高级生物化学 试题
1为什么说蛋白质的一级结构决定其高级结构？
一级结构也就是氨基酸序列，像是一些碱性氨基酸或是带电荷氨基酸会对蛋白质的2级结构产生决定性的作用，由于组成蛋白质的20种氨基酸各具特殊的侧链，侧链基团的理化性质和空间排布各不相同，当它们按照不同的序列关系组合时，就可形成多种多样的空间结构和不同生物学活性的蛋白质分子。
比如脯氨酸经常出现在肽链的折叠处；基酸的性质决定了他们的疏水或亲水，这样折叠时亲水的基团在外，疏水的在内。样下来组成蛋白一级结构的氨基酸间形成像氢键、二硫键这样的次级键，导致了蛋白2级结构的形成，如a折叠、b片层等。三级结构又是由2级结构所决定的，多个2级结构形成结构域，而4级结构又是由几个3级结构组成的，所以说蛋白质的一级结构决定了高级结构。
2试论述蛋白质二级结构的三种基本类型的特点有哪些?
α-螺旋
蛋白质中常见的一种二级结构，肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状，一般都是右手螺旋结构，螺旋是靠链内氢键维持的。每个氨基酸残基（第n个）的羰基氧与多肽链C端方向的第4个残基（第n+4个）的酰胺氮形成氢键。在典型的右手α-螺旋结构中，螺距为0.54nm，每一圈含有3.6个氨基酸残基，每个残基沿着螺旋的长轴上升0.15nm。
螺旋的半径为0.23nm。
特点
① 肽链以螺旋状盘卷前进，每圈螺旋由3.6个氨基酸构成，螺圈间距（螺距）为5.44埃；②螺旋结构被规则排布的氢键所稳定，氢键排布的方式是：每个氨基酸残基的N—H 与其氨基侧相间三个氨基酸残基的C=O形成氢键。这样构成的由一个氢键闭合的环，包含13个原子。因此，α-螺旋常被准确地表示为3.613螺旋。螺旋的盘绕方式一般有右手旋转和左手旋转，在蛋白质分子中实际存在的是右手螺旋。
β-折叠
在β折叠中，两条以上氨基酸链（肽链），或同一条肽链之间的不同部分形成平行或反平行排列，成为“股”。肽平面之间呈手风琴状折叠，股与股之间会通过氢键固定，但氢键主要在股间而不是股内。氨基酸残基的R侧链分布在片层的上下。
β折叠层并不是平的，因为侧链的存在使得它看上去像手风琴一样波纹起伏。这样每一股会更紧密排列，氢键更容易建立。氢键的距离为7埃。在蛋白质结构中β折叠通常会用箭头表示。肽链的氮端在同侧为顺式，两残基间距为0.65nm；不在同侧为反式，两残基间距为0.70nm。反式较顺式平行折叠更加稳定。
能形成β折叠的氨基酸残基一般不大，而且不带同种电荷，这样有利于多肽链的伸展，如甘氨酸、丙氨酸在β折叠中出现的几率最高。
β-转角
也是多肽链中常见的二级结构，连接蛋白质分子中的二级结构（α-螺旋和β-折叠），使肽链走向改变的一种非重复多肽区，一般含有2～16个氨基酸残基。含有5个氨基酸残基以上的转角又常称之环（loops）。
常见的转角含有4个氨基酸残基，有两种类型。
转角I的特点是：第1个氨基酸残基羰基氧与第4个残基的酰胺氮之间形成氢键；转角II 的第3个残基往往是甘氨酸。这两种转角中的第2个残基大都是脯氨酸。
?由四个连续的氨基酸残基构成，主链骨架本身以大约180℃返回折迭。
?第一个氨基酸残基的CO与第四个氨基酸的NH 形成氢键，从而稳定转折的构象
3如何将分子量相同的单链DNA与单链RNA分开，你能够设计出哪几种方法？分别叙述之。
DNA，RNA不同：
1.两性解离：DNA无，只有酸解离（○P），碱基被屏蔽（在分子内部形成了H键）。
RNA有，有PI。
2.粘度大：DNA>RNA，粘度由分子长度/直径决定，DNA为线状分子，RNA为线团。
3.碱的作用：DNA耐碱
RNA易被碱水解。
4.显色反应：鉴别DNA和RNA
浓HCl 浓HCl
RNA ------→绿色化合物DNA ------→蓝紫色化合物
苔黑酚二苯胺
啡啶溴红（荧光染料）和溴嘧啶都可对DNA染色，原理是卡在分子中，DNA 的离心
和电泳显色可用它们。
5.溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA 溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚来沉淀RNA。
6.紫外吸收：核酸的λm＝260nm，碱基展开程度越大，紫外吸收就越厉害。
当A＝1时，DNA：50ug/ml，RNA和单链DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。
用A260/A280还可来表示核酸的纯度：>1.8，DNA很纯；>2RNA很纯。
7.沉降速度：对于拓扑异构体（核苷酸数目相同的核酸），其沉降速度为：
RNA > 超螺旋DNA > 解链环状DNA > 松弛环状DNA > 线形DNA
也就是在离心管中最上层是线形DNA，最下面是RNA。
8.电泳：核苷酸、核酸均可以进行电泳，泳动速度主要由分子大小来决定，因此，电泳是测定核酸分子量的好方法。
9.DNA分子量测定最直接的方法：用适当浓度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以将其他形式的DNA变成线形DNA，用电镜测出其长度，按B-DNA模型算出bp数，根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量
1、用碱分解：能分解的是RNA，不能分解的是DNA
2、用专一性酶分解：如RNase1只分解RNA，DNase1只分解DNA
3、用酸水解，然后进行单核苷酸层析：含U的是RNA，含T的是DNA
4、颜色反应：RNA与地衣酚生成鲜绿色化合物，DNA与二苯胺生成蓝色化合物
1。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀,是最简单的方法。
2。利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定，非固定细胞核酸，或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果，但该方法已被许多实验室广泛采用。
用化学方法水解核酸能够得到什么产物取决于核酸分子中磷酸二酯键和N-糖苷键对酸、碱的相对稳定性。
RNA中，核糖与碱基之间的N-糖苷键对碱稳定，RNA主链中的磷酸二酯键一般也对碱稳定，因此RNA通常应该不被水解。但是，RNA分子由于核糖上有2′-羟基，存在邻接基团参与效应，在碱催化下，RNA分子中的磷酰基发生转移，生成2′，3′-环状单核苷酸中间产物，环核苷酸再进一步水解成2′-核苷酸和3′-核苷酸。DNA则一般不被碱水解。
碱水解RNA时，A、C、G、U、I、T的单核甘酸和几种甲基化碱基是稳定的，m1A转变为m6A，m3C转变为m3U，而m7G、m1I、tC6A、m6tC8A会被碱破坏。修饰组分2′-O-甲基核糖核苷酸由于不能形成2′，3′-环核苷酸，因此该处的磷酸二酸键不被碱水解，产物中出现NmNp 和NmNmNp等寡核苷酸。大肠杆菌16S rRNA中的m62Am62Ap也有很强的抗碱性，用1mol∕L NaOH，37℃水解9小时后仍有38%残存，而通常RNA用0.3mol∕L NaOH，37℃作用18小时即可完全水解。
一噬菌体裂解途径和溶源化途径的调控
①溶源途径
λ噬菌体感染E. coli后，将其基因组整合到细菌染色体上，随着细菌染色体的复制而复制。整合有噬菌体基因组的细菌称为溶源菌，这一过程称为溶源途径。溶源化细菌一般不被同种噬菌体再行感染，这一现象称为免疫性。
②溶菌途径
λ噬菌体感染宿主后也可以利用细菌细胞内的养料进行繁殖，最终使宿主裂解而死亡，这一过程称为溶菌途径。
溶源化的细菌受某些外界物理或化学因素(如紫外线、丝裂霉素C等)的作用原噬茵体便脱离细菌染色体而进行自主复制，于是细菌裂解，游离出大量的噬菌体，这一过程称为诱导。蛋白质分离主要根据五种原理：分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。
λDNA的基因表达调控
抗终止作用
λPhage的转录调控决定了它的裂解途径或溶原途径，它于其它体系比较的最大特点在于抗终止。
抗终止蛋白可解除弱终止子的作用而使转录进行进行。如PN作用于tL1和tR1。PN在左操纵子上的作用部位称为NutL（N-utilization site），PN在右操纵子上的作用部位为NutR，Nut 紧邻终止子处。
抗终止蛋白结合于nut，当RNA pol转录通过nut位点时，RNA pol与nut位点的pN结合，使RNA pol构象发生改变，而不为弱终止子终止。当nutL突变时，N不能抑制tL1位点的终止。说明N蛋白参与可抗终止（tL1和tR1），N蛋白为可扩散的碱性蛋白（14kD）它识别特异的nut位点，故其不能使细菌转录终止。
λ噬菌体基因组调控区有6个启动子，PL、PR1分别负责启动向左向右的转录，PE、PM是转录CⅠ基因的两个启动子，PRE主管建立溶源(repressor for establishment of lysogeny)，PRM 主管维持溶源(repressor for maintenance of lysogeny)。
PRE的启动需要CⅡ、CⅢ蛋白，PI启动转录int基因（整合酶），PI的起始也需要CⅡ/CⅢ蛋白，PR2(或PR’)是λ最强的启动子，负责后期一切基因的转录。PL、PE、PM、PI是启动左向转录，而PRl、PR2则启动右向转录。
噬菌体进入溶源或溶菌途径决定于CⅠ与cro的相对量。phage以原噬菌体形式整合在宿主染色体上。
CⅠ蛋白占有OR2、OR1位点，促进了RNA pol与CⅠ基因启动子（PRM)的结合，从而有利于向左转录（溶源化）。CⅠ蛋白占有OR2、OR1位点，抑制cro基因转录，从而不利于
向右转录（不利溶菌途径）。当细胞营养丰富时，寄主蛋白酶降解CⅡ使CⅡ对CⅠ合成的促进作用消失，进入溶菌途径。λ噬菌体进行溶源循环时，λDNA整合到宿主染色体上，随染色体复制而复制，当溶源菌受紫外线或丝裂霉素C处理后，会发生SOS反应，激活recA 蛋白，recA蛋白有蛋白水解酶活性，分解CⅠ蛋白。将CⅠ蛋白在第111和112AA间打断而使CⅠ从DNA上脱离，于是RNA pol便有机会与Cro基因的启动子结合（OR1、OR2同位点），使转录向裂解方向进行。裂解途径早期，cro蛋白与OR3结合而阻止了CⅠ基因表达. 1离子交换原理及应用
◆电渗析器主要组成部分是离子交换膜。利用待分离分子的荷电性质和分子大小的差别，以外电场电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作。离子交换膜分为阳膜，阴膜。阳膜只充许阳离子通过而阴离子被阻挡；阴膜只充许阴离子通过而阳离子被阻挡。
电渗析应用
?工业上多用于海水、苦咸水淡化、废水处理
?生物分离中可用于氨基酸和有机酸等小分子的脱盐和分离纯化。
◆（2）离子交换层析
