胎儿染色体非整倍体无创基因检测试剂盒的临床验证_付有晴

DOI：10．16016/j．1000-5404．201506018

胎儿染色体非整倍体无创基因检测试剂盒的临床验证

付有晴1，娄季武2，赵颖2，蔡婉芳2，颜妙丽3，瞿京辉3，徐婉芳2，何怡2，林洋洋2，叶菀华2，周光纪2，刘彦慧2［523000广东东莞，广东医学院医学检验系1；523000广东东莞，广东省东莞市妇幼保健院产前诊断中心2；518000广东深圳，华大基因生物科技（深圳）有限公司3］

［摘要］目的验证胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）基因检测试剂盒（联合探针锚定连接测序法）在临床检测上的准确性和有效性。方法选择广东省东莞市妇幼保健院的孕妇外周血样本，采用胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）基因检测试剂盒通过联合探针锚定连接测序法检测，并将结果与临床诊断金标准染色体核型分析结果或出生随访结果作对比。对灵敏度、特异性、总符合率和一致性系数Kappa值进行评价，以验证该试剂盒在临床检测上的准确性和有效性。结果共完成有效样本389例，测序法检出T21阳性6例，T18和T13均未检出阳性，与染色体核型分析结果相符，检测为阴性共383例，经电话随访至出生未发现非整倍体胎儿。统计分析结果显示，测序法与核型分析法总符合率为100%，Kappa=1（≥0．8），其中检测T21的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值均为100%；检测T18和T13的特异性、阴性预测值均为100%。结论采用试剂盒通过联合探针锚定连接测序法检测T21、T18、T13的结果准确度高且方法安全，可以在临床上推广使用。

［关键词］试剂盒；非整倍体；联合探针锚定连接测序法；胎儿游离DNA；产前诊断

［中图法分类号］Ｒ714．55［文献标志码］A

Clinical validation of noninvasive genetic testing kit of fetal chromosomal aneuploidy Fu Youqing1，Lou Jiwu2，Zhao Ying2，Cai Wanfang2，Yan Miaoli3，Qu Jinghui3，Xu Wanfang2，He Yi2，Lin Yangyang2，Ye Wanhua2，Zhou Guangji2，Liu Yanhui2（1Faculty of Medical Laboratory Sciences，Guangdong Medical College，Dongguan，Guangdong Province，523000；2Center of Prenatal Diagnosis，Dongguan Maternal and Child Health Hospital，Dongguan，Guangdong Province，523000；3Biological Technology of BGI，Shenzhen，Guangdong Province，518000，China）

［Abstract］Objective To verify the accuracy and effectiveness of a genetic detection kit for noninvasive fetal trisomy（T21，T18and T13，based on combinatorial probe-anchor ligation sequencing，a product of BGI Biotechnology Limited Co．）in clinical practice．Methods Pregnant women who underwent prenatal diagnosis in our hospital were recruited in this study．Maternal peripheral blood samples were collected from each participant，and then processed in accordance with the kit instructions followed by combinatorial probe-anchor ligation sequencing．The results were compared with the results from prenatal karyotyping confirmation and baby born．The sensitivity，specificity，overall compliance rate and consistency coefficient Kappa values were evaluated to verify the accuracy and validity of the kit in the clinical testing．

Ｒesults A total of389valid samples was tested using this genetic testing kit．Six pregnant women were found carrying trisomy21fetuses by sequencing，and none of them carrying trisomy18or13fetus，which consistent with the results of karyotyping．The other383women were negative，which was further validated by

［基金项目］东莞市医学重点资助项目（2013108101021）；广东省省级科技计划项目（2013B022000003）

［通信作者］刘彦慧，E-mail：liuliang71215@163．com

周光纪，E-mail：50059583@qq．com

［优先出版］http：//www．cnki．net/kcms/detail/51．1095．Ｒ．20151124．0853．011．html（2015-11-24）

telephone follow-up after baby born．Statistical analysis showed that the total coincidence rate of our sequencing and karyotyping was100%and the Kappa=1（≥0．8），indicating that the sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value of trisomy21were100%，and the specificity，negative predictive value of trisomy18and trisomy13were100%．Conclusion This genetic detection kit for noninvasive fetal trisomy is of high accuracy and security，and should be worth of extensive application in clinic．

［Key words］testing kits；aneuploidy；combinatorial probe anchor attachment sequencing；cell free

DNA；prenatal diagnosis

Supported by the Key Project of MedicalＲesearch of Dongguan（2013108101021）and the Project of Science and Technology Plan of Guangdong Province （2013B022000003）．Corresponding author：Liu Yanhui，E-mail：liuliang71215@163．com；Zhou Guangji，E-mail：50059583@qq．com

染色体非整倍体胎儿发生率高，对人类危害大，是我国长期重点防治的先天缺陷之一［1－2］。由于无有效治疗措施，通过产前诊断来阻止患儿出生是目前公认有效的方法。但目前的产前诊断是通过羊膜腔穿刺等创伤性技术实现的，存在流产等风险［3－6］。通过高通量基因测序技术对母体血中胎儿游离DNA进行大规模DNA序列分析，可实现对胎儿无创伤性的染色体检测。2011年，该技术已成为广东省临床服务的试行项目，并于2013年经广东省卫生厅批复（粤卫函［2013］53号）正式在临床上推广应用。由于该技术的优越性，备受妇产科医生和孕产妇的青睐。为进一步加强该技术在临床上的应用管理，2014年2月国家食品药品监督管理总局与国家卫计委办公厅紧急叫停基因测序相关产品和技术在临床医学上的使用，并启动全国多中心的大样本临床验证工作。根据课题组安排，本研究作为东莞地区独立研究中心收集样本，采用由深圳华大基因提供的胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（联合探针锚定连接测序法）进行临床验证，评估试剂盒检测的有效性及可行性。

1材料与方法

1．1研究对象

本研究的样本包括：前瞻性样本，即《产前诊断技术管理办法》中规定的具有细胞遗传学产前诊断指征的孕妇［7］，妊娠12周以上；既往样本，即样本库中已有核型分析结果或出生随访结果的高危孕妇血浆样本。排除标准：孕妇自身为染色体异常携带者；有双胎或者多胎的孕妇；孕妇接受过移植手术、干细胞治疗、孕妇在4周之内接受过引入外源DNA的免疫治疗及在1年之内输注过异体血制品者。剔除标准：标本收集或保存不当不能进行检测的样本；数据记录不规范的样本；无临床跟踪结果的样本。

1．2主要试剂和设备

胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（联合探针锚定连接测序法），包括专用试管和人外周血基因组DNA提取纯化试剂盒（磁珠法）等，由华大基因生物科技（深圳）有限公司提供；羊水细胞培养基，由广州达晖生物技术有限公司提供。LongGene PCＲ仪；基因测序仪（BGISEQ-1000）。

1．3孕妇外周血采集与处理

1．3．1前瞻性样本患者签署知情同意书后，在羊膜腔穿刺之前无菌抽取孕妇外周静脉血5mL，EDTA 抗凝，轻微颠倒采血管4次并及时将采血管放入4?冰箱中暂存，样本于8h内在2 8?条件下1600?g 离心10min，在冰盒上将上清液分装到多个2．0mL离心管中；分离得到的上清液在2 8?条件下16000?g 再次离心10min，在冰盒上将所得上清液转入新的2.0mL离心管中，每个离心管转入600μL血浆，所得上清液即为血浆样本，分离后的血浆样本保存于－80?条件下，并在60d内进行试验。

