生化需氧量的测定

一、实验目的

1．了解生化需氧量（BOD5）的含义。

2．掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理。

3．熟练掌握碘量法测定DO的操作技术。

4．明确化学需氧量和生化需氧量的相关性。

二、实验原理

生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。五天培养法也称标准稀释法或稀释接种法。其测定原理是：将水样在20±1℃条件下培养五天，分别测定培养前后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。溶解氧测定方法一般用叠氮化钠修正法。

对于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（COD Cr）推算。如果BOD5未超过7mg/L，则不必稀释，可直接测定。

对于不含或少含微生物的工业废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种经过驯化的微生物。

三、试剂与仪器

试剂：1、磷酸盐缓冲溶液：将8.5g 磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g 磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g 磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g 氯化

铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。

2、硫酸镁溶液：将22.5g 硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。

3、氯化钙溶液：将27.5g 无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。

4、氯化铁溶液：将0.25g 氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。

5、盐酸溶液（0.5mol/L）：将40mL（ρ=1.18g/mL）盐酸溶于水，稀释至100mL。

6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将20g 氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。

7、亚硫酸钠溶液（1/2Na2SO3=0.025mol/L）：将1.575g 亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。

8、葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC—CH2—CH2—CHNH2—COOH）在103℃干燥1h 后，各称取150mg 溶于水中，移入1000 mL 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。

9、稀释水：在5—20L 玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水暴气2—8h，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L 左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，并混合均匀。稀释水的pH 值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。

10、接种液：可选用以下任一方法，以获得适用的接种液。

（1）城市污水，一般采用生活污水，在室温下放置一昼夜，取上层清液供用。（2）表层土壤浸出液，取100g 花园土壤或植物生长土壤，加入1L 水，混合并静置10min，取上清液供用。

（3）用含城市污水的河水或湖水。

（4）污水处理厂的出水。

（5）当分析含有难于降解物质的废水时，在排污口下游3—8km 处取水样做为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适当稀释后的废水进行连续暴气、每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或检查其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用做接种液。一般驯化过程需要3—8d。

11、接种稀释水：取适量接种液，加于稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加

入量生活污水为1—10mL；表层土壤浸出液为20—30mL；河水、湖水为10—100mL。接种稀释水的pH 值应为7.2，BOD5值以在0.3—1.0mg/L 之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。

仪器：1、恒温培养箱。

2、5—20L 细口玻璃瓶。

3、1000—2000mL 量筒。

4、玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高度长20cm。在棒的底端固定一个直径比量筒

直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。

5、溶解氧瓶：200—300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。

6、虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。

四、实验步骤

1、水样的预处理

（1）水样的pH 值若超出6.5—7.5 范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节至近于7，但用量不要超过水样体积的0.5％。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。

（2）含有少量游离氯的水样，一般放置1—2h，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。其加入量的计算方法是：取中和好的水样100mL，加入1＋1 乙酸10mL，10％（m/V）碘化钾溶液1mL，混匀。以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠标准溶液滴定游离碘。根据亚硫酸钠标准溶液消耗的体积及其浓度，计算水样中所需加亚硫酸钠溶液的量。

（3）若水样中含有Cu，Pb，Zn，Cr，As等有毒物质时，使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数，降低毒物浓度。

2、水样的测定

（1）不经稀释水样的测定

溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移至两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使其产生气

泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样，加塞水封。立即测定其中一瓶溶解氧。将另一瓶放入培养箱中，在20±1℃培养5d 后，测其溶解氧。

（2）需经稀释水样的测定

工业废水可由重铬酸钾法测得的COD 值确定。通常需作三个稀释比，即使用稀释水时，由COD 值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即获得三个稀释倍数；使用接种稀释水时，则分别乘以0.075、0.15 和0.25，获得三个稀释倍数。

稀释倍数确定后按下法之一测定水样：

①一般稀释法：按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水（或接种稀释水）于1000mL 量筒中，加入需要量的均匀水样，再引入稀释水（或接种稀释水）至800mL，用带胶板的玻璃棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。按不经稀释水样的测定步骤，进行装瓶，测定当天溶解氧和培养5d 后的溶解氧含量。另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水（或接种稀释水）作为空白，分别测定5d 前、后的溶解氧含量。

②直接稀释法：直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相同（其差小于1mL）的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀释水），再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量，然后引入稀释水（或接种稀释水）至刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。其余操作与上述稀释法相同。在BOD5测定中，一般采用叠氮化钠改良法测定溶解氧。如遇干扰物质，应根据具体情况采用其他测定法。溶解氧的测定方法附后。

