.

[13] 刘逢芹, 董其亭, 李宏建, 等. 野葛根、藤及其提取物

中相关异黄酮成分的含量测定[J]. 中国中药杂志, 2007, 32(14): 1487-1489.

[14] 宋丽军, 谭晓梅, 罗佳波. RP-HPLC同时测定葛根异黄

酮提取部位中葛根素、大豆苷、染料木苷和大豆苷元的含量[J]. 药物分析杂志, 2009, 29(6): 968-970.

[15] KWUN K H, KIM G J, SHIN H J. Ultrasonication

Assistance Increases the Efficiency of Isoflavones Extraction from Kudzu (Pueraria lobata Ohwi) Roots Waste[J].

Biotechnology and Bioprocess Engineering, 2009(14): 345-348.

[16] 周鲜娇, 杨林华, 潘进权. 葛根中黄酮提取工艺的研究[J].

湛江师范学院学报, 2012, 33(6): 88-93.

[17] 谢果, 张强国. 用正交试验优选葛根总黄铜的提取工艺

研究[J]. 重庆科技学院学报, 2006, 8(1): 46-48.

[18] 武宇芳, 白建华, 赵二劳. 正交试验优化葛根中葛根素的

微波提取工艺[J]. 湖北农业科学, 2012, 51(5): 989-991.

[19] 刘杏荣. 葛根异黄酮的检测方法与提取纯化工艺研究

[D]. 江苏: 江苏大学, 2007.

[20] 周丽. 葛根异黄酮的提取、纯化及水解工艺的研究[D].

哈尔滨: 东北农业大学, 2012.

[21] 王辰, 高玲. 超声波辅助提取葛根黄酮的工艺研究[J]. 长

江大学学报, 2009, 6(4): 61-64.

[22] 麻明友, 肖卓炳, 吴显明, 等. 葛根总黄酮的超声微波双

辅助萃取研究[J]. 食品科学, 2009, 30(24): 242-245. [23] 陈雅维, 张延萍, 周冬菊, 等. 响应面法优化葛根总黄酮

的超声辅助提取工艺[J]. 食品科学, 2012, 33(14): 41-44.

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大豆异黄酮提取工艺

大豆异黄酮提取工艺 和药理功效 一、提取工艺 每100克大豆样品中含有异黄酮128毫克,可分离约102毫克。 大豆异黄酮的提取可以采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行浸提。 不同的溶剂其提取工艺也不同。现以乙醇为例,介绍其浸提工艺。 (1)原料制备将脱脂豆粕进行粉碎。如果采用大豆为原料,需要先进行脱脂,使豆粕残油率<1%,干燥后粉碎备用。 (2)提取采用乙醇为浸提液,先在豆粕粉中加入含0.1~1.0摩尔/升(mol/l)的盐酸,再在95%的乙醇溶液中进行回流提取,过滤收集滤液。 (3)回收提取溶剂将滤液进行减压蒸发,回收乙醇,得到大豆异黄酮的粗水溶液。 (4)纯化将粗水溶液中加入0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液,调节pH值至中性。这时,中性溶液中将出现沉淀,然后过滤,得到的沉淀物即为含大豆异黄酮的产物。 (5)精制将上述产物溶解于饱和的正丁醇溶液中,加于氯化铝吸附柱上进行吸附,然后用饱和的正丁醇溶液淋洗,洗出大豆异黄酮的不同组分 各种大豆制品中异黄酮含量和种类分布不同,不仅与大豆品种和栽培环境有关,还与大豆制品的加工工艺密切相关。水处理、热处理、凝固、发酵等加工环节和方法显著地影响了大豆制品中异黄酮的含量和种类分布,特别是大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白的不同提取方法其中异黄酮含量影响极大。 1)水处理:浸泡使10%的异黄酮流失于浸泡水中,且水处理后的大豆中游离型异黄酮增加,这是因为豆类自身存在的β-glucosidases酶水解葡萄糖苷的结果。

2)加热:水煮加热增加了异黄酮向外渗透速率,使大量异黄酮因渗入加热水中而丢失,同时热处理还显著改变了豆制品中异黄酮种类的分布,因为热处理时β-glucosidases酶活性增强,使异黄酮葡萄糖苷水解为游离型异黄酮,因而制品中游离型异黄酮较原料大豆或大豆粉中的有所增加。 3)凝固:在豆腐生产中,凝固使一部分异黄酮丢失于乳清中,丢失率为44%。 4)发酵:发酵不影响异黄酮的含量,但改变了异黄酮种类的分布,发酵后的产品以游离型异黄酮为主要存在形式,这是因为在发酵过程中,真菌产生的大量β-glucosidases水解酶使异黄酮葡萄糖苷大量水解,从而导致游离型的异黄酮显著增加。 5)加工提取方法:提取方法对大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白中异黄酮含量的影响非常大。如用湿热水洗法去除可溶性碳水化合物所得浓缩蛋白的异黄酮含量与原料豆中的相近,而用60\%-65\%的酒精水溶液洗涤浓缩法提取的大豆浓缩蛋白的异黄酮仅为原料中的1/10。二、药理作用 延缓女性衰老、改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、疏松症、心血管疾病等。 大豆提取物作为营养补充食品使用,此外,大豆异黄酮显著的降低了乳腺癌的发病率,产生这种结果被认为是与它的产物植物雌激素有关。研究还指出在平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长,那些多吃低脂肪,富含大豆蛋白食品的人患(前列腺癌)的概率会更低。 抗氧化作用 金雀异黄素(genistein)含5.7.4三个酚羟基,大豆甙元含7.4二个酚羟基。酚羟基作为供氧体能与自由基反应使之生成相应的离子或分子,熄灭自由基,终止了自由基的连锁反应。大豆异黄酮对整体动物也有比较明确的抗氧化作用,大豆异黄酮提取物对阿霉素引起的小鼠过氧化水平提高和抗氧化酶活性的降低也有明显的抑制作用。 雌激素样作用

