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[药学]药理学实验详解

药理学实验详悉

一、动物实验

动物实验是根据研究目的，恰当地选用标准的符合实验要求的实验动物，在设计的条件下，进行各种科学实验、观察、记录

动物的反应过程或反应结果，以探讨或检验生命科学中未知因素的专门活动。动物实验是人类生存和发展的必要手段。

动物实验方法是进行动物实验时的各种实验手段、技术、方法和标准化操作程序。也探讨实验动物科学中的减少、替代、优

化问题。

实验动物的选择：首先应从生物医学研究的目的和实验要求来选择实验动物，进而考虑实验动物是否容易获得、是否经济、是否

容易饲养。一切实验动物应具有个体间的均一性，遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。

标准化原则：根据对实验质量的要求选择标准化的实验动物。

动物实验中选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物

标准化动物：是指遗传背景明确或来源清楚的，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，模型性状显著且稳定的动物。

在精确试验中，鉴于动物体内外的微生物和寄生虫会干扰试验的结果，最好选择无菌动物或悉生动物，至少也应SPF级动物。规格化原则：选择与实验要求一致的动物规格。

实验动物年龄与体重一般呈正相关性，可按体重推算年龄。一般来说，实验动物年龄、体重应尽可能一致，相差不得超过10%。

不同性别的动物对同一药物的敏感程度是有差异的，如实验无特殊要求应选择雌雄各半做实验，以避免因性别差异所造成的

结果误差。

特殊的生理状态下，如发情、妊娠及哺乳期，机体对实验的反应性发生改变。

★实验动物的选择应用应注意有关国际规范：GLP、SOP、“3R”（Replacement替代 Reduction减少 Refinement优化）

(一)实验动物：系指遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制，经科学方法人工培育用于科学实验的动物。

(二)实验动物的分类方法

1、按遗传学控制分类

*近交系：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染色体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。

近交动物的特征：

a、纯合性和一致性——纯合性指的所有动物的基因位点都应是纯合的。一致性指的是任何可遗传的体征都完全一致。例如：血

型和组织型，体重、毛色。

b、遗传稳定性

c、特异性——就整个近交系小鼠而言，每个近交系在遗传上都是独特的，几乎每个近交系都建立了各自的遗传概况。

d、分布于各地，引一对即可繁殖。

e、背景资料和数据较完整。

*封闭群：以非近亲配种方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新血缘条件下，至少连续繁殖四代以上。

封闭群的特点：

a、由于非近交，具有杂合性，从而避免近交衰退的出现。

b、由于没有引进新的血缘，种群间遗传特性能保持相对稳定。

c、群内个体间，因其具有杂合性，所以个体间的反应性具有差异，重复性和一致性不如近交系。

2、按微生物学分类

*普通级动物Conventional（CV）Animal：不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。

*清洁动物Clean（CL）Animal：除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。饲养在

屏障系统中。空气要经过滤净化，饲养室要保持正压，进入室内的—切物品要经过消毒灭菌，工作人员进入要洗澡和穿灭菌工作

服，动物饮水要经灭菌。

*无特定病原体动物SpecificPathogenfree（SPF）Animal：除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病菌和

对科研干扰大的病原。饲育在屏障系统中，是通过无菌动物、悉生动物、SPF 动物而获得的。笼具、饲料饮水都要经过特殊处理，

并有严格的检疫、消毒、隔离制度。国外所作的科研实验主要使用SPF 动物。

*无菌动物Germfree（GF）Animal：无可检出的一切生命体。此种动物自然界中并不存在，它是经人工剖腹产净化培育出来的。

在隔离器中剖腹产取出其仔体，用无菌母鼠代乳或人工哺乳。

悉生动物(GnorobioticAnimal)：动物体内所携带生命体(病毒、细菌、真菌、原虫和寄生虫)是已知的，也叫已知菌动物。

药理实验指导

药理学实验指导

实验一药物的作用方式【实验目的】理解药物的局部作用和全身作用，并了解兴奋作用、抑制作用及拮抗作用。【实验原理】普鲁卡因为局部麻醉药，抑制中枢神经元，首先抑制对药物敏感的中枢抑制性神经，引起脱抑制而出现兴奋现象，表现为不安、震颤，甚至惊厥。而戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：3%普鲁卡因溶液、0.5%戊巴比妥钠溶液【实验步骤】 1．取小白鼠1只，称重标记，并观察一般活动情况及痛觉反应。 2．在小白鼠一后肢股骨粗隆下端坐骨神经周围，注射3%普鲁卡因溶液0.1ml/10g，随即观察小白鼠左右后肢的活动情况及全身情况。 3．待小白鼠抽搐明显时，立即腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g并继续观察小白鼠全身情况。 4．填表小白鼠用普鲁卡因后表现用戊巴比妥钠后表现左后肢全身左后肢全身【注意事项】 1．要求注射部位要正确。 2．注意抢救时间。【思考题】 1．小白鼠的那些表现各属于局部、全身、兴奋、抑制和拮抗作用？ 2．本次试验队临床用药有何指导意义？

