梅毒的PCR诊断与梅毒螺旋体基因分型研究进展

梅毒诊疗指南(2014版)

梅毒诊疗指南（2014版） 中国疾病预防控制中心性病控制中心 中华医学会皮肤性病学分会性病学组 中国医师协会皮肤科医师分会性病亚专业委员会 在国家卫生计生委疾病控制局的指导和安排下，由中国疾病预防控制中心性病控制中心、中华医学会皮肤性病学分会性病学组、中国医师协会皮肤科医师分会性病亚专业委员会组织专家讨论制定了《性传播疾病临床诊疗与防治指南》，供皮肤科医师、妇产科医师、泌尿科医师、预防医学医师和其他相关学科医师在性病临床诊疗实践及预防控制工作中参考。现将4种性传播疾病的诊疗指南公布如下。参加指南制定的专家有(以姓氏笔画为序)：王千秋、王宝玺、尹跃平、冯文莉、田洪青、刘巧、刘全忠、齐淑贞、孙令、李文竹、李东宁、李珊山、苏晓红、何成雄、张建中、杨帆、杨斌、杨森、杨立刚、周平玉、陈祥生、郑和义、郑和平、段逸群、骆丹、涂亚庭、徐金华、梁国钧、龚向东、蒋娟、蒋法兴、韩建德、程浩、赖维。 梅毒（syphilis）是由苍白螺旋体引起的一种慢性、系统性的性传播疾病。可分为后天获得性梅毒和胎传梅毒（先天梅毒）。获得性梅毒又分为早期和晚期梅毒。早期梅毒指感染梅毒螺旋体在2年内，包括一期、二期和早期隐性梅毒，一、二期梅毒也可重叠出现。晚期梅毒的病程在2年以上，包括三期梅毒、心血管梅毒、晚期隐性梅毒等。神经梅毒在梅毒早晚期均可发生。胎传梅毒又分为早期（出生后2年内发病）和晚期（出生2年后发病）。 一、诊断 1．一期梅毒： （1）流行病学史：有不安全性行为，多性伴或性伴感染史。 （2）临床表现：①硬下疳：潜伏期一般2-4周。常为单发，也可多发。初为粟粒大小高出皮面的结节，后发展成直径约1～2 cm的圆形或椭圆形浅在性溃疡。典型的硬下疳界限清楚、边缘略隆起，创面平坦、清洁；触诊浸润明显，呈软骨样硬度；无明显疼痛或轻度触痛。多见于外生殖器部位；②腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质中，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 （3）实验室检查：①采用暗视野显微镜或镀银染色显微镜检查法，取硬下疳损害渗出液或淋巴结穿刺液，可查到梅毒螺旋体，但检出率较低；②非梅毒螺旋体血清学试验阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应于感染4周后复查；③梅毒螺旋体血清学试验阳性，极早期可阴性。 （4）诊断分类：①疑似病例：应同时符合临床表现和实验室检查中②项，可有或无流行病学史；或同时符合临床表现和实验室检查中③项，可有或无流行病学史；②确诊病例：应同时符合疑似病例的要求和实验室检查中①项，或同时符合疑似病例的要求和两类梅毒血清学试验均为阳性。 2．二期梅毒： （1）流行病学史：有不安全性行为，多性伴或性伴感染史，或有输血史（供血者为早期梅毒患者）。 （2）临床表现：可有一期梅毒史（常在硬下疳发生后4-6周出现），病期2年内。①皮肤黏膜损害：皮损类型多样化，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮损、毛囊疹及脓疱疹等，分布于躯体和四肢等部位，常泛发对称。掌跖部暗红斑及脱屑性斑丘疹，外阴及肛周的湿丘疹或扁平湿疣为其特征性损害。皮疹一般无瘙痒感。可出现口腔黏膜斑、虫蚀样脱发。二期复发梅毒皮损数目较少，皮损形态奇特，常呈环状或弓形或弧形；②全身浅表淋巴结可肿大；③可出现梅毒性骨关节、眼、内脏及神经系统损害等。

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定

梅毒螺旋体抗体胶体金法测定 1【目的】 定性检测血清或血浆中是否含有梅毒抗体 2【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准：专业主管，科主任。 3原理 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（胶体金法）采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血清/血浆中是否含有梅毒抗体，试剂盒含有被事先固定于膜上测试区（T）的重组特异性梅毒抗原和质控区（C）的相应抗体。 测试时，血浆/血清标本滴入试剂盒加样孔（S）内，血标本中的梅毒抗体与预包被在膜上的胶体金结合物反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析，在测试区（T）与固定在膜上的重组特异性梅毒抗原反应。如果血清中含有抗梅毒抗体，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带，表明时阳性结果。如果在测试区内（T）没有出现紫红色条带，则血标本中不含有抗梅毒抗体，表明是阴性结果。无论抗梅毒抗体是否存在于血标本中，混合物都会继续向上层析至质控区（C），质控区的相应抗体与胶体金结合物反应出现一条紫红色条带。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 4标本采集与处理： 4.1受检者准备： 4.1.1受检者的状态： a.不可变的生物因素：年龄，性别，生活环境遗传； b.可变的生物因素： A）情绪：原则上患者应在平静，休息的状态下以晨起空腹时采集标本，患者对采集标本时的恐惧、紧张会造成标本采集的失败。 B）运动：受检者应处于平静状态下采集标本，可减少由于运动带来的影响。 C）生理节律变化：昼夜的生理变化可能使测定结果不恒定，晨起固定时间空腹血尽可能减少昼夜节律带来的影响。 4.2采取标本时： A）体位：除非是卧床的病人，一般采血时取坐位。