葛根提取物技术要求编制说明

葛根提取物技术要求编制说明 为贯彻落实《食品安全法》对保健食品实行严格监管的要求,严格保健食品原料管理,加强保健食品原料的安全监管,提高保健食品准入门槛,做好保健食品许可工作,国家食品药品监督管理局开展了保健食品原料标准的研究工作。按国家食品药品监督管理局食品许可司的要求,我院承担了保健食品原料-葛根提取物技术要求的研究工作。现将编制情况说明如下: 一、编制情况简介 1、通过检索、查阅相关文献资料,收集了全国已有的生产样品,参照已收集的企业生产工艺、制法,经试验确定产品制法并自制部分样品。主要从以下几方面制定产品的技术要求:1 真伪方面。感官与鉴别。从感官、薄层、特征图谱及所含功效成分等方面鉴别产品的真伪;2 安全方面。按《中国药典》中药质量标准研究制定技术要求(国家药典委员会)中的规定,注重中药安全性检测方法和指标的建立和完善,加强对重金属及有害元素、残留农药、残留溶剂、残留二氧化硫、微生物、真菌毒素等外源污染物的检测。3 产品质量方面。参考《中国药典》2010年版及相关文献资料,根据产品的实际功效,选定相应的功效成分控制产品的质量。4 根据稳定性研究结果提供产品的贮藏条件。于2010年7月完成了保健食品葛根提取物原料技术要求的试验研究工作。 2、组织有关专家进行评审 2010年7月份,组织相关专家召开了专家论证会。对保健食品葛根提取物原料技术要求进行了论证并提出了修改意见。 3、委托三家检测单位进行了技术复核 2010年9月份,国家食品药品监督管理局食品许可司召开了保健食品原料技术要求制订汇报工作会议。会上对保健食品葛根提取物原料技术要求提出了有关要求。按要求于9月下旬,委托陕西省食品药品检验所,湖北省疾病控制中心及武汉市食品药品检验所三家单位进行了复核。三家检测单位复核结果基本一致,均认为所订葛根提取物原料技术要求整体可行、重现性好。 4、国家食品药品监督管理局食品许可司组织专家进行了技术审评 2010年11月份和2011年1月,国家食品药品监督管理局食品许可司先后

紫草提取物知识讲解

紫草提取物 西安金绿生物工程技术有限公司 品质天然植物产物系统问题服务商[产品名称-KinGreen]: 紫草提取物 [英文名称-KinGreen]: Radix Arnebiae Extract [拉丁名称-KinGreen]:Lithospermum erythrorhizon [原料别名-KinGreen]: 藐、茈草(《尔雅》),紫丹、紫苭(《本经》),地血(《吴普本草》),茈蔰(《广雅》),紫草茸(《小儿药证直诀》),鸦衔草(《纲目》),紫草根(《现代实用中药》),山紫草(《江苏植药志》)(02 9*81 3 2 1 4 9 5 )。 [产品来源-KinGreen]: 紫草提取物来源为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma (Royle)Johnst. 、紫草Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc. 或内蒙紫草Arnebia guttata Bunge 的干燥根。春、秋二季采挖,除去泥沙,干燥。 [原料形态-KinGreen]: 多年生草本,高达90厘米。根直立,圆柱形,略弯曲,常分歧,外皮暗红紫色。茎直立,单一或上部分歧,全株被粗硬毛。叶互生,无柄;叶片长圆状披针形,长约6厘米,宽约1.3厘米,先端尖,基部楔形,全缘,两面被糙伏毛。聚伞花序总状,顶生;花两性;苞片叶状,两面具粗毛;花萼短筒状,5深裂,裂片狭渐尖;花冠白色,花冠管短,先端5裂,喉部具有5个鳞片状附肢,基部具有

毛状物;雄蕊5,着生于花冠管中部,花丝短或无;子房上位,4深裂,花柱线形,柱头球状,浅裂。小坚果直立,卵圆形,淡褐色。种子4枚,卵圆形。花期5~6月,果期7~8月。 [原料分布-KinGreen]: 分布于新疆、甘肃及西藏西部。东北地区及河北、河南、山西、陕西、宁夏、青海、山东、江苏、安徽、江西、湖北、湖南、广西、四川、贵州等地。 [ Product—Brand ]: 西安金绿-Xi’an KinGreen [化学成分-KinGreen]: 含乙酰紫草醌、异丁酰紫草醌、β,β-二甲基丙烯紫草醌、β-羟基异戊酰紫草醌、3,4-二甲基戊烯-3-酰基紫草醌。 [供应厂家-KinGreen]: 西安金绿生物工程技术有限公司[生产流程-KinGreen]: 选材,煎煮、渗漉、回流、蒸馏、沉淀、静置、过滤、浓缩、干燥等过程。 [药理作用-KinGreen]: 1。抗病原微生物作用紫草煎剂、紫草素、β-二甲基丙烯酰紫草素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌等具有抑制作用.紫草素对大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑菌作用.10%的生理盐水紫草浸液对絮状表皮癣菌、羊毛状小芽孢癣菌有抑制作用.体外实验证明:紫草及其衍生物(除去氢紫草烷外)都有显著的抗菌活性,紫草对阿米巴原虫亦有抑制作用.紫草水煎剂对小鼠结核病有一定疗效.

