减之胶囊对肥胖大鼠减肥降脂作用的实验观察及其机制研究
浙江大学
硕士学位论文
减之胶囊对肥胖大鼠减肥降脂作用的实验观察及其机制研究
姓名：李印彩
申请学位级别：硕士
专业：营养与食品卫生学
指导教师：冯磊
20040501
缩略语
（Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓ）
ＪＺＨｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ减之胶囊
Ｏｒｌｏｒｌｉｓｔａｔ奥利司他
ＴＣｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ总胆固醇
ＴＧｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ甘油三酯
ＨＤＬｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ高密度脂蛋白
ＬＣＡＴｌｅｃｉｔｈｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ卵磷脂胆固醇脂
。酰转移酶
ＬＰＬｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｌｉｐａｓｅ脂蛋白脂酶
ＨＬｈｅｐａｔｉｃｌｉｐａｓｅ肝脂酶
ＬＤＬｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ低密度脂蛋白
ＶＬＤＬｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ极低密度脂蛋白
ＡＰＯａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ载脂蛋白
ＦＦＡｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄ游离脂肪酸
ＢＭＩｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ体重指数
ＬＣＤｌｏｗｃａｌｏｒｉｅｄｉｅｔ低热量饮食
ＶＬＣＤｖｅｒｙｌｏｗｃａｌｏｒｉｅｄｉｅｔ极低热量饮食
ＣＥｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｓｔｅｒ胆固醇脂
ＦＣｆｒｅｅｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ游离胆固醇
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减之胶囊对肥胖大鼠减肥
降脂作用的实验观察及其机制研究
浙江大学医学院
２００１级硕士研究生
导师营养与食品卫生学李印彩
冯磊
中文摘要
目的：研究中药复方制剂减之胶囊对肥胖大鼠的减肥降脂作用及其作用机制。
方法：１．肥胖大鼠模型的建立：雄性ｓＤ大鼠９０只，５０９－７０９，按体重随机分为模型对照组（１０只），每日喂饲普通饲料；造模组（８０只），每日喂饲高脂饲料。两组大鼠每日饮食量相同，自由饮水，每两周称体重一次，持续８周。根据造模组大鼠体重比对照组大鼠体重增加２０％作为肥胖大鼠，共选出７５只肥胖大鼠。
２．减肥实验：将７５只造模成功的肥胖大鼠按体莺和血清胆固醇随机分成五组，每组１５只。第一组为空白对照组（ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，Ｃｏｎ）．每只２ｍｌ／ｄ蒸馏水灌胃：第二二组为阳性对照组（Ｏｒｌｉｓｔａｔｇｒｏｕｐ，Ｏｒｌ），给与奥利司他６０ｒａｇ?ｋ分Ｉ．ｄ４灌胃；其余三组为实验组：低剂量实验组（１０ｗ—ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ?ＪＺＨｌ）ｔ中剂量实验组（ｍｅｄｉｕｍ．ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ。ＪＺＨ２），高剂量实验组（ｈｉｇｈ－ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ．ＪＺＨ３）．分别以减之胶囊１６５ｍｇ－ｋｇｑ．ｄ．‘、２５０ｍｇ?ｋｇｑ?ｄ～、３３０ｍｇｒｋｇ＂１．ｄ。灌胃，减肥实验共４０天，在减肥实验过程中，继续给予高脂饲料喂饲。其间每十天称体重一次；分别在减肥实验前，减肥实验第２０天和第４０天经尾部抽取各组大鼠血液，测定血清甘油三酯，胆固醇和高密度脂蛋白的浓度，减肥实验第４０天同时测定空腹血清卵磷脂胆固醇酯酰转移酶（ＬＣＡＴ），脂蛋白腊酶（ＬＰＬ），肝脂酶（ＨＬ）活性；实验结束前用乙醚麻醉，测量体长和尾长，计算Ｌｅｅｓ指数；在末次给药后“小时颈动脉放血致死，
２
取腹部，肾周围及生殖器周围脂肪组织称重．其中生殖器周围脂肪组织经固定制片后，观察
脂肪细胞的大小和数目。
３．减之胶囊在体外对脂肪酶的抑制作用实验研究：
脂肪酶活性测定：取０．１ｍｌ生理盐水?０．１ｍｌ脂肪酶液［［Ｌｉｐａｓｅ］。。Ⅲ：４７．５６Ｕ／ｍ１］，加
３７℃橄榄油乳剂３ｒｏｔ混合，立即置于紫外分光光度计３４０ｎｒｎ测定吸收值，连续记录
ｌＯｍｉｎ，２０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，４０ｍｉｎ，５０ｒａｉｎ，６０ｍｉｎ的吸光度。同法测量０．１ｍｌ减之胶囊（Ｏ．１ｍｇ／ｍ１），０．１ｍｌ
脂肪酶液，加橄榄油３ｍｌ时的酶活性，
不同剂量减之胶囊对脂肪酶活性影响：配制六个不同剂量的减之胶囊（ｍｇ／ｍ１）：０、ｏ．０５、
０．１、０．１５、０．２、Ｏ．２５。测量不同剂量减之胶囊对脂肪酶活性的影响，方法如下：将不同剂蹙
减之胶囊Ｏ．１ｍ１分别与０。ｌｍｌ脂肪酶液【［Ｌｉｐａｓｅｌ。。一７．５６Ｕｔｍｌ］，橄榄油乳剂３ｍｌ在３７＂（２条件
下保温４０分钟，在紫外分光光度计３４０ｈｍ处测定吸收值。
结果：
１．减之胶囊对肥胖大鼠体重的影响：减肥实验开始时，各组大鼠体重无明显区别，相
互比较无显著差异性（Ｐ＞０．０５）。减肥实验第２０天和第３０天，实验组大鼠体重明显低于空
白对照组，相互比较有差异显著性（Ｐ锄．０５），与阳性对照组比较无显著性差异（Ｐ）Ｏ。０５）。
实验第４０天．低剂量实验组和中剂量实验组大鼠体重明显低于空白对照组，相互比较有差
异显著性（Ｐ＜ｏ．０５），与阳性对照组比较无显著性差异（Ｐ＞ｏ．０５）：高剂量实验组的大鼠体重
更明显低于空白对照组，两者比较有差异显著性（Ｐ＜ｏ，０１）：高剂量实验组的大鼠体重也明
显低于低、中剂量实验组，相互比较有差异显著性（Ｐ（ｏ．０５），与阳性对照组比较也有差异
显著性（Ｐ＜Ｏ．０５）。
２．减之胶囊对肥胖大鼠内脏腊肪组织重量的影响：低、中、高剂量实验组的腹脂、肾
周脂、生殖器周围脂肪的熏量均明显低于空白对照组，相互比较有差异显著性（Ｐ＜ｏ．０５），
与阳性对照组比较无显著差异性（Ｐ＞０，０５）；实验组各组问无差异显著性（Ｐ＞Ｏ．０５）。
３．减之胶囊对肥胖大鼠Ｌｅｅｓ指鼓的影响：各实验组的Ｌｅｅｓ指数均明显低于空白对照
组，两者比较有显著差异性（Ｐ＜０．０５），与阳性对照组比较无显著差异性。其中高剂量实验
组与空白对照组的差异更大（Ｐ＜０．０５）。实验组各组问无差异性（Ｐ＞０．０５）。
