一株能抑制罗非鱼源无乳链球菌的反硝化芽孢杆菌的筛选鉴定_刘观斌

硝化、反硝化的计算

分段进水A/O脱氮工艺反硝化速率的测定 王卿卿1，王社平1、2，惠灵灵1，金尚勇1 （1 西安建筑科技大学环境与市政工程学院，陕西西安，710055； 2. 西安市市政设计研究院，陕西西安，710068） 摘要: 采用间歇式反应器对分段进水A/O脱氮工艺中试装置中活性污泥的反硝化速率进行了测定，结果表明：反硝化过程存在三个速率明显不同的阶段，且随着反应时间的延长，反硝化速率逐渐降低。根据实验结果提出了城市污水厂缺氧选择池和生化反应池缺氧区设计计算时反硝化速率、水力停留时间的参考值。 关键词：城市污水；反硝化速率；分段进水A/O脱氮工艺 The Determination of Denitrification Rate of Step-feed A/O Nitrogen Removal Process Wang Qingqing1, Wang Sheping1,2, Hui Lingling1,Jin Shangyong1 (1.School of Environmental and municipal Engineering,Xi,an University of Architecture & Technology , Shanxi Xi,an ,710055 2. Xi,an Municipal Engineering Design and Research Institution , Shanxi Xi,an ,710068) Abstract: The denitrification rate is determined in batch reactor, the results indicated that there are three obvious different denitrification rates stages in the denitrification process, and with the reaction time prolonging, the denitrification rate declined gradually. According to the experimental results, the reference value of the denitrification rate and hydraulic retention time (HRT) are suggested, which is used in designing and calculating the anoxic selecting tank and the bio-reactor anoxic zone of the municipal wastewater treatment plant (MWTP) . Key Words: municipal wastewater, the specific denitrification rate, Step-feed Nitrogen Removal Process. 反硝化速率的测定对于城市污水处理厂生化反应池缺氧区及缺氧选择池的设计具有十分重要的意义。利用测定的反硝化速率，可更加合理的确定生物反应池的水力停留时间，使其既

题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定

分类号： 2011届本科生毕业论文 题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定 Title：Lactic acid streptococcus thermophilus cultured in the separation and identification 系别：化学与生命科学学院 专业：07级生物技术 学生姓名：邵志国 学号：2007090223 指导老师：郭志华 职称：讲师 2011年4月17号

摘要 [目的]从乳酸中将嗜热链球菌分离出并进行鉴定。[方法] 利用MRS培养基将乳酸中的菌种培养，经过革兰氏染色、镜检分离出嗜热链球菌，最后选出7株，对它进行菌落形态的观察。最后对其进行各种理化鉴定。[结果]镜检结果该菌为革兰氏阳性，经过生化鉴定该菌为嗜热链球菌。 关键词：乳酸；嗜热链球菌；分离；鉴定。

ABSTRACT [objective] the streptococcus thermophilus cultured from lactic acid will isolate and evaluations. [method] Use the media will lactic acid bacteria MRS cultivation, and after gram's staining, isolated anti-bma streptococcus thermophilus cultured, finally chosen for it, seven strains colony morphology observation. Finally the various physical and chemical identification. [result] microscopy results this for gram-positive bacteria, after biochemical identified the bacteria for streptococcus thermophilus cultured. Keywords: lactic acid; Streptococcus thermophilus cultured; Depart; appraisal

详解罗非鱼链球菌病

近期，华南地区养殖罗非鱼出现链球菌病，其发病面积之广，危害程度之重很快成为业内关注的焦点，无论是罗非鱼饲料经销商、罗非鱼出口企业还是政府相关部门都表示了高度的重视。目前，受灾各地都在积极找寻治疗方法，期望将损失减至最少。 肝胆病和链球菌病，孰先孰后？ 据业内初步预测，导致今年罗非鱼大面积发生链球菌病的主要因素有四个：今年多数罗非鱼患有不同程度的肝胆综合征，容易引起鱼体抗病力下降，链球菌伺机入侵机体；链球菌病出现由慢性发作转变为急性发作的可能；近期来华南地区高温少雨，水温比往年偏高，水质容易变差，病害有加重和频繁趋势；与较密集的放养密度相关。其中，第一个因素为发病的最主要原因。 对于罗非鱼面临的两大病害肝胆病和链球菌病，部分人认为链球菌病可引发罗非鱼肝胆综合征，一部分人则认为肝胆综合症可引发链球菌病。总的来说，就是有许多人根据经验把二者当作继发性感染，就以上争议和观点看法，笔者采访了大连海事学院鱼类疾病防治专家杜佳垠教授。杜教授介绍：肝胆综合征属于营养性疾病，而链球菌病属于传染性疾病，两者概念不同。罗非鱼感染链球菌病后，会表现出肝损害、脑神经受损及肾脏受损三方面的症状，具体表现是肝呈土黄色，眼球突出甚至脱落，鱼在水里打转，肾脏变成血糊状等。由于罗非鱼链球菌病的病菌直接进入罗非鱼头部，损害其神经，所以病发初期不会出现大量同时死亡，但会持续很长时间。整个养殖过程死亡过程中，发病率可逐渐提高，由0.1%提高到1%。虽然比例较低，但当养殖产量足够多时，死亡数量相应提升也是骇人的，特别是罗非鱼高密度网箱养殖时，每网箱死亡率每天2条~3条上升到每天30条~50条；池塘养殖其死亡率由当初每天10条上升到每天100条~200条。罗非鱼肝胆综合症与饲料的构成及环境有直接的关系，尤其与饲料里B2的缺乏以及环境的恶劣有关，一般情况下肝胆病等营养性疾病不会引起养殖鱼类较大的死亡率，只有传染性疾病才会蔓延如此迅速。准确地说，患上链球病菌的罗非鱼会表现出肝胆病的症状，但不能肯定链球菌病一定由肝胆病引起。因此，将肝胆综合征和链球病菌分个前因后果不科学。当然鱼类疾病的发生和水体环境及自身免疫力有很大的关系。一般在罗非鱼养殖的初期都不会出现传染性疾病，因为初期养殖规模较小，

