基于免疫纳米磁珠对福氏志贺氏菌的快速富集研究_赵玲
290
基于免疫纳米磁珠对福氏志贺氏菌的
快速富集研究
赵玲1，王程程1，李敏通1，王蓉晖2，李延斌2，胡耀华1，*
（1.西北农林科技大学机械与电子工程学院，陕西杨凌712100；2.美国阿肯色大学生物和农业工程系，阿肯色州费耶特维尔72701）
摘
要：利用纳米磁珠的超顺磁性，结合传统平板计数的方法，通过捕获效率，研究免疫纳米磁珠制备过程中抗体加入量
以及免疫纳米磁珠捕获目标细菌时的加入量，并利用免疫纳米磁珠对纯菌液以及羊肉洗水中100
、101、102、103CFU /mL 的福氏志贺氏菌进行捕获。结果表明，志贺氏菌多克隆抗体（4 5mg /mL ）结合1mL 链酶亲和素纳米磁珠（（180?20）nm ，
2mg /mL ）的最佳量为70μL ，免疫纳米磁珠捕获高浓度目标细菌（102 104
CFU /mL ）时的最佳加入量为60μL 。对于纯
菌液和羊肉洗水，其捕获限可分别达到100CFU /mL 和101CFU /mL ，并且捕获时间在1h 之内。本研究优化了实验条件，为免疫磁珠快速富集目标菌提供了理论依据。
关键词：免疫纳米磁珠，磁分离，捕获效率，福氏志贺氏菌
Ｒapid enrichment of Shigella flexneri based
on the immuno magnetic nanobeads
ZHAO Ling 1，WANG Cheng －cheng 1，LI Min －tong 1，WANG Ｒong －hui 2，LI Yan －bin 2，HU Yao －hua 1，
*
（1.College of Mechanical and Electronic Engineering ，Northwest A＆F University ，Yangling 712100，China ；2.Department of Biological ＆Agricultural Engineering ，University of Arkansas ，Fayetteville ，Arkansas 72701，USA ）Abstract ：The immuno magnetic nanobeads were a rapid method which can be used to isolate the target bacteria directly from food samples to ensure follow －up detection .Combining with the reliable conventional surface plating methods and the superparamagnetic nanobeads ，the influence of the antibody quantity added and the dose of immuno magnetic nanobeads was determined by the capturing efficiency .Meanwhile ，
the immuno magnetic nanobeads was used to capture the shigella flexneri in pure broths and lamb wash water at concentration of 100 103CFU /mL .The results showed that the optimal amount of the shigella polyclonal antibody （4 5mg /mL ）for conjugation of 1mL streptavidin nanobeads （（180?20）nm ，2mg /mL ）was 70μL ，and the optimized amount of immuno magnetic nanobeads used for capture of target bacteria at concentration of 102 104CFU /mL was 60μL .For pure broths and lamb wash water ，the capture limit could reach to 100CFU /mL and 101CFU /mL within 1h ，respectively .This study optimized the test conditions and provided a theoretical basis for immuno magnetic beads rapid enrichment of target bacteria .
Key words ：immuno magnetic nanobeads ；magnetic separation ；capture efficiency ；shigella flexneri 中图分类号：TS207.4
文献标识码：A
文章编号：1002－0306（2013）09－0290－04
收稿日期：2012－10－22*通讯联系人
作者简介：赵玲（1987－），女，在读硕士研究生，研究方向：农产品品质
检测与质量安全。
基金项目：杨凌现代农业国际研究院项目（A213021005）；西北农林科
技大学基本科研业务费专项资金项目（QN2011144）。
志贺氏菌属是革兰氏阴性、兼性厌氧、无芽孢、
不运动、通常不发酵乳糖的棒状杆菌。志贺氏菌属是引起人类肠道疾病常见的病原菌，在我国感染性
腹泻病原菌中高居首位［1］
。目前在国内外，直接从食品中制备的样品往往因为含有的目标微生物太少难
以检测，
所以大多都采用先增菌后检测的方式，这时不仅会耗费大量的时间，而且检测可信性差
［2］
。利用
人工合成的磁性颗粒对目标细菌进行分离、浓缩进而检测的方法在以往已经有了快速的发展
［3］
。细胞
的磁性分离与其他的分离方法相比可以使细胞直接从原始的食品样品里分离并且简单、快速，与电磁场相比，静磁场也不会干扰水溶液中离子和带电溶质
的移动。目前已有利用免疫纳米磁珠实现对食源性病原菌如大肠杆菌［4］
、沙门氏菌［5］、李斯特菌［6］
、阪崎
杆菌
［7］
等肠道致病菌的特异、快速的富集，并结合量
子点荧光标记、吸光度检测、ELISA 等方法或是各种PCＲ方法实现对单个或多种目标菌的定量检测［8－14］。目前还没有采用该种方法对志贺氏菌进行分离、富
集的报道，本研究制备免疫纳米磁珠（immuno －magnetic nanobeads ，Immuno －MNBs ），将针对目标抗
291
原的特异性抗体直接包被于磁珠的表面，从而能够识别目标微生物，利用其超顺磁性和特异性，对食品中的福氏志贺氏菌在磁场中进行特异性捕获，实现对食品中福氏志贺氏菌的快速、高效、特异性分离和富集。为更简便、快捷的定量检测志贺氏菌做好前期准备。
1
材料与方法
1.1
材料与仪器
草原兴发冷冻羊肉卷购于当地超市；福氏志
贺氏菌（ATCC12022）购自美国菌种保藏所；生物素化的志贺氏菌多克隆抗体（4 5mg /mL ）购于Pierce Biotechnology 公司；链酶亲和素纳米磁珠（以CdSe /CdTe 为核的核壳结构，粒径（180?20）nm ）购于江阴美英特生物仪器科技有限公司；磷酸盐缓冲液（PBS ，
0.1mol /L ，pH7.4）购于Sigma 公司；LB 肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂、Baird－Parker 培养基基础等
均购于北京陆桥公司；实验中所用耗材均为
无菌。
MS0206磁分离器（0.4T ）江阴美英特生物仪器科技有限公司；YT－CJ－1N 型超净工作台北京亚泰科隆实验科技开发中心；PB －10pH 计德国Sartorius 公司；智能恒温恒湿培养箱宁波海曙赛福实验仪器厂。
