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Acute HBV by genotype F despite successful vaccination in an immune-competent German patient

Journal of Clinical Virology38(2007)

353–357

Case report

Acute hepatitis B virus infection by genotype F despite successful vaccination in an immune-competent German patient Frank Tacke a,?,Samad Amini-Bavil-Olyaee a,Albert Heim b,Tom Luedde a,

Michael P.Manns c,Christian Trautwein a

a Medical Clinic III,RWTH-University Hospital Aachen,Aachen,Germany

b Department of Virology,Hannover Medical School,Hannover,Germany

c Department of Gastroenterology,Hepatology&Endocrinology,Hannover Medical School,Hannover,Germany

Received18December2006;accepted22December2006

Abstract

Background::Hepatitis B Virus(HBV)infection is a leading cause of chronic hepatitis and liver cirrhosis worldwide,and ef?cient protection can usually be achieved by vaccination that is based on recombinant HBsAg protein from HBV genotype A and D.

Results::Here we report the case of a fully immune-competent German patient that acquired a symptomatic acute HBV infection during adulthood despite a complete and formally successful vaccination,which had resulted in anti-HBs titers considered protective.Further phylogentic analysis identi?ed an infection with the rare genotype F of HBV,possibly acquired in Spain,without apparent aberrations in the immunodominant‘a’determinant domain of the envelope gene.However,sequence comparisons revealed that all reported genotype F isolates display marked differences from the other genotypes in this domain which serves as an epitope for humoral immune responses. Conclusions::The rare HBV genotype F,as detected in this immune-competent,previously vaccinated patient,has marked sequences differences in the envelope/polymerase gene.Therefore,current HBV vaccines based on genotype A and D may not result in full protective immunity towards viral strains from genotype F.

Keywords:Hepatitis B Virus;Antigenicity;Genotype;Escape mutant;A-determinant region;HBV DNA

1.Introduction

Human hepatitis B virus(HBV)is grouped into eight genotypes which show distinct geographical distributions worldwide and dissimilar clinical outcomes(Norder et al., 1994).Various factors including the genotype or mutations in different HBV genes in?uence the clinical presentation as well as disease progression or response to antiviral therapy (Tacke et al.,2004a;Tacke et al.,2004b;Kidd-Ljunggren et al.,2004).The best possible protection against infection is achieved by a completed series of hepatitis B vaccinations before exposure to the virus.Current vaccines are based on ?Corresponding author at:RWTH-University Hospital Aachen,Medical Clinic III,Pauwelsstr.30,52074Aachen,Germany.Tel.:+492418089249; fax:+492418082455.

E-mail address:frank.tacke@https://www.wendangku.net/doc/b516680546.html,(F.Tacke).recombinant proteins of the small envelope antigen which cover the highly conserved immunodominant region of the surface antigen,called‘a’determinant domain,resulting in protective antibodies targeting this immunodominant epitope (Zuckerman,2000;Poland and Jacobson,2004).After vacci-nation,titer of hepatitis surface antibodies(anti-HBs)of more than10IU/L are considered protective(Poland and Jacobson, 2004;McMahon et al.,2005).

There exist several reports of HBV reactivation which can occur despite‘protective’anti-HBs-titer with the clinical feature of acute HBV infection,especially after immuno-suppression,transfusion or transplantation(Soldan et al., 1999;Kempinska et al.,2005).Only few reports exist of HBV infections among anti-HBs positive individuals without having immunosuppression(Mathet et al.,2006).Here,we report the case of an acute HBV infection by genotype F of HBV–an extremely unusual HBV genotype in Europe–in an

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immune-competent German patient despite a prior successful HBV vaccination and proper anti-HBs titer.Careful virolog-ical analysis unravelled the possibility that current vaccines may not confer full protection against infections with HBV genotype F.

2.Case report

A32-year old Caucasian male,originating German and working as a mining engineer,was referred by his gen-eral practitioner to our Outpatients’Clinic with classical symptoms of acute hepatitis,including jaundice,fatigue and generalised skin rash.Initial aminotransferase activities were 525U/L for AST(normal<50)and567U/L for ALT(nor-mal<30),whereas liver function tests(albumin,protein, cholinesterase,prothrombin time)and blood counts remained normal.Serological tests revealed positivity for HBsAg, HBeAg and anti-HBc IgM con?rming the diagnosis of acute HBV infection.The copy number of HBV DNA was26,700 copies/mL by real-time PCR(Roche).No co-infections by other hepatotropic viruses(hepatitis A,C or D viruses),HIV or herpes viruses(IgM for CMV,HSV,EBV or VZV)and no auto-antibodies(ANA,AMA,ANCA,SMA,SLA,and PCA)were detected.

The patient had received a full course of HBV vaccina-tion using Twinrix?combination HA V/HBV vaccine(Glaxo SmithKline)at the recommended schedule as an adult.The vaccination was completed10months prior to the acute HBV infection.At the time of acute HBV infection,‘protective’anti-HBs antibody titer of50IU/L(AxSYM AUSAB,Abbott Diagnostics)and82IU/L(Enzygnost,Dade Behring)were determined using two independent test systems.The patient denied prior blood transfusions,surgeries,i.v.drug abuse or sexual contacts outside his marriage.His wife tested nega-tive for HBV markers.However,frequent business-related journeys to Spain and Morocco were noted,and the jaundice occurred two weeks after returning from a business trip to Spain.

According to current guidelines for acute HBV infec-tion(Manns et al.,2004),the patient was not treated with antiviral medication.Upon a follow-up visit four weeks later, he reported no more discomfort,and the ALT level had normalized(29U/L).On serological analysis,the patient remained HBsAg positive,but seroconverted to HBeAg neg-ative(and anti-HBe positive);HBV DNA in serum was5040 copies/mL.Upon a next follow-up visit another six months later,the clinical and laboratory remission remained stable; HBsAg and HBV-DNA were then tested negative and unde-tectable,respectively.

3.Virological analysis

During the period of acute HBV infection,HBV DNA was extracted,ampli?ed and sequenced as previously described (Tacke et al.,2004a).A507-bp amplicon covering the HBV S and Pol gene(location:460–966)allowed to determine the HBV genotype and mutations in the S and Pol genes (Schildgen et al.,2006).For phylogenetic analysis,this sequence was compared to40de?ned HBV strains.Align-ment was performed by CLUSTAL X,genetic distance was calculated using the Kimura two-parameter algorithm,and a phylogenetic tree was generated by the neighbor-joining method and bootstraped1000times.Recombination episodes were explored by SimPlot program(Amini-Bavil-Olyaee et al.,2005).

Phylogenetic analysis revealed that the isolated HBV strain classi?ed into genotype F,sub-genotype F1and clus-ter Ib with bootstrap values of99,98and85%,respectively (Fig.1).Results showed that this isolate was closely related to isolates reported from Argentina and Japan.The mean rate of nucleotide divergence between the German isolate and other clusters from genotype F was1.1%(F-Ib)to4.6% (F-II/F-IV),and with other genotypes8.8(genotype H)to 14.3%(genotype C).Simplot and Bootscanning analyses revealed no recombination(data not shown).Based on the Lys122,Lys160and Leu127in the S gene,the isolate possesses the adw4subtype.In the S(particularly in the‘a’determi-nant region)and Pol genes no escape mutants or speci?c substitutions were observed(Fig.2).

