生物电镜样本处理方法

生物电镜样本处理方法

透射电镜样品处理流程：

1、2.5%戊二醛——2%多聚甲醛——0.1mol/L磷酸缓冲液，固定4h以上

2、缓冲液漂洗3次，10min/次以上

3、1%饿酸——0.1mol/L磷酸缓冲液，固定1.5h

4、缓冲液漂洗3次，10min/次以上

5、50%、70%、80%、90%、100%乙醇脱水，10-15min/次；

100%丙酮2次，10-15min/次

6、丙酮：包埋剂=1:1，浸透1h；

丙酮：包埋剂=1:2，浸透3h；

7、纯包埋剂浸透过夜

8、样品挑出放入包埋板中聚合：60℃约48h至硬化

9、切1-2μm的半薄片，对照定位后，60-80nm超薄切片，捞于铜网上

10、饱和醋酸铀，枸橼酸铅染色。

透射电镜的样品制备方法详解

透射电镜的样品制备 透射电镜的样品制备是一项较复杂的技术，它对能否得到好的ＴＥＭ像或衍射谱是至关重要的．投射电镜是利用样品对如射电子的散射能力的差异而形成衬度的，这要求制备出对电子束＂透明＂的样品，并要求保持高的分辨率和不失真．电子束穿透固体样品的能力主要取决加速电压，样品的厚度以及物质的原子序数．一般来说，加速电压愈高，原子序数愈低，电子束可穿透的样品厚度就愈大．对于１００～２００ＫＶ的透射电镜，要求样品的厚度为５０～１００ｎｍ，做透射电镜高分辨率，样品厚度要求约１５ｎｍ（越薄越好）． 透射电镜样品可分为：粉末样品，薄膜样品，金属试样的表面复型．不同的样品有不同的制备手段，下面分别介绍各种样品的制备． （１）粉末样品因为透射电镜样品的厚度一般要求在１００ｎｍ以下，如果样品厚于１００ｎｍ，则先要用研钵把样品的尺寸磨到１００ｎｍ以下，然后将粉末样品溶解在无水乙醇中，用超声分散的方法将样品尽量分散，然后用支持网捞起即可． （２）薄膜样品绝大多数的ＴＥＭ样品是薄膜样品，薄膜样品可做静态观察，如金相组织；析出相形态；分布，结构及与基体取向关系，错位类型，分布，密度等；也可以做动态原位观察，如相变，形变，位错运动及其相互作用．制备薄膜样品分四个步骤： ａ将样品切成薄片（厚度１００～２００微米），对韧性材料（如金属），用线锯将样品割成小于２００微米的薄片；对脆性材料（如Ｓｉ，ＧａＡｓ，ＮａＣｌ，ＭｇＯ）可以刀将其解理或用金刚石圆盘锯将其切割，或用超薄切片法直

接切割． ｂ切割成φ３ｍｍ的圆片用超声钻或ｐｕｎｃｈｅｒ将φ３ｍｍ薄圆片从材料薄片上切下来． ｃ预减薄使用凹坑减薄仪可将薄圆片磨至１０μｍ厚．用研磨机磨（或使用砂纸），可磨至几十μｍ． ｄ终减薄对于导电的样品如金属，采用电解抛光减薄，这方法速度快，没有机械损伤，但可能改变样品表面的电子状态，使用的化学试剂可能对身体有害．对非导电的样品如陶瓷，采用离子减薄，用离子轰击样品表面，使样品材料溅射出来，以达到减薄的目的．离子减薄要调整电压，角度，选用适合的参数，选得好，减薄速度快．离子减薄会产生热，使样品温度升至１００～３００度，故最好用液氮冷却样品．样品冷却对不耐高温的材料是非常重要的，否则材料会发生相变，样品冷却还可以减少污染和表面损伤．离子减薄是一种普适的减薄方法，可用于陶瓷，复合物，半导体，合金，界面样品，甚至纤维和粉末样品也可以离子减薄（把他们用树脂拌合后，装入φ３ｍｍ金属管，切片后，再离子减薄）．也可以聚集离子术（ＦＩＢ）对指定区域做离子减薄，但ＦＩＢ很贵．对于软的生物和高分子样品，可用超薄切片方法将样品切成小于１００ｎｍ的薄膜．这种技术的特点是样品不会改变，缺点是会引进形变．（３）金属试样的表面复型即把准备观察的试样的表面形貌（表面显微组织浮凸）用适宜的非晶薄膜复制下来，然后对这个复制膜（叫做复型）进行透射电镜观察与分析．复型适用于金相组织，断口形貌，形变条纹，磨损表面，第二相形态及分布，萃取和结构分析等． 制备复型的材料本身必须是＂无结构＂的，即要求复型材料在高倍成像时也

透射电镜样品制备方法

透射电镜样品制备方法 由于电子束穿透能力限制，必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用，这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。 在透射电镜的样品制备方法中，超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似，需要经过取材、固定、脱水、渗透、包埋聚合、切片及染色等步骤。 一．取材的基本要求 组织从生物活体取下后，如果不立即进行适当处理，会由于细胞内部的各种酶作用，出现细胞自溶现象。此外还可能由于污染，微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏，因此，为了细胞结构尽可能保持天然状态，必须做到快、小、准、冷。 （1）动作迅速，组织从活体取下后应在最短的时间内（争取1分钟内）投入2.5%戊二醛固定液。 （2）所取组织的体积要小，一般不超过1mm*1mm*1mm。也可将组织修成1mm*1mm*2mm大小长条形。因为固定剂的渗 透能力较弱，组织块如果太大，块的内部将不能得到良好的 固定。 （3）机械损伤要小，解剖器械应锋利，操作宜轻，避免牵拉、挫伤与挤压。 （4）操作最好在低温（0℃~4℃）下进行，以降低酶的活性，防