3、碘量法测定溶解氧（DO）

①硫代硫酸钠（Na2S2O3）溶液：取3.1g（Na2S2O3·5H2O），0.1gNa2CO3加蒸馏水稀释至500 mL（于棕色瓶中）；

②硫代硫酸钠溶液的标定：于250 mL锥形瓶中，加入1gK（S）及适量水，加入10.00 mLK2Cr2O7标液（0.0250M）、5 mLH2SO4，静置5min后，用Na2S2O3滴定，待溶液变成浅黄色，加入淀粉指示剂，继续滴定至蓝色刚好褪去。

③DO的固定：

a. 将移液管插入溶解氧瓶的液面以下，加入1ml硫酸锰溶液，2ml碱性碘化钾—叠氮化钠溶液，盖好瓶盖颠倒混合数次，静置。待棕色物沉淀物降至半瓶时，再颠倒混合一次，待沉淀物降到瓶底。

b. 轻轻打开瓶塞，立即用移液管插入液面下加入1.5ml（1+1）硫酸，小心盖好

瓶盖，颠倒混合均匀，至沉淀物全部溶解为止，放置暗处5min。

c. 取100.00ml上述溶液于250ml锥形瓶中，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好全部褪去，记录硫代硫酸钠溶液的用量。

五、计算公式

1、溶解氧的计算

DO（O2，mg/L）=M×V×8×1000/ V水

式中：M——硫代硫酸钠标准溶液的浓度（mol/L）；

V——滴定时消耗的硫代硫酸钠标准溶液的体积（ml）；

8——氧（1/2，O）摩尔质量（g/mol）；

V水——水样体积（ml）。

2、BOD5的计算

①不经稀释直接培养的水样

BOD5（mg/L）=C1-C2

式中：C1——水样在培养前的溶解氧浓度（mg/L）；

C2——水样经5d 培养后，剩余溶解氧浓度（mg/L）。

②经稀释后培养的水样

BOD5 (mg / L) = [(C1 - C2) - (B1–B2 )f1]/ f2

式中：B1——稀释水（或接种稀释水）在培养前的溶解氧浓度（mg/L）；

B2——稀释水（或接种稀释水）在培养后的溶解氧浓度（mg/L）；

f1——稀释水（或接种稀释水）在培养液中所占比例；

f2——水样在培养液中所占比例。

六、数据记录及结果整理

C (Na S O)=0.0238mol/L

由于5天后水样1的DO含量低于1 mg/L，故舍去该组数据。

计算得：水样2：BOD5=249.8630 mg/L

水样3：BOD5=268.4626 mg/L

求得平均值：BOD5=(249.8630+268.4626)/2=259.1628 mg/L

七、思考题

1、如何进行水样预处理？

答：①当水样的pH 值若超出6.5—7.5 范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节至近于7，但用量不要超过水样体积的0.5％。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。

②含有少量游离氯的水样，一般放置1—2h，游离氯即可消失。对于游离氯在

短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。

③若水样中含有Cu，Pb，Zn，Cr，As等有毒物质时，使用经驯化的微生物接

种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数，降低毒物浓度。

④从水温较低的水域或富营养化的湖泊采集的水样，可能遇到含过饱和溶解

氧，此时应将水温迅速升温至20℃左右，充分振摇，以赶出过饱和的溶解氧。从水温较高的水域或废水排放口取得的水样，则应迅速冷却至20℃左右，并充分振摇，使其与空气中氧分压接近平衡。

2、五日后，DO瓶中若有白色絮状物，说明什么问题？如何处理？

答：五日后，DO瓶中有白色絮状物，说明在水的生化氧化过程中微生物已将所有的溶解氧分解掉，可以用酸处理。

3、如何根据BOD5和COD Cr的比值判断废水的可生化性？

答：用BOD5/COD Cr比值作为衡量废水是否适宜用生化处理的指标，其值越高，表明废水的可生化性就越强，一般BOD5/COD Cr>0.3时，认为废水具有可生化性。

五日生化需氧量BOD5测定综合实验

生化需氧量（BOD5）测定综合实验 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物的死亡。 水体中含有的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0—4℃下进行保存。一般应在6小时内进行分析。若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不应超过24小时。 概述 1．方法原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20℃培养时，完成此过程需100多天。目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升（mg/L）表示。 对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1 mg/L以上。 为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气），以便稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物生长的需要。 对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000 mg/L的水样。当水样BOD5大于6000 mg/L，会因稀释带来一定的误差。 仪器 （1）恒温培养箱（20℃±1℃） （2）5—20L细口玻璃瓶 （3）1000—2000ml量筒 （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 （5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 （6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。 试剂 1．磷酸盐缓冲溶液 将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4 ·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的pH应为7.2。 2．硫酸镁溶液 将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4 · 7H2O）溶于水中，稀释至1000ml。