1.2
实验方法
1.2.1
免疫纳米磁珠的制备
取生物素化的志贺氏
菌多克隆抗体和链酶亲和素化的磁珠，
分别用适量PBS 稀释混匀后按照GB4789.5－2012的方法，在麦
康凯琼脂培养基上铺盘，
放置在37?恒温培养箱里培养20 24h ，观察有无杂菌。若有杂菌，用1%NaN 3
处理24h ，用PBS 充分洗涤后再铺盘观察，若无杂菌则可直接用于以下实验。
取1mL 链酶亲和素纳米磁珠（（180?20）nm ，2mg /mL ）3份，在磁分离器上分别用500μL 的PBS
进行洗涤，各2次。分别用450、
430、410μL 的PBS 重新悬挂，依次移取50、70、90μL 的生物素化的志贺氏菌抗体（4 5mg /mL ）加入到已洗好的磁珠溶液中，
使总体积均达到500μL ，涡旋混合均匀后，在试管混
合器上混合，室温反应30min
［15－16］
。反应完全后利用PBS 洗涤，在磁分离器（0.4T ）上分离1.5min 后去掉
上清液，重复清洗2次，加1%牛血清蛋白（纯度＞98%，WOLSEN 公司）的PBS 混合60min ，对磁珠上链酶亲和素的多余位点进行封闭。封闭完成后用PBS 彻底清洗2次，再用1mL 的PBS 重悬，得到的免疫纳米磁珠复合物分别标记为：Immuno －MNBs50，Immuno－MNBs70，Immuno－MNBs90。1.2.2
细菌培养与计数
蘸取少量福氏志贺氏菌的
冻干粉加入到营养肉汤中进行活化（37?，20h ），再在麦康凯琼脂培养基上分离出纯的单菌落，在营养琼脂上再次扩大培养后的菌种保存于甘油和营养肉
汤按1?1比例配制的保存液里。
取上面保存液里的纯的福氏志贺氏菌种1 9mL 的LB 营养肉汤中，培养10h 时移取1mL 于事先灭菌
好的PBS 里进行一系列稀释，
依次编号为1、2、3、4、5、6、7、8以及一个空白。由平板计数的方法得知各梯度目标细菌数。1.2.3
对纯菌液里目标细菌的捕获分别取出
Immuno －MNBs50，Immuno －MNBs70，Immuno －MNBs90三种免疫磁珠各20、
40、60μL 与104CFU /mL 接种量的目标菌100μL ，用PBS 溶液定容到1mL 后在试管摇床上以15r /min 的转速在室温下反应45min ［15－16］。反应完成后用PBS 洗涤至少2次，废液收集并保存，用1mL 的PBS 重悬反应复合物，以得到103
CFU /mL 细菌数量时各种免疫磁珠的捕获效率。分别对纯菌液、免疫磁珠捕获的菌液、以及废液进行
铺盘（作对照），
各做三个平行实验。再取Immuno－MNBs70各40μL 和60μL 分别与接种量为103
、
104、105CFU /mL 的纯菌液100μL 在室温下混合反应45min 。反应完成后洗涤，去掉多余的清液（废液需收集），用1mL 的PBS 重悬反应复合物，需要稀释才能读数的组系按细菌数量适量稀释。分别对各梯度目标细菌的纯菌液、免疫磁珠捕获的
菌液、
废液进行铺盘，各做三个平行实验。将分别得到40μL 和60μL 的Immuno －MNBs70对102
、
103、104CFU /mL 细菌数量目标细菌的捕获效率。
理论上，捕获效率（capture efficiency ，
CE ）CE （%）=N c /N 0?100，其中，
N c 是捕获得到的细菌数，单位为CFU /mL ；N 0是原始的细菌数量，单位为CFU /mL 。
1.2.4
对低浓度目标菌的捕获取100
、
101、102CFU /mL 接种量的纯菌液1mL 在室温下分别与
Immuno－MNBs70的免疫磁珠60μL 混合反应45min 。
反应完成后洗涤，废液收集，用1mL 的PBS 重悬反应复合物。分别对原始纯菌液、免疫磁珠捕获的菌液、废液进行铺盘，各三个平行实验。1.2.5
对食品中目标菌的捕获称取25g 羊肉样品于225mL 已灭菌的0.1%的PBS 缓冲液中，混合1min 后，移取4份样液，其中一份为10mL 不接种做为空白实验。其余三份为9mL ，
接种福氏志贺氏菌（ATCC12022），使样品里最终细菌数量达到101
103CFU /mL 。样品前处理好后，添加免疫磁珠Immuno－MNBs70各60μL 分别对空白实验、101、102、103CFU /mL 浓度的目标菌进行捕获，捕获后洗涤，废液保留，对纯菌液、捕获得到的菌液、废液均铺盘计数。
1.2.6数据分析
本实验所有的微生物检测都重复
三次实验，以确保实验结果的重现性。所有目标细菌捕获效率的平均值和标准偏差值都通过Microsoft Excel （Microsoft Corporation ）计算得到。
2
结果与分析
2.1
多克隆抗体包被链酶亲和素纳米磁珠加入量的
优化选取
分别用Immuno －MNBs50，
Immuno －MNBs70，Immuno－MNBs90三种免疫磁珠各20、40、60μL 三种
不同加入量捕获103
CFU /mL 细菌数量的福氏志贺氏
菌。由图1可以看到，免疫纳米磁珠Immuno －MNBs70对目标细菌的捕获效率最高，它在40μL 和
292
60μL 加入量时分别可达到58.6%和61.2%，所以可以选取70μL 的生物素化抗体为制备免疫纳米磁珠时的较优加入量。Immuno－MNBs50在60μL 的加入量时也达到了59.4%，说明60μL 加入量的捕获效率最好。而抗体加入量为90μL 的免疫纳米磁珠Immuno －MNBs90对目标菌的捕获效率在8.9% 25%之间，如图1所示。可能当加入的抗体过多时，吸附到细菌上的免疫磁珠增多，在强磁场下分离的时候会造成部分细菌的损伤，
由此可知，纳米磁珠对目标细菌的捕获效率并不随着抗体加入量的增多而增高，而是可以得到一个优化值
。
图1
三种抗体浓度的Immune－MNBs
对103
CFU /mL 目标细菌捕获效率的比较
Fig.1The capture efficiency of the three different antibody concentrations of Immune－MNBs
for 103CFU /mL target bacteria
2.2免疫磁珠捕获目标细菌时其加入量的选取
用免疫磁珠Immuno－MNBs70的40μL 和60μL
的加入量分别捕获102
、
103、104CFU /mL 细菌数量的福氏志贺氏菌。发现对于细胞数量为102
、
103、104CFU /mL 的细菌，40μL 和60μL 的加入量对其捕
获效率都非常的接近，通过t 检验，
|t |=7.0＜t （2）0.01=9.925，则p ＞0.01，说明对于102、
103、104CFU /mL 的细菌数量，
40μL 和60μL 的加入量对捕获效率的差异显著性不大，捕获效率在60μL 时比40μL 时略高，
如图2所示，选取免疫磁珠较优加入量为60μL
。
图2Immuno－MNBs70不同加入量
对102
、
103、104CFU /mL 目标菌的捕获效率比较Fig.2The capture efficiency comparison of the
different addition amount of the Immuno－MNBs70
for 102，103，104CFU /mL target bacteria
2.3对低浓度目标细菌的捕获
用免疫纳米磁珠Immuno－MNBs70的60μL 加入
量捕获101
、102CFU /mL 细菌数量的目标菌，得到的
捕获效率分别是：83.8%?2.2%、
65%?3.0%。可以看出较高浓度的目标细菌，
免疫纳米磁珠对低浓度目标细菌捕获效率有所增大。对于100
CFU /mL 数量的目标菌，即个位数量的菌液，菌落计数如表1。可
见，
该种捕获方法的捕获限可以达到100
CFU /mL 。表1
该免疫磁珠对100
