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分子生物学习题集(总).doc

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分子生物学习题集

(2012版)

目录

习题一基因、基因组、基因组学和基因的化学本质 (2)

习题二DNA的复制、重组、损伤、修复以及突变 (7)

习题三DNA转录、逆转录及其转录后加工 (12)

习题四翻译及其后加工 (17)

习题五基因表达的调控 (22)

习题六基因工程以及其他现代分子生物学技术 (27)

习题一基因、基因组、基因组学和基因的化学本质

一、名词解释(每题3分,共15分)

1、SNP

2、satellite DNA

3、annealing

4、RFLP

5、physical map

二、填空题(每空1分,共15分)

1、T m是指DNA热变性时候的熔点,双链DNA中若____含量多,则其T m值高。

2、DNA分子中存在三类核苷酸序列,高度重复序列、中度重复序列和单拷贝序列。tRNA、rRNA以及组蛋白等由__________________编码,而大多数蛋白质由_______________编码。

3、硝酸纤维素膜可结合单链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称为________________印迹法;将DNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称为________________印迹法。

4、蛋白质组是指_________________________________________________________。

5、维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_______________,它由范德华力和疏水作用构成。

6、现在普遍使用的测定DNA一级结构的方法是Sanger提出的_________法。

7、真核生物构成染色质的蛋白质有_________和____________两类。染色质的一级结构为_________,二级结构是________纤维。

8、DNA在酸性溶液中会发生_________,所以DNA应该存放在碱性溶液中;RNA在碱性

溶液中发生______,所以RNA应该存放在酸性溶液中。

9、如果一种DNA溶液的A260/A280<1.6,那么这种DNA样品严重受到_________的污染。

三、判断题(每题1分,共10分)

1、原核细胞和真核细胞的差别之一是前者无染色体结构,后者有染色体结构。()

2、基因组是指某一种生物所具有的全部基因的总称。()

3、真核生物基因的大小通常是外显子的数目和长度决定的。()

4、在所有的真核生物中,内含子的长度和序列是高度保守的。()

5、酵母的基因普遍要比人的基因小,因此,酵母基因组编码的蛋白质普遍要比人基因组编码的蛋白质要小。()

6、在自由的四种核苷酸混合溶液中,任何碱基之间都可以形成氢键而发生配对。()

7、大幅度增加或减少溶液的pH都会导致一种双链DNA的T m下降。()

8、富含GC的DNA双螺旋比富含AT的DNA双螺旋稳定的主要原因是GC碱基对比AT 碱基对多一个氢键。()

9、超螺旋DNA的能量状态总是高于相同序列的松弛型DNA。()

10、用氯化铯梯度超离心纯化质粒DNA时,蛋白质在离心管的最上部,RNA悬浮在中间,而DNA沉在底部。()

四、单项选择题(每题2分,共20分)

1、有关蛋白质组不正确的叙述是()

A、翻译后加工可导致同一个翻译产物形成几种不同的蛋白质

B、蛋白质之间的相互作用可形成组织特异性蛋白质复合物

C、环境因素对一个细胞的蛋白质组无影响

D、一个病态细胞的蛋白质组可能与一个健康细胞的蛋白质组有所不同

2、DNA在细胞核内被包装成30 nm的染色质纤维。在试管里加入某种物质可以人为破坏这种结构(包括10 nm染色质纤维),你认为这种物质是()

A、NaCl

B、辅酶

C、核糖核酸酶

D、ATP

3、序列特异性DNA结合蛋白与DNA结合的主要作用力是()

A、离子键

B、氢键

C、疏水作用

D、范德华力

4、基因组中含有的转座子最多的生物是()

A、细菌

B、噬菌体

C、酵母

D、玉米

5、导致DNA双螺旋具有大沟和小沟的原因是()

A、AT碱基对与GC碱基对的外形不同

B、嘌呤碱基大,形成大沟,而嘧啶碱基小,形成小沟

C、DNA结合蛋白将DNA扭曲成特定的形状

D、两条链上的磷酸核糖骨架不是完全相对称的

6、噬菌体基因组DNA上的碱基发生糖基化和甲基化修饰的主要功能是()

A、促进基因组DNA整合到宿主基因组上

B、保护病毒DNA受到限制性酶的水解

C、有利于核酸正确的排列

D、稳定DNA,防止突变

7、双螺旋DNA具有的典型特征包括()

A、沿着一条链是大沟,另外一条链是小沟

B、碱基对的排列与螺旋轴平行

C、嘌呤碱基和嘧啶碱基的数目相同

D、螺旋的方向总是右手

8、在许多不同物种中,具有高度保守的序列一般是()

A、假基因

B、特定的间隔序列

C、不重要的蛋白质的基因

D、非常重要的蛋白质的基因

9、以下有关染色质的叙述不正确的是()

A、原核生物无染色质结构,真核生物才有染色质结构

B、染色质由DNA、RNA、组蛋白和非组蛋白构成

C、染色质的基本结构单位是核小体

D、组蛋白是一种序列特异性DNA结合蛋白

10、关于一种真核生物的基因组的最佳定义是()

A、这种生物所有的编码蛋白质的基因

B、这种生物细胞核所有的DNA

C、这种生物所有的遗传物质

D、这种生物的单倍体细胞所具有的所有染色体

五、问答题(每题10分,共40分)

1、如果有人在大肠杆菌细胞里发现一种新的蛋白质,它既含有跨膜的结构域,又含有与DNA 结合的结构域,下面显示的是这种蛋白质的部分氨基酸序列:

…Ala-Leu-Phe-Ala-Gly-Ile-Val-Glu-Asn-Ser-Thr-Ala-Asp-Trp-His-Arg-Lys-His-Arg…(1)你认为哪一段氨基酸序列最有可能发现在跨膜的结构域?为什么?

(2)如果进一步的实验证明这种蛋白质并不是一种跨膜蛋白,而是位于细胞质。那么,你认为(1)中所指的氨基酸序列位于蛋白质三维结构的什么部分?

(3)指出这种蛋白质分子中最有可能与DNA结合、发生相互作用的氨基酸序列?为什么?(4)你认为这些氨基酸更可能与碱基还是磷酸核糖骨架相互作用?

(5)何种次级键是蛋白质与DNA之间作用最强的化学键?

2、大肠杆菌DNA的GC含量是0.532(摩尔分数)。

(1)计算大肠杆菌DNA在0.05 mol/L NaCl溶液中的T m。

(2)你认为DNA退火温度是大于、等于还是小于T m?为什么?

(3)嗜热菌能够生存在高达100℃的环境,你认为这一类细菌可以使用哪些手段维持其DNA在高温下仍然处于双螺旋状态。

(4)某些生物喜欢生活在热水之中!例如,某些细菌适宜生活在近乎沸腾的热泉中,如果将它们放在正常的温度下(37℃左右),反而不利于它们的生存。为什么37℃对于适宜生活在95℃下的生物体内的蛋白质的功能是有害的?