4.Discussion

We report the case of an acute HBV infection in a German patient despite prior full schedule vaccination and proper anti-HBs titer.Surprisingly,the patient was infected by an extremely atypical HBV genotype(genotype F,sub-type adw4).The most prevalent HBV genotype in northwest Europe(especially in Germany),North America,and Central Africa is genotype A(Norder et al.,1994),while the origin of genotype F is proposed in the New World,due to its predom-inance in Central and South America(Parana and Almeida, 2005).There are exceptional reports of HBV genotype F from other continents,e.g.single reports from Japan(AB116654), Mongolia(Takahashi et al.,2004)or Poland(Bielawski et al.,2006).In the present case,the route of infection remained vague,as the patient denied any typical risk behaviour.The German patient had worked as a mining engineer in Germany, Spain and Morocco and had returned from Spain prior to the overt acute HBV infection.Therefore,this is most likely the ?rst report of an infection with HBV genotype F from Western Europe or Northern Africa.

Several reports exist worldwide of acute HBV infec-tions despite anti-HBs positivity,especially in immune-compromised,solid organ or bone marrow transplant patients (Soldan et al.,1999;Kempinska et al.,2005)or patients with AIDS(Manegold et al.,2001).By carefully studying the pre-dominant viral species,HBV genome variations were found to be one of the main reasons of acute HBV infection or reac-tivation.For instance,a sudden acute HBV infection among

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Fig.1.The phylogenetic tree was constructed by the Kimura two-parameter matrix and the neighbor-joining method based on the507-bp HBV S gene sequences of41human HBV isolates(one from this study and40from different human HBV reference genotypes).Woolly monkey hepatitis B virus(AF046996)was utilized as an out-group.The numbers represent the percentages of bootstrap replicates(1000replicates)for the node.The scale bar indicates the percentage of nucleotides divergence.The isolate from the German patient is marked by grey square.Results revealed that the German HBV isolate classi?ed in genotype F,sub-genotype F1and cluster Ib with high bootstrap values.

a Brazilian HIV-positive patient with genotype F was asso-ciated with unique substitutions in the S gene and a103-bp deletion in the core gene(Gomes et al.,2004).Similarly, insertions in the HBV core gene were detected in an immune-compromised patient creating a novel binding site for the transcription factor HNF-1(Gerolami et al.,2005).Other observations include recombination between different geno-types(Simmonds and Midgley,2005),and super-infection or coinfection with different viral strains or genotypes(Toan et al.,2006).Interestingly,in case of the German patient, no such apparent major mutations,recombination events or coinfections were detected.

Instead,our patient was fully immune-competent,but developed acute HBV infection despite a‘suf?cient’anti-HBs titer.Positivity for HBsAg despite proper anti-HBs was also recently described in an Argentinian patient(Mathet et al.,2006).In contrast to our case,this patient was a child infected by genotype E of HBV–an extremely exceptional genotype in Argentina–who did not develop clinical signs of acute HBV infection.Furthermore,an amino acid sub-stitution was determined(Leu209Val)in the HBsAg gene, whereas no speci?c mutation could be identi?ed in the Ger-man patient.Coexistence of HBsAg and anti-HBs antibodies is often attributed to an increase in‘a’determinant variabil-ity(Lada et al.,2006),making our reported case without any apparent substitutions in this region remarkable.

Current HBV recombinant vaccines consist of HBsAg proteins containing the‘a’determinant domain of genotype A(subtype adw)and D(subtype ayw),and HBV protec-tive antibodies are targeted towards these immunodominant epitopes(Heijtink et al.,2001).Although no speci?c muta-tions in the‘a’-determinant region of the envelope gene were found for the genotype F isolate in our patient,it is apparent that all genotype F isolates reported in the litera-ture display3–4amino acid variations from these motifs of genotype A or D(Fig.2).Speci?cally,our patient was vac-cinated with the combination HBV/HA V Twinrix?vaccine (Glaxo SmithKline)that is generated from HBV genotype A,subtype adw(Harford et al.,1987).In general,there is a great homology in HBsAg and especially the‘a’deter-minant region between the genotypes,with the exception of the(rare)genotypes H and F(Fig.2).Particularly in genotype F,several speci?c amino acid substitutions exist in the‘a’determinant region(Fig.2,grey boxes)as well as in the HBsAg(Fig.2,arrows)compared with geno-types A or D which may in?uence the protective effect of anti-HBs antibodies.In an antigen–antibody binding study, several substitutions in the viral envelope sequence resulted in evasion of the neutralizing antibody response(Seddigh-Tonekaboni et al.,2000).Therefore,‘protective’anti-HBs antibodies,generated against HBsAg from genotype A and D in recombinant vaccines,may possibly not confer

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Fig.2.The schematic diagram depicts a part of the amino acid sequence of the ampli?ed HBV S-gene from the reported German patient (upper row),alongside all clusters of reported HBV genotypes F and other representative genotypes from A to H.The ‘a’determinant domain of all genotypes is highlighted by the vertical box (amino acids 122–147).Dots indicate identical amino acids.Asterisks designate the stop codon for the HBsAg gene.Arrows show obvious amino acid differences between genotype F and other genotypes.The amino acid substitutions are shown with capital letters.

suf?cient protection against infections with HBV genotype F.

Nonetheless,other particularities of the presented case need to be considered.First,the clinical and virological course of the disease observed after infection with HBV geno-type F was mild,as the acute infection resolved spontaneously and the maximal HBV copy number detected was below 105/mL.This might be explained by a partial protection medi-ated by the antibodies or,alternatively,with a faster (T cell mediated)memory response towards the virus as a result of prior immunization (Rehermann and Nascimbeni,2005).Second,the anti-HBs titer achieved after vaccination (50–80IU/L)in this patient was relatively low,and re-vaccination within one year would have been the appropriate recommen-dation in this case (Poland and Jacobson,2004).The low anti-HBs response,however,is not uncommon,if patients are vaccinated during adulthood (McMahon et al.,2005).In summary,we present the case of an immune-competent,‘successfully’vaccinated patient that developed an acute HBV infection with the rare genotype F.Current vaccines may not confer full protection against rare genotypes,even if no speci?c mutations in the ‘a’determinant epitope are present.It should be considered for future HBV vaccines to comprise immunodominant proteins from all HBV geno-types to cover genetic variability ?aw among different HBV genotypes.

Acknowledgments

This work was supported by the German network of com-petence for viral hepatitis (‘Hep-Net’),the EU grant of Virgil (to C.T.and F.T.)and the START-Program of the Faculty of Medicine,RWTH Aachen (to F.T.).The authors declare that they have no con?ict of interests.

