DNS法淀粉含量测定

淀粉含量测定

侯曼玲，食品分析，化学工业出版社，北京，2004 1 实验原理

样品经除去脂肪和可溶性糖类后，其中的淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。

还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖、麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

2.材料与方法

2.1实验材料

谷物种子

2.2主要仪器

本实验用到的实验仪器有：

具塞玻璃刻度比色管：25mL×19；烧杯：100mL×4；三角瓶：100mL×1；容量瓶：100mL×3，50mL×3；刻度吸管：1mL×4；2mL×3；10mL×1；沸水浴；冰浴；扭力天平；721型可见分光光度计

2.3实验试剂

乙醚，乙醇溶液(φ=85%)，HCl溶液(1+1)，NaOH溶液：配制的质量浓度分别为10%和40%，Pb(Ac)2溶液(200g/L)，Na2SO4溶液(100g/L)

甲基红指示剂(2g/L)

溶解0.2g甲基红于60mL乙醇中，加水稀释至100mL

1mg/mL葡萄糖标准液

准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。

3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂

将6.3g DNS和262mL 2M NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

2.4实验步骤

2.4.1 制作葡萄糖标准曲线

取7支25mL具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。

表1 葡萄糖标准曲线制作

管号1mg/mL葡萄糖标准液

（mL）

蒸馏水

（mL）

DNS

（mL）

葡萄糖含量

（mg）

光密度值

（OD540nm）

0 0 2 1.5 0

1 0.

2 1.8 1.5 0.2

2 0.4 1.6 1.5 0.4

3 0.6 1.

4 1.

5 0.6

4 0.8 1.2 1.

5 0.8

5 1.0 1.0 1.5 1.0

6 1.2 0.8 1.5 1.2

7 1.4 0.6 1.5 1.4

8 1.6 0.4 1.5 1.6

将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min，取出，冰浴冷却至室温，用蒸馏水定容至25mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。调波长540nm，用0号管调零点，测出1~6号管的光密度值。以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，做出标准曲线。

2.4.2 样品处理

准确称取2-5g磨碎、过40目筛的样品，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30mL 乙醚分三次洗去样品中的脂肪，弃去乙醚。再用乙醇溶液约150mL分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类。滤干乙醇后用100mL水将残渣转入250mL锥形瓶中，加入盐酸(1+1)30mL，连接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。

回流完毕后，立即置流动水中冷却至室温，加入2滴甲基红指示剂，将水解液调至近中性(先用40%NaOH溶液调至黄色，再用盐酸(1+1)校正至水解液刚变红色为宜；若水解液颜色深，可用精密pH试纸测试，调至pH约为7)。加中性Pb(Ac)2溶液20mL，摇匀。放置10min，使蛋白质等干扰物质沉淀完全。再加等量的Na2SO4溶液，以除去多余的铅盐。摇匀后将全部溶液及残渣转入500mL 容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中。用水定容至刻度，混匀、过滤(初滤液弃去)。

2.4.3样品中含糖量的测定

取7支大试管，分别按下表加入各种试剂：

将各管混匀后，按制作标准曲线时同样的操作测定各管的光密度，在标准曲线上查出相应的还原糖含量，按下述公式推算出谷物种子内还原糖与总糖的百分含量。

100

%??=

样品重量样品稀释倍数

还原糖毫克数还原糖 100

%??=

样品重量样品稀释倍数

水解后还原糖毫克数总糖量

淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法） 一、酶水解法 1. 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还 原糖测定，并折算成淀粉。 2. 适用范围 GB5009.9-85，适用于所有含淀粉的食物。 3. 仪器 （1）回流冷凝器 （2）水浴锅 4. 试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）乙醚 （3）碘溶液：称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中，加入1.3 g碘，溶解后加水稀释至100 ml。 （4）85 % 乙醇。 （5）其余试剂同《蔗糖测定方法》 5. 操作方法 5.1样品处理 称取2?5 g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少， 此步骤可免），再用约100 ml85聽醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250 ml 烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，放冷至60 'C以下，力口20ml淀粉酶溶液，再55?60 'C保温1h,并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀， 过滤。（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml滤液，置于250ml 锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L 盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示剂，用 5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100 ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。） 5.2测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试 剂空白试验。 6. 计算 x 100

