生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验

报告

实验目的：

1. 学习叶绿体色素的提取和分离方法。

2. 了解叶绿体中色素的组成和结构。

实验原理：

叶绿体是植物和藻类细胞中含有叶绿素的细胞器。叶绿体中有多种不同类型的色素，

包括叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。这些色素通过吸收太阳光能量进行光合作用。

提取叶绿体中的色素可以使用酒精提取法。酒精可以溶解叶绿体膜，使色素溶解到酒

精中。然后，使用色谱技术可以将不同类型的色素分离出来。

实验材料：

1. 鲜叶样品

2. 酒精

3. 氯仿

4. 丙酮

实验步骤：

1. 将鲜叶样品切碎并置于研钵中。

2. 加入足够量的酒精，用研钵研磨混合，直到叶碎细胞完全破裂。

3. 使用滤纸过滤混合物，得到澄清的叶绿体提取物。

4. 将叶绿体提取物转移到试管中，加入少量氯仿。

5. 等待一段时间，观察到叶绿体提取物分为两个层次：上层为酒精层，下层为氯仿层。

6. 使用滴管将上层的酒精取出，置于干燥的容器中保存。

7. 将下层的氯仿层转移至另一个试管中。

8. 加入适量的丙酮，轻轻摇匀，观察色素在丙酮中溶解。

9. 使用滤纸过滤丙酮溶液，得到单一色素溶液。

实验结果：

从叶绿体提取物中分离出不同类型的色素，如叶绿素a、叶绿素b等。通过色素的溶

解性质和色谱技术，可以将这些色素分离出来。

实验总结：

通过本次实验，我们学习了叶绿体中色素的提取和分离方法。了解了叶绿体中的色素

组成和结构。同时，也掌握了使用色谱技术进行色素分离的基本步骤。这对于进一步

研究叶绿体的功能和光合作用具有重要意义。

《叶绿体色素的提取和分离》 实验报告

《叶绿体色素的提取和分离》实验报告 实验目的 1. 学习叶绿体色素的提取、分离方法。 2. 通过叶绿体色素提取、分离方法的学习了解叶绿体色素的相关理化性质。 3. 为进一步研究各叶绿体色素性质、功能等奠定基础。 实验原理 叶绿体色素包括绿色的叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色的类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类,它们均以色素蛋白复合体形式存在于类囊体膜上。两类色素均不溶于水而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。由于提取液中不同色素在固定相和流动相中的分配系数不同,所以可借助分配层析方法将其分离。 实验仪器与药品 1. 绿色植物如菠菜等的叶片。 2. 研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、康维皿、圆形滤纸(直径11cm)。 3. 95%乙醇、石英砂、碳酸钙、展层剂。展层剂按石油醚:丙酮:苯10:2:1的比例配制(V/V)。 实验步骤 1. 叶绿体色素的提取

(1)取菠菜或其它新鲜植物叶片4~5片(4g左右),将其洗净、擦干并去掉中脉,剪碎后置入研钵中。 (2)研钵中加入95%乙醇2~3 ml及少许石英砂、碳酸钙研磨至匀浆,再加95% 乙醇5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。 2. 叶绿体色素的分离 (1)取圆形定性滤纸一张(直径应小于康维皿直径)于其中心扎一圆形小孔(直 径约3mm),另取长方形滤纸条一张(5cm×1.5cm),用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取 液沿滤纸条的长度方向涂抹,注意涂抹色素扩散宽度应限制在0.5cm以内,风干后再重复操作数次。然后沿长度方向将滤纸条卷成纸捻,使涂抹过叶绿体色素溶液的一侧恰在纸捻的一端。 (2)将纸捻带有色素的一端插入圆形滤纸的小孔中,使与滤纸刚刚平齐(勿突出)。 (3)在康维皿中央小室中加入适量的展层剂,把带有纸捻的圆形滤纸平放在康 维皿中央小室上,使纸捻下端浸入展层剂中,迅速盖好培养皿。展层剂将借助毛细管作用顺纸捻扩散至圆形滤纸上,使叶绿体色素在固定相(滤纸中吸附有水分的纤维素)和流动相(展层剂)间反复分配,从而使不同色素得到分离,分离结果为滤纸上可见到各种色素的同心圆环。无康维皿时亦可用底、盖直径相同的培养皿进行实验,实验时可在培养皿底中放入一平底短玻管或塑料药瓶盖以替代康维皿中央小室盛装展层剂,其余相同。 (4)当展层剂前沿接近滤纸边缘时便可结束实验,此时可看到不同色素的同心 圆环,各色素由内往外的顺序为:叶绿素b(黄绿色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶黄素(鲜黄色)、胡萝卜素(橙黄色),再用铅 笔标出各种色素的位置和名称。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的 1. 掌握叶绿体色素的提取和分离方法； 2. 了解叶绿体色素的成分和结构特点； 3. 通过实验观察，加深对叶绿体结构和功能的理解。 实验原理 叶绿体是植物细胞中的一种独特细胞器，因为其含有叶绿素而呈现绿色。叶绿体是光合能量的主要场所，能够将光能转化为化学能，进而为生物体提供能量。 叶绿体中含有多种色素，如叶绿素、类胡萝卜素等。其中，叶绿素是最重要的色素，其分子结构由一个类胡萝卜素环（porphyrin环）和一个酰基侧链（phytyl侧链）组成。叶绿素在光合作用中起着重要的作用，它能够吸收光线，将光能转化为化学能，进而提供生物体所需的营养。 叶绿体中的色素可以通过酒精沉淀的方法进行提取和分离。酒精沉淀方法是根据不同色素在不同酒精浓度下的溶解度差异来进行色素分离的。在实验操作中，首先要将植物组织用液氮或手动研磨方法研磨成细碎的粉末，然后将其置于离心管中，加入一定比例的酒精，并放置在温水浴中摇匀，使颜料完全溶解。接着，将混合液离心，待沉淀出现后将上层液体倒出，待沉淀干燥后即可得到色素提取物。 实验步骤 1. 准备材料。首先准备好新鲜的菠菜叶片、冰醋酸和95%酒精； 2. 研磨植物组织。将菠菜叶片用液氮或手动研磨器研磨成细碎的粉末； 3. 加入酸性试剂。将研磨后的菠菜叶片粉末加入1ml冰醋酸，使其均匀分散； 4. 加入酒精。向组织粉末中缓慢加入5ml 95%酒精，搅拌均匀； 5. 离心。将混合液置于离心管中，进行离心30分钟； 6. 取上层液体。取离心后上层液体，避免沉淀、残渣的干扰； 7. 干燥。将取出的上层液体放置在冷暗处自然晾干； 8. 分析。对干燥后得到的叶绿体色素进行观察和分析。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》

实验八叶绿体中色素的提取和分离 教学目的 1．初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 2．探索叶绿体中有几种色素。 实验原理 1．叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙 酮可提取叶绿体中色素。 2．色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶 解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。 实验程序 1）称取5g绿色叶片并剪碎提取色素 2）加入少量sio2、caco3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口 1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时 到达滤液细线） 制滤纸条 2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线 1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 2）干燥后重复划2-3次 1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准） 纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 3）用培养皿盖盖上烧杯 观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素a； 最窄：叶绿素b； 相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。 实验关键 1．选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。 2．画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进 行，重复2-3次。 3．层析时不要让滤液细线触及层析液。 注意事项 1．因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用 棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。 2．在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。