CFU /mL 目标菌的捕获结果Table 1The capture efficiency of the
Immuno－MNBs to 100CFU /mL number of target bacteria 实验号原菌液的菌落数（CFU /mL ）捕获的菌落数（CFU /mL ）
废液的菌落数
（CFU /mL ）
144023203
3
3
2.4对食品样品中福氏志贺氏菌的检测
在未接种福氏志贺氏菌的空白实验中，样液、捕
获液和废液里均有极少量的非福氏志贺氏菌的杂菌
出现。除去极少量非福氏志贺氏菌杂菌外，对于10
2
和103
CFU /mL 接种量的食品样品，得到的捕获效率
分别为73.3%?4.6%和67.1%?2.5%，对101
CFU /
mL 样品液，其样液与捕获液的菌落数相近，而且废液里也无目标菌出现。说明对于羊肉样品，其捕获
限可达到101
CFU /mL ，
这对食品中低浓度目标菌的快速检测有良好的效果。
与已有的以SPA 包被的磁珠制备的多抗免疫磁
珠对福氏志贺氏菌纯菌液（102
CFU /mL ）的富集作用（捕获效率约为46.9%）相比［17］，该方法可以达到较高的捕获效率（65%），并且与GB4789.5－2012的分离方法相比较，该方法不需要对食品样品进行16 20h 的增菌处理，可以节省时间。
3
结论
3.1
志贺氏菌多克隆抗体（4 5mg /mL ）包被1mL 链
酶亲和素纳米磁珠（（180?20）nm ，
2mg /mL ）的最佳加入量应该选取为70μL ，在捕获高浓度目标细菌时，
该制备好的免疫纳米磁珠的最佳加入量应为60μL ，
此时捕获效率最高，对于103
CFU /mL 细菌量目标细菌的捕获效率可达到61.2%。
3.2
对于低浓度纯菌液目标菌的捕获，其捕获效率比
较高浓度菌液有所提高，
捕获限可以达到100
CFU /mL ，对于羊肉卷样品，免疫磁珠对目标菌的捕获限可以
达到101
CFU /mL ，并且捕获时间小于1h 。
3.3
利用免疫纳米磁珠能够快速、有效地对食品样品中目标细菌进行富集、分离，对以后能够快速、准
确的定量检测食品中的目标细菌提供了理论依据，并且该实验可以得到3 4CFU /mL 目标细菌数量的
捕获限，
这对食品安全检测意义重大。参考文献
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（下转第297页）
297
用了有机溶剂，会使塑料制品中存在的痕量双酚A 部分溶出，进入所测样品中，故双酚A 的含量在允许范围内存在，
这与文献［11］
中的检测结果相一致。
3结论
本研究以原料奶为基质，详细研究了样品的前处理方法，优化了高效液相色谱分离条件和串联质谱测定条件，建立了固相萃取净化与高效液相色谱－串联质谱法多组分同时检测原料奶中5种环境雌激素的分析方法，该方法采用外标法定量，保证了方法的准确性。本方法操作简单快速、灵敏度高、分析时间短、回收率较好、结果准确且方法稳定，适合于大批量样品的快速检测。在当今乳制品质量安全备受关注的环境下，该方法能为牛乳中环境雌激素的监
管与监督提供技术依据，
且可应用于牛奶的实际检验工作和产品质量控制，
有一定的应用价值。参考文献
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（上接第292页）
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《支气管哮喘基层合理用药指南》(2020)要点
《支气管哮喘基层合理用药指南》（2020）要点 一、疾病概述 （一）定义 支气管哮喘（简称哮喘）是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病，这种慢性炎症导致了气道高反应性的发生和发展。临床上表现为反复发作的喘息、气急、胸闷、咳嗽等症状，常在夜间和/或清晨发作、加剧，同时伴有可变的气流受限。哮喘是一种异质性疾病。 （二）诊断与鉴别诊断 哮喘的诊断应根据临床表现及提示可变气流受限的一些辅助检查等，综合分析确定。根据以下一些临床特征，并排除其他疾病时可诊断为哮喘。 1. 临床表现： （1）反复发作喘息、气急，伴或不伴胸闷或咳嗽，夜间及晨间多发，常与接触变应原、冷空气、物理或化学性刺激以及上呼吸道感染、运动等有关。
（2）发作时双肺可闻及散在或弥漫性哮鸣音，呼气相延长。 （3）上述症状和体征可经治疗缓解或自行缓解。 2. 辅助检查： （1）支气管舒张试验：吸入支气管舒张剂后第1秒用力呼气容积（FEV1）增加>12%，且其绝对值增加>200ml。 （2）呼气流量峰值（PEF）及其变异率测定：连续2周或以上监测PEF，平均每日昼夜PEF变异率>10%。 （3）支气管激发试验阳性。 3. 鉴别诊断：哮喘应与左心功能不全、慢性阻塞性肺气肿、上气道阻塞性病变、支气管扩张、嗜酸细胞肉芽肿性血管炎、变应性支气管肺曲菌病等疾病相鉴别。 （三）疾病严重程度分层 哮喘根据临床表现可分为急性发作期、慢性持续期和临床缓解期。急性发作期根据症状、体征和辅助检查分为轻度、中度、重度和危重度4级；慢
性持续期和临床缓解期属于非急性发作期，其严重度评估采用哮喘控制水平分级，分为良好控制、部分 控制和未控制3个等级。非急性发作期的长期规范管理是哮喘治疗的重点。 二、药物治疗原则 不同的分期、分级，哮喘的治疗不同，最终目标是既要达到当前控制，又要降低未来风险。急性发作期和慢性持续期的治疗目标不同： 急性发作期治疗目标主要为尽快缓解症状、解除气流受限和改善低氧血症。 慢性持续期治疗目标在于达到哮喘症状的良好控制，维持正常活动水平，尽可能减少急性发作、肺功能不可逆损害和药物相关不良反应的风险。 哮喘急性发作期治疗原则是去除诱因，根据严重程度不同，给予相应治疗方案，如使用支气管扩张剂、合理氧疗、适时足量全身使用糖皮质激素。 哮喘慢性持续期的长期治疗主要以药物吸入治疗为主，强调规律用药，应遵循分级治疗和阶梯治疗的原则。
纳米材料的制备方法
1化学气相沉积法 1.1化学气相沉积法的原理 化学气相沉积法(Chemical Vapour Deposition (CVD) )是通过气相或者在基板表面上的化学反应，在基板上形成薄膜。化学气相沉积方法实际上是化学反应方法，因此。用CVD方法可以制备各种物质的薄膜材料。通过反应气体的组合可以制备各种组成的薄膜，也可以制备具有完全新的结构和组成的薄膜材料，而且即使是高熔点物质也可以在很低的温度下制备。 用化学气相沉积法可以制备各种薄膜材料、包括单元素物、化合物、氧化物、氮化物、碳化物等。采用各种反应形式，选择适当的制备条件——基板温度、气体组成、浓度和压强、可以得到具有各种性质的薄膜构料。化学气相沉积的化学反应形式．主要有热分解反应、氢还原反应、金属还原反应、基板还原反应、化学输运反应、氧化反应、加水分解反应、等离子体和激光激发反应等。 化学气相沉积法制备纳米碳材料的原理是碳氢化合物在较低温度下与金属纳米颗粒接触时通过其催化作用而直接生成。化学气相沉积法制备碳纳米管的工艺是基于气相生长碳纤维的制备工艺。在研究气相生长碳纤维早期工作中就己经发现有直径很细的空心管状碳纤维，但遗憾的是没有对其进行更详细的研究[4]。直到Iijima在高分辨透射电子显微镜发现产物中有纳米级碳管存在，才开始真正的以碳纳米管的名义进行广泛而深入的研究。 化学气相沉积法制备碳纳米管的原料气，国际上主要采用乙炔，但也采用许多别的碳源气体，如甲烷、一氧化碳、乙烯、丙烯、丁烯、甲醇、乙醇、二甲苯等。在过渡金属催化剂铁钴镍催化生成的碳纳米管时，使用含铁催化剂，多数得到多壁碳纳米管；使用含钴催化剂，大多数的实验得到多壁碳纳米管；过渡金属的混合物比单一金属合成碳纳米管更有效。铁镍合金多合成多壁碳纳米管，铁钴合金相比较更容易制得单壁碳纳米管。此外，两种金属的混合物作为催化剂可以大大促进碳纳米管的生长。