火腿肠(高温蒸煮肠)中淀粉含量的测定酸水解法

实验七火腿肠（高温蒸煮肠）中淀粉含量的测定—酸水解法基本知识点 1、掌握酸水解法测定淀粉的原理、基本过程和操作关键。 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 3、淀粉水解、可溶性糖去除的方法和关键环节。 重点： 1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术 2、酸水解法测定淀粉的原理及注意事项。 难点： 酸水解法测定淀粉的原理和控制要点 复习与提问： 1、检查实验准备情况， （1）实验内容； （2）实验仪器与试剂有哪些？ （3）酸水解法测定淀粉的程序。 2、酸水解法测定淀粉的原理和控制要点 【引入新课】 淀粉在食品工业中用途广泛常用于食品原料或辅料。淀粉是以葡萄糖为基本单位通过糖苷键而构成的多糖类化合物。淀粉是白色、无气味、无味道的粉末状物质，在热水里淀粉颗粒会膨胀破裂，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊，这一过程称为糊化作用。糊化是淀粉食品加热烹制时的基本变化，也就是常说的食物由生变熟。 淀粉不溶于冷水，也不溶于乙醇、乙醚或石油醚等有机溶剂，故可用这些溶剂淋洗、浸泡除去淀粉的水溶性糖或脂肪等杂质。 淀粉不显还原性，但它在酶（或酸）存在和加热条件下可以逐步水解，生成一系列比淀粉分子小的化合物，最后生成还原性单糖——葡萄糖。 淀粉酶的专一性高，但只能将淀粉逐步水解至麦芽糖阶段； 盐酸溶液对淀粉的专一性较差，但它能将淀粉水解至最终产物葡萄糖。故在测定淀粉时，使酶——稀盐酸分解法。 GB 20712-2006《火腿肠（Ham sausage）》规定： 火腿肠（高温蒸煮肠）Ham sausage(Autoclaved ham sauasge)以鲜或冻畜、禽、鱼肉为主要原料，经腌制、搅拌、斩拌（或乳化）、罐入塑料肠衣，经高温杀菌，制成的肉类灌肠制品。 感官要求应符合表1的规定。 表1.感官要求 项目指标 外观肠衣均匀饱满，无损伤，表面干净，良好，扎结牢固，肠衣的扎结部位无内容物渗出。 色泽具有产品固有的色泽。 质地组织紧密，有弹性，切片良好，无软骨及其它杂物，无气孔。 风味咸淡适中，鲜香可口，具固有风味，无异味。 理化要求应符合表2的规定。 表2.火腿肠理化要求 项目 指标 特级优级普通级无淀粉产品

淀粉含量检测方法

谷物中淀粉含量的测定 本方法参考GB/T5009.9-2008 ?食品中淀粉的测定》的第二法酸水解法。 适用范围：本方法适用于谷物原料中淀粉含量的测定。 原理：试样经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。 方法一 1试剂和材料 1.1洒石酸铜甲液：34.639g CuSQ溶于水，加入0.5mL浓H2SO4,稀释到500mL; 洒石酸铜乙液：173g洒石酸钾钠，加50g NaOH,稀释到500mL; 1.2 氢氧化钠溶液：c(NaOH)=1mol/L ; 1.3硫酸铁溶液：50g/L (称取50g硫酸铁，加入200mL水后，慢慢加入100mL 硫酸，冷后加入稀释至1000mL); 1.4高铤酸钾标准滴定溶液：c(1/5KMnO4)=0.1mol/L; 1.5乙醇溶液：85% v/v; 1.6 HCL: 1+1 和1+3; 1.7 NaOH 溶液：40%; 1.8乙酸铅溶液：20%; 1.9硫酸钠：10%。 2仪器设备 2.1粉碎磨：粉碎样品，使其完全通过孔径0.45mm (40目)筛。

2.3回流冷凝装置：能与250mL锥形瓶瓶口相匹配。 3操作步骤 称取样品（粉碎过40目筛）2.0g?5.0g,准确至0.0002g,置于放有慢速滤纸 的漏斗中，用50mL石油酰分5次洗去样品中脂肪，再用150mL85%乙醇溶液分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类物质，滤十乙醇溶液，将滤纸连同残渣一并转移至250mL锥形瓶中。 加100mL水、30mL（1+1）HCl，在沸水浴上回流2h,回流完毕后，立即在流水中冷却，待样品水解液冷却完全后，加2滴甲基红指示剂，先用NaOH溶 液（400g/L）调至黄色，再用（1+1 ）的HCl调至水解液刚变红色。若水解液颜色较深，可用pH试纸测试，使试样水解液的pH值约为乙然后加20mL的乙酸铅溶液（200g/L）,摇匀，放置10min,再加20mL的硫酸钠溶液（100g/L）,以除去过多的铅。摇匀后，将全部溶液及滤渣转入500mL容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，定容，摇匀，过滤，弃去初滤液20mL,滤液供 测定用。 吸取25.00mL滤液于三角瓶中，加25mL洒石酸铜甲液，再加25mL洒石酸铜乙液，在电炉上加热（在3min内煮沸）并煮沸2min,取下过滤，并用60C 水洗涤烧杯和沉淀至洗液不呈碱性为止，将漏斗连同滤纸一同放至前面使用过的烧杯上，向滤纸内加入硫酸铁（50g/L）40mL,使氧化业铜完全溶解，摇匀溶液，再加25mL 水，用玻璃棒搅拌到看不见Cu2O,以0.1mol/l高铤酸钾标准滴定溶液滴定至呈微红色，10s不褪色为终点。同样条件做空白。 方法二 1试剂 1.1碱性洒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuS04 ? 5H2O）及0.050g业甲蓝加适量水溶解，再加水稀释至1000mL。 1.2碱性洒石酸铜乙液：称取50g洒石酸钾钠与75g氢氧化钠，加适量水溶解，再