水中生化需氧量(BOD5)的测定

水中生化需氧量（BOD5 ）的测定 一、实验目的 1、学会测定B OD 5 的方法； 2、掌握实验数据的处理方法。 二、实验要求 1 、了解实验的目的； 2 、学会实验方法和会处理实验数据； 3 、实验之后，懂得其中所涉及的理论知识 三、实验原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物进行的生物化学过程中所消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程目前国内外普遍规定于 20 ±1 ℃培养 5 天，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为 B OD5 值，以氧的质量浓度（ m g /L ）表示。 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物，这些有机物在水体中分解时需要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其他水声生物的死亡。 水中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分，人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。化学测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0~4℃下进行保存，一般应在6 小时内进行分析。若需要远距离转运，贮存时间不应超过24 小时。 对于某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧为2 m g /L ，而剩余溶解氧在1 m g/L 以上。为了保证水样稀释后，有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气）使稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐）以保证微生物生长的需要。 本方法适用于测定B OD 5大于或等于2 m g /L ，最大不超过6 00 0 m g /L 的水样。当水样 B OD5 大于60 00 m g /L 时，会因稀释带来一定的误差。 四、仪器 1. 恒温培养箱 2. 细口玻璃瓶 3. 大量筒 4. 玻璃搅拌棒，棒的长度应比所用量筒高度长2 00 m m。在棒的底端固定一个直径比底 小，并带有几个小孔的硬橡胶板； 5. 溶解氧瓶为 250~350 m L 之间，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形（每组 8 个）； 6. 虹吸管，供分取水样和添加稀释水用（乳胶管即可）； 7. 酸式滴定管（ 50. 00m L 一个）； 8. 三角烧瓶（ 500m L 一个）； 9. 移液管（ 1 .0 0m L， 2. 00 m L， 100m L 各一个）。 10. 870 型直读B OD 5 测定仪 五、试剂 1. 磷酸盐缓冲溶液取8 .5 g 磷酸二氢钾、 21. 75 g 磷酸氢二钾、 33 .4 g 七水合磷酸氢二钠 和1. 7 g 氯化铵溶于水中，稀释至1 000 m L。此溶液的 pH=7. 2。

生化需氧量的测定(包括DO的测定)

生化需氧量的测定 张浩200812082 环工0803 大气组 一、实验目的及要求 1、了解BOD5测定的意义及掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能； 2、掌握保证准确测定的方法； 二、实验原理 生化需氧量（BOD5）是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。 有机物在微生物的作用下，好氧分解过程两个阶段：第一阶段为含碳物质氧化阶段，主要是含碳有机物氧化为二氧化碳和水；第二阶段为硝化阶段，主要是含氮有机化合物在硝化细菌的作用下分解为亚硝酸盐和硝酸盐。一般硝化反应在5~7天后反应从会明显，故一般在20℃五天培养法测定的BOD值一般不包括硝化阶段。 五天培养法也成标准稀释法或稀释接种法。测定原理为;水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养五天，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值为BOD5，单位以的mg/L 表示。 五天培养法实验的必备条件：水体中存在能降解有机物的好氧微生物、有微生物生长所需的营养物质、有足够的溶解氧。 三、实验仪器 1）恒温培养箱[（20+1）℃]； 2）5~20L的细口玻璃瓶； 3）1000mL量筒； 4）玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板； 5）350mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口； 6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用； 四、实验药品 1）磷酸盐缓冲溶液：称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、2.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶液的pH应为7.2； 2）硫酸镁溶液：称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶于水中，稀释至1000mL； 3）氯化钙溶液：称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释至1000mL； 4）三氯化铁溶液：称取0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O），溶于水中，稀释至1000mL；5）稀释水：在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气2~8h，使水中溶解氧饱和或接近饱和（20℃时溶解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值应小于0.2mg/L； 6）接种稀释水：接种稀释水配制后应立即使用； 四、操作步骤 1）经稀释的水样的测定：COD的测定在使用重铬酸钾法确定时，通常需要三个稀释比，由COD值分别乘以0.075、0.15、0.225即由此获得三个稀释倍数；在使用接种稀释水时，应分别乘以0.075、0.15、0.225获得三个稀释倍数分别为0、40、80、120倍。本实验使用的稀释水的COD值为500mg/L； 2）根据确定的稀释倍数，用虹吸法把准备好的稀释水（接种稀释水）引入1000mL量筒

生化需氧量测定

生化需氧量（BOD5）测定 一、原理 生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，要紧是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分不测定水样培养前的溶解氧含量和20±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程中所消耗的溶解氧量（BOD5）。 关于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过称在有足够溶解氧的条件下进行的。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（CODcr）推算。 关于不含或少含微生物的工业废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种通过驯化的微生物。 二、仪器