微生物实验设计-病原性球菌的鉴定

医学微生物学实验设计 姓名：姚淑宝 学号：2010514349 班级：10级临床十一班

病原性球菌的鉴定 姚淑宝 （石河子大学医学院石河子832000） 摘要：球菌是细菌中的一大类，其中对人类有致病性的球菌包括分属葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的一些细菌。本次实验设计以掌握病原性球菌的形态和培养特性，熟悉病原性球菌的分离和鉴定程序为目的。对脓汁中的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌进行鉴别。 一、鉴定思想 本次鉴定试验，先将脓汁标本直接镜检，再分离培养，观察镜下菌体的形态特征以及形成菌落的形态特征确定待测菌的菌属。然后，对可疑菌落纯培养，通过不同生化反应对同一菌属中的不同细菌进行区别。（具体见图1-1） 脓汁标本 直接镜检 分离纯化 葡萄球菌属链球菌属奈瑟菌属 血浆凝固酶试验胆汁溶菌试验麦芽糖发酵试验 图1-1 阴 性 — 白 色 葡 萄 球 菌 阳 性 — 金 黄 色 葡 萄 球 菌 阴 性 — 甲 型 溶 血 性 链 球 菌 阳 性 — 肺 炎 链 球 菌 阴 性 — 淋 病 奈 瑟 菌 阳 性 — 脑 膜 炎 奈 瑟 菌

二、鉴定方法 （一）直接镜检 将脓汁标本涂片进行革兰染色，然后在显微镜下观察细菌菌体的形态、排列、染色性并作出初步诊断。 葡萄球菌属：革兰染色阳性，球形，无芽胞、无鞭毛，呈葡萄串状排列。 链球菌属：革兰染色阳性，球形或椭圆形，无芽胞、无鞭毛，呈链状或成双排列。肺炎链球菌具有荚膜双球的典型形态。 奈瑟菌属：革兰染色阴性，无芽胞、无鞭毛，常成双排列。脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌大多于中性粒细胞内外分布。 通过直接镜检可以确定脓汁标本中细菌的菌属。在确定菌属的基础下再对脓汁标本中的细菌分离纯化，然后挑取可以菌落通过再次涂片染色镜检、致病物质检查、生化反应、血清学鉴定等方法进行菌属内的区别。 （二）分离纯化 用分区划线法将脓汁中的细菌接种在血琼脂平板培养基或巧克力色培养基上并在5%二氧化碳、37℃的条件下培养18~48小时。观察菌落的形态。 葡萄球菌属：在血平板上形成圆形凸起、表面光滑、润湿、边缘整齐、不透明的菌落。形成金黄色、白色和柠檬色脂溶性色素，多数金黄色葡萄球菌菌落周围有β溶血现象。 链球菌属：在血平板上形成灰白色、圆形凸起、半透明或不半透明的细小菌落。不同类群有不同的溶血现象，包括α、β、γ三种。肺炎链球菌在血平板上形成灰白色、略扁平、半透明的细小菌落，菌落周围有α溶血现象。培养时间超过48小时，菌落中央会出现脐状下陷。 奈瑟菌属：脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上，形成无色、圆形、凸起、光滑、透明似露滴状菌落，培养时间超过48小时常死亡。淋病奈瑟菌在巧克力琼脂平板上培养48小时，形成灰白色、圆形、凸起、表面湿润有光泽的细小菌落。 通过在血平板上形成的菌落的不同，可以做出进一步诊断。并可挑取可疑菌落再次镜检，无杂菌后进行纯培养再通过生化反应鉴别。 （三）生化反应 1、血浆凝固酶试验 血浆凝固酶是致病性葡萄球菌产生的，可使含有肝素或枸椽酸钠抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，是判断葡萄球菌致病性的最重要指标。游离凝固酶用试管法检测，结合凝固酶用玻片法测试。通过血浆凝固酶试验可以对葡萄球菌属的纯培养物做出鉴别。 【材料】 被测菌培养物；加抗凝剂的1:2稀释的人或兔血浆；载玻片、接种环、小试管等。 【方法】 试管法：在盛有血浆0.5ml的试管中，接种被测菌培养物，置于温箱内1~4小时后，观

链球菌和葡萄球菌分离鉴定

青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定 姓名： 学院：动物科技学院 班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新 二0一四年四月十二日

链球菌和葡萄球菌分离鉴定 班 2012 指导教师温建新 摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。 关键词：葡萄球菌；链球菌 引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。代表种有金黄色葡萄球菌。白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。致病性菌株能分解甘露醇. 链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高。【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。血琼脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、边缘整齐、直径0.5—0.75mm的细小菌落，不同菌株有不同溶血现象。肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌均产生α溶血环【3】。

