尼氏_Nissl_染色液
尼氏Nissl染色
尼氏(Nissl)染色液 产品简介： 碧云天生产的尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神经生物学家广泛使用的一种Nissl染色液，用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。 Nissl染色是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的。 Nissl染色液染色后呈蓝紫色，常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多，说明神经细胞合成蛋白质的功能较强；相反在神经细胞受到损伤时，Nissl小体的数量会减少甚至消失。 本Nissl染色液染色的有效成分是Cresyl violet。Cresyl violet可以和RNA或DNA结合，可以染色粗面型内质网上的核糖体，也可以染色细胞核。染色后使细胞体呈现斑驳的(mottled)蓝紫色染色。 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。 保存条件： 室温避光保存，至少一年有效。 注意事项： 特别注意：Nissl染色液的染色能力很强，并且染色后很难去除，请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。 样品数量较多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片： 二甲苯中脱蜡5-10分钟，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟。 b) 对于冰冻切片： 蒸馏水2分钟。 c) 对于培养细胞： 用4%多聚甲醛固定10分钟以上。 蒸馏水洗涤2分钟。 换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品： 尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，染色时温度提高到37-50℃对于25-50微米等较厚的切片可以使染色更均匀）。 蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。 95%乙醇约5秒。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照
HE染色和尼氏染色
HE染色 .HE染色简介: 苏木精一伊红染色法（hematoxylin-eosin staining ），简称HE染色法，石 蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝, 如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。 .实验步骤: 1.脱蜡: 将石蜡切片在65C烘箱中烘烤40-60分钟，后用二甲苯（I）、（n）浸泡，各 15min ；2.水化： 无水酒精（100%乙醇）2min,下行至90%、80%、70%酒精各2min,蒸馏水（I）、 (U)各2min； 3.染色: 石蜡画圈，用滴管滴加苏木素在脑片上，放湿盒40s；（苏木素需要回收） 4.流水浸洗: 把玻片装入玻片铁架子里，在1L烧杯里用自来水对玻片进行流水浸洗；（脑片 不要对着水流直接冲） 5.1%盐酸酒精分化: 快速提拉2-3下，用时3-5s左右; 6.流水浸洗: 自来水洗3次，每次20min ； 7.伊红染色: 时间15min ； 8.流水浸洗; 9.脱水:
先在通风橱外的70%酒精浸没，时长2-3S,以颜色适宜为准，再放入通风橱中脱水，70%、80%、90%2-3s, 100%酉精I、n 1min，二甲苯I、n 2min； 10.封片: 上述处理好的玻片，取中性树胶滴入载玻片的组织上，取盖玻片从一端逐步盖下去，避免发生气泡 三.结果的判断: 3.1实验结果: 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例 如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 3.2 HE染色评定标准: (1)切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕; (2)染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。 四?注意事项: 1?染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的 处理是不一样的。 2?染色过程中所用的时间以及酒精梯度脱水的选择要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。
尼氏染色步骤
小鼠脑冰冻切片后，想做尼氏染色，用焦油紫，具体步骤是什么？焦油紫的溶液该如何配制？ 焦油紫染液的配制： 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟； 无水酒精中1分钟； 95%酒精、70%酒精各1分钟，蒸馏水洗片刻； 进入焦油紫染液染色30分钟（37度温箱中染色10分钟），蒸馏水洗涤； 95%酒精分色； 常规脱水、透明、封片。 尼氏体呈紫色，细胞核呈淡紫色，胶质细胞呈淡紫色。 mickeyzq wrote: 焦油紫染液的配制： 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟； 无水酒精中1分钟； 95%酒精、70%酒精各1分钟，蒸馏水洗片刻； 进入焦油紫染液染色30分钟（37度温箱中染色10分钟），蒸馏水洗涤； 95%酒精分色； 常规脱水、透明、封片。