原理：离子交换层析是以离子交换剂为固定相，以特定的含离子的溶液为流动相，利用离子交换剂对需要分离的各种离子结合力的差异，而将混合物中不同离子进行分离的层析技术。
常用的离子交换剂：离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂
应用：离子交换层析的应用
1）水处理
用于水中的各种阴阳离子的去除。目前，离子交换树脂的最大消耗量是用在火力发电厂的纯水处理上，其次是原子能、半导体、电子工业等。
2）食品工业
离子交换树脂可用于制糖、味精、酒的精制、生物制品等工业装置上。
3）制药行业
制药工业离子交换树脂对发展新一代的抗菌素及对原有抗菌素的质量改良具有重要作用。4）合成化学和石油化学工业
在有机合成中常用酸和碱作催化剂进行酯化、水解、酯交换、水合等反应。5）环境保护
离子交换树脂已应用在许多非常受关注的环境保护问题上。
6)分离纯化小分子物质
离子交换广泛的应用于无机离子、有机酸、核苷酸、氨基酸、抗生素等小分子物质的分离纯化。
7)分离纯化生物大分子物质
离子交换层析是依据物质的带电性质的不同来进行分离纯化的，是分离纯化蛋白质等生物大分子的一种重要手段。
◆(3)离子交换色谱
原理以离子交换树脂作为固定相，选择合适的以离子交换树脂作为固定相，选择合适的溶剂作为流动相，使溶质按照其离子交换亲合力的不同而得到分离的方法
离子交换色谱的应用
●料液处理量大分离过程具有浓缩作用
●应用范围广，可在较高流速下操作应用范围广，可在较高流速下操作
●非特异性吸附小，产品回收率高
●离子交换剂种类多，选择余地大，价格低廉
●蛋白肽核酸分离纯化的主要手段
2吸附的原理及应用
1)物理吸附，是指吸附剂与吸附质之间是通过分子间引力（即范德华力）而产生的吸附，在吸附过程中物质不改变原来的性质，因此吸附能小，被吸附的物质很容易再脱离，如用活性炭吸附气体，只要升高温度，就可以使被吸附的气体逐出活性炭表面。
2)化学吸附，是指吸附剂与吸附质之间发生化学作用，生成化学键引起的吸附，在吸附过程中不仅有引力，还运用化学键的力，因此吸附能较大，要逐出被吸附的物质需要较高的温度，而且被吸附的物质即使被逐出，也已经产生了化学变化，不再是原来的物质了，一般催化剂都是以这种吸附方式起作用。
●疏水性吸附色谱
原理:利用表面偶联弱疏水性基团的疏水性吸附剂为固定相根据蛋白质与疏水性吸附剂剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行的分离纯化方法●吸附层析
原理:以吸附剂作为固定相，选择适当的溶剂作流动相。由于各种物质的极性不同，被吸附剂吸附的程度和在流动相中的溶解度不同。层析时，当流动相从固定相上流过时，各组分也就不同程度地被溶解（解吸），然后又再被吸附、再溶解再吸附，从而以不同速度随流动相向前移动。
载体：硅胶氧化铝羟基磷石灰
应用：分离纯化蛋白质、酶、氨基酸、核苷酸等生化物质
3．常用的膜过滤方法、原理及应用
方法:
●超滤(UF)：过滤精度在0.001-0.1微米，属于二十一世纪高新技术之一。是一种利用压差的膜法分离技术，可滤除水中的铁锈、泥沙、悬浮物、胶体、细菌、大分子有机物等有害物质，并能保留对人体有益的一些矿物质元素。是矿泉水、山泉水生产工艺中的核心部件。超滤工艺中水的回收率高达95%以上，并且可方便的实现冲洗与反冲洗，不易堵塞，使用寿命相对较长。超滤不需要加电加压，仅依靠自来水压力就可进行过滤，流量大，使用成本低廉，较适合家庭饮用水的全面净化。因此未来生活饮用水的净化将以超滤技术为主，并结合其他的过滤材料，以达到较宽的处理范围，更全面地消除水中的污染物质。
●纳滤(NF)：过滤精度介于超滤和反渗透之间，脱盐率比反渗透低，也是一种需要加电、加压的膜法分离技术，水的回收率较低。也就是说用纳滤膜制水的过程中，一定会浪费将近30%的自来水。这是一般家庭不能接受的。一般用于工业纯水制造。
●反渗透(RO)：过滤精度为0.0001微米左右，是美国60年代初研制的一种超高精度的利用压差的膜法分离技术。可滤除水中的几乎一切的杂质（包括有害的和有益的），只能允许水分子通过。也就是说用反渗膜制水的过程中，一定会浪费将近50%以上的自来水。这是一般家庭不能接受的。一般用于纯净水、工业超纯水、医药超纯水的制造。反渗透技术需要加压、加电，流量小，水的利用率低，不适合大量生活饮用水的净化。
●微滤（MF）：过滤精度一般在0.1-50微米，常见的各种PP滤芯，活性碳滤芯，陶瓷滤芯等都属于微滤范畴，用于简单的粗过滤，过滤水中的泥沙、铁锈等大颗粒杂质，但不能去除水中的细菌等有害物质。滤芯通常不能清洗，为一次性过滤材料，需要经常更换。① PP 棉芯：一般只用于要求不高的粗滤，去除水中泥沙、铁锈等大颗粒物质。②活性碳：可以消除水中的异色和异味，但是不能去除水中的细菌，对泥沙、铁锈的去除效果也很差。③陶瓷滤芯：最小过滤精度也只0.1微米，通常流量小，不易清洗。
原理:膜过滤是一种与膜孔径大小相关的筛分过程，以膜两侧的压力差为驱动力，以膜为过滤介质，在一定的压力下，当原液流过膜表面时，膜表面密布的许多细小的微孔只允许水及小分子物质通过而成为透过液，而原液中体积大于膜表面微孔径的物质则被截留在膜的进液侧，成为浓缩液，因而实现对原液的分离和浓缩的目的。
其他常用膜分离过程
除了以上四种常用的膜分离过程，另外还有渗析、控制释放、膜传感器、膜法气体分离等。
4．常用的生化物质分离所用的层析方法，各自原理及应用
?吸附层析
原理:以吸附剂作为固定相，选择适当的溶剂作流动相。由于各种物质的极性不同，被吸附剂吸附的程度和在流动相中的溶解度不同。层析时，当流动相从固定相上流过时，各组分也就不同程度地被溶解（解吸），然后又再被吸附、再溶解再吸附，从而以不同速度随流动相向前移动。
载体：硅胶氧化铝羟基磷石灰
应用：分离纯化蛋白质、酶、氨基酸、核苷酸等生化物质
?分配层析
原理:分配层析实际上是一种连续抽提方式。如纸层析中滤纸的结合水为固定相，以水饱和的有机溶剂为流动相（展开剂）。当流动相沿滤纸经过样品点时，样品点中的溶质在水和有机相中溶解度不同而不均匀地分配在两相中，各种组分按其各自的分配系数进行不断分配，从而使物质得到分离和纯化。
载体：纤维素硅藻土硅胶
应用：各种生化物质的分离鉴定
?凝胶层析
原理：凝胶层析也称为排阻凝胶层析、凝胶过滤和分子筛层析。它是60 年代发展起来的，利用凝胶把物质按分子大小不同进行分离的一种方法。由于被分离物质的分子大小（直径）和形状不同，洗脱时，大分子物质由于直径大于凝胶网孔不能进入凝胶内部，只能沿着凝胶颗粒间的孔隙，随溶剂向下移动，因此流程短，首先流出层析柱，而小分子物质，由于直径小于凝胶网孔，能自由进出胶粒网孔，使之洗脱时流程增长，移动速度慢而后流出层析柱。基质葡聚糖凝胶（sephadex）琼脂糖凝胶（sepharose
应用测定分子量脱盐和浓缩分离提纯生物大分子除去热原物质
?离子交换层析
原理:利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同，经过交换平衡达到分离的目的
基质疏水型离子交换剂；亲水型离子交换剂
应用主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。
?亲和层析
原理:亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理，将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。
基质纤维素、聚丙烯酰胺凝胶、sepharose、sephadex
应用分离纯化酶、抗原、抗体;分离纯化核酸;研究酶的结构与功能
?聚焦层析
该法是在等电点聚焦方法基础上发展起来的，其分离纯化蛋白质的依据是等电点的差异和离子交换行为。蛋白质按其等电点在pH梯度环境中进行排列的过程叫做聚焦效应。 pH梯度的形成(由多缓冲剂和多缓冲交换剂形成)是聚焦效应的先决条件，如果一种蛋白质加到已形成pH梯度的层析柱上时,由于洗脱液的连续流动，蛋白质将迅速地迁移到与它等电点相同的pH处。从此位置开始，该蛋白质将以缓慢的速度进行吸附、解吸附，直到在等电点pH 时被洗出。在聚焦层析过程中,一种样品分次加入时，只要先加入者尚未洗出,并且有一定的时间进行聚焦,剩余样品还可以加到柱上,其聚焦过程都能顺利完成
5．SDS-PAGE的原理及应用。
原理:在电场的作用下，带电粒子能在聚丙烯凝胶中迁移，其迁移速度与带电粒子的大小、构型和所带的电荷有关。十二烷基磺酸钠（SDS）能与蛋白质的结合，改变蛋白质原有的构象，使其变成近似于雪茄烟形的长椭圆棒，其短轴长度一样，而长轴与分子量大小成正比。在SDS-PAGE中，SDS-复合物的迁移率不再受蛋白的电荷和形状的影响，而只与蛋白质的分子量正相关。在一定浓度的凝胶中，由于分子筛效应，则电泳迁移率就成为蛋白质分子量的函数，实验证实分子量在15kD～200 kD 的范围内，电泳迁移与分子量的对数呈直线关系，用此法可根据已知分子量白质的电泳迁移率和分子量的对数做出标准曲线，再根据未知蛋白
质的电泳迁移率求得分子量。同时也可根据不同分离级分的蛋白条带的多少来判定分离纯化产物的纯度。
应用: 1. 蛋白质纯度分析；2. 蛋白质分析量的测定，根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量；3. 蛋白质浓度的测定；4. 蛋白质水解的分析；5. 免疫沉淀蛋白的鉴定；6. 免疫印迹的第一步；7. 蛋白质修饰的鉴定；8. 分离和浓缩用于产生抗体的抗原；9. 分离放射性标记的蛋白质；10. 显示小分子多肽
应用：
①普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。
②SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以用于未知蛋白分子量的测定，在同一凝胶上对一系列已知分子量的标准蛋白及未知蛋白进行电泳，测定各个的标准蛋白的电泳距离(或迁移率)，并对各自分子量的对数(log Mr)作图，即得到标准曲线。测定未知蛋白质的电泳距离(或迁移率)，通过标准曲线就可以求出未知蛋白的分子量。
③SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测
6. 生物分离中常用的电泳分离方法及应用。
常用电泳技术:醋酸纤维薄膜电泳;聚丙烯酰胺凝胶电泳;琼脂糖电泳;毛细管电泳
?醋酸纤维薄膜电泳
原理:以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维素的醋酸酯，由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮等有机溶液中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜，厚度以0.1mm—0.15mm为宜。带电颗粒在电场的作用下向着其所带电性相反的电极移动，从而带到分离目的.