许多文献证实铁、钴、镍任意两种的混合物或者其他金属与铁、钴、镍任何一种的混合物均对碳纳米管的生长具有显著的提高作用，不仅可以提高催化剂的性能，而且可以提高产物的质量或者降低反应温度。催化裂解二甲苯时，将适量金属铽与铁混合，可以提高多壁碳纳米管的纯度和规则度。因而，包括像烃及一氧化碳等可在催化剂上裂解或歧化生成碳的物料均有形成碳纳米管的可能。Lee Y T 等[5]讨论了以铁分散的二氧化硅为基体，乙炔为碳源所制备的垂直生长的碳纳米管阵列的生长机理，并提出了碳纳米管的生长模型。Mukhopdayya K等[6]提出了一种简单而新颖的低温制备碳纳米管阵列的方法。该法以沸石为基体，以钴和钒为催化剂，仍是以乙炔气体为碳源。Pna Z W等[7]以乙炔为碳源，铁畦纳米复合物为基体高效生长出开口的多壁碳纳米管阵列。 1.2评价 化学气相沉积法该法制备的纳米微粒颗粒均匀，纯度高，粒度小，分散性好，化学反应活性高，工艺可控和连续，可对整个基体进行沉积等优点。此外，化学气相沉积法因其制备工艺简单，设备投入少，操作方便，适于大规模生产而显示出它的工业应用前景。因此，化学气相沉积法成为实现可控合成技术的一种有效途径。化学气相沉积法缺点是衬底温度高。随着其它相关技术的发展，由此衍生出来的许多新技术，如金属有机化学缺陷相沉积、热丝化学气相沉积、等离子体辅助化学气相沉积、等离子体增强化学气相沉积及激光诱导化学气相沉积等技术。化学气相沉积法是纳米薄膜材料制备中使用最多的一种工艺，广泛应用于各种结构材料和功能材料的制备。用化学气相沉积法可以制备几乎所有的金属，氧化物、氮化物、碳化合物、复合氧化物等膜材料。总之，随着纳米材料制备技术的不断完善，化学气相沉积法将会得到更广泛的应用。
志贺氏菌的危害程度评估报告
志贺氏菌的危害程度评估报告 一、生物学特性 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 志贺氏菌和大肠杆菌都属于肠杆菌科，根据DNA杂交研究结果表明，志贺氏菌属的四个种和大肠杆菌属在生化上是难以区分的，因为有产气的志贺氏菌，也有乳糖阴性、不产气、不运动的大肠杆菌，有些大肠杆菌也能引起痢疾状的腹泻。 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm ,宽0.5-0.7μm 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，不运动，有菌毛。 志贺氏菌需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。根据抗原构造的不同，按最新国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型。 二、危害程度分类 根据中华人民共和国卫生部制定《人间传染的病原微生物名录》该菌危害程度为第三类。 三、致病性和感染剂量 志贺氏菌引起的细菌性痢疾，主要通过消化道途径传播。根据宿主的健康状况和年龄，只需少量病菌（至少为10～100个细胞）进入，就有可能致病。致病因素：志贺氏菌的致病作用，主要是侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类一类是急性细菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型；二类是慢性细菌性痢疾：又分慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型三型。病后有一定的免疫力，但免疫期短，也不稳定。 四、暴露的潜在后果 暴露后可能引起感染，菌量大时可使实验人员显性感染，菌量很少时常呈暂时的带菌状态。被感不染后，成为传染源，可能对周围及环境造成污染，应及时得到控制。
羟萘酸沙美特罗
羟萘酸沙美特罗 一、羟萘酸沙美特罗粉吸入剂 1、原研基本产品信息 【英文名称】SEREVENT 【原研公司】GLAXOSMITHKLINE 【上市时间】1997年美国 【有效成分】SALMETEROL XINAFOATE 【剂型】POWDER;INHALATION 【规格】EQ 0.05MG BASE/INH 【上市情况】美国、中国 2、国内原研进品信息 【商品名称】施立稳/SereventAccuhaler 【产品名称】羟萘酸沙美特罗吸入粉雾剂 【原研公司】GLAXOSMITHKLINE 【上市时间】2009年 【产地】法国 【剂型】干粉吸入剂 【规格】50μg/泡包装规格:60泡，120泡/盘/盒 3、国内上市申报情况 国内厂家无产品上市；无其他公司。 二、沙美特罗+替卡松干粉吸入剂 1、原研基本产品信息 【英文名称】ADVAIR DISKUS 【原研公司】GLAXOSMITHKLINE 【上市时间】2000美国 【有效成分】FLUTICASONE PROPIONATE; SALMETEROL XINAFOATE 【剂型】干粉吸入剂 【规格】100（250、500）/50mcg/dose 【上市情况】美国、中国 2、国内原研进品信息 【商品名称】舒利迭/Seretide 【产品名称】沙美特罗替卡松粉吸入剂 【原研公司】GLAXOSMITHKLINE 【上市时间】2009年
【产地】法国 【剂型】干粉吸入剂 【规格】50ug/100ug（250、500）/泡包装规格: 28泡，60泡/盒 3、国内上市申报情况 国内厂家无产品上市；无其他公司。5家申报，其中3家进口，国内为天晴（批临床）与恒瑞。 三、其他剂型 氟替卡松福莫特罗气雾剂、福莫特罗HFA吸入气雾剂、福莫特罗莫米松吸入用气雾剂、吸入用倍氯米松福莫特罗粉雾剂、吸入用倍氯米松福莫特罗格隆溴铵气雾剂 3、国内申报情况 如下表所示，为含有富马酸福莫特罗成份的干粉吸入剂，目前无单方在申批，大部分复方制剂已批准临床。含有富马酸福莫特罗的申报还包括原料、片剂、气
免疫磁性微球技术专题
免疫磁性微球技术专题 技术简介： 免疫磁性微球（Immunomagnetic Microspheres，IMMS），或称免疫磁珠（Immunomagnetic Beads，IMB）是免疫学和超顺磁性磁珠结合而发展起来的一类新型材料。免疫磁珠是包被有抗体或具有抗体结合功能的超顺磁性微球，当它与含有靶物质的样品混合孵育时，可与靶物质特异性地结合而形成具有磁响应性的复合物，此复合物可被磁场滞留，从而与样品中其他杂质分离。免疫磁性分离简便易行，分离纯度高，保留靶物质活性，且高效、快速、低毒，可广泛应用于细胞分离和提纯、免疫检测、免疫纯化、免疫沉淀等领域。 核心原理： 磁性材料在高温条件下，或是磁性颗粒的粒度很小时，其磁性很容易随周围的磁场改变而改变，磁体的极性也呈现出随意性，难以保持稳定的磁性能，这种现象就是超顺磁效应。超顺磁性磁珠能在外部磁场的作用下迅速聚集，当磁场撤离后即可重新分散而不带有剩磁，这种特性使其作为一种新型的分离纯化基质被广泛用于生物活性物质的分离纯化技术上。理想的磁珠具有均匀的球形、由具有超顺磁性的铁质核心及高分子保护外壳，大小从50~10000nm 不等。表面常带有化学功能的基团，如-OH、-NH2、 -COOH和-CONO2等，使得磁珠几乎可以偶联任何具有生物活性的蛋白。磁珠与多数生物高分子如多聚糖、蛋白质等具有良好的生物相容性。在生物工程，特别是在生物医学领域应用，具有良好的生物相容性是非常重要的。免疫磁珠用于细胞分离和提纯： 在临床医学和基础医学研究领域，经常需要对各种需要的特定种类的细胞进行分离，流式细胞分选技术是一种目前使用较多的细胞分选方法，其原理是用荧光标记抗体的细胞受光激发后在电场中运动方向会发生改变，藉此来将抗体阴性细胞分开，但该方法存在费用高、分离时间长，细胞处理量小等缺陷。 应用免疫磁珠分离细胞是细胞分选的一大突破，该方法方便、快速、分离细胞的纯度高，具有较好的生物活性。使用免疫磁珠进行分离细胞有两种方式；直接从细胞混合液中分离出靶细胞的方法，称为阳性分离；用免疫磁珠去除无关细胞，使靶细胞得以纯化的方法称为阴性分离。免疫磁珠技术可用来分离人类各种细胞如红细胞、外周血嗜酸/碱性粒细胞，神经干
