湖南菌种站保藏根霉菌产糖化酶性能测评
２００８Ｎｏ．１７?１８?ＳｅｒｉａｌＮｏ．１９４ＣｈｉｎａＢｒｅｗｉｎｇ
ＲｅｓｅａｒｃｈＲｅｐｏｒｔ
图２４３株根霉产糖化酶酾活测定结果
Ｆｉｇｕｒｅ２Ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｇｌｕｃｏａｍｙｌａｓｅｐｒｏｄｕｃｅｄ
ｂｙ柏Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｔｒａｉｎｓ根霉在自然界分布很广，用途广泛，我国最早利用根霉糖化淀粉（即阿米诺法）生产酒精。根霉的淀粉酶活性很强，是酿造工业中常用糖化菌，与糖化生产关系密切的根霉主要有东京根霉（又叫河内根霉）（ＲｈｉｚｏｐｕｓｔｏｎｋｉｎｅｎｓＪｓ）、日本根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ）、华根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、爪畦根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｊａｖａｒｄｃｕｓ）和米根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａｅ）等。表ｌ中列出的如米根霉具有很强的淀粉酶活力，是酿酒业的糖化菌，同时其也具有酒精发酵能力及蛋白质分解能力，因此大量存在于酒药与酒曲中；小麦曲根霉（ＲｈｉｚｏｐｕｓｔｒｉｔｉｃＤ可糖化淀粉，还可以发酵蔗糖、葡萄糖等；还有东京根霉、少根根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓａｒｒｈｉｚｕｓ）、戴尔根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｄｃｌｃｍａｒ）、科恩根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｃｏｔｍｈ３等，都是良好的产糖化酶菌种。
结果表明，约有２０株菌种产糖化酶活性均较高。其中，ＨＮＣＣ６．１９７（台湾根霉）、ＨＮＣＣ６．２４６（日本根霉）、ＨＮＣＣ６．１９５（华根霉）产糖化酶活力最高，分别达１２４８Ｕ／ｇ、１２１４Ｕ／ｇ、１１５８Ｕ／ｇ，且有１ｌ株活力超过１０００Ｕ／ｇ（见表２）。
表２高酶活菌株
Ｔａｂｌｅ２．Ｓｔｒａｉｎｓｏｆｈｉｇｈｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙ
ｎＮＣＣ编号名称酶活／（Ｕ?ｇ．１）ＨＮＣＣ编号名称酶活／（Ｕ?９１）６．１２８华根霉１０３０６．１９７台湾根霉１２４８
６．１３３戴尔根霉１０４０６．１９８根霉属１０７８
６．１９１米根霉１０１８６．２４６日本根霉１２１４
６．１９３米根霉１０８９６．２８２小麦曲根霉１００１
６．１９５华根霉１１５８６．２９５爪哇根霉“１８
６．１９６科恩根霉１０７８
注：酶活结果为３次平行的平均值。
ＨＮＣＣ６．１９７产糖化酶的活力最高，而著名的根霉Ｑ３０３便是台湾根霉。日本根霉具有较强的糖化力，所以常用来制葡萄糖和甜酒酿。华根霉淀粉液化力强，有溶胶性，能产生酒精、芳香脂类等物质，因此在酒药与酒曲中大量存在，是酿酒所必需的主要霉菌，也是酸性蛋白酶和豆腐乳生产中的主要菌种。而且华根霉耐高温，在４５０Ｃ仍能生长。
３结论
对于筛选出产酶活性高的菌种，在资源共享中，本着科学的态度向用户推荐具有优良性能的菌种或将优良菌株制成复合酒曲推广应用到生产中。实践证明，优良菌种的应用确实提高了淀粉的糖化率和出酒率，同时风格良好。因此，优良菌株的使用不仅保证了产品的质量，得到了厂家的肯定，提高了产品的品质和收率，同时也保护了菌种资源，对实际生产和菌种资源的利用及研究具有重大的意义。
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湖南菌种站保藏根霉菌产糖化酶性能测评
作者：舒元元， 岳元媛， 胡良页， 王茹， 周遂意， SHU Yuanyuan， YUE Yuanyuan， HU Liangye， WANG Ru， ZHOU Suiyi
作者单位：湖南轻工研究院有限责任公司菌种站,湖南长沙,410015
刊名：
中国酿造
英文刊名：CHINA BREWING
年，卷(期)：2008，(9)
被引用次数：0次
参考文献(12条)
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；将筛选的优势菌株在不同的硒浓度下进行液体培养，测定酶活性，并对根霉进行洗脱、收集、干燥后，用石墨炉原子吸收分光光度法测定硒的含量。主要研究结果如下：
1、从恩施州5家酒曲厂采得5个酒曲样品，经分离纯化，获得14个酒曲根霉菌株，通过对其生长量、糖化酶和液化酶活性的比较，筛选出了三个优势较明显的菌株，即ERhl123、ERh3421、ERh5131。
2、培养基pH值、培养时间、硒浓度对ERhl12
3、ERh3421、ERh5131的生长和所产酶的活性有明显的影响。在pH 4.8-pH 5.2培养3d-4d，培养基中添加5％-10％的玉米粉能显著提高ERhl123、ERh3421、ERh5131根霉菌株产量和酶活性。
3、在3个菌株中，ERh3421的优势更明显，其糖化酶的活性达7.46×10<'2>u/g，液化酶达4.27×10<'3>u/g，蛋白酶达3.06×10<'2>u/g。在淀粉糖化时调至pH 5.8有利于提高3种酶的活性。通过对ERh3421菌株正交组合实验，液化酶活性、糖化酶活性分别为9.43×103 u/g和6.83×103 u/g，且与其他组合下的酶活性有显著差异，最佳组合为：pH5.2，温度30℃，玉米粉浓度5％。
4、在生产过程中，应根据需要控制温度，提高糖化酶、液化酶的活性时将温度控制在30℃，提高蛋白酶的活性时将温度控制在26℃。
5、硒的浓度直接影响根霉的生长和产酶活性，当硒浓度小于80μg/mL时根霉生长良好，糖化酶、液化酶、蛋白酶的活性增大，其中菌株ERh3421的硒富集量(2.9μg/g)高于其它两个菌株。恩施玉米中硒的含量为8.07±5.02mg/kg，适合根霉的生长和产酶。当浓度大于80μg/g时，根霉的生长、酶的活性、富集硒的能力均明显的受到抑制。
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下载时间：2011年3月13日