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2017年临床检验技师考试生化检验第九章重要考点

2017年临床检验技师考试生化检验第九章重要考点
2017年临床检验技师考试生化检验第九章重要考点

2017年临床检验技师考试生化检验第九章重要考点

本章考点:

1.酶学检查

(1)急性心肌梗死时心肌酶及标志蛋白的动态变化

(2)肌酸激酶及同工酶和同工酶亚型、乳酸脱氢酶及同工酶检查在心肌损伤诊断中的临床意义及方法评价

2.肌钙蛋白、肌红蛋白检查及BNP/Ntpro-BNP

(1)肌钙蛋白T和I的测定及其在心肌损伤诊断中的临床意义

(2)肌红蛋白测定及其在心肌损伤诊断中的临床意义

(3)在诊断心肌梗死和进行溶栓治疗时,综合考虑应选择的试验及其临床意义

(4)BNP/Ntpro-BNP临床应用

急性缺血性心脏病在欧美国家具有很高的死亡率,我国近年来有明显增加的趋势。典型的病例可以根据病史、症状及心电图(ECG)的特殊改变进行诊断。大量的临床实践发现,约有25%的急性心肌梗死(AMI)患者发病早期没有典型的临床症状;约50%左右的AMI患者缺乏ECG的特异改变。在这种情况下急性缺血性心肌损伤生化标志物的检测在诊断AMI时尤为重要,尤其是AMI早期或临床症状不典型、ECG未出现明显改变的心肌梗死,如内膜下MI的诊断,并可及时指导、监测溶栓治疗和对预后进行判断,降低AMI后的死亡率。

基于AMI后梗塞部位心肌细胞内的化学物质将释放到外周血中病理生理改变,通过对这些化学物质的测定可诊断AMI。决定一种标志物血浓度变化的因素有该物质的分子大小、在细胞内的分布(胞浆中的小分子蛋白较结构蛋白更易进入血循环)、释放率、清除率和心肌特异性等。典型的AMI心肌损伤标志物改变随发作时间的推移而呈现典型的变化(表3-9-1):

表3-9-1 急性心肌缺血损伤标记物

标志物

分子

量(KD)

学决定

水平

痛后升

高时间

(h)

达峰

时间(h)

恢复

时间(h)

增高

倍数

Mb17.8

100

1~

3

6~7

18~

30

5~

20

CK86

200

3~

8

10~

36

72~

96

5~

25

CK-MB86

25

3~

8

9~

30

48~

72

5~

20

MB2/MB1

1.5

1~

4

4~8

12~

24

3~5

MM3/MM1

1.0

2~

4

8~

12

24~

32

5~

12

LD

135~

140

240

8~

18

24~

72

6~

10d

3~5

LD1/LD2

1.0

6~

12

24~

36

4~

7d

5~

10

CTnT39

0.1

3~

6

12~

48

5~

14d

30~

200

CTnI24

0.5

5~

8

14~

48

4~

10d

20~

50

AST93

45

8~

12

16~

48

3~

6d

2~

25

一、酶学标志物

七十年代至九十年代初,最常用的心肌损伤诊断标志物为心肌酶谱,即:肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK—MB),乳酸脱氢酶(LD)及其同工酶(LD1),天门冬氨酸转移酶(AST)。

九十年代以后,AMI生化标志物研究非常活跃,发现了一些早期诊断的标志物和特异性和敏感度均较佳的确定性标志物,明显地增强了血清生化标志物在AMI早期诊断和病情监测中的作用。而AST、LD及其同工酶,包括αHBDH等在内的血清酶学标志物因为特异性不高,AMI后出现异常的时间相对较晚,目前在AMI诊断中的作用越来越小,已逐渐少用以致基本不再应用。

下面我们对这几种酶学的特点、分布及在AMI诊断和其他疾病诊断中的应用价值做一介绍。

(一)肌酸激酶

肌酸激酶(CK)分子量为86KD,广泛存在于细胞浆和线粒体中,该酶催化体内ATP与肌酸之间高能磷酸键转换生成磷酸肌酸和ADP的可逆反应,为肌肉收缩和运输系统提供能量来源。在人体三种肌肉组织(骨骼肌、心肌和平滑肌)中都含有大量CK,肝、胰、红细胞等CK 的含量极少。胞浆CK的酶蛋白部分由两个亚基组成,不同亚基的组合将其分为CK—MM、CK —MB、CK—BB三种同工酶。骨骼肌里几乎都是CK—MM,胎儿肌肉组织和富含平滑肌的器官,如胃肠道、膀胱、子宫也都有一定量CK,但CK—BB含量相对颇高,脑中CK—BB含量明显高于其他组织;心肌是含CK—MB较多的器官,而且心肌不同部位CK—MB含量也不尽相同,前壁>后壁,右心室>左心室,所以不同部位AMI时MB的释放量不仅与梗塞面积、程度有关,也和梗塞部位有关。在心肌、骨骼肌和脑等组织细胞的线粒体内还含有另一种结构不同的CK,它也是二聚体,称为CK—MiMi(线粒体CK)。CK在骨骼肌、心肌、脑组织大量存在,常用于这些疾病的诊断。

血清中CK的测定方法是连续监测法。IFCC发表了CK测定的参考方法。

参考值:

男24~195U/L

女24~170U/L

CK水平在人群中不是正态分布,受到性别、年龄、种族、生理状态的影响。男性因为肌肉容量大,血清CK活性要高于女性。新生儿出生时,由于骨骼肌受到损伤和短暂的缺氧可引起CK释放,故血清CK水平约为成人的2~3倍;出生后7个月可降至成年人水平。儿童和成人的血清CK会随着年龄的增长而发生变化:女性的平均CK值在最初20年中会呈下降趋势,以后变化不大,而男性的平均CK值在15~20岁会出现生理性的高峰,其他时间变化不大。老人和长期卧床者由于肌肉容量减低也可能低于成人水平。在不同种族之间,白人的CK活性通常为黑人的2/3。故在确定参考值时应注意不同“正常人群”的情况。

临床意义:

1.当发生AMI时,CK活性在3~8小时升高,血中半寿期约为l5小时,峰值在10~36小时之间,3~4天后回复至正常水平。AMI时CK升高一般为的数倍,很少超过的30倍。

2.如果在AMI后及时进行了溶栓治疗出现(再灌注)时,梗塞区心肌细胞中的CK就会被冲洗出来,导致CK成倍增加,使达峰时间提前。故CK测定有助于判断溶栓治疗后是否出现。但总CK活性测定仅有中度敏感,不能检出很早期的。如在发病4小时内CK即达峰值,提示冠状动脉再通的能力为40%~60%。

3.施行心律转复、心导管和无并发症的冠状动脉成形术等均会引起CK值的升高。值得注意的是,心脏插管以及冠状动脉造影在导致CK总活性升高的同时,可以引起CK—MM 同工酶的升高,但CK—MB同工酶的活性上升并不明显。

4.心脏手术和非心脏手术后都将导致CK活性的增高,且增高的幅度与肌肉的损伤范围的大小以及手术时间的长短密切相关。心肌炎时CK可轻度增高。

5.生理性增高人体在运动后将导致CK活性明显增高,运动越剧烈,时间越长,则CK 活性上升的幅度越大,通常在运动后l2~20小时达到峰值,并维持36~48小时。一般而言,对于较少运动的人,运动时间越长、幅度越剧烈,则CK上升的幅度越高;而对于训练有素

的运动员,则CK在同等条件下增高的幅度有限;也有报道,怀孕妇女通常在14~26周时出现CK活性降低,而后又逐渐增高,分娩时CK升高。

6.由于骨骼肌中CK单位含量极高,且其全身总量大大超过心肌,所以在各种肌肉损伤(如挫伤、手术、肌肉注射、癫痫发作)和疾病(如多发性肌炎、肌炎、横纹肌溶解症、进行性肌营养不良、重症肌无力、甲状腺功能减低出现粘液性水肿)时,CK极度升高,活性常高于参考数值数十至数百倍。

7.在急性脑外伤、恶性肿瘤时CK也可增高。

8.长期卧床,CK可有下降。

注意事项:

(1)AMI诊断时注意CK-MB与CK的时效性。AMI发病8h内查CK不高,不可轻易排除诊断,应继续动态观察;24小时CK测定意义最大,因为此时CK应达峰值,如小于上限,可除外AMI;发病48h内多次测定CK不高,且无典型的升高、下降过程,可怀疑AMI的诊断;但要除外两种情况:①CK基础值极低的病人发生心梗时其CK升高后可在正常范围内;②心梗范围很小,心内膜下心梗。

(2)血清、血浆、脑脊液以及羊水等均可做为CK分析的标本。常用的抗凝剂为肝素,其他抗凝剂或多或少地会对CK活性的测定产生影响,但黄疸和混浊标本对结果无影响。

(3)CK测定过程中,主要的干扰物质是腺苷酸激酶(AK)以及肌激酶 (myokinase))它们在红细胞中含量尤为丰富,可导致结果偏高,故标本应避免溶血。加入AK抑制物如单磷酸腺苷(AMP)的试剂盒可抗溶血的干扰。

(二)肌酸激酶同工酶

CK是由M和B亚单位组成的二聚体,形成CK-MM(主要存在于骨骼肌和心肌中)、CK-MB(主要存在于心肌中)和CK-BB(主要存在于脑组织中)三种同工酶,此外在线粒体中还存在一种同工酶(CK-MiMi)。

CK-MB测定方法:两种

参考值:

CK—MB活性

10~24U/L,cutoff limit(诊断限):>25U/L(免疫抑制一酶动力学法)

<6% total CK,cutoff limit:>6% total CK(琼脂糖凝胶电泳法)

MB质量(maSS)

男1.35~4.94ng/ml;cutoff limit:>5ng/ml (免疫学法)

女0.97~2.88ng/ml;cutoff limit:>5ng/ml (免疫学法)

临床意义

(1)关于AMI

1)通常血浆中的CK-MB来自心肌,若患者具有CK—MB活性升高和下降的序列性变化,且峰值超过参考值上限2倍,又无其他原因可解释时,应考虑AMI。CKMB质量用于心梗的诊断时,所用诊断界值推荐为正常人参考数值上限的99%分位。CK-MB mass胸痛发作3小时后的诊断AMI阳性率可达50%。6小时的诊断阳性率可达到80%。

2)AMI发作后如未进行溶栓治疗,CK-MB通常在3~8小时出现升高,达峰时在发病后9~30小时,于48~72小时恢复至正常水平。与总CK测定比较,CK-MB的峰时稍有提前,且消失也较快。由于诊断窗较窄,无法对发病较长时间的AMI进行诊断。临床上也可利用这一点对再梗死进行诊断。

3)以血清CK-MB水平评价AMI的梗塞面积大小存在一定的争论,一般认为,梗塞范围较小者,CK-MB达峰时间较早,恢复正常时间较短。实际CK—MB达峰时间更与病情的严重程度而不是梗塞的面积相关,由此可认为CK-MB达峰早者比达峰晚者预后好。

4)溶栓治疗时,CK-MB早期升高及短时间内达峰是AMI的征兆。下壁AMI在治疗2小时后CK-MB增加2.2倍以上,前壁AMI在治疗2小时后增加2.5倍以上,均提示心肌出现再灌注,上述标准的敏感度为85%,敏感度为100%。

(2)关于不稳定性心绞痛(UAP) 当心肌缺血时CK-MB常不增高,故UAP患者大多数无CK-MB增高,即便增高也不超过正常上限的2倍。

(3)CK-MB并不对心肌完全特异,在骨骼肌中也少量存在。外科手术和骨骼肌疾病时常出现假阳性。急性骨骼肌损伤时可出现CK-MB一过性增高。但CK-MB/CK常<6%,藉此可与心肌损伤鉴别。也有人建议以CK—MB质量/总CK活性的比值为80ng/U作为CK—MB的心肌来源与骨骼肌来源的鉴别。

注意事项:

(1)由于目前CK-MB的测定:临床使用的免疫抑制一酶动力学法不特异,在急性脑外伤、癫痫时BB明显增高,恶性肿瘤(如恶性组织细胞病)因胚胎化细胞产生BB增加,这些病人的血清在应用M亚基的抗体封闭法测定CK—MB活性时,也可见所谓的“CK-MB”增高,但实际是BB增高。CK—BB、巨CK、线粒体CK以及某些CK的变异体都不会被M亚基的抗体封闭,这些均致CK-MB结果偏高,在日常检测中假阳性率颇高,故不少国内外学者建议摒弃此法。相比之下采用免疫学的方法测定CK-MB质量受到的干扰少,值得推广。

(2)由于CK活性很易受到EDTA、柠檬酸、氟化物等抗凝剂的抑制,因此一般采用血清或肝素抗凝标本。CK-MB在常温下不太稳定,通常言样本应在24~48小时内测定。如果不测定,应将其血清或血浆分离,置于低温保存,温度越低,则保存时间越长。

(三)乳酸脱氢酶及其同工酶

乳酸脱氢酶(LD)分子量为l35~140KD,由两种亚单位组成:H(表示heart)和M(表示muscle)。它们按不同的形式排列组合形成含4个亚基的5种同工酶,即:LD1(H4)、LD2(H3M1)、LD3(H2M2)、LD4(HM3)、LD5(M4)。

LD催化丙酮酸与乳酸之间还原与氧化反应,在碱性条件下促进乳酸向丙酮酸方向的反应,而在中性条件下促进丙酮酸向乳酸的转化(为逆反应)。LD是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。

由于LD几乎存在于所有体细胞中,而且在人体组织中的活性普遍很高,所以血清中LD 的增高对任何单一组织或器官都是非特异的。在AMI时升高迟、达峰晚,故对早期诊断价值不大。由于半寿期长(10~163小时),多用于回顾性诊断,如对入院较晚的AMI病人、亚急性MI的诊断和病情监测。

LD在组织中的分布特点是心、肾以LD1为主,LD2次之;肺以LD3、LD4为主;骨骼肌以LD5为主;肝以LD5为主,LD4次之。血清中LD含量的顺序是LD2>LD1>LD3>LD4>LD5。

LDH总活性测定LD最常用的方法有两大类:测定酶在正反应中NAD的还原速率(L→P),此法在国内临床试验室中广泛应用;测定酶在逆反应中NADH的氧化速率(P→L)。IFCC推荐的LDH测定参考方法是基于L→P的反应。

参考值:

100~240U/L(L→P)

临床意义:

(1)用于AMI和亚急性MI的辅助诊断:AMI后8~18小时开始升高,峰值为24~72小时,持续时间6~10天。AMI时LD的升高倍数多为5~6倍,个别可高达10倍。

(2)由于LD特异性低,通常可用于观察是否存在组织、器官损伤。如LD持续正常,可除外组织、器官损伤;如LD总酶活性升高,可能有组织、器官损伤,常用于广泛性癌症化疗时的监测。

(3)各种疾病的急性时相、血液病(巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血)、心肺疾患(AMI、肺梗塞)、肝胆疾患(肝炎、肝硬化、阻塞性黄疸、心力衰竭和心包炎时肝淤血)、

恶性肿瘤、肾疾患、脑血管病变、肌病、休克等LD及其病变部位相应优势的同工酶含量均可增高。

(4)同工酶测定:多种因素都可导致LD升高,因此LD诊断的特异性差。可通过LD同工酶分离和定量来提高其诊断特异性。LD同工酶分离和定量的方法主要为电泳法。心肌损伤时主要是LD1 同工酶增高,因此测定LD1 同工酶才对AMI诊断有意义。如采用LD1/总LD 比值则可进一步提高诊断的特异性。但由于方法繁琐,目前LD同工酶测定在AMI诊断上应用少。

参考值:

LD1 27.6%~36.4%

LD2 36.4%~43.0%

LD3 13.1%~20.1%

LD4 5.2%~9.2%

LD5 1.9%~7.1%

同工酶的比例应为:LD2>LD1>LD3>DL4>LD5(小儿有时可出现LD1>LD2);其中,

LD1/LD2<0.7,AMI的诊断限为LD1/LD2>1.0。

由于不同实验室试验条件不同,故各实验室应有自己的参考值。

临床意义:

(1)通常在AMI后6小时LD1开始出现升高,总LD活性升高略为滞后。由于AMI时LD1较LD2释放多,因此LD1/LD2>1.0,LD1/LD2比值的峰时约在发病后24~36小时,然后开始下降,发病后4~7天恢复正常。

(2)当AMI病人的LD1/LD2倒置且伴有LD5增高时,预后比仅出现LD1/LD2倒置差,LD5增高提示病人心衰伴有肝脏淤血或肝功能衰竭。

(3)LD1活性大于LD2或出现LD图形倒置也可出现在心肌炎、巨细胞性贫血和溶血性贫血,但体外溶血通常不会导致LD1>LD2。

(4)在肝实质病变,如病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝癌时。由于LD5在血清LD中所占比例很少,总LD测定往往不易检出。但同工酶检查可出现LD5>LD4,在胆道梗阻未累及肝实质前仍为LD4>LD5。恶性肿瘤肝转移时常伴有LD4和LD5升高。

(5)骨骼肌疾病时LD5>LD4,各型肌萎缩早期LD5升高,晚期可出现LD1和LD2升高。

(6)肺部疾患可有LD3升高,白血病时常有LD3和LD4的升高。

(四)α-羟丁酸脱氢酶(少用)

由于LD专一性不强,可作用于一系列具有α酮酸结构的化合物。当以α-酮丁酸作底物时所测酶的活性就称为α-羟丁酸脱氢酶(α-hydroxybutyrate dehydrogenase)活性。α-酮丁酸是LD1和LD2的共同底物,其活性实际上就是两种同工酶之和。由于具有4个H亚基的LD1比其他同工酶对α-酮丁酸有更大的亲和力,故可用该指标反映LD1的活性变化。由于试验所采用的底物与LD测定不同,其酶活性不等于乳酸为底物的LD1和LD2的活性之和。

参考值:

90~220U/L

临床意义:

同LD1,用于AMI和亚急性心肌梗死的辅助诊断。

注意事项:

1.标本采取时应注意避免溶血。红细胞中LD是血清中的100倍,故溶血可使结果偏高。草酸盐抗凝剂抑制LD,应避免使用。由于LD的稳定性与温度有很大关系,不同的同工酶在不同的温度下稳定性也不同,因此不管在什么温度下(包括冷冻)保存,均可导致LD酶活性丧失。

2.LD及其同工酶作为早期诊断AMI的标志物,特异性和敏感度较差,目前在临床上的应用已逐渐减少。

(五)天门冬氨酸氨基转移酶(AST)

AST为心肌酶谱的传统项目。由于AST在AMI发作后动态变化与LD相似,且无特异性,现已不用作心肌损伤的标志。

二、心肌损伤的蛋白标志物

在过去三十年中,实验室诊断AMI主要是通过测定“心肌酶谱”。但是酶学指标存在许多不足,酶活性一般在发病后一段时间才出现升高,因而对AMI早期诊断不很敏感。另外酶学指标特异性较差,在人体其他组织,尤其骨骼肌中大量存在,这些组织疾病也可导致“心肌酶”升高。此外,酶学指标在AMI后持续时间不很长,各自的诊断时间窗较短。八十年代,CK-MB活性测定曾被认为是诊断AMI的“金标准”(Golden Standard),但其在骨骼肌损伤出现假阳性确是无可争辩的的事实。所有酶学指标均无法有效地诊断minor myocardial damage(MMD,微小心肌损伤),这对不稳定心绞痛的诊断、预后和治疗极为不利。由于酶学指标的上述缺点,人们不断地寻找新的指标来替代它们。理想的生化指标要求:①对心肌具有高度特异性,在心肌中具有高浓度,而在其他组织中不存在或极少;②在心肌损伤时能够迅速、大量地释放到血液中,从而保证可以早期、灵敏的诊断AMI;③其异常可以在血液中持续较长时间、稳定,利于检测;④测定时间短、费用低廉。目前尚没有一项标志物达到同时具有上述4项特点。

九十年代CK-MB质量的测定,确定了这一指标在诊断AMI中不可替代的地位。近几年研究证明心肌蛋白质如肌红蛋白(Mb)和心肌肌钙蛋白(cTn)在心肌损伤的诊断和治疗监测中更有价值。

随着灵敏、特异的心肌标志物的临床应用,使得心肌缺血损伤可能在发病早期检出,因此专家们提出了急性冠状动脉综合征(ACS)的概念。ACS是指动脉粥样硬化斑块脱落,血小板聚集,血栓形成,致使冠状动脉狭窄、阻塞,引起心肌缺血以及梗死的病理现象。临床表现可以症状不明显,或为不稳定性心绞痛(UAP),或为AMI,甚至心律失常导致突然死亡。心肌蛋白标志物检测在诊断ACS中起着极其重要的作用。肌红蛋白目前是ACS时最早升高的标志物,心肌肌钙蛋白是ACS的确诊标志物。

(一)肌红蛋白

肌红蛋白(Mb),分子量为17.5KD,是一个具有153个氨基酸的多肽链和一个含铁血红素辅基组成的亚铁血红素蛋白,存在于骨骼肌和心肌等组织。它能可逆地与氧分子结合,增加氧扩散进入肌细胞的速度。由于骨骼肌和心肌组织中的Mb免疫学性质相同,因此用免疫学方法无法将其分辨开。近年来随着单克隆技术的发展,建立了荧光酶免法、化学发光法等双抗体夹心法测定Mb,灵敏度达到了ng水平、操作简单,可在数十分钟内完成测定,已越来越广泛地为临床所接受。

参考值:

男性20~80μg/L

女性l0~70μg/L

诊断限:>100μg/L

血清Mb水平随年龄、性别及种族的不同而异,黑人的Mb水平要高于白人。

临床意义:

(1)由于Mb的分子量小,可以很快从破损的细胞中释放出来,在AMI发病后1~3小时血中浓度迅速上升,6~7小时达峰值,l2小时内几乎所有AMI患者Mb都有升高,升高幅度大于各心肌酶,因此可以作为AMI的早期诊断标志物。

(2)由于Mb半寿期短(15min),胸痛发作后6~12小时不升高,有助于排除AMI的诊断,是筛查AMI很好的指标。

(3)由于在AMI后血中Mb很快从肾脏清除,发病l8~30小时内可完全恢复到正常水平。故Mb测定有助于在AMI病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。Mb频繁出现增高,提示原有心肌梗死仍在延续。

(4)Mb是溶栓治疗中判断有无再灌的较敏感而准确的指标。

注意事项:

(1)由于Mb也存在于骨骼肌中,而且仅从肾小球滤液中清除,所以急性肌肉损伤以及各种原因引起的肌病患者、长时间的休克、急性或慢性肾功能不全时Mb都会升高。当Mb作为早期、定量诊断AMI的生化标记物时应除外上列疾病或与之有关的疾病。

(2)不同厂家试剂盒对标本的要求也不同,应按要求取血。如使用抗凝剂,通常采用肝素抗凝。此外,用不同的分析和检测技术所得参考值不同。故各实验室都应建立各自的参考值范围。

(3)由于碳酸酐酶同工酶Ⅲ不存在于心肌,主要存在于骨骼肌;而其从骨骼肌中的释放模式又和Mb相同,故有人通过Mb/CA Ⅲ比值来提高Mb诊断AMI的敏感性和特异性,研究表明Mb/CA Ⅲ于AMI症状出现2小时后就见升高,敏感性和特异性均比CK和CK-MB高,也是早期心肌损伤的标志物之一。

(二)心肌肌钙蛋白

肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白。心肌肌钙蛋白(cTn)是由三种不同基因的亚基组成:心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTn I)和肌钙蛋白C(TnC)。目前,用于ACS实验室诊断的是cTnT和cTnI。

肌钙蛋白T(TnT)分子量为 37KD,是原肌球蛋白结合亚基。有三种亚型:骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)包括快骨骼肌型和慢骨骼肌型,此外还有心肌型。心肌肌钙蛋白T(cTnT)的大部