４．ＭＹ－胶囊对肥脖大鼠鹰肪组织形态的影响：实验各组的脂肪细胞蛊径均明显交小，
与空白对照组比较，有显著性差异（Ｐ曲．０５），与阳性对照组比较无差异显著性（Ｐ＞ｏ．０５），
不同剂量的减之胶囊对脂肪细胞大小影响不明显（Ｐ加．０５）。各实验组脂肪细胞数目（每高
．３
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倍视野）明显较空白对照组多。相互比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），与阳性对照组比较无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５），实验组组闻比较无明显差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。
５．减之胶囊对肥胖大鼠血清胆固醇（ＴＣ）、血清甘油三醋（ＴＧ）、血清高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的影响：减肥实验开始时．各组大鼠血清胆固醇（ＴＣ）浓度无明显差异（Ｐ＞０．０５）。实验结束时（第４０天）减之胶囊实验组大鼠血清胆固醇（１℃）明显低于空白对照组，相互比较差别有显著性（Ｐ＜０．０５）；减肥实验开始时，各组大鼠血清甘油三酯（ＴＧ）浓度无明显差异（Ｐ＞０．０５），实验中期（２０天）和实验结束时（４０），实验组和阳性对照组大鼠血清甘油三酯（ＴＧ）浓度明显低于空白对照组，相互比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。减肥实验开始和结束时，各组大鼠血清高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的浓度无明显差异（Ｐ＞ｏ．０５）。
６．减之胶囊对肥胖大鼠血清卵磷脂胆固醇醢酰转移酶（ＬＣＡＴ）、脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）、肝脂酶（ＨＬ）的影响：血清卵磷脂胆固醇酯酰转移酶（ＬＣＡＴ）的活力：本实验测定结果表明，空白对照组和低、中、高剂量实验组各组间血清ＬＣＡＴ均未见明显差异（Ｐ＞０．０５）；血清脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）活力；减肥实验开始时．空白对照组和实验各组间血清ＬＰＬ活力无明显差异（Ｐ＞ｏ．０５），给与减之胶囊柏天后，实验各组与空白对照组相比有显著性差异（Ｐ如．０５）。血清肝脂酶（ＨＬ）活力：减肥实验开始时，空白对照组和实验各组间血清ＨＬ活力比较无统计学差异，给与减之胶囊４０天后，实验各组与空白对照组相比有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。
７．减之胶囊在体外对脂肪酶的抑制作用实验的研究：本实验结果表明，空白对照组是一标准的单酶单底物酶促反应时间曲线。０ｍｉｎ．３０ｍｉｎ呈陡峭的直线上升，逆反应较少；３０ｍｉｎ．４０ｍｉｎ上升趋缓，逆反应速度渐大：４０ｍｉｎ－６０ｍｉｎ达到反应平衡。减之胶囊组的酶促反应时间曲线表明，脂肪酶的活力较空白对照组明显降低，相互比较有显著统计学意义（Ｐ＜ｏ．０５），减之胶囊组的酶促反应液也是在４０分钟时达到最高峰（酶促反应达到平衡）。不同荆嚣减之胶囊对脂肪酶的活力的影响：减之胶囊剂量小于Ｏ．０５ｒａｇ／ｍ！时，几乎对脂肪酶的活力无影响：０．０５—０．１５ｍｇ／ｍｌ时，脂肪酶的活力下降很明显，呈一斜线下降：０．１５?０．２５ｍｇ／ｍｌ时，又呈一平行线，说明再增加中药剂量脂肪酶的活力无改变。
结论：
１．减之胶囊对肥胖大鼠有明显的减肥作用。
２．减之胶囊可使肥胖大鼠的内脏月％肪重量明显减轻，ｋｅｓ指数下降。
３．减之胶囊可降低肥胖大鼠血清甘油三酯（１ｂ）和血清胆固醇（ＴＣ）的浓度．同时减之胶囊可增强血清脂蛋白腊酶（ＬＰＬ）、肝脂酶（ＨＬ）的活力．
４
４．体外实验表明，减之胶囊可明显抑制脂肪酶的活性。
【关键词】减之胶囊：肥胖：大鼠：减肥机制
５
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塑翌查堂堕主堂些丝奎
ＳｔｕｄｉｅｓＯＨｔｈｅＡｎｔｉ－ｏｂｅｓｉｔｙＥｆｆｅｃｔａｎｄＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆ
ＪｉａｎｚｈｉＣａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅＯｂｅｓｅＲａｔｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＨｉｇｈＦａｔＤｉｅｔ
Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ：Ｌｉｙｉｎｃａｉ
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｆｅｎｇｌｅｔ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏａｓｓｅｓｓｔｈｅａｎｔｉ－ｏｂｅｓｉｔｙｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉ曲ｆａｔｄｉｅｔ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｏｂｅｓｉｔｙｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔ．ＭａｌｅＳＤｓｔｒａｉｎｒａｔｓ（５０９－７０９），ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（１０ｒａｔｓ）ａｎｄｍｏｄｅｌｇｒｏｕｇｇＯｒａｔｓ），ｂｅｉｎｇｇｉｖｅｎｎｏｒｍａｌｄｉｅｔａｎｄｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ．ＥａｃｈｒａｔｈａｄｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｏｆｄｉｅｔｐｅｒｄａｙａｎｄＷａｓｗｅｉｇｈｅｄｅｖｅｒｙｔｗｏｗｅｅｋｓ．