猪链球菌病

一、概念 猪链球菌病是由多种不同群的致病性链球菌引起的一种人畜共患的急性、热性传染病。是一种多型性疾病，主要表现为急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、哺乳仔猪下痢和孕猪流产等 二、病原 链球菌(stroptococcus)属于G+ 球菌,种类很多，现已分离出35个菌株，分为32个荚膜型，其中9—14亚型可引起仔猪发病。 生物学性状: （一）形态染色 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。幼龄培养物大多可见到透明质酸形成的荚膜。无芽胞，无鞭毛，革兰氏染色阳性。（但在陈旧培养基或脓液标本中常呈阴性） （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高，普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。最适温度37℃，最适PH7.4～7.6，血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落，不同菌株有不同溶血现象。 (三)、生化反应 能发醇简单的糖类，产酸不产气。一般不分解菊糖，不被胆汗或1%去氧胆酸钠所溶解。这两种特性用来鉴定甲型溶血型链球菌和肺炎球菌。（四）抗原结构 主要有三种： 1．核蛋白抗原:或称P抗原，无特异性，各种链球菌均同，与葡萄球菌有交叉。 2．群特异性抗原：多糖抗原或称C抗原系统族特异性抗原，是细菌壁的组成成份。对人致病的90%属于A族，其次为B族，其它族少见。 3．型特异性抗原：蛋白质抗原或称表面抗M、R、T、S等四种不同性制质的抗原组份，具有型特异性。是链球菌细胞壁的蛋白质抗原，位于C抗原外层，同族链球菌可根据表面抗原不同进行分型，如A族链状菌可据此分为60多型。 （五）分类 1．根据对红细胞的溶血能力 （1）甲型溶血性链球菌（α-Hemolytic streptococcus）,菌落周围有1～2mm宽的草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。这类链球菌亦称草绿色链球菌（Streptococcus viridans）。此类链球菌为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌（β-Hemolytic streptococcus）菌落周围形成一个2～4mm 宽，界限分明、完全透明的溶血环，完全溶血，称乙型溶血或β溶血。这类细菌又称溶血性链球菌(Streptoccus hemolyticus)，致病力强，引起多种疾病。 （3）丙型链球菌（γ-Streptococcus），不产生溶血素，菌落周围无溶血环，故又称不溶血性链球菌(Streptococcus non-hemolytics)，一般不致病。 2．根据抗原结构分类 按C抗原不同可分类A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T 等18个族。对人致病的大多属于A族。A族又称为化脓性链球菌（Pyogenic streptococcus）。 3．根据对氧需求分类又可分为需氧、兼性厌氧和厌氧三大类链球菌。（六）抵抗力

反硝化碳源的选择原则!

我国城市污水普遍存在反硝化碳源不足的问题，碳源不足已成为制约生物脱氮效率的重要因素，污水处理厂选择外加碳源成为必要的手段。 1、脱氮为什么对碳源有需求？ 硝化过程主要由自养微生物完成，亚硝酸菌和硝酸菌都是化能自养菌，硝化过程所需碳源来自CO2-、HCO-等无机碳源；硝化菌的世代期较异养菌长得多，生长繁殖速度缓慢，产率较低，若进水中有机污染物(COD)大大超过氨氮时，异养菌大量繁殖，并在与硝化菌竞争中占优势，逐渐成为优势菌种，从而降低反应器的硝化效率。一般认为处理系统的BOD 负荷小于0.15BOD/(gMLSS.d)时，硝化反应才能正常进行。 反硝化菌利用碳源作为电子供体，NO-和NO-作为电子受体，将NO-、NO-还原成氮气，达到脱氮的效果。当有溶解氧存在时，反硝化菌分解有机物利用分子态氧作为最终电子受体。在

无氧情况时，反硝化菌利用硝态氮和亚硝态氮作为能量的电子受体，O2-作为受氢体生成HO和OH-碱度，有机物作为碳源及电子供体提供能量并被氧化稳定。 硝化、反硝化过程对有机物的存在是矛盾的：自养硝化菌适宜在低碳源环境下生存，在大量有机物存在时，对氧气和营养物质的竞争不如好氧异养菌，致使反应器内异养菌成为优势菌种；而反硝化反应需要有机碳源作为电子供体完成脱氮过程。 2、反硝化碳源的选择原则 1、外加碳源易被微生物降解，易被反硝化菌利用，不存在残留物对后续出水达标造成不利影响的间题； 2、反应速度足够快，确保所投加的碳源尽量在厌、缺氧功能区内耗尽，避免增加后续曝气系统的负担和运行成本；

3、不会对系统内的微生物种群类型和含量造成影响，避免投加碳源前后出现微生物的短暂适应性问题； 4、价格便宜，安全性好，且易于投加、保存和运输，可就近获得。 3、常用反硝化碳源的优缺点 目前市面上常用的碳源：甲醇、乙酸钠、面粉、葡萄糖、生物质碳源等。在使用过程中，需要根据实际工程情况选择合适的碳源。现对各种常用的碳源进行对比，分析各种碳源的优缺点： 1、甲醇 普遍认为甲醇作为外碳源具有运行费用低和污泥产量小的优势，甲醇作为碳源时，C/N〉5时能达到较好效果。