分是以C-T-I的复合物形式存在于细丝上,6%—8%以游离的形式存在于心肌细胞浆中。因cTnT与骨骼肌TnT的基因编码不同,骨骼肌中无cTnT的表达。cTnT相对于两种骨骼肌亚型有40%的不同源性。cTnT分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。目前所用的单克隆抗体为对心肌特异的捕捉抗体和标记抗体。

TnI(肌钙蛋白I)存在三种亚型:骨骼肌肌钙蛋白I(sTnI)中存在快骨骼肌型和慢骨骼肌型,它们具有相似的分子量(20KD),但二者之间的氨基酸序列约存在40%的差异;第三种为心肌型。心肌肌钙蛋白I(cTnI)与骨骼肌型的氨基酸序列也存在40%的差异。但人的eTnI 氨基末端比sTnI多31个amino acid,使其molecular weight达到22KD,这种独特的顺序使之具有较高的心肌特异性,有助于制备相应的单克隆。cTn]是以cTnI-C-T复合物和游离cTnI形式存在于心肌细胞中,心肌损伤时释放到血循环中后,cTnI-C-T可进一步分解为cTnI-C复合物和游离cTnI。故血循环中除cTnI-C-T、游离cTnI外还有cTnI-C,而且cTnI-C 是其在血液中的主要形式。其代谢产物由肾脏排出体外。

TnC分子量为l8KD,是Ca2+结合亚基,每个分子结合2个Ca2+。心肌和骨骼肌的TnC 结构相同。

由于cTnT和cTnI与骨骼肌中的异质体分别由不同基因编码,具不同的氨基酸顺序,有独特的抗原性,故它们的特异性要明显优于CK—MB同工酶。心肌以外的肌肉组织出现损伤或疾病时,CK和CK-MB可能会升高,而cTnT和cTnI则不会超过其临界值。由于它们在正常血清中含量极微,在AMI时明显增高,且增高倍数一般都超过总CK和CK-MB的变化。cTnT 和cTnI由于分子量小,发病后游离的cTn从心肌细胞浆内迅速释放人血,血中浓度迅速升高,其时间和CK—MB相当或稍早。虽然肌钙蛋白半寿期很短(cTnT 2小时,游离cTnI的半寿期据报道为2h~5d不等),但其从肌原纤维上降解的过程持续时间很长,可在血中保持较长时间的升高,故它兼有CK-MB升高较早和LD1诊断时间窗长的优点。故目前cTn已有逐渐取代酶学指标的趋势。肌钙蛋白的测定主要采用双抗体夹心的免疫学方法,检测方法则包括化学发光以及电化学发光等。

参考值:

cTnT<0.04ng/ml,AMI cutoff value>0.1ng/ml

以下均为贝克曼Access化学发光分析系统的数据,不同厂家的试剂其诊断界值不同

cTnI<0.04ng/ml(99%分位)

CV%为l0%的测定值为0.1ng/MI非ST段抬高性心肌梗死cTnI诊断界值在0.16ng/ml诊断时,特异性和敏感度达85%~95%。

0.04~0.16 ng/ml不排除急性冠脉综合征。

临床意义:

cTn被认为是目前用于ACS诊断最特异的生化指标,它们出现早,最早可在症状发作后2h出现;具有较宽的诊断窗:cTnT(5~14天),cTnI(4~10天)。在它们的诊断窗中,cTn 增高的幅度要比CK-MB高5~10倍。由于在无心肌损伤时cTn在血液中含量很低,因此也可用于微小心肌损伤的诊断,这是以前酶学指标所难以做到的。cTn还具有判断预后的价值,对任何冠状动脉疾患病人,即便ECG或其他检查(如运动试验)阴性,只要cTn增高,应视为具有高危险性。

1.是早期诊断AMI最好的标志物

AMI病人于发病后3~6小时升高,发病10~120小时内检测敏感性达100%,峰值时间于发病后l0~48小时左右出现,呈单相曲线,可达参考值范围的30~40倍。出现峰值较晚或峰值较高的病人增高可持续2~3周。对于非Q波MI、亚急性MI或用CK—MB无法判断预后的病人更有意义。

2.对UAP预后的判断

UAP患者常有MMD发生,但又达不到AMI的诊断标准。这种缺血性心肌损伤可通过cTn 升高得以发现。UAP患者cTn升高幅度小,经治疗后约2/3以上转阴,说明心肌细胞为一过性损伤或微小坏死,与AMI有本质不同。cTn升高者是发展为AMI或猝死的高危人群,动态观察cTn水平变化对其诊断与判断UAP预后具有重要意义。有研究表明UAP患者中cTn升高组30天内AMI、心脏猝死和顽固性心绞痛的发生率为43.8%,明显高于cTnT正常组(7.1%)。

这说明如UAP患者cTn正常,则预后良好,如cTn阳性则应严密监视,可进行冠脉造影,观察冠脉病变严重程度,并给予药物治疗。如可能,应进行经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)或冠状动脉搭桥术(CABG)。cTn对UAP诊断的时间窗为胸痛发作后数小时至数天,也可达数周,与心肌缺血损伤时间的长短有关。应在cTn和CK-MB质量各自诊断的时间窗内适当地多次测定此二指标才能推断。

3.对于ST段抬高的AMI病人,迅速地再血管化已成为临床标准的治疗方案。溶栓治疗和/或PTCA可再通冠脉和减少死亡率。目前较为理想的非入侵性的溶栓疗效的判断组合为:生化标志物加典型的临床表现或ECG变化。冠脉再灌的早期指标有CK-MB、Mb。CTn对于再灌的评估不够理想。

4.估计梗塞面积和心功能

cTn后期峰值与梗塞面积呈正相关,可反映心肌细胞坏死的数量;但利用cTn的峰值浓度来估计梗塞的面积不一定可靠。但cTn累积释放量与心功能受损程度呈正比。

5.其他MMD,如钝性心肌外伤、心肌挫伤、甲状腺机能减退病人的心肌损伤、药物的心肌毒性、严重脓毒血症和脓毒血症导致的左心衰时cTn也可升高。有研究表明:心肌酶谱测定在心肌炎诊断中敏感性很低(15%),但cTn有相对较高的检出值和较长的上升时间。多篇研究表明急性心肌炎的病人cTnI的阳性率较高(88%),但多为低水平增高。

6.由于其他心肌标志物的心肌特异性不如cTn,故cTn被推荐用来评估围手术期心脏受损程度,确定有无围手术期AMI或了解心脏及瓣膜手术时心脏保护措施是否得当,特别是冠状动脉搭桥术后MI和MMD的鉴别。一般有围手术期MI者cTn会持续释放,血中浓度可达5.5~23ng/ml,术后第四天达高峰;无MI者cTn释放取决于心脏停搏时间的长短,动脉被夹注时间短暂者术后第一天cTn有轻度增高,动脉被夹注时间较长者血中cTn增高可延续至术后第五天。

7.cTnT用于血透病人心血管事件预测,其临床价值有待于进一步研究。有文献报告cTnT 增高提示病人预后不良。冠状动脉粥样硬化性心脏病或猝死的可能性加大。cTnI因透析柱吸附而灵敏度不够。

注意事项:

(1)在对AMI诊断方面,cTnT和cTnI价值相同。

(2)由于目前cTnT的试剂为Roche公司专利,只有一家出品该试剂。而cTnI试剂生产厂家很多。由于cTnI分子在血液中极易被蛋白酶先从C末端(amino acid 1~30),再从N 末端(amino acid 110~210)降解;cTnI表面含2个丝氨酸和2个半胱氨酸残基,丝氨酸残基在体内被蛋白激酶A磷酸化,使cTnI分子构型改变,可影响抗体与之结合;AMI时血循环中50%的cTnI是磷酸化形式。半胱氨酸残基易被氧化或还原,这也将改变cTnI分子构型。只有制备针对cTnI分子中部稳定区抗原决定簇,并同时不受以上因素影响的单克隆抗体才能对心肌释放的cTnI进行等分子的测定。市售试剂盒针对cTnI不同的抗原决定簇抗体的识别位点不同,有些抗体结合部位恰在上述不稳定或构型改变区域,检测血中cTnI的存在形式也不一样,故不同试剂盒的参考范围相差很大,cTnI的标准化是当前急待解决的大问题。选择针对稳定表位的单克隆抗体的试剂如贝克曼accuTnI试剂,可以得到稳定的检测结果。

(3)最好建立本实验室参考值。

(4)血浆和血清的分析结果有所差异,要注意试剂盒对样本的要求。

(5)严重的溶血将影响测定结果,但轻微的溶血或脂血对结果不造成影响。有报道,某些cTnI试剂盒可能受到人抗鼠抗体、嗜异性抗体及类风湿因子的影响。

三、心脏标志物的临床应用建议

急性心肌梗死的标志物从酶类发展到蛋白类,从诊断特异性和敏感性来看,蛋白类标志物优于酶类标志物。

1.早期标志物:指症状出现6小时内血液中升高的标志物。

Mb(AMI发生0.5-2小时可升高)

CK、CK-MB(AMI发生3-8小时可升高)

cTnT、cTnI( AMI发生3-6小时可升高)

可作为早期的标志物。

2.中晚期标志物:指症状发生后2-3天或更长时间的病人,

LDH及其同工酶 (维持6-10天)

cTnT (维持5-7天)

cTnI (维持10-15天)

可作为中晚期标志物。

3.排除标志物:可作为排除标志物的有

Mb(早期阴性可排除,晚期阴性不能排除)

cTnT,cTnI (中晚期不升高不能完全排除)

4.确证标志物:指在症状出现后6-12小时升高,并能维持异常升高几天,必须有高的灵敏度和特异性。

cTnT,cTnI是目前认为最好的确证标志物,但仍需结合病史和其他实验室检查作出诊断。

5.经济原因:蛋白类标志物测定相对酶类测定花费较高。

6.分析时间周期:严格控制总的分析时间在1小时内。

1988年deBold从猪脑中发现了一种具有利钠利尿作用的多肽,命名为脑钠肽,又称B 型钠尿肽(BNP)。很快发现,BNP的主要分泌部位在心室。人心肌细胞首先合成的是含108个氨基酸的B型钠尿肽原(proBNP),之后在内切酶的作用下被切割为含76个氨基酸的N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP,MW 8.5 kD)和含32个氨基酸的C端多肽BNP(MW 3.5 kD)。钠

尿肽家族的分子结构中包括由二硫键连接构成的环状结构,可与钠尿肽受体结合发挥利钠、利尿、扩血管、拮抗肾素一血管紧张素一醛固酮系统(RAAS)和交感神经系统(SNS)的作用;NT proBNP不具有生物学活性。当心室容量负荷或压力负荷增加时,心肌合成和释放

BNP/NT-proBNP就会增多。国外大规模多中心临床试验的结果证实,BNP/NT-proBNP是诊断心衰的较好的心肌标志物。欧洲心脏病协会(ESC)和美国临床生化科学院(NACB)分别于2001年和2004年将BNP/NT-proBNP列人了其起草的“心衰诊断及治疗指南”和“心肌标志物的应用指南”中。欧美国家对于BNP/NT-proBNP的临床应用研究已有十余年,成熟的试剂盒已被广泛应用于心衰疾病的诊断和鉴别诊断。

习题:

1.A.CK B.Mb C.cTn D.LD1 E.AST

1)用于术后心梗判断的较好指标是( )

『正确答案』C

2)AMI发生后,血中出现最早的心肌损伤标志物是( )

『正确答案』B

3)用于排除AMI发生的较好指标是( )

『正确答案』B

4)目前作为心肌损伤确诊标记物的指标是( )

『正确答案』C

2.患者,男性,45岁,突然感觉胸痛,4小时后到医院就诊。以下哪项检查对于排除心肌梗死最有帮助( )

A.CK

B.CK-MB

C.cTn

D.Mb

E.以上都可以

『正确答案』C

补充内容:

七十年代末,WHO(世界卫生组织)提出诊断AMI的标准:①病史:急性、严重的胸痛(硝酸甘油无法缓解),超过20分钟;②典型的心电图(ECA3)变化:持续异常的Q波或在两个以上的导联出现Q波变化(时间持续24小时以上);③血清酶学变化:酶活性出现典型的升高和降低改变,并与临床症状相关联。