Ａｆｔｅｒｔｈｅｍｏｄｅｌｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ，ｔｈｅｙＷｅｌ＇ｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ：ｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｃｏｎ），ｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｏｒｌ），ｔｈｅｌｏｗ－ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ（ＪＺＨｌ），ｔｈｅｍｅｄｉｕｍ－ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ（ＪｚＨ２），ｔｈｅｈｉｇｈ‘ｄｏｓａｇｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ（ＪＺＨ３）（１５ｒａｔｓｐｅｒｇｒｏｕｐ）．ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｗｉｔｈＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓａｔｔｈｅｄｏｓａｇｅｓｏｆ１６５ｍｇ－ｋｇ＇ｑｄ’。，２５０ｍｇ－ｋｇ＂ｌａｄ＂‘，３３０ｍｇ?．ｋｇ～?ｄ＿ｌ’ｗｈｉｌｅｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｉｔｈＯｒｌｉｓｔａｔａｔｔｈｅｄｏｓａｇｅｏｆ６０ｍｇ－．ｋｇ＇ｋ．ｄ一．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｏｓａｇｅ，ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＪｉａｎｚ．ｈｉｃａｐｓｕｌｅｓａｎｄＯｒｌｉｓｔａｔｏｆ２ｍｌｐｅｒｄａｙｆｏｒｏｎｅ
ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｏｆｄｉｓｔｉｌｌｅｄｗａｔｅｒ．ＴｈｅｒａｔＷＤＳｐｒｅｐａｒｅｄ，ｗｈｉｌｅｔｈｅ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｌａｓｔｅｄ４０ｄａｙｓ．Ｄｕｒｉｎｇｔｈｅｃｏｕｒｓｅ，ｔｈｅｂｏｄｙｗｅＪｉｇｈｔｓｗｅｒｅｍｅ∞ｕｍｄｅｖｅｒｙｔｅｎｄａｙｓ；Ｔｈｅｆａｓｔｂｌｏｏｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ（ＴＣ），ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ（ＴＧ），ｈｉｇｈ－ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｃｉｎ饵ＤＬ），ｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄａｔｔｈｅｂｅｇｉｎｎｉｎｇ（ｔｈｅｅａｒｌｙｓｔａｇｅ），２０ｔｈｄａｙ（ｔｈｅｍｉｄｓｔａｇｅ）ａｎｄ４０ａ＇ｄａｙ（ｔｈｅｌａｔｅｓｔａｇｅ）；Ａｎｄａｔｔｈｅｌａｔｅｓｔａｇｅ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｆａｓｔｂｌｏｏｄｌｅｃｉｔｈｉｎｃｈｏｌｅａｅｍｌａｅｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＬＣＡＴ），ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｌｉｐａｓｅ（ＬＰＬ），ｈｅｐａｔｉｃｌｉｐａｓｅ（ＨＬ）ｗｅｍａｌｓｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ；Ｂｙｔｈｅｅｎｄｏｆｔｈｅｔｅｓｔ，ｔｈｅｒａｔｓｗｅｒｅｋｉｌｌｅｄａｎｄｔｈｅｉｒｆａｔｔｉｓｓｕｅｓｉｎｔｈｅａｂｄｏｍ∞，ｏｎ，ｌｍ－ｉｎｍａｌａｎｄｐｅｆｉ鲈ｎ蹦Ｗｅ，１１ｒｃｍｏｖｏｄａｎｄｗｅｉｇｈｅｄ：Ａｆｔｅｒ
６
ｔｈｅｆａｔｔｉｓｓｕｅｓｉｎｔｈｅｐｅｒｉｇｅｎｉｔａｌｗｅｒｅｆｉｘｅｄａｎｄｓｔａｉｎｅｄ，ｔｈｅｓｉｚｅａｎｄｎｕｍｂｅｒｏｆｔｈｅｉｒｆａｔｃｅｌｌｓｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｉｅｓ．
ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｌｉｐａｓｅｉｎｖｉｔｒｏ：Ｏ．１ｍｌＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｏ．１ｍｌ
ａｎｄｍｅａｓｕｒｅｄｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙａｔｔｈｅｔｉｍｅｏｆ
ｌｉｐａｓｅａｎｄ３ｍｌｏｌｉｖｅｏｉｌｅｍｕｌｓｉｏｎｗｅｒｅｍｉｘｅｄ
ｔＯｍｉｎ，２０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，４０ｍｉｎ，５０ｒａｉｎ，６０ｒａｉｎ．Ａｃｕｒｖｅｏｆｐｒｏｄｕｃｔ－ｔｉｍｅｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄ，Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓｉｘ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓａｇｅｓｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｌｅｖｅｌｏｆｌｉｐａｓｅｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅｄｏｓａｇｅｏｆ
Ｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ（ｍｇ／ｍ１）ｗｅｒｅ：０，０．０５，０．１，０．１５，０，２，０．２５－Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｔｈｅｓａｍｅａｓｔｈｅ
ａｂｏｖｅ．Ａｔｔｈｅｔｉｍｅｏｆ４０ｍｉｎｕｔｅｓ，ｓｉｘｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｉｇｕｒｅｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ：
１．ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ：
ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｗｅｉｇｈｔｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓａｎｄＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｇｒｏｕｐｓ
ｂｅｆｏｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ｐ＞０．０５）．ＡｆｔｅｒｇｉｖｅｎＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｆｏｒ２０ｄａｙｓａｎｄ３０ｄａｙｓ，ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｓ
ｉｎＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｒｅｄｕｃｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ
（Ｐ＜０．０５），ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｏ》Ｏ．０５）．Ａｔｔｈｅｔｉｍｅｏｆ