止细胞自溶。 （5）取材部位要准确。 二．取材方法 将取出的组织放在洁净的蜡版上，滴一滴预冷的固定液，用新的、锋利的刀片将组织切下并修小，然后用牙签或者镊子将组织块移至盛有冷的固定液的1.5ml离心管中。如果组织块带有较多的血液和组织液，应先用PBS洗几遍，然后切成小块固定。 1.动物及人体组织的取材（在冰浴上进行） 动物组织的取材，应麻醉（1%戊巴比铵5ml/kg体重腹腔注射）或断头急性处死，解剖出所需器官，用解剖剪刀剪取一 小块组织，放在干净的纸板上，滴一滴冷却的固定液，用新的、无油污的锋利双面刀片将材料切成大约1mm宽，2~3mm长的 小块并从中选出受损伤较小的小条，再将其切成1mm3的小块，最后用牙签将这些小块逐一放入盛有预冷的、新鲜固定液的 1.5ml管内，放入冰箱冷藏室低温固定（0~4℃）2-4小时或以 上。 *固定结束后，将固定液用PBS稀释三倍，样品于该溶液中在4℃冰箱保存。送样前请用PBS浸泡清洗3次，贴好标签 送至电镜室。 2.体外培养细胞的取材（在冰浴上进行） 培养在培养瓶中的细胞取材时，先倒出部分培养液，然后用刮刀轻轻刮下瓶壁上的细胞，将细胞悬液转移到离心管中，

透射电镜常规样品制备流程

透射电镜样品制备流程 由于透射电镜能观察的样品必须很薄（60～70nm），所以透射电镜的样品准备要求很严格，方法也很单一，仅有一下两种方法： 一．负染色技术 负染色技术简单快速，可以显示生物大分子、细菌、分离的细胞器以及蛋白晶体等样品的形态、结构、大小以及表面结构的特征。尤其在病毒学中，负染色技术有着广泛的应用。 样品要求：①样品悬液的纯度不要求很纯，但是如果杂质太多，如大量的细胞碎片，培养基残渣，糖类以及各种盐类结晶的存在都会干扰染色反应和电镜的观察。尤其是不能有过多的糖类，因为在电子束的轰击下，糖类容易碳化而有碍观察，因此样品要适当提纯。②样品悬液的浓度要适中，太稀在电镜下很难找到样品，太浓样品堆积影响观察。 操作流程：吸取样品悬液滴到有膜的铜网上，静置数分钟，然后用滤纸吸去多余的液体，滴上负染色液，染色1～2min后滤纸吸去负染色液，待干后用于电镜观察。 二、超薄切片技术 超薄切片技术是为透射电镜观察提供薄样品的专门技术，是生物学中研究细胞超微结构最常用的技术。广泛应用于生物体的各种细胞的超微结构观察。一般厚度在10～100nm的切片称为超薄切片，制作这种切片的技术叫做超薄切片技术。超薄切片制作的过程包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片和染色等几个环节，和一般光学显微镜的石蜡切片过程相似。但是，超薄切片切片过程更为细致与复杂，要求更严格，而且所用的试剂比较昂贵、配制复杂、强致癌。具体操作步骤、注意事项如下： 1．取材和前固定：快速的切取大小为0.5～1.0mm3的样品块，一分钟内把组织（样品）块浸入2.5％戊二醛（进口品质）溶液（取样前来平台领取），每个离心管内装20个以上的样品块，作为一个样送到平台。要求：①取材前一定要和工作人员取得电话联系！②取材选择部位要准确可靠，确保每块材料都是要观察的部位。③所有植物样品一定要抽真空，能够沉底的样品也抽真空15mins，不能沉底的样品一定要抽真空致沉底！④细菌、散在细胞等不能成块的样品，加戊二醛固定液，离心沉淀后送到平台，由平台工作人员处理。⑤泡在前固定液的材料最多可以放2周。 2．漂洗：用1M PBS Buffer Ph 7.2冲洗3次，每次15mins。 3．后固定：加入1％锇酸处理到样品变黑。植物样品一般处理2.5hours，真菌、细菌一般处理2hours，动物样品处理1hours。注意事项：①锇酸剧毒物质，易挥发，操作时要在毒品柜中谨慎使用。②锇酸比较昂贵，需特别节约使用。