应用:特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测,已经广泛用于血清蛋白，血红蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋白，甲胎蛋白，类固醇及同工酶等的分离分析中，尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单，快速等优点。
?聚丙烯凝胶电泳(PAGE) 一般PAGE、SDS-PAGE 、PAGE等电点聚焦
PAGE是在区带电泳原理的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶(PAG)作为支持物，采用电泳基质的不连续体系(即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性及电位梯度的不连续性) 或连续体系（一层凝胶、一种pH和一种缓冲溶液），进行电泳分离一种方法。
PAGE等电点聚焦
原理:
在一定抗对流介质（如凝胶）中加入两性电解质载体(Ampholyte,是一种多氨基多羧基的混合物，由异构物和同系物组成，其pK和pI值各自相异却又相近），当直流电通过时，便形成一个由阳极到阴极pH值逐步上升的梯度。两性化合物在此电泳过程中，就被浓集在与其pI相等的pH区域，从而使不同化合物能按其各自等电点得到分离。
应用：高效率分离纯化蛋白质;测定蛋白质分子量
?琼脂糖电泳
琼脂糖凝胶用作电泳的固相支持物具有分子筛效应，其对生物分子的分离作用不仅与其分子的构象及其相对分子质量大小有关，而且与凝胶的浓度也有密切关系，故可根据分离对象分子量大小选择适当浓度的凝胶。琼脂糖电泳常用于核酸分离，用各种浓度的琼脂糖凝胶可以分离长度为2OObP至5Okb的DNA，琼脂糖凝胶还常用作免疫电泳的固相支持物。
?毛细管电泳
毛细管电泳又称毛细管区带电泳，它是在毛细管（ 2-75μm）中装入缓冲液，从其一端注入样品，在毛细管两端加高压直流电实现对样品的分离，分离后的样品依次通过设在毛细管一
端的检测器检出。
目前已广泛用于氨基酸分析、蛋白质高效分离、指纹图谱研究、分离合成的寡核苷酸、 DNA 序列测定及PCR产物的分析鉴定等。
膜过滤技术
正文：
膜分离是20 世纪60 年代以来发展较快的一项分离技术,它具有操作条件温和、无污染、无相变等特点,在许多方面都得到了应用,象微滤、超滤已应用于生物化工和医药行业中. 膜分离是根据分子大小不同来实现分离的,一般相对分子质量相差10倍以上的物系才具有分离作用,因此它还远远不能满足生化分离的需要. 而生物亲和作用是生物分子之间的可逆专一性识别作用,具有极高的选性.
亲和层析法缺点: 1) 亲和载体价格昂贵,使用寿命短;2) 色谱柱易堵塞和污染,需对原料进行预处理以除去颗粒性杂质;3) 难以实现连续操作和规模放大. 目前亲和层析法仅局限于价值极高的生物活性物质的小批量纯化.
为克服膜过滤和亲和层析的缺点,发展了亲和膜过滤技术,不仅利用了生物分子的识别性能,分离低浓度的生物制品,而且膜的渗透性及通量大,能在纯化的同时实现浓缩,此外还有操作方便、设备简单、便于大规模生产的特点,发展前景引人瞩目。
1 膜过滤的分类
1．1 微孔过滤膜适用在低压(<0．3Mpa)条件下过滤，如应用于制备无菌水、药品、饮料和酒类过滤。
1．2 超滤膜超滤膜纯水工作压力为0．3Mpa，一般在常温下进行操作。特别适用于热敏性物质的浓缩与分离。如应用超滤装置对乳制品、生物制品、果酒、果汁的分离和提纯、蛋白质浓缩、饮用纯净水等。
1．3 反渗透膜能截留盐或小分子量有机物，使水选择性通过或气体通过。如应用在海水脱盐、天然气提纯、回收有机物蒸气、气体分离技术、制备富氧空气、干燥氮气、氧氮分离、氢氮分离、果汁和蔬菜汁加工等。
1．4 纳滤膜过滤精度孔径0．000 5-0．0o5微米，切割分子量为200～l 000；持留通过纳滤膜的溶质介于传统分离范围的超滤和反渗透之间，如盐类。适用范围为海水淡化、超纯水、多糖、乳酸、酪素和抗菌素浓缩等。
2 膜过滤的应用
2. 1 医药行业中的应用[4]
在我国制药业已经使用微滤(滤膜孔径< 0. 22μm)技术对澄清的药液再次除菌、除热原。亦
有使用超滤方法去除抗生素中热原物质。
2. 2食品工业上的应用
传统的食品消毒方法,多采用加热杀菌法,但会给食品的品质带来不利的影响,如变色、变味、营养损失等。随着人们生活和消费水平的提高以及科学技术的发展,一些非加热的消毒技术应运而生,并逐渐在实践中得到推广应用,过滤即是常用的手段之一。在糖厂、酒厂及清凉饮料厂,过滤除菌技术常用于去除粗糖液、酒及水质中可能污染的细菌。
2. 3检验领域的应用
2.3.1在临床检验中的应用
国内医疗单位,在生化检验中使用不同孔径的微孔滤膜分离蛋白质,可以选择性地截留血清或体液中各种不同分子量大小的蛋白质。
2.3. 2 微生物限度检查
在检测使用中消毒剂的微生物污染状况时,使用滤膜过滤法可去除抑菌物质,较真实的反映实际情况。在检测液体食品和饮料中细菌总数和大肠菌群数、酵母菌、霉菌时,采用滤膜过滤的方法,灵敏性、准确性较高,检出率高,可以代替平皿倾注法、多管发酵法。用滤膜过滤法在细菌培养过程中其代谢产物和拮抗物质不易横向扩散,有利于菌落的独立生长,避免菌落的迁延现象,排除了优势菌群的干扰,菌落易于分辨,提高了实验的准确性。
2.3. 3 水质检测[5]
滤膜过滤技术在水质微生物检验方面应用很广
2.3. 4 消毒剂鉴定中的应用
在臭氧水对微生物的杀灭效果鉴定中,因臭氧水机连续不断的产生臭氧水,且臭氧在水中的溶解度低、极易降解挥发,故将新发生的臭氧水直接流到染菌滤膜(孔径= 0.45μm)上,使臭氧水连续不断的作用至预定时间,来测定臭氧水机的杀菌效果。
2.3. 5 微菌落技术中的应用
单克隆抗体应用
作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于鉴别淋巴细胞、鉴定病原体、肿瘤的诊断和分型和体内激素含量的测定等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。但是单克隆抗体对抗原的识别，与多克隆抗体有很大的不同。不同试剂盒因使用的单克隆抗体不同，识别抗原的位点不同，导致检测结果有一定差异。因此，标准化问题还需要进一步研究。
单克隆抗体的制备：（1）用抗原反复免疫小鼠，刺激机体诱生抗原特异性B细胞。（2）取该免疫小鼠脾细胞（含有B细胞）与非分泌性小鼠骨髓瘤细胞在PEG作用下进行细胞融合。由于哺乳类细胞的DNA合成分为从头合成和补救合成两条途径。前者利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶，可被氨基蝶呤阻断；后者则在次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶存在下利用次黄嘌
呤和胸腺嘧啶。B细胞和骨髓瘤细胞在PEG作用下发生细胞融合，加入HAT选择培养基后，未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA，因而死亡，未融合的B细胞因不能在体外培养而死亡；融合细胞因从脾细胞获得HGPRT，故可在HAT选择培养基中存活和增殖。（3）形成杂交瘤细胞，其既有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。由于每个杂交瘤细胞由一个B细胞融合而成，而每个B细胞克隆仅识别一种抗原表位，故经筛选和克隆化的瘤细胞仅能合成及分泌一种同源抗体，即为单克隆抗体。
单克隆抗体的应用
单克隆抗体问世以来，由于其独有的特征已迅速应用于医学很多领域。主要表现在以下几个方面。
1．检验医学诊断试剂：作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。目前，应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广泛应用于：①病原微生物抗原、抗体的检测；②肿瘤抗原的检测；③免疫细胞及其亚群的的检测；④激素测定⑤细胞因子的测定。
单克隆抗体对抗原的识别，与多克隆抗体有很大的不同。不同试剂盒因使用的单克隆抗体不同，识别抗原的位点不同，导致检测结果有一定差异。因此，标准化问题还需要进一步研究。2．蛋白质的提纯：单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质（如Speharose 2B、4B、6B等）上，并制备成层析柱。当样品流经层析柱时，待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合，其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH，欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。
3．肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术：将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接，利用单克隆抗体的导向作用，将药物或放疗物质携带至靶器官，直接杀伤靶细胞，称为肿瘤导向治疗。另外，将放射性标记物与单克隆抗体连接，注入患者体内可进行放射免疫显像，协助肿瘤的诊断。目前单克隆抗体主要为鼠源性抗体，异种动物血清可引起人体过敏反应。因此，制备人-人单克隆抗体或人源化抗体更为重要，但此方面仍未取得明显进展。
细胞融合研究进展
细胞融合(cell fusion)，是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备，膜蛋白的研究。
过程，细胞膜有内外两层，细胞融合首先发生在外层，然后再到内层，由此就出现了两种融合通道，细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时，只出现一种融合通道，即导致融合的基因只能在病毒中找到，而在目标细胞中却找不到。但是，通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程，需要EFF-1出现在两个相互融合的细胞中。
意义，1.理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。2.融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。3.体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组，从而产生新的核外遗传系统。4.淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的制备。
实验操作（以人鼠细胞杂交为例）人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合, 人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合；第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；最
后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细胞膜上相应的抗原结合。开始,融合的细胞一半是红色, 一半是绿色。在37℃下40分钟后, 两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面呈均匀分布，这说明抗原蛋白在膜平面内经扩散运动而重新分布。这种过程不需要ATP。如果将对照实验的融合细胞置于低温(1℃)下培育, 则抗原蛋白基本停止运动。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。
应用于以下几个方面。
2. 1 用于基因定位和绘制人类基因图谱
杂种细胞中某一染色体或其片段的存在与否与细胞的某一性状表达与否相联系,从而可以实现把基因定位于某一染色体或某一区段上。1967年Weise和Green发现在人和鼠的融合细胞中,人的染色体优先丢失,并证明利用这一特点有可能对人染色体上的基因进行定位。1970年Ruddle等开始系统地用融合细胞作为实验系统来绘制人类基因图。
2. 2 用于生产树突状细胞抗肿瘤疫苗
肿瘤抗原可以肽段或完整蛋
白的形式与DCs结合,或者将肿瘤抗原基因转化进DCs中,使其内源性地表达抗原,这两种方法在抗肿瘤免疫应答中均有效,但适于免疫的肿瘤抗原及其基因难以鉴定从而限制了其应用,有实验证明用这两种方法制备的肿瘤疫苗的免疫原性不及肿瘤细胞与树突状细胞直接融合的异核细胞,融合细胞保持了DCs和肿瘤细胞的特性,并且能高效地将未知的肿瘤抗原提呈给免疫系统,今后肿瘤疫苗的研究工作将集中在疫苗的纯化上,以期用高度纯化的杂合细胞来激发更为有效和强烈的免疫应答反应,使得这种方法在临床应用中更为实际.