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常见免疫学指标的临床意义

一、抗核抗体谱（ANA谱） 1、ANA定义：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称。 2、ANA分类：抗DNA抗体:抗单链(ds)-DNA抗体抗双链(ds)-DNA抗体抗左旋-DNA抗体抗组蛋白抗体：抗总组蛋白抗体(AHA) 抗H1、H2A、H2B、H3、H4 和H2A-H2B抗体抗非组蛋白抗体：抗核可溶性成分(ENA):抗PM-1、rRNP、Sm、RNP 、SSA 、SSB、Scl-70、Jo-1、PCNA等抗着丝点抗体(ACA) 抗核仁抗体抗其他细胞成分: 指抗细胞浆成分的抗体（ANCA） 3、ANA阳性的定义:一般将超过95％正常人群ANA水平的数值定义为ANA阳性，对大多数实验室而言，通常认为IFANA滴度1：80为阳性。 4、ANA阳性的临床意义:可见于多种临床情况，除了风湿病外，也可见于正常人或非风湿病: (1)健康人:年龄越大,阳性率越高(>60岁的阳性率为20%～25%),但为低滴度,均质型或弥漫型; (2)有SLE、SS或SSc 家族史的一级亲属,有近50%为阳性; (3)肺疾病:原发肺纤维化、原发肺动脉高压或石棉所致的肺纤维化；（4）肝病和血液病:活动性肝炎、原发胆汁性肝硬化、酒精性肝病、白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、ITP或自身免疫性溶血性贫血等; （5）慢性感染: 寄生虫、结核杆菌、麻风杆菌、沙门菌或克雷伯杆菌感染等; （6）其他:Ⅰ型糖尿病, 多发性硬化,终末期肾病,器官移植后等。注意在正常人中一般ANA滴度较低。ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳性并不能确立某种临床诊断，反之，ANA阴性也不能排除自身免疫性病。附正常人% ≧1：40 20-30，≧1：80 10-12 ，≧1：160 5 ，≧1：320 3 临床上如果ANA滴度≥1：1000肯定可以考虑为结缔组织病或者自身免疫性疾病。具体是哪一种疾病，要结合其他临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。如果对初发患者ANA（＋）≤1：320不能肯定，但也能排除结缔组织病或者自身免疫性疾病可能，也要结合临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。一般ANA=（＋1：100）时，临床意义也不大。因为除对标本稀释处理之外，实验室在对Hep细胞和肝片质控板免疫荧光吸收值是以1：100为定标。如血管炎ANA可阳性，但多为低滴度。借用一句话总结。“不怕做不到，就怕想不到”。 5、ANA阴性的意义，除了上述的阳性、假阳性意义外，也要注意阴性的意义，抗核抗体阴性的原因：正常人或非结缔组织病患者，其体内不存在ANA ；疾病初期，ANA含量不足以被测出或临床治疗有效，病情缓解，ANA确实转阴；其他实验室误差，特别是试剂，有时试剂有问题会让你很郁闷，有的病人出现ANA 谱三阳，而且是一段时间内多个病人，或明显的SLE，但抗体就是阴性，让你很郁闷，这时除排除其他情况外，注意一下实验试剂盒，是否是同一批试剂检测的。 6、抗ds-DNA 抗体：对SLE诊断有高度特异性，目前公认为SLE的特异性抗体，并与疾病活动有关，可用于监测SLE病情变化和观察药物疗效。 7、抗Sm:是SLE标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与nRNP抗体共存。 8、抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE 有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高 9、其他ANA谱，抗SSA和抗SSB与Sjogren?s Syndr ome相关，并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞；抗ScL-70为SSC的标记抗体，抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断，抗核仁型抗体常与SSC有关；抗Jo-1是PM/DM的标记抗体；PCNA为SLE的特异性抗体，但ANA阳性且呈斑点型，对荧光法判断PCNA有干扰，因此首先注意排除实验室误差，PCNA在LE患者中阳性率约3-5%，且有报道其与狼疮患者发生弥散性增殖性肾小球肾炎相关,其他结缔组织病人中常为阴性。

重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)

重组乙肝疫苗接种告知书（酿酒酵母）乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种传染病，通过血液、体液和母婴传播。急性肝炎临床症状有疲倦、厌食、恶心、呕吐、皮肤巩膜黄染等。大多数的急性乙肝感染可完全康复，但部分人特别是婴幼儿可成为慢性乙肝携带者，随后可能发展成为慢性肝病、肝硬化或肝癌。我国是乙肝高发国，目前有1. 2亿人携带慢性乙肝病毒，慢性乙肝患者约3000万人。乙肝病毒在体内不断复制使得肝脏发生炎性病变，肝细胞受损，而且还可能恶变成肝硬化和肝癌，威胁生命。在我国，71%的肝癌是由乙型肝炎发展而来的。接种乙肝疫苗是预防乙肝最有效的手段。本疫苗由重组酿酒酵母表达的乙肝病毒表面抗原经纯化，加入佐剂吸附后制成，抗原含量为10ug/0. 5ml。【接种对象】可以在出生后任何年龄段使用，推荐用于处于乙肝病毒感染风险较高的人群，如从事医疗工作的医护人员及接触血液的实验人员。【接种程序】全程接种3针，接种时间分别为0、l、6月，即第一针在出生后24小时内接种；第二针在第一针接种后1个月接种；第三针在第一针接种后6个月接种。【接种反应】常见局部不良反应有注射部位疼痛、红斑和肿胀，大多轻微，一般在兔疫接种2天后消失。常见和偶见的全身不良反应有发热、头晕、头痛、食欲下降、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、肌痛、疲劳、皮疹和瘙痒等。【接种禁忌】对酵母或疫苗任一成分过敏者禁用，患严重发热性疾病、急慢性严重疾病患者禁用。注意：接种时请带上儿童预防接种证和本告知书。备注：《疫苗流通和预防接种管理条例》规定，疫苗分为第一类、第二类疫苗，第一类疫苗由政府免费向公民提供接种，第二类疫苗是公民自费并且自愿受种的疫苗，本疫苗属于第二类疫苗。酿酒酵母乙肝疫苗接种回执（第针）儿童姓名：出生日期：年月日户籍：常住□流动□ 接种当日儿童体温：℃上次接种疫苗后有无异常反应：□有□无有无禁忌症：□有□无阅读上述说明后如自愿接种本疫苗（替代一类疫苗）并按照该疫苗程序接种，请签名确认；如暂不接种，也请签名确认备档，表明您已明确上述疾病的危害。 □同意接种家长（监护人）签名年月日 □不同意接种家长（监护人）签名共接种3针，具体接种程序见上“接种程序”一栏自费年月日