透射电镜生物样品前处理步骤

电镜样品制备步骤 1、取材：放入2.5%戊二醛溶液中固定2-4h(4℃可保存1-2周，冷冻可保存2年) 注：不可用自来水冲洗，被钳、镊夹取造成机械损伤的组织不可 部分可取较大面积，但厚度必须小于1mm（戊二醛固定能力小于0.5mm） 2、漂洗：牙签取出样品至新的1.5ml离心管，用0.1M pH7.0磷酸缓冲液（PBS）漂洗样品三次（摇床），每次15min 3、锇酸固定与再漂洗：1%锇酸溶液固定样品1-2h（临用前计算用量≤50ul/样，用0.1M PBS将2%锇酸稀释至1%，通风橱操作），吸出固定液，用0.1M pH7.0 PBS漂洗样品三次，每次15min 注：漂洗以清除固定液，避免产生沉淀物干扰结构观察 4、脱水剂梯度脱水：用梯度浓度（50%，70%，80%，90%和95%）乙醇溶液对样品进行脱水处理，每个浓度处理15min 再用100%乙醇处理20min （乙醇细胞内抽提少，但与包埋剂相容性差） 最后用纯丙酮处理20min（若包埋剂为Epon改用环氧乙烷置换） 注：脱水以清除游离水以便包埋剂均匀渗透；脱水剂易吸收空气中水分，密封，置换时应该迅速由低到高逐级脱水而不能急剧脱水，更换溶液时应迅速，以免组织内外产生气泡。 5、包埋剂梯度渗透：①用包埋剂丙酮混合液（V/V=1/1）处理样品1h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小) ②用包埋剂丙酮混合液（V/V=3/1）处理样品3h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小) ③纯包埋剂渗透样品过夜：将样品移至干燥的新离心管中，常温过夜(所用器具均应干燥) 注：样品周围不能有气泡 6、加热聚合：牙签取出经渗透处理的样品至0.5ml干燥离心管（预先装入约300ul包埋剂），加热聚合仪70℃加热过夜。 7、莱卡EM UC 7超薄切片仪修快、切片（50-70nm） 8、正染色：塑料包埋模具（刀划几道缝隙），染色时温度低影响染色效果，冬天空调 醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液100ul染色（15min-1h），双蒸水冲洗 柠檬酸铅100ul染色15min（极易吸收空气中CO2产生PbCO3,染色时毋对着说话、呼吸，同时放置数块NaOH）9、日立H-7650透射电镜观察 spurr包埋剂配制：ERL 2.5g NSA 5.2 g 混合均匀后再加入催化剂DMAE，搅拌30min；低温干燥保存 DER 2.5 g DMAE 0.1g 宜新鲜配制但由于使用期限长(3-4天)，混合物可在使用前一天制备。Spurr树脂是嗜氧，聚合时不加盖 不同处理方法 7d后将培养基上的纤维素膜取出用水冲洗（除去膜表面杂质和残余培养基），浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH溶液80℃保温一小时（去除非纤维结构和残余菌体），取出用去离子水冲洗至pH中性后干燥 碱煮：浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH中，100℃煮沸30min，除去残留菌体与培养基杂质，再用0.5%的乙酸浸泡5min，后用水多次冲洗，至薄膜呈乳白色半透明，用吸水纸吸取表面水分，测试pH值，80℃干燥至恒重水煮：浸泡于蒸馏水中，100℃煮沸30min，后用水多次冲洗，用吸水纸吸取表面水分，测试pH值，80℃干燥至恒重 实验步骤 1，7d后将培养基上的纤维素膜取出用水冲洗，浸泡于0.1mol/L浓度的NaoH，取出冲洗后干燥 2，挖取一小块作为对照组A，电镜下观察微观结构 3，挖取两小块作为实验组B与C，分别碱煮与水煮，之后干燥，电镜下观察微观结构 实际应用 1，细菌纤维素有大表面积网状结构，因此具有很强抗压抗拉能力。（造纸，纸张耐折度与强度能够大幅度提高） 2，细菌纤维素内部有很多“孔道"，因而有良好的透水和透气性。（人造皮肤，创可贴，纱布，绷带）

透射电镜粉末样品制备方法

一、样品要求 1．粉末样品基本要求 （1）单颗粉末尺寸最好小于1μm； （2）无磁性； （3）以无机成分为主，否则会造成电镜严重的污染，高压跳掉，甚至击坏高压枪； 2．块状样品基本要求 （1）需要电解减薄或离子减薄，获得几十纳米的薄区才能观察； （2）如晶粒尺寸小于1μm，也可用破碎等机械方法制成粉末来观察； （3）无磁性； （4）块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由经验的老师指导或制备；样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析。所以块状样品制备之前，最好与TEM的老师进行沟通和请教，或交由老师制备。 二、送样品前的准备工作 1．目的要明确：（1）做什么内容（如确定纳米棒的生长方向，特定观察分析某个晶面的缺陷，相结构分析，主相与第二相的取向关系，界面晶格匹配等等）；（2）希望能解决什么问题； 2．样品通过X-Ray粉末衍射（XRD）测试、并确定结构后，再决定是否做HRTEM；这样即可节省时间，又能在XRD 的基础上获得更多的微观结构信息。 3．做HRTEM前，请带上XRD数据及其他实验结果，与HRTEM老师进行必要的沟通，以判断能否达到目的；同时HRTEM老师还会根据您的其他实验数据，向您提供好的建议，这样不但能满足您的要求，甚至使测试内容做得更深，提高论文的档次。 三、粉末样品的制备 1．选择高质量的微栅网（直径3mm），这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步；（注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只；普通碳膜铜网免费提供使用。） 2．用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上（在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面），轻轻平放在白色滤纸上； 3．取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min 后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微

透射电镜样品的制备方法(精)

试验材料为经过热处理后的钢材! 一、样品要求 1.粉末样品基本要求 (1)单颗粉末尺寸最好小于1μm; (2)无磁性; (3)以无机成分为主，否则会造成电镜严重的污染，高压跳掉，甚至击坏高压枪; 2.块状样品基本要求 (1)需要电解减薄或离子减薄，获得几十纳米的薄区才能观察; (2)如晶粒尺寸小于1μm，也可用破碎等机械方法制成粉末来观察; (3)无磁性; (4)块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由经验的老师指导或制备;样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析。所以块状样品制备之前，最好与TEM的老师进行沟通和请教，或交由老师制备。 二、送样品前的准备工作 1.目的要明确：(1)做什么内容(如确定纳米棒的生长方向，特定观察分析某个晶面的缺陷，相结构分析，主相与第二相的取向关系，界面晶格匹配等等);(2)希望能解决什么问题; 2.样品通过X-Ray粉末衍射(XRD)测试、并确定结构后，再决定是否做HRTEM;这样即可节省时间，又能在XRD的基础上获得更多的微观结构信息。 3.做HRTEM前，请带上XRD数据及其他实验结果，与HRTEM老师进行必要的沟通，以判断能否达到目的;同时HRTEM老师还会根据您的其他实验数据，向您提供好的建议，这样不但能满足您的要求，甚至使测试内容做得更深，提高论文的档次。 三、粉末样品的制备 1.选择高质量的微栅网(直径3mm)，这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步;(注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只;普通碳膜铜网免费提供使用。) 2.用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上(在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面)，轻轻平放在白色滤纸上; 3.取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min 后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上(如粉末是黑色，则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑，此时便适中。滴得太多，则粉末分散不开，不利于观察，同时粉末掉入电镜的几率大增，严重影响电镜的使用寿命;滴得太少，则对电镜观察不利，难以找到实验所要求粉末颗粒。建议由老师制备或在老师指导下制备。)

