实验5 烟草遗传转化实验2

应用农杆菌介导法的烟草转基因实验

一、实验目的

烟草是遗传转化的模式植物，已经建立了一套完善的转化再生体系。本实验以烟草为实验材料，使同学们了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤，掌握遗传转化的基本操作技术。

二、实验用具及药品

烟草叶片，LBA4404质粒载体，摇床，培养皿(带滤纸)，移液枪，镊子，手术刀，无菌水

三、实验方法

根癌农杆菌介导转化的方法已经比较成熟，易于在植物细胞和组织培养实验室进行。具体操作程序如下：

(1)根癌农杆菌质粒的保存：构建好的根癌农杆菌质粒接种在YEP固体培养基上，YEP 固体培养基的成分为每100mL含NaCl 0.5g，酵母1 g，水解酪蛋白1g，琼脂1.5g，pH值7.0，在冰箱中冷藏，一个月换一次培养基，保证菌种正常生长。

(2)配制YEP液体培养基：成分同上，只是不添加琼脂，分装于试管中，每试管加入5mL 左右的液体培养基，包好后高压灭菌，放置于冰箱中待用。

(3)摇菌：用灭菌后的牙签或者火柴棍等挑出一些菌液，一起放入上述YEP液体培养基中，然后置于振荡器上摇菌16—17h(180r／min)，直至溶液变浑浊，即有大量菌丝长出。

(4)用消毒后的0.5mm打孔器从叶片上切出叶盘，然后将叶盘投入农杆菌悬液中培养5min

(5)用滤纸吸干多余的菌液，叶片放在MS+6-BA 1.0 mg/L十IAA 0.1 mg/L培养基上共培养2d，随后转至附加卡那霉素100mg/L，羧苄青霉素500 mg/L的培养基上筛选培养，(25±1)℃，16h光周期。

(6)2周后分化出卡那霉素抗性芽（应为绿色），从基部将芽切下，转至含100mg/L卡那霉素和500 mg/L羧苄青霉素的MS+0.1 mg/LIAA上生根培养，生根后的植株移入温室内栽培。

四、预期结果

愈伤组织：一周后在脱分化培养基上长出淡黄色、松散的愈伤组织。

幼芽：愈伤组织转入分化培养基两周后分化出卡那霉素抗性芽。

生根：芽转入生根培养基后可以生根。

五、作业要求

诱导出烟草愈伤组织并能够再生植株。每小组交出两三株再生并生根的烟草转基因植株。

烟草遗传转化实验

烟草遗传转化实验文件管理序列号：[K8UY-K9IO69-O6M243-OL889-F88688]

实验八植物细胞悬浮培养 实验目的：学习和掌握植物细胞悬浮培养的操作技术与方法。 实验器材： 超净工作台、恒温培养室、高压灭菌器、冰箱、恒温培养箱、培养瓶、250 mL 、500 mL三角瓶、镊子、酒精灯等。 配置MS液体培养基（2，4-D 2 mg/L+1%甘露醇 +3% 蔗糖，pH 5.8）分装于250ml的三角瓶中，每瓶50ml。 实验材料：烟草叶片愈伤组织。 实验方法： 1.70%乙醇净化工作台并擦洗干净，将所用的材料、工具、培养基等放入 工作台。打开紫外灯和风机，15分钟后关闭紫外灯开始方可操作。 2. 在超净台上用无菌镊子夹取出生长旺盛的松软愈伤组织，放入150ml 三角瓶中并轻轻夹碎,每个三角瓶加入培养基20-30ml，每瓶接种1-2g愈伤组织，按愈伤组织与液体培养基1∶10的比例，以保证最初培养物中有足够量的细胞。 3.接种后的三角瓶用天平称取重量并记载，然后置于摇床上，在转速 100-120rpm，25℃下培养以及散射光条件下，进行振荡悬浮培养。4.每周更换新鲜液体培养基两次，每次更换1/3。每次更换新鲜培养基时 称取重量。 5. 每个人接种悬浮培养细胞1瓶，观察并记录细胞生长情况。 6. 培养7天后，制作细胞生长曲线：为了解县浮培养细胞的生长动态，可用以下方法绘制生长曲线图： 鲜重法：在转代培养的不同时间，取一定体积的悬浮培养物，离心收集后，称量细胞的鲜重，以鲜重为纵座标，培养时间为横座标，绘制 鲜重增长曲线。 烟草遗传转化实验 实验目的