随着新的标志物的出现,该标准已经得到进一步的修改。Angina和AMI过去一直被看成两个独立的疾病,但近年随着诊断和治疗方法的改进,人们对这两种疾病有了新的认识。目前多数学者认为,ischemic heart disease(缺血性心脏病)是从stable angina pectoris(SAP,稳定性心绞痛),到unstable angina pectoris(UAP,不稳定性心绞痛),到non-Q wave myocardial infarction(NQMI,非Q波心肌梗死),到Q wave my-ocardial infarction(QMI,Q波心肌梗死)这样一个myocardial ischemia程度由轻到重的连续病理过程,不同阶段之间无完全清楚的界限,象波谱一样分布;临床表现既可交叉,又可不同。

从临床角度来看,acute coronary syndrome(ACS,急性冠状动脉综合征)是涵盖了UAP、NQMI和QMI的一组病症。近年许多文献资料和随机对照试验中也将心肌梗死分为ST段抬高的心肌梗死(STEMI)和非sT段抬高的心肌梗死(NSTE-MI)。

临床实践证明,急诊病人的胸痛在疾病诊断时具有很大的挑战性,多数AMI病人都具有胸痛症状,通过ECG和各种心肌损伤marker检查,可以确诊。但有2%~4%的AMI病人因ECG 未发现异常可能被漏诊;此外,UAP及其他心脏病患者,也常常主诉在入院前有持续数小时或数天的胸痛,甚至某些老人或胰岛素依赖性糖尿病人可能出现痛阈增高或者对疼痛反应迟钝的现象,导致临床上出现所谓的“无症状缺血性心肌损伤”。正确地选择心脏标志物,将使这些NSTEMI和UAP病人得到早期诊治。

根据大规模的随机临床试验,或针对较小样本量的临床试验结果进行仔细分析,美国临床生化科学院(NCAB)于1998年起草了“急性冠脉综合征(ACS)时心肌标志应用建议初稿,并以多种方式征求了100多名专家学者的意见,修改后的建议于1999年公开发表。1999年欧

临床生化检验

Acanthocytosis 棘红细胞增多症 acethylcholine, Ach 乙酰胆碱 acid phosphatase, AP 酸性磷酸酶 acid sphingomyelinase, ASM 酸性鞘磷脂酶 acromegaly 肢端肥大症 actin 肌动蛋白 activation energy 活化能 activator 激活剂 active center 活性中心 activity 活性 acute coronary syndrome, ACS 急性冠状动脉综合征 acute glomerulonephritis, 急性肾小球肾炎 acute myocardial infraction, AMI 急性心肌梗死 acute pancreatitis 急性胰腺炎 acute phase proteins, APPs 急性时相反应蛋白 acute phase reaction, APR 急性时相反应 acute renal failure, ARF 急性肾功能衰竭 acute stress ulcer 急性应激性溃疡 acyl-CoA cholesterol acyltransferase, ACAT 脂酰基CoA胆固醇酰转移酶Addison’s disease 艾迪森病 adducin 内收蛋白 adiponectin 脂联素 adrenocorticotropic hormone, ACTH 促肾上腺皮质激素 adult respiratory distress syndrome, ARDS 成人呼吸窘迫综合征advanced glycation end production, AGE 晚期糖基化终末产物 aging 老化 alanine aminotransferase, ALT 丙氨酸氨基转移酶 albumin, ALB 清蛋白 alcohol dehydrogenase, ADH 乙醇脱氢酶 aldosterone 醛固酮 alimentary pentosuria 饮食性戊糖尿 alkaline phosphatase, ALP 碱性磷酸酶 allosteric protein 变构蛋白 alpha-fetoprotein, AFP 甲胎蛋白 aluminium, Al 铝 Alzheimer’s disease, AD 阿尔茨海默病 amino acid pool 氨基酸池 amino acid, AA 氨基酸 amino black 10 氨基黑10 aminoacidemia 氨基酸血症 aminoaciduria 氨基酸尿症 ammonia intoxication 氨中毒学说 amniotic fluid 羊水 analbuminemia 无清蛋白血症

临床检验基础 血液检验重点整理(理论考试版)

血液标本 全血:用于细胞计数、分类、形态观察; 血浆:全血去除血细胞,用于血栓止血检测; 血清:全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、免疫学检测等。 血液标本采集方法: 一、毛细血管采血法:用于微量检测 部位:耳垂或手指末梢,主要是中指或无名指尖内侧,半岁以下拇指或足部,特殊人员视情况而定 所用器材:采血针、吸管, 简要步骤:1、准备材料;2、选择采血部位;3、按摩皮肤;4、消毒皮肤;5、针刺皮肤;6、拭去第一滴血;7、吸血;8、止血;9、稀释血液。 二、静脉采血法:用于血沉、免疫、生化等检测项目 部位:主要是肘静脉。还可以在:手背部手腕部等部位采血,幼儿可采用颈外静脉采血。采血器材:一次性注射器,检验用真空定量采血装置。 简要步骤:1、准备试管;2、标记试管;3、消毒双手;4、选择静脉;5、检查注射器;6、扎压脉带;7、选择进针部位;8、消毒皮肤;9、穿刺皮肤;10、抽血;11、止血;12、放血 【质量控制】 标本采集时应规范操作,以减少误差;毛细血管采血时应避开伤损部位,避免挤压皮肤,血液应自然流出;静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长;动脉采血后应立即与空气隔绝,阻止血气交换;容器要洁净干燥,避免强力振荡引起溶血;血液标本采集后应立即送检;抗凝的标本其比例要准确,必要时需修正;尽量避免输液时采血,因可干扰测试结果 抗凝: 用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,称为抗凝。 一、草酸盐, 抗凝原理:与血液中钙离子形成沉淀; 使用方法:草酸钠0.1mol/L和血液1:9。 优点:溶解性好,价廉。 缺点:①对凝血因子保护功能差,影响凝血因子;②形成草酸钙沉淀物,影响自动凝血仪器的使用。 使用范围:逐步被淘汰。 二、柠檬酸钠(枸橼酸钠), 抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法:配成109mmol/L的浓度和血液1:9(用于凝血试验);106mmol/L的浓度和血液1:4(用于血沉)。 优点:对凝血因子有很好的保护作用。 缺点:血液中溶解度低,抗凝作用较弱。 使用范围:止血学检验、血沉、输血保养液(毒性小)。 三、乙二胺四乙酸(EDTA)盐, 抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法:15g/L EDTA和血液1:10。

临床医学检验技师职称资格考试真题及答案

临床医学检验技师职称资格考试真题及答案 1.关于血液葡萄糖下列叙述中错误的是 A.毛细血管血葡萄糖浓度低于静脉血葡萄糖浓度 B.血浆是测定葡萄糖的最好样品 C.分析前血液放置一段时间会使结果偏 D.如无特殊原因应空腹抽血测定血糖 E.维生素C可干扰GOD-POD法测定葡萄糖答案:A 2.某病人胸痛6小时后入院,临床检验ECG未见典型急性心梗改变,为进一步明确诊断应选择 A.肌红蛋白 B.CK、LDH C.LDH、α-HBDH D.CK-MB、cTnT E.CK、CK-MB-AST、α-HBDH、LDH 答案:D 3.已糖激酶法是测定血糖的 A.决定性方法 B.参考方法 C.常规方法 D.已经淘汰的方法 E.目前卫生部广泛推荐的方法答案:B 4.下列哪组酶常用于诊断肝脏疾病 A.CK GGT ALP ACP B.ALT AST GGT ALP C.AMY LD α-HBDH LPL D.ACP AST Lipase LD E.AST CK CK-MB LD 答案:B 5.急性肝炎时,人体内转氨酶变化为 A.ALT升高,AST升高,AST/ALT>1.5 B.ALT升高,AST升高,AST/ALT<1.0 C.ALT正常,AST正常,AST/ALT=1.15 D.ALT降低,AST升高,AST/ALT>11.15 E.ALT升高,AST降低,AST/ALT<1.15 答案:B 6.下列哪种酶活性不受急性肝炎的影响 A.CK B.ALT C.AST D.LDH E.ALP 答案:A 7.下列关于ALP的叙述哪项不对

A.ALP是磷酸单酯的水解酶 B.其作用最近pH约为10 C.各年龄组具统一的参考范围 D.在梗阻性黄疸时增高 E.在成骨细胞疾病时增多答案:C 8.检测尿中β2-微球蛋白是监测 A.肾小球蛋白 B.肾小管功能 C.恶性肿瘤 D.良性肿瘤 E.泌尿系统感染 答案:B 9.下列哪项疾病不会引起血尿酸增高 A.痛风 B.肾功能损害 C.白血病 D.恶性肿瘤 E.肝硬化答案:E 10.关于B2微球蛋白叙述错误的是 A.存在于所有有核细胞表面 B.肾移植后如发生排斥反应,尿液B2微球蛋白可出现增高 C.炎症及肿瘤时血浆中浓度可降低 D.尿液B2微球蛋白主要用于监测肾小管功能 E.急性白血病有神经浸润时,脑脊液中B2微球蛋白可增高答案:C 11.用于辅助诊断前列腺癌的酶是 A.酸性磷酸酶 B.胰淀粉酶 C.CK-MB D.胆碱酯酶 E.碱性磷酸酶答案:A 12.用于辅助诊断有机磷中毒的酶是 A.淀粉酶 B.酸性磷酸酶 C.脂蛋白脂肪酶 D.胆碱脂酶 E.碱性磷酸酶答案:D 13.在骨骼疾病的诊断酶学中下列哪项最有价值 A.LDH B.CK C.ALP D.ACP E.ALT 答案:C 14.可用于嗜铬细胞瘤诊断的试验是 A.FSH B.生长激素 C.T3、T4 D.VMA E.血皮质醇答案:D 15.卫氏并殖吸虫主要寄生在宿主的 A.脾 B.肝 C.骨髓 D.肺 E.肌肉答案:D

2017年医学检验专业高级职称考试历年真题

医学检验分类模拟题7 A型题 1、凝血功能检查使用的抗凝剂是 A.枸椽酸钠(1:4) B.草酸钠 C.双草酸盐 D.枸椽酸钠(1:9) E.乙二胺四乙盐 2、有关尿素的叙述不正确的是 A.分子量大约60 B.在尿素酶作用下产生2克分子氨 C.血清中尿素氮含量一般是1.80~6.78mmol/L D.体内氨基酸代谢的最终产物 E.形成于肾脏 3、尿素的生物合成是在下列哪个器官进行的 A.肝脏 B.肾脏 C.肺 D.肾上腺 E.小肠 4、溶血性黄疸时尿中胆红素水平 A.降低 B.正常 C.阴性 D.轻度升高 E.明显升高 5、IgG分子经木瓜蛋白酶分解为 A.2个Fab段和1个Fc段 B.2个Fc段为1个Fab段 C.1个Fab段和1个Fc段 D.2个Fc段和1个Fab段 E.2个Fab段 6、血清清蛋白测定的常规方法是 A.溴甲酚绿法 B.染料结合法 C.酚试剂法 D.双缩脲法

E.紫外分光光度法 7、血浆脂蛋白组成中,含内源性甘油三酯最多的是 A.cm B.VLDL C.IDL D.LDL E.HDL 8、IgG的两条重链为 A.λ与K B.α C.γ D.μ E.ε 9、机体杀伤和清除异常突变细胞的能力是 A.免疫防御 B.免疫耐受 C.免疫监视 D.兔疫自稳 E.免疫清除 10、紫外线消毒的指示菌为 A.大肠埃希氏菌 B.枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC9372) C.嗜热脂肪芽孢杆菌(ATCC7953) D.金黄色葡萄球菌 E.绿脓杆菌 11、在抗原抗体分子比例合适时,沉淀形成快而多,而当抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成,成为带现象,其中,抗原极度过剩时为 A.前带现象 B.后带现象 C.无带现象 D.抗原带现象 E.有带现象 13、小圆上皮细胞来自于 A.肾小管上皮细胞 B.肾盂 C.输尿管 D.底层移行上皮细胞 E.尿道前段和阴道表层