3、(1)有人在纯化质粒DNA的时候,由于某种原因将部分纯化的DNA在室温下放在水里面近一个月的时间。等他想到这件事的时候,他可以接着继续纯化还是需要从头来重新纯化?为什么?如果他纯化的是RNA,又该如何处理?

(2)冰冻的乙醇经常被用来沉淀DNA。乙醇温度的重要性何在?它对短的DNA还是长的DNA更加重要?为什么?

4、(1)“生命需要的必需基因的最低数目究竟有多少”一直是科学家感兴趣的问题。迄今为止,最小的生物的基因组来自寄生的支原体,其大小为5×105 bp。试估计这种生物最多需要多少个编码蛋白质的基因。这些蛋白质基因的功能会是什么?如何能够更精确的确定所需要的必需基因的数目?

(2)全基因组序列分析已经导致像大肠杆菌这样的细菌几乎所有的蛋白质基因得以确定。然而,如果要用类似的方法想毫不含糊的确定大多数真核生物基因组编码蛋白质的基因,则非常困难。给出一个原因解释以上现象。

习题二DNA的复制、重组、损伤、修复以及突变

一、名词解释(每题3分,共15分)

1、Okazaki fragment

2、semiconservative replication

3、NER

4、nonsense mutation

5、suppressor mutation

二、填空题(每空1分,共15分)

1、体内DNA复制一般以______为引物,复制的方向总是__________,催化引物合成的酶称为_________。而体外复制DNA通常用人工合成的__________________为引物。

2、DNA甲基化修饰的甲基供体是______________________。原核细胞DNA上被修饰的碱基一般是__,真核细胞的DNA被修饰的碱基通常位于_________内的__。

3、大肠杆菌染色体DNA复制的起始区称为________,酵母染色体DNA复制的起始区称为______,两者均富含____碱基对。

4、大肠杆菌DNA连接酶使用________作为能源,病毒和真核细胞的DNA链接酶则使用______作为能源。用于基因工程的DNA连接酶一般来自_____________。

5、参与大肠杆菌染色体DNA复制的主要聚合酶是_________________,该酶在复制体上组装成不对称的二聚体,分别负责前导链和后随链的合成。

三、判断题(每题1分,共10分)

1、冈崎片段只由DNA组成。()

2、端粒酶带有自己的DNA模板。()

3、细胞内的DNA复制既需要DNA聚合酶,也需要RNA聚合酶。()

4、同源重组和位点特异性重组都形成Holliday中间体结构。()

5、如果HIV是一种DNA病毒,那么治疗的难度将大大降低。()

6、转座重组既可以导致基因的失活,也可以导致基因的激活。()

7、癌症一般发生在人年迈的时候,其主要原因是随着年纪的增大,人体内的抑癌基因逐步失活。()

8、在一个基因的编码区内发生的核苷酸的插入或缺失总是导致移码突变。()

9、一个正在进行双向复制的真核细胞的DNA分子,当两个相邻的复制叉相遇的时候,一个复制叉的前导链总是跟另外一个复制叉的后随链相遇。()

10、DNA损伤的修复机制完全依赖于每一个DNA具有两个拷贝,每一个拷贝分别属于同源染色体中的一个。()

四、单项选择题(每题2分,共20分)

1、原核生物DNA复制不需要()

A、DNA聚合酶Ⅰ

B、DNA解链酶

C、DNA连接酶

D、端粒酶

2、大肠杆菌染色体DNA复制所需要的DNA聚合酶有()

A、DNA聚合酶Ⅰ

B、DNA聚合酶Ⅱ

C、DNA聚合酶Ⅲ

D、DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ

3、DNA连接酶需要被连接的两个DNA片段分别具有()

A、3’-OH和5’-○P

B、5’-OH和3’-○P

C、3’-OH和5’-OH

D、5’-○P和3’-○P

4、端粒酶是一种()

A、依赖于DNA的DNA聚合酶

B、依赖于DNA的RNA聚合酶

C、依赖于RNA的DNA聚合酶

D、依赖于RNA的RNA聚合酶

5、假定一个转座子插入到某一个基因的可读框内,并产生11 bp的靶点重复,当转座子离开以后,留下重复序列,那么,这最终将导致()

A、转换

B、颠换

C、移码突变

D、易位

6、将两段寡脱氧核苷酸片段5’-ACCACGTAACGGA-3’和5’-GTTAC-3’与DNA聚合酶一起加到含有dATP、dGTP、dCTP和dTTP的反应混合物之中,预测反应的终产物被参入的各碱基的比例是()

A、2C:1T

B、1G:1T

C、3G:2T

D、3G:3T:2C

7、如果一个具有放射性的DNA分子在没有放射性标记的dNTP溶液里进行两轮复制,那么得到的四个子代DNA分子的放射性分布是()

A、两股各有一半带有放射性

B、所有都含有放射性

C、两个没有放射性

D、有一个DNA分子的两条链具有放射性

8、细胞内的突变主要发生在()

A、DNA复制

B、DNA修复

C、转录

D、翻译

9、碱基类似物导致DNA发生突变的主要原因是()

A、插入到碱基之间,使DNA发生断裂

B、使C变成T

C、能够与不同的碱基配对

D、促进DNA的脱嘌呤

10、人类基因组比大肠杆菌基因组大700倍左右,然而,人类基因组复制的时间仅比大肠杆菌基因组复制长6~8倍。这是因为()

A、组蛋白的存在提高了人染色体DNA的复制速率

B、人类基因组的GC含量低,两条链更容易解链

C、人基因组的许多序列在复制中直接跳过去,因为只有3%~5%的序列编码蛋白质

D、人染色体DNA上具有多个复制起始区,大肠杆菌只有一个

五、问答题(每题10分,共40分)

1、(1)在使用双脱氧法测定DNA一级结构的时候,如果在反应系统中添加SSB,可以提高DNA的得率,为什么?现在测序使用的酶一般都是耐热的DNA聚合酶,使用这样的DNA 聚合酶有什么好处?

(2)大肠杆菌细胞内的SSB的主要功能是什么?你如何确定它是不是DNA复制的一种必需成分?

2、(1)有人将狗体内的己糖激酶与狼体内的己糖激酶的氨基酸序列进行了比对,结果发现两者完全相同。基于此,你能否认为这两种生物体内的己糖激酶基因从来没有突变过吗?为什么?