人事管理表格模板

人事管理表格

人员增补申请表 申请部门/物业服务中心: 申请时间: №: 本部( 处) 定编人数人, 在编人数人, 缺人 序号招聘部门岗位人数编制情况增补原因备注 □增编□补员 □增编□补员 □增编□补员 □增编□补员 □增编□补员 □增编□补员 □增编□补员 部门经理/ 服务中心经理 意见 签名/日期: 行政人事部复核 意见 签名/日期: 总经理( 助理) 审核 意见 签名/日期:

备注 员工办理离职申请手续单 使用部门: №: 姓名入职日期岗位申请辞职原因: 劝退/解雇原因: 申请人签名/日期: 被劝退/解雇者直接主管签名/日期: 直接主管准签/日期: 签准行政人事部签名/日期: 部门经理/服务中心经理签名/日期: 总经理签名/日期: 总经理签名/日期: 离职手续办理由 所 在 部 门 办 理 部门工作项目/ 资料文件 已交接清楚 保安已办清交接 手续并交回应交 其它用品 已还领( 借) 用 的工程工具/ 桌柜钥匙 已还领( 借) 用的清洁工具 /桌柜钥匙 部门经理/服务中心经 理核准直接主管签名保安班长签名工程助理签名经理助理签名 签名: 日期: 已交回应交 劳保用品 已交回应交办公 用品/钥匙/设备 所在部门/服务中 心财务欠款额 其它损坏赔偿 及物品归还 经理助理签名保安经理签名财务签名经理助理签名 考 勤 出勤起止 实际 出勤 迟 到 旷 工 事 假 病 假 大 夜 加 班 部门人事负责人 签名/日期 由 公 司 行 □已交回各类 识别证件、手 册 □已交回应交工 作制服 □损坏赔偿罚金 审查合格 □考勤记录 审查合格 人事专管员 签名/日期:

透射电镜图TEM制样及碳膜的选择碳膜介绍

透射电镜图T E M制样及 碳膜的选择碳膜介绍 The following text is amended on 12 November 2020.

1.样品制备： i.准备载玻片，在实验台上，用镊子取铜网正面放于载玻片（或滤纸）上，备 用； ii.将样品加入背景溶液，调好pH值，超声20 min，然后将样品用塑料滴管滴在载玻片（或滤纸）上； iii.待样品自然风干后（样品可以保存一定时间，只要在空气中不容易发生各种复杂反应，样品制备好后可以用一个培养皿盖住来保护样品），测定。注： ①当样品颗粒较大或样品浓度较低时，样品可能被载玻片或滤纸吸走，所以 可以使用悬空法滴定样品，借助的仪器为：自锁架； ②样品提前制作时应多做几个浓度梯度，因为样品太稀（太少）或太浓稠 （太多）都会影响测定，拍摄出的图片不利于后面样品分析； ③样品最好是提前制备好，因为现做可能样品不容易干，并且没有多余的时 间和拍摄人员沟通。若特殊原因没有提前制好样，样品可以烘干，但烘干温度不可超过70o C； ④样品拍摄时的注意事项：注重和拍摄人员的沟通，告诉他们哪些结构特征 或样品图是你需要的，拍摄样品时，制样人员尽量都在拍摄者旁边。制样者也应提前查阅相关资料，知道自己的样品大概的形貌。

2.样品保存：样品制备好应放干燥的干燥器等干燥环境保存，否则样品容易生成 铜绿，可能干扰样品观测。 3.样品制作工具准备（样品外送测定）：塑料滴定管，铜网，样品液（提前超 声），载玻片，纸巾，蒸馏水、背景溶液或去离子水，手套 4.铜网的特点：一面颜色较浅（红色，光亮的），一面颜色较深(颜色深的一面较 亮，有光泽)。喷了碳的一侧稍暗（看起来像是用铅笔在铜网上涂过一样，为正面，铜网边缘部分反光比较均一），在灯光下晃动有时候会有彩色状，喷碳的目的是为了传输电子，因此样品应滴在含碳膜的一侧。反面的铜网边缘会比较亮比较突出，和中间的部分反光不一致。 5. 6.测样注意事项：铜网很轻，拿样品时别让样品被风吹翻或者掉地上了。 7.样品测试：如果滴样的那一侧（正面）和检测时看得那一侧不一致的，样品杆 送进去测定过程中，万一有东西脱落了会掉到镜筒里，会污染荧光屏和镜筒。 8.铜网选择：低倍放大（样品颗粒较大）-普通铜网（最经济实用），高分辨率放 大（样品颗粒小）-微栅

项目管理常用表格模板[1]1

项目需求建议书（RFP） A. 项目信息 提供关于项目名称、客户名称、项目经理以及项目发起人姓名等方面的一般信息 项目名称：客户名称：项目经理：文件起草人：项目发起人：日期： B. 项目目标 描述完成项目的时间、质量要求等方面的信息 C. 工作描述（SOW） 描述执行项目的具体工作 D. 可交付结果 描述执行项目的阶段，完成项目任务的主要交付结果等方面的信息 E. 合同类型 描述使用哪种性质的合同

F. 付款方式 描述付款的时间、金额、币种、方式等 G. 建议书的内容 描述建议书应包括的具体内容 H. 建议书的评价标准 描述评价建议书的主要标准，包括价格、技术方案、项目管理方法、经验与资质等方面 I. 提交建议书的时间、地点要求 描述建议书的截止日期、提交的地点等信息

A. 项目信息 提供项目名称、客户名称、项目经理以及项目发起人姓名等与项目相关的一般信息 项目名称：客户名称：项目经理：授权书起草人：项目发起人：日期： B. 项目授权书 描述项目的工作任务，被任命的项目经理的姓名，项目经理的职责、权力等方面的信息授权书发出人姓名：职务： 授权书接受人姓名：职务： 抄送人：职务： 项目任务描述 项目经理的职责 项目经理的权力 授权人职务：签字：

A. 项目信息 提供项目名称、客户名称、项目经理以及项目发起人姓名等与项目相关的一般信息 项目名称：客户名称： 项目经理：文件起草人： 项目发起人：日期： 请回答如下问题并做出选择 这是更新后的项目计划吗？如果是，更新的原因是： 是否项目的年度预算是否提供？如果是，每年度是多少？ 预算额：年度：资金到位了吗？ 是否预算额：年度：资金到位了吗？ 是否预算额：年度：资金到位了吗？ 是否 项目关系人名单 列出项目执行过程中涉及的相关人员的信息 职务姓名电话E-mail 项目经理 项目发起人 技术总负责人 采购负责人 项目小组成员 项目小组成员 项目小组成员 项目小组成员 项目小组成员 项目小组成员 项目小组成员 客户代表 其他利益相关者

实验二__透射电镜结构原理、样品制备及观察..