实验二药物剂量对药物作用的影响【实验目的】掌握药物剂量与药物作用的关系【实验原理】戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，药物作用越明显，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：0.1%，1%，2%戊巴比妥钠溶液【实验步骤】 1．取性别相同，体重相近小白鼠3只，分别称重、记号（1、2、3号），观察精神状态、痛觉反射及翻正反射。 2．给1号小白鼠腹腔注射0.1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/ 10g 给2号小白鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g 给3号小白鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g 3．用大烧杯罩住小白鼠，并随时观察用药后各小鼠的精神状态、痛觉反射、翻正反射。 4．填表小白鼠号用药用药后的表现（3′6′9′12′15′）精神状态痛觉反射翻正反射1号 2号 3号【注意事项】 1．更换药物要冲洗注射器。 2．小白鼠体重相差应小于两克。【思考题】 1．药物剂量和药物作用的关系？ 2．讨论3只小白鼠用药以后表现为何不同？

中药药理学实验

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响（6 学时）【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量，评价炮制对附子毒性的作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。【药品】生附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml、制附子水煎醇沉液（上清液） 0.5g/ml。【动物】小鼠，雌雄各半，体重18?22 g。【方法】小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组。按0.2ml/10g腹腔注射给药，第 1 组给予生附子水煎醇沉液，第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min 内各组小鼠死亡情况。【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数，比较两者毒性的大小。【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4 小时以上。【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。

实验2生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响（炭末法）（4学时）［目的］了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。［原理］利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速，有泻下作用，故对胃肠实热有釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解，作用减弱，而芒硝在肠内不易被吸收，使肠内渗透压升高，大量水分保留在肠腔，机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有增水行舟，润燥软坚”之功效，致泻作用增强。［器材］手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平，烧杯，搪瓷盘或蛙板。［药品］炭末生理盐水混悬液0.1g/m （炭末为活性炭），生大黄水煎液1g/ml（含炭末 0.1g/m1）,制大黄水煎液1g/ml（含炭末0.1g/ml，生大黄水煎液加芒硝（生大黄1g/ml+芒硝0.5g/ml+炭末0.1g/m1），苦味酸。［动物］小白鼠。［方法］取禁食20~24h成年、体重相近的12只小白鼠，随机分为4组，每组3 只，用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为小肠总长度”。从幽门至炭末前沿的距离作为炭末在肠内推进距离”。取各组3只小自鼠平均值，用公式汁算炭末推进百分率，并注意观察各组小肠容积是否增大。炭末在肠内推进距离（cm）炭末推进率= ---------------------------------------- X100% 小肠全长（cm）［结果］按结果记录分析并填表。

药理学实验方案

元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究 ——药理实验设计设计人：级药学一班张礼杰 515010 信盼 515024 陈茂琴 515026 何朵朵 515028 药学四班杨森 515101 冯禹 515110 王同月 515102

元胡止痛片中抗炎和镇痛作用研究 1.实验目的：探讨元胡止痛片的镇痛和抗炎作用 2.实验原理：（1）元胡止痛片收载于《元胡止痛片收载于《中国药典》是由元胡、白芷两味药组成的中药复方制剂为行气活血止痛剂临床用于治疗气滞血瘀胃痛、胁痛、头痛及月经痛等症疗效确切。本实验是为验证元胡止痛片的镇痛和抗炎作用进行验证。实验对四川禾邦阳光制药厂家生产元胡止痛片不同剂量进行了药效学研究采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和耳肿胀法实验分别测定小鼠扭体反应抑制率、小鼠痛阂值提高率和肿胀率从而确定不同剂量的镇痛和抗炎作用效果。在基础医学研究中筛选镇痛药的常见致痛方法概括有物理法（热、电、机械）和化学法。动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法，即将某些化学物质，如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛，动物表现出“扭体反应”（即腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起）。 3.实验方法 :使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法 ,并分别建立小鼠疼痛和炎症模型 ,灌胃给予不同剂量元胡止痛片配成的溶液，观察对动物的镇痛和抗炎作用。 4.实验过程： 1.内容

4.1 药品与试剂元胡止痛片：四川禾邦阳光制药股份有限公司，国药准字z51021658，规格：片芯重0.25g,12片阿司匹林: 浙江金华市第三制药厂, 国药准字: H13023716, 临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液。 4.2动物：健康昆明种小白鼠，雌性，32只 4.3 器材：数控超级恒温槽，烧杯、1ml 注射器、电子秤 4.4分组：空白对照组 (灌胃0.9%生理盐水 10 mL/kg) 元胡止痛片高、低剂量组 (0.2，0.4mg ／10g) 阳性药阿司匹林对照组 (灌胃阿司匹林 0. 4 g/kg) 4.5人和动物剂量换算公式小白鼠=20 0026 .0?人/g 2 方法（1）热板法 1.动物筛选：致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~30s 之间的合格雌性小鼠。32只，热板法镇痛试验筛选痛阈值合格的小鼠，取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0． 5 ℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值［将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ，连续 2 次，间隔30 s ，测定平均值即为正常痛阈值］。将舔后足时间＜ 5 s 或＞30 s ，或跳跃者不用于此实验