尼氏体呈紫色，细胞核呈淡紫色，胶质细胞呈淡紫色。 你的没有经过复染，对比也可以这么鲜明啊 我用的是1％的甲苯胺蓝，具体步骤是： 常规石蜡切片，二甲苯透明，酒精梯度复水，入1％甲苯胺蓝室温下染3min，自来水冲洗，95％酒精分化，0.5％伊红复染1s，水洗，透明封片，但是结果不好，伊红复染后颜色很深，原来的蓝色被覆盖的很严重，不知道该怎么改进 换焦油紫看看,焦油紫着色比较深. （二）神经细胞尼氏体染色 正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏化，它们主要分布于神经细胞的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫（Cresyl fast violet）亚甲蓝（methylene blue）甲苯胺蓝（toluidine blue）硫董（thionin）等钭其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内的尼氏体更可发生变化，严重的可消失。 焦油坚牢紫显示尼氏体 焦油坚牢紫1g 蒸馏水100ml *作方法： 1、切片脱蜡至水 2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟 3、水洗 4、用95%酒精分化 5、无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶 结果：神经细胞单位：紫-蓝色 细胞核：紫-蓝色 尼氏体：紫-深蓝色 注意：1、应用酒精分化切片，要迅速，防止过度分化，将切片上的颜色全部脱掉。 神经纤维染色 使用说明： 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片： 二甲苯中脱蜡5-10分钟，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品：
病理学技术—特殊染色最最全总结
结缔组织染色法 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表 A 染色，显示胶原纤维，A组排列规则 . Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图表 B Mssson三色法 图表 C 三色染色胃癌组织中血管平滑肌 . 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞
二、胶原纤维染色法 . Van Gieson（）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表 E 2.胶原纤维，Van Gieson.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞 myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)
黄色：其他 三、网状纤维染色 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）
黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 Gomori氏银氨液配制法 图表 G Gomori氏银氨液配制法 四、弹性纤维染色 Gomori醛复红染色法 *甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳 图表 H 醛复红染色法 五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法 蓝绿色：弹性纤维 红色：胶原纤维 黄色：背景
六、肌肉组织染色 △横纹肌组织染色 Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH） 蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维（有时） 紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌 图表 J .磷钨酸苏木素法 图表 K .磷钨酸苏木素染色液 △早期心肌病变组织染色 染色法（1974年）
尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项
尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项 货号：G1434 规格：3×50ml 保存：室温，避光，6个月。 产品内容： 规格 3×50ml Storage 名称 试剂(A):Methylene Blue Stain50ml RT避光 试剂(B):Nissl Differentiation50ml RT 试剂(C):Ammonium Molybdate Solution50ml RT 产品简介： 尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。 尼氏染色液(Nissl Stain，亚甲蓝法)主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。 操作步骤(仅供参考)： 1、新鲜组织固定于20%甲醛液中，常规脱水包埋。 2、切片厚5μm，常规脱蜡至水。 3、Methylene Blue Stain滴染10min。 4、入Nissl Differentiation分化，在显微镜下观察至尼氏体清晰为止。
5、入Ammonium Molybdate Solution处理切片数分钟。 6、蒸馏水冲洗。 7、常规脱水透明，中性树胶封固。 染色结果： 尼氏小体蓝色 背景红色或粉红色 注意事项： 1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。 2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林 溶液。 3、本染色试剂盒对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。 4、石蜡切片厚度7～10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。
Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍
Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明： 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一，可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单，操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟，蒸馏水2 分钟， b)对于冰冻切片：蒸馏水2 分钟， c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10 分钟以上，蒸馏水洗涤2 分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。 2、苏木素（HE）染色对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10 分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），用自来水洗去残留的染色液，约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片：95%乙醇脱水2 分钟，换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟；二甲苯透明 5 分钟，换用新鲜的二甲苯，再透明 5 分钟，用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色，在苏木素染色后，70％乙醇洗涤2 次，每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用
于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次，但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地：国产 提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。 保存：室温避光储存，有效期至少12 个月。 关键词：Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:
病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结
单纯固定液 甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。 重铬酸钾Zenker，Helly，Maximov，Regaud。 苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。不宜用火棉胶包埋。70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。 三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。 升汞：针状结晶，组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞 乙醇：固定兼有脱水作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。 醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。 铬酸避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。 饿酸 延长固定时间，脆性增加，对染色不力。1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。 丙酮：酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。 异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。 叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。电镜标本中常用作中间脱水剂。 环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。 四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。 环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。 混合固定液 B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理； Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。 Bouin液：结缔组织 比较差。不适宜长期固定（12-24h）。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。
HE染色和尼氏染色
HE染色 一．HE染色简介： 苏木精—伊红染色法( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。 二．实验步骤： 1.脱蜡： 将石蜡切片在65℃烘箱中烘烤40-60分钟，后用二甲苯（Ⅰ）、（Ⅱ）浸泡，各15min；2.水化： 无水酒精（100%乙醇）2min，下行至90%、80%、70%酒精各2min，蒸馏水（Ⅰ）、（Ⅱ）各2min； 3．染色： 石蜡画圈，用滴管滴加苏木素在脑片上，放湿盒40s；（苏木素需要回收） 4.流水浸洗： 把玻片装入玻片铁架子里，在1L烧杯里用自来水对玻片进行流水浸洗；（脑片不要对着水流直接冲） 5.1%盐酸酒精分化： 快速提拉2-3下，用时3-5s左右； 6.流水浸洗： 自来水洗3次，每次20min； 7.伊红染色： 时间15min；