2. 3 用于生产单克隆抗体
使小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合形成能产生单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的杂交瘤细胞,单克隆抗体具有专一性和灵敏性,作为理论研究的工具在病原检测和疾病治疗以及食品安全领域具有广阔的应用前景。
2. 4 用于动物育种
体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer technique,SCNT)是将细胞核移植到另一细胞的细胞质中的生物技术。动物体细胞融合后,杂种细胞难以发育再生为一个个体,但借助于细胞核移植的方法将融合后杂种细胞的细胞核移入去核成熟卵内,可培育新的杂种。另外,细胞核移植技术的建立,还为目前进行的哺乳动物体细胞克隆和转基因技术打下良好的实验基础。
2. 5 用于细胞疗法
SCNT将患者的任何体细胞与去核卵细胞融合,融合子进行有丝分裂形成囊胚,囊胚的内细胞团是多能干细胞,对多能干细胞进行诱导使其定向分化可形成所需的组织和器官用于器官移植,不仅解决了器官和组织来源问题,并且也避免了宿主对外来物的免疫排斥。
人工受精及克隆
一、什么是动物克隆？
动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。发育早期的动物胚胎细胞，或成年动物的体细胞，经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后，在适当的条件下，可以重新发育成正常胚
胎。这种胚胎被移植到生殖周期相近的母体之中，可以发育成为正常动物个体。经过核移植而产生的动物，其遗传结构与细胞核供体完全相同。这种不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。
因操纵不当、医生的技术不够娴熟、仪器等原因，可能会出现以下情况：
1、卵巢过度刺激综合征：由于人工授精前要促排卵治疗，所以可能发生卵巢过度刺激综合征。
2、可能会出现异常的妊娠结局：人工授精的多胎妊娠发生率可达20%，宫外孕约2% ~8%，自然流产率为20% ~30%。
3、可能出现盆腔感染：由于要用细管将优化的精液打入子宫，会增加子宫及输卵管感染的机会。操纵时会带入细菌，处理精液时也可能导致细菌污染。
4、出血和损伤：多因宫腔插管困难或操纵粗暴所致，所以首先选择软硬适度的授精管，操纵者做到轻、稳、准，避免损伤宫颈管及子宫内膜造成出血，以免影响授精效果。
5、下腹疼痛：夫妇间新鲜精液人工授精时注入精液过快、过量，尤其是注入宫颈内精液，可诱发下腹痉挛性疼痛
克隆技术已展示出广阔的应用前景，包括以下四个方面：（1）培育优良畜种和生产实验动物；（2）生产转基因动物；（3）生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法；（4）复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源。
然而，克隆技术也存在着一些弊端。在理论上，克隆技术还很不成熟；在实践中，克隆动物的成功率还很低，生出的部分个体表现出生理或免疫缺陷，而且动物的残废率相当高并伴有早衰现象等。此外，克隆技术对伦理道德的冲击和公众对词的强烈反应也限制了克隆技术的应用。我认为，克隆技术的巨大理论意义和实用价值在于它促使科学家们加快了研究的步伐，
使克隆技术的研究与开发进入一个高潮，从而更好地为人类造福。
克隆的利和弊是
人工受精为众多的不孕不育带来了孕育的希望，使他们圆了求子梦。其利如下：
1、精子经过优化处理再进入宫腔，可为精液不液化或宫颈因素等造成的不孕者提供较公道的治疗办法。
2、不需穿刺取卵，对部分不孕症患者不失为一种简单有效且经济的方法。
你对新科技条件下出现的“借腹生子”现象赞同吗？
所谓“借腹生子”是指利用试管婴儿和胚胎移植技术，在受体母亲子宫内使胎儿发育成熟而生出的过程。（1）赞同。该措施可以帮助一些家庭解决不孕不育现象，而且可以帮助一些由于自身素质不良，如果怀胎、分娩会造成生命威胁的母亲，实现得到亲生子女的愿望。
（2）不赞同。给社会和人类伦理道德造成一定的冲击。
一克隆人利弊
论据一（好处）：美国，瑞士等国已经能利用克隆技术培植的人体皮肤进行植皮手术。科学家们预言，在不久的将来，他们还将借助克隆技术制造出人的耳朵、软骨、肝脏，甚至心脏，动脉等人体组织和器官，供医院临床使用。
论据二（好处）：在繁殖许多有价值的基因方面，克隆技术是也有大用武之地。例如，在基因工程操作中，科学家们为了让细菌等微生物“生产”出名贵的药品，如有希望使侏儒症患者重新长高的生长激素以及能抗多种病毒感染的干扰素等等，分别将一些相应的人体基因转移到不同的微生物细胞中，再设法使这些微生物细胞大量繁殖。与此同时，人体基因数目也随着微生物的繁殖而增加。在人体基应被大量克隆时，微生物也随之大量的“生产”出人们所需要的名贵药品了。
论据三（好处）：在基础生命科学方面，克隆技术使得对基因功能研究从以往只能在小鼠身上进行，到现在在多种动物身上均可得到实现，这有利于更加清晰地揭示基因功能和生命本质；克隆技术提供了研究哺乳动物细胞发育全能型以及核质关系最有效的手段之一；克隆技术可以克隆出各种濒临珍稀动物，从而提供基因型完全一致的实验动物，这有利于找到疾病的有效治疗方法，揭示发病的机制，并有助于抗衰老及其机制的研究。
总结（好处）：
一、无排斥反应的器官移植。
二、濒危物种保护。
坏处：
一、克隆技术现在还不成熟，克隆人可能有很多先天性生理缺陷。
二、克隆人的身份难以认定，他们与被克隆者之间的关系无法纳入现有的伦理体系。
三、人类繁殖后代的过程不需要两性共同参与，将对现有的社会关系、家庭结构造成难以承受的巨大冲击。
四、克隆技术有可能被滥用，成为恐怖分子的工具。
五、从生物多样性上来说，大量基因结构完全相同的克隆人，可能诱发新型疾病的广泛传播，对人类的生存不利。
六、克隆人可能因自己的特殊身份而产生心理缺陷，形成新的社会问题。
从道德价值的角度：
一、从社会伦理角度，克隆人是对人类发展的一种过强的干预，可能影响人种的自然构成和自然发展。
二、从家庭伦理角度，会加剧家庭多元化倾向，瓦解正常的人伦秩序，改变人的亲系关系，丧失基本的归属感。
三、从性伦理学角度，完全改变了人类自然的、基于性爱的生育方式，使人口的产生与性爱分离，破坏人类的感情。
四、从生命伦理学角度，破坏了人拥有独特基因的权利，有可能导致人种的退化，还会使正常的生与死的观念发生动摇。
从生态层面：
克隆技术导致的基因复制，会威胁基因多样性的保持，生物的演化将出现一个逆向的颠倒过程，即由复杂走向简单，这对生物的生存是极为不利的。
从文化层面：
克隆人是对自然生殖的替代和否定，打破了生物演进的自律性，带有典型的反自然性质。与当今正在兴起的祟尚天人合一、回归自然的基本文化趋向相悖。
从哲学层面：
通过克隆技术实现人的自我复制和自我再现之后，可能导致人的身心关系的紊乱。人的不可重复性和不可替代性的个性规定因大量复制而丧失了唯一性，丧失了自我及其个性特征的自然基础和生物学前提。
二克隆利弊
克隆，其利和弊是
利:1) 克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。2) 克隆实验的实施促进了遗传学的发展，为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景。3) 克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。4) 克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生能力，但干细胞可以修复神经系统损伤。5) 在体外受精手术中，医生常常需要将多个受精卵植入子宫，以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能提供一个卵子用于受精。通过克隆可以很好地解决这一问题。这个卵细胞可以克隆成为多个用于受精，从而大大提高妊娠成功率。弊:1) 克隆将减少遗传变异，通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因，同样的疾病敏感性，一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。2) 克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体，而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰，干扰了自然进化过程. 3) 克隆技术是一种昂贵的技术，需要大量的金钱和生物专业人士的参与，失败率非常高。4) 转基因动物提高了疾病传染的风险。5) 克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。6) 克隆技术也可用来创造“超人”，或拥有健壮的体格却智力低下的人。而且，如果克隆技术能够在人类中有效运用，男性也就失去了遗传上的意义。7) 克隆技术对家庭关系带来的影响也将是巨大的。一个由父亲的DNA克隆生成的孩子可以看作父亲的双胞胎兄弟，只不过延迟了几十年出生而已。8）不少学者还担心克隆人的出现，会使人们有目的的选择性别，那么性别比例失调将成为一大社会问题。
胚胎干细胞及利弊:
一、胚胎干细胞(ES细胞)是指当受精卵分裂发育成囊胚时内细胞团的细胞, 是一种高度未分化细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。
二、胚胎干细胞的应用前景
1.克隆动物：胚胎干细胞在理论上讲可以无限传代和增殖而不失其正常的二倍体基因型和表现型,所以可以对其进行体外培养至早期胚胎进行胚胎移植,在短期内可获得大量基因型和表现型完全相同的个体,这在保护珍稀野生动物方面有着重要意义。
2.转基因动物：利用转基因技术,将控制人们所需性状的基因导入到胚胎干细胞中,在体外适宜条件下进行细胞培养,在对其诱导分化,产生一个新的个体即转基因生物体,让其表现人们所需要的性状。
3.器官移植：对胚胎干细胞进行体外培养,经过诱导分化,形成相应的组织和器官,可以用于组织器官的移植,使体内病变的组织器官得以修复并恢复正常功能。而且用自体的细胞进行培养后移植还可以避免异体移植所带来的免疫排斥问题。
4.胚胎干细胞是研究体外细胞分化的理想材料：ES细胞在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态。
5.胚胎干细胞在哺乳动物个体发育中的研究。
6.胚胎干细胞用于治疗疾病：目前,胚胎干细胞已经在多种疾病的治疗中发挥着重要的作用。如帕金森氏综合症。
三、胚胎干细胞应用中的争议：研究和利用胚胎干细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。然而,人类胚胎干细胞的研究工作引起了全世界范围内的很大争议,支持者认为，在药物发现及筛选,细胞及基因治疗方面,应用前景无可限量，有望使许多医学难题如糖尿病、帕金森氏病、慢性心力衰竭等迎刃而解,从而提高人的生存质量,为患者带来福音。可以利用这项研究诱导胚胎干细胞分化成组织器官进行自体器官移植,以解决在临床医学上存在的器官移植所带来的免疫排斥问题,是一种挽救生命的慈善行为,是科学进步的表现,应该对这项研究予以支持。而反对者则认为,支持进行胚胎干细胞研究就等于是怂恿他人“扼杀生命”,这是不道德的,违反伦理的。进行胚胎干细胞研究就必须在胚胎上“大动手脚”,破坏胚胎,而胚胎也
是人尚未成形时在子宫的生命形式。如果这样做就是间接牺牲了一个未来的小生命,所以会惹来很多伦理上的反对和斥责。更有科学家认为,在培养准备阶段,哪怕是微小的变化都可能导致对移植后的细胞质量造成极大的影响。
好处:在移植治疗方面，其最大优势是可以克服异体器官及成体干细胞技术的各类缺点，尤其是避免排异；在药物发现及筛选，细胞及基因治疗方面，应用前景无可限量。有望使许多医学难题如糖尿病、帕金森氏病、慢性心力衰竭等迎刃而解，从而提高人的生存质量，为患者带来福音. 通过对胚胎干细胞的研究，人类还可以逐步了解自身发育的过程，把握人类生命的底蕴。此外，胚胎干细胞技术潜在的市场价值、社会价值同样深不可测.
弊端:第一，用胚胎干细胞作研究有悖于生命伦理。胚胎干细胞获得的一个必经步骤是破坏胚胎。而胚胎自细胞融合那一刻起，就是生命形式的雏形, 把胚胎当作工具破坏其完整性。无异于扼杀人的生命. 第二，由于胚胎干细胞研究蕴含着巨大的商业潜力，可能导致一些贪图暴利的集团公司会资助体外受精获得囊胚，支持人工流产获得胎儿组织，那就极有可能导致“人工流产”和“人胚买卖”的泛滥。第三，参照生态伦理学观点，尽管人类是地球的强者，但人类仍是地球生态系统的一部分，人类的所作所为，必须对整个系统负责。而胚胎干细胞研究极有可能导致“克隆人”的出现.