富马酸福莫特罗吸入溶液说明书
HIGHLIGHTS OF PRESCRIBING INFORMATION These highlights do not include all the information needed to use PERFOROMIST safely and effectively. See full prescribing information for PERFOROMIST. These highlights do not include all the information needed to use PERFOROMIST Inhalation Solution safely and effectively. See full prescribing information for PERFOROMIST Inhalation Solution. PERFOROMIST? (formoterol fumarate) Inhalation Solution Initial U.S. Approval: 2001 WARNING: ASTHMA-RELATED DEATH See full prescribing information for complete boxed warning ? Long-acting beta2-adrenergic agonists (LABA) increase the risk of asthma-related death. (5.1) ? A placebo-controlled study with another long-acting beta2-adrenergic agonist (salmeterol) showed an increase in asthma-related deaths in patients receiving salmeterol. (5.1) ? The finding of an increased risk of asthma-related death with salmeterol is considered a class effect of LABA, including formoterol, the active ingredient in PERFOROMIST. The safety and efficacy of PERFOROMIST in patients with asthma have not been established. All LABA, including PERFOROMIST, are contraindicated in patients with asthma without use of a long-term asthma control medication. (4, 5.1) INDICATIONS AND USAGE PERFOROMIST Inhalation Solution is a long-acting beta2-adrenergic agonist (beta2-agonist) indicated for: ? Long-term, twice daily (morning and evening) administration in the maintenance treatment of bronchoconstriction in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD), including chronic bronchitis and emphysema. (1.1) Important limitations of use: ? PERFOROMIST Inhalation Solution is not indicated to treat acute deteriorations of chronic obstructive pulmonary disease. (1.2, 5.2) ? PERFOROMIST Inhalation Solution is not indicated to treat asthma. (1.2) DOSAGE AND ADMINISTRATION For oral inhalation only. ? One 20 mcg/2 mL vial every 12 hours (2) ? For use with a standard jet nebulizer (with a facemask or mouthpiece) connected to an air compressor (2) DOSAGE FORMS AND STRENGTHS Inhalation Solution (unit dose vial for nebulization); 20 mcg/2 mL solution (3) CONTRAINDICATIONS ? All LABA, including PERFOROMIST, are contraindicated in patients with asthma without use of a long-term asthma control medication. (4) WARNINGS AND PRECAUTIONS ? Do not initiate PERFOROMIST Inhalation Solution in acutely deteriorating patients. (5.2) ? Do not use for relief of acute symptoms. Concomitant short-acting beta2 agonists can be used as needed for acute relief. (5.2) ? Do not exceed the recommended dose. Excessive use of PERFOROMIST Inhalation Solution, or use in conjunction with other medications containing long-acting beta2-agonists, can result in clinically significant cardiovascular effects, and may be fatal. (5.3, 5.5) ? Life-threatening paradoxical bronchospasm can occur. Discontinue PERFOROMIST Inhalation Solution immediately. (5.4) ? Use with caution in patients with cardiovascular or convulsive disorders, thyrotoxicosis, or with sensitivity to sympathomimetic drugs. (5.6, 5.7) ADVERSE REACTIONS Most common adverse reactions (>2% and more common than placebo) are diarrhea, nausea, nasopharyngitis, dry mouth, vomiting, dizziness, and insomnia (6.2) To report SUSPECTED