实验二参观透射电子显微镜 时间：2015年12月1日 第一组：14:30-15:30 2013级金属材料工程专业一班 第二组：15:30-16:30 2013级金属材料工程专业二班地点：材料科学与工程学院一楼TEM室 讲解：龚伦军老师 实验二透射电镜结构原理、样品制备及观察 一、实验内容及实验目的 1．结合透射电镜实物介绍其基本结构及工作原理，以加深对透射电镜结构的整体印象，加深对透射电镜工作原理的了解。 2．掌握材料薄膜样品的制备方法—双喷电解减薄法和离子薄化法。 3．选用合适的样品，通过明暗场像操作的实际演示，了解明暗场成像原理。 4. 通过选区电子衍射的实际操作演示，加深对选区电子衍射原理的了解。 二、透射电镜的基本结构及工作原理 透射电子显微镜是一种具有高分辨率、高放大倍数的电子光学仪器，被广泛应用于材料科学等研究领域。透射电镜以波长极短的电子束作为光源，电子束经由聚光镜系统的电磁透镜将其聚焦成一束近似平行的光线穿透样品，再经成像系统的电磁透镜成像和放大，然后电子束投射到主镜简最下方的荧光屏上而形成所观察的图像。在材料科学研究领域，透射电镜主要可用于材料微区的组织形貌观察、晶体缺陷分析和晶体结构测定。 透射电子显微镜按加速电压分类，通常可分为常规电镜(100kV)、高压电镜(300kV)和超高压电镜(500kV以上)。提高加速电压，可缩短入射电子的波长。一方面有利于提高电镜的分辨率；同时又可以提高对试样的穿透能力，这不仅可以放宽对试样减薄的要求，而且厚试样与近二维状态的薄试样相比，更接近三维的实际情况。就当前各研究领域使用的透射电镜来看，其主要三个性能指标大致如下： 加速电压：80～3000kV 分辨率：点分辨率为0.2～0.35nm、线分辨率为0.1～0.2nm 最高放大倍数：30～100万倍

软件版本管理表格

XX公司软件版本控制办法 1、目的 规范本公司软件产品版本的升级流程，清晰管理软件版本号，保证各使用人、使用地点的版本软件都能胜任工作，并可靠保存不同版本软件。 2、适用范围 适用于研发结束进行测试或投入应用的软件系统、硬件驱动软件或独立工作软件，已销售产品中的软件系统的升级或变更管理等。 3、职责 3.1版本管理员负责统计公司内所有软件的版本信息，管理软件版本号，向软件工程师传达工程、维护及销售人员反馈的软件问题并进行汇总，在软件升级结束后向系统集成工程师提供新版本的软件系统。 3.2项目软件负责人及软件工程师负责对软件系统进行升级，项目软件负责人负责将升级后的软件上传到公司产品服务器，并通知版本管理员记录升级信息。 3.3每个项目的软件负责人对本小组内目前完成测试的软件及系统进行归档和版本维护。 3.4项目软件负责人对本项目的软件升级方法进行确认，将对软件的整体调整与总工协商后确定方法。 3.5销售人员和工程人员向版本管理员通报软件产品问题，工程人员负责升级后软件的重新安装和使用跟踪，并对修改版本软件的使用情况在规定时间内进行反馈。 3.6工程部集成工程师在完成软件安装后应填写客户版本信息清单，提交版本管 理员进行归档并汇总。 3.7 对于软件系统的一般性BUG和软件实现明显不适当的问题，项目软件负责人应积极进行修改，升级软件版本；其他软件使用性问题，项目软件负责人有权确定是否修改。 3.8对于软件功能性的重大修改，应将问题进行备案，并提交总工程师确定是否修改以及修改时间。对涉及需要产品升级等问题时，应提交公司技术委员会进行讨论确定。 4、工作程序 4.1软件系统保存 4.1.1建立公司产品存储服务器，网管（研发部）为每个项目组分配源代码存储区域，对每

透射电镜样品制备方法

?透射电子显微镜成像时，电子束是透过样品成像。 ?由于电子束的穿透能力比较低，用于透射电子显微镜分析的样品必须很薄。 ?根据样品的原子序数大小不同，一般在50～500nm之间。 透射电镜样品的要求： ?1. 样品必须对电子束透明。 ?2. 所制得样品必须具有代表性，以真实反映所分析材料的特征。 主要方法： 粉末样品、复型、离子减薄、电解双喷。

?透射电镜观察用的样品很薄，需放在专用的样品铜网上。 ?透射电子显微镜使用的铜网一般直径为3毫米，上面铳有许多微米大小的孔，在铜网上覆盖了一层很薄的火棉胶膜并在上面蒸镀了碳层以增加其膜的强度，被分析样品就承载在这种支撑膜上。

样品铜网的作用： ?承载样品，并使之在物镜极靴孔内平移、倾斜、旋转，寻找观察区。 ?样品通常放在外径3mm ，200目方孔或圆孔的铜网上，铜网牢固夹持在样品座中保持好的热、点接触，减少因电子照射引起的热或电荷积累而产生样品漂移或损伤。 样品台

透射电子显微镜样品制备 电镜观察时样品受到的影响： (1)真空的影响。含有挥发溶剂或易升华的试样必须冷冻后观 察。 (2)电子损伤的影响。试样在电镜中受到l0－3～1A/cm2的电子 束照射，电子束的能量部分转化为热，使试样内部结构或外形发生变化或污染。观察有机物或聚合物试样时，为防止电子束对试样的损伤和污染，应提高电压。 (3)电子束透射能力的影响。由于电子束透射能力较弱，一般 100kv加速电压时，试样厚度必须在20～200nm之间。