食品中淀粉的测定

食品中淀粉的测定 第一法酶水解法 一、目的与要求： 1、明确与掌握各类食品中淀粉含量的原理及测定方法。 2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。 二、原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 三，试剂： 1、0.5％淀粉酶溶液：称取淀粉酶0.5克，加100毫升水溶解，数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。 2、碘溶液：称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中，加入1.3克碘，溶解后加水稀释至100毫升。 3、乙醚 4、85％乙醇 5、6N盐酸：量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。 6、甲基红指示液：0.1％乙醇溶液。 7、20％氢氧化钠溶液。

8、碱性酒石酸铜甲液：称取34.639克硫酸铜(CuS04·5H2O)。加适量水溶解，加0.5毫升硫酸，再加水稀释至500毫升，用精制石棉过滤。 9、碱性酒石酸铜乙液：称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500毫升，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。 11、硫酸铁溶液：称取50克硫酸铁，加入200毫升水溶解后，人100毫升硫酸，冷后加水稀释至1000毫升。 四、操作方法： 1、样品处理： 称取2-5克样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用约100毫升85％乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250毫升烧杯内，并用50毫升水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15分钟，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60℃保温1小时，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。取50毫升滤液，置于250毫升锥形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小时，冷后加2滴甲基红指示液，用20％氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100毫升容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。

大米淀粉含量的测定

不同品牌的大米中淀粉的含量测定研究 广东石油化工学院化学与生命科学学院 生物技术 摘要 淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线。由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的，所以，也与棕红色物质的深浅成正比关系。 关键词水解还原糖吸光度 1 前言 最近网上有人提出疑问：“我们吃的大米淀粉含量究竟有多少？哪种大米的淀粉含量最高？”很多人都不太能准确地回答。对于我们南方人来说，大米是我们的主要食物、能量来源，基于网上有人提出“大米淀粉含量究竟有多少”的疑问，我们决定对某超市出售的某几种大米的淀粉含量进行实验研究。通过实验测出不同品种大米的淀粉含量，比较不同品种大米的淀粉含量的高低。 2 实验目的 1、掌握测定稀酸水解淀粉的原理和方法，利用酸水解法测定淀粉的原理，测定不同品牌的大米中淀粉的含量。 3 实验原理 淀粉是植物体最主要的贮藏多糖，也是人和动物的重要食物来源和发酵工业的基本原料。主要存在于大米、种子和块茎中。淀粉经过稀硫酸水解后生成葡萄糖、麦芽糖等小分子物质而被机体利用。酸水解淀粉产生葡萄糖、麦芽糖等还原糖能使3，5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的的3-氨基-5-硝基水杨酸，后者在540nm处有最大吸收峰。可用比色法进行测定。反应中还原糖被氧化成相应的糖酸。反应如下：

淀粉的含量与产生的还原糖的量成正比。用标准的淀粉溶液制作标准曲线，用比色法测定稀硫酸作用于淀粉后生成的还原糖的量，以单位质量样品在过量酸作用下完全水解生成的还原糖的量从而测定淀粉的含量。 4 实验设备 80℃水浴锅 高速组织捣碎机 分光光度计 20 mL具塞比色管×13 容量瓶（100 mL×7、1000 mL×2） 量筒（20 mL、50 mL） 试管架 移液管（2mL×6、1mL×6） 电子天平 胶头滴管 烧杯 玻璃棒 5 实验材料及试剂 5.1 样品来源 本研究使用的样品包括5种不同品牌的大米。 将这5种不同品牌的大米用蒸馏水进行冲洗以除去大米中的水溶性杂质后待大米晾干后进行实验。 5.2 试剂 5.2.1 2mol/L NaOH 溶液

食品中淀粉含量的测定

GB 5009.9-85 食品中淀粉的测定方法 本标准适用于各类食品中淀粉含量的测定。 第一法酶水解法 1 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖 水解成单糖,最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 2 试剂 2.1 0.5%淀粉酶溶液: 称取淀粉酶0.5g，加100mL水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷, 防止长霉，贮于冰箱中。 2.2 碘溶液:称取 3.6g碘化钾溶于20mL水中,加入1.3g碘,溶解后加水稀释至100mL。 2.3 乙醚。 2.4 85%乙醇。 其余试剂同GB 5009.8—85《食品中蔗糖的测定方法》第2章。 3 操作方法 3.1 样品处理 称取2～5g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50mL乙醚分5次洗除脂肪，再用 约100mL 85％乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250mL烧杯内，并用50mL 水洗滤纸及 漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化,放冷至60℃以下，加 20mL淀粉酶溶液,在55～60℃保温1h，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不显现 蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20mL淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。 加热至沸,冷后移入250mL容量瓶中，并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50mL滤 液,置于250mL锥形瓶中,加5mL6N盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲 基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100mL容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液 并入100mL容量瓶中,加水至刻度，混匀备用。 3.2 测定 按GB 5009.7-85《食品中还原糖的测定方法》4.2操作。同时量取50mL水及与样品 处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。 4 计算