临床医学检验技术生化重点

生物化学检验常见考点总结 一、临床化学基本概念 临床化学是化学、生物化学和临床医学的结合,有其独特的研究领域、性质和作用,它是一门理论和实践性均较强的,并以化学和医学为主要基础的边缘性应用学科,也是检验医学中一个独立的主干学科。 二、临床化学检验及其在疾病诊断中的应用 1.技术方面:达到了微量、自动化、高精密度。 2.内容方面:能检测人体血液、尿液及体液中的各种成分,包括糖、蛋白质、脂肪、酶、电解质、微量元素、内分泌激素等,也包含肝、肾、心、胰等器官功能的检查内容。为疾病的诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供理论和试验依据,也促进了临床医学的发展。 第一章糖代谢检查 一、糖的无氧酵解途径(糖酵解途径) ★概念:在无氧情况下,葡萄糖分解生成乳酸的过程。 1、关键酶:己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶 2、三步不可逆反应: ①葡萄糖磷酸化成为葡萄糖-6-磷酸,由己糖激酶催化。为不可逆的磷酸化反应,消耗1分子ATP。 ②果糖-6-磷酸磷酸化,转变为1,6-果糖二磷酸,由磷酸果糖激酶催化,消耗1分子ATP。是第二个不可逆的磷酸化反应。 ③磷酸烯醇式丙酮酸经丙酮酸激酶催化将高能磷酸键转移给ADP,生成丙酮酸和ATP,为不可逆反应。

3、两次底物水平磷酸化(产生ATP): ①1,3-二磷酸甘油酸→3-磷酸甘油酸 ②磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸 4、1分子的葡萄糖通过无氧酵解可净生成2个分子ATP,糖原可净生成3分子ATP,这一过程全部在胞浆中完成。 5、生理意义: (1)是机体在缺氧/无氧状态获得能量的有效措施。 (2)机体在应激状态下产生能量,满足机体生理需要的重要途径。 (3)糖酵解的某些中间产物是脂类、氨基酸等的合成前体,并与其他代谢途径相联系。 依赖糖酵解获得能量的组织细胞有:红细胞、视网膜、角膜、晶状体、睾丸等。 二、糖的有氧氧化 ★概念:葡萄糖在有氧条件下彻底氧化成水和二氧化碳的过程,是糖氧化的主要方式。 1、四个阶段:①葡萄糖或糖原经糖酵解途径转变为丙酮酸;②丙酮酸从胞浆进入线粒体,氧化脱羧生成乙酰辅酶A;③乙酰辅酶A进入三羧酸循环,共进行四次脱氢氧化产生2分子CO2,脱下的4对氢;④经氧化脱下的氢进入呼吸链,进行氧化磷酸化,生成H2O和ATP。 2、关键酶:柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系。 3、1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和H2O,可生成36或38个分子的ATP。 4、乙酰辅酶A不可以转变为其他物质,只能通过三羧酸循环氧化分解功能。

临床检验基础尿液检验重点整理加油吧医学生

尿液部分 尿液的采集 指导病人后让其自行留取,取清洁中段尿,适用于尿常规检查、细菌检查与细胞学检查。 要求病人清洗手及外生殖器,一般留取中段尿到适当的未受污染的容器中。女性要防止阴道分泌物污染,婴幼儿要避免粪便污染。 晨尿:指清晨起床后、未进早餐与做运动之前第一次排出的尿液。 第二次晨尿:指采集晨尿后2~4小时内的尿液。(要求从前一天晚上到采集此次尿液标本时,只饮水200ml) 随机尿:指患者无需任何准备、不受时间限制、随时排出的尿液标本。 餐后尿:指午餐后2~4小时内的尿液。 3小时尿:上午6时~9时的尿液称为3小时尿。 12小时尿:从晚上8时开始到次日早晨8时终止的12小时内的全部尿液。 24小时尿:采集的当天,患者排空膀胱并弃去尿液,从此时开始计时并采集尿液,将24小时内的尿液全部采集于容器中;结束采集的次日(24小时后),患者排空膀胱,且将尿液采集于同一容器内。如此采集的尿液称为~。 【小知识点】 尿液检查一般应在收到标本后迅速进行。一般2h内送检,30min内完成检测。 如不能及时送检或分析,必须采取保存措施。常用的方法有冷藏法与化学防腐法。 尿量:指24小时内排出体外的尿液总量。 【参考区间】 成人1~2L/24h,即1ml/(h*kg);儿童按体重计算尿量,大约为成年人的3~4倍。 【相关内容】 一、多尿(polyuria):就是指成人24小时的尿量超过2、5L,儿童24小时尿量超过3L。 在正常情况下多尿常见于饮水过多、精神紧张等。此外,静脉输液过多或应用某些药物(如咖啡因、利尿剂等)也可以导致多尿。 病理性多尿常因肾小管重吸收功能与浓缩功能减退所致,可见于以下几种情况: 糖尿病:因尿中葡萄糖含量增高所致,属于溶质性利尿。 肾脏疾病:多种肾脏疾病,因肾小管破坏致使尿浓缩功能减退,均可导致多尿,其特点为夜尿增多。 内分泌疾病:如尿崩症,该病就是由于下丘脑-垂体受损,抗利尿激素分泌减少或缺乏,或由于

初级临床医学检验技师基础知识-26 (总分48.5,考试时间90分钟) 以下 ...

初级临床医学检验技师基础知识-26 (总分48.5,考试时间90分钟) 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。 1. 下列哪种方法不能用于蛋白质的分子量测定____ A. 沉降分析法 B. 凝胶过滤 C. 凝胶电泳 D. 质谱法 E. 盐析法 2. 影响蛋白质等电点(pI)值最主要的因素是____ A. 溶液的pH值 B. 溶液的离子强度 C. 氨基酸组成 D. 光学性质 E. 溶解度 3. 凝胶过滤分离蛋白质的原理所利用的是____ A. 在某个体系内该蛋白质的含量的多少 B. 蛋白质所含酸性氨基酸的多少 C. 蛋白质是清蛋白还是球蛋白 D. 蛋白质所带电荷的多少 E. 蛋白质的分子大小 4. 下列蛋白质通过凝胶层析柱时最先被洗脱的是____ A. 纤维蛋白原(分子量340000) B. 血清清蛋白(分子量68500) C. 肌红蛋白(分子量16900) D. 牛胰岛素(分子量5700) E. 牛β乳球蛋白(分子量35000) 5. 可用于贫血的鉴别诊断的蛋白质是____ A. 前清蛋白 B. 转铁蛋白 C. 清蛋白 D. 免疫球蛋白 E. C-反应蛋白 6. 急性炎症性疾病时血浆蛋白浓度出现低下的是____ A. 铜蓝蛋白 B. C-反应蛋白 C. 前清蛋白 D. α1-酸性糖蛋白 E. α1-抗胰蛋白酶 7. 在醋酸纤维薄膜电泳通常位于α2-区带位置的蛋白质是____ A. 免疫球蛋白 B. 清蛋白 C. 铜蓝蛋白 D. 甲胎蛋白 E. 纤维蛋白原 8. 目前一般认为蛋白质的含氮量为____ A. 16% B. 30%

C. 40% D. 50% E. 80% 9. 多发性骨髓瘤诊断依据之一是血清蛋白电泳图谱出现____ A. α1-球蛋白↑ B. γ和β区带或γ和β之间有—条密集,染色深的区带 C. γ-球蛋白↑ D. β球蛋白↑ E. α2-球蛋白↑ 10. 痛风病的发生与下列何者有关____ A. 氨基酸代谢紊乱 B. 蛋白质代谢紊乱 C. 核酸代谢紊乱 D. 脂类代谢紊乱 E. 糖代谢紊乱 11. 干扰素受体属于____ A. 免疫球蛋白基因超家族 B. 趋化细胞因子受体 C. Ⅰ型细胞因子受体家族 D. Ⅱ型细胞因子受体家族 E. Ⅲ型细胞因子受体家族 12. 人类HLA-Ⅰ类抗原β链编码基因的染色体定位是____ A. 第15号染色体短臂 B. 第6号染色体长臂 C. 第9号染色体长臂 D. 第2号染色体短臂 E. 第6号染色体短臂 13. T细胞中参与非特异性免疫应答的亚群是____A.TH细胞 B.Tc细胞 C.TCRαβ+细胞 D.TCRγδ+细胞 E.TDTH 14. 巨噬细胞可提呈____ A. TI-抗原 B. 细菌抗原 C. 病毒抗原 D. 肿瘤抗原 E. LPS 15. 下列哪种标志不出现于B细胞表面____ A. MHC-Ⅰ类分子 B. MHC-Ⅱ C. PWM-R D. C3b受体 E. CD2分子 16. T、B细胞表面共有的标志是____ A. CD3 B. PWM-R C. 绵羊红细胞受体 D. 补体受体 E. CD80分子 17. 出生后,人类的造血干细胞的主要来源是____ A. 胸腺 B. 淋巴结 C. 骨髓 D. 肝脏 E. 卵黄囊 18. 诱导髓样干细胞向红细胞分化的主要细胞因子是____ A. IL-3 B. GM-CSF C. IL-7 D. G-CSF E. EPO

医学检验技师资格考试试题

医学检验技师资格考试试题(相关专业知识)(一) 一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案,并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1.血清中的淀粉酶可水解淀粉分子中的何种键 A.α-1葡萄糖苷键 B.β-4葡萄糖苷键 C.α-1、4葡萄糖苷键 D.β-1、4葡萄糖苷键 E.A和C 答案:C 2.糖尿病的“三多一少”症状是指 A.多糖,多脂,多尿,消瘦 B.多饮,多食,多大便,小便少 C.多饮,多食,多尿,消瘦 D.高蛋白,高脂肪,多尿,消瘦 E.以上都不是 答案:C 3.可防止糖酵解的抗凝剂为 A.EDTA/氟化钠抗凝剂

B.肝素 C.草酸钾 D.柠檬酸钠抗凝剂 E.EGTA 答案:A 4.将胆固醇转变成胆汁酸的脏器是 A.小肠 B.大肠 C.胃 D.胰腺 E.肝脏 答案:E 5.下列哪项可导致血清总蛋白增高的原因为 A.营养不良 B.消耗增加 C.脱水 D.肝功能障碍 E.丢失过多医学全.在线.网.站.提供 答案:C

6.下列关于肝硬化的叙述何者是正确的是 A.肝硬化时,肝糖原合成增多 B.肝硬化时,乳酸,丙酮酸及α-酮戊二酸生成减少 C.肝硬化时,肝脏的生物转化功能增强 D.肝硬化Ⅳ型胶原合成增多 E.肝硬化时肝脏对激素的灭活功能增强 答案:D 7.原尿成分与血浆成分不同的是 A.葡萄糖的含量 B.钾的含量 C.蛋白质的含量 D.钠的含量 E.尿素的含量 答案:C 8.不适于尿液中尿酸测定的防腐剂为 A.甲苯 B.二甲苯 C.草酸钾 D.盐酸

E.麝香草酚 答案:D 9.阴离子隙(AG)增高常见于下列哪种情况 A.呼吸性酸中毒 B.呼吸性碱中毒医学全在线www.m e https://www.wendangku.net/doc/bc4842998.html, C.代谢性碱中毒 D.代谢性酸中毒 E.失代偿性呼吸性碱中毒 答案:D 10.小儿佝偻病是哪种元素缺乏 A.铁 B.硒 C.锌 D.钙 E.碘 答案:D 11.停经后典型的激素变化是 A.FSH下降,LH上升,E2下降 B.FSH上升,LH下降,E2上升

常规生化检验项目各项指标参考范围及临床意义

常规生化检验项目各项指标参考范围及临床意义(1) ?注:以下各项所述临床意义,仅是表明患某些疾病的可能性,并不表示一定患有某病。请勿随便对号入座!如有疑问请至医院由专业医生结合体格检查等后确诊!!! ?检验项目???谷丙转氨酶 ?英文缩写??? ALT 正常参考值? 0-40IU/L 临床意义?增高:常见于急慢性肝炎,药物性肝损伤,脂肪肝,肝硬化,心梗,胆道疾病等。检验项目???谷草转氨酶 英文缩写??? AST 正常参考值? 0-40I/L 临床意义???增高:常见于心梗,急慢性肝炎,中毒性肝炎,心功能不全,皮肌炎等。 检验项目???转肽酶 英文缩写??? GGT 正常参考值? 0-40IU/L 临床意义???增高:常见于原发性或转移性肝癌,急性肝炎,慢性肝炎活动期,肝硬化,急性胰腺炎及心力衰竭等。 检验项目???碱性磷酸酶 英文缩写??? ALP