1．3．2既往样本在样本库中已有染色体核型分析结果或出生随访结果的高危孕妇血浆样本；血浆样本使用普通EDTA抗凝管采集，按照要求进行血浆分离，分离后的血浆样本保存于－80?条件下不大于2年。

1．4无创性非整倍体检测方法

使用人外周血基因组DNA提取纯化试剂盒（磁珠法）提取血浆游离DNA，进行末端修复后，在DNA 片段的末端加上特定的接头，使用LongGene PCＲ仪扩增两端带有接头的DNA片段，进行环化反应后最终获得对应样本的DNA文库，将所得样本的DNA文库进行质量检测后，在基因测序仪（BGISEQ-1000）上进行测序，将测序数据比对到人参考基因组（NCBI build36），统计21、18、13号染色体的有效数据量用于胎儿染色体非整倍体疾病21-三体综合征、18-三体综合征和13-三体综合征的判断。

1．5胎儿染色体核型分析

常规采集孕妇羊水20mL，通过细胞培养行G显

带染色体核型分析，并按照人类细胞遗传学国际命名体制标准进行核型分析诊断。

1．6随访方法

前瞻性病例在预产期后第56天开始电话出生随访，对既往病例进行电话随访，具体内容包括：婴儿出生体质量、妊娠结局、体检结果、新生儿疾病筛查结果等。1．7数据统计和分析

对收集的孕妇外周血标本进行随机排列并编号，采用试剂盒检测后再揭盲，检测结果与染色体核型分析结果对比。收集数据录入Excel2003，采用SPSS 13．0统计软件进行一致性Kappa检验，评价试剂盒的灵敏性、特异性、总符合率和一致性。

2结果

2．1研究病例

共收集东莞市妇幼保健院孕妇样本391例，剔除2例（1例无核型报告，无临床跟踪结果；1例样本保存不当，经过建库QC检测不合格）。有效样本389例（已达到东莞地区要求的样本量），其中前瞻性样本133例，为2014年2－5月期间具有产前诊断指征的孕妇，既往样本256例。

2．2试剂盒检测结果

389例孕妇均成功通过胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）基因检测试剂盒（联合探针锚定连接测序法）检测，通过测序及比对分析，包括阳性检测结果6例，均为T21高风险，异常风险率达1．54%；阴性检测结果383例（98．46%）。

2．3试剂盒检测结果与染色体核型分析结果比较389份临床样本均成功进行了羊水穿刺染色体检查，检出T21阳性6例，核型为47，XN，+21，而T18和T13均未检出阳性。对比结果分析显示，经试剂盒检测T21的灵敏度、特异性、总符合率均为100%（＞98%），Kappa=1（≥0．8）；检测T18及T13的特异性和总符合率均为100%（＞98%），由于无T18及T13阳性，故不统计T18、T13的灵敏度和Kappa值。

2．4出生后随访结果

在389例孕妇中，检测为阴性共383例，经电话随访至出生未发现非整倍体胎儿。

3讨论

目前，对于大多数出生缺陷尚无有效的治疗方法，及时、准确的产前诊断是唯一有效预防畸形儿出生的技术手段。传统的超声筛查和各种孕妇血清生化指标分析主要是检测T21和一定范围的T18，由于是通过检测与染色体非整倍体的相关因素来评估胎儿染色体的风险值，具有较高的假阳性率。已报道的检出率仅75% 96%，而假阳性率高达5% 10%［8－18］，且受孕周影响较大。此外，对于筛查阳性的病例，需行绒毛膜或羊膜腔穿刺等有创性检查进行最终确诊，可能给孕妇和胎儿造成不可逆的伤害。因此，急需一种更安全、准确、快捷的检测方法来满足目前临床的这种迫切需求。Lo等［19］首次发现母体外周血存在胎儿游离DNA 片段，为无创产前基因检测开辟了道路。

无创产前基因检测相对于传统的超声筛查和各种孕妇血清生化指标分析，检出率高且假阳性率更低。2015年由华大基因主导的对146958例样本基于大规模并行测序的无创产前基因检测结果显示，对T21、T18、T13检测的灵敏度分别为99．1%、98．2%、100%；特异性分别为99．95%、99．95%、99．96%。T21的假阳性率为0．05%，阳性预测值为92．19%；T18的假阳性率为0．05%，阳性预测值为76．6%；T13的假阳性率为0．04%，阳性预测值为32．84%［20］。由于该技术具有对胎儿无创伤、敏感性和特异性高等优点，是一种高准确性的胎儿染色体筛查技术，备受医疗界和广大孕产妇的关注，发展较快。但随之而来的问题也凸显出来：测序策略多，包括鸟枪法测序、靶向大规模并行测序等；设备类型多，包括Illumina高通量测序平台、Life公司的Ion Torrent测序平台以及华大基因的BGISEQ测序平台等；每种技术的适应证不一致，使遗传咨询复杂化；试剂耗材各异，不同公司推出的技术所使用的试剂耗材各异；其他包括由于技术和市场竞争等出现的一系列相关问题。由于这些问题已使临床上发生一些医疗纠纷，提示我们必须进行质量控制和加强管理，以促进该技术的健康发展。为此，2014年2月国家食品药品监督管理总局与国家卫计委办公厅紧急叫停基因测序相关产品和技术在临床医学上的使用，要求对技术进行规范审批。

本研究采用胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）基因检测试剂盒，利用联合探针锚定连接测序法通过对血浆中游离DNA进行末端修复、接头连接、PCＲ反应、环化反应后进行DNA测序，将测序数据与人类参考基因组进行比对。共检测有效样本389例，剔除样本2例（1例因无核型报告及临床跟踪结果；1例因样本保存不当，建库QC检测不合格）。成功检测出6例染色体非整倍体异常，均为T21高风险，异常风险率为1．54%，最后均经过金标准核型分析确诊为T21，与核型结果有较好的一致性；检测结果阴性者383例，经电话随访至出生均未发现非整倍体患儿。本研究所采用

的试剂盒对T21的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值均为100%；对T18及T13的特异性、阴性预测值均为100%；检测结果具有较高的准确性，可在临床推广应用。由于本研究临床样本检测中无T18及T13阳性者，因此对T18、T13的检测还需要更多的临床样本进行进一步的验证。

综上所述，无创产前基因检测技术在非整倍体筛查上具有其他筛查技术无可比拟的优越性，虽然该技术的大规模推广还受制于价格限制，但随着高通量测序的不断发展，其作为普通的筛查技术在临床应用只是时间问题。

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（收稿：2015-06-04；修回：2015-06-25）