有关葛根薄层鉴别与提取工艺设计的实验报告

实验一葛根药材的真实性鉴定 1.仪器与材料 1.1 仪器 生物显微镜[BA210、Motic]、镊子、载玻片、盖玻片、酒精灯、单(双)面刀片、紫外分析灯(254nm和365nm)[WFH-203B、上海精科实业有限公司]、硅板、层析缸、天平[JH202、上海精密科学仪器有限公司]、锥形瓶、超声胶HF 254 振荡仪[SB-5200D、宁波新芝生股份有限公司]、量筒、点样毛细管、水浴[XMTE-8112、上海精宏实验设备有限公司]。 1.2 试剂 水合氯醛试液、蒸馏水、稀甘油、甲醇[分析纯 AR 批号:20120508 国药集团化学试剂有限公司]、乙酸乙酯[分析纯 AR 批号:T20110822 国药集团化学试剂有限公司]、氯仿[分析纯 AR 批号:20131227 国药集团化学试剂有限公司]。 1.3 材料 待鉴定天然药物及对应药材粉末各5份。5份未知药材分别为葛根(豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根)、粉葛(混乱品种:豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根)、劣质葛根、未知生药1(伪品)、未知生药2(伪品);葛根制剂愈风宁心片;葛根素对照品、葛根对照药材、粉葛对照药材。 2. 实验方法 2.1 葛根及粉葛的性状鉴定 观察并记录(文字记录及数码采集图像)药材性状特征,鉴定其是否符合2015年版《中华人民共和国药典》相关项下标准。 葛根的性状鉴别:完整的块根呈圆柱形。表面褐色,具纵皱纹,可见皮孔及须根痕。质坚实。饮片呈纵切的长方形厚片或小方块,长5-35cm,厚0.5-1cm。外皮淡棕色,有纵皱纹,粗糙。切面黄白色,纹理不明显。质韧,纤维性强。气微,味微甜。

大豆异黄酮的测定方法综述(精)

NANCHANG UNIVERSITY 功能食品学综述论文 学 院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班 级:学号:学生姓名:廖杰 指导教师:王远兴

起讫日期: 2014年 3月至 2014年 4月 大豆异黄酮的测定方法 摘要 本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍 关键词:大豆异黄酮;测定方法 Abstract: In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introduced Keywords:soy isoflavones method 目录 摘 要 ........................................................................................................................................... ........... I Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目 录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方 法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)

葛根解酒功效的研究

葛根解酒功效的研究 1,葛根提取液的配制 考虑到乙醇作为提取溶剂会影响葛根解酒功效的实验结果,故选用蒸馏水作为提取溶剂;另外为保证提取率,增加了提取次数。 称取葛根饮片(小方块长约3一scm)1209于大烧杯中,用蒸馏水在超声清洗器中超声 提取3次,每次3Omm,超声温度70℃,固液比为1:10,每次都要经4000转m/m离心机离心过滤30min,然后弃去滤渣,将滤液合并,在真空旋转蒸发仪浓缩至120IllL。得到浓度相当于1克生药/ml的溶液,备用。 2动物管理 小鼠购得后,先在动物室适应3天。动物室温度20℃,湿度为60%,通风良好。小鼠采用分笼饲养,每天早晚各添加饲料一次,自由进食和饮水。3天后开始正式作实验 4饮用酒用量的选择 取小鼠(雌雄兼用)25只,随机分为5组,每组5只。禁食12小时后,各组分别按比 例(酒量:体重)灌胃饮用白酒北京红星二锅头01毗/109、o15mL/10g、oZmL/10g、 025毗/lg0·O3mL/10g,观察小鼠醉酒率及死亡情况。小鼠醉酒与否以翻正反射消失作为指标,即将小鼠背向下轻轻放在动物笼里,若仰位姿势保持305以上,则认为翻正反射消失。5防醉药效实验 防醉药效实验即先灌胃药物再灌胃饮用酒。取小鼠(雌雄兼用)20只,随机分为2组, 每组10只。分别为:空白对照组和葛根提取液受试药物组。禁食1h2后,空白对照组灌胃 0lmL/10g蒸馏水;受试药物组灌胃ollllL/109葛根提取液。2组均在3omm后以。巧mL/109 剂量灌胃饮用酒。记录各组的醉酒(翻正反射消失)和醒酒(翻正反射恢复)时间(以给酒后 开始计时)。 .2.2.76醒酒药效实验 醒酒药效实验即先灌胃饮用酒再灌胃药物。分组方法同防醉实验,只是将2组先灌胃 O巧mL/109剂量饮用酒,30mm后再灌胃olmL/1g0药物。记录2组的醒酒(翻正反射恢复) 时间(以给酒后开始计时)。 7对小鼠血液乙醇浓度的影响 乙醇脂溶性较大,可透过血脑屏障入脑,其在脑内的浓度与血中浓度差别不大,因此可以根据血中乙醇浓度推断酒醉状态,作为考察葛根解酒防醉药效的指标。 东北农业大学工学硕士学位论文 (1)动物分组 将40只小鼠(雌雄兼用)随机分为2组:空白对照组和葛根提取液受试药物组。每组 20只。禁食12小时后,受试药物组先灌胃葛根提取液ollllL/109,空白对照组灌胃同剂量蒸馏水,30mm后再均灌胃饮用酒。巧mL/109。方法同防醉酒实验。然后分别于灌胃饮用酒3Omln、6Omln、gomln、12Omln、18Omln后每组各取4只断头取血。 (2)血乙醇(ALc)定量试剂盒原理及方法 A血乙醇(ALc)定量试剂盒原理: 乙醇一NAD+→乙醛+NADH+ 在34n0m波长下,测定每分钟NADH吸光度的变化值(AA/分钟)大小与乙醇含量成正 仁匕。 B工作试剂的制备: 根据血乙醇(ALc)定量试剂盒说明书操作,ALc干粉用smL缓冲液(试剂盒自带)