(2)有人从使用羟胺诱发的突变中筛选到一种拷贝数极高的质粒,其在大肠杆菌内的拷贝数远高于野生型的质粒,究其原因是DNA复制频率提高了。经过序列分析发现,突变体的质粒在复制起始区周围的一个启动子序列发生了突变。试提出一种机制解释质粒拷贝数增加的现象,同时设计一个实验来证明你的解释。

3、假定你一直在寻找一个具有更高进行性的DNA聚合酶,用于PCR研究。你从几种不同来源的细菌培养物中分别得到了几种DNA聚合酶的粗品,现在要使用长达几千碱基的单链DNA作为模板,测定酶活性。

(1)除了在测活系统中添加DNA模板和DNA聚合酶抽提物以外,还应该加入哪些成分?(2)如果你在粗抽提物中发现了一种具高进行性的DNA聚合酶,需要进一步纯化它。在用不同的引物一模板测定活性以后,你惊奇地发现,如果以短DNA引物/单链环状DNA模板测定活性,进行性不高。但是,如果你以线形的模板启动反应,然后迅速地环化模板,则发现延伸的进行性非常高。对此现象请给予合理的解释。如果你使用上面的环状模板、短的

DNA引物测定活性,则发现在加入无DNA聚合酶的细胞粗抽提物以后,纯化好的DNA聚合酶能像使用线形模板一样,很好地使用环状模板。对此你又如何解释?如何验证你的解释?

(3)你本以为在测活系统中加入大肠杆菌的SSB可能会刺激DNA的合成,但结果不然。然而,如果你加的是T4噬菌体的SSB,则能刺激DNA的合成。另外,在有ATP的情况下加入RecA,结果也能刺激DNA的合成,但如果使用不能水解的ATP类似物代替ATP,则对DNA的合成无刺激。对此,试提出合理的解释。

4、(1)DNA复制起始区一般具有哪些特征?

(2)细菌染色体只有一个复制起始区,而真核细胞染色体具有多个复制起始区,为什么?(3)使用何种方法可以得到一个染色体DNA上的复制起始区序列?

习题三DNA转录、逆转录及其转录后加工

一、名词解释(每题3分,共15分)

1、Pribnow box

2、cis-acting element

3、enhancer

4、core promoter

5、mRNA editing

二、填空题(每空1分,共15分)

1、一个基因的有意义链是指_________,它的序列与mRNA______。

2、大肠杆菌的RNA聚合酶由_________和__因子组成,参与转录起始的是______,而参与延伸的是_________。

3、真核细胞核mRNA前体后加工最重要的三种方式是______、______和______。

4、snRNA即是____________,它的主要功能是参与_____________________________;snoRNA即是_______________,它的主要功能是参与____________________后加工。

5、使用______________方法可以确定原核细胞的启动子序列,使用________________方法可以确定真核细胞基因转录的起始点。

三、判断题(每题1分,共10分)

1、原核生物与真核生物的RNA聚合酶在结构上具有高度的同源性,构成原核生物RNA聚合酶的每一个亚基在真核细胞内都有同源的亚基。()

2、内含子在剪接反应中被切除,所以一种蛋白质的基因如果在内含子内发生突变,一般不会影响到这种蛋白质的功能。()

3、与蛋白质酶不同的是,核酶的活性不受温度的影响。()

4、RNA病毒因为无DNA基因组,所以其生活史省去了从DNA到RNA的过程。()

5、真核细胞mRNA的加帽反应需要GTP。()

6、mRNA的剪接总是产生套索结构。()

7、AAUAAA是真核细胞mRNA的主要加尾信号,该序列在加尾反应完成以后被切除。()

8、多数真核生物mRNA的降解开始于“脱帽”,随后是“去尾”。()

9、mRNA前体上与5’端最近的内含子最有可能先被剪接掉。()

10、既然内含子大都是遗传“垃圾”,所以在RNA剪接的时候不必进行精确的切除。()

四、单项选择题(每题2分,共20分)

1、tRNA基因的转录不需要的转录因子是()

A、TFⅢA

B、TFⅢB

C、TFⅢC

D、TFⅢD

2、在正常的生长条件下,某一细菌基因的启动子的普里布诺框由TCGACT突变成TATACT,由此而引起该基因转录水平发生变化,以下几项描述中正确的是()

A、该基因的转录增加

B、该基因的转录降低

C、该基因不能转录

D、该基因的转录没有变化

3、如果你想设计一种新的抗菌药物,其作用对象是原核细胞的RNA聚合酶,那么,你所设计的药物作用的最佳靶点应该是()

A、α亚基

B、β亚基

C、ω亚基

D、σ因子

4、以下不会出现在一个cDNA克隆中的序列是()

A、加尾信号

B、多腺苷酸尾巴

C、5’-非翻译序列

D、TATA框

5、DNA复制过程中合成RNA引物与细胞内其他RNA的差别在于()

A、T代替U

B、由DNA聚合酶催化

C、只能以DNA-RNA杂交双链形式存在

D、合成的方向是3’→5’

6、真核细胞的TATA框()

A、与-35区一道起作用

B、存在于所有编码蛋白质基因的启动子上

C、将RNA聚合酶定位到启动子上

D、存在于-10区

7、原核细胞内受RNA聚合酶全酶浓度的提高而加速的转录步骤是()

A、封闭的转录起始复合物的形成

B、启动子清空

C、转录延伸

D、转录终止

8、某些发生在RNA聚合酶β亚基上的突变能够阻止依赖于ρ因子的转录终止,你认为下列最有可能在体外恢复依赖于ρ因子的转录终止的条件是()

A、降低转录体系中的ATP浓度

B、降低转录体系中的GTP、CTP和UTP的浓度

C、使用强启动子启动转录

D、在转录系统中加入核糖体

9、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性质是()

A、都需要模板和引物

B、都具有自我校对的活性

C、都需要Mg2+

D、都能够导致DNA发生解链

10、以下属于转录后基因表达调控的机制是()

A、DNA分子上的C发生甲基化修饰

B、转录因子与启动子结合

C、RNA分子上的C脱氨基转变成U

D、基因扩增

五、问答题(每题10分,共40分)

1、(1)如果将由RNA聚合酶Ⅱ催化转录的一个蛋白质的基因让RNA聚合酶Ⅰ或RNA聚合酶Ⅲ来转录,那么,这种蛋白质的mRNA前体还能经历哪些后加工反应?为什么?(2)细菌体内的转录和翻译在时空上是偶联的,但真核生物并没有这样的偶联关系。然而,真核细胞内却有其他的过程与转录偶联,你认为它们是哪些过程?产生这种偶联机制的直接原因是什么?

2、假定枯草杆菌基因组一共具有7300个基因,其中5125个基因在营养型细胞内表达,而在芽孢形成中只有3532个基因表达(假设枯草杆菌的全基因组序列和所有基因的编码序列均已经被确定)。

(1)使用何种技术可以快速确定这5125个在营养型细胞表达的基因和3532个在芽孢形成中表达的基因?

(2)将营养型细胞内表达的基因数和在芽孢形成中表达的基因数相加并非是7300,为什么?

(3)一种枯草杆菌突变体已失去了产生芽孢的能力,只能以营养型细胞生长,你认为哪些基因的突变能产生这种表型?