（编辑汪勤俭）

无创dna产前筛查都检测哪些项目

无创dna产前检测都有哪些项目？95项全 什么是无创dna产前检测？ 无创DNA产前检测，是一种非侵入性的胎儿染色体异常检测技术，采用第二代高通量DNA测序技术和结合生物信息学分析，只需抽取孕妇的静脉血，便可以预先知道胎儿患有21三体综合症（唐氏综合症）、18三体综合症（爱德华氏综合症）、13三体综合症（巴陶氏综合症）的风险率。 检测准确率高达99.9%，假阳率更低于0.1%。同时也可检测性染色体非整倍体综合症以及染色体缺失症等。是检查胎儿是否为唐氏儿的一种产前筛查手段。无创dna产前检测都有哪些项目？ 香港卓信/医/疗（v亻言fchkdna）无创dna产前检测最早怀孕10周就可检测，在技术上也是非常的成熟，也是很多孕妈妈最信赖的一种检测方式，它可以检测23对染色体，检测95项内容，其中有6项三倍体综合症、4项性染色体异常综合症、84项微缺失及微重复综合症以及XY染色体检测(男女检测)。

香港无创dna产前检测项目（95项全）：6种三倍体综合症: Trisomy21(Down Syndrome唐氏综合症)* Trisomy18(Edwards Syndrome爱德华氏综合症)* Trisomy13(Patau Syndrome巴陶氏综合症)* Trisomy9(9号染色体三倍体) Trisomy16(16号染色体三倍体) Trisomy22(22号染色体三倍体) 4种性染色体异常综合症+XY染色体: 45,X(XO)(Turner Syndrome透纳氏综合症) XXY(Klinefelter Syndrome柯林菲特氏综合症) XXX(Triple Syndrome三X综合症) XYY(XYY Syndrome XYY三体综合症) 84种缺失和重复综合症 1.染色体1p31重复综合症 2.染色体1p32-p31缺失综合症 3.染色体1p36缺失综合症 4.染色体1q41-q42缺失综合症 5.染色体2p12-p11.2缺失综合症 6.染色体2p16.1-p15缺失综合症 7.裂手裂足症5型

基因检测话术

基因检测话术 【1】什么是基因检测？ 答：基因检测的全称是“疾病易感性基因检测服务”。所谓疾病易感性是指由遗传决定的易于患某种或某类疾病的倾向性。具有疾病易感性的人一定具有特定的遗传特征，简单地说就是带有某种疾病的易感基因型。通过与正常人基因进行杂交配对检测即可得出结论，遗传基因检测是在大量数据的基础上进行的。6国科学家，14年，30亿美金【2】基因检测的必要性基因的预防性检测就是基因检测。国家卫生部2005年7月11日向全国发出的《中国健康人口基因检测科学社会工程》中指出―基因检测是预防疾病最科学、最有效的手段。‖说明了通过基因检测预防我国人民的常见病、多发病以及重大疾病和重大疾病的患病风险有着非常重要的紧迫性。比方查出我们携带了放射线的敏感基因那么我们就要注意了，尽量避免相关射线等环境因素对身体造成的伤害特别在得了癌症时禁止使用放疗等治疗手段癌症80%是因为长期接触致癌物所致，所以要想远离癌症，要做到以下几点：别抽烟，别喝酒、别吃烧烤、炒菜别放油，吃清蒸或水煮。别吃咸菜、腌菜、泡菜、腊肉。别吃奶制品、干果类、隔夜饭别吃，剩下了都要倒掉、买车要买二手车，三手车更好、买房子别装修，住毛坯房、不要接触油漆和农药、化学制品等、手机常年关机，电脑扔掉，要是能做到以上这些，就能远离癌症了。好像是笑话，这就说明明知道有些东西是有害的，但我们做不到远离，要是真的能做到了，有些人会说干脆死了算了。所以要想真正的做到健康预防，要做到简单有效。所以通过基因检测，能告诉我们体内那些基因是正常的，哪些是有变异的。如果检测结果绝大多数是正常的，只要别太过量，这一生基本就不会发生什么重大疾病。如果检测结果显示你有些基因对某些物质的分解能力很弱，别人可能没事，可你也许只接触一点就有可能打开癌症的大门，启动控制癌细胞的开关，诱发你的致癌基因。例如基因检测显示我们对亚硝胺很敏感，那么让我们不吃或少吃如腌菜、咸菜、泡菜或腊肉的东西，我们是不是就可以做到啊。这就是最大程度的保留了我们生活的快乐和享受的同时，又让我们清晰的了解到谁是我们身体的职业杀手，所以就可以有针对性的远离这些对我们不利的有害物质。 【3】我公司的资质？ 南方医科大学前身为中国人民解放军第一军医大学，创建于1951年，本学科所开展的生物芯片研究，既具有重要的理论意义，对生命科学、临床医学、新药筛选、中药现代化等多学科领域具有辐射和带动作用；同时也具有广泛的应用前景，为临床基因诊断、病原体快速检测、遗传性病症的早期检测与优生优育，农业病虫害检测、食品检疫、环境监测等领域的研究提供了强有力支持，并起到重要的推动作用。我公司是南方医科大学基因检测东三省唯一总代理。 【4】与其他检测公司相比的优越性？为什么与我合作，与我合作的优势？ 我公司是南方医科大学基因检测东三省唯一总代理，同时是广东家安东北分公司，店家享受厂家价格。从价位到服务，从身体养生到口服指导，都可享受最低价位，最权威服务。 【5】怎样让你信服？ 山西省使用已痊愈的甲流病人的血液和已注射疫苗的人的血液治愈了后来发生的所有甲流患者，现在的卡介苗， .帮助病人确定发病阶段、基因启动表达的量、疾病的严重程度以及确定和指导医生对其疾病进行个性化用药并可对患者提供合理化的治疗和合理化的用药方式。 2.筛选和制备出有效抗体应对各种急性、暴发性病毒流行性疾病的应急抗体制备和注入性治疗以达安全、有效的救治性治疗之目的。我们去医院看病看的是蛋白质之后的阶段也就是发病阶段一经诊断出就是已经有了，晚了他个人、家庭和他所热爱的事业都惨了。因为目前国大部分医院还不能做全面的DNA检测所以医院的医生还不能避免―以人试药‖

胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒(高通量测序法)注册技术审查指导原则(2017年第52号)

附件 胎儿染色体非整倍体（ T21、 T18、 T13） 检测试剂盒（高通量测序法）注册技术审查指 导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对胎儿染色体非整倍体 （T21、T18 、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册申报资料 的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审 评提供参考。 本指导原则是针对该类试剂的一般要求，申请人应依据产品的 具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相 应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行 充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注 册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满 足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详细阐明理由， 并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资料和验证资料，相 关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下 制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展， —1——