４０ｄａｙｓ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｗｅｉｇｈｔｓｉｎｔｈｅＪＺＨｌａｎｄＪＺＨ２ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅ
ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ（ｏ．０５），ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ
（Ｐ＞０．０５），ａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｗｅｉｇｈｔｓｉｎｔｈｅＪＺＨ３ｗａｓｏｂｖｉｏｕｓｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈａｎｙｏｔｈｅｒ
ｇｒｏｕｐｆＰ（ｏ。０５）．
２．ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅｗｅｉｇｈｔｓｏｆｆ８ｔｔｉｓｓｕｅｓｉｎｔｈｅａｂｄｏｍｎｏｎ，ｐｅｒｉｒｅｎａｌ，
ｐｅｒｉｇｅｎｉｔａｌｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ：
Ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｓｏｆｆ缸ｔｉｓｓｕｅｓｉｎＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅ
ｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．０５）ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐ（Ｐ＞０．０５）．
３．ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏＢｔｈｅＬｅｅｓＩｎｄｅｘｅｓｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ：
ＴｈｅＬｅｅｓＩｎｄｅｘｅｓｉｎｔｈｅＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆ
ｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐ（Ｐ＞Ｏ．０５），Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｏｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｍｏｎｇｔｈｅｔｅｓｔｇｒｏｕｐｓ．
４．ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｌｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅｓｉｚｅａｎｄｎｕｍｂｅｒｏｆｆａｔｅｃｎｓｉｎｔｈｅｐｅｒｉｇｅｎｉｔａｌ：
Ｔｈｅｓｉｚｅｏｆ缸ｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅＪｉａｎｈｚｉｇｒｏｕｐｓｗ酗ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎ
’
美体瘦身https://www.wendangku.net/doc/a317435912.html,/
ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ如．０５）ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｒＰ＞０．０５）．ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｆａｔｃｅｌｌｓｉｎＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｇｒｏｕｐｓｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｏｓｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ僵．＜０，０５）ｗｈｉｌｅｔｈｅｍｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗｉｔｈｔｈｅＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｆＰ＞Ｏ．０ｓ）．
５。ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｂｌｏｏｄｌｉｐｉｄｓｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ：
（１）Ｔｈｅｂｌｏｏｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐｈａｄ１１０ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｔｔｈｅｂｅｇｉｎｎｉｎｇｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ（Ｐ＞０．０５）．ＡｆｔｅｒｇｉｖｅｎＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｆｏｒ４０ｄａｙｓ，ｔｈｅｃｈｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌｏｆＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓＷａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０，０５）－（２）Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｂｌｏｏｄｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｌｅｖｅｌｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐａｔｔｈｅｂｅｇｉｎｎｉｎｇ（Ｐ＞Ｏ．０５），ｂｕｔａｔｔｈｅｔｉｍｅｏｆ２０血ｄａｙａｎｄ４０“ｄａｙ，ｔｈｅｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｌｅｖｅｌｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｇｒｏｕｐｓａｎｄＯｒｌｉｓｔａｔｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．（Ｐ＜０．０５）．（３）Ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓｈｏｗｅｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｇｒｏｕｐｓ．ｆＰ＞０．０５）．