个植物提取物产品的生产工艺流程

个植物提取物产品的生产工艺流程 植提网为大家分享下,五羟、黄芪、当归、枳实、漆黄素、何首乌、生姜、绿茶、银杏提取物等34个植物提取物产品的生产工艺流程,希望能对从事植物提取物的同行们有所帮助。 二十八烷醇 原料→乙醇提取→浓缩→沉淀→溶剂→脱色→溶剂重结晶→干燥→粉碎、混合、包装→产品 5-hpt 五羟 原料→乙醇提取→浓缩→结晶→脱脂、脱色→重结晶→粉碎、混合、包装→产品 Fisetin 漆黄素 原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→溶剂萃取→浓缩→结晶→干燥→粉碎、混合、包装→产品 Astragalus P.E 黄芪提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Citrus Aurantium P.E 枳实提取物 原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→水沉→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Epimedium P.E 霪羊藿提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→溶剂萃取→萃取液浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Angelica P.E 当归提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Black Cohosh P.E 黑升麻提取物

原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Fo-Ti P.E 何首乌提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Ginger P.E 生姜提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Ginseeng P.E 人参提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 GinkgioBiloba P.E 银杏提取物 原料→乙醇→提取→浓缩→大孔吸附→洗脱→洗脱液→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Horse Chestnut P.E 娑罗籽提取物 原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→溶剂萃取→浓缩→浸膏→喷雾干燥产品 Gynostemma Pentaphylum P.E 绞股蓝提取物 原料→水提→吸附→洗脱→洗脱液浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Horsetail P.E 问荆提取物 原料→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品 Milk Thistle P.E 水飞蓟提取物 原料→乙醇提取→浓缩→沉淀→脱脂→干燥→粉碎、混合、包装→产品 Polygonum Cuspidatum P.E 虎杖提取物 原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→溶剂萃取→浓缩→结晶→水解→结晶→干燥→粉碎、混合、包装→产品 Pomegranate P.E 石榴皮提取物 原料→乙醇提取→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎、混合、包装→产品

葛根中总黄酮提取工艺

葛根中总黄酮提取工艺研究 摘要葛根中总黄酮含量相对同类产品较高,其利用价值也较高。总黄酮具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用本文通过对葛根中总黄酮几种提取方法(超声辅助提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法)的研究和比较,从而确定出一种较好的提取方法——醇提取法。为提高原材料利用率,增加经济效益提供有用的数据。 关键词总黄酮;超声辅助提取法;醇提取法 葛根为豆科多年生落叶藤本植物葛的干燥根[1] , 属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品[2] ,其主要有效成分为葛根素、大豆素、大豆苷等异黄酮类化合物, 具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用[3 ~5 ]。 总黄酮是指黄酮类化合物,是一大类天然产物,广泛存在于植物界,是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇,其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。它们对健康的好处有:抗炎症、抗过敏、抑制细菌、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心与脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等。 天然来源的生物黄酮分子量小,能被人体迅速吸收,能通过血脑屏障,能时入脂肪组织,进而体现出如下功能:消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。 葛根总黄酮提取法有醇回流法、醇渗漉法、浸渍法、超声辅助萃取法等,但利用超声辅助提取中药有效成分具有生产周期短、效率高、设备简单、成本低的优点[6 ,7]。本文主要介绍了超声提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法,并对葛根中总黄酮的开发利用前景作出了一些说明。 1.超声辅助提取法

植物中有效成分提取

植物中有效成分提取 植物中有效成分包括植物营养成分、药用成分、香精、天然色素等成分。如蛋白质、氨基酸、大蒜素、薄荷香精、胡萝卜素等等。 一、常用的提取技术 包括溶剂浸提法、水蒸气蒸馏法、压榨法和超临界二氧化碳萃取法等。 溶剂浸提法是目前最常用的方法。浸提是利用适当的溶剂从原料中将可溶性有效成分浸出的过程。 水蒸气蒸馏法该法的基本原理是将原料和水共热,使原料中的某些易挥发成分与水共沸,同水蒸气一起蒸发,经冷凝、冷却,收集到油水分离器中,利用提取物不溶于水的性质以及与水的相对密度差将其分离出来,就得到所需的提取物。 压榨法压榨是利用机械力将植物、果实、蔬菜或含油多的种子细胞破坏,从而得到含有功能活性成分的汁液或油液的方法。一般适用于功能活性成分能溶解于汁液的植物、果实、蔬菜或油料作物的提取。 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是以超临界状态下的流体作为溶剂,利用该状态下流体所具有的高渗透能力和高溶解能力萃取分离混合物的过程。常用的是CO2超临界萃取法。该方法与通常的液-液萃取或液-固萃取的原理相同,所不同的是一会超临界液体为萃取剂,从组分复杂的样品中巴需要的物质分离出来。超临界流体是介于气液之间的一种非气态又非液态的介质,使在物质的温度和压力超过其临界点时的状态,其特点是:密度与液体相近,故与溶质分子的作用力强,易溶解其他物质;粘度小,接近于气体,故传质速率高;表面张力小,容易渗透进入固体颗粒,能保持较大的流速,并可通过调节其压力、温度、流速和加入溶剂来控制萃取能力。 萃取温度较低,制品不存在热分解问题;对温度和压力进行调节,可实现选择性萃取;对非挥发性物质分离非常简单;制品中无溶剂残留问题;溶剂可再生、循环使用,运行经济性较好;无环境污染。 由于这些特点,能够使萃取过程高效、快速地完成,已广泛用于化学分析、生物有效成分提取中。 超临界流体萃取技术常以二氧化碳作为媒介,其优点有: 二氧化碳的超临界状态容易实现,操作温度较低,接近于常温,而且二氧化碳是惰性气体,因此对一些热敏性物质和需热性差的物质无降解变质作用; 二氧化碳是一种非极性溶剂,对非极性化合物有较高的亲合力,能够从天然物质中选择

