生物化学课后习题答案集
第二章 糖类
1、 判断对错，如果认为错误，请说明原因。
（1）
所有单糖都具有旋光性。
答：错。二羟酮糖没有手性中心。
（2）
凡具有旋光性的物质一定具有变旋性，而具有变旋性的物质也一定具有旋光性。
答：凡具有旋光性的物质一定具有变旋性：错。手性碳原子的构型在溶液中发生了改变。大多数的具有旋光性的物质的溶液不会发生变旋现象。 具有变旋性的物质也一定具有旋光性：对。
（3） 所有的单糖和寡糖都是还原糖。
答：错。有些寡糖的两个半缩醛羟基同时脱水缩合成苷。如：果糖。
（4） 自然界中存在的单糖主要为D-型。
答：对。
（5） 如果用化学法测出某种来源的支链淀粉有57个非还原端，则这种分子有56个分支。
答：对
。
2、
戊醛糖和戊酮糖各有多少个旋光异构体（包括α-异构体、β-异构体）？请写出戊醛糖的开链结构式（注明
构型和名称）。
答：戊醛糖：有3个不对称碳原子，故有2 3 =8种开链的旋光异构体。如果包括α-异构体、β-异构体，则又要乘以2=16种。
戊酮糖：有2个不对称碳原子，故有2 2 =4种开链的旋光异构体。没有环状所以没有α-异构体、β-异构体。
CHO C C C
2OH OH H H H
OH OH
D-核糖
CHO C C C
CH 2OH H HO H H
OH OH
D-阿拉伯糖
CHO C C C
CH 2OH H HO HO HO
H H
L-核糖
CHO C C C
CH 2OH OH H HO HO
H H
L-阿拉伯糖
CHO C C C
CH 2OH OH H HO H
H OH
D-木糖
CHO C C C
CH 2OH H HO HO H
H OH
D-来苏糖
CHO C C C
CH 2OH H HO H HO
OH H
L-木糖
CHO C C C
CH 2OH OH H H HO
OH H
L-来苏糖
3、
乳糖是葡萄糖苷还是半乳糖苷，是α-苷还是β-苷？蔗糖是什么糖苷，是α-苷还是β-苷？两分子的D-吡喃
葡萄糖可以形成多少种不同的二糖？
答：乳糖的结构是4-O-（β-D-吡喃半乳糖基）D-吡喃葡萄糖[β-1，4]或者半乳糖β（1→4）葡萄糖苷，为β-D-吡喃半乳糖基的半缩醛羟基形成的苷因此是β-苷。
蔗糖的结构是葡萄糖α（1→2）果糖苷或者果糖β（2→1）葡萄糖，是α-D-葡萄糖的半缩醛的羟基和β- D -果糖的半缩醛的羟基缩合形成的苷，因此既是α苷又是β苷。
两分子的D-吡喃葡萄糖可以形成19种不同的二糖。4种连接方式α→α，α→β，β→α，β→β，每个5种，共20种-1种（α→β，β→α的1位相连）=19。
4、 某种α-D-甘露糖和β-D-甘露糖平衡混合物的[α]25 D 为+ 14.5°
，求该平衡混合物中α-D-甘露糖和β-D-甘露糖的比率（纯α-D-甘露糖的[α]25 D
为+ 29.3°，纯β-D-甘露糖的[α]25 D 为- 16.3°
）； 解：设α-D-甘露糖的含量为x,则 29.3x - 16.3(1-x)= 14.5 X=67.5%
该平衡混合物中α-D-甘露糖和β-D-甘露糖的比率:67.5/32.5=2.08
5、 请写出龙胆三糖 [β-D-吡喃葡萄糖（1→6）α-D-吡喃葡萄糖（1→2）β-D-呋喃果糖] 的结构式。.
2OH
6、 水解仅含D-葡萄糖和D-甘露糖的一种多糖30g,将水解液稀释至平衡100mL 。此水解液在10cm
旋光管中测得的旋光度α为+ 9.07°，试计算该多糖中D-葡萄糖和D-甘露糖的物质的量的比值(α/β-葡萄糖和α/β-甘露糖的 [α]25 D 分别为+ 52.5°
和+ 14.5°）。 解：[α]25 D = α25 D /cL×
100= 9.07/( 30×1)×100= 30.2 设D-葡萄糖的含量为x,则 52.5x +14.5(1-x)= 30.2 X=41.3%
平衡混合物中D-葡萄糖和D-甘露糖的比率:41.3/58.7=0.70
7、
若某种支链淀粉的相对分子质量为1×106，分支点残基占全部葡萄糖残基数的11.8%，问：(1)1分子支链淀粉
有多少个葡萄糖残基；(2)在分支点上有多少个残基；(3)有多少个残基在非还原末端上？ 解：葡萄糖残基: 1×106/162=6173 分支点上残基：6173×11.8%=728 非还原末端上的残基：728+1=729.
180x - (x-1) ×18-0.118 x×18 = 1×106 180x -1.118 x×18+18 = 1×106 x =6255
分支点上残基：6255×11.8%=738 非还原末端上的残基：738+1=739
.
8、 今有32.4mg 支链淀粉，完全甲基化后酸水解，得10μmol2,3,4,6-四甲基葡萄糖，问：(1)此外还有多少哪些甲基化产物，每种多少；(2)通过（1→6）糖苷键相连的葡萄糖残基的百分数是多少；(3) 若该种支链淀粉的相对分子质量为1.2×106，则1分子支链淀粉中有多少个分支点残基？
解：(1) 32.4mg 支链淀粉所含葡萄糖残基：32400/162=200μmol 。
2,3,4,6-四甲基葡萄糖：n+1个非还原端 10μmol
1,2,3,6-四甲基葡萄糖：还原端一条支链淀粉1个（可忽略不计32.4×103/1.2×106=0.027μmol ） 2,3-二甲基葡萄糖：分支点残基n 个≈10μmol 2,3,6-三甲基葡萄糖：200-10-10=180μmol
(2) 通过（1→6）糖苷键相连的葡萄糖残基的百分数:10/200×100%=5%
(3) 若该种支链淀粉的相对分子质量为1.2×106，则1分子支链淀粉中有多少个分支点残基？ 葡萄糖残基: 1.2×106/162=7407 分支点上残基：7407×5%=370
9、 请用两种方法分别区分一下各组糖类物质：
(1) 葡萄糖和半乳糖：测旋光，乙酰化后GC
(2) 蔗糖和乳糖：Fehling反应，盐酸水解后加间苯三酚
(3) 淀粉和糖原：碘液，溶解性
(4) 淀粉和纤维素：碘液，溶解性
(5) 香菇多糖和阿拉伯聚糖：盐酸水解后加间苯三酚，甲基间苯二酚
10、某种糖类物质可溶于水，但加入乙醇后又发生沉淀，菲林反应呈阴性。当加入浓盐酸加热后，加碱可使Cu2+还原为Cu+。加酸、加入间苯二酚无颜色变化，但加入间苯三酚却有黄色物质生成。试判断这是哪类糖类物质，并说
明判断依据。
答：糖原。
(1): 可溶于水，但加入乙醇后又发生沉淀
(2): 还原性末端1个
(3)：加浓盐酸水解后生成葡萄糖，可发生Fehling反应（加碱可使Cu2+还原为Cu+）。
(4)：加酸、加入间苯二酚无颜色变化：为醛糖。
(5): 加入间苯三酚却有黄色物质生成: 为己糖。
第三章脂类
1、判断对错，如果认为错误，请说明原因。
（1）混合甘油酯是指分子中除含有脂肪酸和甘油外，还含有其他成分的脂质。
答：错。分子中除含有脂肪酸和甘油外，还含有其他成分的脂质称为复脂。混合甘油酯是指分子中与甘油成脂的脂肪酸的烃基有2个或者3个不同者。
（2）磷脂是生物膜的主要成分，它的两个脂肪酸基是处于膜的内部。
答：错。磷脂是生物膜的主要成分，但是它的两个脂肪酸基是处于膜的外部。
（3）7-脱氢胆固醇是维生素D3原，而麦角固醇是维生素D2原。
答：对。
（4）生物膜的内外两侧其膜脂质和膜蛋白分布都是不对称的。
答：对。
（5）膜脂的流动性并不影响膜蛋白的运动。
答：错。因为整个生物膜的流动性在很大程度上取决于膜脂的流动性，脂蛋白也不例外。
2、三酰甘油有没有构型？什么情况下有构型？什么情况下没有构型？
答：甘油本身并无不对称碳原子，但是它的三个羟基可被不同的脂肪酸酰化，则当甘油分子两头的碳原子的羟基被相