(完整版)孟德尔的豌豆杂交实验二教学设计

第2节孟德尔的豌豆杂交实验（二） 第一课时教师肖俊华 日期:2016.9.9 一、指导思想 本节内容是孟德尔经典遗传实验的精华部分，既需要学生了解和掌握孟德尔实验的科学研究过程，更需要深刻领会孟德尔实验的科学研究方法，领略科学研究魅力，因此需要学生具有很强的分析能力和逻辑思维能力。在教学过程中，采取启发式和探究式相结合，让学生进一步体会“假说—演绎法”的研究思路、研究方法和研究过程，注重问题设置的逻辑关系和递进关系，从宏观到微观深刻理解孟德尔自由组合定律的 实质，学会应用孟德尔自由组合定律解决实际问题。 二、教学背景分析 （一）教材分析 1.教学内容分析 《孟德尔的豌豆杂交实验二》是人教版教材《遗传与进化》第一章《遗传因子发现》中第二节的内容。从教材的编排来看，这部分内容是继孟德尔杂交实验一之后，讲解两对相对性状的遗传实验。以孟德尔发现的遗传因子的实验过程为主线，由现象到本质，由简单（一对）到复杂（多对），层层深入地展开讨论，又一次领略科学探究方法——假说演绎法，是以“科学探究”为核心的，即在观察和分析杂交实验结果的基础上发现和提出问题，通过推理和想象提出解释问题的假设，再通过实验对假设进行验证，然后运用数学统计方法分析数据并得出结论。突出了科学史和科学方法的教育，让学生犹如亲历科学家的探索过程，从浓郁的历史感中获得科学知识和对科学方法的领悟。虽然教材把孟德尔的遗传实验介绍的比较清楚，但是因为学生没有这方面的生活经验，这部分知识又是从宏观实验到微观层面理解和掌握遗传的本质，学生在刚刚学过分离定律，对分离定律的基本知识和基本原理理解尚有欠缺的时机进行这部分内容的教学，内容难懂，逻辑思维要求高，科学研究方法需要体会等等，在很大程度上，给学生的理解造成障碍。例如：通过两对性状的杂交实验的现象，对自由组合现象的解释；对自由组合定律的解释验证都是直接给出的，没有很好的铺垫，自由组合定律的应用课本上没有提及，但却是学习和掌握遗传定律最根本的内容，正是基于此，让学生对这部分知识历来感觉难学，老师也对这部分内容找不到很好的就解决方法和有效的教学策略。 本节内容也是学习第二章“减数分裂与受精作用”的重要基础，并为后续学习生物变异和进化奠定基础。 2.在整个高中生物教学中的地位及相互关系 （1）本节在必修二模块中的地位和作用 本节的内容都与其他单元有紧密的联系。本单元讲述的是140年前孟德尔对遗传现象的推测，以及根据推测总结出的遗传规律。遗传规律的细胞学基础是什么?分子生物学基础是什么?需要后期的研究成果去验证、解释和发展。例如，必修模块2《遗传与进化》的第1章《遗传因子的发现》揭示的是遗传规律的细胞学基础；第3章《基因的本质》揭示的是遗传规律的分子生物学基础；第4章《基因的表达》揭示的是基因控制性状的机制；第5章《基因的突变及其他变异》是从分子生物学和细胞学角度解释性状的变异；第6章《从杂交育种到基因工程》讲述的是遗传规律的应用及其发展；第7章《现代生物进化理论》是从群体的角度，讲述遗传和变异在生物进化中的作用。总之，既然整册书是按照遗传学发展的历程来编写的，抓住这条主线，就可以像串珠一样找出各章之间的有机联系。 （二）学生情况分析 学生在初中学习过的知识与本章内容有密切的联系。例如，在初中学习的“基因控制生物的性状”的知识，初步解决了基因与生物个体性状之间的关系问题；学习的“基因的显性和隐性”的知识，初步解决了控制相对性状的成对基因之间的关系问题，以及为什么具有相对性状差异的双亲，后代会有复杂的表现

(完整word版)高中生物必修二孟德尔遗传定律练习题

孟德尔遗传学定律·20161016 孟德尔遗传定律练习题 第I卷（选择题） 一、选择题（题型注释） 1．采用下列哪一组方法，可以依次解决①～④中的遗传问题（） ①鉴定一只白羊是否纯种 ②在一对相对性状中区别显隐性 ③不断提高小麦抗病品种的纯合度 ④检验杂种F1的基因型． A．杂交、自交、测交、测交B．测交、杂交、自交、测交 C．测交、测交、杂交、自交D．杂交、杂交、杂交、测交 2．在孟德尔的豌豆杂交实验中，必需对母本采取的措施是（） ①开花前人工去雄 ②开花后人工去雄 ③自花受粉前人工去雄 ④去雄后自然受粉 ⑤去雄后人工受粉 ⑥受粉后套袋隔离 A．②③④ B．①③④ C．①⑤⑥ D．①④⑤ 3．孟德尔验证“分离定律”假说最重要的证据是 A．亲本产生配子时，成对的等位基因发生分离 B．亲本产生配子时，非等位基因自由组合 C．杂合子自交产生的性状分离比为3：1 D．杂合子测交后代产生的性状分离比为1:1 4．下列关于孟德尔遗传规律的得出过程叙述错误的是 A．选择自花传粉、闭花传粉的豌豆是孟德尔杂交试验获得成功的原因之一 B．假说中具有不同遗传组成的配子之间随机结合，体现了自由组合定律的实质 C．运用统计学方法有助于孟德尔总结数据规律 D．进行测交试验是为了对提出的假说进行验证 5．基因型为RrYY的生物个体自交，产生的后代，其基因型的比例为 A．3:1 B．1：2：1 C．1:1:1:1 D．9:3:3:1 6．孟德尔的豌豆杂交实验中，将纯种的黄色圆粒（YYRR）与纯种的绿色皱粒（yyrr）豌豆杂交，F2种子为480粒，从理论上推测，F2种子中基因型与其个体数基本相符的是 A．yyrr，20粒 B．YyRR，60粒 C．YyRr，240粒 D．yyRr，30粒 7．番茄的红果（A）对黄果（a）是显性，圆果（B）对长果（b）是显性，且自由组合，现用红色长果与黄色圆果（番茄）杂交，从理论上分析，其后代的基因型不可能出现的比例是（） A．1：0 B．1：2：1 C．1：1 D．1：1：1：1 8．基因型为ddEeFf和DdEeff的两种豌豆杂交，在3对等位基因各自独立遗传的条件下，其子代表现型不同于两个亲本的个体占全部子代的（） A．1/4 B．3/8 C．5/8 D．3/4