大豆分离蛋白的提取

大豆分离蛋白的提取 ——紫苏 摘要:本文综述述了大豆分离蛋白的碱提酸沉法、双极膜法、泡沫分离法的分离原理,并讨论了其生产中影响提取率的因素。 关键词:大豆分离蛋白碱提酸沉法双极膜法泡沫分离法 大豆蛋白含量较高而且营养丰富,含有8种人体必需氨基酸,且比例比较合理。目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源,特别是大豆分离蛋白含蛋白质90%以上,是一种优良的食品原料。 目前大豆分离蛋白的生产应用较多的是以下几种: 1. 碱提酸沉法 大豆分离蛋白的传统提取方法是碱提酸沉法,主要利用大豆蛋白在大豆蛋白在高pH时溶解度最大,在等电pH条件下溶解度最小的原理,使之凝聚沉淀。一般分3个步骤:弱碱萃取蛋白质、酸沉淀、喷雾干燥。如图[1] 影响等电沉淀的因素较多: ①原料——原料豆粕应是低温或闪蒸脱脂后的低变性豆粕。这种豆粕含杂质少,蛋白含量较高,蛋白变性程度低,适于大豆分离蛋白生产[2]。 ②水分——浸提时,加水量越多,蛋白质的提取率就越高;但是加水太多,酸沉时蛋白的损失量增高;加水太少,大豆蛋白的溶出率大大下降,还会增加后续各工序的难度。试验得出,浸提时脱脂豆粕与水的比例为1∶10~12最适合提取[3]。 ③pH——蛋白质的溶解度与浸提pH有很大的关系,pH太低的时候,蛋白组分解离; pH 太高,易发生“胱赖反应”,生成有毒物质。 ④温度——温度的高低对蛋白收率、纯度及色泽有显著影响。浸提温度过高,会使蛋白变性,而且粘度增加,分离困难,耗能提高[4]。经试验认为等电酸沉温度控制在40~45℃为宜[1]。 ⑤时间——一般来说浸提时间越长,蛋白的溶出率就越高。但一定的时间后,蛋白得率随浸提时间的延长而无显著的变化。生产中要综合考虑能源消耗、生产周期、工艺成本等各种因素来确定合理的时间[4]。 ⑥另外,当浆料粒度太细反而会使蛋白得率和浸提效果下降,同时增加了过滤分离的难度。加酸速度和搅拌速度控制不好容易出现虽到等电点,但蛋白质凝集下沉缓慢,上清液混浊[1]。 ⒉双极膜电解法 双极性膜是一种新型离子交换复合膜,它通常由阳离子交换层和阴离子交换层复合而成,中 间是亲水界面层,结构如图1所示[5]: 双极膜由3层组成:阴离子交换膜和阳离子交换膜以及阴阳离子交换膜中间的亲水层。在电流作用下,水分子在双极膜上电离为H+和OH-,离子在电势的驱动下,通过膜选择透过阴离子或阳离子,导致溶液的pH值降低,达到大豆蛋白质的等电点而使蛋白质沉淀。这种方法不需要加入酸或碱调整蛋白质溶液的pH值,避免分离得到的大豆蛋白质中混入盐离子,并且可保护大豆蛋白质的功能性。[3]

大豆异黄酮提取

大豆异黄酮提取 【摘要】首先论述了大豆异黄酮8种提取与纯化工艺的原理和应用情况。它们分别是有机溶剂萃取法、超声波法、酸解法、酶解法、高效逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心分离法和超临界萃取法。指出了各技术目前存在的主要问题和今后的主要研究方向。在此基础上利用正交试验得到了乙醇溶液萃取大豆异黄酮的最佳工艺条件:乙醇浓度80%,萃取温度70℃,萃取时间4h,料液比1∶20。 异黄酮是黄酮类化合物的一种,主要存在于大豆科植物中,是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮主要存在于大豆种子的子叶和胚轴中,种皮含量极少。目前已经发现的大豆异黄酮共有12种,分为游离型的甙元和结合型的糖甙两类。甙元为其中的生物活性成分并且含量极少,占总含量的2%~3%,分别为大豆黄素、黄豆黄素及染料木素。对应的β-葡萄糖苷形式为:大豆黄苷、黄豆黄苷、染料木苷。 另外还有较少的葡萄糖苷的乙酰基化合物和丙二酰基化合物。研究表明,大豆异黄酮具有预防癌症、心血管疾病、骨质疏松症和降低妇女更年期综合症等生理功能。该产品具有广阔的开发前景和新的应用价值。目前最常见的异黄酮分离及纯化方法有:有机溶剂萃取法、超声波辅助法、酸解法、酶解法、高速逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心法、超临界萃取法。下面就这些方法的原理以及各自的特点分别进行介绍 有机溶剂萃取法 此法是国内外提取异黄酮使用最广泛的方法,常用的有机溶剂主要有:乙醇、甲醇、乙酸乙酯以及它们的水溶液。本法主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类化合物,因为异黄酮的特殊分子结构,决定了其较大的分子极性,根据相似相溶的原理,该物质可以被这些极性溶剂溶出,进入溶液相,为下一步的纯化处理提供了条件。在有机溶剂萃取法中最常用的溶剂是乙醇,即醇提法。提取过程中, 乙醇的浓度对提取结果有较大的影响。一般认为,乙醇浓度的提高有利于异黄酮的提取,但这还跟异黄酮物质的某