药理实验指导

实验二给药途径对药物作用的影响【目的】观察不同的给药途径对药物作用的影响【原理】回苏灵为中枢兴奋药【材料】小鼠3只，体重18~22g，同一性别。 0.04%回苏灵溶液【方法与步骤】动物称重，标记。每鼠给药剂量均为8mg/kg。甲鼠灌胃给药，乙鼠皮下注射，丙鼠则为腹腔注射。仔细观察动物反应，记录下各鼠的潜伏期和最终结果。【结果处理】将上述观察到的结果填入下表2-4，并结合全班的试验结果，比较三种给药途与药物反应的出现时间和作用程度，最好能进行统计分析。实验三肝脏功能对药物作用的影响【目的】观察肝脏病理功能状态对药物作用的影响。【原理】四氯化碳是一种肝脏毒药，其中毒动物常被作为中毒性肝炎的动物模型，用于筛选保肝药物。【材料】小鼠2只，四氯化碳原液，0.36%戊巴比妥钠。【方法与步骤】 1.取性别相同、体重相近的2只小鼠，在试验前24h，分别皮下注射四氯化碳原液和生理盐水0.1ml/只。 2.2只小鼠分别ip戊巴比妥钠30ml/kg。 3.观察动物的翻正反射消失情况，记录药物作用的潜伏期和持续时间。 4.试验结束后，解剖小鼠，比较2只小鼠的肝脏外观有何不同。【结果处理】将上述观察到的结果填入下表2-5，并结合全班的试验结果，比较不同肝脏状态对药物作用影响，最好能进行分析。实验四药物的抗电惊厥作用【目的】观察苯妥英钠和苯巴比妥对电惊厥的保护作用。【原理】以一强电流刺激小鼠头颅可引起全身强直性惊厥，若药物预防强直性惊厥发生，可初步推测该药有抗癫痫大发作的作用。【材料】小鼠3-4，体重18～22g，雌雄不限。钟罩、天平、注射器，药理生理多用仪。 0.5%苯妥英钠溶液，0.5%苯巴比妥钠溶液。

药理学实验指导

药理学实验指导（供自学助考班用）实验一药理学实验基础知识与常用动物捉拿、给药【目的】1、学习药理学实验基础知识； 2、掌握药理学实验常用动物捉拿、给药方法。【器材】1ml、5ml、20ml注射器，大、小鼠灌胃针头，4号、6号注射针头，250ml烧杯、鼠笼(或铁丝笼)，天平秤、砝码。【药品】0.9%生理盐水。【动物】小白鼠、大鼠、家兔。【内容】一、实验动物的捉拿方法 1、蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夹住左前肢，拇指压住右前肢；右手将双下肢拉直，左手无名指及小指将其压住而固定。此法用于淋巴囊注射。毁脑和毁脊髓则用左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部，拇指和无名指小指握持双下肢，右手持刺针进行操作。 2、小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。双手法：右手提起鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉，小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤，并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部，固定于手中。单手法：小白鼠置于笼盖上，先用左手食指与拇指抓住鼠尾，手掌尺侧及小指夹住尾根部，然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。 3、大白鼠大白鼠容易激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与手掌握住背部和腹部。不要用力过大，切勿捏其颈部，以免窒息致死。 4、家兔用左手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大，其吃重点越分散)。将兔提起，以左手托住其臀部，使兔呈坐位。二、实验动物的给药途径与方法 1、小白鼠给药途径与方法灌胃(ig)：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃针头自口角进入口腔，紧贴上腭插入食道。如遇阻力，将灌胃针头抽回重插，以防损伤。常用灌胃量为0.1～0.2ml/10g。皮下注射(ih)：可用腹部、背部、腹股沟的皮下，此处皮肤比较松弛，也可由助手协助。注药量一般为0.1～0.2ml/10g。肌肉注射(im)：一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴，另一人持连4号针头的注射器，将针头

药理实验方法学

第一章现代药理学实验方法与技术简介第一节分子生物学试验方法与技术分子生物技术在药理学实验中应用较为广泛，包括核酸分子探针的标记、核酸分子杂交、多聚酶链反应、蛋白印迹杂交技术、cDNA文库、随机分子库技术、外核基因在真核细胞中的表达、转基因动物、人类基因治疗等。现将更为常用的技术介绍如下：一、核酸分子探针的标记标记核酸分子探针（nucleic acid probe）是进行核杂交的基础，根据核酸分子探针的来源及性质进行选择，选择的基本原则是具有高度的特异性，探针选择直接影响杂交结果的分析。根据检测对象和目的不同，，可选择不同的探针种类及标记方法。㈠探针种类 1．基因组DNA探针是克隆化的各种基因片断，也是最常用的核酸探针，探针应尽可能选用基因编码（外显子），避免使用内含子及其它非编码序列。 2．cDNA探针与mRNA互补的DNA链称cDNA，是一种较为理想的核酸探针，特异性较高。 3．RNA探针RNA与RNA或DNA杂交体的探针稳定性，特异性高。 4．寡核苷酸探针人工合成寡核苷酸片段做探针，可根据需要合成相应序列。㈡标记物常用的探针标记物有两类：放射性同位素和非放射性同位素。标记物的检测具有高度灵敏性和特异性。标记和探针结合不影响杂交的特异性和稳定性。其中放射性同位素是应用最多的探针标记物，但易造成放射性污染，多数同位素的半衰期短，不能长期存放。常用的放射性同位素有32P?3P?35S，有时也用14C,125I或131I。二、核酸分子杂交（nucleic acid hybridiazation ）是指具有一定同源序列的两条核酸单链在一定的条件下，按碱基互补配对原则形成异质双链的过程。核酸分子杂交是分子生物学领域应用最广泛的技术，灵敏度高、特异性强，主要用于特异DNA或RNA的定性定量检测。三、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是一种体外酶促扩增特异DNA片段的方法。传统的DNA扩增法是分子克隆法，需经过DNA 酶切、链接、转化等步骤构建含有目的基因的载体。然后导入细胞中进行扩增，再用同位素标记的探针进行筛选，操作复杂，耗时。PCR技术灵敏度