猪放线菌病的病原及鉴别诊断

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/a717515580.html, 猪放线菌病的病原及鉴别诊断 作者：卜秋实 李海洋 来源：《现代畜牧科技》2015年第04期 猪放线菌病是由猪放线菌所引起的一种慢性非接触性传染病。为革兰氏染色阳性、不运动、不形成芽孢、非抗酸性的兼性厌氧菌。菌体呈纤细丝样，有真性分支，故与真菌相似。病原在病灶内常形成菊花形或玫瑰花形的菌块，外观似硫磺颗粒。该病的主要临诊特征为败血症、肺炎、肾炎、关节炎、尿道炎、膀胱炎、输尿管炎等尿道疾病，流产和心内膜炎，患病动物的皮肤、黏膜或其他组织形成明显的肉芽肿或脓肿。 1 病原 猪放线杆菌为小杆菌，革兰氏阳性杆菌，长2～3 m，宽0.3～0.5 m。在组织和培养基上呈丛状或栅栏样，不运动，不形成芽孢，无荚膜。在动物组织中能形成带有辐射状菌丝的颗粒状聚集物，外观似硫磺颗粒，呈灰色、灰黄色或微棕色，大小如别针头状，质地柔软或坚硬。组织压片经革兰氏染色，其中心菌体为紫色，周围辐射状的菌丝呈红色。猪放线杆菌可在麦康凯培养基上生长，在血琼脂上厌氧培养时，该菌生长良好，48h可见到直径2～3mm的菌落，继而长成扁平干燥、灰色、表面不透明、边缘呈锯齿状的大菌落，不太黏稠，呈β溶血。在血清肉汤培养基生长可形成黏稠的沉淀物。猪放线杆菌对外界的抵抗力不强，一般消毒药均可迅速将其杀灭。对青霉素、链霉素、四环素、林可霉素和磺胺类等药物敏感。流行病学患病猪和带菌猪是该病的主要传染源。猪放线杆菌常存在于各种年龄健康猪的扁桃体、口腔和健康母猪的阴道。另外，猪的上呼吸道、消化道和皮肤，污染的土壤、饲料和饮水也存在该菌。猪放线杆菌属于条件性致病菌，主要通过损伤的黏膜或皮肤感染。大部分6月龄或更大的公猪在包皮的憩室部位存在有猪放线菌，可能是在几周龄时猪放线菌就定植在这个部位。新生仔猪、哺乳仔猪和断奶猪常出现临诊发病，而母猪和成年猪发病少见。 2 鉴别诊断 根据临床症状和肺脏的病理变化，可做出初步诊断，确诊需做细菌学检查与病原分离。可用血琼脂平板进行细菌分离培养，观察菌药的溶血现象。 急性咽喉型炭疽。主要侵害颌下、咽后及颈前淋巴结，而肺没有明显的发炎病变。最急性猪肺疫的咽喉部肿胀是咽喉部周围组织及皮下组织的出血性浆液性炎症，肺有急性肺水肿变等病变。涂片用碱性美蓝液染色后镜检，炭疽可见到带红色荚膜的大杆菌，猪肺疫可见到两端浓染的长椭圆形小杆菌。 猪气喘病。患猪主要症状是气喘、咳嗽，体温不高，其全身症状轻微。肺炎病变呈胰样或肉样，界限明显，两侧肺叶病变对称，无化脓或坏死趋向。

污水处理技术中反硝化碳源的选择方法

污水处理技术中反硝化碳源的选择方法 随着国家对废水排放标准的提高，其中总氮排放的要求也进一步提高,尤其一些地区要求市政污水处理厂提标到地表水准四类标准，其中要求总氮小于10PPM，为保证总氮达标排放，通过外加碳源降低污水中总氮的量，成为了目前唯一适用于实践的手段。 一、碳源介绍 目前市面上常用的碳源：甲醇、乙酸、乙酸钠、面粉、葡萄糖、生物质碳源及污泥水解上清液等。在使用过程中，需要根据实际工程情况选择合适的碳源。现对各种常用的碳源进行对比，分析各种碳源的优缺点： 1、甲醇 甲醇作为外碳源具有运行费用低和污泥产量小的优势，在甲醇碳源不足时，存在亚硝酸盐积累的现象。以甲醇为碳源时的反硝化速率比以葡萄糖为碳源时快3倍，其最佳碳氮比（CO D：氨氮）为2.8～3.2 。 但甲醇作为外加碳源时，有以下3点问题需关注： ①甲醇易燃，为甲类危化品，储存和使用均有严格要求。特别是其储存需报当地公安部门备案审批，手续繁琐。 ②微生物对甲醇的响应时间较慢，甲醇并不能被所有微生物利用，当甲醇用于污水处理厂应急投加碳源时效果不佳； ③甲醇具有一定的毒害作用，将甲醇作为长期碳源，对尾水的排放也会造成一定的影响。 2、乙酸钠 乙酸钠的优点在于它能立即响应反硝化过程，可作为水厂应急处置时使用。 乙酸钠由于是小分子有机酸盐的原因，反硝化菌易于利用，脱氮效果是最好的。通过实验发现，碳氮比在4.6时，可以达到稳定的脱氮效果，而且它的水解物为小分子有机物，能容

易被微生物降解，反硝化响应时间快，而且无毒，能作为应急碳源。但是，它价格较贵，产泥率高，对污水厂的污泥处置会带来了一定的压力。 使用乙酸钠要考虑以下3点： ①乙酸钠多为20%、25%、30%的液体，由于当量COD低，运输费用高，不能远距离运输。 ②产泥量大，污泥处理费用增加； ③价格较为昂贵，污水处理厂大规模投加乙酸钠几乎不可能。 3、乙酸 乙酸作为碳源，与乙酸钠类同。但作为工业化产品，用做碳源确实浪费。 但其弊端有四点： ①乙酸为乙类危化品，也是挥发性酸，是大气污染VOC的重要组成部分，环保部门监管多，储存条件要求高。 ②多数污水处理厂远离乙酸厂，运输费用高，不能远距离运输。 ③乙酸代谢后的氢离子有降低出水pH的可能。 ④乙酸价格市场变化大，高价时做碳源价格昂贵，将乙酸应用于污水处理厂的大规模投加几乎不可能。 4、糖类 糖类外加碳源中，以面粉、蔗糖、葡萄糖为主，由于葡萄糖是最简单的糖，所以目前研究比较多。当碳源充足时，以葡萄糖为碳源的最佳碳氮比较甲醇为碳源时高得多，为6∶1～7∶1。碳源对硝氮的比还原速率几乎没有影响，但是对亚硝氮的比积累速率影响较大，在研究中发现只有葡萄糖作为外加碳源时对亚硝氮的比累积速率没有影响。