本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 胎儿染色体非整倍体（Fetal Chromosome Aneuploidies ）中 的21 三体、 18 三体、 13 三体（ Trisomies 21、 Trisomies 18、Trisomies13 ，即 T21 、T18、T13）是临床上最常见的染色体非整 倍体疾病。其对应的分别为 21-三体综合征（又称唐氏综合征，先天愚型 或 Down 综合征）、18-三体综合征（又称 Edwards 综合征）和 13-三体 综合征（又称 Patau 综合征），发病率分别约为 1/700、1/6000、1/10000，患儿绝大多数存在严重智力障碍及器官畸形。 产前筛查和产前诊断是为避免产生遗传缺陷患儿提供的手 段。常规的产前筛查方法包括：早孕期的超声与血清学联合筛查和中 孕期母体血清学筛查。筛查结果为高风险的孕妇经建议经产前诊断进 行最终确认，由孕妇知情选择。胎儿染色体异常的产前诊断金标准 为介入前产前诊断手术 ,是指通过绒毛取材术 /羊膜腔穿刺术 /经皮脐 血管穿刺术，取相应细胞采用细胞生物学方法对 胎儿染色体进行核型分析。 高通量测序方法检测胎儿染色体非整倍体的原理是：孕妇母体 血浆中存在胎儿游离DNA （cell-free DNA ，cfDNA ），长度约为 75bp— 250bp，几乎全部来源于胎盘的滋养层细胞，其浓度和 孕周密切相关并以一定比例（ 5%— 30%）稳定存在于母体外周血 浆中。高通量测序方法通过取母体血浆提取包含正常母体和胎 —2——

染色体异常基因检测

染色体异常基因检测 染色体 染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体。人类体细胞有23对染色体，其中22对为男女所共有，称为常染色体；另外一对为决定性别的染色体，男女不同，称为性染色体；男性为XY，女性为XX。 染色体异常 体细胞或性细胞内染色体发生异常改变称为染色体异常，可分为数目异常和结构异常两大类。染色体异常可以自发地产生，称为自发突变；也可以通过物理的、化学的和生物的诱变作用而产生；还可以由亲代遗传所致。 染色体异常是导致出生缺陷、先天性遗传病、自然流产、不孕不育等的重要遗传因素。新生儿染色体异常的发病率为1/60。 常见的染色体微缺失/微重复综合征有300种，多会导致不同程度的发育异常和智力障碍，常伴有五官、内脏、四肢等方面的畸形，严重危害患者健康，给家庭和社会带来极大负担。 染色体异常基因检测 核子基因基于新一代高通量测序仪开发的染色体异常检测方法，可对流产组织、脐带血、绒毛、羊水、外周血等多种来源的样本进行测序分析，一次性检测23对染色体非整倍体、300种常见微缺失/微重复综合征及其他100kb以上的染色体异常，全面排查流产、胎儿异常、新生儿/儿童表型异常、不孕不育原因。 临床应用： 1、流产组织染色体异常检测：查明反复流产、异常妊娠的原因，指导再次生育。 2、胎儿染色体异常检测：排查胎儿异常的原因。 3、新生儿/儿童染色体异常检测：为发育异常、智力障碍，多发畸形等患儿排查染色体异常因素，为疾病确诊和治疗提供指导信息。 4、成人染色体异常检测：排查不孕不育、不良孕产史的遗传因素。 ????

技术优势： 1、全面覆盖：一次性检出23对染色体非整倍体和300种常见染色体微缺失/微重复综合征。 2、分辨率高：可检出100kb以上的染色体微缺失/微重复和低至5%的嵌合体。 3、准确度高：检测准确率>99% 4、自动解读：对检测到的微缺失/微重复，自动关联国际主流染色体异常数据库（Decipher、ISCA、OMIM、Clinvar）进行解读。 检测适用人群： 1、反复性流产，需要查明流产原因并确认再次生育方案的家庭。 2、超声显示结构异常或宫内发育迟缓的胎儿及父母。 3、临床表型为发育异常、智力障碍、多发畸形等患儿及父母。 4、具有染色体疾病家族史的夫妇及胎儿。 5、曾生育染色体疾病患儿的夫妇。 6、不孕不育或有不良孕产史的夫妇。 ????

华大基因、达安基因、贝瑞和康三大无创DNA检测技术平台比较

华大基因、达安基因、贝瑞和康三大无创DNA检测技术平台比较点击数：7561录入时间：2014-6-6[打印此页][返回] 2014年2月，国家食药监总局和卫计委联合发布通知，暂停基因测序临床应用。而在临床医学上，基因测序应用最广泛、最成熟的是无创产前基因检测，尤其 是产前唐氏综合征筛查。 相比于传统技术，无创产前基因检测仅需抽取少量孕妇外周血，用高通量测序 技术即可准确分析胎儿是否患有染色体疾病，具有安全、快速、检测周期短等 优势，已逐渐被中国大众所接受。据统计，无创产前基因检测目前在中国已经 积累了超过40万例临床应用。 “叫停令”直接影响了国内多家实施基因检测的公司，但所幸的是，“叫停” 并不是完全停止，通知第二条规定：“基因测序诊断产品应按规定经食品药品 监管部门审批注册，并经卫生计生行政部门批准技术准入方可应用。” 中国当前市场使用的测序仪均不符合这一条件。为促进无创产前基因检测在中 国市场尽快获批，各大测序服务提供商开始通过高通量基因测序仪的“国产化”，来满足现有的监管法规要求。 贝瑞和康此次联合Illumina共同生产新型测序仪，并向食药总局申请注册，使得Illumina公司的测序平台进入了中国的注册审批程序。 据财新网消息，除贝瑞和康外，当前正在向食药总局申请注册的“国产”测序 仪包括：华大基因的BGISEQ1000（基于CG的测序平台）、中山大学达安基因 股份有限公司的DA8600（基于Life Technologies公司的Ion Proton测序 平台）。 这些公司都是国内无创产前检测的领头公司。现在，他们站在差不多同一条起 跑线上，将在中国市场上进行搏杀。他们之间的竞争，将会走向何方？我们可 以从各自使用的技术平台和申报国家医疗器械注册证情况探知一二。 竞争激烈“国产化”将走向何方？ 当前，全球市场上测序仪最主要的提供商是美国的Illumina公司和 Life Technologies公司，我国市场上的基因测序仪也几乎被这两家公司垄断。达安基因、华大基因、贝瑞和康等国内公司在无创产前检测领域竞争的背后， 实际上是Life Tech与Illumina两大技术平台的PK。 一、Life Tech/Illumina两大技术平台PK