皮肤病免疫学指标的临床意义

常见免疫学指标的临床意义一、抗核抗体谱（ANA谱） 1、ANA定义：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称。 2、ANA分类：抗DNA抗体: 抗单链(ds)-DNA抗体抗双链(ds)-DNA抗体抗左旋-DNA抗体抗组蛋白抗体抗总组蛋白抗体(AHA) 抗H1、H2A、H2B、H3、H4 和H2A-H2B抗体抗非组蛋白抗体抗核可溶性成分(ENA):抗PM-1、rRNP、Sm、RNP 、SSA 、SSB、Scl-70、Jo-1、PCNA等抗着丝点抗体(ACA) 抗核仁抗体抗其他细胞成分: 指抗细胞浆成分的抗体（ANCA） 3、ANA阳性的定义: 一般将超过95％正常人群ANA水平的数值定义为ANA阳性，对大多数实验室而言，通常认为IFANA滴度1：80为阳性。 4、ANA阳性的临床意义: 可见于多种临床情况，除了风湿病外，也可见于正常人或非风湿病: (1)健康人:年龄越大,阳性率越高(>60岁的阳性率为20%～25%),但为低滴度,均质型或弥漫型; (2)有SLE、SS或SSc家族史的一级亲属,有近50%为阳性; (3)肺疾病:原发肺纤维化、原发肺动脉高压或石棉所致的肺纤维化；（4）肝病和血液病:活动性肝炎、原发胆汁性肝硬化、酒精性肝病、白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、ITP或自身免疫性溶血性贫血等; （5）慢性感染: 寄生虫、结核杆菌、麻风杆菌、沙门菌或克雷伯杆菌感染等; （6）其他:Ⅰ型糖尿病, 多发性硬化,终末期肾病,器官移植后等。注意在正常人中一般ANA滴度较低。ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳性并不能确立某种临床诊断，反之，ANA阴性也不能排除自身免疫性病。附正常人% ≧1：40 20-30 ≧1：80 10-12 ≧1：160 5 ≧1：320 3 如果临床上ANA滴度≥1：1000肯定可以考虑为结缔组织病或者自身免疫性疾病。具体是哪一种疾病，要结合其他临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。如果对初发患者ANA（＋）≤1：320不能肯定，但也能排除结缔组织病或者自身免疫性疾病可能，也要结合临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。一般ANA=（＋1：100）时，临床意义也不大。因为除对标本稀释处理之外，实验室在对Hep细胞和肝片

乙肝疫苗事件案例(模拟) (1)

模拟新闻发布会案例——新生儿注射乙肝疫苗死亡案例（模拟新闻发布会案例） 2014年1月5日凌晨1时，我市XX路XX小区住户陈XX在市XX医院顺产一名男婴。接产医务人员按常规为孩子做了检查，男婴为足月儿，健康状况良好。男婴出生后约1小时，即凌晨2时，一名护士为其注射了乙肝疫苗。凌晨3时许，男婴出现呕吐现象，检查发现其背部皮肤出现数个小水泡，当班医师予以抗过敏、止吐、监护生命体等治疗。凌晨5时许，男婴出现呼吸急促、嘴唇发青。家属赶紧向护士求救，孩子被转入重症监护室。继续抗休克、生命支持治疗。1月6日11时许，孩子终因抢救无效死亡。医院出具的临床死亡原因是：休克、呼吸衰竭。1月6日下午15时开始，患方召集30余人到市XX医院讨说法，认为是医院注射乙肝疫苗导致男婴死亡，并质疑医院抢救不及时，措施不得力，要求医院赔偿人民币100万元。医院方耐心进行了解释，并建议患方进行尸体解剖以明确死因。患方不同意尸体解剖。也不同意按正常程序处理男婴遗体。而是将遗体陈列门诊大厅，打横额，打砸医院大厅桌椅、电脑等设施。公安、卫生、市医疗纠纷第三方机构介入调查处理。公安部门带走3名带头闹事人员后，聚集人员逐步散去，男婴遗体转市殡仪馆。患方家属随后单方在“XX网站”发布“新生儿被XX医院打乙肝疫苗杀死”等网贴，

声称将组织更多人员到医院讨说法，到市政府上访。事件发生后，市卫生部门、市疾控部门迅速介入调查处理。据查，男婴注射的是深圳XX生物制品股份有限公司生产的疫苗。不属近期国家禁止使用的乙肝疫苗范围。该疫苗是国家提供的免费疫苗，属于自治区卫生厅统一招标采购的，疫苗全部由自治区疾病预防控制中心按自治区—市—县—接种单位逐级发放，疫苗流通环节温度符合标准要求。该疫苗在XX医院的贮存于2～8度的冰箱中，使用前外观正常。疫苗接种过程符合要求，且该护士已取得预防接种上岗证。

基因工程方法生产乙肝疫苗

重组乙肝疫苗的研制生产过程、理化性质、生物学活性、临床应用国际上先后研制出了第一代血源性乙肝疫苗和第二代基因工程乙肝疫苗。第一代乙肝疫苗主要运用乙肝病毒携带者血清中提取纯化出的的乙肝病毒表面抗原，先后经过减毒处理和添加佐剂后注入人体预防接种。但是由于对血源性疫苗安全性存在顾虑，人们进一步着手开发第二代乙肝疫苗，也就是基因重组疫苗。第一步是分离目的基因，获得目的DNA片段的方法主要有两种，一是直接从细胞基因组中分离，二是人工合成。第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组，成为重组DNA分子，多采用连接酶的方法连接。第三步是基因克隆，即将重组体DNA分子，引进合适的宿主细胞(大肠杆菌、酵母)中增殖。根据所用载体的不同，可选用转化(以质粒作载体时，重组体DNA分子以此种方式进入感受态的宿主细胞，以获得转化子菌落)、转染(λ噬菌体作载体时，构成的重组体DNA分子，以此种方式进入宿主细胞，可转染得到噬菌斑)、转导(λ噬菌体DNA与外源DNA组成的重组体DNA分子，与噬菌体蛋白组装成具有感染力的噬菌体颗粒，即人工包装的噬菌体颗粒，引入宿主细胞)的方法，往宿主细胞引入重组体DNA分子。第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定，即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。因为不是所有的细胞都能获得重组体DNA分子，为了获得摄取了重组体DNA分子细胞，需经筛选，才能将其与未摄取重组体DNA分子的细胞区别开来，并作进一步鉴定。筛选含有重组体DNA分子细胞的方法，一般都是以载体DNA 及目的基因的遗传标记及分子特征为依据，并结合受体细胞的基因表型而建立起来的。由于许多质粒都具有抗生素等药物的抗性标记，因此，在含有一定浓度抗生素的选择培养基上，可以很容易地把摄取了重组体DNA分子，因同时也获得了抗生素抗性的细胞辨认出来。但药物筛选只是一个方面，依据它只能判断质粒载体是否进入了受体细胞，还不能确定受体细胞是否摄取了含有目的基因的重组体DNA分子。对于重组体DNA分子的鉴别，通常是在抽提出重组质粒DNA后，用凝胶电泳法或电镜观察其分子大小，用限制酶酶解，观察其酶切图谱进行。还可采用菌落原位杂交法来进行鉴定，即将菌落从最初生长的平板上转移到硝酸纤维素滤膜上，用碱裂解滤膜上的菌落，使DNA分子游离，变性，并固定在滤膜上，随即用同位素标记的与目的基因互补的DNA或RNA探针杂交，最后通过滤膜的放射自显影鉴定菌落，并从最初生长的平皿上挑选出放射自显影呈阳性的菌落。第五步是基因表达，这是指宿主细胞在大量繁殖过程中外源DNA在宿主细胞中的转录和翻译，表达生成的产物(蛋白质)，最好在细胞内不被分解，而分泌到细胞外面。表达产物若为较小的多肽，或是对细菌蛋白酶极为敏感的蛋白质，形成后，通常即被迅速降解。为了保证外源基因表达产物能分泌到细胞外而不被降解，通常可以把外源基因插入在载体的某些结构基因中间，在这种情况下，表达产物是融合蛋白质，融合蛋白质可以抵抗内源蛋白酶的降解，又可以在细胞信号肽的引导下分泌到细胞外。