《药理学实验》教学大纲

西南科技大学本科实践教学大纲《药理学实验》教学大纲【课程编号】17315272 【英文名称】Experiments of Pharmacology 【课程学时】16 【适用专业】制药工程一、本实验课程的教学目的和要求药理学实验是与药理学理论教学密切的重要实践环节。以药理学实验的基本知识、技术和方法为基础，结合不同作用类别的药物，使学生掌握药理学实验的基本知识，掌握药理学实验的基本技能，验证药理学中的基本理论，牢固掌握药理学的基本概念；了解在药物发现和评价过程中，药理学研究的内容和必要性。通过药理学实验，使学生了解获得药理学知识的科学途径，同时培养学生实践操作、互助协作、独立思考、综合分析和解决问题能力，体验科学研究的基本程序，全面提高学生的综合素质。二、本实验课程与其它课程的关系药理学实验是对《药理学》和《生理学》理论课程教学的补充和完善，同时有利于《生物化学》的理论知识中的有关部分的理解。三、实验课程理论教学内容安排本实验课程不安排理论教学内容四、实验内容安排实验一、药理学实验的基本知识和基本技术

生命科学与工程学院【目的要求】熟悉药理学实验的基本技术；能掌握药理学实验的基本知识和基本技术【内容】药理学实验基本知识；实验动物的捉拿和固定方法；实验动物标记方法；实验动物给药方法。实验动物取血方法；实验动物处死方法。【方法】理论讲授结合实际操作实验二、不同途径、不同剂型、不同剂量的阿托品对药物作用的影响【目的要求】学习不同途径、不同剂型、不同剂量对药物作用的影响；了解不同给药途径及同一药物不同剂型对药物吸收的影响及特点。通过实验比较不同途径给予阿托品的药效学有何不同。通过实验比较不同剂型、不同剂量的阿托品的作用。实验动物为健康昆明种小鼠（雌雄不拘）。【内容】1 介绍静脉注射及静脉滴注、肌肉注射、皮下注射、动脉注射、锥管注射、腹腔注射、胃肠道给药、舌下给药及黏膜给药、直肠给药、吸入给药、透皮给药等途径的药物吸收特点。 2 介绍药物制剂对药物作用影响 3 结合理论进行实验观察 4 根据结果讨论剂型及途径与药物效应的关系。【方法】静脉注射、胃肠道给药等方法实验三、水杨酸钠血药浓度及血浆半衰期测定【目的要求】了解药物血浆半衰期的意义。掌握分光光度法测定水杨酸钠血药浓度，并根据血药浓度计算半衰期的方法。【内容】1 讲授分光光度法测定药物浓度的原理和半衰期计算方法。 2 分组进行家兔取血、给药、测定等实验过程。 3 根据实测结果计算半衰期。 4 讨论半衰期的临床意义。【方法】家兔灌胃给药、家兔静脉取血、分光光度法测定水杨酸钠血药浓度实验四、传出神经系统药物对家兔血压的影响【目的要求】学习家兔固定、麻醉、气管插管、动脉插管、血压记录；【内容】1 分组完成家兔固定、麻醉、气管插管、动脉插管、血压记录等过程。 2 根据实验讲义依次给药、观察结果。 3 总结【方法】动脉插管法实验五、镇痛药实验及统计学分析【目的要求】学习镇痛药的实验方法；掌握实验性疼痛的诱导方法，观察各类镇痛药的作用。根据实验结果，运用统计学原理进行结果分析，从而理解各类镇痛药的作用特点并初步掌握统计学在药理学实验中的应用。【内容】1 介绍统计学基本概念及实验注意事项。 2 分组进行实验操作和观察。 3 以班为单位统计各组实验结果，在教师指导下进行统计学处理分析。 4 根据统计学结果得出结论并理解不同类型镇痛药的镇痛效果。【方法】光电法实验六、子宫兴奋药及实验【目的要求】学习掌握子宫兴奋药的作用特点和临床应用【内容】介绍平滑肌实验装置、分组进行实验、总结实验结果