8.流水浸洗； 9.脱水： 先在通风橱外的70%酒精浸没，时长2-3s，以颜色适宜为准，再放入通风橱中脱水，70%、80%、90%2-3s，100%酒精Ⅰ、Ⅱ1min，二甲苯Ⅰ、Ⅱ2min；10．封片： 上述处理好的玻片，取中性树胶滴入载玻片的组织上，取盖玻片从一端逐步盖下去，避免发生气泡 三．结果的判断： 3.1实验结果： 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 3.2 HE染色评定标准： （1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕； （2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。 四．注意事项： 1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的处理是不一样的。 2．染色过程中所用的时间以及酒精梯度脱水的选择要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。
病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结电子教案
病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色 总结
单纯固定液 甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。 重铬酸钾 Zenker，Helly，Maximov，Regaud。 苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。不宜用火棉胶包埋。 70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。 三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。 升汞：针状结晶，组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞 乙醇：固定兼有脱水作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。 醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。 铬酸避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。 饿酸 几天配制。延长固定时间，脆性增加，对染色不力。1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。 丙酮：酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。
叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。电镜标本中常用作中间脱水剂。 环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。 四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。 环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。 混合固定液 B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理；Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。 Bouin液：结缔组织 鲜明，细胞质比较差。不适宜长期固定（12-24h）。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。 Orth：胚胎，神经，脂肪均可。需在暗处固定24h。 Carnoy液：胞质和胞核，染色体，糖原保存，尼氏体；不能保存脂类。Helly固定液：含有氧化剂和还原剂，临时配制，久置失效。 PFG：肽类抗原固定，用于免疫电镜研究。 PLP和PLPD（含有过碘酸钠） Rossman： Zenker固定液：形态学研究常用固定液。不适宜固定含血量较多的标本，脾肾；对免疫球蛋白效果最好，对病毒包涵体固定也较好。不能用金属容易盛放，也不能用金属镊子夹取组织块。固定后流水冲洗12H，在70%乙醇脱水时加入碘脱汞。PATH染色用该液固定。嗜铬细胞染色；三色染色。 中性缓冲甲醛液：为免疫组化最常用。24h内为宜 中性甲醛液：为最常用的固定液。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则
1.2. Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图表B 1.2 Mssson三色法 图表C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌
1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图表D 4.Weigert间苯二酚法
二、胶原纤维染色法 2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他
3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染） 黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 3.2 Gomori氏银氨液配制法 图表G Gomori氏银氨液配制法
髓鞘染色液(固绿法)
髓鞘染色液(固绿法) 简介： 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。 很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Leagene 髓鞘染色液(固绿法可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义,髓鞘呈深蓝色，脱髓鞘纤维不着色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、固定：采用甲醛钙固定液固定样本。 2、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 3、切片入95%乙醇稍洗。 4、入固绿染色液，37℃恒温箱染色。 5、直接用95%乙醇洗涤。 6、蒸馏水冲洗。 7、入MS 分化液分色。 8、蒸馏水冲洗(如果分色不足，可重复6步骤)。9、常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： 髓鞘 深绿色，横截面呈环状，纵截面呈条索状或鱼骨刺状 脱髓鞘纤维 不着色，横截面呈半环状或不着 编号 名称 DK00063×50ml Storage 试剂(A):甲醛钙固定液250ml RT 避光试剂(B):固绿染色液50ml RT 避光试剂(C):MS 分化液100ml RT 使用说明书 1份