ADVERSE REACTIONS, contact Dey Pharma, L.P. at 1-800-429-7751 or FDA at 1-800-FDA-1088 or https://www.wendangku.net/doc/b43758894.html,/ medwatch. To report SUSPECTED ADVERSE REACTIONS, contact Dey Pharma, LP at or FDA at 1-800-FDA-1088 or https://www.wendangku.net/doc/b43758894.html,/medwatch DRUG INTERACTIONS ? Other adrenergic drugs may potentiate effect. Use with caution. (5.3, 7.1) ? Xanthine derivatives, steroids, diuretics, or non-potassium sparing diuretics may potentiate hypokalemia or ECG changes. Use with caution. (5.7, 7.2, 7.3) ? MAO inhibitors, tricyclic antidepressants and drugs that prolong QTc interval may potentiate effect on the cardiovascular system. Use with extreme caution. (7.4) ? Beta-blockers may decrease effectiveness. Use with caution and only when medically necessary. (7.5) See 17 for PATIENT COUNSELING INFORMATION and the FDA-approved Medication Guide Revised: 05/2010
纳米材料的主要制备方法
本科毕业论文 学院物理电子工程学院 专业物理学 年级 2008级 姓名贾学伟 设计题目纳米材料的主要制备方法 指导教师闫海龙职称副教授 2012年4月28日 目录 摘要 (1) Abstract (1) 1 引言 (1) 1.1纳米材料的定义 (1) 1.2纳米材料的研究意义 (2) 2 纳米材料的主要制备方法 (3) 2.1化学气相沉积法 (3) 2.2溶胶－凝胶法 (5) 2.3分子束外延法 (6) 2.4脉冲激光沉积法 (8) 2.5静电纺丝法 (9) 2.6磁控溅射法 (11) 2.7水热法 (12)
2.8其他制备纳米材料的方法 (13) 3 总结 (14) 参考文献 (14) 致谢 (15)
纳米材料的主要制备方法 学生姓名：贾学伟学号： 学院：物理电子工程学院专业：物理学 指导教师：闫海龙职称：副教授摘要：纳米材料由于其特殊的性质，近年来引起人们极大的关注。随着纳米科技的发展，纳米材料的制备方法已日趋成熟。本文主要介绍了纳米材料的制备方法,其中包括化学气相沉积法、溶胶—凝胶法、分子束外延法、脉冲激光沉积法、静电纺丝法、磁控溅射法、水热法等。在此基础上,分析了现代纳米材料制备方法的发展趋势。纳米技术对21世纪的信息技术、医学、环境、自动化技术及能源科学的发展有重要影响,对生产力的发展有重要作用。 关键词：纳米；纳米材料；纳米科技；制备方法 The preparation method of nanomaterials Abstract：Nanomaterials are attracting intense in recent years. With the development of nanotechnology, nanomaterials preparation method has been more and more mature. The preparation methods sush as, chemical vapor deposition method, molecular beam epitaxy, laser pulse precipitation, sintering, hydrothermal method, sol-gel method are introduced in this paper. New development trend of preparation methods are analysed. N anomaterials will promote the development of IT, medicine, environment, automation technology and energy science, and will have a great influenced on productive in the 21st century. Key words：nanometer；na nomaterials；nanotechnology；preparation 1 引言 1.1纳米材料的定义 纳米材料是指在三维空间中至少有一维处于纳米尺度范围或由它们作为基本单元构成的晶体、非晶体、准晶体以及界面层结构的材料，这大约相当于10-100个原子紧密排列在一起的尺度[1]。通常材料的性能与其颗粒尺寸的关系极为密切，当小粒子尺寸进入纳米量级时，其本身具有体积效应、表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应等。从而使其具有奇异的力学、电学、光学、热学、化学活性、催化和超导特性，使纳米材料在各种领域具有重要的应用价值[2]。
20041126_志贺氏菌属
志贺氏菌属 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 一、生物学性状 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm ,宽 m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H S。根据生化反应可进行初步分类。 2 志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为二大组。 A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、6、9、10型）和靛基质阴性（2、7、8型）的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组：包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一） 表一志贺氏菌属生化反应的分类 葡萄糖（+） 甘露醇（-）甘露醇（+） 志贺氏菌志贺氏菌乳糖（-）乳糖（+）（1、3、4、（2、7、8型） 5、6、9、10型）靛基质（-）靛基质（+）靛基质（-） 福氏菌6型福氏菌（1、2、宋内氏菌 鲍氏菌（1、2、 3、4、5型）， 3、4、6、8 鲍氏菌（5、7、9、 10、12、14型） 11、13、15型） 抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种。 型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要
志贺菌属