同脂肪酸酰化时，则三酰甘油没有构型，当甘油分子两头的碳原子上的羟基被不同脂肪酸酰化时，则有构型。
3、计算一软脂酰二硬脂酰甘油酯的皂化值。M=862
CH2O
CHO
CH2O O
C17H35
O
C17H35
C
O
C15H31CH
2
O
CHO
2
O
O
C17H35
O
C17H35
O
C15H31
解：皂化值=56.1×(1000/862)×3=195.24
皂化值=（3×56.1×1000）/相对分子质量=（3×56.1×1000）/862=195.24
4、计算用下法测定的甘油的碘值。称取80mg菜油，与过量的溴化碘作用，并加入一定量的碘化钾。然后用0.05mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定，用去硫代硫酸钠11.5mL。另做一空白对照（不加菜油），消耗硫代硫酸钠24.0mL。
解：碘值=(NV×(127/1000))/m×100=((24.0-11.5)×0.05×(127/1000))/0.08×100=99.2
5、生物膜表面亲水、内部疏水的特性是由膜蛋白决定的还是由膜脂决定的？如何形成这种特性？
答：由膜脂决定的。组成生物膜的磷脂分子具有1个极性的头部（膜表面）和2个非极性的尾部（膜内部），水为极
性分子，根据相似相溶原理，使生物膜表面亲水，内部疏水。
第四章蛋白质化学
1、用对或者不对回答下列问题。如果不对，请说明原因
（1）构成蛋白质的所有氨基酸都是L-氨基酸，因为构成蛋白质的所有氨基酸都有旋光性。
答：错。除了甘氨酸外构成蛋白质的氨基酸都有旋光性，但是这与氨基酸都是L-氨基酸没有关系。是两个完全不相关的概念。
（2）只有在很低或者很高的PH值时，氨基酸的非电离形式才占优势。
答：错。在等电点时氨基酸的非电离形式才占优势。
（3）当PH大于可电离基团的pK a′时，该基团半数以上解离。
答：对。
（4）一条肽链在回折转弯时，转弯处的氨基酸常常是脯氨酸或甘氨酸。
答：对。
（5）如果一个肽用末端检测方法测定不出它的末端，这个肽只能是个环肽。
答：错。若这个肽的N-末端封闭的话，比如：N-末端是pro，用末端检测方法也测定不出它的末端。
（6）如果用Sephadex-G-100来分离细胞色素C、血红蛋白、谷氨酸和谷胱甘肽，则洗脱顺序为谷氨酸→谷胱甘肽→细胞色素C→血红蛋白。
答：错。正确的洗脱顺序为：血红蛋白→细胞色素C→谷胱甘肽→谷氨酸。
（7）α-螺旋中每个肽键的酰胺氢都参与氢键的形成。
答：错。脯氨酸所含亚氨基参与肽键的形成，再无氢原子用来形成氢键。
（8）蛋白质的等电点是可以改变的，但等离子点不能改变。
答：对。
2、向1mol/L的处于等电点的甘氨酸溶液中加入0.3mol HCl，问所得溶液的pH值是多少？如果加入0.3mol NaOH 代替HCl时，pH值又是多少？
解：Ph低= pK a1+lg(n(AA)-n(H+))/ n(H+)= 2.34+lg(1-0.3)/0.3=2.71
pH高= pK a2+lgn(OH-)/(n(AA)-n OH))= 9.60+lg0.3/(1-0.3) =9.23
3、1.068g的某种结晶α-氨基酸，其pK a1和pK a2值分别是2.4和9.7，溶解于100mL的1mol/L的NaOH溶液中时，其pH值为10.4。计算氨基酸的相对分子质量，并提出其可能的分子式。
解：pH高= pK a2+lgn(OH-)/(n(AA)-n OH))
10.4= 9.7+lg0.01/( n(AA)- 0.01)
n(AA) =0.012
M=1.068/0.012=89mol/g
可能的分子式:C3H7O2N,为丙氨酸。
4、已知Lys的ε-氨基的pK a′为10.5，问在pH 9.5时，Lys水溶液中将有多少这种基团给出质子？
解：pH = pK +Log[A-]／[HA]
9.5=10.5+ Log[NH2]／[NH3+]
[NH2]／[NH3+]=1/10
[NH2]: 1/11;[NH3+]=10/11
5、有一个肽段，经酸水解测定有4个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为两个片段；其中一个片段在280nm有强的光吸收，并且Pauly反应，坂口反应都是阳性；另一个片段用CNBr处理后释放出一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色。
试写出这个氨基酸排列顺序及其化学结构式。
答：用胰蛋白酶水解成为两个片段：碱性氨基酸羧基端肽键;
280nm有强的光吸收：Tyr;
Pauly反应阳性: Tyr;
坂口反应阳性:Arg；
用CNBr处理:Met羧基端肽键；
茚三酮反应呈黄色：Pro。
氨基酸排列顺序：（N ）-Tyr- Arg-Met- Pro （C ） 化学结构：
NH 2C
CH 2
C N
C C N H
O
C C N C COOH
O
O H H H 2C H
H
CH 2CH 2OH
CH 2
CH 2NH C NH
NH 2
CH 2S CH 3H
CH 2H 2
C
6、一种纯的含钼蛋白质，用1cm 的比色杯测定其吸光吸收ε%0.1 280为1.5。该蛋白质的浓溶液含有Mo10.56μg/mL 。1:50稀释该浓溶液后A 280为0.375。计算该蛋白质的最小相对分子质量（Mo 的相对原子质量为95.94） 解： 比尔定律：A=ECL(C=g/L; L=cm ；E=L/g.cm) 吸光系数
E= E %0.1
280/10=1.5/10=0.15
C= A/ EL=（0.375×50）/(0.15×1)=125g/L=125mg/mL =125000μg/mL 最小相对分子质量=95.94×(100/(10.56/125000)) =11.35×105=11.35KD
7、1.0mg 某蛋白质样品进行氨基酸分析后得到58.1μg 的亮氨酸和36.2μg 的色氨酸，计算该蛋白质的最小相对分子质量。
解：Leu%=(58.1/1000) ×100%=5.81%
Trp%=(36.2/1000) ×100%=3.62% Leu 残基%=((131-18)/131) ×5.81%=5.01% Trp 残基%=((204-18)/204)×3.62%=3.30%
以Leu 残基%计算的蛋白质最低分子量=(131-18)/5.01%= 2255 以Trp 残基%计算的蛋白质最低分子量=(204-18)/3.30%= 5636 5636：2255=5:2
求其最小公倍数：5636×2=11272, 2255×5=11275 蛋白质的分子量约为11270
8、某一蛋白质分子具有α-螺旋和β-折叠两种构象，分子总长度为5.5×10-5cm ，该蛋白质相对分子质量为250000。试计算蛋白质分子中α-螺旋和β-折叠两种构象各占多少？（氨基酸残基平均相对分子质量按100计算）。 解：设α-螺旋为x, β-折叠为y,则： x+y=250000/100 1.5x+3.5y=5.5×10-5×108 解得X=1875
Y=625
第五章
核酸化学
1、用对或者不对回答下列问题。如果不对，请说明原因 （1）腺嘌呤和鸟嘌呤都含有嘧啶环，并都含有氨基。 答：对。
（2）RNA 用碱水解可得到2′-核苷酸，而DNA 用碱水解却不能得到2′-脱氧核苷酸。 答：对。
（3）在碱基配对中，次黄嘌呤可以代替腺嘌呤与胸腺嘧啶配对。 答：错。次黄嘌呤不能与胸腺嘧啶配对。
（4）真核细胞与原核细胞的DNA 都与组蛋白结合成核蛋白。
答：错。真核细胞的DNA 与组蛋白结合成核蛋白。原核细胞不含有组蛋白。 （5）tRNA 是RNA 中相对分子质量最小的，但所含稀有成分却是最多的。