色，呈空白区。 注意事项： 1、分化这一步很关键，应严格控制分化时间，可在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的甲醛钙固定液为佳。 3、切片不宜太厚，应控制在5～7μm以内，否则易出现脱片或过染等现象。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 DC0032Masson三色染色液 DF0111中性福尔马林固定液(10%) DG0005糖原PAS染色液 DH0001改良Lillie-Mayer苏木素染色液 DJ0001普鲁士蓝染色液(核固红法) DK0022尼氏染色液(焦油紫法) NH0043SSC缓冲液(20×,pH7.0) TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
尼氏染色液(Nissol stain,焦油紫法)操作步骤及注意事项
尼氏染色液（Nissol stain,焦油紫法）操作步骤及注意事项 货号：G1430 规格：2×50ml/2×100ml 保存：室温避光保存，有效期6个月。 2×50ml2×100ml保存 尼氏染色液50ml100ml RT，避光 分化液50ml100ml RT 说明书一份 产品简介： 尼氏体或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。通过焦油紫染色，能够很好地显示尼氏体的变化。本产品操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏体、神经元等的染色， 操作步骤(仅供参考)： 1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液后，常规脱水包埋。 2、切片厚5μm，常规脱蜡至水。 3、将切片置于尼氏染色液，并将染缸于56℃温箱浸染1h。 4、去离子水洗去染色液。 5、将切片置于分化液中分化数秒至2min，（需在显微镜下观察至背景接近于无色为止。）
6、无水乙醇迅速脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果: 尼氏体:紫色;背景:无色或浅蓝色. 注意事项： 1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。 2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。 3、石蜡切片厚度可能会影响到染色结果，可以根据组织情况适当增加切片厚度 4、染色后的标本需尽快拍照，同时染色后切片务必避光保存，否则容易褪色。 5、染色实验结果和操作熟练程度相关，建议先做预实验摸索最佳条件。
耐尔蓝染色液(Cain法)
耐尔蓝染色液(Cain 法) 简介： 脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。 Leagene 耐尔蓝染色液(Cain 法)又称硫酸耐尔蓝染色液，可以鉴别组织内的中性脂肪和酸性脂肪(脂肪酸或磷脂等)，如用于动脉粥样硬化灶、急性出血性胰腺炎的脂肪坏死时，该染色液可区分两种脂类。脂肪组织内出现酸性脂肪，即表示有中性脂肪分解。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 组织固定于的Cain 甲醛钙固定液，低温恒冷切片机或半导体制冷切片机切片，切片厚 度8μm 。 2、 切片用蒸馏水水洗后，裱贴于载玻片上。 3、 预热Nile blue 染色液至，切片入预热后的Nile blue 染色液浸染。 4、 取适量的Cain 分化液，按Cain 分化液：蒸馏水=1：3的比例配制Cain 分化工作液。 切片直接用Page 分化工作液分化，直至无余色脱出为止。 5、 蒸馏水稍洗。 6、 甘油明胶封固。 染色结果： 中性脂肪 红色或淡红色 脂肪酸、细胞核 蓝色 复合脂类 深浅不一的紫色 细胞质及其他组织成分 淡蓝色 编号 名称 DL0020 3×50ml Storage 试剂(A): Cain 甲醛钙固定液 250ml RT 避光 试剂(B): Nile blue 染色液 50ml RT 避光 试剂(C): Cain 分化液 50ml RT 使用说明书 1份
第八单元 染色与染料
第八单元染色与染料 第一节染色的概念和目的 用染液对组织(切片)进行处理，使组织中的不同成分被染上相应的颜色或深浅不一，产生不同的折射率，以利于(光学)显微镜观察和分析的过程称为染色 利用染料在组织切片上给与颜色，使其与组织或细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分 未加染色的切片在显微镜下除了能够辨认细胞和细胞核的轮廓以外，看不清楚其他任何结构 即使由于组织内部各种物质的折射指数不同，从光线的明暗上能使我们看到一些组织结构，但也是极其简单而有限的。远远不能满足观察和诊断的要求 我们不仅要通过显微镜视野来看到组织和细胞的形态结构，而且还要通过组织和细胞的形态变化来研究它的发生和发展.