实验 金黄色葡萄球菌的分离和鉴定

实验题目金黄色葡萄球菌的分离和鉴定 一、实验目的 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害，我们要分离出它们并研究。 二、实验原理 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8um左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1—2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10—15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，V—P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 三、实验材料和设备 1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（13%NaCl）：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠130g，琼脂15g，蒸 馏水1000ml，121℃灭菌20min后倒平板。 肉汤培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min。 甲苯胺兰-DNA平板 2.试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 3.仪器和设备 显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。 四、实验方法 金黄色葡萄球菌的分离： 1.称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，再加入200ul 磺胺类药物，振荡10min，使土样充分混匀。利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。 2.从上述锥形瓶中取5ml上清液放入一只干净的试管中，30℃，200rpm，24h。 3.取培养好的菌液，按梯度稀释法稀释土壤悬液，依次制备成100、1000、10000、100000倍悬液后，分别取200ul涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，置于37℃培养箱中培养24h。利用高盐培养基抑制其他细菌的生长，从而分离金黄色葡萄球菌。 金黄色葡萄球菌的鉴定： 1.菌落形态：菌落较小，较湿，较透明，边缘整齐，隆起。

链球菌病

链球菌病-常见的病原 Sandy Amass and Gottschalk 链球菌感染是复杂的，因为有很多不同的血清型或菌株常存在于猪的扁桃体和鼻腔中。有必要对特殊的可引起明显临床症状的菌株进行流行病学的研究。用于比较同一血清型不同菌株的新的强有力的分子生物学技术将有利于我们了解这种疾病。 几乎所有猪的上呼吸道中都携带链球菌。实际上，链球菌可以看作猪扁桃体和鼻腔中的正常菌群，并且甚至可从健康猪肺脏中分离到。致病菌株并不存在于所有猪体内，因此，从猪的上呼吸道中分离到链球菌，不应该诊断为疾病。一头猪体内可以携带不同血清型的，甚至同一血清型中的不同菌株。 因为很多链球菌菌株的毒力并不知道，有必要对某些引起临床疾病的菌株进行流行病学调查。例如，在大量猪体内或支气管肺炎的纯培养物中分离到的链球菌，只能看作肺脏潜在的病原。 感染的日龄 通常认为，最危险的时期是在5-10周龄之间，每一猪场都有特定的发病时期。 链球菌的水平传播常在断奶后立即发生，此时小猪会打架，通过咬出来的伤口，混合感染性的唾液和血液。但是，在打架的育肥猪舍内也可能因此发生损失，通常在育肥的初期阶段到60千克时发生。 老母猪有可能感染新引进的后备母猪。实际上，母猪通常扮演病原储存宿主的角色。链球菌不仅能够存在于上呼吸道，而且可以存在于生殖道。这是非常重要的，因为有些新生仔猪可以在分娩时感染（垂直传播）。 为什么一窝里仅有部分仔猪受到感染，其它猪没有问题，到现在还没有搞清楚。主要是由于现有设备的敏感性不能进行准确地诊断。最近开发的试验（选择性分离、检测特异血清型DNA的分子试验）将会很快提高我们有关本阶段和以

有关外，影响较大猪发病的因素同样没有弄清。 II型链球菌引起的脑膜脑炎，神经症状、划船样动作、耳直立、眼睛上翻 应激反应刺激的表现 在生产到肥育系统中，临床症状的突然爆发并不说明感染是最近才引进猪场的。有可能细菌在很早以前就存在，而且没有临床症状。 可以认为很多饲养条件能增加疾病爆发的危险性。这些因素包括：过度拥挤、与通风不足（氨气、CO2、灰尘浓度或湿度过高）有关的高温、温度的波动和以不同日龄的猪和粪尿污染严重（仔猪周围和下面）为特征的饲养管理不良等。 在全进全出饲养系统中，因为与其它病原的感染一样，这一系统变化的突然性和严重感染猪与易感仔猪混合，有致病力的链球菌可快速致病。 临床诊断 Lisa Tokach, Steve Henry and Enric Marco 感染日龄和发病症状随猪场不同而不同，但对特定猪场来讲是相对固定的。断奶仔猪的链球菌病通常根据以下一项或更多的临床症状做出初步诊断：急性死亡、脑膜脑炎、发热（40-42°C）和关节炎, 潜伏期极短（＜24小时）。因此，在急性爆发时，最早的症状可能仅仅是发现一头或几头死猪。 有时，链球菌发病不是很快，因此有可能观察到关节炎。有些结局，如在恢复的仔猪可以见到瞎眼和头部姿势异常（容易与中耳感染混淆）。 很少发生于哺乳仔猪

罗非鱼链球菌病的防治

罗非鱼链球菌病的防治 以引起罗非鱼链球菌病的无乳链球菌为对象，利用4种常用消毒剂和5种抗生素药品作对比试验，探究防治链球菌病的最适外泼消毒剂和内服药。 罗非鱼作为世界水产行业最主要的养殖品种之一，具有生长速度快、食性杂、肉质好、营养价值高、繁殖能力强等优点广泛分布于热带亚热带的淡咸水域中。我国沿海地区特别是海南、广东、福建、广西等省份养殖的罗非鱼产量占世界一半以上。 近年来，伴随着罗非鱼养殖面积和养殖密度越来越高，由无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染引起的罗非鱼链球菌病已经成为阻碍我国罗非鱼养殖业健康持续发展的主要因素。特别是自2009年以来罗非鱼“链球菌病”呈现全国暴发的趋势，在每年的高温季节尤其是7-9月份，发病率在50%以上，死亡率最高可达80%以上。 目前罗非鱼“链球菌病”缺乏安全高效的防控措施，虽然使用一定量的抗生素能在某些程度上抑制该病的暴发，但是随着无乳链球菌耐药性的增加，该病存在比较严重的停药反弹的现象。每年由于罗非鱼出口药物残留超标造成罗非鱼出口受阻、国内滞销、鱼价低迷给我国整个罗非鱼产业带来了巨大的经济损失。寻找安全高效的的罗非鱼“链球菌病”防控方法是目前众多水产养殖者急需解决的问题。 一、样品的采集与诊断 2015年10月，在福建省云霄县常山下坂某养殖场暴发罗非鱼“链球菌病”，规格在20cm左右，表现为典型的“链球菌病”症状。患病鱼体表发黑在池边漫游打转，摄食减少，眼球突出浑浊，体表、鳃盖和下颌等处充血出血，尾鳍镶白边，