免疫学指标联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

免疫学指标联合检测对类风湿关节炎的诊断价值目的探讨免疫学指标类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸多肽抗体（抗CCP）和抗角蛋白抗体（AKA），免疫球蛋白G（IgG）、C3、C4在类风湿关节炎（RA）诊断中的临床应用价值。方法对120例RA患者（RA组）、130例其他自身免疫系统疾病的患者（非RA组）、60例健康人（对照组）同时进行RF，抗CCP，AKA，IgG，C3、C4检测。结果RA组抗CCP、RF、AKA的阳性率均明显高于非RA组和对照组（P＜0.05）；RA组IgG水平较对照组明显升高（P＜0.05）；RA组C3、C4水平与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论RA患者体内存在多种免疫功能紊乱，联合检测免疫学指标对疾病的诊断、治疗和预后有重要的意义。标签：免疫学指标；联合检测；类风湿关节炎类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以关节滑膜炎为为特征的慢性全身性自身免疫性疾病。该病反复发作，可导致关节障碍、甚至残废。早期诊断和应用抗类风湿病变的药物有助于延缓病情的发展，故各国学者一直以来对该病的早期实验室诊断相当重视[1]。本研究将免疫学指标纳入到RA诊断中，以探讨其对RA诊断和鉴别诊断的价值。 1 资料与方法 1.1 一般资料选取2010年1月～2012年10月在本院就诊的RA患者120例，患者均符合美国风湿协会（ARA）在1987年重新修订的RA诊断标准，其中，男性49例，女性71例，年龄20～50岁，平均35.3岁；非RA组：130例非RA的自身免疫系统疾病患者，患者均符合各自疾病的最新国际诊断标准，其中，男性47例，女性83例，年龄23～54岁，平均37.2岁；自身免疫性溶血性贫血（AHA）17例、系统性红斑狼疮（SLE）37例、干燥综合征（SS）18例、系统性硬化病（PSS）11例、强直性脊柱炎（AS）29例、混合型结缔组织病（UCTD）4例、皮肌炎（DM）7例、结节性多动脉炎2例、多肌炎5例；正常对照组：随机抽取来本院体检的健康者60例，男性26例，女性34例，年龄25～52岁，平均（33.6±6.9）岁。 1.2 标本采集所有入选者空腹采集肘静脉血3 ml，2 h内进行3000 r/min，离心20 min后，分离出血清，置入-40℃冰箱保存，待检。 1.3 检测方法 1.3.1 类风湿因子（RF）的检测RF测定用美国Beckman公司生产的

乙肝疫苗营销方案

新型乙肝疫苗市场营销方案报告内容；一，广东省成人乙肝市场概况 (1) 成人乙肝市场现状与特点 (2) 成人乙肝疫苗竞争品种 (3) 成人乙肝疫苗销售渠道二,60ug乙肝疫苗SWOT分析 (1) 优势，劣势，机会，威胁三,60ug乙肝疫苗推广策略 (1)市场分类：乙肝预防性市场，乙肝治疗性市场 ⑵乙肝预防性细分市场策略(POV,成人体检中心，常规接种和普种项目) ⑶乙肝治疗性细分市场策略(医院肝胆内外科，感染科) 四，60ug乙肝疫苗广东市场具体行动方案 (1) 确定阶段性推广目标及方式三个层次：启动期，培育期，成长期(快速增长期) (2) 确定区域性市场开发目标： A，重点POV市场:市，区，县级POV覆盖目标； B，重点医院市场：成人体检中心覆盖目标：一，广东省成人乙肝市场概况 (1) 成人乙肝市场容量和潜力巨大 2008年卫生部乙肝血清流病学调查结果显示：全国15-59岁人群乙肝表面抗原携带率仍然高达8.57%，乙肝抗体阳性率仅为47.38%,过半成人没有乙肝表面抗体的保护。广东省乙肝发病率属全国之最,15-59岁人群4400万(每个年龄段基数100万人)，如按47,38%阳转率计算理论上应有2315万人无乙肝抗体保护,而乙肝新发病人92%-93%都是16岁-60岁之间的人群,表明广东省成人乙肝市场规模和潜力都有较大发展空间 (2) 成人接种乙肝现状分析目前国家免疫规划集中在儿童，对成人采取健康教育，以提高乙肝危害知晓率，形成有效的防治氛围为主的策略，努力提高成人乙肝疫苗接种率，有关调查表明成人接种乙肝疫苗中自愿接种乙肝疫苗占56.86%,单位组织接种占36.74%,医生建议仅占5.32%;在没有接种乙肝疫苗的人群中，不知道需要接种占的比例最高，为45.11%;有94.35%的人愿意免费接种乙肝疫苗.该调查数据表明目前自愿接种和单位组织接种占主导因素. (3) 成人乙肝疫苗竞争品种 GSK安在时20ug(78元/支)，华北CHO20ug(31元/支)，天坛10ug，大连汉逊10ug，瑞士博尔纳20ug。目前最主要的竞争品种:GSK安在时20ug,华北CHO20ug

2020年免疫学指标应用研究进展

范文 2020年免疫学指标应用研究进展 1/ 6

免疫学指标应用研究进展【提要】类风湿性关节炎(ＲA)是以关节滑膜炎为特征，以慢性多发性关节炎为主要临床表现的一种自身免疫性疾病。其新的实验室血清免疫学指标有蛋白类如血清淀粉样蛋白A(SAA)、正五聚蛋白 3(PTX3)、葡萄糖-6 磷酸异构酶(G6PI)、脑信号蛋白 7A(Sema7A)、免疫球蛋白 G4(IgG4)和各种细胞因子类如白细胞介素(IL)-20、IL-21、IL-33、 IL-34、IL-35 等。这些指标可能与ＲA 的发生发展相关，同时也可为治疗及评估预后提供新思路。风湿性关节炎(rheumatoidarthritis，ＲA)为一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为特征的系统性疾病。ＲA 疾病的活动期一般有血小板、血沉、C-反应蛋白(C-reactiveprotein，CＲP)、补体水平升高，类风湿因子(rheumatoidfactor，ＲF)、抗瓜氨酸化蛋白抗体(anticitrullinatedproteinantibodies，ACPA)及抗核抗体阳性等表现。最新的 2010 年ＲA 分类标准和评分系统纳入了新的炎症标志物指标，提高了诊断的敏感性，为早期诊断和治疗提供了重要依据［1］。同时，除了经典的免疫学检查外，随着ＲA 免疫机制研究的深入，有更多的免疫学指标被发现及应用，本文对ＲA 的主要免疫学指标及其新进展进行综述。 1 蛋白类

1．1 血清淀粉样蛋白 A 血清淀粉样蛋白 A(serumamyloidA，SAA)是一种急性时相蛋白，由肝脏产生，主要通过与血浆中的 HDL 结合发挥其生物活性。既往许多研究表明 SAA 在多种自身免疫性疾病中表达升高，尤其当系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus，SLE)、关节炎患者和正常人相比时，SSA 在ＲA 患者中表达水平更高，并且与疾病活动度、CＲP、血沉呈正相关［2］。研究表明，SSA 在ＲA 中的作用机制可能是通过 P38 有丝分裂蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase，MAPK)信号通路来影响B 类Ⅰ型清道夫受体的表达，从而促进血管的生成［3］。还有研究显示，SAA 比 CＲP 更能反映ＲA 的疾病活动度［4］。提示 SAA 可能是与ＲA 疾病活动度相关性更高的生物学指标。 1．2 正五聚蛋白 3 正五聚蛋白 3(pentraxin3， PTX3)在 1992 年被发现，它含 381 个氨基酸，属于正五聚蛋白超家庭。 PTX3 为一种急性期反应蛋白，主要由肝细胞以外的多种细胞产生，正常情况下以备用形式储存在中性粒细胞的特殊颗粒中，当出现组织损伤及微生物感染等炎性反应时才释放出来，发挥其组织修复及重构作用［5－6］。因其与心血管疾病有密切关系而备受关注，但最近研究发现，其在自身免疫性疾病，如ＲA、系统性硬化症、小血管的血管炎等疾病中呈高表达［7］。 3/ 6