流产组织染色体异常检测

流产组织染色体异常检测 流行病学: 据估计，人类妊娠中自然流产的发生率为50%～60%，且大多都发生在孕早期。引起自然流产的因素众多，如遗传、免疫、血型、感染、解剖、内分泌、环境等，所以准确找到流产原因并有针对性的进行临床指导就显得尤为重要。而这其中，超过一半的孕早期流产都是由遗传缺陷所导致的，其中胚胎染色体数目异常和结构异常是最主要的两个原因。数目异常有三体、三倍体及X单体等；结构异常有染色体断裂、倒置、缺失和易位。染色体异常的胚胎多数结局为流产，极少数可能继续发育成胎儿，但出生后也会发生某些功能异常或合并畸形。若已流产，妊娠产物有时仅为一空孕囊或已退化的胚胎。 目前临床对于流产遗传因素分析，并没有清晰一致的检测方案，往往检测之后还是不能明确病因。而新基因格医学检验所的流产组织染色体异常检测可明确流产是否由遗传因素中的染色体异常所导致，以及确定异常大小和定位，从而帮助临床医生科学地解释相关临床问题，降低习惯性流产的发生率及其给家庭成员尤其是孕妇带来的生理、心理伤害。 导致胚胎染色体异常的危险因素： 1.遗传因素： 2.抗胚胎抗体阳性 3.宫内环境异常 4.环境因素：如孕期接触电离辐射，化学物品和微生物感染。 检测技术: 流产组织染色体异常检测，通过采集流产组织、刮宫组织、引产组织等样品，从中挑取由受精卵发育成的胎儿、胚胎或绒毛等细胞提取DNA，然后对其进行下一代高通量测序(NGS)，并通过生物信息学分析，即可准确分析流产样本染色体数目异常及5M以上的染色体缺失/重复异常的状况。通过这种对流产组织染色体异常状况进行分析，再结合夫妻双方的遗传背景，即可辅助分析造成流产的遗传因素，为后续的诊断治疗提供科学依据，从而将有助于寻找到流产发生的根源所在，便可提示医生从更科学的角度合理的指导夫妇再次备孕。 下一代高通量测序技术NGS优势： 1、适用性广：可检测几乎所有自然流产、人工流产甚至稽留流产组织样本； 2、检测全面：一次性覆盖全部23对染色体，大大提高阳性检出率； 3、成功率高：无需细胞培养、制片、杂交等常规繁琐操作，干扰因素少，检测成功率高； 4、准确率高：阳性样本验证检出率大于99%； 5、分辨率高、拓展性强：全基因组扫描，可检测5MB以上缺失/重复，并可发现新的缺失/重复片段和基因遗传多态； 6、快速高效：同时进行多样本多位点检测，过程自动化。 流产组织染色体异常检测试用人群： 不良妊娠的孕妇； 反复流产的孕妇； 孕期接触过电化学辐射或受到感染的孕妇； 任何关注胎儿健康的孕妇。 服务流程： 检测咨询—签署知情同意书—样本采集—DNA提取—上机测序及信息分析—生成检测报告—报告解读及发送 检测周期： 自收到样本后10个工作日出检测报告。

胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒(高通量测序法)注册技术审查指导原则(2017年第52号)

附件 胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册技术 审查指导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对胎儿染色体非整倍体 （T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本指导原则是针对该类试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详细阐明理由，并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下 制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展， —1—

本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 胎儿染色体非整倍体（Fetal Chromosome Aneuploidies）中的21三体、18三体、13三体（Trisomies 21、Trisomies 18、Trisomies13，即T21、T18、T13）是临床上最常见的染色体非整倍体疾病。其对应的分别为21-三体综合征（又称唐氏综合征，先天愚型或Down综合征）、18-三体综合征（又称Edwards综合征）和13-三体综合征（又称Patau综合征），发病率分别约为1/700、1/6000、1/10000，患儿绝大多数存在严重智力障碍及器官畸形。 产前筛查和产前诊断是为避免产生遗传缺陷患儿提供的手段。常规的产前筛查方法包括：早孕期的超声与血清学联合筛查和中孕期母体血清学筛查。筛查结果为高风险的孕妇经建议经产前诊断进行最终确认，由孕妇知情选择。胎儿染色体异常的产前诊断金标准为介入前产前诊断手术,是指通过绒毛取材术/羊膜腔穿刺术/经皮脐血管穿刺术，取相应细胞采用细胞生物学方法对胎儿染色体进行核型分析。 高通量测序方法检测胎儿染色体非整倍体的原理是：孕妇母体血浆中存在胎儿游离DNA（cell-free DNA，cfDNA），长度约为75bp—250bp，几乎全部来源于胎盘的滋养层细胞，其浓度和孕周密切相关并以一定比例（5%—30%）稳定存在于母体外周血浆中。高通量测序方法通过取母体血浆提取包含正常母体和胎 —2—

开展无创产前基因检测项目工作实施方案

开展无创产前基因检测项目工作实施方案 为保障母婴健康，降低出生缺陷风险，提高我市出生人口素质，根据《中华人民共和国母婴保健法》和《X省产前诊断技术管理实施细则》有关规定，按照《中共X市委办公室X市人民政府办公室关于明确市委市政府X年十项重点民生工程及责任单位的通知》(X办〔X〕12号)要求，今年开始在全市育龄妇女中开展无创产前基因检测工作。 开展无创产前基因检测项目，能够尽早发现唐氏综合征、爱德华氏综合征、帕陶氏综合征等三种胎儿染色体非整倍体异常，避免先天性智力低下、生长发育迟缓、五官四肢内脏畸形、多流产或出生后不久死亡等。此项工作将本着“政府引导，知情自愿，科学规范”的原则，将出生缺陷干预关口前移至筛查环节，与国家免费孕前优生健康检查项目对接，解决生育政策调整后群众“生得好”的问题，从而有效降低出生缺陷发生率，提高出生人口素质。 一、服务对象、机构、内容 (一)服务对象及检测时间 1.夫妇一方具备X市本地户籍且符合计划生育政策，并按规范接受孕产妇健康管理服务(国家基本公共卫生服务项目)的孕妇。 2.妊娠时间为1+02-2+66周，月经不规律者以B超确定孕周的孕妇。 3.符合条件的妇女，按照市委、市政府制定的惠民政策，每孩次享受一次优惠的无创产前基因检测服务。

(二)服务机构 市妇幼保健院、县级妇幼保健计划生育技术服务机构(县妇幼保健院)、华大基因X医学检验所、省卫计委审批的产前诊断中心。 (三)服务内容 优生健康教育、产前咨询、无创产前基因检测等服务。 1.优生健康教育 向婚前和早孕夫妇传播优生科学知识，增强出生缺陷预防意识。由承担基本公共卫生服务的婚前、孕产期保健技术服务机构负责通过优生指导、优生咨询、优生宣传等多种方式，积极做好婚前和孕期预防先天性缺陷、遗传性疾病的健康教育，并发放《无创产前基因检测服务卡》(以下简称《服务卡》)。在《孕产期保健登记本》上做好相关登记。告知到市妇幼保健院或县级妇幼保健计划生育技术服务机构(县妇幼保健院)接受相关检测服务。2.无创产前基因检测标本采集对符合条件的孕妇进行采血，并按检测要求做好标本的储藏及运输。由市妇幼保健院和县级妇幼保健计划生育技术服务机构(县妇幼保健院)负责对符合享受此项目条件的孕产妇进行血样标本采集，并做好宣传咨询、登记，与孕妇签订《胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测临床申请单》、《检测知情同意书》、《检测医疗保险知情同意书》(以下简称保险书)，检测结果发放、解读、异常病例的转诊和检测档案的管理。 二、服务流程