正常参考值? 30-115IU/L 临床意义???增高:常见于肝癌,肝硬化,阻塞性黄疸,急慢性黄疸型肝炎,骨细胞瘤,骨折及少年儿童。 检验项目???乳酸脱氢酶 英文缩写??? LDH 正常参考值? 90-245U/L 临床意义???增高:急性心肌梗塞发作后12-48小时开始升高,2-4天可达高峰,8-9天恢复正常。另外,肝脏疾病恶性肿瘤可引起LDH增高 检验项目??总胆红素 英文缩写?? TBIL 正常参考值? 4.00-17.39umol/L 临床意义???增高:原发生胆汁性肝硬化急性黄疸型肝炎,慢性活动期肝炎,病毒性肝炎。肝硬化,溶血性黄疸,新生儿黄疸,胆石症等 检验项目???直接胆红素 英文缩写??? DBIL 正常参考值? 0.00-6.00umol/L 临床意义???增高:常见于阻塞性黄疸,肝癌,胰头癌,胆石症等。 检验项目? ??游离胆红素 英文缩写??? IBIL 正常参考值? 0.00-17.39umol/L

临床检验基础重点整理

教材:人民卫生出版社《临床检验基础(第5版)》 血液部分 红细胞计数(RBC):测定单位体积血液中红细胞的数量。 【计数方法】显微镜计数法: 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数(一般200倍)后,滴入血细胞计数盘,然后于显微镜下,计数一定范围内的红细胞数,经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。 计算:红细胞数/L=5个中方格内红细胞×5 ×10 ×200 ×10^6/L

【参考值】 成年男性:(4. 0~5. 5)×10^12/L,成年女性:(3. 5~5. 0)×10^12/L;新生儿:(6. 0~7. 0)×10^12/L 低于3.5×10^12/L可诊断为贫血,低于1.5×10^12/L应考虑输血。 【临床意义】 1、病理性增多 相对性增多:血浆水分丢失,有形成分相对增加,绝对值没有发生变化 绝对性增多:继发性(心、肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等);原发性(真性红细胞增多症) 2、病理性减少 骨髓造血功能低下(再障);造血原料缺乏(缺铁贫、巨幼贫);红细胞破坏增加(溶贫);红细胞丢失过多 红细胞比积(HCT/PCV):指红细胞在全血中所占体积百分比。 【参考值】(温氏法) ①成年:男性0.40~0. 50,女性0.37~0. 48;②新生儿0.47~0.67;③儿童:0.33~0.42。【临床意义】 增高:1. 血液浓缩;2. 红细胞增多症;3. 新生儿。降低:1. 贫血;2. 其他原因的稀血症 应用:1. 疗效观察;2. 计算红细胞指数 血红蛋白(Hb):是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质,是红细胞内的运输蛋白。 【检测原理】 血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi),Hi与氰化钾的氰根(CN-)生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN),HiCN在540nm有吸收峰。在特定的实验条件下,可测得吸光度并计算Hb(G/L)。但在实际工作中,一般实验室的分光光度计达不到WHO规定的标准条件,所以利用Hb参考液制备标准曲线,换算出Hb(G/L)。 【参考值】 成年男性:120-160 g/L,成年女性:110-150 g/L;新生儿:170-200 g/L

临床医学检验师试题及答案

17年临床医学检验(师)《专业实践技能》全真模拟试卷(1) 一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案,并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 第1题不影响酶活性测定的因素为(B) A.底物浓度 B.样品杯直径 C.温度 D.pH值 E.缓冲液的离子强度 第2题用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时,固相载体的包被物是(B) A.酶标记A抗体 B.未标记的抗A抗体 C.未标记抗原A D.酶标抗球蛋白抗体 E.酶标记抗原A 第3题下列哪一项指标可作为卵巢癌转移的指标(E) A.CEA B.AFP C.CA125 D.癌抗原 E.CA19-9 第4题下列哪项疾病属于自发性血小板增多(B) A.炎症性疾病 B.骨髓增生性疾病 C.恶性肿瘤 D.脾切除 E.原发性(特发性)血小板减少性紫癜 第5题在免疫球蛋白测定中,检测阈值可达0.1mg/L的方法有(D) A.散射免疫比浊法 B.酶联免疫吸附法 C.免疫胶乳比浊法 D.以上3种方法均可 E.单相免疫扩散法

第6题低密度脂蛋白中含量最多的载脂蛋白是(C)A.ApoAⅠ B.ApoAⅡ C.ApoB D.ApoCⅡ E.ApoE 第7题不属于连续监测法中干扰因素是(E) A.样品本身含有与化学反应有关的酶 B.工具酶中混有杂酶 C.样品中某些代物或药物的干扰 D.分析容器的污染 E.自动生化分仪的类型 第8题反映肝细胞受损,膜通透性增加的血清酶是(B)A.γ-GT B.ALT C.MAO D.ChE E.ALP 第9题巨幼红细胞性贫血时,血片易见(D) A.球形红细胞 B.靶形红细胞 C.口形红细胞 D.有核红细胞 E.镰刀形红细胞 第10题属于肿瘤特异性抗原的是(C) A.胚胎抗原 B.甲胎蛋白 C.黑色素瘤抗原 D.癌胚抗原 E.CA199 第11题沉淀反应形成的反应现象(A) A.肉眼可见

临床生化检验名解

急性时相反应(APR:对炎症和组织损伤的非特异性反应,血浆蛋白质(如a 1-抗胰蛋白酶、a 1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、C4、C3纤维蛋白原和C-反应蛋白等)浓 度显着升高,而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降,此炎症反应过程称为急性时相反应。该过程中出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白(APRP。增加的蛋白 质称为正相APP减少的蛋白质称为负相APR M蛋白:为浆细胞病患者异常浆细胞克隆增殖,而产生的大量单一的免疫球蛋白或其轻链或重链片段,病人血清或尿液中的M蛋白在蛋白电泳时呈现一条色泽深染的窄区带。 C反应蛋白在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质,是急 性时相反应时极灵敏的指标,升高早且程度高。 血浆运载蛋白在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质,如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等。 前清蛋白由肝细胞合成、分子量比清蛋白小,电泳位置在清蛋白之前的蛋白质,主要起运输载体和营养蛋白作用。 痛风(gout )由于遗传性和(或)获得性的尿酸排泄减少和(或)嘌呤代谢障碍,导致高尿酸血症,当出现尿酸盐结晶形成和沉积,并引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎、尿酸性尿路结石时,即为痛风,严重者有关节畸形及功能障碍。痛风是一组疾病,高尿酸血症中10%?20%发生痛风。 氨基酸血症:氨基酸或其中间代谢物或其旁路代谢物在血液中增高称为氨基酸血症 空腹血糖FPG:是指8 小时内不摄入含热量的食物后,所测得的静脉血浆葡萄糖浓度。FPG 为糖尿病最常用检测项目,若空腹血糖浓度不止一次高于7.0mmol/L 即可诊断为糖尿病。糖尿病是一组由于胰岛素分泌不足或(和)胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病,高血糖是其特征。长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭,尤其是眼肾神经、心脏和血管系统。两种病理过程参与糖尿病的发病机制: 胰岛B细胞的自身免疫性损伤及机体对胰 岛素的作用产生抵抗。妊娠期糖尿病指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作。 低血糖症指血糖浓度低于空腹参考水平下限。低血糖由多种原因引起,其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致,临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖。其诊断主要依据多次连续测定空腹血浆葡萄糖浓度或在发作时测定血糖和OGTT胰岛素和C肽等其他相关指标。 反应性低血糖一种临床疾病,病人在日常生活中有餐后症状,毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5 ?2.8mmol/L 。 OGTT指口服葡萄糖耐量试验。口服一定量葡萄糖后,2小时内做系列血浆葡萄糖浓度测定, 以评价不同个体对血糖的调节能力的一种标准方法,并对确定健康和疾病个体也有价值。 OGTH匕空腹血糖更灵敏,但重复性差。 糖尿病前期(pre-diabetes)(1 )空腹血糖受损(IFG): 反映了基础状态下糖代谢稳态的轻度异常。(2)糖耐量减退(IGT): 反映负荷状态下机体对葡萄糖处理能力的减退。(3)糖调节受损(IGR):作为糖尿病的前期阶段,将IFG和IGT统称为IGR。它们可单独或合并存在。 胰岛素抵抗IR :是指单位浓度的胰岛素细胞效应减弱,即机体对正常浓度胰岛素的生物反应性降低的现象,是2型糖尿病的肥胖等多种疾病发生的主要诱因之一。 糖化血红蛋白GHb是血红蛋白与血糖进行非酶促反应结合的产物,他们的糖基化位点是血红蛋白B链N末端的缬氨酸残基,其生成是一个缓慢的不可逆过程,生成量与血糖的浓度和高血糖存在的时间相关。反映过去 6~8 周的平均血糖浓度,为评估血糖的控制情况提供可靠的实验室指标。 高脂蛋白血症:是指血浆中CM VLDL LDL、HDL等脂蛋白有一种或几种浓度过高的现象。 血脂血浆脂类简称血脂,包括游离胆固醇、胆固醇酯、磷脂、甘油三酯、糖酯、游离脂肪酸等,无论是外源性或内源性脂类均以脂蛋白复合体形式在血液循环中运输。 载脂蛋白脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白。它构成并稳定脂蛋白的结构,修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性,还可以作为脂蛋白受体的配体,参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。 LDL受体途径LDL或其他含ApoBlOO E的脂蛋白如VLDL 3 -VLDL均可与LDL受体结合,内吞入细胞使其获得脂类,主要是胆固醇,这种代谢过程称为LDL受体途径。该途径依赖于LDL受体介导的细胞膜吞饮作用完成。 SRCR清道夫受体富含半胱氨酸域。是I型清道夫受体C-端侧特异域肽段,该段富含半胱氨酸。清道夫受体的8个半胱氨酸有6个在此范围,半胱氨酸的二硫键交联而成的区域非常紧密、牢固,形成球状,足以经受细胞外环境的影响,属于细胞外区域。 胆固醇的逆转运周围组织细胞膜的游离胆固醇与HDL结合后,被LCAT酯化成胆固醇酯,移