答：对。
2、比较DNA、RNA在化学组成、分子结构和生理功能上的特点。
3、DNA双螺旋结构的基本要点是什么？DNA双螺旋结构有何重要生物学意义？
答：DNA双螺旋结构的基本要点：
（1）两条反向平行的多脱氧核苷酸链围绕同一中心轴以右手盘绕成双螺旋结构，螺旋表面具大沟和小沟。
（2）嘌呤碱和嘧啶碱基位于螺旋的内侧，磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧，彼此以3 ′-5 ′磷酸二酯键连接，形成DNA分子的骨架。碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角。
（3）螺旋横截面的直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为0.34 nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺矩（即螺旋旋转一圈）高度为3.4 nm。
（4）双螺旋内部的碱基按规则配对，碱基的相互结合具有严格的配对规律，即腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）结合，鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）结合，这种配对关系，称为碱基互补。A和T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。双螺旋的两条链是互补关系。
DNA双螺旋结构的重要生物学意义：
该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础,它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。推动了分子生物学和分子遗传学的发展，被誉为20世纪最伟大的发现之一。
第六章酶化学
1、用对或者不对回答下列问题。如果不对，请说明原因
（1）生物体内具有催化能力的物质都是蛋白质。
答：错。还有核酶，其化学本质是核酸。
（2）所有酶都具有辅酶或者辅基。
答：错。酶按其化学组成可分为：简单蛋白酶和结合蛋白酶。简单蛋白酶不含有辅酶或者辅基；结合蛋白酶不含有辅酶或者辅基。
（3）酶促反应的初速度与底物浓度无关。
答：错。酶促反应的初速度与底物浓度的关系符合米氏方程。米氏方程描述的底物浓度与酶促反应速度的关系正式通过测定酶促反应的初速度得来的。
（4）当底物处于饱和状态时，酶促反应的速率与酶的浓度成正比。
答：错。当底物处于饱和状态时，酶促反应的速率为最大反应速率V max。
（5）对于所有酶而言，K m值都与酶的浓度无关。
答：对。
（6）测定酶的活力时，必须在酶促反应的初速度时进行。
2、现有1g淀粉酶制剂，用水稀释至1000mL从中吸取0.5mL测定酶的活力，得知5min可分解0.25g淀粉。计算每克
酶制剂所含的淀粉酶活力单位（淀粉酶活力单位规定为：在最适条件下，每小时分解1g淀粉的酶量为1个活力单位）解：0.5mL酶制剂所含的淀粉酶活力单位=(60×0.25)/5 =3
每克酶制剂所含的淀粉酶活力单位=(1000/0.5) ×3 =6000
3、称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液，从中取出0.1mL酶液，以酪蛋白为底物，用Folin比色法测定酶的活力，得知每小时产生1500μg酪蛋白；另取2mL酶液用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。根据以上数据，求出：（1）1mL 酶液中所含的蛋白质量及活力单位；（2）比活力；（3）1g酶制剂所含的总蛋白质含量及总活力（每分钟产生1μg酪氨酸的酶量为1个活力单位）
解：（1）1mL酶液中所含的蛋白质量=(0.2×6.25)/2=0.625 mg
1mL酶液中所含的活力单位=(1500/60)×10 =250
（2）比活力=活力单位/毫克酶蛋白=250/0.62 =400
（3）1g酶制剂所含的总蛋白质含量=0.625×1000=625 mg
1g酶制剂总活力=250×1000=2.5×105
4、当底物浓度Cs分别等于4K m、5K m、6K m、9K m和10K m时，求反应速率V相当于最大反应速率V max的几分之几？解：据米氏方程：V=V max Cs/( K m +Cs)
若：Cs=nK m时，则：V=n/(n+1) V max
Cs=4K m时，则：V=4/5 V max
Cs=5K m时，则：V=5/6 V max
Cs=6K m时，则：V=6/7 V max
Cs=9K m时，则：V=9/10 V max
Cs=10K m时，则：V=10/11 V max
6、从某生物材料中提取纯化一种酶，按下列步骤进行纯化，计算最后所得酶制剂的比活力、活力回收率和纯化倍数（纯化率）？
回收率=提纯后总活力/提纯前总活力×100%=196/12650×100%=1.54%
纯化倍数=纯化后比活力/纯化前比活力=16.33/0.68=24
第九章糖代谢
1、用对或不对回答下列问题。如果不对，请说明原因。
(1) 糖代谢中所有激酶催化的反应都是不可逆。
答：错。由磷酸甘油酸磷酸酶催化的1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸的反应是可逆的。
(4) 5mol 葡萄糖经HMS完全氧化分解，可产生180mol ATP.
答：175mol。3分子的G-6-P产生6分子的NADPH+H+和1分子3-P-甘油醛，同时又返回2分子的G-6-P，也就是1分子的G-6-P产生6分子的NADPH+H+和1分子3-P-甘油醛。那么2分子的G-6-P产生12分子的NADPH+H+和2分子3-P-甘油醛，其中2分子3-P-甘油醛可以通过EMP的逆过程变成G-6-P，这样，1分子的G-6-P净产生12分子的NADPH+H+（它的穿梭总是免费的），合36分子的A TP。1分子的葡萄糖就可以产生35分子的A TP。
(5) 糖原合成和糖异生都是耗能的。
答：对。
(6) 单糖进入细胞后都生成磷酸单糖，这实际上是细胞的一种保糖机制，以免单糖再转移到细胞外。
答：对。
2、1710g蔗糖在动物体内经有氧分解为H2O和CO2，总共可产生所少摩尔ATP？多少摩尔CO2 ？
解：1mol可分解为：1mol的葡萄糖和1mol果糖。
1mol葡萄糖和1mol果糖完全分解均可产生：36或者38molATP，6mol CO2。
则1mol的蔗糖完全分解可产生：72或者76molATP，12mol CO2。
蔗糖分子量：342
1710g蔗糖=1710/342=5mol
则：1710g蔗糖悠扬分解后产生的：
5×72=360或者5×76=380mol ATP
5×12=60mol CO2
3、某厂用发酵法生产酒精，对淀粉质原料液化酶和糖化酶的总转化率为40%，酒精酵母对葡萄糖的利用率为90%。问投料5000kg可产生多少升酒精（酒精密度0.789g/cm3）？酵母菌获得多少能量（多少molATP）？
解：酒精体积V=(5×106×40%×90%)/(162×0.789×103)=14.1L
nATP=[(5×106×40%×90%)/162]×2=2.2×104mol
4、1mol乳酸完全氧化分解可生成多少摩尔的ATP？没生成1molATP若以储能30.54KJ计算，其储能效率多少？如果2mol乳酸转化成葡萄糖，需要消耗多少molATP?