亚细胞定位之烟草转化方法

本氏烟草（N. benthamian）瞬时表达及相关实验方法： 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化： A、实验步骤： 1、根据实验需要，将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中，并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中，28℃，200rpm过夜。 *估算时间，防止农杆菌液浓度超过1OD，否则会影响转化效率。 3、当菌液OD值介于0.6~1.0之间时，1000g，5min离心收集农杆菌。 4、用2ml Induction medium（without AS）轻柔重悬农杆菌，然后再次离心收集菌液。 5、重复步骤4。 6、所得沉淀用1ml Induction medium 重悬。 7、室温放置1~4小时 8、测OD值，根据实验需要，配置侵染液（组合详见下文）。 9、用不加针头的注射器将侵染液注射进6~8周大的本氏烟草叶片中。 *使用注射器时注意安全，防止针头扎到手，使用完的注射器要把针头套套上再扔，或者将针头放到注射器里面，避免伤害他人；注射时应戴乳胶手套并在每次注射完成后清洗手套，防止交叉污染。B、试剂： Induction medium： MES-KOH PH 5.7 10mM MgCl210mM AS 200uM 推荐提前配制母液 1M MES-KOH PH5.7 过滤灭菌，4℃保存，用时稀释100倍。 1M MgCl2 过滤灭菌，4℃保存，用时稀释100倍。 0.2M AS 溶于DMSO 有机溶剂专用滤膜过滤灭菌，分装（避免反复冻融），-20℃。用高压灭菌的超纯水稀释。 C、关于表达时间： 烟草瞬时表达系统中蛋白的表达可以维持比较长的时间，一般注射24小时之后到一周之内都会有表达。严格来讲需要摸索每个蛋白的最佳表达时段，但一般注射后48小时至72小时不同蛋白表达量都比较可观，不要错过。 D、关于侵染液浓度： 推荐每个菌株的浓度在0.1~0.2之间。过高的农杆菌浓度会引起叶片萎蔫甚至枯萎。

烟草组培苗实验步骤

烟草叶片的组织培养 一、实验原理与实验步骤 在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。 植物材料：烟草植株 药品：（2,4-D、NAA、6-BA浓度均可）、1mol/L NaOH、1mol/L HCL 蒸馏水、70%酒精0.01%升汞 仪器：玻璃杯、玻璃棒、pH试纸(5.5-9.0) 、1瓶无菌水、1个无菌烧杯、1包无菌滤纸、 1个无菌白瓷板、培养瓶若干移液器、微波炉、灭菌器、超净工作台、酒精灯、解剖刀、镊子 二、实验方法与步骤

注意： 1、大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2、微量元素母液的配制 按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签 3、铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。 4、有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。（1）制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。 （2）称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。 生长调节剂母液配制： 为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。 不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为0.5mg时，则取1ml母液即可。 三、培养基配制和灭菌 本次实验使用 （1）愈伤组织诱导及其幼芽分化培养基:MS+2,4-D 0.5 mg/L +6-BA 1.0 mg/L；（2）幼芽增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L； （3）生根培养基：MS+NAA 0.2 mg/L。 注意事项：上述培养基均在MS固体培养基溶化后降低到50左右后，加入相应激素所得， MS固体培养基的配置过程在此不作过多赘述