６．ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｂｌｏｏｄｌｅｃｉｔｈｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＬＣＡＴ），ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｌｉｐａｓｅ（ＬＰＬ），ｈｅｐａｔｉｃｌｉｐａｓｅ（ＨＬ）：
ＬＣＡＴ：ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｇｒｏｕｐｓ；ＬＰＬ：Ａｔ龇
ａｍｏｎｇｔｈｅｇｒｏｕｐｓ，ａｔｔｈｅ４０“ｄａｙｂｅｇｉｎｎｉｎｇｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ
ｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＬＰＬｉｎｔｈｅＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓＷａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；ＨＬ：ＴｈｅｒｅＷａＳｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓａｎｄｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｔｔｈｅｂｅｇｉｎｎｉｎｇｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ａｔｔｈｅ４０ｍｄａｙｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＨＬｉｎｔｈｅＪｉｚｎｚｈｉｇｒｏｕｐｓＷａＳｉｎｃｒｅａｓｅｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ。
７．ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＪｉｎｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｏⅡＬｉｐａｓｅｉｎｖｉｔｒｏ：
Ｔｈｅｓｔｕｄｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓａｓｉｎｇｌｅｅｎｚｙｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｃｕｒｖｅ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｌｅｖｅｌｉｎｔｈｅＪｉａｎｚｈｉｇｒｏｕｐｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｐｒｏｄｕｃｔｏｆｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓＷａＳｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔａｔｔｈｅｔｉｍｅｏｆ４０ｍｉｎｕｔｅｓ．ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓａｇｅｓｏｆＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓＯＨｔｈｅｌｉｐａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ：ｗｈｅｎｔｈｅＪｉａｎｚｈｉ
ｔｈｅｌｉ碑ｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．ＴｈｅＪｉａｎｚｈｉｄｏｓａｇｅｓｗｅｒｅｄｏｓａｇｅｗ笛Ｏ．０５ｍｇ／ｍ１．ｉｔｈａｄａｌｍｏｓｔｎｏｅｆｆｅｃｔｏｎ
０．０５ｍｇ／ｍｌ?０．１５ｍｇ／ｍｌ，ｔｈｅｌｉｐａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｂｅｉｎｇｄｅｃｒｅａｓｅｄｍａｒｋｅｄｌｙ，ａｎｄｔｈｅｄｏｓａｇｅｓｗｅｒｅＯ．１５ｍｇ／ｍｌ－０．２５ｍｇ／ｍｌ，ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｌｉｐａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．
童
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：
１Ｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｍｉｇｈｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔｌｅｖｅｌｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ．
２．ＪｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｃｏｕｌｄｒｅｄｕｃｅｔｈｅｗｅｉｇｈｔｓｏｆｔｈｅｖｉｓｃｅｌｆａｔｔｉｓｓｕｅａｎｄＬｅｅｓｉｎｄｅｘｅｓｉｎｔｈｅ
ｏｂｅｓｅｒａｔｓ．
３．Ｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｂｌｏｏｄｌｅｖｅｌｓｏｆｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ
ｉｎｔｈｅｏｂｅｓｅｒａｔｓ．
４．ＪｉａｎｚＪｌｉｃａｐｓｕｌｅｓｃｏｕｌｄｍａｒｋｅｄｌｙｅｌｅｖａｔｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｂｌｏｏｄＬＰＬ，ＨＬ．
５．Ｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓｍｉｇｈｔｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｌｉｐａｓｅｉｎｖｉｔｒｏ．
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］：Ｊｉａｎｚｈｉｃａｐｓｕｌｅｓ；ｏｂｅｓｅｒａｔｓ；ｌｉｐａｓｅ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．
９
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减之胶囊对肥胖大鼠减肥降脂作用的实验观察及其机制研究
浙江大学医学院
２００１级硕士研究生
导师
Ｈｑ吾营养与食品卫生学李印彩
冯磊