2016年无创产前筛查和诊断(NIPT)分析报告

2016年11月出版

正文目录 1、无创产前筛查和诊断（NIPT）：精度高、风险低、无流产风险 (3) 2、NIPT 全球发展状况分析 (4) 2.1、主要地区发展 (4) 2.1.1、美国 (4) 2.1.2、欧洲 (6) 2.2、发展状况 (7) 2.3、市场规模及格局 (8) 3、NIPT 我国市场分析 (11) 3.1、发展历程 (11) 3.2、市场格局 (12) 3.3、规模展望 (13) 3.4、我国NIPT企业与国外企业的差异 (14) 3.5、我国各地无创产前基因检测（NIPT）相应政策 (15) 3.5.1、福建卫计委无创产前定价1400元，目前最低 (15) 3.5.2、深圳市NIPT纳入医保 (15) 3.5.3、湖北省NIPT定价1460元/次 (15) 3.5.4、江苏物价局NIPT定价价2210元/次 (15) 3.5.5、重庆市NIPT纳入医保 (16) 3.5.6、四川发改委定价NIPT定价2400元/次 (16) 3.5.7、贵州省高龄单独两孩孕产妇出生缺陷基因筛查享受全免费政策 (16) 3.5.8、湖南省：计划生育特殊家庭可享免费产前诊断，但未对孕妇无创产前基因检 测纳入医保进行规定 (17) 3.6、最新规范通知出台，NIPT发展驶入新蓝海 (17) 3.7、国内NIPT市场商业模式分析 (19) 4、未来基因测序发展趋势：拓展辅助生殖和癌症等领域 (20) 5、投资策略与建议 (20) 6、风险提示 (20) 图表目录 图表 1：NIPT 的原理介绍 (3) 图表 2：NIPT替代传统三体筛查技术指日可待 (7) 图表 3：美国主要 NIPT 公司介绍 (9) 图表 4：国外NIPT公司概况 (10) 图表 5：我国NIPT市场情况概述 (13) 图表 6：我国关于 NIPT 的政策变化 (13) 无创产前筛查和诊断（NIPT）：精度高、风险低、无流产风险 无创产前筛查和诊断（NIPT, Non-Invasive Prenatal Testing）是一种非侵入性产前检测,即通过采集孕妇外周血提取胎儿游离DNA 的方式，精准检测胎

高龄孕产妇无创DNA产前诊断的应用

高龄孕产妇无创DNA产前诊断的应用 摘要目的:对高龄孕妇采用无创DNA产前检测技术（NIPT）检测胎儿染色体，研 究NIPT技术对诊断胎儿染色体非整倍体的意义。方法:选取618名高龄孕妇进行 无创DNA产前检测。采用高通量测序技术对孕妇外周血中胎儿游离DNA进行检测，对染色体异常的孕妇进行羊膜腔穿刺手术。对羊水细胞进行培养后，进行G 显带染色体核型分析比较分析NIPT检测结果和核型分析结果。结果:在618名高 龄孕妇中，有18名孕妇检测异常，具体为：6名孕妇21-三体高风险，2名孕妇 13-三体高风险，10名孕妇性染色体异常（5名47，XXY/XXX;2名45，XO；3名47，XYY）。其中16名孕妇进行羊水穿刺检查，染色体检查结果为：6名21-三体，1名13-三体，4名47，XXY/XXX；3名47，XYY，2名孕妇羊水穿刺结果正常。对 检测结果进行比较后可知：NIPT技术对21-三体检出率为100％，而对13-三体检 出率为50％；在性染色体非整倍体检测中，NIPT技术对核型为47，XXY/XXX的检出率为100％，而对核型为45，XO的检出率却很低。结论:对高龄孕妇采用NIPT 技术检测胎儿染色体，能有效检测出21-三体及性染色体数目增加，但对13-三体 及性染色体数目减少的检出率较低；且对NIPT检测结果异常的孕妇需要进行羊膜腔穿刺手术，避免孕妇流产。 关键词：高龄孕妇；无创DNA；产前诊断；染色体核型 由于国家调整了计划生育政策，在全面放开二孩后高龄孕妇的数量不断增加。高龄孕妇的卵子质量较低，导致胎儿容易产生染色体异常。因此，医护人员应对 高龄孕妇进行产前诊断引起足够的重视。目前，传统的产前诊断方法已不能满足 孕妇及其家属的需求，无创DNA产前诊断技术具有安全、简便、检出率高等特点，逐渐成为高龄孕妇产前诊断的主要方法[1]。本次研究对在我院进行NIPT的618 名高龄孕妇的临床资料进行总结，将NIPT检测结果和羊水穿刺结果进行比较，旨在研究NIPT技术对高龄孕妇产前诊断的临床意义。 1.资料与方法 1.1临床资料 选取2018年9月-201年12月在我院接受治疗的618名高龄孕妇，年龄为 35-45岁，平均年龄为38.69±2.81岁，怀孕周期为12-24周。所有孕妇均知晓本 次研究内容，且自愿配合，并签署了知情同意书。 1.2研究方法 （1）、采集血样：抽取孕妇10ml外周血，充分混匀后在4℃下低温保存， 并在6h内进行血浆分离。 （2）、提取游离DNA：采用血浆游离DNA提取试剂盒法提取经水浴解冻的 血浆中的游离DNA。 （3）、制备文库和测序：补平游离DNA缺口，并对部分部位进行磷酸化和 去磷酸化，然后使用连接酶连接标签和接头，以形成标准文库。利用高通量测序 技术对游离DNA进行分析。 （4）、数据分析：比较测序所得的DNA序列与人的参考基因组，计算染色 体Z值，并检测胎儿染色体非整倍体异常。Z值在-3.0~3.0间为阴性，Z值＞3.0 为三体高风险，Z值＜3.0为单体高风险。对检测结果为阴性的孕妇进行其他产前 检查，其余孕妇则需进行羊膜腔穿刺手术以确保检测准确。 （5）、染色体制备：经羊膜腔穿刺后，用22号穿刺针抽取羊水，抽取的前 2ml废弃，然后抽取30ml羊水分装于3个试管并送往实验室培养、收获、制片，

染色体疾病的产前诊断知识讲解

染色体疾病的产前诊 断

染色体疾病的产前诊断 时间:2013-01-31 来源:网络综合整理 染色体病是指由染色体异常引起的疾病。据估计染色体异常占出生儿的 1/150～1/120。产前诊断中最常见的染色体异常有：染色体数目异常、染色体结构异常和微结构异常染色体疾病。据文献报道我国每年出生染色体异常的新生儿约10万人，在活婴儿中染色体异常者占0.3%。因此，普及染色体疾病的产前筛查和产前诊断，对降低出生缺陷的发生有着非常重要的意义。 下面就常见的染色体疾病及染色体病的产前筛查和染色体疾病的产前诊断作简单的阐述。 一、染色体数目异常疾病 染色体数目异常是临床上最主要的染色体病，其中以13号、21号、18号，X、Y染色体异常最为常见，占染色体非整倍体畸变95%以上。这些染色体异常占全部染色体病的80%～90%。常见的可以进行产前诊断的染色体病有以下几种。 （一）21三体综合征 21三体综合征（trisomy 21 syndrome）又称先天愚型综合征和唐氏综合征（Down syndrome），是胎儿和新生儿中最常见的非整倍体染色体异常。在新生儿中的发病率为1/600，在受精卵中为1/150。主要的临床特征为：智力低下，特殊面容，眼裂上斜，鼻梁扁平，舌大、外伸和流涎。约40%患者伴有先天性心脏病。 患者核型绝大多数（92.5%）为单纯型21三体，即47，XX，（xy），＋21； 4.8%为易位型（如14/21、21/22易位）；少数为嵌合型。单纯型21三体几乎都是新突变，与父母核型无关，它是减数分裂染色体不分离所致。单纯型21