孟德尔的豌豆杂交实验二教学设计

孟德尔的豌豆杂交实验 二教学设计 文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）

第2节孟德尔的豌豆杂交实验（二） 第一课时教师肖俊华 日期:2016.9.9 一、指导思想 本节内容是孟德尔经典遗传实验的精华部分，既需要学生了解和掌握孟德尔实验的科学研究过程，更需要深刻领会孟德尔实验的科学研究方法，领略科学研究魅力，因此需要学生具有很强的分析能力和逻辑思维能力。在教学过程中，采取启发式和探究式相结合，让学生进一步体会“假说—演绎法”的研究思路、研究方法和研究过程，注重问题设置的逻辑关系和递进关系，从宏观到微观深刻理解孟德尔自由组合定律的实质，学会应用孟德尔自由组合定律解决实际问题。二、教学背景分析 （一）教材分析 1.教学内容分析 《孟德尔的豌豆杂交实验二》是人教版教材《遗传与进化》第一章《遗传因子发现》中第二节的内容。从教材的编排来看，这部分内容是继孟德尔杂交实验一之后，讲解两对相对性状的遗传实验。以孟德尔发现的遗传因子的实验过程为主线，由现象到本质，由简单（一对）到复杂（多对），层层深入地展开讨论，又一次领略科学探究方法——假说演绎法，是以“科学探究”为核心的，即在观察和分析杂交实验结果的基础上发现和提出问题，通过推理和想象提出解释问题的假设，再通过实验对假设进行验证，然后运用数学统计方法分析数据并得出结论。突出了科学史和科学方法的教育，让学生犹如亲历科学家的探索过程，从浓郁的历史感中获得科学知识和对科学方法的领悟。虽然教材把孟德尔的遗传实验介绍的比较清楚，但是因为学生没有这方面的生活经验，这部分知识又是从宏观实验到微观层面理解和掌握遗传的本质，学生在刚刚学过分离定律，对分离定律的基本知识

孟德尔遗传定律和减数分裂测试题

高一减数分裂和遗传定律测试题 班级 学号 姓名 成绩 一、选择题 1．鉴别一株黄色子叶的豌豆是否为纯合子，常用的方法是（ ） A ．杂交 B ．测交 C ．检查染色体 D ．观察性状 2．两只杂合子白羊为亲本，接连生下3只小羊是白色。若它们再生第4只小羊，其毛色（ ） A ．是白色的可能性大 B ．一定是黑色的 C ．一定是白色的 D ．是黑色的可能性大 3．现有AaBb 和Aabb 两种基因型的豌豆个体自交，假设这两种基因型个体的数量和它们的生殖能力均相同,在自然状态下,子一代中能稳定遗传的个体所占比例是 ( ) A.1/2 B.1/3 C.3/8 D.3/4 4．某种基因型为Aa 的高等植物产生的雌雄配子的比例是（ ） A ．雄配子很多，雌配子很少 B ．雌配子︰雄配子 = 1︰3 C ．A 雌配子︰a 雄配子 = 1︰1 D ．雌配子︰雄配子 = 1︰1 5．将具有一对相对性状的纯种豌豆个体间行种植； 另将具有一对相对性状的纯种玉米个间行种植。 具有隐性性状的一行植株上所产生的F1是 ( ) A.豌豆和玉米都有显性个体和隐性个体 B 、玉米都为隐性个体,豌豆既有显性又有隐性 C.豌豆和玉米的显性和隐性比例都是3∶1 D.豌豆都为隐性个体,玉米既有显性又有隐性 6、某细胞中染色体数为2N ，下列图象中属于有丝分裂中期和减数第二次分裂后期的依次是 A ．①② B ．②③ C ．④② D ．③④ 7采用哪一组方法，可依次解决①～④中的问题 ( ) ①鉴定一只白羊是否纯合 ②在一对相对性状中区分显隐性 ③不断提高小麦抗病品种的纯合度 ④检验杂种F 1的基因型 A ．杂交、自交、测交、测交 B ．测交、杂交、自交、测交 C ．测交、测交、杂交、自交 D ．杂交、杂交、杂交、测交 8．人类多脂基因(T)对正常(t)是显性，白化基因(a)对正常(A)是隐性，两对基因位于二对同尖染色体上。一个家庭中父亲多指，母亲正常，他们有一个白化病手指正常的孩子，则下一个孩子只有一种病和有两种病的几率分别是 ( ) A 、1/2、1/8 B 、3/4、1/4 C 、1/4、1/4 D 、1/4、1/8 9．水稻的有芒和无芒是一对相对性状，下列四组杂交实验中，能判断性状显隐关系的是（ ） ①有芒×有芒→有芒 ②有芒×有芒→有芒215 + 无芒70 ③有芒×无芒→有芒 ④有芒×无芒→有芒101 + 无芒97 A ．①② B ．②③ C ．③④ D ．①④ 10、某男子患先天聋哑，他的父母和妹妹均无此病，如果他妹妹与先天聋哑患者结婚，出生病 孩的几率是（ ）A ．21 B ．32 C ．3 1 D ．41 11、有丝分裂和减数分裂过程中共有的特点是 （ ）①DNA 复制 ②形成赤道板 ③纺锤体出现 ④联会 ⑤着丝点分裂 A ．①③⑤ B ．②③④ C ．①④⑤⑥ D ．①②③⑤ 12下列属于相对性状的是（ ）