因此染色的技术才逐渐发展成为制片过程中的一个重要环节 它较固定、脱水、包埋、切片等步骤远为复杂，理论性强，技术要求严格，已经成为一门独立的科学，它在组织学，病理学等学科中已占有相当的地位 第二节染色的分类 一、一般分类法 通常有常规染色、特殊染色、细胞染色、组织化学染色、免疫组织化学染色和荧光染色等 常规染色通常指病理学常规制片最广泛应用的苏木精-伊红染色法（H-E染色法），又称普通染色法 组织细胞形态结构特点与病变，用常规染色法基本上都可以显示出来，故大多数组织病变用常规染色即可做出诊断或初步诊断 在常规染色的基础上，为了专门显示特殊组织或其物质成分，证明或区分各种组织细胞、病变和物质的特点，可进行相应的特殊染色或其他染色 二、按组织或成分分类 包括结缔组织染色、肌肉组织染色、神经组织染色、脂类染色、糖原染色、粘液染色、色素染色、病理性沉着物染色、病原微生物染色、内分泌细胞染色、脱落细胞染色、核酸染色、酶染色和免疫组织化学染色等 三、按染色方法分类 有切片染色法、蜡带染色法、组织块染色法、大体标本染色法、整体染色法和涂片染色法等 四、按染色的步骤分类 单一染色法:用一种染液只染某种单一成分的染色 （如用铁苏木精染睾丸生殖细胞） 复染色法:用两种不同性质的染然料进行染色 （如H-E染色） 多色染色法:用三种或三种以上不同颜色的染色 （如Mallory氏结缔组织多色染色法） 五、按染料的浓、淡程度和用不用 媒染物分类 有渐进法与后退法、直接法与间接法
尼式染色(中英文对照)
尼式染色 Description: This method is used for the detection of Nissl body in the cytoplasm of neurons on paraformaldehyde fixed frozen or vibratome tissue sections. The Nissl body will be stained purple-blue. This stain is commonly used for identifying the basic neuronal structure in brain or spinal cord tissue. Fixation: 4% paraformaldehyde in 0.1M PB or PBS Section: frozen or vibratome sections at 20-50 um. Solutions and Reagents: 0.1% Cresyl violet solution: Cresyl echt violet (or cresyl violet acetate) --- 0.1 g Distilled water ------------------------------------ 100 ml Add 10 drops (or 0.3 ml) of glacial acetic acid (冰醋酸)just before use and filter. Procedure: 1.Mount frozen or vibratome sections on gelatin coated or positive charged plus slides. Air dry sections or bake slides on slide warmer overnight. 把切片放在用明胶或正电荷处理过的切片上，过夜或烘干。 2.Place slides directly into 1:1 alcohol/chloroform overnight and then rehydrate through 100% and 95 % alcohol to distilled water. DON’T put frozen sections directly to water otherwise they will come off the slides. This is called de-fat step that will reduce background fat staining. 直接放入1；1 乙醇/氯仿过夜，再经过100%----95%乙醇----蒸馏水水化。（不要直接把切片过水，否则会脱片，这步叫去脂，可以减少背景色） 3.Stain in 0.1% cresyl violet solution for 5-10 minutes. Notes: Staining in warmed cresyl violet solution (warm up in 37-50 oC oven) can improve penetration and enhancing even staining. It is particularly beneficial for thicker (30 um) sections. 切片放入0.1%焦油紫染液5-10min，最好放入37-50摄氏度可以增强渗透性使染色更深。30μm的切片最适宜。 4.Rinse quickly in distilled water. Differentiate in 95% ethyl alcohol for 2-30 minutes and check microscopically for best result. 用蒸馏水冲洗，95%乙醇分色2-30min，用显微镜观察看到最好的结果。 5.Dehydrate in 100% alcohol 2x5 min. 用100%乙醇脱水2x5 min 6.Clear in xylene 2x5 min. 用二甲苯透明2x5 min 7.Mount with permanent mounting medium. 用中性树胶封片。 Results: Neuron (Nissl body) -------------------------- pink-violet （粉紫色）
尼氏染色液(甲基紫法)
尼氏染色液(甲基紫法) 介绍: 神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。 Leagene 尼氏染色试剂盒(Nissl Stain ，甲基紫法)主要特点是操作简便、染色稳定、分化时间短，适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。 组成： 自备材料： 1、中性福尔马林溶液 2、显微镜 3、蒸馏水 参考操作(仅供参考)： 1、 固定: 可采用乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液。 2、 组织切片: 石蜡切片 (见注意事项4)。 3、 切片脱蜡入水。 4、 用甲基紫染色液涂片，染色。 编号 名称 DK0021 2×50ml Storage 试剂(A): 甲基紫染色液 50ml RT 避光 试剂(B): Nissl Differentiation 50ml RT 使用说明书 1份