肝脏、胆囊、脾脏充血肿胀严重时糜烂，肠道和腹腔中充满淡黄色积水，烂鳃并且溃烂部位附着污泥，鳃盖内侧淤血，显微观察发现鳃丝表面有少许车轮虫和指环虫，鳃丝存在坏死灶，鳃小片毛细血管扩张出现充血现象，在鳃丝动脉中发现气泡。 二、病原分离纯化与鉴定 使用70%的酒精棉球对患病鱼体表进行擦拭消毒后进行解剖，用火焰灼烧过的接种环挑取少许肝脏组织于BHI固体培养基上进行划线，37℃培养18h。根据培养结果挑取优势菌落重新进行划线，同样条件培养后在BHI培养基中进行划线纯化。将纯化后的病原菌在BHI液体培养基中37℃，200r/min培养18h后将菌液送往生物公司进行测序后经过比对得知为无乳链球菌。 三、药敏实验 使用4种常用消毒剂和5种抗生素药品作为对比实验，选取福尔马林（有效成分：37%-40%甲醛）、卫捷（有效成分：戊二醛、苯扎溴铵）、绿安（有效成分：月苄三甲氯铵）、金碘（有效成分：聚维酮碘）4种常见消毒药和磺胺嘧啶钠（有效成分：磺胺嘧啶钠）、呋喃西林（有效成分：呋喃西林）、强力泰（有效成分：恩诺沙星）、呼乐芬（有效成分：氟苯尼考）、鱼血安（有效成分：盐酸环丙沙星、盐酸小檗碱）5种抗生素，使用牛津杯法进行药敏实验。 吸取100μL培养后的病原菌液均匀涂布于使用BHI固体培养上，然后吸取双蒸水稀释后的不同消毒药（1%）100μL打入牛津杯中，共做3个平行。 将5种抗生素各称取0.2g溶于50ml双蒸水中，配制成4g/L浓度的溶液。吸取100μL培养后的病原菌液均匀涂布于BHI固体培养基上，吸取100μL相应的抗生素溶液于牛津杯中，连续做3个平行，37℃培养18h后观察抑菌效果。 本实验分离出的罗非鱼链球菌病原菌在4种消毒剂（编号1-4）的对比中，对福尔马林最为敏感，抑菌圈直径在37mm左右，其次是卫捷和绿安，抑菌圈直径在24mm左右，通过3组实验表明金碘对病原菌并不敏感，抑菌效果不明显。 在5种抗生素（编号5-9）的对比实验中发现，病原菌对鱼血安最为敏感，抑菌圈直径为34mm左右，强力泰、呼乐芬次之，抑菌圈直径30mm左右，最后是呋喃西林，抑菌圈直径27mm左右，某些养殖户常用的磺胺嘧啶钠对无乳链球菌没有抑菌效果。 表1 药物抑菌圈大小

病原微生物第9章 球菌习题与答案

第 9章球菌 一、选择题 【A型题】 1．SPA存在于： A．所有的葡萄球菌表面 B．化脓性球菌表面 C．90％以上金黄色葡萄球菌表面 D．表皮葡萄球菌表面 E．产肠毒素的葡萄球菌表面 2．鉴定葡萄球菌致病性的重要指标是： A．产生溶素 B．产生血浆凝固酶 C．产生色素 D．具有SPA E．发酵葡萄糖 3．关于SPA，下列哪一项是错误的? A．为金黄色葡萄球菌表面的蛋白质抗原 B．为所有的葡萄球菌都具有的一种结构 C．能与人类IgG的Fc段结合 D．具有抗吞噬作用 E．与协同凝集相关 4．葡萄球菌引起化脓性炎症，其脓汁黏稠、局限，与下列哪种因素有关? A．溶素 B．杀白细胞素 C．血浆凝固酶 D．透明质酸酶 E．链激酶 5．葡萄球菌溶素对人类有致病作用的主要是： A．a B．β C．γ D．δ E．ε 6．葡萄球菌肠毒素的主要作用是： A．直接损伤肠黏膜细胞，导致腹泻 B．直接损伤胃黏膜细胞，导致呕吐 C．直接毒害中枢神经系统，引起昏迷 D．通过刺激呕吐中枢而导致呕吐 E．直接毒害肠黏膜血管，导致出血性肠炎 7．引起亚急性心内膜炎常见的细菌是： A．甲型溶血性链球菌 B．乙型溶血性链球菌 C．金黄色葡萄球菌 D．肺炎链球菌 E．脑膜炎奈瑟菌 8．各型链球菌中，致病力最强的是： A．甲型溶血性链球菌 B．乙型溶血性链球菌 C．丙型链球菌