三体的发生率与母亲的生育年龄密切相关，高龄孕妇生育21三体患儿的比例明显升高。 （二）18三体综合征 18三体综合征又称为Edward综合征，是一种严重的畸形，出生后不久死亡。患儿临床表现为头面、手足有严重畸形，头长而枕部凸出，犹如冬瓜样，称冬瓜头。眼距宽，眼球小，手紧握拳，足突出，向背部翘起，呈帆船状脚，95%的病例有先天性心脏病。 细胞遗体学检查80%患者核型为47，XY（或XX），＋18；另外10%患者为嵌合体，即46，XY（或XX）/47，XY（或XX），＋18；其余为各种易位，主要是18号与D组染色体的易位。 （三）13三体综合征 13三体综合征又称Patau综合征。新生儿中的发病率为1∶25 000。临床表现为智力发育障碍、小头、眼球小、前脑发育缺陷，常伴有腭裂。 细胞遗传学检查80%的病例为游离型13三体，核型为47，XX（或XY），＋13。其余的为嵌合型或易位型。易位型通常以13号和14号染色体罗泊逊易位居多。 （四）性染色体异常综合征 1. klinefelter syndrome综合征：又称先天性睾丸发育不全综合征。临床表现主要是小睾丸、无精子产生，97%患者不育。患者男性第二性征发育差，身材高，四肢长，可有智商低，精神异常及精神分裂症倾向。细胞遗传学检查绝大多数患者核型为47，XXY。大约有15%患者为嵌合体，其中常见的为46，XX/47，XXY；46，XY/48XXXY。额外的X是由于亲代减数分裂时X染色体不分离的结果。 2. XYY综合征：在男婴中发生率为1∶900。患者男性表型正常，身材高大，易兴奋，常有攻击行为。睾丸发育不全，生精过程障碍。XYY核型是父亲精子形成过程中第二次减数分裂时发生Y染色体不分离的结果。

基因检测相互问答及其规范标准答案

十个问题及答案 问题1：基因检测有什么用途？ 回答： 1. 辅助临床诊断：很多疾病表现出来的症状类似，临床上很难进行鉴别诊断，容易混淆。若是通过基因检测，在基因层面找到致病原因，可以辅助临床医生鉴别诊断甚至纠正临床上的诊断。 举例：某基因检测机构通过对一个临床疑似“先天性白内障-小角膜综合症”的家系进行了基因检测，最后在基因层面发现他们家系患的其实是“玻璃体视网膜脉络膜病”而非“先天性白内障-小角膜综合症”，帮其纠正了临床诊断。 又如：糖尿病中有一型特殊类型的糖尿病为“单基因糖尿病”（由单个基因突变引起，为孟德尔遗传病）由于其基因存在缺陷，使得患者在代谢特征、临床表现和治疗方案等方面，都与1型或者2型糖尿病患者有着明显的区别。但是，由于认识上的不足，单基因糖尿病常常被误认为1型或2型糖尿病。英国一项流行病学的调查显示，有80%的青春晚期糖尿病(MODY)患者未被正确诊断。在欧美国家的单基因糖尿病的研究中，发现有10%的1型糖尿病和2-5%的2型糖尿病其实是单基因糖尿病。所以，通过对正常人群体，特别是有糖尿病家族史的人群，进行单基因糖尿病致病基因的筛查，可以尽早发现基因缺陷，从而把单基因糖尿病患者从1型或者2型糖尿病患者中区分出来。 2.携带者筛查：最常见的是唐氏综合征的筛查。传统的唐氏综合征筛查是利用血清学筛查进行的，检出率为65%-75%，容易漏检。而无创产前基因检测则可以准确地筛查出唐氏综合征患儿，还包括对18三体综合征和13三体综合征的筛查。此外，针对具有某些单基因遗传病（尤其是隐性遗传病）家族史的高危人群进行相关致病基因的筛查，可以及时发现该家族中致病基因的携带情况，进而分析后代患病的风险，为家属成员提供有效的遗传信息，防止缺陷基因向下一代遗传。 3指导治疗：现在医生开药的遵循的是经过广泛测试后提供的剂量信息。但所有的药物在测试过程中都是以群体作为样本的，因此药物剂量在对于大多数人是合适的。但是由于每个人的基因不同，会导致正常剂量下的药物对一些人产生致命的作用。导致原本挽救健康的药可能反而对健康造成伤害。这样的现象就称为药物不良反应（adverse drug reactions, ADR）。如药物warfarin是一种抗凝剂，是防止血液凝固的一种药物，病人服用这种药物可以大大减轻血栓形成的危险。但是抗凝剂服用过多，血液便不容易凝固，会造成出血，甚至有生命危险。在我们身体中有一种酶叫CYP2C9，它可以代谢这种抗凝剂，把它分解成小分子物质，使之失去抗凝血作用。正常情况下warfarin发挥作用后被代谢，完成它的药物治疗作用，也并不对人身体造成危害。但是，如果一个人CYP2C9发生突变，代谢功能降低，是弱代谢型(poor metabolizer)，就意味着warfarin代谢过慢，在身体中不断积累，最终可能造成出血倾向。基因检测的作用就在于此：它可以先判定某人的CYP2C9是否发生了突变，并判定他属于哪种代谢类型，然后再根据代谢类型决定药物剂量。如果是强代谢型，那就适当提

无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术的应用

无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术的应用 无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术是20多年来基因组学首个真正意义上能够进入临床应用领域的创新性突破，以下是搜集的一篇探究无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术的，供大家阅读查看。 研究发现，孕妇外周血浆中存在胎儿游离DNA(cffD-NA)，长度在75bp和250bp之间，平均为166bp。怀孕4周可检出，8周后含量上升并稳定存在(7周建立胎儿胎盘循环)，其含量在5%～30%之间，能够通过高通量方法稳定检测出来。cffDNA以核小体形式稳定存在，在分娩后2h内快速消失从而不会影响下一胎的检测。因此，可以作为非创伤性产前检测的理想材料。 xx年8月，我院与中国医学遗传中心，湖南家辉遗传专科医院，北京贝瑞和康生物技术有限公司合作开展了“无创胎儿染色体非整倍体产前检测”，xx年8月-xx年8月，对257例孕13周～26周孕妇外周血进行了胎儿游离DNA检测。 检测的257例孕妇外周血中，253例正常，4例异常。其中:1例提示21-三体阳性，羊水结果证实(无假阳性，无假阴性)。1例提示18-三体阳性，羊水结果证实(无假阳性，无假阴性)。1例提示13-三体阳性，羊水结果正常(有假阳性，无假阴性)。1例提示母体性

染色体异常，对孕妇外周血进行染色体检查，结果为46，XXX/46，XX(60%∶40%)(无假阳性，无假阴性)羊水结果提示胎儿正常。阳性率为1.56%，灵敏度99%以上。 3.1国外临床试验结果:自1997年发现母体血液中存在胎儿游离DNA之后，无创伤的直接检测胚胎染色体异常成了一个重大的研究课题。xx年 ___中文大学和美国斯坦福大学的研究人员相继发表了应用高通量测序技术从母体血浆DNA中检测胎儿21三体的论文。xx 年 ___中文大学、美国Sequenom公司和VerinataHealth公司先后开展了应用高通量测序方法检测胎儿21、18、13号染色体的临床试验。 3.1.1 ___中文大学于xx年1月发表于英国医学 ___(BritishMedicalJournal)的文章表明，通过对753例高危孕妇的血浆DNA进行检测，准确检出86例唐氏综合征胎儿，灵敏度大100%，3例假阳性，无假阴性。 3.1.2Sequenom公司的临床结果于xx年3月发表于AJOG，该机构对449例高危孕妇的血浆DNA进行了检测，准确诊断出39例T21样本，1例假阳性，无假阴性，与 ___中文大学的结果非常相似。