3、下图显示的是一种细菌的几个相邻的基因结构图谱。基因的名称用带有数字的ORF表示,每一个ORF似乎是一个基因,但还没有得到专门的鉴定。某些ORF后来被证明参与Arg的合成,因此这些基因也用arg来表示,图中弯曲的箭头为转录起始点。图中单纯的数字是基因之间的核苷酸数目。

(1)已有证据表明一种调节蛋白的结合位点与argF的启动子序列重叠。部分证据来自DNA 酶Ⅰ足迹实验,受这种调节蛋白保护的区域有29 nt,从-10区的中间延伸到-35区的上游。试画出导致上升结论的足迹实验的结果,需要同时给出对照实验。

(2)从(1)给出的信息来看,你认为调节蛋白最有可能是激活蛋白还是阻遏蛋白?为什么?

(3)下图显示的是靠近ORF5起点区域的一段RNA序列,这种结构有什么意义?它来自哪一个转录物?

(4)在细菌的培养基中加入Arg,能够提高ORF4的转录。这意味着ORF4编码的蛋白质的功能是什么?ORF4有可能参与合成Arg吗?为什么?

4、(1)有人得到一种哺乳动物的细胞系:它的一个基因的启动子被细菌的强启动子序列(-35区和-10区一致序列)取代,因此,可以被细菌的RNA聚合酶有效识别。然而,当他将带有原核生物转录所有必需成分的质粒(独立的实验证明,这些质粒能够高表达出有功能的蛋白质)导入到上述细胞系的时候,发现这个受原核生物启动子驱动的基因表达的效率很低,最后只产生很少的mRNA。对此现象试提出两种可能的机制给予解释。

(2)在真核细胞内,RNA聚合酶Ⅱ发生磷酸化修饰是基因表达十分重要和关键的一步。试回答:①催化磷酸化的激酶是什么?②磷酸化的具体对象是什么?③磷酸化的主要功能是什么?

习题四翻译及其后加工

一、名词解释(每题3分,共15分)

1、Shine-Dalgarno sequence

2、wobble rule

3、signal hypothesis

4、N-end rule

5、translational frameshift

二、填空题(每空1分,共15分)

1、翻译的时候肽链延伸的方向总是____________,而阅读mRNA模板的方向总是__________。

2、核糖体上与tRNA结合的部位有A、P和E,其中与空载tRNA结合的是__,与起始tRNA 结合的部位是__。

3、翻译的起始密码子通常是______,有时也可以是______。然而,它们都编码______。终止密码子则有_______、______和______。

4、原核生物和真核生物在翻译的时候第一个被参入的氨基酸分别是__________________和____________。

5、原核生物在蛋白质生物合成的时候,参与起始阶段的起始因子有3种,其中与起始tRNA 结合的是______;参与延伸阶段的延伸因子有3种,其中与氨酰-tRNA结合的是__________;终止释放因子有3种,其中能够水解GTP的是______。

三、判断题(每题1分,共10分)

1、通过封闭多肽离开通道起作用的抗生素一定结合在核糖体的小亚基上。()

2、抑制转肽酶活性的抗生素通常与核糖体的大亚基结合。()

3、根据摆动法则,tRNA上的反密码子在第三个位置的核苷酸处于摇摆的位置。()

4、如果将细胞质中的mRNA导入到线粒体基质内翻译,通常得不到有功能的蛋白质产物。()

5、参与糖酵解和糖异生途径的酶都没有信号肽。()

6、甲硫氨酸的密码子只有一个(AUG),但起始密码子可以是AUG,也可以是GUG或UUG。由于GUG和UUG编码的是其他氨基酸,故如果以它们作为起始密码子的话,第一个参入的氨基酸将不再是Met。()

7、密码子第一位碱基发生的突变要比第三位发生的突变的危害要大得多。()

8、催化大肠杆菌其实甲硫氨酰-tRNA合成的氨酰-tRNA合成酶识别的氨基酸是甲酰甲硫氨酸。()

9、核糖体大亚基的主要功能是催化肽键的形成,而小亚基主要是结合mRNA和tRNA。()

10、与tRNA相连的氨基酸本身在决定何种氨基酸参入到正在延伸的肽链上不起任何作用。()

四、单项选择题(每题2分,共20分)

1、不是通过模拟tRNA的结构与核糖体结合的蛋白质是()

A、IF2

B、EF-G

C、RF2

D、eRF2

2、一种新发现的抗生素能够抑制细菌的蛋白质合成。如果将这种抗生素加到以AUGUUUUUUUAG为模板的体外翻译系统之中,则只形成一种二肽产物fMet-Phe。根据以上信息,你认为该抗生素抑制()

A、翻译的起始

B、氨酰-tRNA进入A部位

C、核糖体移位

D、翻译的终止

3、在中度胁迫条件下,细胞内的蛋白质发生变性或去折叠。有助于细胞度过胁迫条件而提高表达或开始表达的基因是()

A、编码糖酵解途径的酶

B、编码分子伴侣

C、编码RNA聚合酶Ⅱ

D、编码核糖体亚基

4、大肠杆菌16S rRNA的3’端序列是5’-CACCUCCUUAOH-3’,那么mRNA分子上的SD 序列是()

A、UCCUU

B、UCCUCC

C、GGAAU

D、AGGAGG

5、嘌呤霉素通过分子模拟抑制翻译,被它模拟的分子是()

A、肽酰-tRNA

B、氨酰-tRNA

C、肽酰转移酶

D、终止释放因子

6、假定一个编码蛋白质(由200个氨基酸组成)的基因由2个外显子和1个内含子组成。以下几种突变中最有可能阻止这种蛋白质不能合成的是()

A、第2个外显子内发生一个插入突变

B、基因的内含子区域缺失5个核苷酸

C、内含子内发生一个碱基置换

D、第2个外显子内发生一个无义突变

7、以下有关翻译进位的叙述正确的是()

A、EF-Tu在结合氨酰-tRNA的时候水解GTP

B、在EF-Tu释放以后,氨酰-tRNA必须旋转,肽键才能形成

C、aa-tRNA-EF-Tu在与EF-T s结合的时候水解GTP

D、EF-Tu能够与EF-G同时与核糖体结合

8、在核糖体上,mRNA的结合部位和转肽酶的活性中心分别位于()

A、两个亚基之间;大亚基

B、两个亚基之间;小亚基

C、大亚基;小亚基

D、小亚基;大亚基

9、在一个真核细胞内,由一种特定的mRNA翻译出来的蛋白质的量部分取决于()

A、DNA甲基化的程度

B、mRNA降解的速率

C、某些转录因子的存在

D、mRNA含有的内含子的数目

10、一种转基因突变细菌有望用于人体疫苗,为了获得FDA的批准,突变的性质需要预先知道,而最重要的是回复突变成野生型的可能性更需要明确。你认为获得FDA批准可能性最低的突变是()

A、点突变

B、插入突变

C、缺失突变

D、染色体重排

五、问答题(每题10分,共40分)

1、(1)原核生物与真核生物在识别起始密码子的机制上有何不同?这种差别与原核生物的mRNA多数是多顺反子及真核生物的mRNA绝大多数是单顺反子有无某种关系?为什么?(2)在大肠杆菌细胞里表达来自嗜热菌的基因现在已经是十分普遍的实验技术。然而,有时表达的效果不错,有时表达得则不理想。Ishida和Oshima在研究中发现,在大肠杆菌细胞里表达量极低的基因在紧靠RBS附近含有回文序列。如果将此序列去除,这些基因的表达量将大大提高。为什么这种回文序列在嗜热菌体内对基因表达不构成问题,但在大肠杆菌却能降低基因翻译的效率?