大米中淀粉含量的测定要点

实验七大米中淀粉含量的测定 一、实验原理 本法是根据GB/T5009.9-2003酸水解法和改良快速直接滴定法进行测定的。 试样经除去脂肪及可溶性糖后，其中的淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原性单糖的方法测定，并折算成淀粉。 二、实验仪器与试剂 水浴锅粉碎机40目筛附250mL锥形瓶的回流装置台称电炉锥形瓶烧杯量筒容量瓶移液管棕色酸式滴定管手套 乙醚乙醇(85%) 盐酸(1+1) NaOH溶液(400g/L) NaOH溶液(100g/L) 乙酸铅溶液（200g/L）硫酸钠溶液(100g/L) 甲基红溶液(2g/L,用乙醇配) 0.01mol/L KMnO4标准溶液 裴林氏A液：溶解CuSO4·5H2O 35g 及亚甲基蓝0.05g，加水溶解，定容至1000mL，摇匀。 裴林氏B液：称取117g酒石酸钾钠，126.4g 氢氧化钠，9.4g亚铁氰化钾溶解后，定容至1000mL,摇匀。 0 .1% 标准葡萄糖溶液：取分析纯葡萄糖，在150℃下烘干至恒重，准确称取1.000g无水葡萄糖，加水溶解后定容至1000mL。 三、实验操作步骤 1、样品处理 将大米磨碎并过40目筛，称取3.00g米粉置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30mL乙醚分三次洗去试样中脂肪，弃去乙醚。用150mL85%乙醇分数次洗涤残渣，除可溶性糖。滤干乙醇溶液，以100mL水洗涤漏斗中残渣并转移至250mL 锥形瓶中，加入30mL(1+1)盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h。回流完毕后，立即置流水中冷却。待试样水解液冷却后，加2滴甲基红溶液，先以NaOH 溶液(400g/L)调至黄色，再以盐酸（1+1）校正至水解液刚变为红色为宜。然后加20mL乙酸铅溶液（200g/L），摇匀，放置10min，再20mL硫酸钠溶液(100g/L)，以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液和残渣转入500mL容量瓶中，加入水稀释至刻度。过滤，弃去初滤液20mL，滤液供测定用。

马铃薯中淀粉含量的测定-精选.

ANYANG INSTITUTE OF TECHNOLOGY 马铃薯中淀粉含量的测定Determination of starch content in potato 系（院）名称：生物与食品工程学院 专业班级：07食品质量与安全1班 学生姓名：马天顺马帅 指导教师姓名：田萍 指导教师职称：副教授 2010年6月

录 …………………………………………………………………… 英文摘要、关键词…………………………………………………………………… 引言……………………………………………………………………………………… 第1章 ×××××××××××××………………………………………… 1.1 ×××××××××××××……………………………………………… 1.1.1 ××××××××××××× …………………………………………… 1.1.2 ××××××××××××× …………………………………………… 1.2 ××××××××××××× ……………………………………………… 1.3 ××××××××××××× ……………………………………………… 第2章 ××××××××××××××× ………………………………… 2.1 ×××××××××××××……………………………………………… 2.1.1×××××××××××××……………………………………………… 2.1.2×××××××××××××……………………………………………… 2.2 ××××××××××××× ……………………………………………… 2.3 ××××××××××××× ……………………………………………… 第3章××××××××××××……………………………………………… 3.1 ××××××××××××× ……………………………………………… 3.2 ××××××××××××× ……………………………………………… 第4章××××××××××××× ………………………………………… 结论 …………………………………………………………………………………… 致谢 …………………………………………………………………………………… 参考文献 ………………………………………………………………………………

面粉中淀粉含量测定

一、实验目的： 1、利用酸水解法测定出食品中淀粉含量； 2、利用凯氏定氮法测定食品中蛋白质的含量。 二、实验原理： 1、淀粉的测定原理：利用酸水解法测定食品中的淀粉，首先将米粉去脂肪及可溶性糖，接着加盐酸对米粉进行酸水解，利用滴定的方法检测水解后样品中还原糖，将还原糖换算成淀粉的含量。 2、蛋白质测定的原理：食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。 三、实验仪器及试剂： 1、仪器：天平、定氮蒸馏装置、烧杯、500mL与100mL容量瓶、滤纸、烧瓶、水浴锅、锥形瓶、玻璃珠、滴定管。 2、试剂：硫酸铜、硫酸钾、硫酸（1.84 g/L）、甲基红乙醇溶液（1 g/L）、硼酸溶液（20 g/L）、混合指示液(2份甲基红乙醇溶液(1g/L)+1份亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L))、氢氧化钠溶液（400 g/L）、硫酸或盐酸标准滴定溶液 （0.0500mol/L）、乙醚、85%乙醇、6mol/LHCl、40%NaOH、20%乙酸铅、10%的NaSO 、碱性酒石酸铜液（甲、乙液）。 4 四、实验步骤： 1、淀粉的测定实验步骤： （1）样品的处理：称取2.0~5.0克的面粉样品，将样品置于带有滤纸的漏斗加入30ml乙醚以除去面粉中脂肪，再用150ml的85%乙醇分3次洗涤残渣以除去可溶性糖，滤干，接着用100ml水洗涤残渣后将残渣移至烧瓶，加入30ml的 6mol/L的HCl至烧瓶中，用沸水浴冷凝回流40min，接着用流水冷却后用碘液鉴定是否充分水解，直至水解充分，冷却后加入甲基红及40%的NaOH调至黄色，用6mol/L的HCl校正至刚好变红，加入20ml20%的乙酸铅，摇匀放置10min，接