三种梅毒螺旋体检测

三种梅毒螺旋体检测方法的临床评价 作者：凌聪作者单位：广东省南雄市人民医院检验科，广东南雄512400 【摘要】目的：探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法:应用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测596份标本，其中57例确诊为梅毒感染。结果:ELLSA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P > 0.05)，二者敏感性和特异性分别为94.7 %,98.1%和91.2%, 97.2%;TRWST与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P< 0 .05)。结论:ELISA法和TPPA法在临床的诊断中是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法。 【关键词】梅毒螺旋体; 甲苯胺红不加热血清学试验; 酶联免疫吸附试验; 梅毒螺旋体明胶凝集试验 Research on Three Method for Detecting Treponema Pallidum LING Cong The People's Hosptial of Nanxiong, Guangdong Nanxiong 512400, China Abstract: Objective: To explore three kinds of method for detecting treponema pallidum. Method: 596 specimens were detected with TRUST, ELLSA and treponema pallidum particle assay respectively, 57 of them infected treponema pallidum. Result: There's no significance difference between ELISA and TPPA method (P>0.05). The sensibility and specifity was 94.7%, 98.1% and 91.2%, 97.2& while, there's significant difference among TRUST, ELISA and TPPA (P<0.05). Conclusion: It's a good way to detect treponema pallidum with ELISA and PPPA method. Key words: Treponema pallidum; TRUST; ELISA TPPA 梅毒是一种经典的性传播疾病，梅毒螺旋体属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。其传染性强，危害性大，感染后可以引起全身各组织、器官的损害，危害较大。近年梅毒的发病呈上升趋势，因此对梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题，尤其对控制其蔓延至关重要。实验室如何更合理地选用检测方法，避免错诊、误诊、漏诊而产生医患纠纷等问题是非常必要的。为此，就如何更合理地利用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋明胶凝集试验(TPPA)三种不同方法为临床对梅毒的辅助诊断在此进行探讨。我们对2007年1月至2007年12月门诊和妇产科采集的596份标本采用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅素螺旋体明胶凝集试验(TPPA)方法进行梅毒检测，结果分析如下。 1 对象与方法 1.1 一般资料：本组596例，男134例，女462例，年龄25～70岁;均为我院皮肤科、外科门诊就诊患者和妇产科住院病人。根据2000年中国卫生部防疫司颁布的性病诊断标准，其中57例临床确诊为梅毒感染。 1.2 方法：596份标本分别采用TRUST,TPPA,ELISA三种方法检测，检测所用试剂在有效期内使用，严格按照试剂操作说明书操作。 1.3 试剂与仪器：①TRUST 试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供、仪器使用江苏省姜堰市天力医疗器械TL-2000A型梅毒自动旋转仪；②TPPA 试剂由日本富士欧必株式会社提供；③ELISA 试剂由为厦门新创科技有限公司提供、仪器使用美国生产的Stat fax-2100酶标仪和Stat fax-2600洗板机。 1.4 统计学方法：应用S PS S14.0统计软件，不同方法间的比较采用X2检验。 2 结果