乙肝疫苗注射知识宣传

乙肝疫苗的相关知识介绍一、乙肝疫苗的定义：乙肝疫苗是一种预防乙型肝炎的疫苗。即从乙型肝炎病毒携带者血浆中分离乙肝表面抗原(HbsAg)，经处理后而制成。乙肝疫苗是用于预防乙肝的特殊药物。疫苗接种后，可刺激免疫系统产生保护性抗体，这种抗体存在于人的体液之中，乙肝病毒一旦出现，抗体会立即作用，将其清除，阻止感染，并不会伤害肝脏，从而使人体具有了预防乙肝的免疫力，从而达到预防乙肝感染的目的。接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。二、为何要打乙肝疫苗? 注射乙肝疫苗乙肝疫苗可以成功预防乙肝病毒的感染，新生儿一出生就接种乙肝疫苗，基本可以确保将来不得乙肝。现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，成功地预防乙肝，实际就是防硬化、防肝癌第一针。目前乙肝疫苗较便宜，每支几元钱，民众都能接受。乙肝疫苗能预防乙肝的原理简单的说就是：乙肝疫苗其实就是制备乙肝病毒表面的某些有效蛋白，这些蛋白接种人体后，免疫细胞会产生“特异性武器”（抗体）来对抗乙肝病毒，而接种者本身不会被感染。当人体接触乙肝病毒的时候，这种早已存在于体内的“特异性武器”就会立即“开火”，清除病毒，抵御感染。三、接种疫苗后，多长时间需要再次接种? 乙肝疫苗接种后产生的抗体水平随时间逐渐下降。一般接种疫苗，注射3针后1个月97%的人都可测到表面抗体；第2年仍保持在这一水平；第3年降到74%左右，抗体滴度也下降。是否需要再次接种疫苗,主要是要在测定乙肝表面抗体的滴度后，决定何时再打乙肝疫苗。我国的多医学者建议免疫后3年内加强1次为好。四、乙肝疫苗能和其他疫苗同时使用吗? 乙肝疫苗可以和流脑疫苗、卡介苗、白百破、脊髓灰质疫苗、乙脑疫苗同时接种，接种程序按照计划免疫所要求的顺序进行。但是乙肝疫苗最好不要和麻疹疫苗同时使用。五、意外接触乙肝病毒者如何打乙肝疫苗? (1)对未接种过疫苗的接触者，先注射乙肝免疫球蛋白（24小时内），同时在不同部位接种乙肝疫苗。

乙肝疫苗致死突发事件案例分析

乙肝疫苗致死突发事件案例分析姓名：张** 学号：*******

乙肝疫苗致死突发事件案例分析张**(*******) 摘要：公共卫生突发事件是指突然发生，造成或者可能造成社会公众身心健康严重损害的重大传染病、群体性不明原因疾病、重大食物和职业中毒以及因自然灾害、事故灾难或社会安全等事件引起的严重影响公众身心健康的公共卫生事件。本文将对乙肝疫苗致死突发事件进行回顾并结合突发事件应急管理理论进行案例分析，同时结合实际提出应对措施和做出相关评价。关键词：乙肝疫苗；疫苗风险；政府部门；社会媒体引言疫苗作为一种特殊药品，要求实行最严格的监管，其整体安全性是高于治疗性药品的。但公众对疫苗风险认知不足和情绪效应，超出了实际风险很多倍。从2005年安徽泗县疫苗事件到2010年山西疫苗事件，类似事件波及范围在扩大，平息纠纷的难度在加大。政府部门面临的压力也在增加。 1 乙肝疫苗致死事件回顾 1.1 事件主线（1）2013年12月8日，赵某在郫县第二人民医院迎来自己的第二个孩子。11日，这名男婴因呼吸循环衰竭去世。赵某怀疑儿子的去世与接种乙肝疫苗有关。（2）2013年12月17日，一名男婴在深圳南湾人民医院降生，74分钟后孩子父亲却接到了儿子的死亡通知，医院称可能与接种康泰公司生产的乙肝疫苗有关。（3）2013年12月19日中午，深圳市疾控中心报告，深圳市龙岗区南湾人民医院产科有一例新生儿死亡病例，该新生儿死亡前曾接种过深圳康泰生物制品股份有限公司生产的乙肝疫苗，家长怀疑其孩子突发死亡与本次接种疫苗有关。（4）2013年12月21日，浙江温州永嘉县一名出生两个月的婴儿死亡，前一天上午他刚打过产自大连汉信生产的乙肝疫苗。[1] 1.2案件经过及死亡病例 1.2.1案件经过这一事件的最早的曝光是从湖南省婴儿接种疫苗死亡开始的，随后，广东、四川陆续出现类似病例。其中，湖南省常宁市、衡山县、汉寿县共有3名婴儿在接种乙肝疫苗后出现严重不良反应，常宁和衡山的两名婴儿死亡。昨日，广东省疾控中心证实，11月至今，广东中山、江门、深圳、梅州等地先后发生4例类似死亡病例。四川死亡病例情况不详。 1.2.1死亡病例 7例死亡病例中，有6例死因尚在调查中，需尸检报告出来后才能确定，一般需要30个工作日。其中中山病例，广东省疾控中心副主任邓惠鸿表示，经中山市预防接种异常反应调查诊断专家组调查，诊断结论为重症肺炎，与疫苗接种无关。 2应对措施及其事件影响 2.1 应对措施 2.1.1应对措施（1）叫停问题疫苗国家食药监总局、国家卫计委于2013年12月20日下发通知，要求暂停使用深圳康泰公司的