肥胖己成为当今世界最为严重而紧迫的公共卫生问题之一，有人将肥胖，高血压病，高胰岛素血症，高脂血症称为“Ｘ综合症”．也有人将其称为“死亡四重奏”。随着经济的发展，人们生活水平的提高，【。Ｉ近年来全世界肥胖症患者正以每５年增长ｌ倍的趋势日益增多．目前全球至少有肥胖者２．５亿多。新世纪初，国际肥胖症大会发布报告，全世界因肥胖症引起的有关疾病的死亡人数已超过同期全球饿死的人数。Ｂ啊Ｂ胖症是受生物．行为．环境因素共同影响的一种多因素的疾病，当机体经常处于正的能量平衡状态，使能量的获得大于消耗时促迸发胖。它主要表现是体内腊肪积聚过多和（或）分布异常。体重增加。一般用体重指数（ｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ，ＢＭＩ，ＢＭＩ＝体重（ｋｇ），身高（ｍ）２）来表示肥胖程度。在我国，理想的ＢＭＩ值为２１ｋｇ／ｍ２，ＢＭＩ值大于２４则为肥胖。肥胖不仅影响人们的生活质量，而且可引发冠心病，高血压，高血脂，２型糖尿病．某些癌症和其他疾病，对人类健康危害极大。有统计表明，ＢＭＩ每增加１个单位，高血压病的发病危险就增加１０％。从美国麻省的Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍｐ４ｌ得到的数据表明，男子的相对体重减少１０％，则血清葡萄糖下降Ｏ．１４ｍｍｏｌ，ｑ．，，血清胆固醇下降ｏ．２９２ｍｍｏｌ／Ｌ，收缩压下降６，６ｍｍＨｇ，以及血清尿酸下降１９．６ｍｍｏｌ／Ｌ。根据这些数据。估计男性体重每下降１０％，可使冠状动脉疾病的发生率下降２０％。所以．如何有效地防治肥胖是目前营养学研究的热点之一。
目前，对于肥胖症的治疗主要有饮食行为疗法．运动疗法，药物治疗和外科手术。对于大多数肥胖患者来说，减少热能摄入和增加体育运动是远远不够的。常常是停止减肥后体重迅速上升，甚至超过了减肥前的体重。而选择外科手术（常用的有垂直绑扎胃成形术和胃旁路术）又觉得风险太大，不易接受。而早期应用药物治疗可预防并发症的出现，增强患者的
ｌＯ
信心。吲鉴于目前的减肥药的有效性和长期使用的安全性尚未臻理想，因此应根据不同情况
个体化选择治疗方案，同时必须坚持在控制饮食多运动的基础上使用减肥药。现今国际上制
定了统一的减肥原则，即不抑制食欲，不引起腹泻，减轻体重而不减轻体力。因此，制订统
一的疗效标准。寻求高效低毒的减肥药，是今后研究的方向。
中药应用于肥胖症的治疗已经有较久的历史，此方面的研究也随着中药减肥的推广而不
断的深入。从有减肥作用的中药，成药研究，到中药中起减肥作用的主要活性成分研究，以
及减肥作朋机理方面的探索．都有了较为开阔的发展。减之胶囊是由决明子，芦荟，等食ｊ｛ｊ
中药组成。中医认为，【“１决明子性寒，味甘、苦，归肝，大肠经，具“清热明目，润肠通
便”等功效。现代研究表明，决明子的药理作用有降压，降脂，明目，增强免疫功能，导泻，
保肝等作用。其浸取物中含葸酣衍生物．大黄素类，糖．蛋白质，脂肪．甾体化合物等。并
且探明决明子的减肥降脂的主要有效成分是葸醌衍生物。芦荟‘９。“，我国从唐朝开始就记载
了芦荟在医药中的应用情况，随着科学技术的发展。人们对芦荟的认识越来越深刻。研究表
明，芦荟的叶中含有多种营养成分，如芦荟多糖，芦荟酊，芦荟乌辛。芦荟中含有蒽醌类物
质，如芦荟求，异芦荟甙，芦荟大黄素等。芦荟的药用价值已得到全球性的承认和研究，在
治疗疾病和作为保健食品，化妆品上均显示出神奇的疗效和作用。减肥中药方剂是近年来应
用较多的一静治疗方法，它以固定处方的中成药形式出现。药物组成比较全面，故疗效较好，
患者易于接受，容易坚持治疗㈤。如黄昕等自拟减肥降脂茶（枸杞子ｌｏｇ，何首乌，草决明，
山术查各１５９等）治疗肥胖疗效确切。本实验以ｓＤ大鼠为实验对象．探讨中药复方制剂减
之胶囊对肥胖大鼠的减肥作用及其作用机制。
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１．实验动物
实验材料
实验动物为ｓＤ大鼠，雄性，体重５０９－７０９，清洁缓，由浙江省药品检验所实验动物中心提供（台格证号：第２２００１００１６号）。动物饲料由浙江大学实验动物中心提供，执行标准ＧＢｌ２９２４．９４。饲养条件符合浙实动设施标准第２００１００１号的要求。
２．主要仪器
ｌ
ＡＣＳ．６ＥＡＳ型电子称（分度值０．５克）：北京市菲姆斯科技开发公司制造。２Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ电子称（分度值Ｏ．１ｉｎｇ）：塞多利斯仪器公司制造。３电热恒温水浴箱（型号：ＨＨ．Ｗ２１．ＣＵ６００）：上海医疗器械七厂制造。４ＨＩＭＡＣ低温超速离心机，日本ＨＩＴＡＣＨＩ公司制造。５７２１分光光度计：上海第三分析仪器厂制造。６ＵＶ－１６０Ａ紫外可见分光光度计：日本岛津公司制造。
７ＯＬＹＭＰＵＳ显微镜（ＣＨ３０）：日本ＯＬＹＭＰＵＳ公司制造。３．主要试剂
血清游离胆固醇酶法测定试剂盒：购自上海联阳实业有限公司。批号：０２０５０１。血清总脂酶及肝脂酶测定试剂盒：购自南京建成生物工程研究所。批号：０２０７０４。猪胰脂肪酶：批号：０６１Ｋ１２０１，ＳＩＧＭＡ公司出品。三羟甲基氨基甲烷：批号：３ｔ６９Ａ７３。上海生工生物工程有限公司出品。
甘油三酯测定试剂盒：批号：０２０８０５．宁波市慈城生化试剂厂出品。
高密度脂蛋白测定试剂盒（ＨＤＬ），批号：０２０８０５，宁波市慈城生化试剂厂出品。
胆固醇测定试剂盘，批号：０２０８０５。宁波市慈城生化试剂厂出品。
去氧胆酸纳：ＵＳＡ分装，购自中国医药（集团）上海化学试剂公司，批号：Ｆ２００１０５１８。２２
２
２
２
２２
●２３４５６７８
３
３
３
１，３３３３
３，９肝素钠：华美生物工程公司。
３．１０其他试剂均为国产分析纯。
４．主要试剂配制
４．１中药复方制ｊｆ！｜减之胶囊的配制
减之胶囊由海南养生堂药业有限公司提供。按实验要求用蒸馏水配制成相应浓度的溶
液，低温保存。
４．２赛尼克溶液的配制
赛尼克由瑞士巴塞尔豪夫迈罗氏有限公司生产，上海罗氏制药有限公司分装．用蒸馏水
配制成相应的浓度。低温保存。
４．３橄榄油乳剂
（１）三羟甲基氨基甲烷．去氧胆酸缓冲液：
称取三羟甲基氮基甲烷６。Ｏ克，去氧胆酸钠３．０克，加水８００ｍｌ溶解，用Ｉｍｏｌ／Ｌ盐酸调
ＰＨ值至９．１（３７。１２），最后加水至１Ｌ。此液在４－８。Ｃ约可保存６个月。
（２）橄榄油纯化：
吸橄榄油０．０５ｍｌ加入甲基红试剂３．０ｒａｌ，震荡后离心。如甲基红溶液用５０２ｒｉｍ在光径
１０ｍｍ比色皿中吸光度增加Ｏ．０２，说明含较多脂肪酸，应再通过氧化铝柱（应将氧化铝于
４００。Ｃ活化４ｈ君再重新装枉）。
（３）檄榄油乳荆：
先配制１％橄榄油乙醇液（１毫升橄榄油加９９毫升９９％乙醇液即可），另加热三羟甲基
氨基甲烷（ＴＲＩＳ）一去氧胆酸缓冲液ｌＯＯｍｌ至沸腾，取下。在搅拌器搅拌下逐滴加入１％橄
榄油乙醇溶液２．５ｍｌ。继续搅拌至得一均匀乳液，在冰箱中保存，此液橄榄油浓度为
１７０ｔｕｎｏｌ／Ｌｏ
４。４：猪胰脂肪酶：
对底物橄榄油具２０５活力Ｕ／ｍｇ蛋自，ＳＩＧＭＡ公司产品ｔ用时以适量５０ｍｍｏｌ／ｄｍ３黼
缓冲液溶解，３０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｒａｉｎ。置冰箱保存．使用时配制成ｆＬ．１埔ｓｅ】。叫Ｉ＝４７．５６Ｕ／ｍ１．
１３
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实验方法