解：乳酸+NAD+→丙酮酸+ NADH+H+进入呼吸链2or3molATP
丙酮酸进入TCA循环：15mol A TP
1mol乳酸完全氧化分解可生成17or18mol的ATP
储能效率=17×30.54/1336.7=38.84%
或者储能效率=18×30.54/1336.7=41.13%
如果2mol乳酸转化成葡萄糖，需要消耗：4molATP（丙酮酸→草酰乙酸，3-磷酸甘油酸→1.3二磷酸甘油酸个1molATP）+2molGTP(草酰乙酸→磷酸烯醇式丙酮酸)=6molATP
5、每摩尔下列各物在酵母细胞内完全氧化时产生多少摩尔ATP及CO2 ？假定酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化系统完全具有活性。
（1）麦芽糖；（2）乳糖；（3）1-磷酸葡萄糖；（4）3-磷酸甘油醛；（5）琥珀酸
（6）α-酮戊二酸
6、虽然氧分子并不直接参与TCA循环，但该循环的运行必须在有氧的情况下才能发生，为什么？
答：氧分子并不直接参与TCA循环，但底物在脱氢酶作用下会脱下NADH+H+或者FADH2, NADH+H+或者FADH2之后进入线粒体呼吸链，必须以氧作为最终的电子受体。
第十章
1、用对或不对回答下列问题。如果不对，请说明原因。
（1）脂肪酸的氧化分解是在有机分子的羧基端开始的。
答：对。
（2）只有偶数碳原子的脂肪酸才能在氧化降解时产生乙酰CoA。
答：错。奇数碳原子的脂肪酸开始时任按β-氧化途径降解，产生乙酰CoA，最后剩下丙酰CoA。丙酰CoA羧化成琥珀酰CoA，在进入TCA循环。
（3）因为甘油和3-磷酸甘油醛都是三碳化合物，所以它的完全降解所产生的ATP数是一样的。
答：错。甘油首先需要在甘油激酶的作用下消化一分子的A TP生成α-磷酸甘油，然后转变为磷酸二羟丙酮，最后转化为3-磷酸甘油醛。所以它完全分解之后产生的A TP数目比3-磷酸甘油醛少一个。
（4）从乙酰CoA合成1分子软脂酸，需消耗8分子ATP。
答：错。从乙酰CoA合成1分子软脂酸，需要进行7次的缩合反应，消耗7分子A TP。
（５）合成糖原需要UTP，合成磷脂需要CTP。
答：对。
2、1mol三软脂酰甘油酯完全氧化分解，产生多少摩尔ATP？多少摩尔CO2？如由3分子软脂酸和1分子甘油合成1分子三软脂酰甘油需要几分子ATP？
解：1mol三软脂酰甘油酯在脂肪酶的作用下生成3mol软脂酸和1mol甘油
1mol软脂酸完全氧化分解可产生129A TP，则3mol软脂酸生成3×129=387 A TP。
1mol甘油完全氧化分解可产生20（19）-1=19（18）mol A TP。
1mol三软脂酰甘油酯完全氧化分解可产生：387+19（18）=406（405）ATP。同时产生：16×3+3=51 mol CO2。
1分子软脂酸活化成脂酰CoA需要消耗2ATP。
1分子甘油磷酸化成α-磷酸甘油需要消耗1A TP。
3分子软脂酸和1分子甘油合成1分子三软脂酰甘油需要：3×2+1=7ATP。
3、1mol下列含羟基不饱和脂肪酸完全氧化成CO2和水，可净生成多少摩尔ATP？
CH3-CH2-CH2-CH=C(OH)-CH2-CH2-COOH, 这道题错了，若按照我改的这个化合物进行计算。
解：该化合物含有8个碳原子，可进行3次β-氧化生成4个乙酰CoA。
1mol该化合物完全氧化可生成：3×2+3×3+12×4-2=61ATP
若多一个双键，少生成2ATP。
则总共生成61-2=59ATP
4、据你所知，乙酰CoA在动物体内课转变成那些物质？
答：（1）进入TCA循环，彻底氧化分解，生成CO2+H2O,放出能量。
（2）作为脂肪酸、固醇合成的原料。
（3）某些植物、微生物中，可在乙醛酸体内进行乙醛酸循环。
（4）在动物肝、肾脏中有可能产生乙酰乙酸、D- -羟丁酸和丙酮（酮体）。
大学生物化学习题-答案
生物化学习题 蛋白质 —、填空题 1. 氨基酸的等电点（pl）是指—水溶液中，氨基酸分子净电荷为0时的溶液PH值。 2. 氨基酸在等电点时，主要以_兼性一离子形式存在,在pH>pI的溶液中，大部分以负/阴离子形式存在,在pH 《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参 与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是: 生物化学（第三版）课后习题详细解答 第一章糖类 提要 糖类是四大类生物分子之一，广泛存在于生物界，特别是植物界。糖类在生物体内不仅作为结构成分和主要能源，复合糖中的糖链作为细胞识别的信息分子参与许多生命过程，并因此出现一门新的学科，糖生物学。 多数糖类具有(CH2O)n的实验式，其化学本质是多羟醛、多羟酮及其衍生物。糖类按其聚合度分为单糖，1个单体；寡糖，含2-20个单体；多糖，含20个以上单体。同多糖是指仅含一种单糖或单糖衍生物的多糖，杂多糖指含一种以上单糖或加单糖衍生物的多糖。糖类与蛋白质或脂质共价结合形成的结合物称复合糖或糖复合物。 单糖，除二羟丙酮外，都含有不对称碳原子(C*)或称手性碳原子，含C*的单糖都是不对称分子，当然也是手性分子，因而都具有旋光性，一个C*有两种构型D-和L-型或R-和S-型。因此含n个C*的单糖有2n个旋光异构体，组成2n-1对不同的对映体。任一旋光异构体只有一个对映体，其他旋光异构体是它的非对映体，仅有一个C*的构型不同的两个旋光异构体称为差向异构体。 单糖的构型是指离羧基碳最远的那个C*的构型，如果与D-甘油醛构型相同，则属D系糖，反之属L系糖，大多数天然糖是D系糖Fischer E论证了己醛糖旋光异构体的立体化学，并提出了在纸面上表示单糖链状立体结构的Fischer投影式。许多单糖在水溶液中有变旋现象，这是因为开涟的单糖分子内醇基与醛基或酮基发生可逆亲核加成形成环状半缩醛或半缩酮的缘故。这种反应经常发生在C5羟基和C1醛基之间，而形成六元环砒喃糖(如砒喃葡糖)或C5经基和C2酮基之间形成五元环呋喃糖(如呋喃果糖)。成环时由于羰基碳成为新的不对称中心，出现两个异头差向异构体，称α和β异头物，它们通过开链形式发生互变并处于平衡中。在标准定位的Hsworth式中D-单糖异头碳的羟基在氧环面下方的为α异头物，上方的为β异头物，实际上不像Haworth式所示的那样氧环面上的所有原子都处在同一个平面，吡喃糖环一般采取椅式构象，呋喃糖环采取信封式构象。 单糖可以发生很多化学反应。醛基或伯醇基或两者氧化成羧酸，羰基还原成醇；一般的羟基参与成脂、成醚、氨基化和脱氧等反应；异头羟基能通过糖苷键与醇和胺连接，形成糖苷化合物。例如，在寡糖和多糖中单糖与另一单糖通过O-糖苷键相连，在核苷酸和核酸中戊糖经N-糖苷键与心嘧啶或嘌呤碱相连。 生物学上重要的单糖及其衍生物有Glc, Gal，Man, Fru,GlcNAc, GalNAc,L-Fuc,NeuNAc (Sia),GlcUA等它们是寡糖和多糖的组分,许多单糖衍生物参与复合糖聚糖链的组成，此外单糖的磷酸脂，如6-磷酸葡糖，是重要的代谢中间物。 蔗糖、乳糖和麦芽糖是常见的二糖。蔗糖是由α-Gla和β- Fru在两个异头碳之间通过糖苷键连接而成，它已无潜在的自由醛基，因而失去还原，成脎、变旋等性质，并称它为非还原糖。乳糖的结构是Galβ(1-4)Glc，麦芽糖是Glcα(1-4)Glc,它们的末端葡萄搪残基仍有潜在的自由醛基，属还原糖。环糊精由环糊精葡糖基转移酶作用于直链淀粉生成含6,7或8个葡萄糖残基，通过α-1,4糖苷键连接成环，属非还原糖，由于它的特殊结构被用作稳定剂、抗氧化剂和增溶剂等。 淀粉、糖原和纤维素是最常见的多糖，都是葡萄糖的聚合物。淀粉是植物的贮存养料，属贮能多糖，是人类食物的主要成分之一。糖原是人和动物体内的贮能多糖。淀粉可分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉分子只有α-1,4连键，支链淀粉和糖原除α-1,4连键外尚有α-1,6连键形成分支，糖原的分支程度比支链淀粉高。