药理实验指导43252

药理实验指导总论、链霉素毒性、肝脏在药物代谢中的作用一、药理学实验课的目的和要求：（一）目的：（1）使学生掌握进行药理学实验的基本方法，了解获得药理学知识的科学途径（2）验证药理学中的重要基本理论，更牢固地掌握药理学的基本概念。（3）培养对科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风，并初步具备客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决问题的能力。（二）要求：（1）实验前做好预习工作，结合实验内容，复习有关药理学、生理学和生物化学等方面的理论知识，并领会实验设计的原理。（2）实验时认真操作，仔细观察，并做好实验记录。（3）实验后整理实验结果，并进行分析思考，认真书写实验报告，并做好实验室的清洁卫生，关好水、电。二、实验设计的基本原则（1）重复性（2）对照性（3）随机性三、药理学实验的一般方法和技术（一）实验动物选择的原则和方法 1、首先要根据实验的目的选择实验动物 2、选用来源清楚、遗传背景明确的实验动物 3、选用容易获得、价格便宜、易于饲养与管理的实验动物 4、必须注意实验动物种类、品系的质量及健康状况是否良好 5、选用人畜共患疾病的实验物物和传统应用的实验动物（二）实验动物的选择：常用的实验动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、狗。常根据不同的实验目的和要求选用不同的实验动物，所选用的动物必须能较好地反映试验药物的选择性作用并符合节约的原则。蛙和蟾蜍：离体心肌，观察药物对心脏的作用。坐骨神经和腓肠肌，观察药物对周围神经肌肉或横纹肌的作用。小白鼠： 1.小鼠属于脊椎动物门，哺乳纲，啮齿目，鼠科，小鼠属动物。 2.成熟早，繁殖力强。 3.体形小，易于饲养管理。 4.性情温顺，胆小怕惊。 5.对外来刺激极为敏感。6.便于提供同胎和不同品系动物。7.喜居于光线较暗的安静环境，习于昼伏夜动，喜欢啃咬。8.体小娇嫩，不耐饥饿，不耐冷热，对环境的适应性差。9. 成年雌鼠在动情周期不同阶段阴道粘膜可发生典型变化。适用于需要大量动物的实验，如药物筛选，半数致死量，药物效价。

《药理学实验》课程教学活动大纲

《药理学实验》课程教学大纲（执笔人：尹艳艳审核人：周兰兰教学院长：陈志武）一、课程简介（一）课程代码：（二）课程名称（含英文名称）：药理学实验（pharmacology experiments）（三）课程类别：专业基础课（四）修读对象：药学专业（五）总学时与学分：其中实验54学时，3学分。（六）相关课程：药理学（七）内容提要本课程涵盖了药理学部分的模拟实验及经典实验项目，以大量的实验尤其是动物实验为基础，复制疾病动物模型，研究用药后的生物体功能活动变化及其规律，以巩固药理学及相关基础理论知识，进一步强化实验操作技术，提高动手能力，培养分析问题和解决问题的能力。二、教学目的和教学方法（一）教学目的 1．加强学生的药理学基本理论、基本知识和基本技能的训练，培养理论联系实际和独立开展科学研究的能力。药理学实验可以帮助学生验证药理学理论知识，巩固和加强对药理学理论的掌握；促进学生对药理学一些抽象概念的理解；了解药理学研究的一些基本方法，培养学生药理学实验设计和科研能力；初步掌握药物研究的基本技能，并且通过科研模拟实验加强学生的创新思维能力的培养。

2.药理学实验主要以学生在教师指导下自己动手操作为主，少量示教实验为辅，并且配合课堂讨论和多媒体等方法，达到既验证理论，巩固和加强药理学理论知识学习的目的，又要做到培养学生科研能力和创新思维的开发。（二）教学方法采用课堂讲授、现场指导、模拟实验、双语教学、自主设计、病例讨论和课外训练等多种教学手段相结合的教学方法。三、实践教学学时分配四、选用教材和主要教学参考书

1.陈志武,董六一,《药理学实验指导》,中国协和医科大学出版社,2013年10月 2.孔德虎，《医学机能学实验教程》，科学出版社，2009年2月。五、实验教学内容实验一、动物捉拿及各种药方法（录像）主要讲授内容：介绍动物捉拿及各种给药方法教学时数：3学时重点与难点： 1.小鼠、大鼠和家兔的捉拿方法。 2.小鼠、大鼠和家兔常见的给药方法实验二、小鼠戊巴比妥钠LD50和ED50的测定主要讲授内容：ED50及LD50的概念，其测定方法和小鼠腹腔注射的方法教学时数：4学时重点与难点： 1.小鼠腹腔注射的方法。 2.LD50和ED50的计算方法。思考题或练习题： 1. 半数有效量（ED50）和半数致死量（LD50）测定的目的意义如何？ 2. 药物的剂量与药物作用有何关系？ 3. 治疗指数和安全范围之间有何联系？实验三、吗啡的镇痛作用（小鼠热板法和小鼠扭体法）主要讲授内容： 1.镇痛药物的热板实验方法测定，观察镇痛药的镇痛作用，熟练掌握小鼠皮下注射的方法； 2.镇痛药物的扭体实验方法测定，观察镇痛药的镇痛作用，熟练掌握小鼠腹腔注射的