烟草瞬时转化相关文献

Systemic Agrobacterium tumefaciens–mediated transfection of viral replicons for ef?cient transient expression in plants Sylvestre Marillonnet 1,2,Carola Thoeringer 1,2,Romy Kandzia 1,Victor Klimyuk 1&Yuri Gleba 1 Plant biotechnology relies on two approaches for delivery and expression of heterologous genes in plants:stable genetic transformation and transient expression using viral vectors.Although much faster,the transient route is limited by low infectivity of viral vectors carrying average-sized or large genes.We have developed constructs for the ef?cient delivery of RNA viral vectors as DNA precursors and show here that Agrobacterium–mediated delivery of these constructs results in gene ampli?cation in all mature leaves of a plant simultaneously (systemic transfection).This process,called ‘magnifection’,can be performed on a large scale and with different plant species.This technology combines advantages of three biological systems (the transfection ef?ciency of A.tumefaciens ,the high expression yield obtained with viral vectors,and the post-translational capabilities of a plant),does not require genetic modi?cation of plants and is faster than other existing methods. Viral vectors designed for expression of recombinant proteins in plants hold great promise because of high absolute and relative yields,and because of the speed provided by transient expression.Most of the results of practical interest achieved so far have been obtained with vectors built on the backbones of plus-sense RNA viruses such as tobacco mosaic virus (TMV)or potato virus X 1–4. We have recently shown that TMV-based vectors can be delivered to plant tissues using A.tumefaciens 5(agroinfection).However,one step of this process,namely the formation of active replicons from the primary nuclear transcript,is inef?cient.In a standard leaf transfec- tion experiment,this inef?ciency is masked by the subsequent ability of the replicons to move to neighboring cells by cell-to-cell movement.Here we show that this bottleneck can be fully remedied by incorpora-tion of silent nucleotide substitutions into the vector and by addition of multiple introns.We demonstrate that such modi?cations provide for ef?cient processing of the DNA information into active replicons in almost all cells (as high as 94%)of Nicotiana benthamiana ,an up to 1,000-fold improvement over nonoptimized TMV-based vectors,and an even higher improvement (4106-fold)in Nicotiana tabacum (tobacco).Finally,we show that the resulting vectors allow the development of a fully scalable and versatile whole-plant transfection protocol,that we term magnifection,for production of heterologous proteins in plants. RESULTS Viral replication following agroin?ltration of TMV-based vectors Agroin?ltration of a TMV-based viral vector containing the gene encoding green ?uorescent protein (GFP)(pICH16707,Fig.1a )into N.benthamiana leaves leads to the formation of foci of GFP ?uorescence 3d post-in?ltration (d.p.i.)(shown in ref.5and in Supplementary Fig.1online).T o quantify the proportion of cells initiating viral replication,a 489-bp deletion was made within the movement protein (MP)coding sequence,resulting in construct pICH14833(Fig.1a ).Replicons derived from this construct cannot move from cell-to-cell but are able to replicate autonomously within each infected cell.Three days after agroin?ltration of pICH14833in N.benthamiana leaf (OD 600of the A.tumefaciens in in?ltration solution was 0.7),a small number of cells expressing GFP appeared (see Supplementary Fig.1online),and the same pattern was still visible 2weeks after in?ltration.By counting protoplasts prepared from the in?ltrated area (Figs.1and 2),we found that 0.6–1.6%of cells initiated viral replication. There are several reasons why RNA viral vectors might have dif?culties starting the replication cycle.First,RNA viruses,such as TMV ,replicate in the cytoplasm and never enter the nucleus,and have therefore evolved in an environment where they are not exposed to the nuclear pre-mRNA processing machinery.As a result,pre-mRNA transcripts made in the nucleus from viral constructs may not be re-cognized and processed properly.Second,viral vector constructs encode very large transcripts (B 7.6kb for the primary transcript of a viral vector containing a GFP gene),a size much larger than the average size (1–2kb)of plant genes.Moreover,in nature,large eukaryotic genes often contain numerous introns that facilitate processing and export of the pre-mRNAs from the nucleus 6.We therefore hypothesized that modi?cations of the constructs that would increase the ef?ciency of processing and export of primary transcripts from the nucleus to the cytoplasm could lead to an increase in the number of cells that would initiate viral replication.Two types of modi?cations were made: Published online 8May 2005;doi:10.1038/nbt1094 1Icon Genetics,Biozentrum Halle,Weinbergweg 22,D-06120Halle (Saale),Germany.2These authors contributed equally to this work.Correspondence and requests for materials should be addressed to Y.G.(gleba@icongenetics.de).A R T I C L E S ?2005 N a t u r e P u b l i s h i n g G r o u p h t t p ://w w w .n a t u r e .c o m /n a t u r e b i o t e c h n o l o g y