纤维素与淀粉、糖原不同，它是由葡萄糖通过β-1.4糖苷键连接而成的，这一结构特点使纤维素具有适于作为结构成分的物理特性，它属于结构多糖。 第二章糖类 1、判断对错，如果认为错误，请说明原因。 （1）所有单糖都具有旋光性。 答：错。二羟酮糖没有手性中心。 （2）凡具有旋光性的物质一定具有变旋性，而具有变旋性的物质也一定具有旋光性。 答：凡具有旋光性的物质一定具有变旋性：错。手性碳原子的构型在溶液中发生了 改变。大多数的具有旋光性的物质的溶液不会发生变旋现象。 具有变旋性的物质也一定具有旋光性：对。 （3）所有的单糖和寡糖都是还原糖。 答：错。有些寡糖的两个半缩醛羟基同时脱水缩合成苷。如：果糖。 （4）自然界中存在的单糖主要为D-型。 答：对。 （5）如果用化学法测出某种来源的支链淀粉有57 个非还原端，则这种分子有56 个分支。 答：对。 2、戊醛糖和戊酮糖各有多少个旋光异构体（包括α-异构体、β-异构体）？请写出戊醛糖的开链结构式（注明构型和名称）。 答：戊醛糖：有3 个不对称碳原子，故有2 3 =8 种开链的旋光异构体。如果包括α-异构体、 β-异构体，则又要乘以2=16 种。 戊酮糖：有2 个不对称碳原子，故有2 2 =4 种开链的旋光异构体。没有环状所以没有α-异 构体、β-异构体。 3、乳糖是葡萄糖苷还是半乳糖苷，是α-苷还是β-苷？蔗糖是什么糖苷，是α- 苷还是β -苷？两分子的D-吡喃葡萄糖可以形成多少种不同的二糖？ 答：乳糖的结构是4-O-（β-D-吡喃半乳糖基）D-吡喃葡萄糖[β-1，4]或者半乳糖β（1→4） 葡萄糖苷，为β-D-吡喃半乳糖基的半缩醛羟基形成的苷因此是β-苷。 蔗糖的结构是葡萄糖α（1→2）果糖苷或者果糖β（2→1）葡萄糖，是α-D-葡萄糖的半缩 醛的羟基和β- D -果糖的半缩醛的羟基缩合形成的苷，因此既是α苷又是β苷。两分子的D-吡喃葡萄糖可以形成19 种不同的二糖。4 种连接方式α→α，α→β，β→α， β→β，每个5 种，共20 种-1 种（α→β，β→α的1 位相连）=19。 4、某种α-D-甘露糖和β-D-甘露糖平衡混合物的[α]25 D 为+ °，求该平衡混合物中α-D- 甘露糖和β-D-甘露糖的比率（纯α-D-甘露糖的[α]25 D 为+ °，纯β-D-甘露糖的[α]25 D 为- °）； 解：设α-D-甘露糖的含量为x,则 (1-x)= X=% 该平衡混合物中α-D-甘露糖和β-D-甘露糖的比率:= 5、请写出龙胆三糖[β-D-吡喃葡萄糖（1→6）α-D-吡喃葡萄糖（1→2）β-D-呋喃果糖] 的 结构式。. 6、水解仅含D-葡萄糖和D-甘露糖的一种多糖30g,将水解液稀释至平衡100mL。此水解液 在10cm 旋光管中测得的旋光度α为+ °，试计算该多糖中D-葡萄糖和D-甘露糖的物质的 量的比值(α/β-葡萄糖和α/β-甘露糖的[α]25 D 分别为+ °和+ °）。 解：[α]25 D= α25 D /cL×100= ( 30×1)×100= 设D-葡萄糖的含量为x,则 +(1-x)= X=% 121.胆固醇在体内的主要代谢去路是（C） A.转变成胆固醇酯 B.转变为维生素D3 C.合成胆汁酸 D.合成类固醇激素 E.转变为二氢胆固醇 125.肝细胞内脂肪合成后的主要去向是（C） A. C. E. A.胆A.激酶 136.高密度脂蛋白的主要功能是（D） A.转运外源性脂肪 B.转运内源性脂肪 C.转运胆固醇 D.逆转胆固醇 E.转运游离脂肪酸 138.家族性高胆固醇血症纯合子的原发性代谢障碍是（C） A.缺乏载脂蛋白B B.由VLDL生成LDL增加 C.细胞膜LDL受体功能缺陷 D.肝脏HMG-CoA还原酶活性增加 E.脂酰胆固醇脂酰转移酶（ACAT）活性降低 139.下列哪种磷脂含有胆碱（B） A.脑磷脂 B.卵磷脂 C.心磷脂 D.磷脂酸 E.脑苷脂 ）A. D. A. E. A. 谢 A. 216.直接参与胆固醇合成的物质是（ACE） A.乙酰CoA B.丙二酰CoA C.ATP D.NADH E.NADPH 217.胆固醇在体内可以转变为（BDE） A.维生素D2 B.睾酮 C.胆红素 D.醛固酮 E.鹅胆酸220.合成甘油磷脂共同需要的原料（ABE） A.甘油 B.脂肪酸 C.胆碱 D.乙醇胺 E.磷酸盐 222.脂蛋白的结构是（ABCDE） A.脂蛋白呈球状颗粒 B.脂蛋白具有亲水表面和疏水核心 C.载脂蛋白位于表面 D.CM、VLDL主要以甘油三酯为核心 E.LDL、HDL主要的胆固醇酯为核心 过淋巴系统进入血液循环。 230、写出胆固醇合成的基本原料及关键酶？胆固醇在体内可的转变成哪些物质？ 答：胆固醇合成的基本原料是乙酰CoA、NADPH和ATP等，限速酶是HMG-CoA还原酶，胆固醇在体内可以转变为胆汁酸、类固醇激素和维生素D3。231、简述血脂的来源和去路？ 答：来源：食物脂类的消化吸收；体内自身合成的 2、 （β-[及 胰岛素抑制HSL活性及肉碱脂酰转移酶工的活性，增加乙酰CoA羧化酶的活性，故能促进脂肪合成，抑制脂肪分解及脂肪酸的氧化。 29、乙酰CoA可进入以下代谢途径： 答：①进入三羧酸循环氧化分解为和O，产生大量 生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸 第一章绪论 略 第二章核酸的结构与功能 一、名词解释 1．核苷：是核糖或脱氧核糖与嘌呤或嘧啶碱生成的糖苷。 2．核苷酸：核苷中的戊糖羟基被磷酸酯化，形成核苷酸。 3．核酸：多个核苷酸彼此通过3′,5′-磷酸二酯键连接所形成的多聚核苷酸，称为核酸。4．核酸的一级结构：指DNA分子中核苷酸的排列顺序及连接方式。 5．核酸的二级结构：即DNA的双螺旋结构模型。 6．环化核苷酸：即cAMP和cGMP。在细胞的代谢调节中作为激素的第二信使，控制细胞的生长、分化和细胞对激素的效应。 7．增色效应：DNA变性后，在260nm处的紫外吸收显著增高的现象，称增色效应（高色效应）。 8．减色效应：DNA复性后，在260nm处的紫外吸收显著降低的现象，称为减色效应。 9．核酸变性：指核酸双螺旋的氢键断裂变成单链的过程，并不涉及共价键的断裂。 10．熔解温度：50% 的双链DNA发生变性时的温度称为熔解温度（Tm）或解链温度。11．退火：变性DNA在缓慢冷却时，可以复性，此过程称为退火。 12．核酸复性：变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构，这个过程称复性。 13．分子杂交：形成杂交分子的过程称为分子杂交。当两条来源不同的DNA（或RNA链或DNA 链与RNA链之间）存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。 14. 核酸降解：多核苷酸链上共价键（3′,5′-磷酸二酯键）的断裂称为核酸的降解。15．碱基配对：DNA双螺旋内部的碱基按腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）结合，鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）结合，这种配对关系，称为碱基配对。 16．稀有碱基：是指A、G、C、U之外的其他碱基。 17．超螺旋：以DNA双螺旋为骨架，围绕同一中心轴形成的螺旋结构，是在DNA双螺旋基础上的进一步螺旋化。 二、填空 1．260． 2．下降，增大。 3．核糖，脱氧核糖。 4．嘌呤碱，嘧啶碱，260nm。5．大，高。 6．戊糖/核糖。7．核苷酸。 8．反密码子。 9．核苷酸，3′，5′-磷酸二酯键，磷酸，核苷，戊糖，碱基。 10．脱氧核糖核酸（DNA），核糖核酸（RNA），脱氧核糖，A、G、C、T；核糖，A、G、C、U。 1 绪论 1．生物化学研究的对象和内容是什么？ 解答：生物化学主要研究: （1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能； （2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化； （3）生物遗传信息的储存、传递和表达； （4）生物体新陈代谢的调节与控制。 