(3)遗传密码的哪些性质有利于基因从一种生物向另外一种生物的转移(通过基因工程或自然转移)?哪些性质不利于基因从一种生物向另外一种生物的转移?

2、如果你分离到一个病毒的400 nt的DNA片段,它能编码至少两种不同的蛋白质,一个长度是120个氨基酸残基,另一个的长度为80个氨基酸残基。

(1)你认为这种现象普遍吗?

(2)试提出两个模型解释以上现象。

(3)如果你测定这两种蛋白质的氨基酸序列,发现它们无序列同源性,那么,你能排除哪

现代分子生物学_复习笔记完整版.doc

现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学:以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象,从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学:偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程,也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列(核苷酸、氨基酸)的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术(基因工程) ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间:19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一:肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二:噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括: ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑,标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些? ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5~10位获诺贝尔奖的科学家,简要说明其贡献。

(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)

分子生物学试题及答案 一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。 3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。 9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子,弱化子等。 12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、(IF-2)和(IF-3)。 4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、(DNA重组技术)三部分。7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、( T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、 (mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。 9.蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法)、(可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从( S2)开始,无G时转录从( S1)开

分子生物学作业

分子生物学作业 一、名词解释 1.断裂基因 真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区相互间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因成为断裂基因。 2.单核苷酸多态性 单核苷酸多态性是由基因组DNA上的单个碱基的变异引起的DNA 序列多态性。是人群中个体差异最具代表性的DNA多态性,相当一部分还直接或间接与个体的表型差异、对疾病的易感性或抵抗能力、对药物的反应性等相关。单核苷酸多态性被认为是一种能稳定遗传的早期突变。 一、简答题 1.简述真核生物基因组的结构与功能特点。 ①真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于细胞核 内,除配子细胞外,体细胞内基因组是双份的(即双倍体),有两份同源的基因组。 ②真核生物的基因转录产物为单顺反子。即一个结构基因经过转 录生成一个mRNA分子,再翻译生成一条多肽链。 ③真核生物基因组存在重复序列,重复次数可达百万次以上。 ④真核生物基因组中不编码的区域多于编码的区域。 ⑤真核生物的大部分基因都含有内含子,因此,基因是不连续的

(断裂基因)。 ⑥真核生物基因组远远大于原核生物的基因组,具有多复制起始 点,而每个复制子的长度较小。 2.试述双向凝胶电泳技术的基本原理。 双向凝胶电泳技术是指第一向的固相pH梯度等电聚焦电泳与第二向SDS-PAGE组成的分离系统,也称双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,简称2-DE。等电聚焦电泳是基于蛋白质等电点(pI)的差异进行分离,SDS-PAGE则是根据蛋白质分子量(Mw)的不同进行分离。 其中等电聚焦指:在电场中电泳基质形成一个从正极到负极不断增大的PH梯度,由于蛋白质为两性电解质,带负电荷的蛋白质分子向正极移动,待正电荷的蛋白质分子向负极移动,当蛋白质分子运动到各自的PI处时,所带净电荷变为零,于是停止迁移而留在该位置上,这种不同的蛋白质分别聚焦在各自的PI处,形成一条狭窄稳定的区带而彼此分开的现象就称为等电点聚焦。 SDS-PAGE是在PAGE系统中加入SDS和还原剂后所组成的电泳系统。SDS是一种阴离子去垢剂,疏水端能插入蛋白质分子内,破坏蛋白质分子内的氢键及疏水作用,改变蛋白质分子的三级和四级结构;还原剂则断裂蛋白质分子内的二硫键,使蛋白质分子去折叠,结构变得舒展。蛋白质分子与SDS充分结合后,形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物,所带负电荷大大超过蛋白质分子原有的电荷量,消除了不同分子间原有电荷的差异。蛋白质-SDS复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳系统中的迁移率不再与电荷相关,而主

现代分子生物学第六章作业

现代分子生物学第六章作业 09级一班芮世杭222009317011027 1,列举两种研究基因表达模式的方法并简述其原理。 (1)基因表达序列分析技术(SAGE)是一种以DNA序列测定为基础定量分析全基因组表达模式的技术能够直接读出任何一种细胞类型或组织的基因表达信息在转录组水平上,任何长度超过9—10个碱基的核苷酸片段都可能代表一种特异性核苷酸的转录产物,因此,用特定限制性核酸内切酶分离转录产物中具有基因特异性的9—10个碱基的核苷酸序列并制成标签。将这些序列标签连接,克隆,测序后,根据其占总标签数的比例即可分析其对应编码基因的表达频率。 (2)原位杂交技术(ISH)是用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射检测体系,在组织,细胞,间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段,分为RNA和染色体原位杂交两大类。RNA原位杂交用放射性或非放射性标记的特异性探针与被固定的组织切片反应。若细胞中存在与探针互补的mRNA分子,两者杂交产生双链RNA,课通过反射性标记或经酶促免疫显色,对该基因的表达产物做出定性定量分析。 (3)基因芯片技术(FISH)对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记,用原位杂交与靶染色体或DNA上特定的序列结合,再通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的位置。 2,简述基因芯片技术对分子生物学研究的意义。 解某些基因对特定生长发育阶段的重要性;基因芯片还可用于进行基因诊断,可建立正常人特定组织、器官的基因芯片,给出标准杂交信号图。用可疑病人的cDNA做探针与之杂交,检查哪些基因的表达受抑制或激活,另可研究表达基因的生物学特性。 3,比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋白质相互作用方面的优缺点? (1)酵母双杂交技术称Two-hybrid system也叫interaction trap(相互作用陷井),是90年代初发展起来的分离基因的新方法,可用于分离能与已知靶蛋白质(target protein)相互作用的基因。 基本原理: 真核生物的转录因子大多是由两个结构上分开、功能上独立的结构域组成的。如GAL4的N端1-147aa是DNA结合域(BD),其C端768-881aa是转录激活域(AD)。一般情况下,AD能与GAL4效应基因启动子上游的特定DNA区段(UAS)相结合,而此时,AD 则推动了转录起始。 若用基因工程的方法,将GAL4 AD和BD分别克隆到不同的载体上,导入同一细胞株中表达,效应基因无法被激活,但可把来自不同转录因子的AD或BD区域连成一个功能基因。 主要实验过程: a. 选择缺失GAL4编码基因的酵母寄主菌株-SFY526或HF7c; b. 构建带有GAL1 UAS-启动子-lac Z(His3)的转化载体; c. 把已知的靶蛋白质编码基因克隆到pGBT9的多克隆位点上,把所有cDNA都克隆到pGAD424载体上,构成cDNA表达文库。 d. 从大肠杆菌中分别提取这两种重组质粒DNA,共转化感受态酿酒酵母菌株。 e. 将共转化的酵母菌株涂布于缺少Leu,Trp和His的培养基上,筛选表达相互作用的杂种蛋白的阳性菌落。