1、恒温培养箱 2、5-20L细口玻璃瓶 3、1000—2000mL量筒 4、玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高长20㎝。在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。 5、溶解氧瓶：200-300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 6、宏吸管：供分取水样和添加稀释水用。 三、试剂 1、磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g 磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g 氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的PH值应为7.2。 2、硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。 3、氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水中，稀释至1000mL。 4、氯化铁溶液：将0.25g氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。

五日生化需氧量作业指导书

五日生化需氧量 作业指导书 ( 依据标准: GB/T7488-1987 ) 1含义及有关质量或排放标准 1.1 五日生化需氧量含义 五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。 1.2 五日生化需氧量(BOD5)的地表水质量1或污水排放标准2-3 注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002） 2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）

3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997) 2分析方法稀释接种法(GB7488-87) 2.1 适用范围 本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。 本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。 本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。 2.2 定义 生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。 2.3 原理 将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。

水五日生化需氧量(BOD5)的测定

实验五水五日生化需氧量（BOD5）的测定 1 目的 1.1 理解BOD的含义及测定条件； 1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。 2 方法原理 生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。 对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。 某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。 一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。 3 适用范围 BOD5为2—1000mg/L水样，超过1000mg/L的水样，应适当稀释。 4 主要仪器及设备 使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。玻璃器皿干燥后方能使用。 常用实验室设备如下： 4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。 4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。 4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。

实验七 五日生化需氧量的测定

实验七五日生化需氧量的测定 生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第五节。 一、实验目的和要求 1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。 2．复习第二章第五节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。 二、仪器 1．恒温培养箱。 2．5～20L细口玻璃瓶。 3．1000～2000mL量筒。 4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。 5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。 6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 三、试剂

1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。 2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。 3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。 5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。 6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。 7．亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3＝0.025mol/L)；将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。 8．葡萄糖-谷氨酸标准溶液；将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH)在103℃干燥lh后，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9．稀释水：在5～20L玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水曝气2～8h，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，并混合均匀。稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。 10．接种液：可选用以下任一方法获得适用的接种液。

水中五日生化需氧量(BOD5)的测定(标准操作规程作业指导书)

1.适用范围 本测定规程规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。 2.测试原理 在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4 h或（2+5）d±4 h[先在0~4℃的暗处培养2 d，接着在（20±1）℃的暗处培养5 d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5的形式表示。 3.仪器设备 3.1 生化培养箱：20±1℃。 3.2 溶解氧仪：0~20 mg/L。 3.3 曝气装置。 3.4 溶解氧瓶：300 mL。 3.5 滤膜：孔径为1.6 μm。 3.6 一般实验室常用仪器和设备，玻璃容器需符合国家A级标准。 4.试剂 除非另有说明，分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。 4.1 一级水，文中所说的水均指一级水。 4.2接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。也可按以下方法获得接种液。 4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300 mg/L，总有机碳不大于100 mg/L。 4.2.2 含有城镇污水的河水或湖水。 4.2.3 污水处理厂的出水。 4.2.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适当该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需

生化需氧量(BOD5)的测定

实验三生化需氧量（BOD5）的测定 一、实验目的 1．掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理和方法。 2．学会使用自动调温培养箱。 二、原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分别测定水样培养前的溶解氧含量和在20℃±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。 水体发生生物化学过程必须具备： (1)水体中存在能降解的好气微生物。 (2)有足够的溶解氧。 (3)有微生物生长所需的营养物质。 因此在测定水样时须加入一定量的无机营养物质。根据水样的情况进行一定比例的稀释，稀释水充分暴气等等。 三、仪器 1．自动调温培养箱（20℃±1℃）,不透光，以防光合作用产生溶解氧。 2．5～20 L细口玻璃瓶。 3．1000～2000mL量筒。 4．特制搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长20cm。在粗铁丝下端装一个2mm 厚，直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。 5．培养瓶：250～300mL特制的BOD瓶（带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口）或试剂瓶。所用培养瓶的容积均需校准，编号纪录。 6．碘量瓶：250mL 四、试剂 1．磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH应为7.2。 2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。