粉末样品制备 ?随着材料科学的发展，超细粉体及纳米材料发展很快，而粉末的颗粒尺寸大小、尺寸分布及形态对最终制成材料的性能有显著影响，因此，如何用透射电镜来观察超细粉末的尺寸和形态便成了电子显微分析的一的一项重要内容。 ?其关键工作是是粉末样品的制备，样品制备的关键是如何将超细粉的颗粒分散开来，使其均匀分散到支持膜上，各自独立而不团聚。

粉末样品 透射电镜试样制备

透射电镜试样制备 一、样品要求 1.粉末样品基本要求 (1)单颗粉末尺寸最好小于1μm; (2)无磁性; (3)以无机成分为主，否则会造成电镜严重的污染，高压跳掉，甚至击坏高压枪; 2.块状样品基本要求 (1)需要电解减薄或离子减薄，获得几十纳米的薄区才能观察; (2)如晶粒尺寸小于1μm，也可用破碎等机械方法制成粉末来观察; (3)无磁性; (4)块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由经验的老师指导或制备;样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析。所以块状样品制备之前，最好与TEM的老师进行沟通和请教，或交由老师制备。 二、送样品前的准备工作 1.目的要明确：(1)做什么内容(如确定纳米棒的生长方向，特定观察分析某个晶面的缺陷，相结构分析，主相与第二相的取向关系，界面晶格匹配等等);(2)希望能解决什么问题; 2.样品通过X-Ray粉末衍射(XRD)测试、并确定结构后，再决定是否做HRTEM;这样即可节省时间，又能在XRD的基础上获得更多的微观结构信息。 3.做HRTEM前，请带上XRD数据及其他实验结果，与HRTEM老师进行必要的沟通，以判断能否达到目的;同时HRTEM老师还会根据您的其他实验数据，向您提供好的建议，这样不但能满足您的要求，甚至使测试内容做得更深，提高论文的档次。 三、粉末样品的制备 1.选择高质量的微栅网(直径3mm)，这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步;(注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只;普通碳膜铜网免费提供使用。) 2.用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上(在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面)，轻轻平放在白色滤纸上; 3.取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上(如粉末是黑色，则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑，此时便适中。滴得太多，则粉末分散不开，不利于观察，同时粉末掉入电镜的几率大增，严重影响电镜的使用寿命;滴得太少，则对电镜观察不利，难以找到实验所要求粉末颗粒。建议由老师制备或在老师指导下制备。) 4.等15 min以上，以便乙醇尽量挥发完毕;否则将样品装上样品台插入电镜，将影响电镜的真空。 四、块状样品制备 1.电解减薄方法 用于金属和合金试样的制备。(1)块状样切成约0.3mm厚的均匀薄片;(2)用金刚砂纸机械

微生物透射电镜样品制备

一．取样 在平板上选取不同位置组织，用小刀切取1*2mm2的长方形样品。 Ps：取样时小心进行，切勿触碰样品表面，样品的培养基需全部刮除。 二．前固定 不同样品分别放入装有1mL2.5%戊二醛的1.5豪升的离心管中，常温固定5-6小时后于4℃冰箱中保存过夜。 Ps：戊二醛挥发性强，对人体有害。请于通风橱中进行。 三．冲洗 取出样品，立即放入装有1mL 0.1M PBS缓冲液的1.5豪升的离心管中，10分钟后换新PBS缓冲液，重复7-8次。 Ps：整个实验过程中，溶液加入量均不超过1mL。 四．后固定 取冲洗后的样品，立即放入装有按比例1 : 1（PBS 30uL: 锇酸30uL）配好的锇酸溶液的1.5豪升的离心管中，常温固定1-2小时。 Ps：锇酸挥发性强，对人体有害。请于通风橱中进行。 五．冲洗 取出样品，立即放入装有1mL 0.1M PBS缓冲液的1.5豪升的离心管中，10分钟后换新PBS缓冲液，重复7-8次。 Ps：锇酸废液放入制定回收瓶中，切勿乱倒。 六．梯度脱水 配好浓度分别为：30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%的乙醇，吸出1.5豪升的离心管中的PBS缓冲液，按浓度顺序加入梯度乙醇，每一级浓度乙醇脱水10min，最后100%乙醇重复2-3次，保证样品绝对无水。 Ps：操作过程中切勿伤及样品，各个梯度乙醇现配现用。 七．置换 吸除1.5豪升的离心管中的100%乙醇，加入100%丙酮，持续置换10min，重复3次。 Ps：丙酮以及上一步的无水乙醇都需要现开现用，以防浓度变化，影响结果。 八．浸透 吸除离心管中的丙酮，按照总体积80uL，Spurr树脂:丙酮（1:3）的比例，将混液加入样品管中。间隔8小时以上，加入总体积80uL，Spurr树脂:丙酮（1:1）比例的混液。间隔8小时以上，加入总体积80uL，Spurr树脂:丙酮（3:1）比例的混液。即终体积为240uL。 Ps：一个样品一个样品的在干燥环境中操作，以防止样品受潮，同时操作过程中切勿伤及样品，下同。 九．摆放样品并聚合 按照样品数量在聚合板上的样品槽中加入纯Spurr树脂，将浸透液中的样品小心取出，放在样品槽靠边位置（方便切片）。聚合板放在70℃烘箱中聚合。 十．制备切片 切片捞在100目0.3%Formvar膜覆盖的镍网上。 十一．染色 染色：用2%的醋酸铀25摄氏度染色10min，用重蒸水洗3次，每次20min 再用柠檬酸铅25摄氏度染色5min，用重蒸水洗3次，每次20min。 十二．电镜观察