胚胎工程
一、定义：主要是对哺乳动物的胚胎进行某种工程技术操作，然后让其继续发育获得人们所需要的成体动物的一种技术。
胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。
二、应用：这些技术进一步挖掘动物的繁殖潜力，为优良牲畜的大量繁殖，稀有动物的种族延续提供有效的解决办法。在畜牧业和制药业等领域发挥重要的作用，具有光明的应用前景。
1.胚胎移植
意义：a充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；b缩短雌性优良个体本身的繁殖周期
C 提高繁殖效率，后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍
胚胎移植是将良种雌性动物配种后的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育成为新个体，所以也称作借腹怀胎。其中，提供胚胎的个体为“供体”（doner），接受胚胎的个体为“受体”(recipient)。胚胎移植实际上是产生胚胎的供体和孕育胚胎的受体分工合作共同繁育后代的过程。
胚胎移植技术程序及操作供体和受体的选择超数排卵处理供体母畜的配种胚胎的收集胚胎的检查胚胎的保存与培养胚胎的移植供体和受体的术后观察。
胚胎移植技术的利用提高良种母畜繁殖力简化良种引进方法降低种质资源保存费用加速育种进程利于防疫促进生殖生理理论与胚胎生物技术的发展。
胚胎移植被认为是继家畜人工授精技术之后家畜繁殖领域的第二次革命。人工授精技术极大地提高了优秀种公畜的利用率，胚胎移植技术则极大地增加了优秀母畜的后代数，挖掘了母畜的遗传和繁殖潜力。在畜牧业生产与科研中，胚胎移植技术主要用于以下几个方面：（１）增加进口纯种畜和优秀个体的后代数。用于纯繁扩群，增加种畜的数量。（２）缩短家畜的改良周期，加速品种改良。纯种牛的胚胎移植给黄牛，可将15－20年的改良周期变为
一年，大幅度地提高了家畜的遗传品质和生产性能。（３）用于单胎动物的育种，可缩短选择种牛的年限。如牛的MOET育种方案比后裔测定育种方法遗传进展快。（４）移植产双胎，提高生产效率。对肉用家畜尤其有价值。同时移植双胚或双半胚或在配种后第7天前后移植一枚胚胎，可获得30%以上的双犊率。（５）代替种畜的引进。（６）保存品种资源。保存于具有优良遗传特性的家畜胚胎库、基因库，保护濒临灭绝的家畜和动物品种。（７）用于一些疾病的诊断和治疗。（８）发展家畜生物技术的研究手段。这项技术是胚胎分割、嵌合、核移植、体外受精和转基因动物等家畜生物技术不可缺少的技术革新手段，也可用于生物学和医学的研究。特别值得一提的是，通过胚胎移植产下的后代可从本地母牛获得免疫，疾病抵抗力增强，胚胎传染疾病的危险性减小。目前胚胎移植技术被越来越多地用于牛的引种和牛群的品种改良。
胚胎移植存在的主要问题胚胎来源技术人员匮乏胚胎冷冻问题诸多胚胎移植费用高羊、猪等动物手术操作限制受体重复使用。
因的动物，称为转基因动物。转基因动物表达系统，包括外源基因、表达载体和受体细胞等，基因组的转移则是细胞核移植和动物克隆技术，人工合成与设计基因、全基因乃至基因组的转基因技术是合成生物学。
转基因动物是指将特定的外源基因导全动物受精卵或胚胎，使之稳定整合于动物的染色体基因组并能遗传给后代的一类动物。
转基因动物所有的细胞均整合有外源基因，并具有将外源基因遗传给子代的能力，若动物只有部分组织细胞整合有外源基因，则称为嵌合体动物，这类动物只有在整合了外源基因的“部分组织细胞”恰为生殖细胞时，才能将其携带的外源基因遗传给子代。
二、基因转移方法
哺乳类动物基因转移方法，是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射等方法注入实验动物的受精卵(或着床前的胚胎细胞)，然后将此受精卵(或着床前的胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物。
根据外源基因导入的方法和对象的不同，目前制作转基因动物的方法主要有显微注射法、反转录病毒法、胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)法、电脉冲法、精子载体导入法等。
转基因动物的应用
一、生命现象的基础理论研究
1.发育生物学的研究:转基因动物可用于观察目的基因在胚胎不同发育阶段的特异性表达、关闭及调控机制，了解调控顺序(如增强子、启动子)在组织特异性表达中的作用，例如人肾素基因在小鼠体内的特异性表达可能与该基因的5’端侧翼顺序有关。此外，转基因动物还可用于识别动物发育过程中的基因(包括内源基因)及其活动，也可测出与动物发育相关的未知基因的表达特性。
2.遗传学研究:利用自然突变或人为修饰的基因作为外源基因，构建转基因动物，研究导人的异常基因的表型效应，可以了解基因站构和功能的盖系，还可用于基因组印迹分析、遗传缺陷的矫正等。
二、医学研究
1.心血管疾病的研究:各种调节心血管功能的因子如转脂蛋白、转纤维蛋白溶酶原等都可通过转基因动物来了解其生理功能及作用，建立如动脉粥样硬化、突发性高血压、静脉闭塞等
转基因动物模型。
肿瘤学研究
2.肿瘤基因的发现是近10年来肿瘤学研究的重大突破，现已发现乳腺癌基因等100多个肿瘤基因。实验证明，各种脊椎动物都携带肿瘤基因，在通常情况下并不引起细胞癌变，只有在某些条件下才能被激活使癌细胞增生而导致癌变。建立带有肿瘤基因的转基因动物可了解哪些组织对肿瘤基因转化活性敏感、肿瘤形成与其基因的关系、肿瘤基因生长分化影响等等。
3.遗传病研究 :通常是将功能正常的外源基因导入动物体的靶细胞内，用来弥补缺陷的基因，改变患病细胞的遗传物质，进行基因治疗。
4.免疫学研究:巴宾耐特(Babinet)发现虽然转基因小鼠产生HBsAg，但在6个月内没有任何病理变化，表现为一种持续的带病毒状态。这些结果表明：乙型肝炎患者的肝细胞损伤不是由HBV的HBsAg表达直接引起，而是通过对肝细胞膜上的病毒抗原发生免疫反应造成的。因此，可以用转基因小鼠模型来研究免疫耐受与肝细胞损伤的关系以探讨发病机制。此外，转基因小鼠还为研究第l和第Ⅱ类主要组织相容性抗原的功能提供了新手段。
三、改良和培育动物新品种：经典的遗传育种方法要在同种或亲源关系很近的种间才能进行，并且受到变异或突变的限制，而使用重组DNA技术在短时间内就可使亲缘关系很远的种间遗传信息进行交换和重组。另外由于转基因动物可以稳定地整合外源基因，并在合适的组织表达，还能将这种性状遗传给后代，这样就可以生产出生长快、产肉、产毛、产奶更多而耗料极少的转基因家畜，为家畜改良提供一条重要的途径。
四、研制和生产生物活性物质：将在医学领域中有价值的生物活性蛋白基因导人家畜或家禽的受精卵，在发育成的转基因动物体液或血液、乳、尿、腹水中收获基因产物，便可获得大量有价值的生物活性蛋白，通常将此动物称为“动物生物反应器”。其中以乳汁为最理想的分泌部位。目前，tPA(组织型纤溶蛋白元激活因子)已在转基因小鼠的乳汁中得到了表达，成为治疗血栓的理想药物。β-乳球蛋白在转基因小鼠中可表现出羊奶的主要成分——β-乳糖球蛋白。此外，凝血因子Ⅳ和α1-抗胰蛋白酶也在转基因绵羊中得到了表达。其他如乙型肝炎病毒抗原、卵泡刺激素、促黄体生成素等也都能按需要利用转基因动物生产，为医药、食品及畜牧业的发展开辟了极为广阔的天地。
动物生物反应器
动物生物反应器是利用转基因活体动物，高效表达某种外源蛋白的器官或组织，进行工业化生产功能蛋白质的技术。动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。即，把人体相关基因整合到动物胚胎里，使生出的转基因动物血液中，或长大后产生的奶汁中，含有人类所需要的不同蛋白质。这是当前生物技术的尖端和前沿研究项目。
膜管状器官组织工程
气管、血管、食管、胃肠道、输尿管、膀胱、尿道、阴道等，在组织结构上具有相同的特点，即内有(管状)空腔,此类器官可统称为“膜管状器官”膜管状器官的组织三维结构相对简单，因而此类器官的组织工程化构建相对容易，较实质性器官(肝脏、肾脏等)的研究更适合目前学科的较快发展水平。迄今为止，组织工程化血管、食管、输尿管、膀胱、尿道等组织已在具有完全免疫功能的自体哺乳动物体内成功构建，其构建的组织在形态、结构、生化组织成分与生物力学强度等方面接近正常组织…
1 膜管状器官组织工程一般方法及进展
膜管状器官组织工程需将种子细胞种植于管状支架材料上或种植细胞后制备成管状，再将此复合组织于体外、体内或置于生物反应器内培养，随着细胞增殖，支架降解，形成膜管状组织。其内容包括：种子细胞的获取和扩增，可降解支架的研制和改进，生物反应器的设计应用以及对各种细胞生物学特性和复合组织构建培养的全程调控。
目前，应用较成熟的种子细胞为自体同源组织细胞，但由于体外培养时其增殖能力不强，功
能易老化导致所能获得的细胞数量不能满足构建器官的需求。而干细胞因具有高度的自我更新，增殖能力及多向分化潜能，有望解决这一问题，渐成为研究的热点。胚胎干细胞及包含骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells，BMSCs)在内的多种成体干细胞已用于膜管状器官组织工程。此外，对种子细胞进行基因修饰以调控其增殖、分化及功能表达的研究亦与日俱增。
支架材料的表面组成、微观结构、排列方式等对细胞的迁移、黏附、增殖、定向分化、基质分泌以及组织形成等一系列生物活动均会产生重要影响。因此，应用于膜管状器官组
织工程的支架材料应是表面性能与机械特性并重。天然材料，如壳聚糖、胶原蛋白、弹性蛋白及小肠黏膜下层(SIS)、心包、筋膜、血管、膀胱等组织的脱细胞基质、羊膜等。脱细胞基质材料本身包含许多生物信息，能提供细胞所需的信号，具有与细胞亲和力强，能为细胞的生长、增殖、分化及功能发挥提供近似体内的发生、发育的细胞外基质支架条件，能使
细胞聚集成组织，控制组织结构，调节细胞表型等特点，但机
展望
膜管状器官组织工程的临床应用前景广阔，这方面研究已经取得十分显著的成绩，多种组织也已成功构建，但要继续发展，尚有许多问题亟待解决。如：种子细胞培养分化方法的改进、智能型生物材料的研制、组织构建技术的改良、促进组织工程移植物的血管化等。
组织工程应用于临床还存在哪些障碍,如何解决?