3．氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4．三氯化铁溶液：将0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。 5．盐酸溶液（0.5mol/L）：将40mL（ρ=1.18g/mL）盐酸溶于水，稀释至100mL。 6．碱性碘化钾溶液：称取250g氢氧化钠（NaOH），在搅拌下溶解于250mL 水中，冷却后，加75g碘化钾（KI），用水稀释至500mL。贮于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，避光保存。 7.硫代硫酸钠溶液c（Na2S2O3=0.01mol/L）：硫代硫酸钠溶液c(Na2S2O3·5H2O)=0.01mol/L：称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于煮沸放冷的水中，加2g碳酸钠，用水稀释至10 L，贮于棕色瓶中，使用前标定。标定方法同实验五。 8．5g/L淀粉指示剂：称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100mL 煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1mL冰醋酸，稀释至200mL，盛于试剂瓶中。 五、分析步骤 溶解氧的测定：将经20℃±1℃五天培养后的水样的250mL培养瓶盖外的水倒去，小心打开盖子，加入1mL氯化亚锰溶液和2mL碱性碘化钾溶液（注意先加氯化亚锰，移液管尖接近液面）。立即谨慎地将瓶盖好，不能有气泡，溢出的水倒掉，用手指按住瓶盖，用力反复颠倒培养瓶20次，直到沉淀与液体完全混合为止。将培养瓶静置约1小时，当沉淀只占培养瓶体积1/2时，小心打开盖子，吸出清液略大于5mL，用移液管加入5mL硫酸溶液，盖上盖子，反复颠倒培养瓶，使沉淀完全溶解。 静置5分钟，小心打开瓶塞，，然后用已标定的0.01mol/L的硫代硫酸钠标准溶液滴定。当溶液呈淡黄色时，加1mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚刚腿去。记下滴定管读数。

实验1生化需氧量的测定

实验一 生化需氧量的测定 一、实验目的与要求 1、掌握测定BOD 5的基本原理和操作技能； 2、复习间接碘量法； 3、巩固、熟练掌握容量分析基本操作（移液、滴定）。 二、实验原理 1、溶解氧(DO)与生化需氧量（BOD ）的意义 溶解氧(DO)：溶解于水中的分子态氧，单位为mg/L 。 生化需氧量（BOD ）：在有溶解氧的条件下，好氧微生物在分解水中有机物的生物化学过程中所消耗的溶解氧量。 2、五日生化需氧量（BOD 5） 水样在 20±1℃培养5天，培养前后溶解氧的差值，单位为mg/L 。 3、碘量法测溶解氧原理及其计算 反应式：MnSO 4+2NaOH= Na 2SO 4+Mn(OH)2↓ 2 Mn(OH)2+O 2=2MnO(OH)2 MnO(OH)2+2H 2SO 4= Mn(SO 4)2+3H 2O Mn(SO 4)2+2KI = MnSO 4+K 2SO 4+ I 2↓ 2Na 2S 2O 3+ I 2 = Na 2S 4O 6+2NaI 由反应式可得： DO(mg/L)=S O O S V M n /10413223 2??- （Vs 为水样体积 / L ） 4、N a2S 2O 3溶液的标定 反应式：-- - ++--+=+++=++I O S I O S O H I Cr H I O Cr 227321462642232223272 由反应式可得： ----?=23227227 2232/)61(O S O Cr O Cr O S V V C c c 三、仪器与试剂 1、仪器 以组为单位（2人1组）：250mL 溶解氧瓶×4；酸式滴定管，移液管：1mL ，2mL ，10mL ；250mL 锥形瓶×3；量筒：10mL ，100mL 。 公用：恒温培养箱；水样虹吸管；玻璃器皿若干。 2、试剂 MnSO 4溶液；碱性KI 溶液；Na 2S 2O 3溶液（待标定）；0.0250 mol/L （1/6K 2Cr 2O 7）

水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法培训讲学

水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法HJ505-2009 1. 适用范围 1.1 本方法适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。 1.2 本方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测 定上限为6mg/L，稀释与接种法的测定上限为6000mg/L。 2. 术语和定义 五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是分解有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。条件为（20±1）℃培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。 3. 方法原理 将水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h或（2+5）d±4 [先在0~4℃的暗处培养2d，接着在（20±1）℃的暗处培养5d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量。 若样品中的有机物含量较多，BOD5的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定； 对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化出力等的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质是，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 4. 试剂和材料 分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。 4.1 接种液 取POLYSEED 胶囊1 粒溶于装有250ml稀释水的烧杯中。将烧杯置于磁力搅拌器上搅 拌曝气1h。曝气结束，放置0.5h后倾出全部清液，将该清液置于磁力搅拌器上搅拌，此接种液最多能放置二天。其它获得接种液的途径见如下。 4.1.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300mg/L，总有机碳不大于100 mg/L； 4.1.2 含有城镇污水的河水或湖水； 4.1.3 污水处理厂的出水； 4.1.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需3~8天。 4.2 盐溶液 4.2.1 磷酸盐缓冲溶液 将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、16.6g磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）、17.7g七水合磷 酸氢二钠（Na2HPO4）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于约500ml水中，稀释至1000ml 并混合均匀。此缓冲溶液的pH 应为7.2。 4.2.2 七水合硫酸镁 将22.5g的七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml 并混合均匀。 4.2.3 氯化钙 将27.5g的无水氯化钙（CaCl2）溶于水，稀释至1000ml 并混合均匀。 4.2.4 六水合氯化铁 将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶解于水中，稀释至1000ml 并混合均匀。