【材料课堂】TEM透射电镜的样品制备方法

【材料课堂】TEM透射电镜的样品制备方法 材料科学与工程点击上方「材料科学与工程」快速关注材料类综合、全面、专业的微信平台 1TEM 样品台样品台的顶端2对样品的要求 1. 样品一般应为厚度小于100nm的固体。 2. 感兴趣的区域与其它区域有反差。 3. 样品在高真空中能保持稳定。 4. 不含有水分或其它易挥发物，含有水分或其他易挥发物的试样应先烘干除去。 5. 对磁性试样要预先去磁，以免观察时电子束受到磁场的影响。 TEM样品常放置在直径为3mm的200目样品网上，在样品网上常预先制作约20nm厚的支持膜。 3纳米粉末样品的制备方法 1. 纳米颗粒都小于铜网的小孔，因此要先制备对电子束透明的支持膜。 2. 将支持膜放在铜网上，再把粉末放在膜上，送入电镜分析。 3. 粉末或颗粒样品制备的关键取决于能否使其均匀分散到支持膜上。 4. 用超声波分散器将需要观察的粉末在分散介质（不与粉末发生作用）中分散成悬浮液。 5. 用滴管滴几滴在覆盖有支持膜的电镜铜网上，待其干燥(或用滤纸吸干)后, 即成为电镜观察用的粉末样品。 6. 微米粉末样品通过研磨转为纳米颗粒，如催化剂等。4块状样品的制备方法4.1超薄切片法

超薄切片方法多用于生物组织、高分子和无机粉体材料等。超薄切片过程图4.2离子轰击减薄法 离子轰击减薄法多用于矿物、陶瓷、半导体及多相合金等。 1. 将待观察的试样按预定取向切割成薄片,再经机械减薄抛光等过程预减薄至30-40μm的薄膜。 2. 把薄膜钻取或切取成尺寸为2.5-3mm的小片。 3. 装入离子轰击减薄装置进行离子轰击减薄和离子抛光。 原理： 在高真空中，两个相对的冷阴极离子枪,提供高能量的氩离子流,以一定角度对旋转的样品的两面进行轰击。 当轰击能量大于样品材料表层原子的结合能时,样品表层原子受到氩离子击发而溅射、经较长时间的连续轰击、溅射,最终样品中心部分穿孔。 穿孔后的样品在孔的边缘处极薄,对电子束是透明的,就成为薄膜样品。 4.3电解抛光减薄法 电解抛光减薄方法适用于金属与部分合金。4.4聚焦离子束法 适用于半导体器件的线路修复和精确切割。 聚焦离子束系统（FIB），利用源自液态金属镓的离子束来制备样品。 通过调整束流强度，FIB可以对样品的指定区域进行快速和

5s管理表格模板格大全(整理版)

整理 分项检核要点分值评价项目得 分 整改措施 1 通道上 东西 0 随意放置,影响通行或垃圾遍地。 虽能通行,但要搬移,推车不能过。 放置物品,超出通行道。 虽有东西放置或超越通路,但有警示。 无任何东西阻碍安全通行。 1 2 3 4 2 作业场所 产品材料 工模具 零件 0 一个月以上不用的东西杂乱放置。 角落里堆放不要的东西。 以不妨碍地放置，暂时不使用的东西。 已按照标准实施管理,但不彻底。 无任何不需要的东西放置。 1 2 3 4 3 柜、货架 内或上面 0 有垃圾及杂物堆放,且杂乱。 有损坏或不能使用的零件或工模具。 可以使用和不使用的东西区别管理。 没有无使用价值的东西存放。 按使用频率和用途分类标识管理。 1 2 3 4 4 桌子上下 或抽屉 仓库 0 不使用东西或资、材料杂乱放置。 放置着各种不使用的东西。 放置几乎半个月才使用一次的东西。 虽未达到规定标准,但均分类管理。 只放置每天使用及最低限度的东西。 1 2 3 4 5 仓库0 物品塞满杂乱,连行走都不畅通。 物品随便放置,不分类管理。 大致有分类定位,但无标识。 物品定位标识管理,但进出不方便。 任何人\任何时间都容易判断,且仓管员随时 都能报出物品存放位置。 1 2 3 4 整顿 分项检核要 点 配 分 评价项目得分整改措施 1 设备 仪器 0 锈或不能使用的，都杂乱放置。 能使用与不能使用的都放在一起。 能使用的与不能使用的，均注明标识放置。 按使用频率及精密度分类管理。 在任何时间、任何人都能正常使用，处于一目了 然状态。 1 2 3 4 2 工0 同上。

模具等1 同上。 同上。 制作图形标识定位，以目视管理明晰。 不但任何人都一目了然，且用毕维护保养归位。2 3 4 3 零部件 产品 材料等 0 不良品与良品放在同一区域。 不良品与良品虽分开放置，但无标识。 物品虽标识定位，但未考虑物品的定位安全。 产品柜、货架、桌面物品，放置定位标识。 以图形定位标识管理，使任何人都一目了然。 1 2 3 4 4 图纸0 作废图纸与有效图纸存放一处。 以文件夹、图纸柜区分管理，但无标识。 虽然存放标识清楚，但未采用保护措施。 外层采用不易污迹或破损保护措施。 任何时间，都保护良好的使用状态。 1 2 3 4 5 文件 图书 资料 0 零乱放置桌面或文件柜中，无标识区别。 虽有标识，但存放无定位，需要花时间寻找。 个人文件与公司文件虽定位化，但在共同场所保 管。 以电脑或文字处理机储存管理且检索方便。 以定位化日视管理，在任何时间、任何人都能马 上取之 使用（15秒内）。 1 2 3 4 清扫 分 项 检核要 点 配 分 评价项目得分整改措施1 通 道 0 纸屑、垃圾随处可见。 虽无明显垃圾，但有细碎垃圾、灰尘。 每天都安排人员清扫。 不但干净，而且无坑凹积尘。 有使其不肮脏的预防对策。 1 2 3 4 2 作 业 场 所 0 同上。 同上。 同上。 同上。 同上。 1 2 3 4 3 办公室 作业台 0 文件、电话、工模具、零件表面有灰尘。 文件架、工模具、零件等下面积有灰尘。 虽有灰尘，但每天都清扫一次以上。 每天清扫，连抽屉也很干净。 随时检查桌、台各方位都很干净。 1 2 3 4 4 玻璃窗 门框 0 任凭玻璃窗、门框破损状态。 玻璃污迹、窗框积有灰尘。 1