尽管组织工程研究与临床应用取得了很大成绩，从基础科学及临床应用的角度，仍然有很多问题需要进行深入研究。
（一）种子细胞的进一步研究
1. 细胞来源研究（自体细胞、同种异体细胞、胚胎干细胞、异种细胞）
2. 细胞培养技术（快速扩增细胞的形态、功能检测，生长因子的应用，细胞生长与应力的关系）
（二）支架材料的研究：现在用于研究和临床应用的支架材料，均不完全具备理想支架材料的全部条件。因此支架材料的研究及其优选，成为今后组织工程研究的重要问题之一。不仅要研究单一成分材料，更要研究复合材料及生物衍生材料。
（三）细胞与支架材料的相互作用：目前对细胞与支架材料的相互作用研究还停留在细胞水平，涉及分子水平、蛋白水平、基因水平的研究还不多，而这又是工程化组织临床应用安全性需要阐明的基础理论。
（四）动物体内植入试验：不仅在无免疫功能的裸鼠体内植入，也需要在有免疫功能的小动物、大动物进行体内植入实验。最好能在非人高等哺乳动物中进行体内植入试验，其获取的结果更接近人体的实际情况。无论动物体内试验结果有多好，还是与人体的实际情况有差别，因此在获得扎实的研究结果之后，早日进行临床试用。
（五）临床验证研究：在制定严格的实施计划，充分的安全保障，病人知情的情况下，设计随机双盲临床试验。应设计阳性对照组，不能使用安慰剂或阴性对照组。
（六）检测及评价：由于不同组织所采用的种子细胞和支架材料不同，其检测方法及评价标准也应有所不同。需制定完善的人体检测技术及评价标准。
（七）产业化研究：对于组织工程产品的产业化，需研究标准化批量生产的工艺技术等，同时研究组织工程产品的审批程序。制定管理制度及相应的政策法规。
人工染色体
人工染色体(英文：artificial chromosome)指人工构建的含有天然染色体基本功能单位的载体系统。包括酵母人工染色体（YAC）、细菌人工染色体（BAC）、P1派生人工染色体（PAC）、哺乳动物人工染色体（MAC）和人类游离人工染色体（HAEC）。人工染色体为基因组图谱制作、基因分离以及基因组序列分析提供了有用的工具。
原理
天然染色体基本功能单位包括复制起始点(replication origin)、着丝粒(centromere)和端粒(telomere)。复制起始点，保证了染色体复制，着丝粒保证了染色体分离，端粒封闭了染色体末端，防止粘附到其他断裂端，保证了染色体的稳定存在[1]。
人们为了克隆大片段DNA，利用DNA体外重组技术分离了天然染色体的基本功能元件并将它们连接起来，从而构成了人工染色体。相比于其他复制子而言，染色体要大得多[2]。
当前转基因技术已成为一种成熟的技术在生物学实验中广为应用然而受载体容量的限制对一些大基因或多个基因的操作仍很困难所幸的是在质粒、YAC、BAC的基础上现在又出现了一种全新的载体即人类人工染色体（HAC）。HAC由三个单元组成：即端粒着丝粒和复制起点。
一具有以下优点: (1))能携带大片段DNA或染色体片段可以包含完整的基因或多个基因的载体包括基因的所有外显子和附近染色体区域的调控区(2)不整合到基因组中从而不产生宿主基因组本身的插入突变和转基因沉默等现象这是其他转基因载体所无法避免的(3)更为重要的是,HAC 以单拷贝的形式存在于细胞中所携带的基因是人类基因组DNA, 包含调节基因表达的所有元件这些都为目的基因提供了一个与其在正常染色体上一致的环境保证了转基因可以模拟在正常细胞中的时间性和空间性的表达也就是说转基因可以在人或动物的发育和细胞分化的不同状态下进行表达或关闭
二应用及其发展前景
(1)纠正细胞的代谢缺陷
已有两个研究小组用他们构建的含有编码HPRT1整个40kb基因包括调节区域的HAC ,成功地纠正了HPRT 缺失的HT 1080 细胞的代谢缺陷
2002年,Auriche等制作了第一个包含治疗性基因的HAC. 他们选择包含完整的CFTR 基因位点及其上游调控序列的YAC –yCFIRES, 用质体融合法将其与含有MC 1的CHO细胞融合结果检测到了CFTR基因的转录及其表达的蛋白. 这些转基因实验的成功表明用HAC进行体细胞的基因治疗是可行的但仅局限在细胞水平上
(2)通过染色体克隆系统生产转基因动物
可用于制备转基因家畜, 建立人类疾病的转基因动物模型
三研究存在的问题
（1）关于HAC的结构
●成功构建不同类型的HAC 为研究人染色体的结构和功能带来了新的视野和新的观点但究竟哪一种更适合作为基因表达的载体呢？
用组装法构建的HAC 由于构建的不可控性和结构上的复杂性而很少使用；
●微小人工染色体的优点是通过定位截短获得结构相对明确最常被研究者采用但它也有
生理学试题及答案完整版
生理学复习题 一、填空题 1. 腺垂体分泌的促激素分别是、、、 和。 2. 静息电位值接近于平衡电位, 而动作电位超射值接近于平衡电位。 3．视近物时眼的调节有、和。 4.影响心输出量的因素有、、 和。 5. 体内含有消化酶的消化液有、、 和。 6.神经纤维传导兴奋的特征有、、 和。
7.影响组织液生成与回流的因素有、、和 。 8．影响肺换气的因素 有、 、、 、、和。 9. 胃与小肠特有的运动形式分别为和。 10.影响能量代谢的形式有、、和 。 11. 细胞膜物质转运的形式有、、、 和。 二、单项选择题 1．最重要的吸气肌是 A．膈肌 B．肋间内肌 C．肋间外肌 D．腹肌 E．胸锁乳
突肌 2. 保持体温相对稳定的主要机制是 A.前馈调节 B.体液调节 C.正反馈 D.负反馈 E.自身调节 3．肾小管重吸收葡萄糖属于 A.主动转运 B.易化扩散 C.单纯扩散 D.出胞 E.入胞 4. 激活胰蛋白酶原最主要的是 A．Na+ B．组织液C．肠致活酶D．HCl E．内因子 5. 关于胃液分泌的描述, 错误的是? A. 壁细胞分泌内因子 B. 壁细胞分泌盐酸 C.粘液细胞分泌糖蛋白 D.幽门腺分泌粘液 E主细胞分泌胃蛋白酶 6. 营养物质吸收的主要部位是 A.十二指肠与空肠 B. 胃与十二指肠 C.回肠和空肠 D.结肠上段 E.结肠下段 7.某人的红细胞与A型血清发生凝集, 该人的血清与A型红细胞不发生凝集, 该人的血型是 A A型 B. B型 C.AB型 D. O型 E. 无法判断
8. 受寒冷刺激时, 机体主要依靠释放哪种激素来增加基础代谢 A.促肾上腺皮质激素 B. 甲状腺激素 C.生长激素 D.肾上腺素 E.去甲肾上腺素 9. 关于体温生理波动的描述, 正确的是 A.变动范围无规律 B.昼夜变动小于1℃ C.无性别差异 D.女子排卵后体温可上升2℃左右 E.与年龄无关 10. 血液凝固的基本步骤是 A．凝血酶原形成-凝血酶形成-纤维蛋白原形成 B．凝血酶原形成-凝血酶形成-纤维蛋白形成 C．凝血酶原形成-纤维蛋白原形成-纤维蛋白形成 D．凝血酶原激活物形成-凝血酶原形成-纤维蛋白原形成 E．凝血酶原激活物形成-凝血酶形成-纤维蛋白形成 11.下列哪项 CO2分压最高 A 静脉血液 B 毛细血管血液 C 动脉血液 D 组织细胞 E 肺泡气 12.在神经纤维产生一次动作电位后的绝对不应期内 A. 全部Na+通道失活 B.较强的剌激也不能引起动作电位 C.多数K+通道失活 D. 部分Na+通道失活 E.膜电位处在去
生物化学期末考试试题及答案范文
《生物化学》期末考试题 A 一、判断题（15个小题，每题1分，共15分）( ) 2、糖类化合物都具有还原性( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() 二、单选题（每小题1分，共20分） 1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连：( ) A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个：( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是：( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时，每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) Ａ、１Ｂ、２C、3 Ｄ、４．E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP？( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是( )
生物化学试题带答案
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的
生物化学测试题与答案
生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？B(每克样品*6.25) A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E ．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是： E A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸D．色氨酸 E ．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是： D A．盐键 B ．疏水键 C ．肽键D．氢键E．二硫键( 三级结构) 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是： B A．天然蛋白质分子均有的这种结构 B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是： E A．分子中必定含有辅基 B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定： C A．溶液pH值大于pI B．溶液pH值小于pI C．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4 E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于： D A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是： D A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解 D．生物学活性丧失E．容易被盐析出现沉淀
9．若用重金属沉淀pI 为8 的蛋白质时，该溶液的pH值应为： B A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？E A．半胱氨酸 B ．蛋氨酸C．胱氨酸D．丝氨酸 E ．瓜氨酸题 选择 二、多项 1．含硫氨基酸包括：AD A．蛋氨酸B．苏氨酸C．组氨酸D．半胖氨酸2．下列哪些是碱性氨基酸：ACD A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是：ABD A．苯丙氨酸 B ．酪氨酸C．色氨酸D．脯氨酸 4．关于α- 螺旋正确的是：ABD A．螺旋中每3．6 个氨基酸残基为一周 B．为右手螺旋结构 C．两螺旋之间借二硫键维持其稳定（氢键） D．氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5．蛋白质的二级结构包括：ABCD A．α- 螺旋 B ．β- 片层C．β-转角D．无规卷曲 6．下列关于β- 片层结构的论述哪些是正确的：ABC A．是一种伸展的肽链结构 B．肽键平面折叠成锯齿状 C．也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D．两链间形成离子键以使结构稳定(氢键) 7．维持蛋白质三级结构的主要键是：BCD A．肽键B．疏水键C．离子键D．范德华引力 8．下列哪种蛋白质在pH5 的溶液中带正电荷？BCD(>5) A．pI 为4．5 的蛋白质B．pI 为7．4 的蛋白质 C．pI 为7 的蛋白质D．pI 为6．5 的蛋白质 9．使蛋白质沉淀但不变性的方法有：AC A．中性盐沉淀蛋白 B ．鞣酸沉淀蛋白 C．低温乙醇沉淀蛋白D．重金属盐沉淀蛋白 10．变性蛋白质的特性有：ABC
生理学试题90045
生理学试题(卷二) 专业＿＿＿班级＿＿＿姓名＿＿＿学号＿＿＿ 一、名词解释10分（5个名词，每题2分） 1、兴奋性 2、血细胞比容 3、房室延搁 4、肾糖阈 5、肺活量 二、填空题10分（20个空，每空0.5分） 1、在中枢神经系统参与下，机体对刺激作出有规律的反应称_______ 。 2、静息状态下，细胞膜对__有较大的通透性，所以又称___平衡电位。 3、柠檬酸钠能防止血液凝固是因为它除去了血浆中的________。 4、衡量组织兴奋性常用的指标是阈值，阈值越高则表示兴奋性_______ 。 5、骨骼肌收缩舒张基本功能单位___。肌细胞收缩，暗带变__，明带变__ 。 6、内环境的相对稳定状态称为_______。 7、红细胞生成的主要原料是_______和_______。 8、心肌细胞的生理特性有_______、_______、_______和_______。 9、心脏中传导速度最快的是_______。 10、肺通气的原动力来自_______ 。 11、牵张反射包括_______ 和_______ 两个反射。 12、外周阻力增加引起动脉血压升高，其主要表现为_______压升高。 三、是非判断题10分（10个题，每题1分） 1、外源性凝血是由因子Ⅲ启动的，这种因子存在于组织中。( ) 2、血浆胶体渗透压的相对稳定对于维持细胞内外水平衡极为重要。( ) 3、人在清醒、安静状态下的能量代谢称为基础代谢。( ) 4、所有器官都接受交感和副交感神经的双重支配。( ) 5、有髓与无髓神经纤维都通过局部电流传导动作电位，传导速度相同。( )