2孟德尔杂交实验二 公开课【一等奖教案】

第二节孟德尔豌豆杂交实验（二） 一、教学目标 1.知识目标 (1)孟德尔两对相对性状的杂交试验(A: 知道)。 (2)两对相对性状与两对等位基因的关系(B: 识记)。 (3)两对相对性状的遗传实验，F2中的性状分离比例(B: 识记)。 (4)基因的自由组合定律及其在实践中的应用(C: 理解)。 (5)孟德尔获得成功的原因(C: 理解)。 2.能力目标 (1)通过配子形成与减数分裂的联系，训练学生的知识迁移能力。 (2)通过自由组合定律在实践中的应用及有关习题训练，使学生掌握应用自由组合定律 解遗传题的技能、技巧。 二、教学重点及实施方案 1.重点 (1)对自由组合现象的解释。 (2)基因的自由组合定律的实质。 (3)孟德尔获得成功的原因。 2.实施方案 (1)结合减数分裂过程精讲自由组合现象的解释及实质。 (2)使用挂图、投影、多媒体进行直观教学。 (3)使用表格进行归纳总结。 三、难点·突破策略 1.难点：*对自由组合现象的解释。 2.突破策略 (1)使用多媒体课件形象的体现由于非等位基因的自由组合导致性状的自由组合。 (2)应用概率知识让学生理解不同配子的随机组合，从而出现性状比例9∶3∶3∶1。 四、教具准备： 多媒体课件。 五、学法指导 本节内容与前面知识联系非常密切，在教学中指导学生边复习回忆所学内容，如减数分裂、生殖、发育、基因及基因对性状的控制等，边理解掌握孟德尔杂交试验现象及解释、测交验证、本质等，最终理解外在现象和内在本质相统—的观点，同时也为以后学习“生物的变异”打下扎实的理论基础。 六、课时安排 2课时

第一课时 [一] 教学程序 导言基因的自由组合定律 孟德尔发现并总结出基因的分离定律，只研究了一对等位基因控制的一对相对性状的遗传。但任何生物都不是只有一种性状，而是具有许多种性状，如豌豆在茎的高度上有高茎和矮茎；在种子的颜色上有黄色和绿色；在种子的形状上有圆粒和皱粒；在花的颜色上有红色和白色等等。那么，当两对或两对以上的相对性状同时考虑时，它们又遵循怎样的遗传规律呢?孟德尔通过豌豆的两对相对性状杂交试验，总结出了基因的自由组合定律。 [二] 教学目标达成过程 (一)两对相对性状的遗传试验 学生活动:阅读并分析教材P9。 教师列出如下讨论题纲: (1)孟德尔以豌豆的哪两对相对性状进行实验的? (2)F l代的表现型是什么?说明了什么问题? (3)F2代的表现型是什么?比值是多少?为什 么出现了两种新的性状? (4)分析每对性状的遗传是否遵循基因的分离定律? 学生展开热烈的讨论并自由回答，教师不忙于评判谁对 谁错，出示挂图“黄色圆粒豌豆 和绿色皱粒豌豆的杂交试验”，对实验过程和结果进行指导 分析: (1)相对性状指同一生物同一性状的不同表现类型，不能 把黄与圆、绿与皱看作相对性状。 (2)F l代全为黄色圆粒，说明黄色对绿色为显性，圆粒对皱 粒为显性。 (3)F2代有四种表现型:黄色圆粒、黄色皱粒、绿色圆粒、 绿色皱粒，前后代比较发现，出现了亲代不曾有的新性状-- 黄色皱粒和绿色圆粒，这又恰恰是两亲本不同性状的重新组 合类型。这四种表现型比为9∶3∶3∶l，恰是(3∶1)2的展开， 表明不同性状的组合是自由的、随机的。那么，孟德尔是如何解释这一现象的呢? (二)对自由组合现象的解释 学生活动:阅读并分析教材P10。 教师列出如下讨论题纲: (1)孟德尔研究控制两对相对性状的基因是位于一对还是两对同源染色体上? (2)孟德尔假设黄色圆粒和绿色皱粒两纯种亲本的基因型是什么?推出F l代的基因型是什么? (3)F1代在产生配子时，两对等位基因如何分配到配子中?产生几种配子类型? (4)F2代的基因型和表现型各是什么?数量比为多少? 学生讨论、总结归纳并争先恐后回答，教师给予肯定并鼓励。

高中生物必修二孟德尔遗传定律练习题.doc

孟德尔遗传定律练习题 第 I 卷（选择题） 一、选择题（题型注释） 1 ．采用下列哪一组方法，可以依次解决① ～④ 中的遗传问题（） ① 鉴定一只白羊是否纯种 ② 在一对相对性状中区别显隐性 ③ 不断提高小麦抗病品种的纯合度 ④检验杂种 F1的基因型． A．杂交、自交、测交、测交B．测交、杂交、自交、测交 C．测交、测交、杂交、自交 D．杂交、杂交、杂交、测交2．在孟德 尔的豌豆杂交实验中，必需对母本采取的措施是（） ①开花前人工去雄 ②开花后人工去雄 ③自花受粉前人工去雄 ④去雄后自然受粉 ⑤去雄后人工受粉 ⑥受粉后套袋隔离 A．②③④B．①③④C．①⑤⑥D．①④⑤ 3．孟德尔验证“分离定律”假说最重要的证据是 A．亲本产生配子时，成对的等位基因发生分离 B．亲本产生配子时，非等位基因自由组合 C．杂合子自交产生的性状分离比为3： 1 D．杂合子测交后代产生的性状分离比为1:1 4．下列关于孟德尔遗传规律的得出过程叙述错误的是 A．选择自花传粉、闭花传粉的豌豆是孟德尔杂交试验获得成功的原因之一 B．假说中具有不同遗传组成的配子之间随机结合，体现了自由组合定律的实质 C．运用统计学方法有助于孟德尔总结数据规律 D．进行测交试验是为了对提出的假说进行验证 5．基因型为RrYY 的生物个体自交，产生的后代，其基因型的比例为 A． 3:1 B．1：2：1C．1:1:1:1D．9:3:3:1 yyrr ）豌豆杂交，F2 6．孟德尔的豌豆杂交实验中，将纯种的黄色圆粒（YYRR）与纯种的绿色皱粒（ 种子为 480 粒，从理论上推测，F2种子中基因型与其个体数基本相符的是 A． yyrr ， 20 粒B．YyRR，60粒 C． YyRr， 240 粒D．yyRr，30粒 7．番茄的红果（ A）对黄果（ a）是显性，圆果（ B）对长果（ b）是显性，且自由组合，现用红色长果 与黄色圆果（番茄）杂交，从理论上分析，其后代的基因型不可能出现的比例是（） A．1：0 B ．1：2：1 C ．1：1 D ．1：1：1： 1 8．基因型为 ddEeFf 和 DdEeff 的两种豌豆杂交，在 3 对等位基因各自独立遗传的条件下，其子代表 现型不同于两个亲本的个体占全部子代的（） A． 1/4B ．3/8 C ． 5/8 D．3/4