志贺菌属细菌是引起人类细菌性痢疾的主要肠道病原菌之一。 一、分类 志贺菌属可用特异性抗血清将其分为4个血清群(种)：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍特志贺菌，D群为宋内志贺菌。1989年CDC分类系统将生化反应特性相近的A、B，C群归为一群，统称为志贺菌A、B、C血清群；而将生化反应特征与之相异，鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。DNA G+C含量为49~53mol％。 二、临床意义 志贺菌属细菌的致病主要与细菌的侵袭力、内毒素和外毒素有关，志贺菌属细菌因菌毛的作用，细菌黏附于肠黏膜的表面，并侵入上皮细胞内生长繁殖，形成感染病灶，引起炎症反应。本菌属各菌株均有强烈的内毒素，由于内毒素的释放可造成上皮细胞死亡及黏膜下发炎，并形成毛细血管血栓，导致坏死、脱落和溃疡，患者出现典型的脓血便；另一方面可引起全身中毒症状(内毒素血症)，导致发热、意识障碍，甚至中毒性休克。A群志贺菌1型和2型产生的志贺毒素，ST对Vero细胞有毒性作用也称为Vero毒素VT对小鼠有强烈的致死毒性，有VT1和VT2两种。ST属VT1型。 志贺菌属细菌主要引起人类细菌性痢疾，简称菌痢，一年四季均可发病，以夏秋季节发病率最高，典型的急性菌痢表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重，发热等症状。小儿常可引起中毒性菌痢，患儿常无明显的消化道症状而表现为全身中毒症状，若抢救不及时，往往造成死亡。四种志贺菌中，痢疾志贺菌引起的菌痢较为严重，其他志贺菌引起的感染则相对较轻，具有自限性且很少致死。我国以福氏志贺菌和宋内志贺菌引起的菌痢最为多见。多数菌痢为散发病例，可引起人与人之间的传播。偶可因食用了被污染的水和食物而引起暴发流行。 三、生物学特性 为革兰阴性短小杆菌，菌体大小(1~3μm×(0.7~1.0)μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。 培养特性为兼性厌氧，最适生长温度为35℃，最适pH为7.2~7.4。营养要求不高，能在普通琼脂培养基上生长，且生长良好。在肠道选择培养基上可形成乳糖不发酵、中等大小、无色透明或半透明菌落，宋内志贺菌常形成粗糙型菌落。 志贺茵属菌种有O抗原，无H抗原，部分菌种有K抗原。O抗原是分类的依据，有群特异性和型特异性两种抗原，根据生化反应和O抗原的不同，将志贺菌属分为4个血清群(A、B、C、D)和40余个血清型。O抗原耐热，加热100℃ 60分钟不被破坏。K抗原存在时能干扰O抗原与相应抗血清的凝集作用。加热100℃ 60分钟可消除K抗原对O抗原的干扰作用。
磁性微球的生物医学进展
磁性微球的生物医学进展 1、磁性微球的制备 磁性微球的制备方法较多，不同类型的磁性微球制备方法不同。大致可分为物理法和化学法。物理法有喷雾干燥、热处理法和冷冻凝聚法。化学法有乳液聚合法、悬浮聚合法、分散聚合法、自组装法和生物合成法等。 1.1喷雾干燥法 喷雾干燥法是将磁流体分散在基体材料的溶液中，利用喷雾干燥制得磁性微球。王强斌等〔7〕将纳米磁流体分散在聚丙烯腈的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，混合均匀后进行喷雾，得到外形规整、粒径分布较窄、磁含量约15% 的聚丙烯腈磁性微球，得到的磁性微球可作为固定化酶的载体。 1.2热处理法 热处理法是将蛋白质分散在磁流体中，在超声激烈搅拌下加热，使蛋白质稳定，可得到蛋白质包覆的磁性微球。Jchatterjee等〔8〕采用此法得到了分散性良好的人血清白蛋白(HSA)磁性微球。将HSA加入到磁流体中，然后将混合液倒入棉子油中，先在低温(4℃)下高速超声搅拌，然后加热到130℃，同时保持高速的搅拌，持续一定时间，然后冷却洗涤。得到的磁性微球分散良好，稳定性较化学交联蛋白质得到的磁性微球更好。 1.3冷冻凝聚法 冷冻凝聚法是将磁流体分散在基体材料中，再加入液体石蜡，搅拌。低温冷却后加入有机溶剂搅拌、过滤、洗涤可得到包覆Fe3O4的磁性微球。张胜〔9〕等利用冷冻法制备了包裹超微Fe3O4和平阳霉素的明胶磁性微球。此微球具有较好的靶向性和缓释性。 1.4乳液聚合法 乳液聚合法是将磁流体分散在高分子单体中，加入乳化剂，高速搅拌剪切乳化。同时高分子单体在乳液滴中发生聚合反应，形成了磁性颗粒均匀分散的磁性高分子微球。谢钢〔10〕采用乳液聚合法制备了PS(聚苯乙烯)/Fe3O4复合微球，并研究了不同的分散稳定剂对所制备的复合磁性微球的影响。悬浮聚合和乳液聚合类似，将磁流体加入到高分子单体中，不加乳化剂的情况下，借助高速搅拌的作用将单体分散成小液滴，单体在小液滴中反应，得到磁性高分子微球。王胜林〔11〕等采用悬浮聚合法制备了聚苯乙烯磁性微球。将Fe3O4磁性粒子用一种复合分散剂进行表面处理后分散到苯乙烯中，从而形成苯乙烯磁流体，在磁流体中加入引发剂单体二乙烯基苯(DVB)，然后将磁流体分散在水中，经过高速剪切
布地奈德福莫特罗粉吸入剂药物相关说明
药品名称: 通用名称：布地奈德福莫特罗粉吸入剂 英文名称：Budesonide and formoterol Fumarate Powder for Inhalation (Symbicort Turbuhaler) 商品名称：信必可都保 成份: 本品为复方制剂，其组分为：布地奈德（80μg/吸）和富马酸福莫特罗（4.5μg/吸）；布地奈德（160μg/吸）和富马酸福莫特罗（4.5μg/吸）。 适应症: 本品适用于需要联合应用吸入皮质激素和长效β2-受体激动剂的哮喘病人的常规治疗： -吸入皮质激素和“按需”使用短效β2-受体激动剂不能很好地控制症状的患者 或 -应用吸入皮质激素和长效β2-受体激动剂，症状已得到完全控制的患者。 注意：本品(80微克/4.5微克/吸)不适用于严重哮喘患者。 登录规格: (1) 80/4.5微克/吸，60吸/支 (2) 160/4.5微克/吸，60吸/支 (3) 160/4.5微克/吸，120吸/支 用法用量: 本品不用于哮喘的初始治疗。本品应个体化用药，并根据病情的严重程度调节剂量，这在开始使用复方制剂时需要注意。如果某个患者所需剂量超出推荐剂量，则应增开适当剂量的β－受体激动剂和/或皮质激素的处方。 本品160/4.5微克/吸推荐剂量： 成人和青少年（12岁和12岁以上）：1-2吸/次，一日2次。 本品80/4.5微克/吸推荐剂量： 成人（18岁和18岁以上）：1-2吸/次，一日2次。有些病人可能需要使用量达到4吸/次，一日2次。 青少年（12岁-17岁）：1-2吸/次，一日2次。 儿童（6岁和6岁以上）：2吸/次，一日2次。 患者应由医师定期复查评价以确保其使用最佳的本品剂量。剂量应逐渐减到能有效控制病人哮喘症状的最小剂量。若使用最小推荐量后仍然能很好地控制症状，下一步则需要考虑尝试单独使用吸入皮质激素。
三维纳米材料制备技术综述
三维纳米材料制备技术综述 摘要：纳米材料的制备方法甚多。目前，制备纳米材料中最基本的原则有二：一是将大块固体分裂成纳米微粒；二是由单个基本微粒聚集，并控制聚集微粒的生长，使其维持在纳米尺寸。本文主要介绍纳米材料分类和性能，同时介绍了一些三维纳米材料的制备方法，如水热法、溶剂热法和微乳液法。 关键词：纳米材料；纳米器件；纳米阵列；水热法；溶剂热法；微乳液法 1.引言 随着信息科学技术的飞速发展，人们对物质世界认识随之也从宏观转移到了微观，也就是说从宏观的块体材料转移到了微观的纳米材料。所谓纳米材料，是材料尺寸在三维空间中，至少有一个维度处于纳米尺度范围的材料。如果按照维度的数量来划分，纳米材料的的种类基本可以分为四类：（1）零维，指在空间中三维都处在纳米尺度，如量子点，尺度在纳米级的颗粒等；（2）—维，指在空间中两个维度处于纳米尺度，还有一个处于宏观尺度的结构，例如纳米棒、纳米线、纳米管等；（3）二维，是指在空间中只有一个维度处于纳米尺度，其它两个维度具有宏观尺度的材料，典型的二维纳米材料具有层状结构，如多层膜结构、一维超晶格结构等；（4）三维，即在空间中三维都属于宏观尺度的纳米材料，如纳米花、纳米球等各种形貌[1]。 当物质进入纳米级别，其在催化、光、电和热力学等方面都出现特异性，这种现象被称为“纳米效应”。纳米材料具有普通材料所不具备的3大效应：（1）小尺寸效应——其光吸收、电磁、化学活性、催化等性质发生很大变化；（2）表面效应——在催化、吸附等方面具有常规材料无法比拟的优越性；（3）宏观量子隧道效应，例如纳米微粒表现出令人难以置信的奇特的宏观物理特性，如高强度和高韧性，高热膨胀系数、高比热容和低熔点，异常的导电率和磁化率，极强的吸波性,高扩散性，以及高的物理、化学和生物活性等[2]。 纳米科学发展前期，人们更多关注于一维纳米材料，并研究其基本性能。随着纳米科学快速发展，当今研究热点开始转向以微纳结构和纳米结构器件为方向的对纳米阵列组装体系的研究。以特定尺寸和形貌的一维纳米材料为基本单元，采用物理和化学的方法在两维或三维空间内构筑纳米体系，可得到包括纳米阵