临床检验基础 重点

Hi ,Hi 与氰离子反应生成棕红色HiCN ,在540nm 处有最大吸收峰,且其吸光度与溶液浓度成正比而检出Hb 浓度。 / 注意:分光光度计必须符合WHO 标准,否则:1HiCN 参考液制作标准曲线或者计算K 值 2带标准直接计算 测定Hb 的方法学评价 1. HiCN 法:ICSH 和WHO 推荐参考方法 操作简便,结果稳定可靠,可测多种Hb (SHb 除外),可直接定值 /缺点:剧毒,不能测SHb ,对HbCO 转化慢,脂血、高球蛋白、高白蛋白、血小板增多可导致Hb 假性增高 2.SDS 法:临床首选/优点:试剂无毒,缺点:ε未定,需依赖HiCN 法间接得出结果, SDS 会破坏WBC ,不能用于WBC 计数 RBC 、Hb 测定的临床意义 1.RBC 、Hb 降低(低于参考值下限指示贫血) 1)生理性减少(生理性贫血)1、6个月-2岁婴幼儿(造血原料不足)2、妊娠中、晚期(血液稀释)3、老年人(造血功能减退) 2)病理性减少:RBC 生成少、破坏多、丢失多 2.RBC 、Hb 升高1)生理性增多:新生儿、高原生活、剧烈运动(缺氧);成年男性比女性高(雄性激素水平较高) 2)病理性增多 1、相对性增多:血液浓缩:如剧烈呕吐、严重腹泻、 大面积烧伤患者2、绝对性增多:慢性心肺疾病、真红,RBC 可达(7-10)×1012 /L 贫血病因分类:1、骨髓造血功能低下:如再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移等 2、造血原料缺乏:如缺铁性贫血、巨幼贫 3、红细胞破坏增加:各种溶血性贫血 4、红细胞丢失过多:急、慢性失血 Hct 的方法及意义方法主要为离心法:温氏法和微量法 / 意义:略高:1血液浓缩:如大量出汗、呕吐、腹泻、大面积烧伤;2红细胞增多症:如真红,有时可高达80%3新生儿, 降低:各种贫血,但减少程度不一定与RBC 一致. 可用作真红、输血及输液疗效观察指标。 用作计算MCV 和MCHC 血液流变学指标之一,增加表明血↑;缺铁贫和巨幼贫正常或轻度↑2)减少:骨髓造血功能低下:绝对值<15×109 /L :再障 2、作为贫血治疗的疗效观察指标 1)缺铁贫和巨幼贫治疗后,先Ret ↑,后RBC 和Hb 逐渐↑ 2)溶血和失血性贫血治疗后:Ret 逐渐降低,已得到控制;持续高值,未控制或加重。 3、网织红细胞成熟指数(RMI )骨髓造血的早期标志 4、未成熟网织红细胞比值(IRF ) 5、RPI ESR 影响因素+意义 1)血浆因素 增快:纤维蛋白原、球蛋白、胆固醇、甘油三酯 减慢:清蛋白、糖蛋白及卵磷脂 2)红细胞因素 红细胞的数量和形态 3)其他因素 血沉管的位置,温度 / 临床意义:1、生理性血沉增快:老年人,妇女月经期,妊娠三个月以上血沉逐渐增快可达30mm/h 2、病理性血沉增快1)各种炎症:急性细菌性炎症、风湿热、结核活动期2)组织损伤及坏死:心肌梗死增快,心绞痛正常(鉴别)3)良、恶性肿瘤的鉴别:恶性肿瘤多增快,良性肿瘤多正常4)高球蛋白血症:SLE 、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等5)贫血:越重越快6)高胆固醇血症:动脉粥硬化、糖尿病等 3、减慢:真性红细胞增多、脱水、DIC WBC :中性粒数量变化:多数情况一致,也可以不一致 1)中性粒生理性增多1、年龄2、日间变化:下午较高3、剧烈运动、激动、严寒、暴热等4、妊娠、分娩 2)中性粒病理性增多 1、急性感染:化脓性球菌最常见 2、严重的组织损伤及大量血细胞破坏;严重的烧伤、大手术后、心肌梗死、急性溶血 3、急性大出血:内脏破裂、宫外孕破裂4、急性中毒:化学药物、代谢性中度 5、恶性肿瘤 6、白血病 3)中性粒减少 1、某些感染:伤寒、副伤寒、流感 2、某些血液病:再障 3、慢性理化损伤:X 射线、氯霉素 4、自身免疫性疾病:SLE 5、脾功能亢进 淋巴细胞的临床意义1)淋巴细胞增多 1、绝对增多:某些病毒或细菌所致的传染病;某些传染病恢复期;肾移植排异反应前期;急淋、慢淋;某些慢性感染 2、相对增多:再障、粒缺2)淋巴细胞减少 :放射线、肾上腺皮质激素;N ↑可导致L ↓(相对) 单核临床意义 增多: 1、某些感染:亚急性感染性心内膜炎、急性感染的恢复期、肺结核 2、某些血液病:单核细胞性白血病、恶性组织细胞病、淋巴瘤及MDS 嗜酸粒 1、增多 超敏反应;寄生虫病;某些皮肤病;血液病:如慢粒 2、减少 伤寒、副伤寒、大手术后;长期使用肾上腺皮质激素 嗜碱粒 增多:慢粒、嗜碱性粒细胞性白血病 嗜酸性粒细胞直接计数原理+意义:采用嗜酸性粒细胞稀释液讲血液稀释一定倍数,红细胞和大部分其他白细胞被破坏,E 着色,充池计数经换算得每升血液中E 数 / 意义 1、生理变化 1)劳动、寒冷、饥饿、神经刺激,E ↓(肾上腺皮质激素组织骨髓释放E ,并促使血中E 向组织浸润) 2)日间变化:白天较低,夜间较高;上午波动较大,下午比较恒定。 2、嗜酸性粒细胞增多 1)过敏性疾患:支气管哮喘、血管神经性水肿、食物过敏 2)寄生虫:钩虫、蛔虫等 3)某些传染病:猩红热4)慢粒白血病5)某些恶性肿瘤:淋巴系统恶性疾病(如霍奇金)、肺癌 3、嗜酸性粒细胞减少 伤寒、副伤寒、大手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。 4 、嗜酸性粒细胞计数的其他应用1)观察急性传染病的预后:2)观察手术和烧伤病人的预后3)测定肾上腺皮质功能 白细胞分类原理 三分类:电阻抗法,五分类:多项技术联合检测 1电阻抗法:溶血处理后白细胞体积,区别小细胞群(L ),中间细胞群(M 、E 、B )和大细胞群(N ) 2光散射与细胞化学计数联合白细胞分类计数过氧化物酶染色:活性E 、N 、M 依次降低,L 、B 无活性 3容量、电导、光散射(VCS )白细胞分类法,电阻抗法测量体积V ,高频电磁针测量细胞内部结构电导C ,光散射S 区别细胞颗粒的结构和颗粒的质量 4阻抗与射频技术联合白细胞分类法DC 通过四个不同的检测系统:嗜酸粒检测系统;嗜碱粒检测系统;淋巴、单核、粒细胞检测系统;幼稚细胞检测系统 5多角度偏振光散射白细胞分类技术 0°前角光散射测细胞大小 10°狭角光散射测细胞结构 90°垂直光散射测细胞的内部颗粒和细胞成分 90°消偏振光散射将E 从其他白细胞中分离出来 血细胞分析仪的检测参数及意义(1)RDW 红细胞体积分布宽度:参考<14.9% / 1、用于贫血的形态学分类(RDW/MCV ) 2、诊断缺铁贫。95%以上缺铁贫RDW 异常。小细胞低色素贫血、RDW 正常则缺铁贫可能不大。 3、缺铁贫与轻型地贫的鉴别。前者RDW 增高,后者正常。 (2)MPV 平均血小板体积:参考 7.6-13.2fl / 结合PLT 的变化,MPV 越大,新生血小板越多1、增大:血小板破坏增多,骨髓纤维化、血栓性疾病、脾切除、慢粒等 2、减少:骨髓造血功能损伤致血小板减少 常用筛选实验 BT 、PLT 、APTT 、PT 、D-D 临床应用 BT :延长:血管壁异常;血小板异常;血管性血友病等 ,缩短:心梗、脑血管病变及DIC 等 PLT : 生理变化:早晨较低,午后较高;剧烈运动后较高;月经、妊娠有改变;静脉血比毛细血管血高。 / 病 理变化:1)血小板减少(PLT<100×109 /L )血小板生成障碍:再障、放射性损伤、急性白血病,血小板破坏或消 耗增多:ITP 、DIC , 血小板分布异常:脾肿大、血液被稀释 2)血小板增多(PLT>400×109 /L ) 原发性增多:慢粒、真红 反应性增多:急性化脓性感染、急性大出血等 APTT : 1推荐应用的内凝筛选实验 2延长 1)Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ减低,能检出Ⅷ:C 小于25%的轻型血友病 2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ严重缺乏,如肝病,维生素K 缺乏 3)抗凝物质:口服抗凝剂、血循环中存在病理性抗凝物质等 4)纤溶活性增强 3缩短 1)高凝状态,如DIC 的高凝期2)血栓性疾病,如心、脑血管病变,深静脉血栓等 4检测肝素治疗的首选指标 PT 1延长1)先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏2)获得性凝血因子缺乏,如严重肝病、维生素K 缺乏、纤溶亢进、DIC 晚期3)血中抗凝物质增加,口服抗凝剂、肝素等 2缩短: DIC 早起,心梗、脑血栓行测好难过,3INR 是用于监测口服抗凝药的首选指标 D-D 增高:继发性纤溶(鉴别原发)。血栓性疾病、肿瘤,溶栓治疗的监测:D-D 显著升高 尿液检验目的?1.泌尿系统疾病诊断及疗效判断 2.其他系统疾病的诊断及鉴别诊断 3.安全用药监测 4.重金属中毒检查(职业病防护) 5.健康体检 尿液标本采集有哪些种类、方法和临床应用? 1.晨尿 : ①首次晨尿:肾脏浓缩功能评价,有形成分、化学成份(HCG). ②二次晨尿:细菌培养、有形成分计数. 2.随机尿 适于门诊、急诊。 3.计时尿 ①3h 尿: 6-9am. 尿有形成分排泄率;②餐后2h 尿 :病理性尿胆原、糖尿、蛋白尿等③12h 尿:晚上8点-次晨8点, :Addis 计数、蛋白排泄率等。 ④24h 尿:大容器(>4L),防腐,收集完全,测尿总量,混匀,适量送检(50ml);尿中化学成分、T.B 排出量,电解质等。 4.特殊尿标本①尿三杯试验②无菌尿液:细菌培养、药敏等。 尿液标本采集质量保证 1.尿液采集标准操作规程(SOP ) 2.检验项目选择与申请 3.患者准备:告知、控制 4.标本采集:器材、运送 5.人员职责 尿液标本保存有哪些方法 1.低温冷藏:2℃~8 ℃,6h 内,有形成分保存。 2.冰冻 -20℃~-70℃,离心,除去有形成分,冰冻上清液(化学成分)。 3.化学防腐 ①甲醛:有形成分形态固定。 ②甲苯 尿化学成分定性或定量。 ③麝香草酚:有形成分镜检、尿浓缩T.B 、化学成分。 ④浓盐酸 化学成分定量。 ⑤其他:冰乙酸:戊二醛:碳酸钠 尿液理学检查有项目及临床意义①尿量:1.少尿:<400ml/24h 或<17ml/h ,无尿: <100ml/24h 。肾前性少尿:休克、心衰、脱水。肾性少尿:急性肾炎、肾衰。肾后性少尿:尿路梗阻 2.多尿>2.5L/24h 肾性多尿:慢性肾炎、慢性肾衰早期等。内分泌性多尿:尿崩症、甲亢。代谢性多尿: 糖尿病 ②尿色及透明度: 1.血尿:泌尿生殖系统疾病:炎症、结石等/全身性疾病:血友病等/邻近器官疾病/药物不良反应。 2.血红蛋白尿:血管内溶血,如蚕豆病、输血反应等 3.肌红蛋白尿:肌肉组织广泛损伤、变性,如急性心梗等。 4.胆红素尿:见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。 5.乳糜尿:寄生虫(丝虫)或非寄生虫(结核、肿瘤、创伤、手术等)。 6.脓尿/菌尿:泌尿生殖系统感染。 7.结晶尿:正常尿、结石、痛风、药物等 ③尿比密 方法+评价:1.比重计法:需校正;操作繁、标本量大、影响(温度,蛋白,葡萄糖等)2.折射仪法:标准 3试带法: 简便,但干扰多,测定范围窄,精密 度差,过筛试验 临床意义:1. SG ↓:低比密尿SG <1.015见于尿崩症、慢性肾炎等。