成人接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗后效果观察

2012年4月第2卷第8期·临床研究·成人接种重组（酿酒酵母）乙肝疫苗和重组（汉逊酵母）乙肝疫苗后效果观察孙迎春朱丽君张?智高冬梅董桂华沈阳市疾病预防控制中心免疫规划科，辽宁沈阳 110031 [摘要] 目的观察重组（酿酒酵母）乙肝疫苗和重组（汉逊酵母）乙肝疫苗在成人中的免疫效果。方法对HBsAg、抗HBs、抗HBc三项指标全部为阴性、且未接种过乙肝疫苗的162名16岁以上人群，按照0、1、6的免疫程序接种10μg重组（酿酒酵母）乙肝疫苗和重组（汉逊酵母）乙肝疫苗，于全程免疫1个月后采血，测定血清中抗HBs水平。结果接种重组（酿酒酵母）乙肝疫苗的99人，抗HBs阳转率为94.95%，几何平均浓度为331.08 mIU/mL；接种重组（汉逊酵母）乙肝疫苗的63人，抗HBs阳转率为98.41%，几何平均浓度为270.79 mIU/mL。两组间抗HBs阳转率和几何平均浓度差异均无统计学意义（P＞0.05）。接种两种疫苗均未观察到明显的不良反应。结论重组（酿酒酵母）乙肝疫苗和重组（汉逊酵母）乙肝疫苗均具有良好的安全性和免疫原性。 [关键词]重组（酿酒酵母）乙肝疫苗；重组（汉逊酵母）乙肝疫苗；免疫效果 [中图分类号] R4；R512.6+2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2012）08-169-02 Evaluation on Immunization Effectivity of Recombinant Hepatitis B Vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula Polymorpha) in adults SUN?Yingchun ZHU?Lijun ZHANG?Zhi GAO?Dongmei DONG?Guihua Department of Gynaecology and Obstetrics, Shenyang Center for Disease Control and Prevention,Shenyang 110031,China [Abstract] Objective To observe and compare the immunization effectivity of recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) in adults. Methods Randomly selected 162 healthy subjects aged over 16 years old. They have no a history of hepatitis B vaccine immunization and their HBsAg, antiHBs and antiHBc were all negative. They were vaccinated with 10μg of recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) at 0, 1, 6 months. After a month in completing the 3rd vaccination, their serum samples were collected and antiHBs was detected. Results 99 people were slected to vaccinate recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae). The positive seroconversion rate of antiHBs was 94.95%. The geometric mean concentration of antiHBs was 331.08 mIU/mL; 63 people were slected to vaccinate recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha). The positive seroconversion rate of anti-HBs was 98.41%. The GMC of anti-HBs was 270.79 mIU/mL. The statistical significance of differences were not found in the positive seroconversion rates and the GMCs between two groups (P＞0.05). All the vaccines did not show any severe adverse effect. Conclusion Both recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) are very effective and safe to adults. [Key words] Recombinant hepatitis B vaccine (saccharomyces cerevisiae); Recombinant hepatitis B vaccine (hansenula polymorpha); Immune effect 乙型病毒性肝炎（简称乙肝）是一种严重威胁人类健康的传染病，接种乙肝疫苗是预防和控制乙肝最有效的手段，目前使用较多的乙肝疫苗为重组（酿酒酵母）乙肝疫苗。重组（汉逊酵母）乙肝疫苗于2004年在中国上市，经过多年的观察研究，两种疫苗在儿童中使用的安全性和免疫原性已得到了肯定[1-3]。为比较重组（酿酒酵母）乙肝疫苗和重组（汉逊酵母）乙肝疫苗在成人中的免疫效果，笔者选择了162名健康成年人进行了观察，现报道如下。1 资料与方法 1.1?一般资料选择沈阳市沈北新区未接种过乙肝疫苗，经筛检HBsAg、抗HBs、抗HBc三项指标全部为阴性，无乙肝病史，无乙肝疫苗接种禁忌证的162人为研究对象，年龄16～58。随机分为两组：接种重组（酿酒酵母）乙肝疫苗组99例，重组（汉逊酵母）乙肝疫苗组63例。 1.2?乙肝疫苗来源重组（酿酒酵母）乙肝疫苗为深圳康泰生物制品股份有 CHINA MEDICINE AND PHARMACY 169

乙肝疫苗免疫接种实施方案

黑卫疾发〔〕465号黑龙江省卫生厅黑龙江省财政厅黑龙江省教育厅关于印发补种乙肝疫苗项目管理方案的通知各市（行署）卫生局、财政局、教育局：根据《中共中央国务院关于深化医药卫生体制改革的意见》和《医药卫生体制改革近期重点实施方案（ - ）》要求，从起在全国范围内对1994年至出生的未免疫人群实施乙肝疫苗接种。为确保我省补种乙肝疫苗项目的顺利实施，省卫生厅、省财政厅、省教育厅组织制定了《黑龙江省补种乙肝疫苗项目管理方案》。现印发给你们，请各地各部门结合实际，认真做好全省15岁以下儿童乙肝疫苗补种工作。

黑龙江省卫生厅黑龙江省财政厅黑龙江省教育厅二○○九年九月二日 3

主题词：卫生疾病项目方案通知抄送：卫生部疾病预防控制局，省政府办公厅，省医改办公室，省农垦、森工总局，省疾病控制中心。黑龙江省卫生厅办公室 9月2日印发共印110份补种乙肝疫苗实施方案根据《中共中央国务院关于深化医药卫生体制改革的意见》和《医药卫生体制改革近期重点实施方案（～）》要求，国家定于～，在全国范围内对1994年至出生的未免疫人群实施乙肝疫苗接种。为完成辖区工作任务，特制定本方案。一、项目目标在辖区内对1994年至出生的未免疫人群接种乙肝疫苗，使未接种乙肝疫苗的儿童95%以上得到补种，进一步降低该人群乙肝病毒感染率和乙肝表面抗原携带率。二、项目范围和内容（一）项目内容为1994年1月1日至12月31日出生的未接种或未完成乙肝疫苗全程接种的儿童接种乙肝疫苗。 4

（二）接种原则根据既往接种史，按照国家免疫规划疫苗免疫程序，完成乙肝疫苗全程接种。对既往未完成规定免疫剂次的人群，只需补种未完成的剂次。（三）免疫程序按照0、1、6月的免疫程序实施接种，即：未接种乙肝疫苗者，接种3针次；既往接种不足3针者，补足3针；免疫史不详者视为未接种，须接种3针次疫苗。三、项目组织实施（一）组织领导为15岁以下人群补种乙肝疫苗，是国务院确定的医药卫生体制改革近期重点工作，是先期启动的六项重大公共卫生服务项目之一。是惠及民生，落实国务院新医药卫生体制改革精神的重要举措。各级政府要站在讲政治的高度，充分认识乙肝疫苗补种工作的重大意义，作为当前一项重大事项来抓，加强领导，加强组织协调，加大资金投入，做好舆论宣传，确保各项措施落到实处。（二）实施步骤 1.社会动员和宣传广泛开展社会宣传，动员全社会参与，营造良好的接种实施氛围。宣传活动重点为告知接种活动的意义、接种对象、接种时间和地点等，采取当地群众最易于接受的方式、文字，使受种者获取准 5