分子生物学题库

分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序(Motifs) 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉(RNA interference) 15.反义RNA 16.启动子(Promoter) 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域(carboxyl terminal domain,CTD) 19.single nucleotide polymorphism,SNP 20.切口平移(Nick translation) 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体(vector) 38.位点特异性重组 39.原癌基因(oncogene) 40.重叠基因、 41.母源影响基因、

42.抑癌基因(anti-oncogene)、 43.回文序列(palindrome sequence)、 44.熔解温度(melting temperature, Tm) 45.DNA的呼吸作用(DNA respiration) 46..增色效应(hyperchromicity)、 47.C0t曲线(C0t curve)、 48.DNA的C值(C value) 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶(topoisomerase)、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒(telomere) 57.酵母人工染色体(yeast artificial chromosome, YAC)、 58.SSB蛋白(single strand binding protein)、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子(codon)、、 73.同义密码(synonymous codons)、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子(衰减子)(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白(阻遏蛋白)(repressor) 82.诱导物(inducer)、 83.CTD尾(carboxyl-terminal domain ) 84.载体(vector)、 85.转化体(transformant)

现代分子生物学第四章作业【修订版】

现代分子生物学第四章作业(5-13题) 222009317011128 牛旭毅2011.10.15 5,比较原核与真核的核糖体组成? 答:相同点:核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒,可以解离为两个亚基,每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。 不同点:(1)原核生物核糖体由约2/3的RNA及1/3的蛋白质组成。真核生物核糖体中RNA占3/5,蛋白质占2/5。(2)大肠杆菌核糖体小亚基由21种蛋白质组成,分别用S1……S21表示,大亚基由33种蛋白质组成,分别用L1……L33表示。真核生物细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质,小亚基有33种蛋白质。 6,什么是SD序列?其功能是什么? 答:定义:因澳大利亚学者夏因(Shine)和达尔加诺(Dalgarno)两人发现该序列的功能而得名。信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3~7个核苷酸序列(AGGAGG),是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。 功能:此序列富含A-G,恰与16SRNA3’端富含T-C的序列互补,因此mRNA 与核蛋白体sRNA容易配对结合。因此SD序列对mRNA的翻译起重要作用。 7,核糖体有哪些活性中心? 答:核糖体有多个活性中心,即mRNA结合部位、结合或接受AA- tRNA部位(A 位)、结合或接受肽酰-tRNA的部位(P位)、肽基转移部位及形成肽键的部位(转肽酶中心),此外还应有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。 8,真核生物与原核生物在翻译起始过程中有什么区别? 答:原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA(fMet上角标),30s小亚基首先与mRNA 模板相结合,再与fMet-tRNA(fMet上角标)结合,最后与50s大亚基结合。 真核生物的起始tRNA是Met-tRNA(Met上角标),40s小亚基首先与Met-tRNA(Met上角标)相结合,再与模板mRNA结合,最后与60s大亚基结合生成起始复合物。真核生物蛋白质生物合成的起始机制与原核生物基本相同,其差异主要是核糖体较大,有较多的起始因子参与,其mRNA具有m7GpppNp帽子结构,Met-tRNA (Met上角标)不甲酰化,mRNA分子5' 端的“帽子”参与形成翻译起始复合物。9,链霉素为什么能预制蛋白质合成? 答:链霉素是一种碱性三糖,干扰fMet-tRNA与核糖体的结合,从而阻止蛋白质合成的正确起始,并导致mRNA的错读。若以poly(U)作模板,则除苯丙氨酸(UUU)外,异亮氨酸(AUU)也会掺入。链霉素的作用位点在30S亚基上。

关于分子生物学试题及答案

分子生物学试题(一) 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的()片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为()、()两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是()、()和()。 4.蛋白质的跨膜需要()的引导,蛋白伴侣的作用是()。5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:()和()。6.分子生物学的研究内容主要包含()、()、()三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是()、()。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:()、()。 9.蛋白质多亚基形式的优点是()、()、()。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从(S2 )开始,无G时转录从(S1 )开始。 12.DNA重组技术也称为(基因克隆)或(分子克隆)。最终目的是(把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体)。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤: ①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为(松弛型质粒)。 14.PCR的反应体系要具有以下条件: a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物(约20个碱基左右)。 b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15.PCR的基本反应过程包括:(变性)、(退火)、(延伸)三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括: ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中; ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;

分子生物学试题库

第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因:细胞内与细胞增殖相关的正常基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。 复制:以亲代DNA或RNA为模板,根据碱基配对的原则,在一系列酶的作用下,生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转座子 (transposon 或 transposable element):位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。 半保留复制:以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA,这样新形成的子代DNA 中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制。 染色体:染色体是遗传信息的载体,由DNA、RNA和蛋白质构成,其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中,以染色质形式存在。在细胞分裂时,染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体,为显微镜下可见的具不同形状的小体。 核小体:是构成真核生物染色体的基本单位,是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式,包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是 DNA和蛋白 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接,这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中,除了需要模板DNA外,还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括(B) A. 富含G-C区 B. 富含A-T区 C. Z-DNA D. 无明显特征 2.插入序列(IS)编码(A) A.转座酶 B.逆转录酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶 3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D) A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂 C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式(C) A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留 5.原核生物基因组中没有(A) A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)

分子生物学作业(完整版)

分子生物学作业 第一次 1、Promoter:(启动子)一段位于结构基因5…端上游、能活化RNA聚合酶的DNA序列,是RNA聚合酶的结合区,其结构直接关系转录的特异性与效率。 2、Cis-acting element:(顺式作用元件)影响自身基因表达活性的非编码DNA序列,组成基因转录的调控区包括:启动子、增强子、沉默子等 一、简述基因转录的基本特征。(作业)P35 二、简述蛋白质生物合成的延长过程。P58 肽链的延伸由于核糖体沿mRNA5 ′端向3′端移动,开始了从N端向C端的多肽合成。 起始复合物,延伸AA-tRNA,延伸因子,GTP,Mg 2+,肽基转移酶 每加一个氨基酸完成一个循环,包括: 进位:后续AA-tRNA与核糖体A位点的结合 起始复合物形成以后,第二个AA-tRNA在EF-Tu作用下,结合到核糖体A位上。 通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物,参与下一轮循环。 需要消耗GTP,并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子。 转位:P位tRNA的AA转给A位的tRNA,生成肽键; 移位:tRNA和mRNA相对核糖体的移动; 核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子,二肽酰-tRNA2进入P位,去氨酰-tRNA 被挤入E位,空出A位给下一个氨酰-tRNA。移位需EF-G并消耗GTP。 三、真核细胞mRNA分子的加工过程有哪些?P40 1、5’端加帽 加帽指在mRNA前体刚转录出来或转录尚未完成时,mRNA前体5’端在鸟苷酸转移酶催化下加G,然后在甲基转移酶的作用下进行甲基化。 帽子的类型 0号帽子(cap1) 1号帽子(cap1) 2号帽子(cap2) 2、3’端的产生和多聚腺苷酸花 除组蛋白基因外,真核生物mRNA的3?末端都有poly(A)序列,其长度因mRNA种类不同而变化,一般为40~200个A 。 大部分真核mRNA有poly(A)尾巴,1/3没有。 带有poly(A)的mRNA称为poly(A)+, 不带poly(A)的mRNA称为poly(A)-。 加尾信号: 3?末端转录终止位点上游15~30bp处的一段保守序列AAUAAA。 过程: ①内切酶切开mRNA3?端的特定部位; ②多聚A合成酶催化加poly(A)。 3、RNA的剪接