志贺氏菌属诊断血清说明书
志贺氏菌属诊断血清学试验操作程序 1.目的 制定标准化的志贺氏菌属诊断血清操作程序，指导对志贺氏菌属的检测2.原理 用志贺氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清，经吸收出去非特异性凝集素后制成，通过凝集试验原理诊断各型志贺氏菌。3.试剂及实验设备 3.1志贺氏菌属诊断血清：宁波天润生物药业有限公司生产的规格为22种的志 贺氏菌属诊断血清 3.2试剂保存：2~8°C避光保存，防止冻结，在有效期内使用。 3.3实验设备：玻片、吸样枪、接种环、水浴箱、玻璃管、血平板、营养琼脂、 电热高温接种灭菌器。 4.程序步骤 4.1将诊断血清于冰箱取出后平衡至室温。 4.2选择符合志贺氏菌属培养特性，并经初步生化检测符合志贺菌属生物特性的 疑似菌落。 4.3菌群分析 将经18~24h血平板上纯培养的待检菌，分别用志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验，凝集阳性时，再分别用群多价血清做玻片凝集试验，群多价血清凝集阳性时，再分别与相应的单价血清做玻片凝集试验，最终确定其血清分型。如果志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验均为阴性，可能有以下3种可能性：①K抗原的存在，处理方法：取待检菌的纯菌落于生理盐水中制成浓度约2麦氏单位的菌悬液，置于100°C水浴中煮沸30min，泠却至室温后再用诊断血清进行玻片凝集试验；②非典型菌落，处理方法：通过在营养琼脂平板上的传代让其恢复抗原性，再用诊断血清进行玻片凝集试验；③诊断血清型以外的可送市或省CDC检测。 4.4玻片凝集试验法取18~24h血平板上纯培养的待检菌，用生理盐水制成2麦 氏单位的菌悬液，取诊断血清20μL于洁净玻片上，然后取20μL待检菌悬
痢疾志贺菌
痢疾志贺菌 一、简介 志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。 我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。细菌性痢疾是一种常见病，主要流行于发展中国家，全世界年病例数超过2亿，其中500万例需住院治疗，年死亡病例达65万。志贺菌属还可感染除人类以外的其他灵长类，偶尔感染畜禽，可引起肉品等污染。 二、生物学特性 1、本质 革兰阴性短小杆菌，(2~3)μm×(0.5~0.7)μm，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。 2、培养特性 需氧或兼性厌氧，液体培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。 3、抗原结构 志贺菌属主要有菌体抗原（O抗原）而无鞭毛抗原（H抗原），个别菌型及新分离菌株有K抗原。O抗原是分类的依据，分群特异抗原和型特异抗原，借此将志贺菌属分为4群（种）40余血清型（包括亚型）。 K抗原在分类上无意义，但可阻止O抗原与O抗体的结合，在进行抗O实验时需加热煮沸，排除K抗原的结合 （1）（1)A群:又称痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae),通称志贺氏痢疾杆菌。有12个血清型，其中8型又分为三个亚型。是惟一不能发酵甘露醇的一群志贺菌。 （2）B群：又称福氏志贺氏菌（Sh.flexneri），通称福氏痢疾杆菌。发酵甘露醇。有15个血清型（含亚型及变种），抗原构造复杂，各型间有交叉反应。 （3）C群：又称鲍氏志贺氏菌（Sh.boydii），通称鲍氏痢疾杆菌。发酵甘露醇，有18个血清型，各型间无交叉反应。 （4）D群：即宋内志贺菌。抗原单一，只有一个血清型。是惟一具有鸟氨酸脱羧酶的一群志贺菌，宋内志贺菌有I相和II相两个交叉变异相。I相呈S型菌落，对小鼠有致病力，多自急性期感染病人标本中分离得。II相为R型菌落，对小鼠不致病，常从慢性患者或带菌者检出。 4、变异 （1）S-R变异存在于宋内志贺菌的两个变异相之间 （2）耐药性变异随着抗生素的滥用，耐药性日益强大 （3）营养缺陷变异有链霉素依赖株，可作为疫苗进行免疫 5、生化反应 可以发酵葡萄糖，产酸不产气 除痢疾志贺菌外，所有菌株均可以发酵甘露糖；除了宋内志贺菌外，所有菌株均不能发酵乳糖，因为缺乏β-半乳糖苷酶 6、抵抗力 志贺菌的抵抗力比其他肠道杆菌弱，加热60℃10min可被杀死（大肠埃希菌是30分钟左右）。对酸和一般消毒剂敏感。在各群志贺菌中，以宋内志贺菌抵抗力最强。在粪便中，由于其他肠道菌产酸或噬菌体的作用常使本菌在数小时内死亡，故粪便标本应迅速送检。但在污染物品及瓜果、蔬菜上，志贺菌可存活10—20d。在适宜的温度下，可在水及食品中繁
布地奈德福莫特罗粉吸入剂(信必可都保)的说明书
布地奈德福莫特罗粉吸入剂(信必可都保)的说明书 生活中难免会患上呼吸道方面的疾病，患者如果没有重视的话就很可能延误了治疗疾病的最佳时机。选择服用布地奈德福莫特罗粉吸入剂(信必可都保)治疗呼吸道疾病可以有效的控制疾病和 达到治愈疾病的目的，患者在服用药物的时候一定要仔细阅读用药说明，以免错误用药所带来的困扰。 【药品名称】 通用名称：布地奈德福莫特罗粉吸入剂 商品名称：布地奈德福莫特罗粉吸入剂(信必可都保) 英文名称：Budesonide and Formoterol Fumarate Powder for Inhalation 拼音全码：BuDiNaiDeFuMoTeLuoFenXiRuJi(XinBiKeDuBao) 【主要成份】本品为复方制剂，其组份为：布地奈德(80微克／吸)和富马酸福莫特罗(4.5微克，吸)。
【性状】本品为多剂量粉吸入剂，在储库型干粉吸入装置中的内容物为白色或类白色颗粒。 【规格型号】(80μg+4.5μg)*60吸 【用法用量】本品不用于哮喘的初始治疗。本品应个体化用药，并根据病情的严重程度调节剂量。这不仅在开始使用复方制剂时需要注意，当需要调节维持剂量时也需要注意。如果某个患者所需联合治疗的剂量超出了复方制剂的范围，则应增开适当剂量的β-受体激动剂和/或皮质激素的处方。患者应由医师定期复查评价以确保其使用最佳的信必可都保剂量，剂量应逐渐减到能有效控制病人哮喘症状的最小剂量。若使用最小推荐量后仍然能很好地控制症状，下一步则需要考虑尝试单独使用吸入皮质激素。推荐剂量：成年人和青少年(12岁和12岁以上)：1-2吸/次，一日2次。在常规治疗中，当一日2次剂量可有效控制症状时，应逐渐减少剂量至最低有效剂量，甚至一日一次给予。低于12岁的儿童：有效性和安全性尚无完全确定。特殊患者群：老年患者不需调整剂量。尚无肝肾功能损害的患者使用信必可都保的资料。因为布地奈德和福莫特罗主要通过肝脏代谢清除，故严重肝硬化患者的药物暴露量估计会增加。