四种梅毒螺旋体检测方法的应用分析

四种梅毒螺旋体检测方法的应用分析 周君霞，巫翠云，何林 （海口市人民医院，海南海口５７０２０８） ［摘要】应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、梅毒螺旋体血球凝集试验（ＴＰＨＡ）、甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）分别检测血清中的梅毒螺旋体抗体，荧光定量ＰＣＲ（ＦＱ—ＰＣＲ）法检测局部分泌物或渗出物中梅毒ＤＮＡ。 结果：ＴＲＵＳＴ、ＴＰ－ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ、ＦＱ—ＰＣＲ法灵敏度分别为８４．３％、９６．１％、９４．１％、９７．１％，特异性分别为９３．５％、９８％、１００％、１００％。ＴＲＵＳＴ在一、三期梅毒的阳性率最低（６６．７％和５０％）；ＦＱ—ＰＣＲ在一期梅毒阳性率最高。提示ＴＰ－ＥＬＩＳＡ可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法；ＴＰＨＡ可作为梅毒确诊方法；ＴＲＵＳＴ可应用于梅毒治疗疗效监测；早期梅毒的诊断首选ＦＱ－ＰＣＲ。 【关键词】梅毒螺旋体；梅毒螺旋体血凝试验；甲苯胺红不加热血清试验；荧光定量ＰＥＲ ［中图分类号］Ｒ７５９．１【文献标识码】Ｂ［文章编号】１００２－２６６Ｘ（２００８）０１－０１２２－０２‘ 梅毒是由苍白密螺旋体引起的性传播疾病，流行非常广泛。本研究应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、梅毒螺旋体血球凝集试验（ＴＰＩ－ＩＡ）、甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）、荧光定量ＰＣＲ技术（ＦＱ—ＰＣＲ）等４种检测方法对１０２例各期梅毒患者的标本进行检测，并对检测结果及各种方法的优缺点进行分析比较，为选择合适的梅毒检测方法提供参考。 １材料与方法 １．１标本来源１０２例标本来自２００６年１０月一２００７年１０月按２０００年中国卫生部防疫司颁布的性病诊断标准确诊的我院梅毒患者，其中一期３６例、二期５８例、三期８例；对照组１００例为来自我院皮肤科和泌尿外科非梅毒患者。 １．２检测方法分别对各期梅毒患者及对照组血清进行ＴＰ－ＥＬＩＳＡ、ＴＰＨＡ、ＴＲＵＳＴ检测；用消毒棉签取所有被检者局部分泌物、渗出液或局部淋巴结抽出液作ＦＱ—ＰＣＲ检测。ＰＣＲ试剂由中山达安基因股份有限公司提供，ＥＬＩＳＡ、ＴＲＵＳＴ试剂由厦门英科新创科技有限公司提供，ＴＰＨＡ试剂为英国Ｏｍｅｇａ诊断试剂。ＭｕｈｉｓｋａｎＭＫ３酶标仪为热电（上海）仪器有限公司生产。ＰＥ５７００扩增仪为美国ＡＢＩ公司生产。 １．３统计学方法计数资料比较用采用，检验，以Ｐ≤Ｏ．０５为有统计学差异。 ２结果 ４种检测方法对梅毒患者标本检测的敏感度和特异性比较见表ｌ。４种检测方法对１００例对照组标本检测结果：ＴＲＵＳＴ阳性６例，特异性为９３．５％；１２２ＴＰ－ＥＬＩＳＡ阳性２例，特异性为９８％；ＴＰＨＡ和ＦＱ－ＰＣＲ法未见假阳性，特异性１００％。‘ 表１４种检测方法的敏感度和特异性比较（％） 注：与其他方法比较，。Ｐ＜０．０５ ３讨论 目前临床对梅毒螺旋体感染的诊断方法越来越多，但临床应用不一。人体感染梅毒螺旋体后，血液产生两种抗体，一种是非梅毒螺旋体特异性抗体，是梅毒螺旋体在破坏组织时释放的抗原性物质（心磷脂）刺激机体产生的有抗体性质的反应素（抗心磷脂抗体），如ＲＰＲ、ＴＲＵＳＴ、ＶＤＲＬ、ＵＳＲ等，另一种是梅毒螺旋体特异性抗体，包括ＩｇＭ和ＩｇＧ，如ＴＰＨＡ、ＥＬＩＳＡ等，ＦＱ—ＰＣＲ法则属于分子生物学技术，可直接检测梅毒螺旋体的核酸。 本研究用４种方法对１０２例梅毒患者和对照组标本进行检测，结果显示ＴＲＵＳＴ的灵敏度和特异性均低于其他３种方法，这是因为人体感染梅毒４一ｌｏ周血清中才可产生一定数量的抗体，而非特异性抗体比特异性抗体晚１周出现，并且在疾病的非活动期和治疗后容易消失。而且ＴＲＵＳＴ易出现生物学假阳性，可见于多种疾病，如结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热等，常导致过激治疗，健康老年人中也可出现假阳性结果…，本次结果也显示假阳性率偏高。但此方法所得的抗体的效价与病情的变化 　万方数据

梅毒诊断

【梅毒】中华人民共和国关于梅毒诊断及治愈标准根据《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》特制定本标准。 一、诊断原则： 梅毒诊断必须根据病史、临床症状、体检及实验室检查等进行综合分析，慎重作出诊断。 ⑴病史：应注意感染史，婚姻史，妊娠史，生育史等。对胎传梅毒应了解生母梅毒病史。 ⑵体检：应作全面体格检查，注意全身皮肤、粘膜、骨骼、口腔、外阴、肛门及表浅淋巴结等部位，必要时进行心脏血管系统、神经系统及其他系统检查和妇科检查等。 ⑶实验室检查：①暗视野显微镜检查梅毒螺旋体。②梅毒血清学试验：非梅毒螺旋体抗原试验，如VDRL、RPR、USR试验等，为筛查试验。梅毒螺旋体抗原试验，如TPHA、FTA－ABS试验等，为证实试验。③组织病理检查。 二、梅毒分期诊断标准 1 一期梅毒 ⑴病史：有感染史，潜伏期一般为2～3周。

⑵临床表现：①典型硬下疳：一般单发，1～2cm大小，圆形或椭圆形，稍高出皮面，呈肉红色的糜烂面或浅在性溃疡。疮面清洁，分泌物量少，周边及基底浸润明显具软骨样硬度，无痛。多发于外生殖器，也可见于肛门、宫颈、口唇、乳房等部位。②腹股沟或患部近卫淋巴结可肿大，常为数个，大小不等，质硬，不粘连，不破溃，无痛。 ⑶实验室检查：①暗视野显微镜检查：皮肤粘膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体。②梅毒血清学试验：梅毒血清学试验阳性。如感染不足2～3周，非梅毒螺旋体抗原试验，可为阴性。应于感染4周后复查。 疑似病例：具备⑴及⑵为疑似病例。 确诊病例：疑似病例加⑶任何一项为确诊病例。 2 二期梅毒 ⑴病史：有感染史，可有一期梅毒史，病期2年以内。 ⑵临床表现：①皮疹为多形态，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮疹及脓疱疹等，常泛发对称；掌跖易见暗红斑及脱屑性斑丘疹；外阴及肛周皮疹多为湿丘疹及扁平湿疣等，不痛可有瘙痒。头部可出现虫蛀样脱发。二期复发梅毒，皮损局限，数目较少，尚可见环形皮疹。②口腔可发生粘膜斑，

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)

梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（胶体金法） [产品名称] 通用名称：梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（胶体金法） 英文名称：Diagnostic Kit for Antibody to Treponema Pallidum（Colloidal Gold） [包装规格] 一人份/袋，100袋/盒；25人份/筒，100人份/盒；单支/袋，50支/盒。 [临床意义] 快速检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体。 [检验原理] 应用免疫层析式双抗原夹心法原理 [主要组成成份] 由纯化的基因重组梅毒螺旋体（Treponema Pallidum）抗原，免疫重组梅毒螺旋体抗体，固相硝酸纤维膜，胶体金交联的重组梅毒螺旋体抗原及其他试剂制成。 [储存条件及有效期] 4-30℃避光干燥处密封储存，切勿冰冻。有效期24个月。 [样本要求] 采集静脉血1-2ml与干净容器中分离出血或血浆样本，如不及时测定可置4℃冰箱贮存，超过三天应加入0.1%硫柳汞防腐，不可使用冻干样本。 [检验方法] 1、待测样本、检测试纸或其他检测用材料等均在室温平衡后取出试纸条或测试卡。 2、条型产品将测试条有剪头的一段插入血清或血浆样本容器中，约10秒后取出平放，15 分钟内观察显示结果。测试纸插入样本深处不可超过MAX标志线。 3、板型产品用所配滴管加2-3滴（约80μl-120μl）样本于加样孔中，15分钟在观察孔中 观察显示结果。 [检验结果的解释] 阳性：在检测线位置及对照线位置各出现一条反应线。 阴性：仅在对照线位置出现一条反应线。 无效：测试纸无反应线出现或仅在检测线位置出现一条反映现，表明试验失败或检测试纸失效。请用新测试纸重试。如果问题仍然存在，请停止使用本批产品，并与当地经销商联系。[试验方法的局限性] 1、由于技术上和操作上可能出现的失误，以及样本中可能存在的干扰物质，会导致错误的 结果。对可疑结果请重新测试。 2、本试剂只是定性的筛查梅毒螺旋体特异性抗体的存在，它不能确定被测物在样本中的具 体含量。 3、本试剂仅是一种临床辅助诊断工具，如结果呈阳性，请及时采用其他方法做进一步检查 并以医师诊断为准。 [产品性能指标] 测试临床2400多人份临床血清/血浆样本，并与临床所用确诊试剂比较，结果证明该产品的临床诊断灵敏度为98.6%，临床诊断特异性为99.7%。 [注意事项] 1、本品为一次性使用体外诊断试剂，应在有效期内使用。

血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析

血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的 结果分析 目的调查本院住院患者梅毒血清学试验TRUST生物学假阳性率并进行临床分析。方法通过2016年10月～12月在本院搜集的10161例住院患者临床病例，结合实验室的梅毒血清学试验，分析TRUST生物学假阳性的发生是否与性别、年龄、疾病等因素相关，并进行统计学分析。结果10161例住院患者TRUST 生物学假阳性率为38（0.37%）；男女患者（0.27% vs0.44%）以及各年龄段患者（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）之间假阳性率均无统计学差异（P ＜0.05）；TRUST假阳性多见于皮肤和皮下组织疾病（2.78%）、血液和造血器官疾病（2.17%）以及肿瘤（0.33%）等患者中，其抗体滴度均较低，不超过1：8。结论TRUST试验生物学假阳性存在一定的发生率，对于容易出现假阳性的患者，建议与TPPA等梅毒螺旋体抗原血清学试验联合检测。 Abstract：Objective To investigate the clinical significance of TRUST biological false positive rate in the hospitalized patients with syphilis serological test.Methods A total of 10161 hospitalized patients were collected from 2016 October to December in the hospital.With syphilis serological laboratory tests，analysis of the occurrence of TRUST biological false positive age and gender，disease，and other relevant factors，and analyzed statistically.Results 10161 cases of hospitalized patients with TRUST biological false positive rate was 38（0.37%）；male and female patients（0.27% vs0.44%）and the patients of all ages（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）there was no significant difference between the false positive rate（P＜0.05）；TRUST false positive in the skin and subcutaneous tissue diseases（2.78%），disease of blood and hematopoietic tumors（2.17%）and（0.33%）patients，the antibody titers were low，not exceeding 1：8.Conclusion TRUST test biological false positive rate for a certain existence，prone to false positive patients，the suggestion and TPPA such as treponema pallidum antigen serologic test combined detection. Key words：Syphilis；TRUST；Biological false-positive 梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋體感染人体而发生的常见性传播疾病，已经问世数百年了，目前在世界范围均有分布，是严重的性传播疾病之一；可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等[1-3]。梅毒血清学试验为确诊梅毒病例所必需的实验室检查项目，目前常用的梅毒血清学试验包括非梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗原血清学试验.中山大学孙逸仙纪念医院对于梅毒的血清学检测采用了甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）结合分析的办法，而相对于耗时的TPPA，TRUST具有操作简单、快速和成本低等特点，更适于大批量血样本的筛选，是目前临床实验最为快速简便的检测手段。TRUST试验是用于筛选梅毒病人的非特异性试验，并非确证试验，它的原理是用正常牛心肌的心磷脂作为抗原，测定患者血中的抗心磷脂抗体，是一种凝集反应。除在梅毒的继发期，灵敏度可高达95%～100%外，在梅毒早期、晚期及