１．肥胖动物模型的建立及处理
１．１肥胖动物模型的建立及分组
取９０只雄性ｓＤ大鼠，５０９－７０９，按体重随机分为正常对照组（１０只）和造模组（８０只）。正常对照组喂饲普通饲料，造模组喂饲高脂饲料。高脂饲料的配方如下：１０％猪油，１０％蛋黄粉．８０％普通饲料混匀。供给饲料的量为第１，２周内每只大鼠１３９／ｄ克，以后每周增加２９，每天的饲料吃完后不再添加。用上述高脂饲料喂饲断乳大鼠８周后，造模组的大鼠体重和对照组的大鼠体重比较，差异有显著意义。根据造模组大鼠体重比对照组人鼠体重增加２０％作为肥胖大鼠，共选出７５只肥胖大鼠。然后按血清胆固醇和体重随机的原则分为五组（每组１５只），即空白对照组（Ｃｏｎ）．阳性对照组（Ｏｒｌ）．低剂量实验组（ＪＺＨＩ）、中剂量实验组（ＪＺＨ２）和高剂量实验组（ＪＺｌｑ３）。
１．２实验处理
五组大鼠给以同样的高脂饲料喂饲，同时空白对照组以每天２ｍｌ蒸馏水灌胃，阳性对照组以每天６０ｍｇ／ｋｇ奥利司他灌胃，低、中和高剂量实验组以每天１６５ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３３０ｍｇ／ｋｇ减之胶囊灌胃，连续４０天。其间每十天称体重一次；分别于减肥实验前，第２０天，第４０天将禁食１２小时大鼠断尾取静脉血液．制备血清，测定血清总胆固醇（ＴＣ），甘油三酯（ＴＧ），高密度脂蛋白（ＨＤＬ），实验第４０天同时测定禁食１２小时后血清卵磷脂胆固醇酯酰转移酶（ＬＣＡＴ），脂蛋白脂酶（ＬＰＬ），肝脂酶（ＨＬ）活力。在末次给药后２４小时颈动脉放血致死，取腹部，肾周围及生殖器周围脂肪组织称重；在处死前，用乙醚麻醉，测量其体长，尾长，计算Ｌｅｅｓ指数：各组生殖器周围脂肪组织经固定制片后，石蜡切片，在显微镜下观察脂肪细胞的大小和数目。
２．观察指标，原理及方法
２．１血清总胆固醇（ＴｏｔａｌＣｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＴＣ）：
采用胆固醇测定试剂盒。于减肥实验开始时，及实验第２０天，４０天．分别采集空腹血
液，及时分离血清。
方法原理：
胆固酵酯和水在胆固醇酯酶的作用。卜＿，生成游离胆固醇和脂肪酸；游离胆固醇和０２在
胆同醇氧化酶的作用下生成胆甾烯酮和Ｈ２０２；两分子Ｈ２０２和４一氨基安替比林和４－氯酚在过
氧化物酶的作用下生成红色的苯醌亚胺。５００ｎｍ处测定生成物红色醌亚胺的吸光度。
操作步骤
按试剂盒测定步骤进行，具体操作如。ｐ
混匀，置３７‘Ｃ水浴１０分钟，５００ｎｍ波长空白管调零，读取测定管和标准管的Ａ值。
按下式计算总胆固醇的浓度：
测定管Ａ／标准管Ａ×标准管含量＝Ｔ－Ｃｍｍｏｌ／Ｌ（ｍｇ／ｄ１）
２．２血清甘油三酯（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）：
采用甘油三酯测定试剂盒。于减肥实验开始时，及实验第２０天，４０天，分别采集空腹
血液，及时分离血清。
原理：
甘油三酯和三分子Ｈ２０在ＬＰＬ的作用下，生成甘油和３脂肪酸；甘油和ＡＴＰ在ＧＫ的
作用下生成３．磷酸甘油和ＡＤＰ；３－磷酸甘油、２Ｈ２０、０２在ＧＰＯ作用下生成２Ｈ２０２和磷酸
二羟丙酮；２Ｈ２０２、４－ＡＡＰ、４－氯酚在ＰＯＤ作用下生成红色的苯醌亚胺。５００ｎｔｏ处测定生成
物红色苯醌亚胺的吸光度。
１５
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混匀，置３７。Ｃ水浴１０分钟，５００ｒｉｍ波长空白管调零，读取测定管和标准管的Ａ值。按下式计算甘油三酯的浓度：
（测定管Ａ／标准管Ａ）×２．２６＝ＴＧｍｍｏｌ／Ｌ
２．３血清高密度脂蛋白（ＨｉｇｈＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＤＬ）：
采用高密度脂蛋白测定试剂盒。于减肥实验开始时，及实验第２０天，４０天，分别采集空腹血清测定。
方法原理：
用磷钨酸．镁选择性沉淀血清中的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白，上层液中的高密度脂蛋白用ＣＯＤ．ＰＡＰ法测定。
测定方法：
高密度脂蛋白的分离：血清０．２ｍｌ加分离剂０．２ｍｌ，混匀，置室温ｌＯ分钟１５００ｘｇ离心１０分钟，上层血清供测定。
分离后的胆固醇测定：
按试剂盒测定步骤进行，具体操作如下：
摇匀．置３７。Ｃ水浴１０分钟，５００ｈｍ波长，以空白管校零，分别测定各管的Ａ值，按
１６
下式计算：
（测定管Ａ／标准管Ａ）×标准管含量＝ＨＤＬ．Ｃｍｍｏｌ／Ｌ
２．４血清卵磷脂胆固醇腊酰基转移酶（ＬｅｃｉｔｈｉｎＣｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＡｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ．
ＬＣＡＴ）铡定
２．４．１原理：采用改良的Ｓｐｅｒｒｙ法——自身底物法（ｔｈｅｓｅｌｆ－ｓｕｂｓｔｒａｔｅｍｅｔｈｏｄ）１１２］。
利Ｊ｝ｊ血清中原有卵磷脂与胆固醇作底物，保温一定时间，由于ＬＣＡＴ的作用，血清中胆固醇
ｌ骆（ｃｈｏｌｅｓｔｃｒｏｌｅｓｔｅｒ，ＣＥ）增加，而游离胆圃醇（ｆｒｅｅｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＦＣ）减少，然后，应用胆固醇氧
化酶使胆固醇氧化，同时产生Ｈ２０２，后者与４一氨基安替比林及苯酚在辣根过氧化物酶作用
下生成红色醌亚胺，在５００ｎｍ处进行比色可测定Ｆｃ含量，以ＦＣ的减少量（即胆固醇酯化
量）表示ＬＣＡＴ活性大小。
２．４．２操作步骤：将大鼠禁食１２小时后，断尾取血，４。Ｃ，３５００ｒｐｍ，离心１５分钟
制备血清，取两份新鲜血清０．１ｍｌ，其中一份置５６ａＣ水浴，另一份置３７６（２水浴。各ｌ小时，
立即分别测定Ｆｃ的含量（ＦＣ测定采用上海联阳实业有限公司生产的试剂盒）［１３－ｔ５］。
２．４．３．计算方法：
ＬＣＡＴ活力：（总ＯＤ值Ｆｃ一反应后ＯＤ值ＦＣ）÷标准ＯＤ值Ｆｃｘ标准Ｆｃ浓度ｘ（总
反应液体积一血浆体积×保温时间）×１０。
＝（ＡＯＤ＋０．１１５）×（１．２９ｘ１０６）×（Ｏ．０３＋０．Ｉ×１）×１０。
单位：ｎｍｏｌＦＣ／ｍ１．ｈ
２．５血清脂蛋白脂酶（ＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＬｉｐａｓｅ，ＬＰＬ）和肝脂酶（ＨｅｐａｔｉｃＬｉｐａｓｅ，
ＨＬｌ的测定
２．５．】一原理：参照改良的Ｋｒａｕｓｓ及Ｂ］ａｃｈｅ的方法【“”ｌ。利用ＬＰＬ及ＨＬ能催化血浆中
甘油三酯水解成甘油和脂肪酸的特性，以脂肪乳剂为底物，在３７℃，ＰＨ８．３的条件下与一定
量肝素后新鲜血浆保温２０分钟．血浆中的ＬＰＬ与ＨＬ可将底物中甘油三酯水解为甘油和游
离月％肪酸（ｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄ，ＦＦＡ），水解释放的ＦＦＡ和铜试剂中ＣＵ＋结合，形成脂肪酸铜盐，
溶于氯仿，显色剂显色，在５５０ｎｍ处比色测定生成的ＦＦＡ的量，即可分别计算出ＬＰＬ和
ＨＬ的活性。
２．５．２样本的处理：大鼠禁食１２小时后，尾静脉注射肝素１５０１Ｕ／ｋｇ体重，３０分钟
后取血，肝素抗凝．４＂Ｃ，３５００ｒｐｍ，离心１５分钟翻备血清?