2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。 3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。 解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、 磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2）、羟基（—OH ）、羰基（C O ）、羧基（—COOH ）、巯基（—SH ）、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。 生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C 端）,蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。 2 蛋白质化学 1．用于测定蛋白质多肽链N 端、C 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？ 解答：（1） N-末端测定法：常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。 ①2,4―二硝基氟苯(DNFB 或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝基氟苯（2,4―DNFB ）反应（Sanger 反应），生成DNP ―多肽或DNP ―蛋白质。由于DNFB 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为黄色DNP ―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。 ② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS ―Cl ）反应生成DNS ―多肽或DNS ―蛋白质。由于DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNS ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS ―氨基酸，其余的都是游离氨基酸。 ③ 苯异硫氰酸脂（PITC 或Edman 降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯（PITC ）反应（Edman 反应），生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N ―末端的PTC ―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去N ―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。 ④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N 端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N 端残基序列。 （2）C ―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。 肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C 端氨基酸以游离形式存 在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。 生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题 第一章糖类 提要 糖类是四大类生物分子之一，广泛存在于生物界，特别是植物界。糖类在生物体内不仅作为结构成分和主要能源，复合糖中的糖链作为细胞识别的信息分子参与许多生命过程，并因此出现一门新的学科，糖生物学。 多数糖类具有(CH2O)n的实验式，其化学本质是多羟醛、多羟酮及其衍生物。糖类按其聚合度分为单糖，1个单体；寡糖，含2-20个单体；多糖，含20个以上单体。同多糖是指仅含一种单糖或单糖衍生物的多糖，杂多糖指含一种以上单糖或加单糖衍生物的多糖。糖类与蛋白质或脂质共价结合形成的结合物称复合糖或糖复合物。 单糖，除二羟丙酮外，都含有不对称碳原子(C*)或称手性碳原子，含C*的单糖都是不对称分子，当然也是手性分子，因而都具有旋光性，一个C*有两种构型D-和L-型或R-和S-型。因此含n个C*的单糖有2n个旋光异构体，组成2n-1对不同的对映体。任一旋光异构体只有一个对映体，其他旋光异构体是它的非对映体，仅有一个C*的构型不同的两个旋光异构体称为差向异构体。 单糖的构型是指离羧基碳最远的那个C*的构型，如果与D-甘油醛构型相同，则属D系糖，反之属L 系糖，大多数天然糖是D系糖Fischer E论证了己醛糖旋光异构体的立体化学，并提出了在纸面上表示单糖链状立体结构的Fischer投影式。许多单糖在水溶液中有变旋现象，这是因为开涟的单糖分子内醇基与醛基或酮基发生可逆亲核加成形成环状半缩醛或半缩酮的缘故。这种反应经常发生在C5羟基和C1醛基之间，而形成六元环砒喃糖(如砒喃葡糖)或C5经基和C2酮基之间形成五元环呋喃糖(如呋喃果糖)。成环时由于羰基碳成为新的不对称中心，出现两个异头差向异构体，称α和β异头物，它们通过开链形式发生互变并处于平衡中。在标准定位的Hsworth式中D-单糖异头碳的羟基在氧环面下方的为α异头物，上方的为β异头物，实际上不像Haworth式所示的那样氧环面上的所有原子都处在同一个平面，吡喃糖环一般采取椅式构象，呋喃糖环采取信封式构象。 单糖可以发生很多化学反应。醛基或伯醇基或两者氧化成羧酸，羰基还原成醇；一般的羟基参与成脂、成醚、氨基化和脱氧等反应；异头羟基能通过糖苷键与醇和胺连接，形成糖苷化合物。例如，在寡糖和多糖中单糖与另一单糖通过O-糖苷键相连，在核苷酸和核酸中戊糖经N-糖苷键与心嘧啶或嘌呤碱相连。 生物学上重要的单糖及其衍生物有Glc, Gal，Man, Fru,GlcNAc, GalNAc,L-Fuc,NeuNAc (Sia),GlcUA 等它们是寡糖和多糖的组分,许多单糖衍生物参与复合糖聚糖链的组成，此外单糖的磷酸脂，如6-磷酸葡糖，是重要的代谢中间物。 蔗糖、乳糖和麦芽糖是常见的二糖。蔗糖是由α-Gla和β- Fru在两个异头碳之间通过糖苷键连接而成，它已无潜在的自由醛基，因而失去还原，成脎、变旋等性质，并称它为非还原糖。乳糖的结构是Gal β(1-4)Glc，麦芽糖是Glcα(1-4)Glc,它们的末端葡萄搪残基仍有潜在的自由醛基，属还原糖。环糊精由环糊精葡糖基转移酶作用于直链淀粉生成含6,7或8个葡萄糖残基，通过α-1,4糖苷键连接成环，属非还原糖，由于它的特殊结构被用作稳定剂、抗氧化剂和增溶剂等。 淀粉、糖原和纤维素是最常见的多糖，都是葡萄糖的聚合物。淀粉是植物的贮存养料，属贮能多糖，是人类食物的主要成分之一。糖原是人和动物体内的贮能多糖。淀粉可分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉分子只有α-1,4连键，支链淀粉和糖原除α-1,4连键外尚有α-1,6连键形成分支，糖原的分支程度比支链淀粉高。纤维素与淀粉、糖原不同，它是由葡萄糖通过β糖苷键连接而成的，这一结构特点使纤维素具有适于作为结构成分的物理特性，它属于结构多糖。 肽聚糖是细菌细胞壁的成分，也属结构多糖。它可看成由一种称胞壁肽的基本结构单位重复排列构成。