水质五日生化需氧量(bod5)的测定

中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 505—2009 代替GB/T 7488-1987 水质五日生化需氧量（BOD5）的测定 稀释与接种法 警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服； 标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。 1 适用范围 本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD）的稀释与接种的方法。 本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD）的测定。 方法的检出限为L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限 为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。 2 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法 GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 3 方法原理 生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1） ℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d， 即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓

度之差， 计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD形式表示。 若样品中的有机物含量较多，BOD的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不 含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处 理等的废水，在测定BOD时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在 难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微 1 生物引入水样中进行接种。 4 试剂和材料 本标准所用试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。 水：实验用水为符合GB/T 6682 规定的3 级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于 mg/L，不含有氯或氯胺等物质。 接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。也可 按以下方法获得接种液。 4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300mg/L，总有机碳不大于100mg/L； 4.2.2 含有城镇污水的河水或湖水； 4.2.3 污水处理厂的出水； 4.2.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种 液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生 活污水，使适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，

水中生化需氧量检测方法

水中生化需氧量檢測方法 NIEA W510.55B 一、方法概要 水樣在20℃恆溫培養箱中暗處培養5天後，測定水樣中好氧性微生物在此期間氧化水中物質所消耗之溶氧（Dissolved oxygen，簡稱DO），即可求得5天之生化需氧量（Biochemical oxygen demand，簡稱BOD5）。 二、適用範圍 本方法適用於地面水體、地下水、放流水及廢（污）水中生化需氧量檢測。 三、干擾 (一) 酸性或鹼性之水樣會造成誤差，應使用氫氧化鈉或硫酸調整之。 (二) 水樣中若含餘氯會造成誤差，可以使用亞硫酸鈉排除干擾。 (三) 水樣中若含氰離子、六價鉻離子、重金屬及其他毒性化學物質均會造成干擾，必須經過適 當處理，否則不適宜生化需氧量之測定。 (四) 水樣中溶氧若過飽和會造成誤差。可將水溫調整至20 ± 3℃，再通入空氣或充分搖動以去 除干擾。 (五) 水樣中無機物質如硫化物及亞鐵離子之氧化作用會消耗溶氧而造成誤差；此外，水樣中還 原態氮之氧化作用亦會消耗溶氧而造成誤差，可使用硝化抑制劑以避免氧化作用。 (六) 水樣中若含肉眼可見之生物，應去除之。 四、設備及材料 (一) BOD瓶：60 mL或更大容量之玻璃瓶（以300 mL具玻璃塞及喇叭狀口之BOD瓶為佳）。 使用前應以清潔劑洗淨，然後以試劑水淋洗乾淨並晾乾。 (二) 恆溫培養箱：溫度可控制在20 ± 1℃，並可避光以預防BOD瓶中藻類行光合作用而導致 水樣溶氧增加。 (三) 高壓滅菌釜：溫度能保持在121℃（壓力約15 lb/in2或1.1 kg/cm2）滅菌15分鐘以上。

(四) 溶氧測定裝置：參照水中溶氧檢測方法－碘定量法（NIEA W422）或水中溶氧檢測方法－ 電極法（NIEA W455）。 五、試劑 所有配製使用的試劑化合物除非另有說明，否則必須是分析試藥級；以下所述溶液中，若有沈澱或生物滋長跡象時即應捨棄。 (一) 試劑水：比電阻≧16 MΩ- cm之純水。 (二) 磷酸鹽緩衝溶液：溶解8.5 g磷酸二氫鉀（KH2PO4）、21.75 g磷酸氫二鉀（K2HPO4）、33.4 g磷酸氫二鈉（Na2HPO4．7H2O）及1.7 g氯化銨（NH4Cl）於約500 mL試劑水中，再以試劑水稀釋至1 L，此溶液pH值應為7.2，無需任何調整。或者，溶解42.5 g磷酸二氫鉀（KH2PO4）及1.7 g氯化銨（NH4Cl）於約700 mL試劑水中，以10 M氫氧化鈉溶液調整pH值至7.2，再以試劑水稀釋至1 L。 (三) 硫酸鎂溶液：溶解22.5 g硫酸鎂（MgSO4．7H2O）於試劑水中，並稀釋至1 L。 (四) 氯化鈣溶液：溶解27.5 g氯化鈣（CaCl2）於試劑水中，並稀釋至1 L。 (五) 氯化鐵溶液：溶解0.25 g氯化鐵（FeCl3．6H2O）於試劑水中，並稀釋至1 L。 (六) 硫酸溶液，0.5 M：緩緩加28 mL濃硫酸於攪拌之試劑水中，並稀釋至1 L（註1）。 (七) 氫氧化鈉溶液，1 M：溶解40 g氫氧化鈉於試劑水中，並稀釋至1 L。 (八) 氫氧化鈉溶液，10 M：溶解40 g氫氧化鈉於試劑水中，並稀釋至100 mL。 (九) 亞硫酸鈉溶液，0.0125 M：溶解1.575 g亞硫酸鈉（Na2SO3）於1 L試劑水中。此溶液不穩定， 須於使用當日配製。 (十) 硝化抑制劑：使用2-氯-6-（三氯甲基）砒啶（2-Chloro-6-(trichloromethyl) pyridine，簡稱TCMP） 或TCMP市售品。 (十一) 葡萄糖－麩胺酸溶液：葡萄糖（Glucose）及麩胺酸（Glutamic acid）經103 ±2℃烘乾至少1小時後，溶解0.1500 g葡萄糖及0.1500 g麩胺酸於試劑水中，並稀釋至1 L。此溶 液滅菌（過濾滅菌或121℃高溫高壓滅菌15分鐘）後貯存於4 ±2℃下，可保存3個月， 若溶液無法維持在無菌狀態，應於使用前配製。 (十二) 碘化鉀溶液：溶解10 g碘化鉀於100 mL試劑水中。 (十三) 源水：水樣稀釋用，可使用去離子水、蒸餾水、經去氯後之自來水或天然水。