药理学实验指导讲解

药理学实验指导中药教学部重庆邮电学院生物学院二O O四年六月前言药理学实验教学的目的，不仅是验证药理学理论，还可培养学生基本操作技能，观察和分析解决问题的能力，以及体验科学研究的基本原则和基本程序，从而提高学生实验研究能力和严密的科学思维方法。为了使各专业的学生能深入理解药理学的基本理论和基本知识，特编写了这本《药理学实验实验指导》。本实验指导选择的实验内容经典、实用，做到既和理论课有密切联系，又有实验课的独特体系；既有整体动物（包括清醒动物和麻醉动物）实验，又有器官水平实验；既有验证性实验，又有设计性实验,还有综合性实验。从而使学生初步具备对客观事物进行观察、比较、分析、综合和解决问题的能力，并验证、巩固和加深理解基本理论，从而初步掌握药理学实验的基本方法。为了达到上述目的，要求同学们做到下列事项：

一、遵守纪律，提前5分钟到达实验室，因故外出或早退应向老师请假。进入实验室必须身穿白大衣，不许穿拖鞋，衣着整洁干净。实验时应严肃认真，不高声谈笑，不进行实验室无关的活动。违者将给予一定的处罚。二、实验前：1.仔细阅读实验指导，了解实验目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原理；2.结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面理论知识做到充分理解；3.预测实验中各个步骤可能出现的情况；4.注意实验中可能发生的问题。三、实验时：1.实验者必须先熟悉仪器的使用要点，而后运用。仪器损坏或失灵，应请老师修理或调换。违章操作使仪器损坏者，要进行赔偿。各小组实验器材不得调换。公用物品用完后放回原处。2.实验时将实验器材妥善安排好，正确装置；严格按照实验指导上的步骤进行操作，准确计算给药量，防止出现差错意外；3.认真仔细地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应出现的时间、表现以及最后转归，联系课堂讲授内容进行思考。4.注意节约实验材料。四、实验后：1.整理实验结果，经过分析思考，写出实验报告（①.名、班级、组别、日期、操作者②.题目、目的、简要方法(包括仪器，药品等)．③实验结果是实验中最重要的部分，应该忠实，正确地记述实验过程中所观察到的现象。一定随时记录，不可单凭记忆，否则容易发生错误或遗漏）。时交给指导教师；2.整理实验器材，洗净擦干，妥为安好，放回原处。将用过的动物进行处死动物及其他废物丢入指定处所。有班长安排各组进行轮流打扫清洁，做好实验室的清洁卫生工作（桌、凳、地板、收拾干净，摆放整齐），离开时关闭所有的水、电、气关好门窗。生物信息学院中药学教学部刘圣蓉刘毅编著二0 0四年六月

药理学实验指导

2实验报告的写作 2.1实验题目实验题目一般应包括实验药物、实验动物、实验主要内容等。如“心得安对麻醉犬的降压作用分析”，“普鲁卡因肌注对小鼠局麻作用及中毒抢救”，“奎尼丁抗电诱发的蛙心心律失常的作用”等。 2.2实验目的 2.3实验方法 2.4实验结果实验结果是实验报告中最重要的部分，需绝对保证其真实性。应随时将实验中观察到的现象在草稿本上记录，实验告一段落后立即进行整理，不可单凭记忆或搁置了长时间后再作整理，否则易致遗漏或差错。实验报告上一般只列经过归纳、整理的结果。但原始记录应予保存备查。 2.5讨论讨论应针对实验中所观察到的现象与结果，联系课堂讲授的理论知识，进行分析和讨论。不能离开实验结果去空谈理论。要判断实验结果是否为预期的。如果属于非预期的，则应该分析其可能原因。讨论的描述一般是：首先描述在实验中所观察到的现象，然后对此现象提出自己的看法或推论，最后参照教科书和文献资料对出现这些现象的机制进行分析，如实验观察到用药后动物出现了什么现象，提示了该药可能具有什么药理作用，文献曾报道该药可对什么受体有作用。因此，可初步推测该药的这种药理作用可能与其作用于什么受体有关。 2.6结论实验结论是从实验结果归纳出来的概括性判断，也就是对本实验所能说明的问题、验证的概念或理论的简要总结。不必再在结论中重述具体结果。未获证据的理论分析不能写入结论。第二章药理学实验设计的基本知识一实验设计的基本原则药理学研究的目的是通过动物实验来认识药物作用的特点和规律，为开发新药和评价药物提供科学依据。由于生物学研究普遍存在的个体差异，要取得精确可靠的实验结论必须进行科学的实验设计，因此必须遵循以下基本原则。

中药药理学实验指导

中药药理学实验指导中药教学部姚干编重庆邮电学院生物信息学院

2005年02月10日前言我国中医中药历史悠久，理论体系完整，在历代临床实践中积累了丰富的药效学经验。中药和方剂是祖国医学的精华，其药理作用需要不断地加以研究与探索。中药药理学是采用现代科学技术方法来研究中药的组方、成分、作用机理及用途的一门前沿科学，而中药药理实验和中药药理学是不可分割的一门学科的两个组成部分，缺一不可。中药药理实验以中医药理论为指导，以中药功效为主线，运用现代药理学实验方法进行单味中药与经典方剂的研究，对继承、发扬祖国医药学这一伟大宝库的历史使命和实现中药现代化，有着非常重要的作用。本实验指导是以中药专业培养计划为依据，按照《中药药理学》实验课程（本科）教学大纲的要求编撰而成的，主要供我院中药专业本科学生实验教学使用。本实验指导首先对中药药理实验的基础知识与基本技术进行了简要介绍，选择的实验项目力求内容经典、实用，既与理论课有密切联系，又有实验课的独特体系；既有整体动物实验，又有器官水平实验；既有定性实验，又有定量实验；既有验证性实验，又有设计性实验。从而使学生初步具备对客观事物进行观察、比较、分析、综合和解决问题的能力，并验证、巩固和加深理解基本理论，从而初步掌握中药药理学实验的基本方法。