关于病理染色
【病理技术】关于病理染色 导语：随着医学科学不断发展的需要，作为医学基础理论的病理学及其他许多学科对病理学研究的技术方法，目前得到更为广泛的应用，特别是近年来的免疫学、分子生物学技术与病理学技术相结合，使病理学新技术层出不穷，并已逐步开展与应用。 来源：“HAOYISHENG”微信号 染色的作用 染色的作用是为了提高标本各部分在光学显微镜下的分辨率。未经染色的组织切片和细胞涂片不能直接在光学显微镜下观察。即使是显微镜有足够的分辨率和合适的放大倍数，还必须要求标本各部分结构对光的折射率有较显著的差别，方能加以辨认。 生物染料 染料从来源上可分为天然染料（如苏木精、卡红、巴西木精）和人工合成染料；从化学组成上可分为无机染料和有机染料。我们常用的染料主要是人工合成的煤焦油染料，它主要是含主香碳环和杂环的有机化合物。这些有机化合物必须自身具有颜色，同时与被染物质分子间有一定的亲和力方能称为染料。我们知道，染料的颜色和与被染物分子间的亲和力是由染料的分子结构决定的。在染料分子中
有使其产生颜色的发色团和使染料颜色加深的并与被染物质间产生亲和力的助色团。 （一）发色团 使有机分子产生颜色的含有不饱和键的基团称为发色团也称生色团。将发色团引入分子之后可使有机化合物选择性吸收光谱向长波长移动，即从肉眼不可见的紫外光区移向可见光区，从而使分子显色。有机分子中引入发色团有可能使有机化合物显色，但在有机分子中仅仅有发色团并不一定就显示颜色，还要看发色团被引入有机分子后，是否使有机分子形成较大的共轭体系，共轭程度越大颜色越深。有颜色的有机分子必需引入助色团，才能与被染物分子产生亲和力，使被染物着色，因此把有发色团又有助色团的有机化合物称为染料。 （二）助色团 能够使染料分子颜色加深，极性加大，并与被染物质分子间形成亲和力的基团称为助色团。使染料分子与被染物质分子间产生亲和力是助色团最主要的作用。助色团使染料分子色度加深、染料分子极性增强，易离子化。助色团多为极性基因，有的还具有酸碱性，如—OH与苯环相连有弱酸性，—NH2及其取代物具有碱 性，—SO3H具有强酸性，—COOH具有弱酸性，这些基因引入有机分子之后 不仅增强其极性而且与碱或酸成盐，易溶于水并电离成正负离子，促进染料与被染物分子间的结合。 染料的分类 1、天然染料 2、合成染料（又称煤焦油染料） 合成染料都是从煤焦油中提取苯的衍生物。它还可以按其分子中所含论坛最新贴子关于我们本站自1998年成立以来首次改版，从病理技术方面做全做深，新增了病理技术理论知识、病理资讯、病理图库及技术精英等功能。我们的宗旨是传播一种积极的思想,提供一些理论和实践的知识，为朋友们解决一点实际的问题,想您所想的，关心您关心的，希望病理技术
尼氏染色试剂盒(Nissol stain,焦油紫法)使用说明书
尼氏染色试剂盒（Nissol stain,焦油紫法）使用说明书规格：2×50ml/2×100ml 保存：室温避光保存，有效期6个月。 2×50ml2×100ml保存 试剂(A):Cresyl violet stain50ml100ml RT，避光 试剂(B):Nissol Differentiation50ml100ml RT 说明书一份 试剂(A):主要由焦油紫(Cresyl violet)等组成。试剂(B):主要由弱酸、乙醇等组成。 自备材料：1、无水乙醇2、温箱或水浴锅3、酒精灯4、蒸馏水5、显微镜 产品简介： 神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中，细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示，例如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以包括神经元的细胞核和神经胶质。 尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。另外，尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。 焦油紫法尼氏染色操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、
Luxol Fast Blue髓鞘染色液使用说明
Luxol Fast Blue髓鞘染色液使用说明 货号：G3245 有效期：12个月有效。 产品内容： 产品名称规格Storage 试剂(A):Luxol Fast Blue染色液50ml RT避光 试剂(B):Luxol分化液50ml RT 试剂(C):焦油紫染色液50ml RT避光 产品简介： 髓鞘（myelin sheath）是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。 很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义，例如神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 操作步骤（仅供参考）： 1.石蜡切片5～8μm，脱蜡至95%乙醇； 2.入Luxol Fast Blue染色液，室温过夜（冰冻切片染色时间不超过16h）； 3.入95%乙醇洗去多余染色液；
4.蒸馏水冲洗； 5.入Luxol分化液分色15s； 6.入70%乙醇分色30s。 7.水洗，显微镜观察（如果必要，重复分化步骤5-6。），直到灰质和白质轮廓分明。 8.入焦油紫染色液复染30～40s，水洗。 9.用95%、100%乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： 注意事项： 1.分化这一步很关键，应严格控制分化时间，可在镜下观察分化程度。 2.固定液以10%的福尔马林为佳。 3.切片不宜太厚，应控制在8～9μm以内，否则易出现脱片或过染等现象。 4、如室温染色效果不佳或者缩短染色时间，可在56℃下染色。 5、复染液染色水洗后不能用70%乙醇脱水，否则会脱去luxol fast blue的蓝色。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。