6、骨骼肌收缩时，长度可以不缩短，而仅发生肌张力的变化。( ) 7、减压反射是维持动脉血压相对恒定调节机制中的最重要反射。 8、严重缺氧时呼吸中枢神经元兴奋性升高，呼吸增强，体现调节作用。( ) 9、视近物时瞳孔缩小，此反射中枢在大脑皮层。( ) 10、排泄是指将机体代谢的产物，包括食物残渣等排出体外的过程。( ) 四、简答题12分（4个题，每题3分） 1、简述影响心输出量的因素。 2、何谓呼吸？呼吸由哪几个环节组成？ 3、简述胆碱能纤维分布。 4、为什么小肠是营养物质的主要吸收部位？ 五、单项选择题40分（40个题，每题1分，每题包括4个备选答案） 1、下列哪些活动属于条件反射( ) A.看到酸梅时引起唾液分泌 B.食物进入口腔后引起胃液分泌 C.大量饮水后尿量增加 D.寒冷环境下皮肤血管收缩 2、关于神经纤维静息电位的形成机制，下述哪项是错误的( ) A. 细胞外K＋浓度小于细胞内 B.细胞膜对Na＋有很小的通透性 C.细胞膜主要对K＋有通透性 D.细胞外浓度K＋升高，会使静息电位值加大 3、突触前抑制的产生是由于( ) A. 突触前轴突末梢去极化 B.突触前轴突末梢超极化
生物化学期末考试试卷与答案
安溪卫校药学专业生物化学期末考试卷选择题 班级 _____________姓名 _____________座号 _________ 一、单项选择题（每小题 1 分，共30 分） 1、蛋白质中氮的含量约占 A 、 6.25% B 、10.5%C、 16% D 、19%E、 25% 2、变性蛋白质分子结构未改变的是 A 、一级结构B、二级结构C、三级结构 D 、四级结构E、空间结构 3、中年男性病人，酗酒呕吐，急腹症，检查左上腹压痛，疑为急性胰腺炎，应测血中的酶是 A 、碱性磷酸酶 B 、乳酸脱氢酶C、谷丙转氨酶D、胆碱酯酶E、淀粉酶 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 A 、能加速化学反应速度 C、具有高度的专一性 E、对正、逆反应都有催化作用B、能缩短反应达到平衡所需的时间D、反应前后质和量无改 5、酶原之所以没有活性是因为 A 、酶蛋白肽链合成不完全C、酶原是普通的蛋白质E、是已 经变性的蛋白质B、活性中心未形成或未暴露D、缺乏辅酶或辅基 6、影响酶促反应速度的因素 A 、酶浓度B、底物浓度C、温度D、溶液pH E、以上都是 7、肝糖原能直接分解葡萄糖，是因为肝中含有 A 、磷酸化酶 B 、葡萄糖 -6-磷酸酶C、糖原合成酶D、葡萄糖激酶E、己糖激酶 8、下列不是生命活动所需的能量形式是 A 、机械能B、热能C、 ATP D、电能E、化学能 9、防止动脉硬化的脂蛋白是 A、CM B 、VLDL C、 LDL D、 HDL E、 IDL 10、以下不是血脂的是 A 、必需脂肪酸 B 、磷脂C、脂肪D、游离脂肪酸E、胆固醇 11、一分子软脂酸在体内彻底氧化净生成多少分子ATP A、38 B、 131 C、 129 D、146 E、 36 12、没有真正脱掉氨基的脱氨基方式是 A 、氧化脱氨基B、转氨基C、联合脱氨基D、嘌呤核苷酸循环E、以上都是 13、构成 DNA 分子的戊糖是 A 、葡萄糖B、果糖C、乳糖 D 、脱氧核糖E、核糖 14、糖的有氧氧化的主要生理意义是： A 、机体在缺氧情况下获得能量以供急需的有效方式 B 、是糖在体内的贮存形式 C、糖氧化供能的主要途径 D 、为合成磷酸提供磷酸核糖 E、与药物、毒物和某些激素的生物转化有关 15、体内氨的主要运输、贮存形式是 A 、尿素B、谷氨酰胺C、谷氨酸 D 、胺E、嘌呤、嘧啶 16、DNA作为遗传物质基础，下列叙述正确的是 A 、 DNA 分子含有体现遗传特征的密码 B 、子代 DNA 不经遗传密码即可复制而成
高级生物化学历年试题及答案
2010年高级生化考试题 蛋白质组学：指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴科学，其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。 蛋白质组：一个细胞或组织或机体所包含的所有蛋白质，现定义为基因组表达的全部蛋白质。具有三种含义：一个基因组、一种生物、一种细胞所表达的全部蛋白质。 疏水作用层析：就是根据蛋白质表面的疏水性差别发展起来的一种纯化技术。在疏水作用层析中，不是暴露的疏水基团促进蛋白质与蛋白质之间的相互作用，而是连接在支持介质（如琼脂糖）上的疏水基团与蛋白质表面上暴露的疏水基团结合。 DNA的三级结构：DNA分子通过扭曲和折叠形成的特定构象。核酸的三级结构反映了对整体三维形状有影响的相互作用，包括不同二级结构元件间的相互作用，单链与二级结构间的相互作用以及核酸的拓扑特征。 DNA的四级结构： 共价催化：在酶催化反应过程中，酶与底物以共价键结合成中间物过滤态以加速反应。即在催化时，亲核催化剂或亲电催化剂能分别放出点子或汲取电子，并作用于底物的缺电子反应中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价键中间复合物，降低反应活化能，使反应加速。 Ks型不可逆抑制剂：这类抑制剂主要作用于酶活性部位的必须基团，但也作用于酶非活性部位，取决于抑制剂与酶活性部位必须基团在反应前形成非共价络合物的解离常数以及与非活性部位同类基团形成非共价络合物的解离常数之比，即Ks的比值，故称为Ks型不可逆抑制剂。 Kcat型不可逆抑制剂：这类抑制剂不但具有与天然底物相类似的结构，而且本身也是酶的底物，可被酶催化而发生类似底物的变化。但这类抑制剂还有一种潜伏性的反应基团，这种基团可因酶的催化而暴露或活化，作用于酶活性中心或辅基，使酶共价共价修饰而失活。 Ks分段盐析法：在一定的pH值和温度条件下，改变盐的离子强度I值，使不同的溶质在不同的离子强度下有最大的析出，此种方法称为Ks分段盐析法。 β分段盐析：保持溶液的离子强度不变，改变溶液的pH值和温度，使不同的溶质在不同的PH值和温度条件下台最大的析出，此种方法称为β分段盐析法。 cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 穿梭载体(shuttle vector)：是指含有两个亲缘关系不同的复制子，能在两种不同的生物中复制的。这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因,还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择标记性状,具有多克隆位点.通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增克隆的基因,在酵母菌中用于基因表达分析. 后生遗传：指通过遗传而产生的基因表达修饰，且不能被逆转，此类遗传改变主要指染色体结构的改变和DNA甲基化状态的改变。 对角线电泳：用于分析混合物中某一组分对某些化学处理或光处理后变化的双向电泳技术。样品加样后先从一个方向进行电泳分离，经化学或光处理后，再以与第一次电泳垂直方向进行第二次电泳分离，则经过处理未被修饰的组分皆位于电泳图谱的对角线上。 化学酶工程：也称初级酶工程是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶及人工模拟酶的研究和应用。 生物酶工程：是用生物学方法，特别是基因工程、蛋白质工程和组合库筛选法改造天然酶，创造性能优异的新酶；它是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。 酶提取的回收率：每次提纯后酶制剂总活力与提取液的总活力的百分比。 1,miRNA和siRNA，及其功能（网上搜索所得） SiRNA的主要特征：长约21到23nt ；双链的3’端各有2个或3个突出的核苷酸；5’端磷酸化，3’端为自由的-OH基团。siRNA可作为一种特殊引物，在RNA指导的RNA聚合酶作用下，以靶mRNA为模板合成dsRNA，后者可被降解形成新的siRNA，新生成的siRNA又可进入上述循环。这种过程称为随机降解性多聚酶链反应。MicroRNA (miRNA)：是含有茎环结构的miRNA前体，经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子（~21-23个核苷酸）。MiRNA，以及miRISCs（RNA-蛋白质复合物）在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能，miRNA被认为在调控发育过程中有重要作用。 miRNA的特点：广泛存在于真核生物中, 是一组不编码蛋白质的短序列RNA , 它本身不具有开放阅读框架(ORF) ;通常的长度为20～24 nt , 但在3′端可以有1～2 个碱基的长度变化;成熟的miRNA 5′端有一磷酸基团, 3′端为羟基, 这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA 的降解片段区别开来；多数miRNA 还具有高度保守性、时序性和组织特异
植物生理生化试卷A及答案
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 东北农业大学成人教育学院考试题签 植物生理生化（A） 一、单项选择题(每题2分，共30分) 1．下列元素缺乏时，导致植物幼叶首先出现病症的元素是（） A．N B．P． C.Ca D．K 2．能诱导果实发生呼吸跃变的植物激素是（） A．ABA B．IAA C．ETH D．CTK 3．植物一生的生长进程中，其生长速率的变化规律是（） A．快一慢一快 B．快一慢 C．慢一快一慢 D．慢一快 4．植物细胞中质子泵利用ATP水解释放的能量，逆电化学势梯度跨膜转运H+，这一过程称为（）A．初级主动运输 B．次级主动运输 C．同向共运输 D．反向共运输 5．植物叶片中进行亚硝酸还原的主要部位是（） A．线粒体 B．细胞基质 C．液泡 D．叶绿体 6．高等植物光系统Ⅱ的作用中心色素分子是（） A．P680 B．P700 C．A0 D．Pheo 7．植物光呼吸过程中，氧气吸收发生的部位是（） A．线粒体和叶绿体 B．线粒体和过氧化物酶体 C．叶绿体和乙醛酸循环体 D．叶绿体和过氧化物酶体 8．类胡萝卜素对可见光的吸收范围是（） A．680～700nm B．600～680 nm C．500～600 nm D．400～500nm 9．1mol NADH + H+经交替氧化途径将电子传给氧气时，可形成（） A．4molATP B．3molATP C．2.molATP D．1molATP 10．若某一植物组织呼吸作用释放C02摩尔数和吸收O2摩尔数的比值小于1，则该组织在此阶段的呼吸底物主要是（） A．脂肪 B．淀粉 C．有机酸 D．葡萄糖 11．某植物制造100g干物质消耗了75kg水，其蒸腾系数为（） A．750 B．75 C．7．5 D．0．75 12．下列蛋白质中，属于植物细胞壁结构蛋白的是（） A．钙调蛋白 B．伸展蛋白 C．G蛋白 D．扩张蛋白 13．在植物的光周期诱导过程中，随着暗期的延长（） A．Pr含量降低，有利于LDP开花 B．Pfr含量降低，有利于SDP开花 C．Pfr含量降低，有利于LDP开花 D．Pr含量降低，有利于SDP开花
生物化学期末考试试题及答案
《生物化学》期末考试题 A 一、判断题(15个小题,每题1分,共15分) ( ) 1、蛋白质溶液稳定的主要因素就是蛋白质分子表面形成水 化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体,就是因为它含有的不 饱与脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键就是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时,抑制剂与酶结合则影响底物与酶的 结合。 ( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收,预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用就是由于它具有解偶联作用。 ( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。 ( )
10、脂肪酸氧化称β-氧化。( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位就是线粒体。( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。( ) 15、脂溶性较强的一类激素就是通过与胞液或胞核中受体的
1、下列哪个化合物就是糖单位间以α-1,4糖苷键相连: () A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物就是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位就是下列哪个: ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基 酸 E、以上都不就是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点就是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的 时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质与量无改 E、对 正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物就是: ( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链 Ｅ、DNA
生物化学题库及答案.