１７
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生理盐水（ｍＩ）０．１５００ｐｍｏｌ／Ｌ标准应用液（ｍ１）Ｏ．１
血清（ｍ１）一蒸馏水（ｍ１）０．９试剂六抑制剂（ｆｎｌ）一０．１
Ｏ．９
——
０．１
——
０．９
试剂一底物应用液（ｍＩ）１．０１．０１，０ｌ，０—————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一一混匀，３７‘Ｃ水浴２０分钟
试剂二铜试剂（ｍ１）１．０１．０１．０１?０—————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一一试＂女Ｕ－－－抽提液（ｍＩ）４．０４．０４．０４．０
充分混匀抽提２分钟，３５００转份，离心１０分钟，仔细吸去上层蓝色液体及蛋白凝块弃之，吸取下层抽提液２ｍｌ进行显色。
下层抽取液（ｍ１）２．０２．０２，０２．０
试剂四显色剂（“）０．４０．４０．４０?４混匀，静置５分钟，５５０ｎｍ处，Ｉｃｍ光径，空白管调零，将总脂酶和肝脂酶管平行比色，测各管吸光度。
２．５．４表示方法：３７’ｃ每毫升血浆每小时在反应体系中所产生的１微摩尔的游离脂
肪酸ＦＦＡ为１个酶活性单位。
２．５．５计算方法：
总脂酶活性；（测定管ＯＤ值＋标准管ＯＤ值）×标准管ＦＦＡ浓度ｘ（６０分钟＋反应时间）
ｘ（卜反应体积）÷１０００＝（测定管ＯＤ值÷０．３３）ｘ５００ｘ（６０＋２０）。（Ｉ＋０?１）＋ｔ０００
肝脂酶活性：同上
脂蛋白脂酶活性：总脂酶活性－肝脂酶活性
单位：ＩａＥｑＦＦＡ／ｍ１．ｈ
２．６．Ｌｅｅｓ指数的测定
１８
２．６．１操作方法：
处死动物前先在电子称上称量体重，再用乙醚麻醉，方法如下：把乙醚倒入盛有３＿４个
棉球的小烧杯中，然后把大鼠整个头部放进烧杯内，渐渐大鼠被麻醉。先出现兴奋挣扎，然
后出现抑制，身体变软，此时立刻把大鼠放平，仰卧，整个身体摊开，用直尺准确测量体长
（从口鼻至肛门的长度）及尾长。作好记录。
２．６２计算公式：Ｌｅｅｓ指数＝３√体重（ｇ）ｘ１０３／体长（ｅｒａ）。
２．７内脏脂肪组织重量的测定：
麻醉苏醒后，大鼠颈动脉放血，处死。然后打开腹腔，取出内脏，仔细分离大网膜、肾
周围脂肪组织、生殖器周围脂肪组织，用滤纸吸干．在电子称上分别称其重量。
２．８脂肪细胞大小和数目的测定
取生殖器周围的脂肪组织一小块２ｘ２ｃｍ，用１０％福尔马林固定．常规石蜡包埋，切片，
ＨＥ染色，在４００倍显微镜下计数全视野中脂肪细胞的数目，并用禊４微器测量脂肪细胞的大
小。
在１０ｘ４０倍光镜下随机取位置居中处的两视野进行读片计数，并用测微尺测定脂肪细胞
直径，同时根据脂肪细胞的直径大小将其分成三类：（大于１５９ｍ，１１－１５９ｒｎ，小于１ｌｇｍ），
并对其进行分类记数，同时计算每个视野中的细胞数，然后用加权法计算其平均值。
脂肪细胞分为白色脂肪细胞和棕色脂肪细胞。在显微镜下白色脂肪细胞较大，核被挤向
一侧，呈大空泡状；棕色脂肪细胞较小，核位于中央，内有很多小空泡。计算脂肪细胞时，
以白色脂肪细胞为标准。先在低倍镜（４ｘｔ０）下观察脂肪细胞，然后再用高倍镜（１０ｘ４０）
倍计数脂肪细胞和测量脂肪细胞太小。
２．９减之胶囊在体外对脂肪酶的抑制作用实验研究Ｉ”删
原理：脂肪酶（ＥＣ３．１．１．３），系统名称为甘油三酯酰基水解酶，为一组专一性不商的酶，
能水解多种含长链（８—１８碳链）脂肪酸的甘油三酯，两端（ａ位）的脂肪酸较易被水解生成
甘油二酯，进一步又被水解为Ｂ甘油单酯。１３甘油单酯很难被脂肪酶水解，常需先进一步变
构为ａ甘油单酯。脂肪酶只作用于油和永的界面，反应速度和底物乳剂中颗粒大小有关。颗
粒愈小．接触表面积大，反应速度快，而与乳剂中底物浓度高低关系较小。因此，配制一个
均匀而能长期保存底物乳剂是方法中一个很重要而又困难的问题，现在多用去氧腰酸钠为乳
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