实验四食品中淀粉的测定方法

实验四食品中淀粉的测定方法 Method for determination of starch in foods (一)目的 掌握酶水解法测定各类食品中淀粉含量，了解酸水解法。 (二)原理（酶水解法） 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 (三)仪器与试剂 1. 0.5%淀粉酶溶液：称取淀粉酶0.5g，加100ml水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。 2. 碘溶液：称取 3.6g碘化钾溶于20ml水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀释至100ml。 3. 乙醚。 4. 85%乙醇。 其余试剂同GB5009.8—85《食品中蔗糖的测定方法》。 (四)操作步骤 1.样品处理 称取2～5g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50ml乙醚分5次洗除脂肪，再用约100ml85%乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20m1淀粉酶溶液，在55～60℃保温1h，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。取50ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5ml6N盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。2.测定 按GB5009.7—85《食品中还原糖的测定方法》。同时量取50ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。

植物组织中淀粉含量的测定

植物组织中淀粉含量的测定 2007-01-12 08:55 Ⅰ蒽酮硫酸法 一、原理 淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖，然后在浓硫酸的作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物，利用蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应，即可进行比色测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 任何植物材料。 （二）试剂 浓硫酸（比重 1.84 ）。 9.2mol/L HClO 4 。 2%蒽酮试剂，同实验 24 。 （三）仪器设备 电子天平，容量瓶： 100 mL 4 个、 50 mL 2 个，漏斗，小试管若干支，电炉，刻度吸管 0.5mL 1 支、 2.0 mL 3 支、 5 mL 4 支，分光光度计，记号笔。 三、实验步骤 1. 标准曲线制作 取小试管11支从0～10编号，按表24-3加入溶液和蒸馏水。 以下步骤按苯酚法或蒽酮法均可，见方法一或方法二，绘制相应的标准曲线。 表24-3 各试管加入标准液和蒸馏水量 管号 1～2 3～4 5～6

7～8 9～10 淀粉标准液(ml) 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 蒸馏水（ml） 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 淀粉含量（mg） 40 80 120 160 200

2. 样品提取称取 50 ～ 100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干样品，置于 15 mL 刻度试管中，加入 6 ～ 7 mL 80 ％乙醇，在 80 ℃水浴中提取 30 min ，取出离心 （ 3000 rpm ） 5 min ，收集上清液。重复提取两次（各 10 min ）同样离心，收集三次上清液合并于烧杯，置于 85 ℃恒温水浴，使乙醇蒸发至 2 ～ 3 mL ，转移 至 50 mL 容量瓶，以蒸馏水定容，供可溶性糖的测定。 向沉淀中加蒸馏水 3 mL ，搅拌均匀，放入沸水浴中糊化 15 min 。冷却后，加入 2 mL 冷的 9.2 mol/L 高氯酸，不时搅拌，提取 15 min 后加蒸馏水至 10 mL ，混匀，离心 10 min ，上清液倾入 50 mL 容量瓶。再向沉淀中加入 2 mL 4.6 mol/L 高氯酸，搅拌提取 15 min 后加水至 10 mL ，混匀后离心 10 min ，收集上清于容量瓶。然后用水洗沉淀 1 ～ 2 次，离心，合并离心液于 50 mL 容量瓶用蒸馏水定容供测淀粉用。 3. 测定取待测样品提取液 1.0 mL 于试管中，再加蒽酮试剂 5 mL ，快速摇匀，然后在沸水浴中煮 10 min ，取出冷却，在 620 nm 波长下，用空白调零测定光密度，从标准曲线查出淀粉含量（ mg ）。 四、结果计算：含量（%）=100*C*VT/V1*1000*W 式中： C ——从标准曲线查得淀粉量， mg 。 V T ——样品提取液总体积 , mL 。 V 1 ——显色时取样品液量， mL 。 W ——样品重， g 。 0.9 ——由葡萄糖换算为淀粉的系数。 Ⅱ碘 - 淀粉比色法 一、原理 对于淀粉含量较少的植株样品，也可采用碘–淀粉比色法。淀粉在加热情况下能溶于硝酸钙溶液中，当碘化钾和硝酸钙共存时，碘能以碘–淀粉蓝色化合物沉淀全部淀粉。将此沉淀溶于碱液，并在酸性条件下与碘作用形成蓝色溶液进行比色。二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 任何植物材料。 （二）试剂 1 ． 80 ％硝酸钙溶液。 2 ． 0.5 ％碘液：称 5.00 g 结晶碘和 10.00 g 碘化钾，放入研钵混合干研，然后 加 10 mL 蒸馏水研至全部碘溶解，将溶液全部转入 1000 mL 容量瓶定容后，贮于磨口试剂瓶。