《减数分裂和受精作用》教学设计

《减数分裂和受精作用》教学设计 一、教材分析： 1.教材的地位与作用： 本节课的教学内容是以精子形成过程为例学习减数分裂过程，由此总结减数分裂的基本概念。这节课的内容是学生学习了细胞的基础知识。学生已经初步掌握了动植物细胞的结构和功能，明确了有性生殖的重要意义，理解了有性生殖是生物界普遍存在的一种生殖方式，对于生物的遗传、变异具有十分重要的意义。减数分裂这一内容还与以后学习遗传学知识密切相关，特别是与生物的遗传规律、变异中的基因重组以及染色体组、多倍体、单倍体等内容都有非常密切的联系。由于本节课的内容既是对有丝分裂知识的延伸和扩展，也是学习遗传学知识的基础，因此有着承前启后的作用。 2.教学的重点与难点： （1）教学重点：减数分裂的过程和概念。这是生殖细胞形成的基础，又是遗传和变异的细胞学基础。 （2）教学难点：同源染色体，四分体的概念，以及染色体行为的变化规律。其中染色体行为的变化规律既是重点又是难点，它是学生理解减数分裂的关键。 二、教学目标分析： 1.知识与技能： （1）通过本节课的学习要求学生理解减数分裂的基本概念、过程和特点，明确减数分裂是生殖细胞形成过程中的一种特殊的有丝分裂； （2）掌握同源染色体的基本概念； （3）理解和掌握减数分裂的两次分裂过程中染色体行为特征，特别是染色体数目、染色单体数目和DNA含量的变化规律。 2.过程与方法： 通过对比减数分裂和有丝分裂、精子和卵细胞形成过程的异同点，培养学生比较、分析问题并认识事物实质的思维能力；通过对减数分裂过程中染色体和DNA变化规律的认识，培养学生观察、分析、综合等方面的思维能力；通过分析讨论、巩固练习，培养学生解决问题的能力。 3.情感态度与价值观： 通过减数分裂过程中染色体和DNA变化规律的认识，使学生明确减数分裂和受精作用，是维持亲、子代之间体细胞染色体数目一致，保证物种稳定的重要条件；减数分裂产生遗传内容不同的配子，是有性生殖后代具有丰富变异性的重要原因。从而明确有性生殖在生物的生殖方式上有着更高级的进化地位。 三、学情分析： 1. 学生学习本课内容的基础： 根据本节课的知识体系、重点难点和学生的认识水平，采用“启发与探究”的教学模式实施教学，即：目标→观察→思考→总结→应用，根据教学目标设疑，引导学生观察和思考，通过归纳和总结来解决问题并形成知识体系。然后加以应用，目的在于培养学生的思维能力。教学过程尽量体现以教师为主导，学生为主体的教学原则。 2. 学生学习本课内容的能力： 借助多媒体辅助教学，增加教学的直观性、科学性和课堂内容容量。以此来突出本节课的重点，突破难点。