紫草提取物

紫草提取物西安金绿生物工程技术有限公司 品质天然植物产物系统问题服务商 [产品名称-KinGreen]: 紫草提取物 [英文名称-KinGreen]: Radix Arnebiae Extract [拉丁名称-KinGreen]:Lithospermum erythrorhizon [原料别名-KinGreen]: 藐、茈草(《尔雅》),紫丹、紫苭(《本经》),地血(《吴普本草》),茈蔰(《广雅》),紫草茸(《小儿药证直诀》),鸦衔草(《纲目》),紫草根(《现代实用中药》),山紫草(《江苏植药志》)(02 9*81 3 2 1 4 9 5 )。 [产品来源-KinGreen]: 紫草提取物来源为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma (Royle)Johnst. 、紫草Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc. 或内蒙紫草Arnebia guttata Bunge 的干燥根。春、秋二季采挖,除去泥沙,干燥。 [原料形态-KinGreen]: 多年生草本,高达90厘米。根直立,圆柱形,略弯曲,常分歧,外皮暗红紫色。茎直立,单一或上部分歧,全株被粗硬毛。叶互生,无柄;叶片长圆状披针形,长约6厘米,宽约1.3厘米,先端尖,基部楔形,全缘,两面被糙伏毛。聚伞花序总状,顶生;花两性;苞片叶状,两面具粗毛;花萼短筒状,5深裂,裂片狭渐尖;花冠白色,花冠管短,先端5裂,喉部具有5个鳞片状附肢,基部具有毛状物;雄蕊5,着生于花冠管中部,花丝短或无;子房上位,4深裂,花柱线形,柱头球状,浅裂。小坚果直立,卵圆形,淡褐色。种子4枚,卵圆形。花期5~6月,

大豆蛋白提取技术研究进展

大豆蛋白提取技术研究进展 系别:食品工程系 专业:食品科学与工程 班级:食科13-2班 学号:242013002003 姓名:陈亚林

摘要 大豆蛋白产品分为三类,即大豆蛋白粉、大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白。大豆分离蛋白含有人体所必需的八种氨基酸,不含胆固醇,具有许多优良的食品性能,添加在食品中可以改善食品的品质和性能,提高食品营养价值。是一种重要的植物蛋白,在食品工业中得到了广泛的应用,是近年来的研究重点。其中,大豆浓缩蛋白的提取方法有稀酸浸提法、酒精浸提法和湿热浸提法。大豆分离蛋白有碱溶酸沉法、离子交换法、超滤膜分离法等。本文以研究方向和工艺改进方面为着力点解释大豆浓缩蛋白和分离蛋白这两种主要的提取方法的发展脉络。 关键词 大豆浓缩蛋白;大豆分离蛋白;稀酸浸提法;酒精浸提法;碱溶酸沉法;离子交换法;超过滤法;湿热浸提法 大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)是把脱皮大豆中的除蛋白质以外的可能性物质和纤维素、半纤维素物质都除掉,得到的蛋白质含量不低于 90%的制品,又称等电点蛋白。与大豆浓缩蛋白相比,生产大豆分离蛋白不仅要从低温脱溶豆粕中除去低分子可溶性糖等成分,而且还要去除不溶性纤维素、半纤维素等成分。其生产方法主要有碱溶酸沉法、超过滤法和离子交换法。 一、碱溶酸沉法 1.提取原理低温豆粕中的蛋白质大部分能溶于稀碱溶液。将低温豆粕用稀碱溶液浸提后,用离心分离法除去原料中的不溶性物质,然后用酸把浸出物的PH调至4.5左右,蛋白质由于处于等电点状态而凝聚沉淀,经分离可得到蛋白质沉淀,再经洗涤、中和、干燥得到大豆分离蛋白。 2.提取工艺豆粕的质量直接影响大豆分离蛋白的功能特性和提取率,只有高质量的豆粕才能获得高质量和高得率的大豆分离。要求原料无霉变,豆皮含量低,残留溶剂少,蛋白质含量高(45%以上),脂肪含量低,NSI高(不低于80%)。豆粕粉碎后过40-60目筛。 首先利用弱碱溶液浸泡低温豆粕,使可溶性蛋白质、糖类等溶解出来,利用离心机除去溶液中不溶性的纤维素和残渣。在已溶解的蛋白质溶液中加入适量的酸液,调节溶液的PH达到4.5,使大部分蛋白质从溶液中沉析出来,这时只有大约10%的少量蛋白质人仍留在溶液中,这部分溶液称为乳清。乳清中除含有少量蛋白质外,还含有可溶性糖、灰分和其他微量成分,然后将用酸沉析出的蛋白质凝聚体进行搅动、水洗、送入中和罐,加碱中和溶解成溶液状态。将蛋白质溶液调节到合适浓度,由高压泵送入加热器经闪蒸器快速灭菌后,再送入喷雾干燥塔脱水,制成大豆分离蛋白。