3 ． 5 ％含碘硝酸钙溶液：取 10 mL 80 ％的硝酸钙溶液，加入 160 mL 水再加 入 3 mL 0.5 ％的碘液混匀，现用现配。 4 ．标准淀粉溶液：称取纯淀粉 50 mg 于研钵中，加 3 mL 80 ％硝酸钙溶液，研细并转移到 100 mL 的三角瓶中，用 1 5 mL 80 ％的硝酸钙溶液冲洗研钵，无损地收

实验六 淀粉含量测定

实验六（红薯/马玲薯/黄地瓜等淀粉块茎类植物）中淀粉含量测定 （酸水解法） 综合设计（4学时） 一、实验原理 1、淀粉提取，也称为浆渣分离或分离，是淀粉加工中的关键环节，直接影响到淀粉提取率和淀粉质量。粉碎后的物料是细小的纤维，体积大于淀粉颗粒，膨胀系数也大于淀粉颗粒，比重又轻于淀粉颗粒, 将粉碎后的物料，以水为介质，使淀粉和纤维分离开来。 2、淀粉是食品中主要的组成部分，也是植物种子中重要的贮藏性多糖。淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线。由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的，所以，也与棕红色物质的深浅成正比关系。 二、材料、仪器与试剂 （一）材料：五指山红薯。 （二）仪器：分光光度计722、小台秤、分析天平、烧杯（100mL）、研钵、容量瓶（100mL）、洗瓶、漏斗、滤纸、具塞刻度试管（15mL）、恒温水浴、移液管（1mL, 2mL）。 （三）试剂 1 2mol/L NaOH 溶液 准确称取4g NaOH固体，溶于15 mL蒸馏水中，并倒入50ml容量瓶中，用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。 2 3，5-二硝基水杨酸试剂 准确称取3，5-二硝基水杨酸1g，溶于2mol/L NaOH 溶液20mL，加入50mL蒸馏水，再加入30g酒石酸钾钠，待溶解后用蒸馏水定容至100mL。盖紧瓶塞，勿让CO2进入。若溶液浑浊，可过滤后使用。 3 0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH5.6） A液（0.1mol/L柠檬酸）：称取C6H8O7?H2O 21.01g，用蒸馏水溶解并定容至1000mL。 B液（0.1mol/L柠檬酸钠）：称取Na3C6H5O7?2H2O 29.41g，用蒸馏水溶解并定容 至1000mL A液110 mL与B液290 mL 混匀，即为0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH5.6）。 4 1mg/mL 淀粉溶液 称取0.1g淀粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH5.6）100 mL中。 5 20%硫酸 用50mL的量筒量取50mL的水，倒入100mL烧杯中；再用20mL的量筒量取12.6mL98%的浓硫酸，沿内壁缓缓倒入烧杯内的水中，边倒边用玻璃棒搅拌。等冷至室温后，倒入100ml容量瓶中，用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

淀粉含量的测定

淀粉含量的测定 一、 实验目的 1、 掌握淀粉含量测定的方法及其原理； 2、 熟悉基本的实验操作及训练动手能力。 二、 实验原理 经预先除去可溶性糖的淀粉质样品(米粉)，用酸水解生成葡萄糖，然后用还原糖测定方法测定其含量，再折算为淀粉含量。 三、 实验器材 1、 试剂：碱性酒石酸铜甲溶液、碱性酒石酸铜乙溶液、0.1%葡萄糖标准溶液、0.2%甲基红 乙醇指示剂、80%乙醇溶液、6mol/L 盐酸溶液、20%氢氧化钠溶液。 2、 仪器：电子天平、漏斗、滤纸、250mL 磨口三角瓶、150mL 锥形瓶(非磨口)、冷凝管、 水浴锅、100mL 容量瓶、250ml 容量瓶、移液管、滴定管。 四、 实验步骤 1. 样品处理 称取2g 米粉(市售)，用80%乙醇100mL 分数次洗涤过滤，去除可溶性糖，再用100mL 蒸馏水将残渣移入250mL 磨口三角瓶中。 2. 水解 吸取30mL 6mol/L 盐酸溶液于上述250mL 磨口三角瓶中，瓶口装回流冷凝管，置于沸水浴中水解2h 。水解完毕，取出三角烧瓶用冷水冷却。在样品中加入2滴甲基红指示剂，先用20%氢氧化钠溶液调至黄色。再用6mol/L 盐酸溶液调至刚好转红，然后用10%氢氧化钠溶液在调至红色刚好退去，使样品pH 值在7左右。将样品移入250mL 容量瓶中稀释定容，过滤，收集滤液，将滤液稀释10倍待用。 3. 碱性酒石酸铜溶液的标定 （Vs=11.3ml ） 移取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5mL ，置于150mL 锥形瓶内，加水10mL ，加玻璃珠数粒，从滴定管内滴加葡萄糖标准液9mL ，并在2min 内加热至沸腾，并保持30秒钟，趁热以1滴/2秒的速度低加葡萄糖标准溶液，直到溶液的蓝色刚好退去为止，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。重复操作三份，取平均值。计算10mL 碱性酒石酸铜甲乙混合液相当于葡萄糖的质量。 4. 样液预测定： 吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0mL 于150mL 锥形瓶中，加水10mL ，加玻璃珠数粒，在2min 内加热至沸腾，趁热从滴定管中滴加样品溶液，整个过程保持沸腾状态，待溶液颜色转浅后，以1滴/秒的速度滴定，直至蓝色刚好退去为止，记录样品消耗体积V ’。 5. 样液测定 吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0mL 于150mL 锥形瓶中，加水10mL ，加玻璃珠数粒，从滴定管中加比预测体积少1mL 的样品溶液，并在2min 内加热至沸腾，趁沸连续以1滴/2秒的速度滴定，直至蓝色刚好退去为止，记录样品消耗体积V 。 6. 计算 %10011000250 9.0????=V m c V S 淀粉含量