目录中药药理学实验须知 3 中药药理实验的基础知识与基本技术 5 实验一生大黄、制大黄对小鼠排便时间和数量的影响17 实验二生大黄、制大黄对小鼠小肠运动的影响17 实验三秦艽对蛋清致大鼠后跖肿胀的影响18 实验四青皮对家兔离体肠平滑肌的影响19

实验五金铃子对小鼠的镇痛作用20 实验六人参对小鼠耐常压缺氧的作用20 实验七人参对小鼠游泳时间的影响21 中药药理学实验须知一、中药药理学实验课的目的和要求㈠目的中药药理学实验课的目的在于通过实验，使学生掌握中药药理学实验的基本方法，了解获得中药药理学知识的科学途径，验证中药药理学中的重要理论，更牢固地掌握中药药理学

《药学大实验》实验指导药理学部分

药学实验（药理学实验）实验五不同给药途径、给药剂量对药物作用的影响 (一)不同给药途径对药物作用的影响 ?实验目的观察不同给药途径对药物（硫酸镁）作用的影响，了解核酸镁不同给药途径产生不同作用的原因；掌握硫酸镁的作用以及小鼠灌胃、腹腔注射方法 ?实验原理硫酸镁为一种容积性泻药（此外还有刺激性和润滑性泻药），口服在肠道难吸收，在肠内形成高渗压而阻止肠内水分的吸收，从而扩张肠道、刺激肠壁、促进肠道蠕动，产生泻下作用。注射给药可使血中Mg2+增加，由于Ca2+和Mg2+化学结构相似，Ca2+和Mg2+间存在相互拮抗作用，Ca2+参与运动神经末梢Ach释放，而Mg2+拮抗Ca2+这种作用，结果使神经肌肉接头处Ach减少，骨骼肌紧张性降低，肌肉松弛。同时对中枢神经及心血管系统产生抑制作用。因此产生抗惊厥及降压效果。本实验观察不同给药途径对硫酸镁作用性质的影响。大多数药物需进入血液分布到作用部位才能发生作用。药物自给药部位进入全身血液循环的过程为吸收（absorption），吸收速度的快慢及吸收数量的多少直接影响药物的起效时间及强度。其中给药途径是决定药物起效时间及强度的重要因素

之一。给药途径不同，则药物吸收快慢亦不同，其吸收快慢顺序除静脉注射外是：腹腔注射>吸入>舌下>直肠>肌内注射>皮下注射>口服>皮肤。给药途径不同，其吸收程度又不同，由此使药物作用强度不同。药物经不同给药途径所致的吸收程度是：吸入、舌下、直肠、肌内注射较为完全，口服次之，皮下较差；皮肤表面吸收程度最差，一定要脂溶性特别高的药物才能通过此途径较好地吸收。而胃肠道给药，影响因素较多，包括有首关消除的影响等，使药物吸收程度有所不同。首关消除（first pass elimination）：从胃肠道吸收入门静脉系统的药物在到达全身血循环前必先通过肝脏，如果肝脏对其代谢能力很强或由胆汁排泄的量大，则使进入全身血循环内的有效药物量明显减少，这种作用称为首关消除。有的药物在被吸收进入肠壁细胞内而被代谢一部分也属首关消除。首关消除也称首关代谢（first pass metabolism）或首关效应（first pass effect）。注射、舌下和直肠给药可避免肝代谢。 ?实验学时 2学时 ?实验对象小白鼠，体重18-22g，雌雄不限 ?实验器材 1ml注射器2支、小白鼠灌胃针头1个、5号针头1个、250ml烧杯2个

大学药理学实验(附问题详解)

实验题目：小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定 Determination of Cl-Tubocurarine's Median Effective Dose （ED50）【实验目的】了解ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。【相关理论】 1．关于量反应，质反应：量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表示；例如：血压、尿量等。质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现；如：生死、有效或无效。以阳性反应的出现频率或百分数来表示（全或无，阳性率）。 2．关于ED50，LD50，以及治疗指数: 能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全. 可用机率单位正规法或点斜法求出LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。 3．肌松药分为去极化型和非去极化型两种。去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作用不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反而会加重。非去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作用能被新斯的明解救。 4．测定ED50，LD50的意义可计算治疗指数TI（LD50/ ED50），为临床安全用药提供指导。

【实验动物】小鼠（种KM），雌雄各半。【实验器材】铁丝网，铁架台，天平，注射器等。【实验方法】应用点斜法测定ED50。应用该方法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求： 1）动物以5~8组为宜； 2）每组动物数须一致； 3）各组给药剂量应呈现等比数列； 4）各组给药剂量的公比r = 1.1~1.6； 5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤20% 【实验方法】 1．预实验：目的是为了找出符合上述点斜法要求5）的Dmax和Dmin。阳性反应判定标准：20min小鼠落下3次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。 2．确定组数（n）后，根据Dmax和Dmin，计算各组应给予的剂量，Dmax= rn·D min。注意公比r应在上述要求的围，即 = 1.1 ~ 1.6。分别计算出各组应注射的剂量，见下表： Group No. 1 2 3 4 5 6...