梅毒的诊断标准是什么

梅毒的诊断标准是什么? 梅毒病程长，症状复杂，与很多非梅毒性疾病的表现有相似之处，因此必须结合病史、临床表现及实验室检查结果，进行综合分析，必要时还须进行家属调查，追踪观察和试验治疗，以便作出正确诊断。 （一）病史有无婚外性乱史（包括时间、性伴侣性病情况）。现病史及既往曾否患过硬下疳、二期、三期梅毒，或患过其它性传播疾病。配偶有无梅毒及性传播病史。有无早产、死产史、疑为先天梅毒应询问其父母的性病史及兄弟姊妹的健康状况。是否接受过抗梅毒治疗（药物及剂量）。 （二）体检应作系统全面检查，早期应注意检查皮肤、粘膜，特别是掌跖、阴部、肛门等处。晚期除注意皮肤粘膜外，还应注意心血管和神经系统。 （三）实验室检查 1．梅毒螺旋体检查适用于早期梅毒皮肤粘膜损害，如硬下疳、湿丘疹、扁平湿疣等。其中硬下疳尤为重要，因梅毒血清反应在硬下疳出现2～3周始呈阳性。 （1）暗视野检查：为最常应用的螺旋体检查方法，其原理为在装有暗视野集光器的显微镜下，视野中无直接光线，光只能从四周透入，当接物镜下无物体存在时，视野始终保持黑色，当有物体时，则从四周透人的光线射到物体上，物体将光线折射在目镜方向而发生光亮，从而观察到螺旋体的形态及运动特征。 （2）直接荧光抗体检查法：取患者皮损疮面血清，干燥后加兔抗人梅毒螺旋体荧光抗体，其原理为疮面血清中梅毒螺旋体与兔抗人梅毒螺旋体发生特异性结合，在荧光显微镜下观察，可见梅毒螺旋体呈亮绿色荧光，其它种类螺旋体不发光，此法特异性高，也可用于口腔梅毒损害的检查，但缺点为敏感性差。 （3）涂片染色检查法：可用镀银染色法，螺旋体染成棕黑色，背景为黄色。 2．梅毒血清学试验为诊断梅毒必需的检查方法，对潜伏梅毒，患者血清学的诊断尤为重要。梅毒螺旋体感染人体后，可产生两种抗体。非特异性的抗心脂质抗体，可用牛心脂质检测出，称非梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体蛋白+人脂质抗原一抗心脂质抗原一抗心脂质抗体十心脂质抗原一非螺旋体抗原梅毒血清反应）；抗梅毒螺旋体抗体可用梅毒螺旋体（活的或死的梅毒螺旋体或其成分）检测出来，称梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体特异抗原-一刺激机体一抗梅毒螺旋体抗体十梅毒螺旋体抗原一螺旋体抗原梅毒血

梅毒螺旋体的检测方法及评价

梅毒螺旋体的检测方法及评价 梅毒螺旋体(treponemapallidum,TP)是引起性传播性疾病梅毒的主 要病原体。1905年由Schandim等首次发现,通过人类粘膜或有破损的皮肤直接接触病人感染性病灶而传播。不但引起人类全身性疾病危害人们的健康,同时还传播给下一代。多年来通过大量的研究工作,建立了许多检测TP的方法。近年来,随着分子生物学和免疫学技术的发展,进一步促进了对TP的研究工作,使得快速、敏感、特异的梅毒诊断方法不断更新完善,有利于广泛开展流行病学调查、预防控制及更准确地指导临床治疗。 TP检测的各种方法 检测TP和抗-TP抗体的方法有梅毒螺旋体检查和血清学检查法。梅毒螺旋体检查主要包括暗视野显微镜检查、直接免疫荧光实验（ＤＦＡ）及梅毒螺旋体镀银染色检查,其中ＤＦＡ的特异性较高。梅毒螺旋体检查适用于一、二期梅毒有病损者的患者，受取材及特殊显微镜限制，耗时长,难以为临床所接受。 血清学试验是目前国内外诊断梅毒的主要方法,其种类较多,包括非 螺旋体抗原试验(非特异性试验)和螺旋体抗原试验(特异性试验)。 非特异性试验是以类脂质为抗原的试验方法,世界卫生组织确认诊断梅毒的标准试验有 1性病研究实验室(VDRL)试验; 2不加热血清反应素(USR)实验; 3快速血浆反应素(RPR)试验;

4自动反应素(ART)试验; 5 RST反应素筛选试验和TRUSAT(甲苯胺红不加热血清试验)。这些试验因具有相同的标准化抗原,敏感性相似,对1、2期梅毒有诊断价值,也可做疗效随访用。又因其操作简易,费用低廉,常用作梅毒的筛选检查。但它们的敏感性和特异性比特异试验差,并且生物学假阳性高,结果受多种条件的影响。除对其他螺旋体感染时出现阳性外,假阳性还出现在急、慢性感染,妊娠,高丙种球蛋白血症,结缔组织病,溶血性贫血和其他自身免疫性疾病,也可出现在老年人和一些健康人,但多数情况下查不出原因。在国外上述几种非特异性试验中,除VDRL试验常用外,RPR试验和ART应用较少。 在我国多用RPR和TRUST。就TRUST、RPR两种方法而言,对非特异性反应素抗体导致的阳性标本TRUST法的检出率和重复性都强于RPR 法,这可能与TRUST试剂中表面包裹抗原的甲苯胺红颗粒比RPR试剂中的活性炭颗粒小更易耐受振荡导致TRUST试剂稳定性强有关。 特异性试验是以梅毒密螺旋体本身或非致病的密螺旋体为抗原,以检查病人血清中抗密螺旋体的特异性抗体。目前应用的方法有: 1密螺旋体荧光抗体吸收(FTA-ABS)试验; FTA-ABS试验被认为是当前敏感性和特异性最高的试验方法, 且在1期梅毒头几天就可以测出特异性抗体F3G，常用来最后确诊梅毒,在研究中以它为标准。但提取物为活菌，存在潜在危险性，故其应用受到很大限制。FAT-ABS试验是定性试验,治疗对它的影响也很小,一般用于确诊而不用于筛选。 2梅毒密螺旋体血凝(TPHA)试验; TPHA试验容易操作和定量,特异性

梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程

1 检验申请 单独检验项目申请：梅毒螺旋体抗体（速写TP）；组合项目申请：性病检测、输血前监测定加选本项目。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 2.1 标本采集 2.1.1 采用含高效促凝剂或含分离胶的真空采血管，常规静脉采血约2 ml，无需抗凝。 2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符号。 2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足：少于0.5 ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.3 其它如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存 2.2.1 标本接收后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2 标本保存时间：血清室温（15～25℃）下可稳定48h，在冰箱中（2～8℃）可稳定7天。-20℃放置12个月。为避免标本中水份挥发使血清浓缩，对保存超过1天的标本均加塞密闭或覆盖保鲜膜。 2.2.3 已完成测试的标本保存完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7天。备复检。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛状态。 2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理 本品采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（血浆）样本中的梅毒螺旋体抗体。检测时，样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原（大肠杆菌表达）结合形成抗原抗体复合物，由层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原（大肠杆菌表达）结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色。游离的胶体金标记梅毒抗原（大肠杆菌表达）则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照处显色。 4 试剂及其他用品 4.1 梅毒螺旋体抗体试验试剂盒，由英科新创（厦门）科技有限公司出品。4.2 试剂盒保存：贮存于4～30℃干燥保存，有效期18个月。 4.3 试剂盒准备：试剂从包装里取出，需尽快进行试验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。 8标本检测步骤：

梅毒螺旋体特异性抗体检测

梅毒螺旋体特异性抗体检测 1.实验原理 梅毒的病原是苍白螺旋体（TP），感染后患者血清学反应较复杂，可产生2种抗体，一种是非梅毒螺旋体抗体；另一种是TP特异性抗体。前者在疾病活动期可检出，但治疗后很快下降，一般用RPR等检测。后者在治疗后相当长时间内都可检测到。Syphagen-TPHA是一种检测TP抗体的特异、灵敏的间接血球凝集试验。适用于梅毒 确诊检查。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备：空腹采血 2.2 标本种类：血清或EDTA抗凝血浆 2.3 标本要求：检测标本可以是血清，对于大范围筛选实验，也可用含EDTA的血浆。如果出现可疑结果，用血清标本来确证。用含抗凝剂（EDTA）的试管收集血液，离 心收集血浆，在24小时内检测。 3. 标本储存：血清于2-8℃可存放48小时，在-20℃可存放4周；血浆则用含抗凝 剂（EDTA）的试管收集血液，离心收集血浆，在24小时内检测。 4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：溶血、脂血或污染标本。 6. 试剂 6.1 试剂名称：梅毒螺旋体抗体诊断试剂 6.2 试剂生产厂家：（日本）富士瑞必欧珠式会社 6.3 包装规格：100人份 6.4 试剂盒组成：溶解液，血清稀释液，致敏粒子，未致敏粒子，阴性对照血清， 阳性对照血清，滴管2支，使用说明书。 6.5 试剂储存条件及有效期 6.6存放于2-10℃，有效期为12个月，不同批号的试剂不得混用。 7. 操作步骤

7.1.1 每人份需4个孔，其中2个用于样品稀释。在第1个孔中加100ul（4滴）稀释液，在第2孔至第4孔中各加25ul（1滴）稀释液。 7.1.2 在第1孔加入25ul标本后，混匀后取25ul加入第2孔，混匀后取25ul加入第3孔，混匀后取25ul丢弃。 7.1.3 在第3孔加25ul（1滴）未致敏粒子；在第4孔加25ul致敏粒子。 7.1.4 轻轻摇晃混匀后，加盖静置于室温，120分钟后观察结果。 7.2 定量检测 7.2.1在第1个孔中加100ul（4滴）稀释液，在第2孔至最后一孔中各加25ul（1滴）稀释液。 7.2.2 在第1孔加入25ul标本，混匀后取25ul加入第2孔，混匀后取25ul加入第3孔，以同样的方式稀释至最后一孔，最后一孔混匀后取25ul丢弃。 7.2.3 在第3孔加25ul（1滴）未致敏粒子；在第4孔至最后一孔分别加25ul致敏粒子。 7.2.4 轻轻摇晃混匀后，加盖静置于室温，120分钟后观察结果。 8. 结果判断与分析 8.1 －粒子成纽扣状聚集，呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形 8.2 ±粒子形成小环状，呈现出外周边缘且平滑的圆形 8.3 ＋粒子环明显变大，其外周边缘不均匀且杂乱地聚集在周围 8.4 ＋＋产生均一的聚集，凝集粒子在底部整体上呈膜状延展 未致敏粒子（最终稀释倍数1：40）的反应图像判定为阴性，致敏粒子（最终稀释倍数1:80以上）的反应图像判定为阳性时，最终判定为阳性。 9. 临床意义：如结果为阳性，说明有梅毒抗体，曾经受到梅毒的感染；如果结果为阴性说明不含梅毒抗体；如果出现临界结果，说明梅毒抗体水平低，处于梅毒早期阶段，或者是预后残留有抗体，并应进一步检查。 10. 操作性能：快速简便、特异性强、灵敏度高 11. 方法局限性：严重溶血或脂血标本会影响结果判断