D．B群链球菌 E．D群链球菌 9．测定SLO抗体，可协助诊断： A.风湿热 B．肠热症 C．类风湿性关节炎 D．猩红热 E．红斑性狼疮 10．链球菌分类的依据是： A．形态特征 B．菌落特征 C．生化反应 D．溶血性 E．致病性 11．脑脊液离心后取沉淀物涂片染色，镜检发现中性粒细胞内外有革兰阴性双球菌，该病人可诊断为： A．结核性脑膜炎 B．流行性乙型脑炎 C．流行性脑脊髓膜炎(流脑) D．新生隐球菌性脑膜炎 E．脱髓鞘脑脊髓膜炎 12．脑膜炎奈瑟菌主要的致病物质是： A．外毒素 B．内毒素 C．自溶酶 D．溶素 E．杀白细胞素 13．肺炎链球菌致病与否主要依赖于： A．内毒素 B．外毒素 C．侵袭性酶类 D．荚膜 E．芽胞 14．奈瑟菌属包括： A．脑膜炎球菌 B．肺炎球菌 C．白假丝酵母菌 D．新生隐球菌 E．腐生葡萄球菌 15．淋病奈瑟菌的主要致病因素是： A．内毒素 B．外毒素 C．侵袭性酶 D．菌毛 E．荚膜 16．关于流脑的叙述，下列哪一项是错误的? A．主要致病因素为内毒素 B．95％以上由B群脑膜炎球菌引起 C．人类为唯一的传染源 D．主要通过飞沫传播 E．暴发型以儿童为主

计算污水处理反硝化深床滤池运营成本

计算污水处理反硝化深床滤池运营成本 一、反硝化深床滤池工艺特点总结 1、多功能性：反硝化深床滤池一池多用，同步去除 TN、SS、TP 三个水质指标稳定达标，运行可靠，而其它滤池技术功能单一。 2、N TN 低温时稳定达标：根据调查现实运行情况，因国内大部分污水处理厂在冬季低温条件下反硝化不彻底，反硝化深床滤池可对 TN 的稳定达标起到了把关作用，并可应对远期日益严格的 TN 排放标准。 3、工艺灵活性：夏季 TN 如能达标，运行时简单改变工艺运行条件，反硝化深床滤池可灵活转换成深床滤池，可只直接过滤SS，满足SS 稳定达标并可小于5mg/l。 4、投资成本低：因反硝化深床滤池一池多用，污水处理厂总体投资大大节省。 5、运行成本少：反硝化滤池独有的驱氮技术，保证滤池具有最小的碳源消耗和能耗。反冲洗水量小，本技术反冲洗水量一般≤2%，保证≤4%，远小于其他类型滤池的5%-10%，这无疑降低了反冲洗废水的处理成本。 6、反硝化深床滤池终身免维护，无易损易耗件。 二、运行费用 此处选择了广州龙岱贵州地区10000m3/D项目举例计算反硝化滤池运营成本。 滤池的运行费用由四部分组成：

1、反冲洗电费 反冲洗电耗计算：滤池运行周期 24h （按最不利工况计算），每天冲洗 4 格滤池，反冲洗历时：气单独反冲洗 2min + 气水联合反冲洗 10min + 水单独反冲洗 5min 。则气反冲洗时间为 12min/ 每池，计 48min/0.8h ；水反冲洗时间为 15min/ 每池，计 60min/1h 。 驱氮电耗计算：驱氮周期 3h ，每次水反冲 2min 。 2、反硝化脱氮，则碳源投加费用： 冬季低温进水平均TN为35mg/L，设计出水TN为15mg/L，则去除TN 为20mg/l。

罗非鱼链球菌病的防治技巧

罗非鱼链球菌病的防治技巧 近年全国各地都发生罗非鱼链球菌病，尤其是“猪场与鱼塘”配套养殖模式发病率高，给罗非鱼养殖造成了很大经济损失。 罗非鱼链球菌病十分难治：原因之一是感染的链球菌主要寄生在鱼体白细胞内，损伤白细胞，破坏鱼的免疫系统，使罗非鱼抗病力大为下降；原因之二是大多数药物很难进入白细胞内将链球菌杀死，致使一般药物治疗无效。 罗非鱼链球菌病的预防：主要釆用新型生态养殖技术，即在养殖过程中定期使用枯草芽孢杆菌，或加强型芽孢杆菌、降硝除氮灵进行净水解毒和抑制链球菌等致病菌滋生；同时定期使用增氧池底净或除毒底净改良池塘底质；如在高温发病季节再结合定期饲喂一些微生态制剂，效果更好。这是罗非鱼养殖成功的一项重要技术。 罗非鱼链球菌病的治疗：及时采用如下方法冶疗可获得良好效果。 1.水体处理：如塘水混浊发泡，则应适当换水，并选用强力碘或浓戊二醛消毒。但发病死亡高峰期不宜消毒，否则会诱发大量死鱼。此时可泼洒大量的枯草芽孢杆菌或加强型芽孢杆菌进行“以菌抑菌”。 若多次使用过药物治疗且效果差，此时应适当换水并泼洒解毒净水王或鱼虾解毒王，以清除水中残留的药（毒）物及抗应激，同时再选用增氧池底净或池塘解毒宝等进行适当的改底，然后泼洒瘦水型枯草芽孢杆菌或加强型芽孢杆菌稳定水质和抑制病菌滋生。 2.结合特效药饲喂：每天喂2次，连用4-5天为一疗程，每20公斤饲料用量为：链球康1号50g+链球康2号50g+罗非抗病素50g ；控制病情后可改喂：鱼血康（或高效鱼病灵）100克+五黄抗毒先锋（或黄金败毒液）200毫升+罗非抗病素（或免疫多糖1000）50克。 待病情稳定后，若再选用肠胃舒、厌食拖便灵或罗非抗病素按0.1-0.15%拌料定期饲喂，可有效防止疾病复发。

