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如何选择和使用切片石蜡

第10卷第2期2001年6月

中国组织化学与细胞化学杂志

CHIN ESE JOU R N AL O F HIST OCHEM IST RY AN D CY T O CHEM IST R Y

V ol.10No.2

Jun.2001如何选择和使用切片石蜡

蔡俊杰

(第一军医大学南方医院病理科广州510515)

  石蜡是病理切片技术中最常应用的材料之一,每天都要与它打交道。目前,国内使用的切片石蜡种类繁多,根据各地区各单位所处的地理环境不同,所使用各种石蜡的熔点也就有异。有的喜欢熔点高一些的,有的则喜欢熔点稍低一点的。但是迄今为止,对于如此常用的物质,对于关系到病理组织切片质量的好坏,关系到病理档案的保存等许多问题。如何才能选用恰当的石蜡,以便更好地解决上述问题。国内许多教科书[1~4]却没有详细应用的报道。为此,本文根据近三十年来石蜡的使用情况,提出有关的看法。

1.材料和方法

1.1 材料:上海化工厂生产的动植物切片石蜡;广州东方红化工厂生产的切片石蜡;汕头化工厂生产的切片石蜡和广东茂名石油化工厂生产的石蜡。

1.2 方法:常规石蜡手工包埋法和机器石蜡包埋法。

2.结果

应用经过处理的石蜡包埋的组织块,表面观之呈淡黄色,蜡质密度好,柔软合适,切片连续切片好,切片完整,支承力强,蜡块归档经10年后检查,未出现塌陷、变形的现象。未经处理的石蜡,蜡质密度差,表面观之呈乳白色,手搓捻之易碎,切片时较易碎,支承力不够,难以连续切片,蜡块归档10年后检查,可发现变形、塌陷等现象。

3.讨论

要选择和应用好石蜡,就必须对石蜡有一全面的了解,不熟悉和不了解的东西,根本上就谈不上使用得当。因此必须对其性质和作用加深了解,然后才能对其性质的改善以及选择应用上有所作为。

3.1 石蜡的性质。石蜡是一种碳氢化合物,由矿物油的分裂产生。它的性质很不一样,熔点在45℃~75℃的范围。熔点低的石蜡,肉眼观之呈乳白色,手触之易碎。熔点高的石蜡,肉眼观之为浅淡黄色,手触之呈柔韧至硬感,不易碎。熔点高的石蜡硬度高,熔点低的石蜡,其硬度低。一般将熔点在54℃以下的称为软石蜡,54℃以上的为硬石蜡。

3.2 石蜡对组织和切片的作用。组织浸蜡时,由于二甲苯的诱导作用,将石蜡引导至组织之中,经过一段时间后,组织完成浸蜡时就可将组织进行包埋,组织块被埋藏于用石蜡浇灌的模型中冷却后,熔解的石蜡冷却成块,浸入到组织之中的石蜡,将组织之中的各种腔隙以及组织和细胞在脱水过程中被各种脱水剂作用后溶解去的物质所遗留的地方填充起来,起到支撑填平的作用,使组织块不出现高低不平的现象,使切片能完整的切出。

3.3 石蜡应用的选择。由于石蜡熔点的范围大,可选择的余地较多,因此必须选择适合于本地区本单位使用的石蜡。才能制出高水平高质量的病理组织切片和各种组织切片。如果选用的石蜡熔点较高,石蜡的硬度较硬,则切片较难切,柔软度不适合,但这可切较薄的切片,如果选择熔点较低的石蜡,硬度也就降低,切片的支撑力不够,较难切出薄片。我国幅员辽阔,南北气候不同,温差较大,一年四季的温度变化又极不相同,对不同熔点的石蜡使用就不能千篇一律,应根据季节,地区和气温选用石蜡。如广东地区,冬天室温低至几摄氏度,夏天又高至30余度,虽然现在大部分使用空调,但是,不同季节选用不同熔点种类石蜡,还是必要的。这样有利于操作和切片。

3.3.1 应用于某些组织化学石蜡熔点的选择。某些组织化学,尤其是酶类的组织化学,当应用石蜡切片来制作时,石蜡的熔点要求不能过高,因为酶类对温度的敏感性较强,温度越高,对酶活性的破坏就越严重。因此需要选择既能适合于切片又能尽量保存酶活性的温度,这种温度是54℃。

3.3.2 常规切片石蜡熔点的选择。常规制片应根据所在地区和季节的不同来选择石蜡的熔点,据近三十年的实验证明:在夏秋季节,应选用60~62℃熔点的石蜡为最好。其余季节可选用58~60℃的石蜡。上述的各种熔点,适合于切3~5 m厚的切片。如果要切2 m以下的切片,则要选用70℃左右的蜂蜡,或者用蜂蜡与60~62℃的石蜡等份混合,以提高石蜡的硬度,增加石蜡的支撑力。否则用60~62℃的石蜡来切2 m以下的切片是不行的,这种熔点的石蜡支撑力不够,切片时切片挤在一起,不易张开,用摄子挟起易断裂、粉碎,无法成片等。

3.4 石蜡性质的改善。对于每一批刚购入的石蜡,为了使它达到最佳的切片状态,用前都必须进行处理,使其密度更加细致,性质更加柔韧,更加符合切片的要求。

3.4.1 电炉加热-冷却-加热法。用一铝锅,于电炉上加热,放入石蜡后将其加热至熔解,如含有杂质的石蜡,在加热过程中可发出哔哔吧吧的响声,随着温度的升高,所含杂质,有的被蒸发,有的被裂解破坏,当没有听到声音后(此时温度约为90℃左右),即可停止加热,将锅放入冷水中让石蜡加速冷却,但要注意不让水没过铝锅,以防水进入石蜡。当完全冷却后取出,再加热熔解,如此反复2~3次,待冷却后肉眼观察石蜡,颜色呈浅黄色。这种石蜡特别好用,尤