梅毒螺旋体抗体测定TPPA标准操作规程

1 检验申请 单独检验项目申请： TPPA组合项目申请：RPR+TPPA临床医生根据需要提岀检验申请。 2标本采集与处理 标本采集 常规静脉采血约 2 ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 下列标本为不合格标本 标本量不足。 严重溶血、严重浑浊的标本。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 标本保存 标本保存时间：立即测定或放置2?8C冰箱内。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置4?8C冰箱内保存7天。 3、方法原理 凝集法。将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶离子上?这种致敏离子和样品中的梅毒 螺旋体抗体进反应发生凝集，产生粒子凝集反应，由此可以检测出血清和血浆中的梅毒螺旋体抗体,并且可用来测定抗体效价。 4、试剂及其他用品准备 溶解液8ml/瓶x 1,血清稀释液60ml/瓶x 1，致敏粒子（冷冻干燥）瓶x 5，未致敏粒子（冷冻干燥）瓶x 5，阳性对照血清（液状）瓶x 5。 5质控品与室内质控规则 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。 质控品测定：在每一批标本中测定阴性和阳性对照各一次。 质控规则：阴性和阳性对照符合即可。 如岀现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重 新回复到控制状态后开始标本检测。 6操作步骤 将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中，共计4滴（100ul ），从第2孔至最后一孔各滴入 1滴 （25ul）。 吸取样品25ul至第1孔中。然后以2n的方式从第1孔稀释至最后一孔。 用试剂盒中提供的滴管在第3孔中滴入1滴（25ul）未致敏粒子，从第 4孔至最后一孔滴入 1 滴（25ul）致敏粒子。 用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅岀的强度混合30秒钟，加盖后于室温（15-30 C）

梅毒诊断标准

梅毒诊断标准 1 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗、疾病预防控制机构及其工作人员对梅毒的诊断和报 告。 2 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒syphilis 梅毒是苍白螺旋体( Treponema pallidum )（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例 不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3 3 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL venereal disease research laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验）

FTA-ABS fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ELISA enzyme-linked immuno-sorbent assay 酶联免疫吸附试验 4 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为；或性伴有梅毒感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2周～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭 圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体(见附录A)。 4.1.3.2