胞壁肽是一个含四有序侧链的二糖单位，G1cNAcβ(1-4)MurNAc，二糖单位问通过β-1,4连接成多糖，链相邻的多糖链通过转肽作用交联成一个大的囊状分子。青霉素就是通过抑制转肽干扰新的细胞壁形成而起抑菌作用的。磷壁酸是革兰氏阳性细菌细胞壁的特有成分;脂多糖是阴性细菌细胞壁的特有成分。 糖蛋白是一类复合糖或一类缀合蛋白质。许多膜内在蛋白质加分泌蛋白质都是糖蛋白糖蛋白和糖脂中的寡糖链，序列多变，结构信息丰富，甚至超过核酸和蛋白质。一个寡搪链中单糖种类、连接位置、异头碳构型和糖环类型的可能排列组合数目是一个天文数字。糖蛋白中寡糖链的还原端残基与多肽链氨基酸残基之间的连接方式有:N-糖太键，如β- GlcNAc-Asn和O-糖肽链，如α-GalNAc-Thr/Ser, β-Gal-Hyl, β-L-Araf-Hyp,N-连接的寡糖链(N-糖链)都含有一个共同的结构花式称核心五糖或三甘露糖基核心，N-糖链可分为复杂型、高甘露糖型和杂合型三类，它们的区别王要在外周链,O-糖链的结构比N-糖链简单，但连 生物膜 五、问答题 1．正常生物膜中，脂质分子以什么的结构和状态存在？ 答：.脂质分子以脂双层结构存在，其状态为液晶态。 2．流动镶嵌模型的要点是什么？ 答：.蛋白质和脂质分子都有流动性，膜具有二侧不对称性，蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3．外周蛋白和嵌入蛋白在提取性质上有那些不同？现代生物膜的结构要点是什么？ 4．什么是生物膜的相变？生物膜可以几种状态存在？ 5．什么是液晶相？它有何特点？ 6．影响生物膜相变的因素有那些？他们是如何对生物膜的相变影响的？ 7．物质的跨膜运输有那些主要类型？各种类型的要点是什么？ 1.脂质分子以脂双层结构存在，其状态为液晶态。 2.蛋白质和脂质分子都有流动性，膜具有二侧不对称性，蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3.由于外周蛋白与膜以极性键结合，所以可以有普通的方法予以提取；由于嵌入蛋白与膜通过非极性键结合，所以只能用特殊的方法予以提取。 现代生物膜结构要点：脂双层是生物膜的骨架；蛋白质以外周蛋白和嵌入蛋白两种方式与膜结合；膜脂和膜蛋白在结构和功能上都具有二侧不对称性；膜具有一定的流动性；膜组分之间有相互作用。 4.生物膜从一种状态变为另一种状态的变化过程为生物膜的相变，一般指液晶相与晶胶相之间的变化。生物膜可以三种状态存在，即：晶胶相、液晶相和液相。 5.生物膜既有液态的流动性，又有晶体的有序性的状态称为液晶相。其特点为：头部有序，尾部无序，短程有序，长程无序，有序的流动，流动的有序。 6.影响生物膜相变的因素及其作用为：A、脂肪酸链的长度，其长度越长，膜的相变温度越高；B、脂肪酸链的不饱和度，其不饱和度越高，膜的相变温度越低；C、固醇类，他们可使液晶相存在温度范围变宽；D、蛋白质，其影响与固醇类相似。 7.有两种运输类型，即主动运输和被动运输，被动运输又分为简单扩散和帮助扩散两种。简单扩散运输方 向为从高浓度向低浓度，不需载体和能量；帮助扩散运输方向同上，需要载体，但不需能量；主动运输运 输方向为从低浓度向高浓度，需要载体和能量。 生物氧化与氧化磷酸化 一、选择题 1．生物氧化的底物是： A、无机离子 B、蛋白质 C、核酸 D、小分子有机物 2．除了哪一种化合物外，下列化合物都含有高能键？ A、磷酸烯醇式丙酮酸 B、磷酸肌酸 C、ADP D、G-6-P E、1,3-二磷酸甘油酸 3．下列哪一种氧化还原体系的氧化还原电位最大？ A、延胡羧酸→丙酮酸 B、CoQ(氧化型) →CoQ(还原型) C、Cyta Fe2+→Cyta Fe3+ D、Cytb Fe3+→Cytb Fe2+ E、NAD+→NADH 4．呼吸链的电子传递体中，有一组分不是蛋白质而是脂质，这就是： 生物化学试题（1） 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 蛋白质降解及氨基酸代谢： 1.氨基酸脱氨基后C链如何进入TCA循环.（30分） P315 图30-13 2.说明尿素形成机制和意义（40分） P311-314 概括精要回答 3.提高Asp和Glu的合成会对TCA循环产生何种影响?细胞会怎样应付这种状况？（30分） 参考答案： 核苷酸代谢及蛋白质合成题目及解答精要： 1.生物体内嘌呤环和嘧啶环是如何合成的？有哪些氨基酸直接参与核苷酸的合成？ 嘌呤环（Gln+Gly+Asp）嘧啶环（Gln+Asp） 2.简要说明糖、脂肪、氨基酸和核苷酸代谢之间的相互联系？ 直接做图，并标注连接点 生物氧化及电子传递题目及解答精要： 名词解释：（60分，10分一题） 甘油-3-磷酸穿梭：P139 需概括 苹果酸-天冬氨酸穿梭：P139 需概括 电子传递链：P119 解偶联剂：P137 化学渗透假说：P131 生物氧化：P114 两个出处，总结概括 问答题：（10分） 1.比较底物水平磷酸化和氧化磷酸化两者的异同？ 参考答案： 也可自己概括 2.以前有人曾经考虑过使用解偶联剂如2，4-二硝基苯酚（DNP）作为减肥药，但不久即放弃使用，为什么？（10分） 参考答案： 3.已知有两种新的代谢抑制剂A和B：将离体的肝线粒体制剂与丙酮酸、氧气、ADP和无机磷酸一起保温，发现加入抑制剂A，电子传递和氧化磷酸化就被抑制；当既加入A又加入抑制剂B的时候，电子传递恢复了，但氧化磷酸化仍不能进行，请问：①.抑制剂A和B属于电子传递抑制剂，氧化磷酸化抑制剂，还是解偶联剂？②.给出作用方式和A、B类似的抑制剂？（20分） 参考答案： 糖代谢及其他途径： 题目及解答精要： 1.为什么糖原讲解选用磷酸解，而不是水解？（50分） P178 2.糖酵解、TCA循环、糖异生、戊糖磷酸途径和乙醛酸循环之间如何联系？（50分） 糖酵解（无氧），产生丙酮酸进入TCA循环（有氧）（10分） 糖异生糖酵解逆反应（1，3，10步反应单独代谢流程）（10分） TCA循环中草酰乙酸可进入唐异生（10分） 戊糖磷酸途径是糖酵解中G-6-P出延伸出来并又回去的一条戊糖支路（10分） 乙醛酸循环是TCA循环在延胡羧酸和L-苹果酸间的一条捷径（10分） 糖酵解题目及解答精要： 1.名词解释（每个10分） 糖酵解：P63 激酶：P68 底物水平磷酸化：笔记 2.问答题 ①为什么砷酸是糖酵解作用的毒物？（15分） P75 ②糖酵解中两个耗能阶段是什么？两个产能阶段是什么？三个调控位点在哪里？（15分） P80 表22-1 ③糖酵解中磷酸基团参与了哪些反应？（20分） 在1，3，6，7，8，10步参加了反应 ④当肌肉组织激烈活动时，与休息时相比需要更多的ATP。在骨骼肌里，例如兔子的腿肌或火鸡的飞行肌，需要的A TP几乎全部由厌氧酵解反应产生的。假设骨骼肌缺乏乳酸脱氢酶，它们能否进行激烈的体力活动，即能否借 生物化学试题及答案 绪论 一．名词解释 1.生物化学 2.生物大分子 蛋白质 一、名词解释 1、等电点 2、等离子点 3、肽平面 4、蛋白质一级结构 5、蛋白质二级结构 6、超二级结构 7、结构域 8、蛋白质三级结构 9、蛋白质四级结构 10、亚基 11、寡聚蛋白 12、蛋白质变性 13、蛋白质沉淀 14、蛋白质盐析 15、蛋白质盐溶 16、简单蛋白质 17、结合蛋白质 18、必需氨基酸 19、同源蛋白质 二、填空题 1、某蛋白质样品中的氮含量为0.40g，那么此样品中约含蛋白 g。 2、蛋白质水解会导致产物发生消旋。 3、蛋白质的基本化学单位是，其构象的基本单位是。 4、芳香族氨基酸包括、和。 5、常见的蛋白质氨基酸按极性可分为、、和。 6、氨基酸处在pH大于其pI的溶液时，分子带净电，在电场中向极游动。 7、蛋白质的最大吸收峰波长为。 8、构成蛋白质的氨基酸除外，均含有手性α-碳原子。 9、天然蛋白质氨基酸的构型绝大多数为。 10、在近紫外区只有、、和具有吸收光的能力。 11、常用于测定蛋白质N末端的反应有、和。 12、α-氨基酸与茚三酮反应生成色化合物。 13、脯氨酸与羟脯氨酸与茚三酮反应生成色化合物。 14、坂口反应可用于检测，指示现象为出现。 