可溶性淀粉测定方法

可溶性糖和可溶性淀粉： Soluble sugar was determined by the anthrone method (Li, 2000) using sucrose as the standard. Half a gram of fresh samples was placed in a 25mL cuvette added with 10 mL distilled water, allowed to stand at 100℃ for 1 h, and filtered into 25 mL volumetric flasks. Reaction mixture of 7.5 mL contained 0.5 mL extracts, 0.5 mL mixed reagent (1 g anthrone+50 mL ethyl acetate), 5mL H2SO4 (98%), 1.5 mL distilled water. The mixture was heated at 100℃ for 1 min and absorbance read at 630nm. Soluble starch was determined by the anthrone method (Li, 2000) with sucrose as the standard. The remainder of measured soluble sugar was transferred to a 25 mL cuvette containing 10 mL distilled water and 1.0 mL HClO4 (9.2 mol L-1). The cuvette was placed in a boiling water bath for 30 min, cooled to 30 ℃, and filtered into 25 mL volumetric flasks. Reaction mixture of 7.5 mL contained 0.5 mL extracts, 0.5 mL mixed reagent (1 g anthrone+50 mL ethyl acetate), 5mL H2SO4 (98%), 1.5 mL distilled water. The mixture was heated at 100℃ for 1 min and absorbance read at 630nm. Total non-structural carbohydrates (NSC) were the sum of soluble sugar and soluble starch. Extraction and analysis of carbohydrate Carbohydrates were analyzed essentially as described by Pharr et al. (1985) and Modore et al. (1988). Briefly, 0.5 g (FW) of cucumber seedling leaves

淀粉测定方法

淀粉的测定方法（1） 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法） 一、酶水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 2.适用范围 ，适用于所有含淀粉的食物。 3.仪器 （1）回流冷凝器 （2）水浴锅 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）乙醚 （2） % 淀粉酶溶液：称取淀粉酶（Sigma公司， 3.2.1） g，加100 ml水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好邻用现配。）（3）碘溶液：称取 g碘化钾溶于20 ml水中，加入 g碘，溶解后加水稀释至100 ml。 （4） 85 %乙醇。 （5）其余试剂同《蔗糖测定方法》 5.操作方法 样品处理 称取2～5 g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250 ml烧杯内，并用50 ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，放冷至60 ℃以下，加20 ml淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1 h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。加热至沸，冷后移入250 ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤。（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml 滤液，置于250 ml锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1 h，冷后加2滴甲基红指示剂，用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100 ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100 ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。） 测定

肉制品中淀粉含量的测定

肉与肉制品化学指标测定实验 肉制品中淀粉含量的测定 一、滴定法 （一）原理 淀粉可在酸水解下全部生成葡萄糖，葡萄糖具有还原性，在碱性溶液中能将高铁氰化钾还原。根据铁氰化钾的浓度和碱液滴定量可计算出含糖量而推算出淀粉含量，其反应式如下： 滴定终了时，稍微过量的糖即将指示剂甲基兰还原为无色的隐色体。无色体易被空气中的氧所氧化并重新变为次甲基兰染色体。 （二）仪器 250mL 三角烧瓶；滴定管；上皿天平；100mL 量筒；250mL 容量瓶；10、5、2毫升吸管。 （三）试剂 10%盐酸；20%NaOH 溶液；15%亚铁氰化钾溶液；30%硫酸锌溶液；2.5N NaOH 溶液；1%次甲基兰指示剂；1%铁氰化钾标准溶液。 （四）实验方法与步骤 1．准确称取绞碎样品20g 置于250mL 三角烧瓶中，加入80mL10%盐酸，煮沸回流1小时。 2．冷却后用20%氢氧化钠溶液中和，移入250mL 容量瓶中，加入3mL15%亚铁氰化钾溶液，5mL30%硫酸锌溶液，摇匀，加蒸馏水至刻度，摇匀。 3．将溶液过滤。 4．将滤液注入50mL 滴定管中。 5．将3—5个三角烧瓶中各准确加入10mL1%铁氰化钾标准溶液，2.5mL2.5N NaOH 溶液，1滴1%次甲基兰指示剂，煮沸1分钟。其中一个用于预滴定，滴定至兰色消失为止。其它几个用于正式滴定，正式滴定时，先加入比预滴定少0.5mL 左右的糖液，煮沸1min ，加指示剂1滴，再用滤液滴定至兰色褪色。 （五）计算 淀粉%=V 100.9A 0.0175V )(10.05K ???+? 式中： 0.9——由葡萄糖转换为淀粉的系数