检测早期梅毒螺旋体感染的4种方法比较

?检验技术? 检测早期梅毒螺旋体感染的４种方法比较 ＣｏｍｐａｒｉｓｍｏｆＦｏｕｒＫｉｎｄｓｏｆＭｅｔｈｏｄｓｉｎＤｅｔｅｃｔｉｏｎｆｏｒＥａｒｌｙＳｙｐｈｉｌｉｓＩｎｆｅｃｔｉｏｎ 张永乐，章松平，马兰，时代强，郑爱媚 ＺＨＡＮＧＹｏｎｇ—ｌｅ。ＺＨＡＮＧＳｏｎｇ?ｐｉｎｇ，ＭＡＩ＿ａｍ，ＳＨＩＤａｉ—ｑｉａｎｇ．ＺＨＥＮＡｉ—ｍｅｉ ［摘要】目的探讨检测早期梅毒螺旋体感染的最适方法。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）、梅毒螺旋体血凝试验（ＴＰＨＡ）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ＴＰ．ＥＬＩＳＡ）、快速血清反应（ＲＰＲ）法对１０２例早期梅毒患者、３０例非梅毒患者的分泌物、血清进行梅毒螺旋体感染（１１Ｐ）检测，比较４种检测法灵敏度及特异性。结果１０２例早期梅毒患者ＦＱ．ＰＣＲ检出９２例（９０．２０％），ＴＰＨＡ检出８６例（８４．３１％），ＴＰ－ＥＬＩＳＡ检出８８例（８６．２７％），ＲＰＲ检出７０例（６８．６％）。３０例非梅毒患者ＦＱ．ＰＣＲ和ＴＰＨＡ检测均（一），ＴＰ－ＥＬＩＳＡ检出１例（＋），ＲＰＲ检出６例（＋）。结论早期梅毒患者诊断首选ＦＱ．ＰＣＲ进行分泌物或溃疡创面渗出物检测ＴＰ．ＤＮＡ，其次选用ＴＰＨＡ和ＴＰ—ＥＬＩＳＡ进行血清学检测，ＲＰＲ在梅毒感染早期检出率较低，易出现漏栓现象。 ［关键词］梅毒螺旋体；实时荧光定量聚合酶链反应；血凝试验；酶联免疫吸附试验；快速血清反应 ［中图分类号］Ｒ７５９．１［文献标识码】Ｂ［文章编号］１００１－７０８９（２００８）０２一０１１８—０２ 为了提高早期梅毒的诊断率，笔者采用４种不同方法对１０２例早期梅毒患者和３０例对照者进行临床检测比较分析，结果报告如下。 １材料和方法 １．１病例选择１０２例早期梅毒患者为２００６年２月一２００７年１月本院皮肤性病门诊就诊者，所选病例外生殖器均有典型硬下疳表现，且暗视野显微镜检查出梅毒螺旋体，经临床确诊为早期梅毒患者，其中男５２例，女５０例，平均年龄３０岁。３０例对照者来源于本院２００７年１月～２００７年２月产科住院患者。１．２试剂仪器ｒＱ．ＰＣＲ试剂购于中山大学达安基因股份有限公司，ＴＰＨＡ试剂为Ｅｔ本富士株式会社提供，ＴＰ?ＥＬＩＳＡ试剂购于广州中山生物，ＲＰＲ试剂购于兰州生物制品研究所；ＡＢｌ７９００核酸自动检测仪，美国ＢＩＯ．ＲＡＤ伯乐酶标仪，芬兰原装Ｐｒｏｌｉｎｅ移液器。 １．３方法１０２例患者和３０例对照者同时对其分泌物及血清采用ＦＱ．ＰＣＲ、ＴＰＨＡ、ｒＩ’Ｐ．ＥＬＩＳＡ、ＲＰＲ４种检测方法进行检测。患者用无菌棉拭子取溃疡或糜烂部位分泌物，对照者取尿道口或阴道口分泌物，分别置于无菌试管备用。同时采集全血２ｍＬ离心分离血清备用。ＶＱ．ＰＣＲ检测向无菌棉拭子标本中加入１ｍＬ生理盐水振荡１ｒａｉｎ，转入１．５ｍＬ的离心管中，１３０００ｒ／ｒａｉｎ离心５ｒａｉｎ，弃上清，向沉淀物中加入核酸提取液５０灿振荡混匀５ｓ，１００℃干浴１０ｒａｉｎ，转入４。Ｃ放置３０ｒａｉｎ，１３０００ｒ／ｒａｉｎ离心５ｒａｉｎ，取上清２斗Ｌ进行ＰＣＲ检测，扩增条件为９３。Ｇ２ｒａｉｎ１个循环，９３℃４５ｓ、５５℃６０ｓ４０个循环。血清ＴＰＨＡ、ＴＰ—ＥＬＩＳＡ、ＲＰＲ的检测严格按照试剂盒说明书进行操作。 Ｉ．４统计学处理采用ｘ２检验。 ［作者单位】浙江中医药大学附属杭州市第六人民医院，浙江杭州３１００１４ ［作者简介】张永乐（１９７６一），男，陕西省安康市人，医学学士，主管检验师，从事临床分子诊断研究工作。２结果 ２．１４种检测方法的结果ＲＰＲ检测检出率分别与ＦＱ－ＰＣＲ、ＴＰＨＡ、ＴＰ．ＥＬＩＳＡ３种检测法比较ｘ２值分别为１４．５ｌ、６．３４、９．１１，Ｐ均＜０．０５差异有统计学意义，而ｒＱ．ＰＣＲ、ＴＰＨＡ、ＴＰ?ＥＬＩＳＡ、３种方法检出率比较ｘ２＝１．６０８，Ｐ＞０．０５无统计学差异，见表ｌ。 ２．２４种检测方法敏感性及特异性比较见表ｌ。ＦＱ—ＰＣＲ的敏感性、特异性比其他３种检测法高，ＴＰＨＡ、ＴＰ．ＥＬＩＳＡ的敏感性、特异性比ＲＰＲ检测法高。 表１１０２例患者和３０例对照检查者４种检测结果比较例 注：敏感性＝梅毒患者阳性例数／梅毒患者总的检测数，特异性＝非梅毒患者阴性数／非梅毒总数。 ３讨论 ＲＰＲ检测法是一种将牛心磷脂抗原结合在标准的活性炭上，因梅毒患者血清中含有抗类脂抗原的抗体（反应素），这种抗原与梅毒患者血清中反应素结合形成肉眼可见的凝集颗粒，通过观察是否有凝集颗粒来判断是否存在梅毒感染。因白蛋白对胶体颗粒有保护作用，形成亲水薄膜，胶体颗粒受到保护失去吸附免疫球蛋白的作用，可能导致不能形成较大的凝集颗粒，血清中如果出现白蛋白多于球蛋白时将会出现假阴性反应，同时梅毒患者血清中抗类脂抗原的抗体产生在梅毒感染３～４周后才出现，在此前检测也可能出现假阴性反应。这也正是早期梅毒患者ＲＰＲ阳性不高的主要原因，本文早期梅毒阳性率６８．６０％，与文献报道一致…。同样在很多疾病过程中机

梅毒实验室测试题

单位：姓名：成绩： 梅毒实验室测试题 一、单选题（共40分，每小题2分） 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法：（） A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法：（） A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到：（） A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本：（） A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本：（） A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本：（） A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括：（） A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是：（） A （100±2）转/分 B（100±10）转/分 C （120±2）转/分 D （120±10）转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是：（） A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间：（） A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是：（）

A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中：（） A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是：（） A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体：（） A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是：（） A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、ELISA法采用的抗原是：（） A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、TPPA法采用的抗原是：（） A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、RPR法采用的抗原是：（） A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是：（） A 一级 B 二级 C 三级 D 四级 20、室间质控的主要目的是评价：（） A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 二、是非题（共60分，每小题2分） 1、除部分极早期梅毒外，一般梅毒患者无论是否接受过有效抗梅治疗，梅毒螺旋体特异性 抗体常终身阳性。（） 2、RPR/TRUST只能用于梅毒血清学检测初筛。（） 3、二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性。（） 4、诊断隐性梅毒时，RPR滴度应在1：8以上。（） 5、先天梅毒的实验室检查可采集脐带血进行梅毒血清学试验。（）