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸
最新生物化学试题集合(有答案)
《生物化学》期末考试题 A 1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 ( ) 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。 ( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() 1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连： ( ) A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油
3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个： ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是： ( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时，每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) Ａ、１Ｂ、２ C、3 Ｄ、４． E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP？ ( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行 ( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是 ( ) A、HMG-CoA还原酶 B、HMG-CoA裂解酶 C、HMG-CoA合成酶 D、磷解酶 E、β-羟丁酸脱氢酶 10、有关G-蛋白的概念错误的是 ( ) A、能结合GDP和GTP B、由α、β、γ三亚基组成 C、亚基聚合时具有活性 D、可被激素受体复合物激活 E、有潜在的GTP活性 11、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二个氮原子来自 ( ) A、氨基甲酰磷酸 B、NH3 C、天冬氨酸 D、天冬酰胺 E、谷氨酰胺 12、下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症 ( )
2011年生理生化真题.
415 2011 年农学门类联考动物生理学与生物化学 动物生理学： 一、单项选择题：I?15小题，每小题1分，共15分。下列每题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的。 1 ?能使神经细胞膜上Na+通道大量开放的临界膜电位水平是 A. 局部电位 B. 阈电位 C. 锋电位 D. 后电位 2?白细胞吞噬细胞的跨膜转运方式属于 A. 被动转运 B. 主动转运 C. 出胞作用 D. 入胞作用 3 ?引起骨骼肌产生强值收缩的动作电位表现为 A. 可发生重叠 B. 不发生重叠 C. 可发生融合 D. 可发生融合 4. 血液中使血红蛋白氧解离曲线发生右移的因素是 A. CO2 分压升高 B. PH 值升高 C. 2,3- 一二磷酸甘油酸减少 D. 温度降低 5. 有关肺泡表面活性物质的描述，正确的是 A. 能降低肺的顺应性 B. 能降低肺泡表面张力 C. 由肺泡I 型上位细胞分泌 D. 成分为二磷酸磷脂酰肌醇 6. 恒温动物体温调节的基本中枢位于 A. 延髓 B. 脑桥 C. 视前区-下垂脑前部 D. 大脑皮层 7. 安静时机体主要的产热器官是 A. 肝脏 B. 脾脏 C. 肾脏 D. 肺脏 8. 毁坏哺乳动物的视上核和视旁核后，其尿液会发生的变化是 A. 尿量减少，尿稀释 B. 尿量增加，尿浓缩 C. 尿量增加，尿稀释 D. 尿量减少，尿浓缩 9. 血浆胶体渗透压降低会使肾小球滤过率 A. 增大 B. 减小 C. 不变 D. 先减小后增大 10. 关于肾小球滤过的描述，正确的是 A.入球小动脉收缩，原尿增加 B.血浆晶体渗透压升高，原尿减少 C. 肾小囊内压升高，原尿增加 D. 肾小球滤过面积减小，原尿减少 11. 消化道平滑肌经常处于微弱且持续的收缩状态，这种现象产生的前提是 A. 交感神经的兴奋 B. 副交感神经的抑制 C. 慢波的存在 D. 壁内神经丛的抑制 12. 刺激胃酸分泌的内源性物质是 A.胰高血糖素 B.生长抑素 C.胃泌素 D.促胰液素 13. 调节摄食行为的基本中枢位于
生物化学基础期末考试试题
生物化学基础期末考试试题 1、蛋白质的基本组成单位是（）。 [单选题] * A.葡萄糖 B.氨基酸(正确答案) C.多肽 D.色氨酸 2、下列哪个不属于必需氨基酸（）。 [单选题] * A.缬氨酸 B.赖氨酸 C.酪氨酸(正确答案) D.色氨酸 3、许多氨基酸之间以肽键连接而成的一种结构称为（）。 [单选题] * A.蛋白质 B.多肽链(正确答案) C.蛋白质一级结构 D.二肽 4、蛋白质的一级结构，是指蛋白质多肽链中（）的排列顺序。 [单选题] * A.氨基酸 B.氨基酸残基(正确答案) C.肽 D.肽键
5、蛋白质在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失，称为蛋白质的（）。 [单选题] * A.脱水缩合 B.变性(正确答案) C.复性 D.破坏 6、以下作为模板，传递DNA遗传信息的是（）。 [单选题] * A.DNA B.信使RNA(正确答案) C.转运RNA D.核糖体RNA 7、以下负责转运氨基酸的是（）。 [单选题] * A.DNA B.信使RNA C.转运RNA(正确答案) D.核糖体RNA 8、以下提供蛋白质生物合成场所的是（）。 [单选题] * A.DNA B.信使RNA C.转运RNA D.核糖体RNA(正确答案) 9、以下储存遗传信息的是（）。 [单选题] * A.DNA(正确答案)
B.信使RNA C.转运RNA D.核糖体RNA 10、核酸的基本组成单位是（）。 [单选题] * A.DNA B.核苷 C.核苷酸(正确答案) D.含氮碱基 11、核苷酸的排列顺序属于DNA分子的（）。 [单选题] * A.一级结构(正确答案) B.二级结构 C.三级结构 D.四级结构 12、双螺旋结构属于DNA分子的（）。 [单选题] * A.一级结构 B.二级结构(正确答案) C.三级结构 D.四级结构 13、酶的化学本质是（）。 [单选题] * A.氨基酸 B.蛋白质(正确答案) C.无机物 D.维生素
生物化学试题及标准答案(蛋白质化学部分).docx
人学牛物化学试题库三 蛋白质化学 一、填空题 1?构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具 有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6?7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有 两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2.紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中 含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3.丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是；组氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4.氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是a—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5.蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6.镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子b亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者 为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7.Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要 特点是。 8.蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的a-螺旋往往会。 9.蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和O 10.蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11.在适当浓度的b-毓基乙醇和8MJR溶液中，RNase （牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中b-毓基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M腺可使键破坏。当用透析方法去除b-毓基乙醇和服的情况下，RNA酶又恢复原 有催化功能，这种现象称为。 12.细胞色素C,血红蛋白的等电点分别为10和7.1,在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13?在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这 些氨基酸组分）。 14.包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可 表示为。 15.当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH>pI时，
《生理学试题》附带详细答案
《生理学试题》 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1.动脉血压 2.呼吸 3. Internal environment 4. 静息电位 5. 食物的氧热价 6. 脊休克 7. hormone 8. 心输出量 9. 红细胞沉降率 10. 肾小球滤过率 二、填空题（共20空，每空0.5分，共10分） 1. 机体生理功能的调节方式有、和自身调节。2．血液凝固过程可分为、和纤维蛋白的形成三个基本步骤。 3.心肌细胞的生理特有、、、。4．肾小管的髓袢升支粗段的顶端膜上有电中性同向转运体，小管液在流经髓袢升支粗段时，渗透压。 5．皮肤温度高于环境温度的散热方式是、和对流散热。 6. 氧离曲线右移表示Hb和O2的亲合力；毛细血管血液释放O2。7．胃液中因子缺乏造成肠道吸收障碍，会出现贫血。8．局部反应的特点、和可以叠加。 9．根据丘脑各部分向大脑皮层投射特征的不同，可把感觉投射系统 分为和。 三、简答题（共4题，每题5分，共20分） 1．简述心交感神经在心血管活动调节中的作用。 2．简述神经细胞动作电位产生的机制 3.简述生长素的生理作用。 4．简述神经纤维传递兴奋的特征。 四、论述题（共2题，每题10分,共20分） 1．试述影响肾小球滤过的因素 2．动物实验中，切断家兔双侧迷走神经后对呼吸有何影响？为什么？ 五、多项选择题（共10题，每题1分，共10分） 1．神经肌肉接头处兴奋传递的特征： A．单向传递 B．有时间延搁 C．对环境变化敏感 D．相对不疲劳性 E．有兴奋的总和 2.影响心室肌细胞兴奋性的因素 A．静息电位 B．最大复极电位 C．阈电位 D．钠通道状态 E．钙通道状态3.胆碱能纤维包括 A．支配骨骼肌的运动神经B．支配汗腺的交感节后纤维 C．自主神经节前纤维D．支配肾上腺髓质的交感神经 E．交感缩血管纤维 4.在环境温度为30℃时作剧烈运动，人体散热的途径有
生物化学期末考试试题及答案
《生物化学》期末考试题 A 一、判断题（15个小题，每题1分，共15分） ( ) 1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( )
9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将 二、单选题（每小题1分，共20分）
1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连：() A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、 香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、 脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个： ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是： ( ) Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA
生物化学试题及答案
《基础生物化学》试题一 一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分） 1、DNA是遗传物质，而RNA则不是。 2、天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。 3、蛋白质降解的泛肽途径是一个耗能的过程，而蛋白酶对蛋白质的水解不需要ATP。 4、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。 5、糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转。 6、哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成A TP。 7、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。 8、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。 9、tRNA的二级结构是倒L型。 10、端粒酶是一种反转录酶。 11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet，真核细胞新生肽链N端为Met。 12、DNA复制与转录的共同点在于都是以双链DNA为模板，以半保留方式进行，最后形成链状产物。 13、对于可逆反应而言，酶既可以改变正反应速度，也可以改变逆反应速度。 14、对于任一双链DNA分子来说，分子中的G和C的含量愈高，其熔点（Tm）值愈大。 15、DNA损伤重组修复可将损伤部位彻底修复。 16、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中将向阴极移动。 17、酮体是在肝内合成，肝外利用。 18、镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。 19、基因表达的最终产物都是蛋白质。 20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。 二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共30分） 1、NAD+在酶促反应中转移（） A、氨基 B、氧原子 C、羧基 D、氢原子 2、参与转录的酶是（）。 A、依赖DNA的RNA聚合酶 B、依赖DNA的DNA聚合酶 C、依赖RNA的DNA聚合酶 D、依赖RNA的RNA聚合酶 3、米氏常数Km是一个可以用来度量（）。 A、酶和底物亲和力大小的常数 B、酶促反应速度大小的常数 C、酶被底物饱和程度的常数 D、酶的稳定性的常数 4、某双链DNA纯样品含15%的A，该样品中G的含量为（）。 A、35% B、15% C、30% D、20% 5、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）。 A、蛋白质 B、RNA C、DNA D、酶 6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是（）。 A、三羧酸循环 B、氧化磷酸化 C、脂肪酸β氧化 D、糖酵解作用 7、大肠杆菌有三种DNA聚合酶，其中主要参予DNA损伤修复的是（）。 A、DNA聚合酶Ⅰ B、DNA聚合酶Ⅱ C、DNA聚合酶Ⅲ D、都不可以 8、分离鉴定氨基酸的纸层析是（）。 A、离子交换层析 B、亲和层析 C、分配层析 D、薄层层析 9、糖酵解中，下列（）催化的反应不是限速反应。 A、丙酮酸激酶 B、磷酸果糖激酶 C、己糖激酶 D、磷酸丙糖异构酶 10、DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是（）。