分子生物学复习题(有详细答案)

绪论 思考题:(P9) 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义? 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念,即将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?什么是反向生物学?什么是 后基因组时代? 研究内容: DNA的复制、转录和翻译;基因表达调控的研究;DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学:是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能,在体外使基因突变,再导入体内,检测突变的遗传效应,即以表型来探索基因结构。 后基因组时代:研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式,人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件(年代、发明者、简要内容) 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文,提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年,重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术,并完成了第一个细菌基因的克隆,开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的? 随着基因组计划的完成,人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代,人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生,如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题:(P130) 1、基因的概念如何?基因的研究分为几个发展阶段? 概念:基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段:○120世纪50年代以前,主要从细胞的染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后,主要从DNA大分子水平上进行研究,属于分

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问答题: 1 衰老与基因的结构与功能的变化有关,涉及到:(1)生长停滞;(2)端粒缩短现象;(3)DNA损伤的累积与修复能力减退;(4)基因调控能力减退。 2 超螺旋的生物学意义:(1)超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密,使DNA分子体积变得更小,对其在细胞的包装过程更为有利;(2)超螺旋能影响双螺旋的解链程序,因而影响DNA分子与其它分子(如酶、蛋白质)之间的相互作用。 3 原核与真核生物学mRNA的区别: 原核:(1)往往是多顺反子的,即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息(来自几个结构基因)。(2)5端无帽子结构,3端一般无多聚A尾巴。(3)一般没有修饰碱基,即这类mRNA分子链完全不被修饰。 真核:(1)5端有帽子结构(2)3端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴,其长度为20-200个腺苷酸。(3)分子中可能有修饰碱基,主要有甲基化,(4)分子中有编码区与非编码区。 4 tRNA的共同特征: (!)单链小分子,含73-93个核苷酸。(2)含有很多稀有碱基或修饰碱基。(3)5端总是磷酸化,5末端核苷酸往往是pG。(4)3端是CPCPAOH序列。(5)分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合,开成双螺旋,从而构成其二级结构,开头类似三叶草。(6)三级结构是倒L型。 5 核酶分类:(1)异体催化的剪切型,如RNaseP;(2)自体催化的剪切型,如植物类病毒等;(3)内含子的自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA前体。 6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程: (1)5端加帽;(2)3端加尾(3)内含子的切除和外显子的拼接;(4)分子内部的甲基化修饰作用,(5)核苷酸序列的编辑作用。 7 反义RNA及其功能: 碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA,又称调节RNA,这类RNA是单链RNA,可与mRNA配对结合形成双链,最终抑制mRNA作为模板进行翻译。这是其主要调控功能,还可作为DNA复制的抑制因子,与引物RNA互补结合抑制DNA的复制,以及在转录水平上与mRNA5末端互补,阻止RNA合成转录。 8 病毒基因组分型:(1)双链DNA(2)单链正股DNA(3)双链RNA(4)单链负股RNA(5)单链正股RNA 9 病毒基因组结构与功能的特点: (1)不同病毒基因组大小相差较大;(2)不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸。(3)病毒基因组有连续的也有不连续的;(4)病毒基因组的编码序列大于90%;(5)单倍体基因组,(6)基因有连续的和间断的,(7)相关基因丛集;(8)基因重叠(9)病毒基因组含有不规则结构基因,主要类型有:a几个结构基因的编码区无间隔;bmRNA没有5端的帽结构;c结构基因本身没有翻译起始序列。 10 原核生物基因组的结构的功能特点: (1)基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。 (2)基因组中只有1个复制起点。 (3)具有操纵子结构。(4)编码顺序一般不会重叠。(5)基因是连续的,无内含子,因此转录后不需要剪切。(6)编码区在基因组中所占的比例(约占50%)远远大于真核基因组,但又远远小于病毒基因组。(7)基因组中重复序列很少(8)具有编码同工酶的基因。(9)细菌基因组中存在着可移动的DNA序列,包括插入序列和转座子。 (10)在DNA分子中具有多种功能的识别区域。 11??真核生物基因组结构与功能的特点:

现代分子生物学作业

现代分子生物学与基因工程作业 姓名________________班级_____________学号________________ 1、绝大多数的真核生物染色体中均含有HI、H2A、H2B、H3和H4五种组蛋白,在不同物种之间它们的保守性表现在() A.H3和H4具有较高的保守性,而H2A和H2B的保守性比较低 B. H2A和H2B具有较高的保守性,而H3和H4的保守性比较低 C. H1和H4具有较高的保守性,而H3和H2B的保守性比较低 D. H1和H3具有较高的保守性,而H4和H2B的保守性比较低 2、下列叙述哪个是正确的() A. C值与生物体的形态学复杂性成正相关 B. C值与生物体的形态学复杂性成负相关 C. 每个门的最小C值与生物体的形态学复杂性是大致相关的 C值指一种生物单倍体基因组DNA的总量。不同物种的C值差异很大,随着生物体的进化 3、真核DNA存在于() A. 线粒体与微粒体内 B. 线粒体与高尔基体内 C. 线粒体与细胞核内 D.细胞核与高尔基体内 E. 细胞核与溶酶体内 4、在核酸分子中核苷酸之间的连接方式是() A. 2‵-3‵磷酸二酯键 B. 2‵-5‵磷酸二酯键 C. 3‵-5‵磷酸二酯键 D.糖苷键 5、所有生物基因组DNA复制的相同之处是() A. 半保留复制 B. 全保留复制 C. 嵌合型复制 D. 偶联型复制 6、复制子是() A. 细胞分离期间复制产物被分离之后的DNA片段 B. 复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白 C. 任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连) D. 复制起点和复制叉之间的DNA片段 7、在原核生物复制子中,下列哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核酸() A.DNA聚合酶I B.DNA聚合酶II C.DNA聚合酶III D. 连接酶