由反应可知，淀粉与葡萄糖之比为162.1：180.12=0.9：1，即0.9克淀粉水解后可得1克葡萄糖。 K ——1%铁氰化钾标准液校正系数； A ——样品稀释倍数（250/20=12.5）； 10.05与0.0175——用10毫升标准的铁氰化钾时得出的经验系数。 二、容量法 （一）原理 淀粉可在酸水解下生成葡萄糖，然后根据斐林氏容量法测定葡萄糖的含量。 斐林氏A 、B 液混合时，生成的天兰色Cu(OH)2沉淀。立即与酒石酸钾钠起反应，生成深兰色的氧化铜和酒石酸钾钠的络合物——酒石酸钾钠铜，酒石酸钾钠铜被葡萄糖和果糖还原，生成红色的氧化亚铜（Cu 2O ）沉淀，达到终点时稍微过量的转化糖将兰色的次甲基兰染色体还原为无色的隐色体，而显出氧化亚铜的鲜红色。 （二）仪器 500mL 磨口锥瓶；100mL 量筒；回流装置；滤纸和漏斗；500mL 容量瓶和100mL 容量瓶；碱式滴定管；10mL 和5mL 吸管；水浴。 （三）试剂 浓盐酸；30%NaOH ；12%醋酸锌；6%亚铁氰化钾。 斐林氏A 液：溶解69.28g 化学纯的硫酸铜（CuSO 4·5H 2O ）于1000mL 水中，过滤备用。 斐林氏B 液：溶解346g 化学酒石酸钾钠和100g 化学纯NaOH 于1000毫升水中，过滤备用。 斐林氏溶液标定：准确称取经烘干冷却的分析纯蔗糖 1.5—2g ，用蒸馏水溶解并移入250mL 容量瓶中，加水至刻度，摇匀，吸取此液50mL 于100mL 容量瓶中，加盐酸5mL ，摇匀，置水溶中加热，使溶液在2—2.5min 内升温至67—69℃保持7.5—8min ，使全部加热时间为10min ，取出，迅速冷却至室温，用30%NaOH 溶液中和，加水至刻度，摇匀，注入滴定管中（必要时过滤）。 准确吸取斐林A 、B 液各5mL 于250mL 锥形瓶中，加水约50mL ，玻璃珠数粒。置石棉网上加热至沸，保持1min ，加入次亚基兰指示剂一滴。再煮沸1min ，立即用配制好的糖液滴定至兰色褪尽显鲜红色为终点，正式滴定时，先加入比预试时少0.5mL 左右的糖液，煮沸1min ，加指示剂1滴，再煮沸1min ，继续用糖液滴定至终点，按下式计算其浓度： A=0.95 500WV 式中： A ——相当于10mL 斐林氏A 和B 混合液的转化糖的量（g ）； W ——称取的纯蒸糖的量（g ）； V ——滴定时消耗的糖液的量（mL ）； 500——稀释比（1/250×50/100）； 0.95——换算系数（0.95克蔗糖可转化为1g 转化糖）。 （四）操作方法 1．称取样品5g ，除去脂肪和水（可称用脂肪和水分测定后的残渣）。移入500mL 磨口锥瓶中，加100mL 水和7mL 浓盐酸，加热回流1小时，冷却，用30%NaOH 中和之，用滤纸滤入500mL 容量瓶中，加5mL12%醋酸锌和5mL16%亚铁氰化钾澄清之，加水至刻度，摇匀，过滤。 2．取滤液50mL 于100mL 容量瓶中，加盐酸5mL ，摇匀，置水浴中加热，使溶液在2

淀粉酸解法测定含量

第一法酶水解法 一、目的与要求： 1、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方法。 2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。 二、实验原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 三，试剂： 1、0.5％淀粉酶溶液：称取淀粉酶0.5克，加100毫升水溶解，数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。 2、碘溶液：称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中，加入1.3克碘，溶解后加水稀释至100毫升。 3、乙醚 4、85％乙醇 5、6N盐酸：量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。 6、甲基红指示液：0.1％乙醇溶液。 7、20％氢氧化钠溶液。 8、碱性酒石酸铜甲液：称取34.639克硫酸铜(CuS04?5H2O)。加适量水溶解，加0.5毫升硫酸，再加水稀释至500毫升，用精制石棉过滤。 9、碱性酒石酸铜乙液：称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500毫升，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。 11、硫酸铁溶液：称取50克硫酸铁，加入200毫升水溶解后，人100毫升硫酸，冷后加水稀释至1000毫升。 四、操作方法： 1、样品处理： 称取2-5克样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用约100毫升85％乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250毫升烧杯内，并用50毫升水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15分钟，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60℃保温1小时，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。取50毫升滤液，置于250毫升锥形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小时，冷后加2滴甲基红指示液，用20％氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100毫升容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 2、测定： 吸取50毫升处理后的样品溶液，于400毫升烧杯内，加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制，在4分钟内沸腾，再准确煮沸2分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。 同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白实验。 计算：X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100 X1：样品中淀粉的含量，％； A1：测定用样品中还原糖的含量，mg； A2：试剂空白中还原糖的含量，mg；