不同提取方法对葛根总黄酮得率的影响

范树国,赵朝英,邱璐,等.不同提取方法对葛根总黄酮得率的影响[J].江苏农业科学,2012,40(1):233-235. 不同提取方法对葛根总黄酮得率的影响 范树国1,2,赵朝英1,邱璐1,2,李国树1,2,李天星1,杨海艳1,梁晓华1 (1.楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄675000;2.滇中高原生物资源开发与利用研究所,云南楚雄675000) 摘要:以95%乙醇为提取剂,分别用冷浸法、超声法、超声与冷浸结合使用法提取葛根总黄酮,以紫外分光光度计法测量葛根总黄酮含量。以葛根总黄酮的得率为评价指标,对3种方法进行综合评价,并筛选出各种方法所需的最佳提取时间。试验数据经SPSS统计分析表明,超声与冷浸结合使用法对葛根总黄酮得率的提高影响不显著,实际生产应用时,冷浸提取48h效果较好。 关键词:葛根;总黄酮;提取方法;得率 中图分类号:TS202.1文献标志码:A文章编号:1002-1302(2012) 櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄 01-0233-03 (上接第232页) 可取性。 3结论 本试验对苎麻非纤维高效降解菌株的分离筛选方式方法进行了大量的摸索研究,最终确定了用处理苎麻纤维对菌株进行富集,并以水解圈和降解显色的双重初筛快速鉴定方法,减少了无效菌株的生长干扰,使得目标菌株得以富集,成为优势菌株,降解苎麻胶质,得到质量较好的苎麻纤维。该筛选模型的建立为今后的试验者提供了一个良好的参考依据,大大降低了工作量,提高了工作效率。但是这仅仅是一个开始,接下来还需要进行大量试验摸索。 参考文献: [1]张世平.发展生态麻纺织实现可持续发展———麻纺织业发展展望[J].中国纺织经济,2004(1):4-16. [2]Brühlmann F,Leupin M,Erismann K H,et al.Enzymatic degumming of ramie bast fibers[J].J Biotechnol,2000,76(1):43-50.[3]Petrova S N,Volkova I Y,Zakharov A G.Oxidative delignification of flax fiber[J].Russian Journal of Applied Chemistry,2003,76(8):1344-1347. [4]Goda K,Sreekala M S,Gomes A.Improvement of plant based natural fibres for toughening green composites-effect of load application dur-ing mercerisation of ramie fibres[J].Composites A:Appl Sci Manuf,2006,37(12):2213-2220. [5]张元明,孙亚宁,韩光亭,等.麻生物脱胶的发展[J].中国纺织经济,2004(1):154-156. [6]Zheng L S,Du Y M,Zhang J Y.Degumming of ramie fibers by alkalo-philic bacteria and their polysaccharide-degrading enzymes[J].Bioresource Technology,2001,78(1):89-94. [7]熊和平,喻春明,王玉福,等.麻类技术100问[M].北京:中国农业出版社,2009:3-4. [8]沈萍,范秀荣,李广武.微生物学实验[M].北京:高等教育出版社,2005:69-74. [9]罗远莉.苎麻生物脱胶的研究[D].重庆:重庆大学,2007.[10]王德骥.苎麻纤维素化学与工艺学———脱胶和改性[M].北京:科学出版社,2001:13-14. 葛根(Radix puerariae),为豆科植物葛藤属野葛[Pueraria lobata(Willd.)Ohwi]或粉葛(P.thomsonii Benth)的块根,有“山人参”之美称,我国广东、广西、四川、云南等地均有较丰富的葛根资源。葛根的主要有效成分为异黄酮类化合物,根据理化性质和波谱数据,对野葛根的化学成分进行分析,共分离鉴定了14个化合物[1-2]。其中葛根素是豆科葛藤属的特有成分,也是主要有效成分,是葛根及其制剂中异黄酮含量的 收稿日期:2010-12-28 基金项目:云南省中青年学术技术带头人后备人才培养计划(编号:2006PY01-61);云南省高校2009—2012年重点建设学科和楚雄师范学院重点学科建设项目“植物学”(编号:05YJJSXK03);楚雄师范学院学术带头人专项(编号:05YJDTR08)。 作者简介:范树国(1965—),男,河北青县人,博士,教授,主要从事植物生理生化及分子生物学研究。Tel:(0878)3101953;E-mail:fansg@cxtc.edu.cn。 通信作者:邱璐,女,硕士,教授,主要从事植物组织培养及转基因研究。E-mail:qiulu@cxtc.edu.cn。评价指标[2]。葛根具有改善脑循环和外周循环、收缩和舒张平滑肌、抗肿瘤、抗骨质疏松、治疗绝经期综合症、抗心肌梗塞和心律失常、扩张冠状血管、降血糖、增强记忆力及解热等功能与作用[3]。葛根在食品工业、医药工业和日用化工方面均有较多应用。目前对葛根总黄酮提取方法的研究大都采用单一提取方法,部分专家研究单一提取方法时采用过酶解回流法[4],提高了葛根总黄酮的收率。本研究探讨不同单一提取方法及结合使用方法对葛根总黄酮得率的影响。 1材料与方法 1.1材料 葛根粉,购自楚雄一心堂药房,为粉葛粉,200g/盒,批号:080201、071201,云南红云天然食品有限公司生产,原产地广西。葛根素对照品(HPLC级,纯度>98%),购自成都曼思特生物科技有限公司。 1.2方法 1.2.1不同方法提取葛根总黄酮采用冷浸法、超声法、超 — 332 — 江苏农业科学2012年第40卷第1期