基因工程乙肝疫苗的制备

基因工程乙肝疫苗的制备【摘要】基因工程乙肝疫苗是通过构建含有乙肝表面抗原的重组质粒转染酵母细胞，制备乙肝病毒表面的有效蛋白。本文主要介绍基因工程疫苗--重组酵母乙肝疫苗制备的基本原理和工艺流程，以及乙肝疫苗的纯度分析方法。【关键词】乙肝疫苗重组质粒工艺流程 1.基因工程乙肝疫苗产生背景疫苗是人类目前可以彻底消灭某一疾病的唯一武器，接种疫苗被认为是最有效、最经济的疾病预防手段。《发展中国家消灭乙型肝炎免疫接种计划实施指南》中指出：“世界上四分之三的人口生活在中或高乙肝流行区，因此，唯一的策略就是有效地减少乙肝的流行，最终消灭乙肝······” 世界卫生组织肝炎专家及计划免疫全球咨询组认为：控制全球乙型肝炎及减少死亡的策略是开展大规模的婴儿及学龄前儿童的乙肝疫苗接种。我国卫生部制定的目标是从92年开始在全国逐步推行乙型肝炎（HB）计划免疫。92年全国共生产血源疫苗1500万人份，尚不能满足新生儿接种需要，如考虑其他人群，缺口更大。为了实现HB计划目标，进一步为控制全球HB做出贡献，我们必须大规模提高HB 疫苗的产量和进一步提高质量。血源HB疫苗原料为无症状带毒者的HBsAg阳性血浆。血源价格昂贵，供应量有限，采集困难。因此血源疫苗的产量和成本受到原料的限制。利用基因工程重组微生物细胞表达HBsAg生产HB疫苗的技术，原料易得，价廉，适宜进行大规模生产，有可能大幅度降低成本。 2.使用重组酵母的原因和重组酵母构建 2.1使用重组酵母的原因使用重组酵母进行乙肝疫苗的大规模生产，有如下几点原因：（1）.酵母对培养基的要求低，价廉易得。（2）.酵母细胞生长快，故生产率高。（3）.动物细胞生长慢，容易染菌，对操作要求严。（4）.酵母系统容易放大，动物细胞系统放大难。 2.2重组酵母构建 HBV只有3200bp，为双链的DNA,是一个相当小的病毒。其基因组共有四个ORF，编码以下一些蛋白：Core蛋白和pre-core蛋白，Pol蛋白，X蛋白，以及S蛋白（L、M、S）。故重组酵母可用以下方法：（1）.根据已经测定的编码乙肝病毒表面抗原决定簇基因序列，用化学合成法直接合成目的基因或者通过鸟枪法克隆目的基因。用识别相同黏性末端的限制性内切酶将外源DNA和质

两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较

两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较目的比较儿童接种5 μg、10 μg两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗的免疫效果，为儿童乙肝疫苗免疫方案的制定提供参考依据。方法选择笔者所在医院乙肝疫苗接种婴幼儿为观察对象，将200名儿童分组以5 μg组、10 μg组两种剂量，按照0-1-6免疫程序接种重组酵母乙肝疫苗，于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb效价。结果5 μg组、10 μg组血清抗-HBs阳性率分别为90.0%,97.5%，两组间无显著性差异；两组效价组间比较有显著性差异，10 μg组血清抗-HBs效价明显高于5 μg组。结论接种较大剂量(10 μg)的乙肝疫苗后，抗HBs阳性率高且抗体效价也高，有效保护时间会更长。标签：计划免疫；酵母乙肝疫苗；抗体测定病毒性乙型肝炎的治疗至今没有理想的抗病毒药物，乙型肝炎的预防和控制关键依靠接种乙型肝炎疫苗。目前，我国研制开发的基因工程疫苗主要有两种：重组酵母乙型肝炎疫苗和重组（中国仓鼠卵巢细胞，CHO细胞）乙肝疫苗。我国儿童疫苗接种常采取0-1-6免疫程序，重组酵母乙型肝炎疫苗的常用剂量为5 μg/（0.5 ml·支），而重组（CHO细胞）乙肝疫苗的常用剂量为10 μg/（0.5 ml·支）。本组研究主要观察两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗抗体阳性率和抗体的效价。 1资料与方法 1.1一般资料选择笔者所在医院母亲体检HBsAg阴性的小儿为接种重组酵母乙肝疫苗的观察对象，将200名儿童按0-1-6免疫程序，分别以5 μg/（0.5 ml·支）和10 μg/（0.5 ml·支）两种不同剂量分组接种重组酵母乙肝疫苗，于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb。 1.2疫苗与接种按第0个月、第1个月、第6个月为接种时间点，于上臂三角肌肌肉注射接种。 1.3抗体检测方法采用固相放射免疫试剂,检测抗HBs，以HBsAb效价(GMT)大于1 IU/L计为阳性，HBsAb效价(GMT)大于10 IU/L为血清有保护作用。 1.4疫苗安全性观察接种前告知接种对象疫苗可能的副反应，如注射部位有轻度红肿、疼痛，接种当天有轻度头痛、疲劳、乏力等不适，一般2 d内会缓解消失。 1.5统计学处理用SPSS 1 2.0软件统计数据，采用χ2检验和方差分析多组均值的比较。P＜0.05为差異有统计学意义。 2结果疫苗安全性是接种疫苗的前提，本次接种对象中少数出现注射部位肿痛或全

有关山东疫苗事件的19个问题权威解答

有关山东疫苗事件的19个问题权威解答按：山东“问题疫苗”案件持续引发关注。目前，整个案件仍在调查之中。但对于普通人来说，很多人更关心的是自己的孩子是不是接种了这批“问题疫苗”、一类疫苗和二类疫苗有什么区别、哪些疫苗必须接种、过期疫苗是不是有毒……关于疫苗的这一系列问题，我们一一梳理了近期媒体发布的权威意见，供大家知晓。 1、二类疫苗是不是必须打？目前，我国将疫苗分为两类，也就是一类和二类疫苗。据有关部门透露，本次山东“问题疫苗”案中，涉及的全部都是二类疫苗。那么，一类疫苗和二类疫苗有什么区别？按照《疫苗流通和预防接种管理条例》定义，第一类疫苗，是指政府免费向公民提供，公民应当依照政府的规定受种的疫苗。目前，这类疫苗以儿童常规免疫疫苗为主，包括乙肝疫苗、卡介苗、脊灰减毒活疫苗、百白破疫苗等等。第二类疫苗，是指由公民自费并且自愿受种的其他疫苗。比如水痘疫苗、流感疫苗、b型流感嗜血杆菌结合疫苗、轮状病毒疫苗等等。因此，此次涉案的疫苗并不属于必须接种的类别之中。

2、“问题疫苗”等于“毒疫苗”吗？据警方介绍，本案的疫苗是正规疫苗生产厂家生产的，但其未按规定进行冷链存储和运输，部分属于临期疫苗，流通过程中存在过期、变质的风险。北京大学医学部免疫学系副主任王月丹表示，过期或者失效疫苗不能完全等同于“毒疫苗”。他表示，只要是正规疫苗，如果未冷藏或过期，人接种之后直接致命的可能性很小。 3、接种异常反应增多了吗？国家卫生计生委新闻发言人熊煌23日表示，从目前的

研判分析看，未发现疑似预防接种异常反应增多的情况。 4、“过期疫苗”有副作用吗？中国疾控中心副主任、中科院院士高福称，过期疫苗应该是没有起到疫苗该起的作用，但估计不会引发副反应。也就是说，即便疫苗失效了，导致出现这种副反应的可能性也极低。高福称，但不管怎样，这次山东疫苗事件涉嫌犯罪没有疑问。 5、问题疫苗接种后最大的风险是什么？此次的“问题疫苗”的最大风险是失效，即人接种后没有产生免疫。比如，对于狂犬病等致命传染病，接种无效疫苗后无法防止感染，一旦感染就会危及生命。 6、打了“问题疫苗”怎么办？ 21日，山东省食品药品监督管理局公布了此次12种非法疫苗的名单。北京大学医学部免疫学系副主任王月丹建议如果近期接种了名单中的疫苗的群众去医院检查一下免疫的效果。如果没有产生免疫，可以补种疫苗。如果像是狂犬疫苗，风险比较高，建议去医院检测有无免疫应答，没有的话，建议补种合格的疫苗。