药理学实验的基本知识和基本技术

药理学实验的基本知识和基本技术一、实验动物的种类选择药理学实验常用的动物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、犬、蛙、蟾蜍等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点，故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用，并符合节约的原则。小白鼠：系实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖，且价廉，适用需要大量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。大白鼠：与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠，如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管，或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近，且稳定，现常用于抗高血压药物实验。豚鼠：是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感，容易致敏，常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌亦敏感，故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验，其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验，研究抗心律失常药物的机理。家兔：温顺、易饲养，常用于观察药物对心脏、呼吸的影响及农药中毒和解救的实验。亦用于研究药物对中枢神经系统的作用、体温实验、热原检查及避孕药实验。猫：与家兔比较，猫对外科手术的耐受性强，血压较稳定，故常用于血压实验。但价格较贵。此外，猫也常用于心血管药物及中枢神经系统药物的研究。犬：药理实验需大动物时常用犬。常用于观察药物对心脏泵功能和血流动力学的影响，心肌细胞电生理研究，降压药及抗休克药的研究等。犬还可以通过训练，用于慢性实验研究，如条件反射、高血压的实验治疗、胃肠蠕动和分泌实验、慢性毒性实验。蛙和蟾蜍离体心脏能较持久地有节律地搏动，常用于观察药物对心脏的作用；坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用；蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。须注意：由于动物对外界刺激的反应存在个体差异，在选择实验动物时，还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。二、实验动物的编号

中药药理学实验说课讲解

中药药理学实验

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响（6学时）【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量，评价炮制对附子毒性的作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。【药品】生附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml、制附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml。【动物】小鼠，雌雄各半，体重18 ～ 22 g。【方法】小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组。按0.2ml/10g腹腔注射给药，第1组给予生附子水煎醇沉液，第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min内各组小鼠死亡情况。【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数，比较两者毒性的大小。【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。

实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响（炭末法）（4学时） [目的]了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。[原理]利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速，有泻下作用，故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解，作用减弱，而芒硝在肠内不易被吸收，使肠内渗透压升高，大量水分保留在肠腔，机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟，润燥软坚”之功效，致泻作用增强。 [器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平，烧杯，搪瓷盘或蛙板。 [药品] 炭末生理盐水混悬液0.1g/m（炭末为活性炭），生大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/m1)，制大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/ml，生大黄水煎液加芒硝（生大黄1g/ml+芒硝0.5g/ml+炭末0.1g/m1)，苦味酸。 [动物]小白鼠。 [方法] 取禁食20~24h成年、体重相近的12只小白鼠，随机分为4组，每组3只，用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门

药理实验指导

药理学实验指导实验一药物的作用方式【实验目的】理解药物的局部作用和全身作用，并了解兴奋作用、抑制作用及拮抗作用。【实验原理】普鲁卡因为局部麻醉药，抑制中枢神经元，首先抑制对药物敏感的中枢抑制性神经，引起脱抑制而出现兴奋现象，表现为不安、震颤，甚至惊厥。而戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：3%普鲁卡因溶液、0.5%戊巴比妥钠溶液【实验步骤】 1．取小白鼠1只，称重标记，并观察一般活动情况及痛觉反应。2．在小白鼠一后肢股骨粗隆下端坐骨神经周围，注射3%普鲁卡因溶液0.1ml/10g，随即观察小白鼠左右后肢的活动情况及全身情况。3．待小白鼠抽搐明显时，立即腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g并继续观察小白鼠全身情况。 4．填表小白鼠用普鲁卡因后表现用戊巴比妥钠后表现

左后肢全身左后肢全身【注意事项】 1．要求注射部位要正确。 2．注意抢救时间。【思考题】 1．小白鼠的那些表现各属于局部、全身、兴奋、抑制和拮抗作用？2．本次试验队临床用药有何指导意义？实验二药物剂量对药物作用的影响【实验目的】掌握药物剂量与药物作用的关系【实验原理】戊巴比妥钠为镇静催眠、抗惊厥药，随着药物剂量的增加，药物作用越明显，对中枢的抑制作用逐渐增强，分别产生镇静、催眠、麻醉和抗惊厥的作用。【实验对象】小白鼠(体重20g左右) 【实验材料】 1．器材：1ml注射器、钟罩、镊子 2．药品：0.1%，1%，2%戊巴比妥钠溶液【实验步骤】 1．取性别相同，体重相近小白鼠3只，分别称重、记号（1、2、3号），观察精神状态、痛觉反射及翻正反射。 2．给1号小白鼠腹腔注射0.1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/ 10g 给2号小白鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g

[药学]药理学实验详解

药理实验指导

中药药理学实验

药理学实验方案

药理实验指导

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药理实验方法学

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药理学实验指导讲解

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