紫草的研究进展

收稿日期:2002206217; 修订日期:2002211203 作者简介:严松柏(19732),男(汉族),江苏宿迁人,现任江苏省连云港中药学校助理讲师,硕士学位,主要从事药用植物学研究工作. (文献综述( 紫草的研究进展 严松柏1,谈献和2,胡玉涛1 (1.江苏省连云港中药学校,江苏连云港 222006; 2.南京中医药大学药学院,江苏南京 210029) 摘要:全面综述了紫草的化学成分、药理学、临床应用、组织培养方面的研究进展。 关键词:紫草化学成分;  药理研究; 临床应用; 组织培养中图分类号:R282.710.5;R282.710.7 文献标识码:B 文章编号:100820805(2003)022******* 紫草为紫草科(Boraginaceae )多年生草本植物新疆假紫草A mebia euchrom a (Royle )Johnst 、紫草L ithosperm um erythrorhi 2zon Sieb.et Zucc 或内蒙紫草A.guttata Bunge 的干燥根。此外同科植物滇紫草Onosm a paniculatum Bur.et Franch.的根也作紫草用。其主要成分紫草宁及其衍生物为萘醌类化合物,具有抗肿瘤、抗炎和抗菌活性,还有抗肝脏氧化损伤和抗受孕作用。另外紫草素作为天然色素已广泛应用于医药、化妆品和印染工业中。1 化学成分 新疆紫草含萘醌类成分:β-羟基异戊酰紫草素(β2Hydroxy 2 isovalerylshikonin )、紫草素(Shikonin )、2,32二甲基戊烯酰紫草素(Teracrylshikonin )、乙酰紫草素(Acetylshikonin )、β,β2二甲基丙烯 酰紫草素(β,β2Dimethylacrylshikonin )、异丁酰紫草素(Isobutyl 2shikonin )、α2甲基2正丁酰紫草素(α2Methyl 2n 2butylshikonin )、异戊 酰紫草素(Isovalerylshikonin )、去氢阿卡宁(Dehydroalkannin ,去氢异紫草素),以及少量的去氧紫草素(Deoxyshikonin ),其中以β,β2二甲基丙烯酰紫草素含量最高,此外尚分离得到β,β2二甲基丙烯 酰阿卡宁(β,β2Dimethylacrylalkannin )、β2乙酰氧基异戊酰阿卡宁 (β2Acetoxyisoralerylalkannin )、β2羟基异戊酰阿卡宁(β2Hydroxyiso 2valerylalkannin )等。 紫草主含乙酰紫草素,除未检出去氧紫草素、去氢阿卡宁和三甲基丙烯酰紫草素外,其余成分与新疆紫草相同。还有紫草嘧啶A 、B (Lithospermidin A 、B )和紫草呋喃A ~E (Shikonofuran A ~E )[1]。2 药理2.1 抗炎作用皮下注射紫草素10mg/kg 对小鼠巴豆油耳炎症和大鼠酵母性足趾肿有明显抑制作用,进一步验证了紫草素的抗炎作用,并推测萘醌类化合物对52脂氧酶活性抑制作用是由其还原性决定的[2]。 为寻找比紫草素更为有效的促进伤口愈合的化合物,人们合成了12个还原乙酰化紫草素类化合物,并研究了它们促伤口愈合活性。从中发现化合物MDS 2004具有比紫草素更高的药理活性;当表皮给药时,在0.1~1mg/棉球肉芽范围内,呈浓度依赖性地加速大鼠棉球肉芽肿形成;当表皮用药1mg/耳时,可对ox 2azolone 和dinitrofluorobenzene 性小鼠耳部水肿产生强烈的抑制,远远超过紫草素,且对小鼠耳部不产生刺激作用;小鼠口服用10mg/kg 后行为并无明显变化;当口服给药时,它比紫草素更能抑 制大鼠角叉菜胶性后足水肿。但对大鼠切开和暴露在外的伤口 模型并未显示出任何愈合作用[3]。2.2 抗肿瘤作用给小鼠腹腔内注射抗癌药丝裂霉素C ,同时口服中成药紫华荣及其主要成分紫草根、黄芪、川芎,发现紫华荣能刺激网皮状内皮系统使处抑制状态的巨噬细胞恢复活性,使被抑制的淋巴细胞活跃,对丝裂霉素C 所造成的免疫不全起到的防御作用。另外发现在紫草素12OH 位置上引入不同的酰基可以得到一系列酰基紫草素衍生物,它们对DNA 拓扑异构霉Ⅰ有不同程度的抑制作用[4]。 蒋丽英等应用M TT 比色法检测新疆紫草素对人大肠癌细胞株CCL229的增殖作用,用DNA 琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术(FCM )及TdT 介导的原位末端标记法(TUN EL 法)检测新疆紫草素对CCL229细胞的诱导凋亡效应。结果发现新疆紫草素(0.1,10,100μg/ml )能够抑制CCL229细胞增殖,并且呈浓度相 关性。新疆紫草素(1 μg/ml )作用于CCL229细胞不同时间(24、48、72h )后,DNA 琼脂糖凝胶电泳呈现细胞凋亡的典型梯形条带谱,FCM 出现明显的亚二倍体峰,TUN EL 染色后可见细胞凋亡的特征性棕黄色颗粒。由此得出:新疆紫草素能够有效地诱导大肠癌细胞CCL229凋亡[5]。2.3 抗生育作用杨柳等取早孕新鲜绒毛组织进行体外培养,并加入一定剂量的紫草乙醇提取物,抽取培养液,用放免法测定培养液中HCG 含量,作统计学处理,结果发现加药组与对照组比较,HCG 含量显著降低,24h ,48h 呈显著性差异(P <0.05),72h 呈极显著性差异(P <0.001);两加药组比较无显著性差异,从而说明:紫草乙醇提取物能显著抑制体外培养的人绒毛组织分泌 HCG 的功能,破坏绒毛组织结构,甚至使其坏死[6]。 刘建华等为了探讨紫草辅助米非司酮抗早孕时对早孕妇女血中生殖激素的影响,将88例早孕妇女随机分成服用米非司酮、紫草、米非司酮加紫草组和空白对照组,比较用药前后血人绒毛 膜促性激素β亚单位(β2HCG )、卵泡刺激素(FSH )、黄体生成素 (L H )、雌二醇(F 2)、孕酮(P )和睾酮(T )的变化。实验结果表明单用米非司酮或紫草均对β2HCG 有一定的抑制作用,二者合用抑制作用更加明显;单用紫草对血中FSH 、L H 有较明显的抑制作用,对E 2、P 及T 无明显影响。认为紫草对绒毛功能有一定的影响,与米非司酮合用影响更明显;紫草对垂体生殖激素有明显的抑制作用。但是否与紫草能提高药物流产效果有关,尚需进一步研究[7]。 2.4 抗甲状腺作用Michael Auf ,mk olk 等人[8]详细研究了紫草 及其有关成分的抗甲状腺作用,认为具有3,42二羟基肉桂酸结构的物质是抗甲状腺作用的前体。这类酚类物质发生自氧化所产生的邻醌是活性物质,邻醌与体内蛋白质的结合导致激素不能与 ? 301?L ISHIZHEN MEDICIN E AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2003VOL.14NO.2 时珍国医国药2003年第14卷第2期

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