链球菌的分离鉴定及药敏试验

链球菌的分离鉴定及药敏试验 摘要为分离和鉴定疑似链球菌感染病料，该试验采用革兰氏阳性菌选择性培养基进行分离培养，并进行生化试验鉴定及药敏试验。结果表明：6份病料中分离出6株链球菌菌株，根据生化试验鉴定表推断出，有4株为C群，1株为D 群，1株为E群。药敏试验结果表明，先锋必和青霉素对链球菌有较好的抑制作用，此结果为链球菌病的研究和防治提供一定的理论依据。 关键词链球菌；分离鉴定；药敏试验 链球菌（Streptococcus）广泛存在于自然界，水、尘埃、动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等都有存在，大多数不致病。医学上重要的链球菌主要有化脓性链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌、羊链球菌等，有些可致人和动物各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。近段时间，楚雄州部分羊场发生羊急性死亡病例，该试验通过对部分羊场送检的7份病料进行分离鉴定与药敏试验，了解各地羊发病的原因，从而为该病的预防和用药提供一定的理论基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 病料来源。各地送检的疑似链球菌病引起的病变组织，共7份，保存于4 ℃冰箱。 1.1.2 试验试剂。牛心浸液、兔子全血、牛肉浸膏、琼脂粉、血清、蛋白胨、磷酸二氢钠、氯化钠、无水磷酸氢二钠、蒸馏水、乙醇、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钾、酵母金粉、胰胨、L-精氨酸盐盐酸、柠檬酸铁、0.5%酸性复红、精氨酸、马尿酸钠、七叶苷、淀粉酶、甘露醇、乳糖、棉子糖、山梨醇、菊糖、水杨苷、海藻糖、伯胶糖等，均来自于传染病实验室。 1.1.3 培养基。叠氮钠血琼脂、营养琼脂、牛心浸液培养基、马丁肉汤培养基、6.5% NaCl生长培养基、血清糖发酵培养基、精氨酸培养基、3-羟基丁酮培养基、马尿酸盐培养基、七叶苷培养基、葡萄糖培养基、蔗糖培养基、海藻糖培养基等培养基均按照陈天寿《微生物培养基的制造与应用》[1]中的方法配制。 1.1.4 药敏片。青霉素、红霉素、万古霉素、卡那霉素、氟哌酸、先锋必、复方新诺明。 1.2 试验方法 1.2.1 病原分离培养。将病料从横断面剪开，露出新鲜的组织液，在叠氮钠血液培养基上涂抹一点后，做常规划线分离。37 ℃培养24～48 h，挑取可疑菌落做纯培养后，进行生化试验鉴定。

检测肺炎链球菌分布病原分离鉴定和耐药

检测肺炎链球菌分布病原分离鉴定和耐 药 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 肺炎链球菌是一种可以引起人类患病的条件致病菌,该菌属于链球菌科的链球菌属,又称肺炎链球菌。肺炎链球菌主要寄生于人类上呼吸道的口腔鼻咽部,作为正常菌群存在爿:不引起疾病,当机体免疫力下降时,可引起大叶肺炎化脓性脑膜炎中耳炎+心内膜炎等甚至败血症。肺炎链球菌引起的脑膜炎在细菌性脑膜炎中死{:率最高,为19%，是常见的机会致病芮。长期以来,由于肺炎链球菌生存条伺:较高，属兼性厌氧菌,又可产生自溶酶,菌落形态与甲型链球菌相似，因此检测时有误检和漏检现象。近年来,随着分离和鉴定技术的不断完善,对肺炎链球菌的检出卒逐年提高,而且耐药率也逐年上升,这与肺炎链球菌的分离鉴定刀:平及滥用抗生素有关，现将我院检出的肺炎链球苗185株的分布病原分离鉴定及耐药性分析如下： 1临床资料 1.1发病情况标本来源于吉林大学白求恩医学院附属医院，门诊及住患者185株肺炎链球菌阳性标本，年龄最小2岁，最大71岁，

平均年龄37岁，以儿童及老年人居多。其中痰培养108株(58%)，脑脊液培养23抹(1:%)，其他部位脓性分泌物49株(30%)，全部病两均川1—2种厂·谱抗生素治疗，同时配合辅助使用过糖皮质激素。 1.2临床表现及实验室检测患者均有化脓性感染病灶,高热.体温28—40T;白细胞数，12-23×109/L，分类:中性粒细胞60%—90%，有呼吸道症状感染者,咳铁锈包痰或黄色脓性痰，化脓性脑膜炎患者脑脊液呈黄色,潘氏反应(++++)，细胞数，1000×106/L:分类:中性粒细胞80%—90%，葡萄粮降底,1.5mmom/L。 1.3仪器和试剂微生物分析仪为生物梅里埃生产的Vitek-2，乏敏培养基及药敏纸片坫由北京药物技术开发部提供CO2培养箱由上海一恒科技有限公司生产血液分析仪为日本生产的Sysmex-XT-2000全自动血液分析仪生化分析仪为日本生产的AU640 2实验室检查 2.1镜检取纯培养物涂片革兰氏染色及荚膜染色镜检发现:该菌为革兰氏阳性球菌成双排列,呈矛头状,钝端相对,尖端相背,有较宽的荚膜可初步报告找到革兰氏阳性双球菌,疑似肺炎链球菌 2.2荚膜肿胀试验先将痰液置于盐水中洗涤,以除去唾液,脓液或脑脊液可直接进行试验,直接涂片发现有疑似肺炎链球菌时,可将标本少许置于玻片上,加少量未稀释的肺炎链球菌抗血清混匀,再滴加少量美蓝混合,口盖玻片,以油镜检查，若荚膜显著肿大,菌体周围有一无色宽的环状带,菌体无变化,且染成蓝色,此即荚膜肿胀试验阳性,可初