高中生物必修二减数分裂和遗传规律测试卷

2013—2014学年度第二学期第一次学情检测 高一生物（必修二） 本试卷分第I卷选择题和第II卷非选择题两部分。满分 100分考试时间100分钟。 注意 :请将第I卷的答案涂在答题卡上 ,第II卷的答案填在规定的答题纸上。 第I卷 一.单项选择题本题包括35小题每小题2分共70分。 1．下列各组中属于相对性状的是 A．人的双眼皮与单眼皮B．兔的白毛和羊的褐毛 C．玉米的黄粒与圆粒D．豌豆高茎与绿色豆荚 2．一对等位基因的杂合子自交三次，在F3代中显性纯合子的比例为 A．1／8 B．7／8 C．7／16 D．9／16 3. 某纯合红花植物与另一纯合白花植物杂交，F l在低温强光下开红花，在高温荫蔽处则开白花， 这一实例说明 A．表现型是基因型的外在表现形式B．基因型决定表现型 C．基因型不同表现型也不同D．表现型是基因型与环境因素相互作用的结果4．通过测交不能推测被测个体 A．产生配子的比例B．产生配子的数量C．产生配子的种类D．基因型 5．基因分离规律的实质是 A．子二代出现性状分离B．子二代出现性状分离比为3:1 C．等位基因随同源染色体的分开而分离D．测交后代性状分离比为1:1 6．具有一对等位基因的杂合子进行测交，其测交后代中，与两个亲本的基因型都不同的个所占的比例是 A．0 B．25% C．50% D．100% 7. 父本基因型为AABb，母本基因型为AaBb，其F1不可能出现的基因型是 A．AABb B．Aabb C．AaBb D．aabb 8．下列基因型中哪一项是纯合体 A. BbDD B. DdCc C. EERr D. AAbb 9．按自由组合定律遗传，能产生四种类型配子的基因型是 A．YyRR B．MmNnPP C．BbDdEe D．Aabb 10. 下列杂交组合中，子代基因型种类和表现型种类数相同的一组是 A.aaBb×AABB B.aabb×aaBb C.aaBb×AABb D.AaBB×aaBb 11．基因型为 AaBb 的个体与 aaBb 个体杂交，按自由组合定律遗传，F l的表现型比例是： A ． 9 ：3 ： 3 ： 1 ; B ．1 ：1：1：1 C ． 3 ：l ： 3 ； l ; D ．3 ：1 12．孟德尔的豌豆杂交实验中，将纯种的黄色圆粒（YYRR）与纯种的绿色皱粒（yyrr）豌豆杂交，F2代种子为480粒，从理论上推测，基因型为YyRR的个体数大约是 A．60粒B．30粒C．120粒D．240粒13．两个黄色圆粒豌豆品种进行杂交，得到6000粒种子均为黄色，但有1500粒为皱粒。两个杂交亲本的基因组合可能为 A．YYRR×YYRr B．YyRr×YyRr C．YyRR×YYRr D．YYRr×YyRr 14．香豌豆的花色有紫花和白花两种，显性基因C和P同时存在时开紫花。两个纯合白花品种杂

孟德尔遗传定律综合试题及答案

孟德尔遗传定律综合试题 出题人：晁璐 审题人：胡国联 一选择题（共30题，每题2分，共60分，每小题只有一个正确答案） 1．牛的黑色对红色是显性，现有一头黑色公牛，若要判断它是纯合子还是杂合子，最好 的杂交组合是（ ） A ．黑色公牛×黑色母牛 B ．黑色公牛×红色母牛 C ．黑色公牛×杂色母牛 D ．黑色公牛×白色母牛 2．一匹家系不明的雄性黑马与若干纯种枣红马杂交，生出20匹枣红马和25匹黑马，这 说明（ ） A ．雄性黑马也是纯合子 B ．黑色为隐性性状 C ．枣红色是隐性性状 D ．说明不了什么 3．在孟德尔两对相对性状的豌豆杂交实验中，F2代中能稳定遗传的个体和性状重组型 个体所占的比例分别是（ ） A ．164和166 B ．169和162 C ．81和83 D ．42和83 4．一对雌雄蛙，若用人工方法孕育出1000只蝌蚪，从理论上推算，至少需要卵原细胞 和精原细胞的数量分别是（ ） A ．280 和 1 000 B ．1 000 和 250 C ．1 000 和 4 000 D ．4 000 和 2 000 5．关于减数分裂的描述正确的是（ ） A ．第一次分裂，着丝点分裂，同源染色体不配对 B ．第一次分裂，着丝点不分裂，同源染色体配对 C ．第二次分裂，着丝点分裂，同源染色体配对 D ．第二次分裂，着丝点不分裂，同源染色体不配对 6．基因型为Dd 的植物体，产生雌配子和雄配子之间的比例应该是（ ） A ．l ∶1 B ．3∶1 C ．无一定比例，但雄多于雌 D ．无一定比例，但雌多于雄 7．血友病是伴X 染色体隐性遗传疾病。患血友病的男孩，其双亲基因型不可能是（ ） A ．XHXH 和XhY B ．XhXh 和XHY C ．XhXh 和XhY D ．XHXh 和XhY 8．让杂合子Aa 连续自交三代，则第四代中杂合子所占比例为 A ．1/4 B ．1/8 C ．1/16 D ．1/32 9．牵牛花的红花基因（R ）对白花基因（r ）显性，阔叶基因（B ）对窄叶基因（b ）显 性，它们不在一对同源染色体上，将红花窄叶纯系植株与白花阔叶纯系植株杂交，F1 植 株再与“某植株”杂交，它们的后代中：红花阔叶、红花窄叶、白花阔叶、白花窄叶的植 株数分别354、112、341、108，“某植株”的基因型为 （ ） A ．RrBb B ． Rrbb C ． rrBb D ．RRbb 10．下列各组性状中，属于相对性状的是（ ） A 豌豆种子圆滑与子叶黄色 B ．狗的黄毛与兔的黑毛