五日生化需氧量

生化需氧量（BOD5） 稀释与接种法 GB7488--87 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物的死亡。 水体中含有的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0—4℃下进行保存。一般应在6小时内进行分析。若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不应超过24小时。 概述 1．方法原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20℃培养时，完成此过程需100多天。目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升（mg/L）表示。 对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释

后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1 mg/L以上。 为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气），以便稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物生长的需要。 对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000 mg/L的水样。当水样BOD5大于6000 mg/L，会因稀释带来一定的误差。 仪器 （1）恒温培养箱（20℃±1℃） （2）5—20L细口玻璃瓶 （3）1000—2000ml量筒 （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。（5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。

五日生化需氧量的测定

实验七五日生化需氧量得测定 生化需氧量(BOD)就是指在规定得条件下,微生物分解水中某些可氧化物质(主要就是有机物)得生物化学过程中消耗溶解氧得量,用以间接表示水中可被微生物降解得有机类物质得含量,就是反映有机物污染得重要类别指标之一。测定BOD得方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。本实验采用稀释接种法测定污水得BOD。该方法也称五天培养法(BOD5),即取一定量水样或稀释水样,在20℃±1℃培养五天,分别测定水样培养前、后得溶解氧,二者之差为BOD5值,以氧得mg/L表示,其相关内容参阅教材第二章第五节。 一、实验目得与要求 1.掌握用稀释接种法测定BOD5得基本原理与操作技能。 2.复习第二章第五节中得相关内容,提出为保证测定准确度,应当控制好哪些条件。 二、仪器 1.恒温培养箱。 2.5～20L细口玻璃瓶。 3.1000～2000mL量筒。 4.玻璃搅拌棒:棒长应比所用量筒高度长200mm,棒得底端固定一个直径比量筒直径略小,并有几个小孔得硬橡胶板。 5.溶解氧瓶:200～300mL,带有磨口玻璃塞,并具有供水封用得钟形口。 6.虹吸管:供分取水样与添加稀释水用。 三、试剂

1.磷酸盐缓冲溶液:将8、58磷酸二氢钾(KH2PO4),2、75g磷酸氢二钾(K 2HPO4),33、4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)与1、7g氯化铵(NH4C1)溶于水中,稀释至1000mL。此溶液得pH 应为7、2。 2.硫酸镁溶液:将22、5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中,稀释至1000mL。 3.氯化钙溶液;将27、5g无水氯化钙溶于水,稀释至1000mL。 4,氯化铁溶液;将0、25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水,稀释至1000mL。 5.盐酸溶液(0、5mol/L):将40mL(ρ=1、18g/mL)盐酸溶于水,稀释至1000mL。 6.氢氧化钠溶液(0、5mol/L):将20g氢氧化钠溶于水,稀释至1000mL。 7.亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3＝0、025mol/L);将1、575g亚硫酸钠溶于水,稀释至1000mL。此溶液不稳定,需每天配制。 8.葡萄糖谷氨酸标准溶液;将葡萄糖(C6H12O6)与谷氨酸(HOOCCH2CH2CHNH2COOH)在103℃干燥lh后,各称取150mg溶于水中,移入1000mL容量瓶内并稀释至标线,混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9.稀释水:在5～20L玻璃瓶内装入一定量得水,控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵,将此水曝气2～8h,使水中得溶解氧接近于饱与,也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干得纱布,置于20℃培养箱中放置数小时,使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL,并混合均匀。稀释水得pH值应为7、2,其BOD5应小于0、2mg/L。 10.接种液:可选用以下任一方法获得适用得接种液。