最新现代分子生物学试题库

核酸结构与功能 一、填空题 1.病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。 2.AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3.X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。 4.氢键负责维持A-T间(或G-C间)的亲和力 5.天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题(单选或多选) 1.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。 这两个实验中主要的论点证据是(C )。 A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B.DNA突变导致毒性丧失 C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D.DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 E.真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2.1953年Watson和Crick提出( A )。 A.多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B.DNA的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D.遗传物质通常是DNA而非RNA E.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3.DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述?( CD ) A.哺乳动物DNA约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B.依赖于A-T含量,因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C.是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D.可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度 4.DNA的变性(ACE )。A.包括双螺旋的解链 B.可以由低温产生C.是可逆的D.是磷酸二酯键的断裂E.包括氢键的断裂 5.在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成(AD )。 A.基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋 B.依赖于A-U含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少 C.仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D.同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对 E.允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6.DNA分子中的超螺旋(ACE )。

分子生物学作业

《分子生物学》> 作业系统> 答题 第一次作业 题目:一、名词解释 1.广义分子生物学 2. 狭义分子生物学 3. 基因 4.断裂基因 5.外显子 6.内含子 7.C值与C值矛盾 8.半保留复制 9.转座子 10.超螺旋结构 参考答案: 1.广义的分子生物学概念包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。例如,蛋白质的结构、运动和功能,酶的作用机理和动力学,膜蛋白结构与功能和跨膜运输等。 2.狭义分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平阐明蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控机理的学科。 3.基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。包括编码蛋白质和tRNA、rRNA的结构基因,以及具有调节控制作用的调控基因。基因可以通过复制、转录和决定翻译的蛋白质的生物合成,以及不同水平的调控机制,来实现对遗传性状发育的控制。基因还可以发生突变和重组,导致产生有利、中性、有害或致死的变异。 4.断裂基因:在真核生物基因组中,基因是不连续的,在基因的编码区域内部含有大量的不编码序列,从而隔断了对应于蛋白质的氨基酸序列。这一发现大大地改变了以往人们对基因结构的认识。这种不连续的基因又称断裂基因或割裂基因。 5.外显子:基因中编码的序列称为外显子。 6.内含子是在信使RNA被转录后的剪接加工中去除的区域。 7.C值与C值矛盾:C值指生物单倍体基因组中的DNA含量,以pg表示(1pg=10-12g)。C值矛盾(C value paradox)是指真核生物中DNA含量的反常现象。 8. 半保留复制:在DNA复制程程中,每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,这种方式称为半保留复制。

(完整版)分子生物学》试题及答案

《分子生物学》考试试题B 课程号:66000360 考试方式:闭卷 考试时间: 一、名词解释(共10题,每题2分,共20分) 1. SD 序列 2. 重叠基因 3.ρ因子 4.hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon): 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题(共20空,每空1分,共20分) 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成,真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子,其中__ 个为氨基酸编码,起始密码子为__ _______;终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______,冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中,独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一

种_______状双链DNA,在基因工程中,它做为_______。 三.判断题(共5题,每题2分,共10分) 1.原核生物DNA的合成是单点起始,真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时,前导链的合成方向为5’→ 3’,后随链的合成方向也是5’→ 3’。() 四、简答题(共6题,每题5分,共30分) 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别? 四、问答题(共2题,共20分) 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。(10分) 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节?分别是怎样进行 的?(10分)

发育生物学作业

用分子生物学、细胞生物学的方法研究个体发育机制的学科。 验胚胎学发展起来的。 实验胚胎学是研究发育中的胚胎各部分间的相互关系及其性质,如何相互影响,发育生物学则是追究这种相互关系的实质是什么,是什么物质(或哪些物质)在起作用,起作用的物质怎样使胚胎细胞向一定方向分化,分化中的细胞如何构成组织或器官,以保证组织和器官的发育,正常发育的胚胎怎样生长、成熟、成为成长的个体,后者在发育到一定阶段后为什么逐步走向衰老,如何在规定的时间和空间的顺序下完成个体的全部发育。 精子发生:spermatogenesis 定义1:由精原细胞经初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞至成熟精子形成的过程。 应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞分化与发育(二级学科) 定义2:由原始生殖细胞发育成精原细胞、精母细胞,再发育为成熟精子的整个过程。 胚胎诱导:中文名称:胚胎诱导 英文名称:embryonic induction 定义:动物在一定的胚胎发育时期,一部分细胞影响相邻的另一部分细胞使其向一定方向分化的现象。 应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞分化与发育(二级学科) 胚胎干细胞:英文名称:embryonic stem cell;ES cell 定义1:由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞,具有发育全能性,理论上可以诱导分化为机体中200多种细胞。 应用学科:免疫学(一级学科);免疫系统(二级学科);免疫细胞(三级学科) 定义2:取自哺乳动物囊胚的内细胞团细胞,经培养而成的多能干细胞。具有分化为各种组织的潜能。

应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞分化与发育(二级学科) 定义3:从囊胚期内细胞团分离得到的干细胞,可以分化为体内任何一种类型的细胞。 应用学科:遗传学(一级学科);发育遗传学(二级学科) 细胞表型:也就是细胞的表现形式。我们知道有基因型和表型,遗传后染色体自有重组会产生新的“基因型”,但不同的基因型不一定都有不同的表现,而生物体外在表现出来的就是所谓“表型”。 知道隐性显性吗?比如隐形是a,显性是A,基因型Aa和AA的东西表现出来的样子其实就可以是一样的(完全显性状况下),即为他们的表型相同。 分生组织:英文名称:meristem 定义:植物体内能连续或周期性地进行细胞分裂的组织。 应用学科:水产学(一级学科);水产基础科学(二级学科) (meristem)是在植物体的一定部位,具有持续或周期性分裂能力的细胞群。分裂所产生的细胞排列紧密,无细胞间隙;细胞壁薄,细胞核大,一小部分仍保持高度分裂的能力,大部分则陆续长大并分化为具有一定形态特征和生理功能的细胞,构成植物体的其他各种组织,使器官得以生长或新生。分生组织是产生和分化其他各种组织的基础,由于它的活动,使植物体不同于动物体和人体,可以终生增长。 信号转导:信号转导(signal transduction) 是细胞通讯的基本概念, 强调信号的接收与接收后信号转换的方式(途径)和结果, 包括配体与受体结合、第二信使的产生及其后的级联反应等, 即信号的识别、转移与转换。 在细胞通讯系统中,细胞或者识别与之相接触的细胞,或者识别周围环境中存在的各种化学和物理信号(来自于周围或远距离的细胞),并将其转变为细胞内各种分子活性的变化,从而改变细胞的某些代谢过程,影响细胞的生长速度,甚至诱导细胞凋亡,这种针对外源信息所发生的细胞应答反应全过程称为信号转导(signal transduction)。 变态:英文名称:metamorphosis;metamorphoses (复) 定义1:脊椎动物中,仅两栖类所特有的一种生命过程。其幼体具鳃,多水栖,而成体一般用肺呼吸,多陆生。变态过程伴随骨骼系统、呼吸系统等一系列身体形态和结构的巨大变化。 应用学科:古生物学(一级学科);古脊椎动物学与古人类学(二级学科);两栖类(三级学科) 定义2:

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