/ 比密低而固定:SG 固定于1.010±0.003, 呈等渗尿,表示肾实质严重损害。 2. SG ↑ 见于: 急性肾小球肾炎.糖尿病.肾前性少尿疾病如高热、脱 水等 2.鉴别肾前性或肾性少尿:肾前性少尿:Uosm >450mOsm/kg. H2O,肾性少尿:Uosm <350m 3.利用渗透清除率计算自由水清除率 尿蛋白定性试验+原理+评价+注意事项 ①试带法:(筛查。) ②加热醋酸法:加热加酸→蛋白沉淀 / 准确,A 、 G 均敏感;灵敏度较低, 操作较繁。 ③磺基水杨酸法(SSA):蛋白质NH 4+ +磺酸根-→蛋白盐沉淀 / 简便,灵敏度高,多种蛋白均反应;推荐确诊实验。 尿蛋白定量试验+评价 ①磺基水杨酸-硫酸钠比浊法:线性范围窄,影响多,欠准确。 ②双缩脲比色法:对A/G 均敏感;灵敏度较低,操作繁。 ③丽春红S 染料结合法:灵敏度很高,对A/G 均敏感,线性范围宽,干扰少;但操作繁。 ④其他:免疫法、尿蛋白电泳 / 灵敏、特异,前景好。 蛋白尿临床意义1.肾小球性蛋白尿:原发性肾小球损害性疾病、肾病综合征和某些继发性肾小球损害性疾病如糖尿病等。分为:选择性蛋白尿,非选择性蛋白尿 2.肾小管性蛋白尿 :肾盂肾炎、间质性肾炎,中毒 3.混合性蛋白尿 . 4.溢出性蛋白尿:本周氏蛋白尿,血红蛋白尿、肌红蛋白尿。5.组织性蛋白尿:肾小管炎症、中毒等 6.假性(或偶然性)蛋白尿:膀胱炎、尿道炎等或阴道分泌物混入。 7. 生理性蛋白尿:功能性蛋白尿,体位性蛋白尿 (各种特点见名解) 尿糖定性试验 ①班氏糖定性(Benedict test ):利用葡萄糖还原性将硫酸铜还原; / 简便,灵敏,特异性差,有假+(VitC 等)。 ②试带法 ③薄层层析法 尿糖定量试验 ①葡萄糖氧化酶(GOD)法:同血糖测定, 先以班氏法定性,再稀释至3g/L 以下。/ 灵敏、特异,抗VitC 等干扰;用于治疗监测及用药调整。 ②薄层层析法 临床意义 ①血糖增高性糖尿:摄入性,应激性(颅脑外伤、急性心梗),代谢性:糖尿病,内分泌性(血糖↑— 胰高糖素、甲状腺激素、生长激素、(去甲)肾上腺素、糖皮质激素,血糖↓— 胰岛素) ②血糖正常性糖尿:肾性糖尿,肾糖阈降低。 ③其它: 乳糖尿等。 尿胆红素检查方法:①重氮法:强酸介质中,Bil 与重氮盐偶联反应,产生红色偶氮化合物.(试带法)。/ 灵敏度较低,简便、快速,多假+/-,筛检。 ②氧化法:1.Harrison 法: 以钡盐吸附胆红素并浓缩,酸性三氯化铁氧化胆红素为胆绿素呈现绿色;/ 灵敏、准确,为确证试验;但操作较繁,假+(水杨酸等)。 2.Smith 碘环法:碘氧化胆红素呈绿色环。简单,灵敏度低。 尿胆原检查 ①改良Ehrlich 法:②试带法 尿酮体检测方法:①亚硝基铁氢化钠法:乙酰乙酸、 丙酮与亚硝基铁氢化钠反 ,灵敏度和特异性不同;试带法:筛检法,敏感、方便、快速;②Gerhardt 法 临床意义 ①糖尿病酮症酸中毒(Diabetic ketoacidosis):早期β-羟丁酸为主,缓解后乙酰乙酸↑。 ②非糖尿病酮症:剧烈运动、禁食、发热、严重呕吐腹泻等。 直接涂片法 优点:简便,不影响有形成分形态 / 缺点:易漏诊 / 应用:血尿、脓尿者 离心涂片法 优点:敏感,阳性率高 / 缺点:操作不易规范,报告不统一,离心可破坏形态,使形态区分困难或漏检。 / 应用:有形成分较少的标本,多用于试带法后确诊。 尿有形成分包括哪些内容? 细胞(红,白),管型,结晶,其他成分。 管型形成条件:①白蛋白或T-H 蛋白→基质,首要条件 ②浓缩和酸化沉淀→蛋白质 ③可供交替使用的肾单位→足够的时间形成 ④尿流缓慢,有局部性尿液淤积 化学法检测尿隐血原理?Hb 亚铁血红素→催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色。 尿试带法测定各项目的原理如何? 1.蛋白质PRO :指示剂蛋白误差法(溴酚蓝), 2.葡萄糖GLU :葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法 3.亚硝酸盐NIT :亚硝酸盐还原法 4.尿比密SG :多聚电解质离子解离法。 5.酸碱度pH :酸碱指示剂法 6.酮体KET :亚硝基铁氰化钠法 7.胆红素BIL :重氮反应原理 8.尿胆原URO :醛化反应或偶氮法。 9.红细胞/血红蛋白/隐血(ERY/Hb/OB):血红蛋白类过氧化物酶法。 10.白细胞LEU :白细胞酯酶法 11.维生素CVitC :还原法 尿液干化学分析质量控制㈠分析前质量保证 1.试带: 批号、避光、干燥 2.标本: 接受时间(2h 内检测)3.容器: 塑料、标记 4.饮食、用药 ㈡分析中质量保证 1.严格按规定要求操作 2.用质控人工尿液进行室内质控 3.质量控制标准 ㈢分析后质量保证 1.判断影响因素 2.检验报告的审核,签发①正确分析干化学与镜检结果相关性,②确证实验或参考方法 脑脊液检查适应性禁忌症 适应症:有脑膜刺激征(颈强直、布氏征、克氏征),疑有脑出血,原因不明的剧烈头疼,昏迷、抽搐或瘫痪 / 禁忌症:颅内压明显↑病情危重,局部皮肤感染 潘氏实验原理+评价+蛋白质增加意义CSF 中球蛋白与苯酚相结合形成不溶性蛋白质沉淀。/ 评价:优点:操作简便,快速,所需标本少,灵敏度高。缺点:假阳性率偏高。/ 蛋白质增加的意义:1.中枢神经 系统感染:病脑+ 结脑++ 化脑+++ 2.蛛 网膜下隙或脑室陈旧性出血 3.脑肿瘤 4.脑神经根病变 5.椎管内梗阻 脑脊液显微镜检查意义 1.中枢神经系统WBC+++(分叶为主) 2.脑寄生虫病:嗜酸性粒细胞增高 3.蛛网膜下隙或脑室出血:RBC 升高。 一、对涂片的满意程度:满意、不满意; 二、细胞学诊断:1.未见癌细胞和癌前病变细胞;2.病原体 3.反应性细胞改变①炎症有关②萎缩(有或无炎症)③宫内节育器④与放疗有关; 4.上皮细胞异常:鳞状上皮细胞异常(不典型鳞状上皮细胞、鳞状上皮内病变、鳞状细胞癌)腺上皮异(不典型腺体细胞性质未定、非典型颈管腺细胞倾向瘤变、颈管原位腺癌和腺癌) 测定临床意义1.早期妊娠的诊断 2.协助 3.流产诊断及保胎监护 4.绒 5.肿瘤 特异性阴道炎:清洁度异常,同时 / 非特异性 1.线索细胞 2.PH 大 4.5 3.胺试验阳性(加10%KOH ,因产氨而释放出鱼腥味臭味 4.阴道分泌物呈稀薄,乳白色奶油状。(线索细胞加 任意两项便可诊断) -- 精索静脉曲张:无力型精子症 3.死精子>50%—死精子症 精子计数意义(1)少精子症,精子计数<20×109/L ① 睾丸病变精索静脉曲张、睾丸炎、睾丸肿瘤。 ②输精管疾病输精管精道阻塞、输精管精道先天性缺如和免疫性不育。 ③其它逆行射精、有害金属或放射性损害、环境因素,老年人,药物(长期用棉酚)。 (2)无精子症:严重的睾丸 和输精管疾病。 精子尾部低渗肿胀试验HOS 概念及意义 精子在低渗溶液中,由于渗透压的变化,水分子通过精子膜进入精子以达到渗透压平衡,使精子体积增大而出现尾部不同程度的肿胀现象,相差显微镜或普通高倍镜观察,计数200个精子中出现各种肿胀精子数,计算平均百分比。 / 意义:体外精子膜功能及完整性的评估指标,预测精子潜在的受精能力,不育症的精子尾部肿胀率明显降低,活的不动精子提示精子鞭毛结构异常,因此也可用HOS 测定精子存活率 核异质(dyskaryosis ):即上皮细胞的核异常,主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、核染色较深,但胞质尚正常。根据不典型增生程度分为轻、中、重度不典型增生。 轻度核异质:不典型细胞占上皮细胞层下1/3,细胞边缘清楚,核轻度增大,有轻度至中度畸形,染色质轻度增多,染色稍加深,核胞质比多在正常范围内 中度核异质:不典型细胞占上皮细胞层下1/3 ~2/3,细胞边缘较清楚,核明显增大,畸形明显,染色质浓密不均,深染,核与胞质比轻度增大。 重度核异质:不典型细胞超过上皮细胞层2/3,细胞边界不清,极性紊乱,核明显增大,比正常大1~2倍,畸形更明显,染色质增多、核与胞质比增大。不典型增生几乎达到或超过全层,可诊断原位癌。 背景成分:指涂片中非上皮细胞成分。意义:①红细胞:与取材有关;②中性粒细胞:可大量出现,常呈裸核,组织炎症③淋巴细胞:慢性炎症时较多见④浆细胞:慢性炎症⑥细菌团、真菌团、植物细胞、棉花纤维、粘液和染料沉渣等 复鳞上皮细胞变化规律 1) 胞体:由小到大 2)胞核:由大到小至消失 3)核染色:质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩;4)胞质量:少到多,核胞质比大到小;5)胞质染色:暗红到浅红。 恶性肿瘤细胞主要形态特征 核的改变:1.核增大1~4倍(核染色质增生↑) 2.核畸形 3.核深染 DNA ↑,腺癌深染不及鳞癌 4.核膜增厚(染色质呈粗颗粒状,分布不均常堆积于核膜下)5.核胞质比增大 6.核仁增大、数目增多,形态异常(分化程度越低,核仁异常越明显)7.核分裂增多(有丝分裂细胞↑)8.裸核 ( 癌细胞增生过快,营养供给不足,细胞退化.腺癌和未分化癌多见) / 细胞质的改变: 高、低分化鳞癌主要特征 高分化鳞癌:以表层细胞为主 细胞多形性,体积大,胞浆丰富,常染深红色,核大、畸形、深染、常分散存。 / 低分化鳞癌:中层或底层细胞为主。不规则形或圆形,散在分布或成团。 高低分化腺癌主要特征 高分化腺癌:胞体较大,可单个脱落也可成排成团脱落,胞质丰富,含有空泡,有时大空泡将核挤于一侧,形成印戒样癌细胞为特征性细胞。特征性细胞有:①纤维形癌细胞②蝌蚪形癌细胞③癌珠。 / 低分化腺癌:胞体较小,多成团互相重叠,极性紊乱,易融合成团呈花边样或桑椹样。 小细胞未分化癌主要特征:癌细胞小,比淋巴细胞略大 异性明显,三角形燕麦形核胞浆少,往往是裸核 核畸形显著,染色呈墨水滴状 成片镶嵌状 脱落细胞 图片制作固定方法 染色方法 1.带湿固定:涂片尚未干燥固定,适用较粘稠的标本(痰液、宫颈刮片及食管刷片等) 2.干燥固定:自然干燥后,固定。适用较稀薄的标本(尿液、浆膜腔积液等)一般15~30min 。含粘液较多标本适当延长。 染色方法: H-E 染色:优点:染色效果好。操作简易,试剂易配染色透明度好,细胞质呈淡玫瑰红色,细胞核显紫蓝色,红细胞呈朱红色。缺点:不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定 / 巴氏染色优点:色彩多样且鲜艳。染色效果好,能观察女性雌激素水平;缺点:染色程序较复杂 / 瑞-吉氏染色 适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片 脱落细胞报告方式:三级分类法:Ⅰ级阴性正常细胞或炎症变性细胞 Ⅱ级可疑发现核异质细胞 Ⅲ级阳性 / 四级分类法:Ⅰ级阴性 Ⅱ级少量轻度核异质细胞,多由炎症变性所致。Ⅲ级可疑。有重度核异质细胞,符合癌细胞标准。但由于数量过少,或形态不典型,不能排除癌前病变的可能。Ⅳ级阳性。涂片中可见典型的癌细胞。 / 直接法:①未找到癌细胞②标本质量差③找到不典型细胞④找到可疑癌细胞⑥找到癌细

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