GB生化需氧量(BOD5)的测定

实验（一）生化需氧量(BOD5)的测定 一．实验原理 在水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾溶液，水中的溶解氧将二价锰氧化成四价锰的氢氧化物棕色沉淀。加酸后，沉淀溶解，四价锰又可氧化碘离子而释放出与溶解氧量相当的游离碘。以淀粉为指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定释放出的碘，可计算出溶解氧含量。反应式如下： MnSO4+2NaOH=Na2SO4+Mn(OH)2↓ 2Mn(OH)2 +O2=2 MnO(OH)2↓（棕色沉淀） MnO(OH)2+2H2SO4=Mn(SO4)2+3H2O Mn(SO4)2+2KI= MnSO4+K2SO4+I2 2Na2S2O3+I2=Na2S4O6+2NaI 二．实验仪器、设备 1．250mL溶解氧瓶。 2．250mL锥形瓶。 3．25mL酸式滴定管。 4．1mL、2mL吸管。 5．50mL移液管。 三．实验试剂 1．硫酸锰溶液：称取36.4g硫酸锰(MnSO4·H2O )或48g（MnSO4·4H2O）溶于水中，稀释至100mL。此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。 2．碱性碘化钾溶液：称取50g氢氧化钠，溶解于30～40mL水中，另称取15g 碘化钾溶于20mL水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将两溶液混合，加水稀释至100mL。如有沉淀则放置过夜，倾出上清液，贮于棕色瓶中，用橡胶塞塞紧，避光保存。此溶液酸化后，遇淀粉应不呈蓝色。 3．（1+5）硫酸溶液（标定硫代硫酸钠溶液用）。 4．1%（m/V）淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用刚煮沸的水稀释至100mL。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。 5．重铬酸钾标准溶液（c 1/6 K2Cr2O7=0.025mol/L）：称取在105～110℃烘干2h，并冷却的优级纯重铬酸钾1.2258g溶于水中，移入1000mL容量瓶内，稀释至标线，摇匀。 6．硫代硫酸钠溶液[c Na2S2O3·5H2O≈0.0125 mol/L]：称取3.1g硫代硫酸钠溶于煮沸放冷的水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至1000mL，贮于棕色瓶中。使用前，用0.025mol/L重铬酸钾标准溶液标定。 标定方法：于250mL碘量瓶中，加入10.00 mL0.025mol/L重铬酸钾标准溶液，加入过量的酸性碱化钾，密塞，摇匀。于暗处静置5min后，用待标定的硫代硫酸

生化需氧量的测定

一、实验目的 1．了解生化需氧量（BOD5）的含义。 2．掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理。 3．熟练掌握碘量法测定DO的操作技术。 4．明确化学需氧量和生化需氧量的相关性。 二、实验原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。五天培养法也称标准稀释法或稀释接种法。其测定原理是：将水样在20±1℃条件下培养五天，分别测定培养前后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。溶解氧测定方法一般用叠氮化钠修正法。 对于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。其具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（COD Cr）推算。如果BOD5未超过7mg/L，则不必稀释，可直接测定。 对于不含或少含微生物的工业废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种经过驯化的微生物。 三、试剂与仪器 试剂：1、磷酸盐缓冲溶液：将8.5g 磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g 磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g 磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g 氯化 铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。

2、硫酸镁溶液：将22.5g 硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000mL。 3、氯化钙溶液：将27.5g 无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4、氯化铁溶液：将0.25g 氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000mL。 5、盐酸溶液（0.5mol/L）：将40mL（ρ=1.18g/mL）盐酸溶于水，稀释至100mL。 6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将20g 氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。 7、亚硫酸钠溶液（1/2Na2SO3=0.025mol/L）：将1.575g 亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。 8、葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC—CH2—CH2—CHNH2—COOH）在103℃干燥1h 后，各称取150mg 溶于水中，移入1000 mL 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9、稀释水：在5—20L 玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水暴气2—8h，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L 左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，并混合均匀。稀释水的pH 值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。 10、接种液：可选用以下任一方法，以获得适用的接种液。 （1）城市污水，一般采用生活污水，在室温下放置一昼夜，取上层清液供用。（2）表层土壤浸出液，取100g 花园土壤或植物生长土壤，加入1L 水，混合并静置10min，取上清液供用。 （3）用含城市污水的河水或湖水。 （4）污水处理厂的出水。 （5）当分析含有难于降解物质的废水时，在排污口下游3—8km 处取水样做为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适当稀释后的废水进行连续暴气、每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或检查其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用做接种液。一般驯化过程需要3—8d。