透射电镜样品制备

透射电镜试样制备 一、实验内容及目的 了解透射电镜对试样的要求，熟悉透射电镜试样的制备过程，制备一个合格的透射 电镜试样。 二、薄膜样品的制备 用于透射电镜下观察的试样厚度要求在50-200nm之间，试样的制备过程大致可以分为以下三个步骤： 第一步从实物或大块样品上切割厚度为0.3-0.5mm厚的薄片。电火花线切割法是目前用得最广泛的方法，它是用一根往返运动的金属丝作切割工具，以被切割 的样品作阳极、金属丝作阴极，两极间保持一个微小的距离，利用其间的火花放电 进行切割。电火花切割可切下厚度小于0.5mm的薄片，切割时损伤层比较浅，可以 通过后续的磨制或减薄过程去除。电火花切割只能切割导电样品，对于陶瓷等不导 电样品可用金刚石刃内圆切割机切片。 第二步样品薄片的预减薄。预减薄的方法有两种，即机械法和化学法。机械法是通过手工研磨来完成的，把切割好的薄片一面用粘接剂粘在样品座表面，然后 在水砂纸磨盘上进行研磨减薄。应注意把样品平放，不要用力太大，并使它充分冷 却。减薄到一定程度时，用溶剂把粘接剂溶化，使样品从样品座上脱落下来，然后 用同样方法研磨另一个面直至样品被减薄至规定的厚度。（如果材料较硬，可减薄至 70μm左右；若材料较软，则厚度不能小于100μm。另一种预先减薄的方法是化学 薄化法。这种方法是把切割好的金属薄片放入配制好的化学试剂中，使它表面受腐 蚀而急需减薄。因为合金中各组成相的腐蚀倾向是不同的，所以在进行化学减薄时， 应注意减薄液的选择。化学减薄的速度很快，因此操作时必须动作迅速。化学减薄 的最大优点是表面没有机械硬化层，减薄后样品的厚度可以控制在20-50μm 。经 化学减薄的样品最终抛光穿孔后，可供观察的薄区面积较大。但是化学减薄时必须 事先把薄片表面充分清洗，否则将得不到满意的结果。 第三步最终减薄目前效率最高和操作最简便的方法是双喷电解抛光法，图 为一台双喷式电解抛光装置的示意图。将预先减薄的样品剪成直径为3mm的圆片, 装入样品夹持器中。进行减薄时，针对样品两个表面的中心部位各有一个电解液喷 嘴。从喷嘴中喷出的液柱和阴极相接，样品和阳极相接。电解液是通过一个耐酸泵 来进行循环的。在两个喷嘴的轴线上还装有一对光导纤维，其中一个光导纤维和光 源相接，另一个和光敏元件相接。如果样品经抛光后中心出现小孔，光敏元件输出 的电信号就可以将抛光线路的电源切断。用这样的方法制成的薄膜样品，中心孔附 近有一个相当大的薄区，可以被电子束穿透，直径3mm圆片上的周边好似一个厚度 较大的刚性支架，因为透射电镜样品座的直径也是3mm，因此，制备好的样品可直 接装入电镜进行观察分析。 对于不导电的陶瓷材料和脆性材料，最终减薄可采用离子减薄法。该法是用离子束在样品的两侧以一定的倾角（5-30）轰击样品，使之减薄。由于陶瓷样品硬度 高，耐腐蚀，因此，离子减薄的时间长。对于要求较高的金属薄膜样品，在双喷后 再进行一次离子减薄，效果会更好。 三．实验报告要求 1.简述双喷法和离子减薄法制备透射电镜试样的工艺过程。 2.影响双喷法的因素有哪些？如何影响？

时间管理的表格模板

（测试）你了解自己的生活节奏吗？ 通过本测试，你将了解自己的生活节奏，更有效率地工作。 1、只考虑你自己“感觉最好”的节奏，如果每天的作息时间完全由你自己决定，你愿意什么时候起床？ A、5：00——6：30 B、6：30——7：45 C、7：45——9：45 D、9：45——11：00 E、11：00——12：00 2、只考虑你自己“感觉最好”的节奏，如果每天的作息时间完全由你自己决定，你愿意什么时候睡觉？ A、20：00——21：00 B、21：00——22：15 C、22：15——0：30 D、0：30——1：45 E、1：45——3：00 3、假定正常情况下，你能容易地发觉醒来时是在早上吗？ A、一点不容易 B、不太容易 C、比较容易 D、非常容易 4、早上醒来后的头半个小时里，你觉得脑子灵活吗？ A、一点不灵活 B、不太灵活

C、比较灵活 D、非常灵活 5、早上醒来后的头半个小时里，你觉得疲倦吗？ A、非常疲倦 B、比较疲倦 C、比较振作 D、非常振作 6、你决定从事一些体育锻炼，一位朋友建议你每周做两次，每次一小时，最好是在早上7：00——8：00的时间做。对朋友的建议你根本没往脑子里去，还是只考虑你自己“感觉最好”的节奏？你认为你会怎么做呢？ A、会以一种好的方式去做 B、会以一种合理的方式去做 C、会发现要做到有困难 D、会发现要做到非常困难 7、你晚上什么时候才感到疲倦，想睡觉？ A、20：00——21：00 B、21：00——22：15 C、22：15——0：30 D、0：30——1：45 E、1：45——3：00 8、你希望能在你竞技状态的高峰时间参加测验，你知道这次持续两小时的测验将是精疲力尽的，假如你可以自由地安排每天的日程，并且只考虑你自己“感觉最好”的节奏，你愿意选择哪一段测验时间？ A、8：00——10：00 B、11：00——13：00