15、肽键中羰基氧和酰胺氢呈式排列。 16、还原型谷胱甘肽的缩写是。 17、蛋白质的一级结构主要靠和维系；空间结构则主要依靠维系。 18、维持蛋白质的空间结构的次级键包括、、和等。 19、常见的蛋白质二级结构包括、、、和等。 20、β-折叠可分和。 21、常见的超二级结构形式有、、和等。 22、蛋白质具有其特异性的功能主要取决于自身的排列顺序。 23、蛋白质按分子轴比可分为和。 24、已知谷氨酸的pK1(α-COOH)为2.19，pK2(γ-COOH)为4.25，其pK3(α-NH3+)为9.67，其pI为。 25、溶液pH等于等电点时，蛋白质的溶解度最。 三、简答题 一绪论 1．生物化学研究的对象和内容是什么？ 解答：生物化学主要研究:（1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能；（2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化；（3）生物遗传信息的储存、传递和表达；（4）生物体新陈代谢的调节与控制。 2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。 3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等 6 种是解答蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的 4 个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成 4 个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多 O 种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2）、羟基（—OH）、羰基（C）、羧基（—COOH）、 巯基（—SH）、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20 种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C 端）,蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。 二蛋白质化学 1．用于测定蛋白质多肽链N 端、C 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？ 解答：（1）N-末端测定法：常采用2, 4 ―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。①2, 4 ―二硝基氟苯(DNFB 或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2, 4 ―二硝基氟苯2, 4 ―DNFB）（反应（Sanger 反应）生成DNP― 1 绪论 1.生物化学研究的对象与内容就是什么？ 解答:生物化学主要研究: (1)生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能; (2)生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化; (3)生物遗传信息的储存、传递与表达; (4)生物体新陈代谢的调节与控制。 2.您已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示:生物化学就是生命科学的基础学科,注意从不同的角度,去理解并运用生物化学的知识。 3.说明生物分子的元素组成与分子组成有哪些相似的规侓。 解答:生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种就是蛋白质、核酸、糖与脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质,即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键与共价三键,碳还可与氮、氧与氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基(-NH2)、羟基(-OH)、羰基()、羧基(-COOH)、巯基(-SH)、磷酸基(-PO4 )等功能基团。这些功能基团因氮、硫与磷有着可变的氧化数及氮与氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。 生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状,其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件就是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性(N 端→C端),蛋白质主链骨架呈"肽单位"重复;核酸的构件就是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连,核酸链也具有方向性(5′、→3′),核酸的主链骨架呈"磷酸-核糖(或脱氧核糖)"重复;构成脂质的构件就是甘油、脂肪酸与胆碱,其非极性烃长链也就是一种重复结构;构成多糖的构件就是单糖,单糖间通过糖苷键相连,淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。 2 蛋白质化学 1.用于测定蛋白质多肽链N端、C端的常用方法有哪些？基本原理就是什么？ 解答:(1) N-末端测定法:常采用―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。 ①―二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与―二硝基氟苯(―DNFB)反应(Sanger反应),生成DNP―多肽或DNP―蛋白质。由于DNFB与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNP―多肽经酸水解后,只有N―末端氨基酸为黄色DNP―氨基酸衍生物,其余的都就是游离氨基酸。 ②丹磺酰氯(DNS)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯(DNS―Cl)反应生成DNS―多肽或DNS―蛋白质。由于DNS与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNS―多肽经酸水解后,只有N―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS―氨基酸,其余的都就是游离氨基酸。 ③苯异硫氰酸脂(PITC或Edman降解)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯(PITC)反应(Edman反应),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时,N―末端的PTC―氨基酸发生环化,生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来,除去N―末端氨基酸后剩下的肽链仍然就是完整的。 ④氨肽酶法:氨肽酶就是一类肽链外切酶或叫外肽酶,能从多肽链的N端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类与数量,按反应时间与残基释放量作动力学曲线,就能知道该蛋白质的N端残基序列。生物化学题库及答案大全
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