无创产前基因检测知情同意书 (1)

无创产前基因检测知情同意书 无创产前基因检测是通过采集孕妇外周血(5ml)，提取游离DNA，采用新一代高通量测序技术，结合生物信息分析，得出胎儿患染色体非整倍性疾病（21-三体又称唐氏综合征，18-三体，13-三体）的风险率，准确率为99%以上；具有无创取样、无流产风险、高灵敏度，准确性高的特点。该方法最佳检测时间为孕早、中期，且不需要实施穿刺手术，避免了孕妇疼痛、出血及胎儿流产、感染等风险，是非常安全的检测方法。 无创产前基因检测是一项安全性高的早中孕期无创性非介入性的产前筛查技术，进行该检测你需要知情以下内容： 1、无创产前检测抽血与常规静脉采血方法相同，采集5mL静脉血用于检测；采血不需要空腹，只要正常饮食、作息即可。 2、该方法检测时间为孕12周（超声推算或确认）之后，最佳检测孕周为12~24周。 3、无创产前检测可在孕12周开始进行，但鉴于当前医学检测技术水平的限制和孕妇个体差异等原因，即使在检测人员已经履行了工作职责和操作规程的前提下，仍有可能会出现假阳性或假阴性；如果孕妇孕周推测不准，或孕周过小（实际孕周<12周），可能影响检测结果的准确性。 4、无创产前检测仅针对21三体综合征(唐氏综合征)、18三体综合征(爱德华氏综合征)、13三体综合征(帕陶氏综合征)三大染色体疾病。 5、无创产前检测不适于检测：胎儿染色体中的嵌合体型、易位型、微缺失、微重复等结构性异常；怀有多胞胎的孕妇；孕妇本人为染色体非整倍体疾病患者；孕妇接受过移植手术、干细胞治疗；孕妇在4周之内接受过免疫治疗；孕妇在一年之内输注过异体血制品等。 6、由于孕妇个体化差异导致的血浆中胎儿DNA浓度过低，可能需要重新抽血取样；若不重新抽血取样则不能获得退费。 7、本检测结果仅供参考，不作为最终确诊结果。如检测结果为高风险，需进行产前诊断及遗传咨询；如胎儿患疾病的风险为低风险，建议继续进行常规产检；相关解释需咨询临床医生。 孕妇方已知晓上述所有内容，已充分了解该检查的准确性和局限性，对其中的疑问已得到医生的解答，经本人慎重考虑愿意进行该项检测，并承担因检测带来的相关风险。孕妇方承诺提供的个人资料真实可靠；同意在去掉所有个人信息后，检测数据可供研究参考并同意将该检测样本用于非赢利性的科学研究。为确认上述内容为双方意思的真实表达，医方已履行了告知义务，孕妇方已享有充分知情和选择的权利，签字生效。 孕妇同意（签字）医生（签字） 身份证号日期年月日日期年月日

唐氏筛查和无创dna的区别

唐氏筛查和无创dna的区别 唐氏筛查，一般怀孕的女性都知道是怎么一回事，而且这也是必须要做的事情，目的就是为了排查胎儿是否有其他的问题。唐氏筛查很有必要做，那么无创DNA呢？无创DNA又是什么来的呢？下面我们就一起来看看唐氏筛查和无创DNA的区别吧！ 唐氏筛查 通过抽取宝妈的血清，检测母体血清中甲型胎儿蛋白（AFP）、人类绒毛膜促性腺激素（β-hCG）和游离雌三醇（uE3）的浓度；需结合预产期、体重、年龄和采血时的孕周等，计算生出先天缺陷胎儿的危险系数； 适用孕周：孕14-20周+6天 ① 优点：经济实惠、安全方便、孕检必查项目、无创伤。 ② 缺点：检出率及准确性低，假阳性率高。唐筛高危的，经确诊最后很大一部分都不是。无创DNA检测 通过采集孕妇外周血10mL，提取游离DNA，采用新一代高通量测序技术，结合生物信息分析，即可准确得出胎儿发生染色体非整倍体，即21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征的风险率。 适用孕周：孕12-26周 ①优点：无创、检出率准确率高、假阳性率低。 ②缺点：费用较高，检测面窄、对双胎和嵌合型染色体异常无法检测、但无创的检测范围已覆盖了常见染色体非整倍体疾病。 羊水穿刺 羊水穿刺是在唐筛检查结果显示胎儿患有唐氏综合症的危险性比较高的前提下，进一步进行确诊性的检查方式之一。在超音波的导引下，将一根细长针穿过宝妈肚皮，穿过子宫壁，进入羊水腔，抽取羊水进行综合查验；确认前期诊断为高危唐氏综合症的宝妈，需要进行羊水穿刺检查。 适用孕周：孕16-22周+6天 ① 优点：能一次检测46条染色体、还能进行基因芯片及单基因疾病检测、准确性高是目前检测范围最广和准确性最高的产前诊断技术之一。 ② 缺点：有一定风险、宫内感染、母婴血液接触的风险、由于该项检查有0.5%的几率会导致流产，所以一般不建议宝妈们选择这项检查哦。 唐氏筛查与无创DNA的区别，相信看了上文都有一定的了解了，很多人如果觉得这两者是没有区别的，那么就要再好好研究研究了。另外，羊水穿刺的坚持方法，我们也有介绍了，我们也可以去了解清楚是怎样一回事。

染色体异常是什么原因引起的

染色体异常是什么原因引起的 *导读：染色体异常是什么原因引起的？染色体异常也称染色体发育不全，染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体，染色体病即染色体异常，故而导致基因表达异常机体发育异常。…… 染色体异常是什么原因引起的？染色体异常也称染色体发 育不全，染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体，染色体病即染色体异常，故而导致基因表达异常机体发育异常。 染色体异常的病因有以下几种： 1、物理因素：人类所处的辐射环境，包括天然辐射和人工辐射。天然辐射包括宇宙辐射，地球辐射及人体内放射物质的辐射，人工辐射包括放射辐射和职业照射等。 2、化学因素：人们在日常生活中接触到各种各样的化学物质，有的是天然产物，有的是人工合成，它们会通过饮食、呼吸或皮肤接触等途径进入人体，而引起染色体畸变。 3、生物因素：当以病毒处理培养中的细胞时，往往会引起多种类型的染色体畸变，包括断裂、粉碎化和互换等。 4、遗传因素：染色体异常常可以表现为家族性倾向，这提示染色体畸变与遗传有关。 5、自身免疫性疾病：自身免疫性疾病似乎在染色体不分离中起一定作用，如甲状腺原发性自身免疫抗体增高与家族性染色

体异常之间有密切相关性。 染色体异常分分类为：数量畸变包括整倍体和非整倍体畸变，染色体数目增多、减少和出现三倍体等；结构畸变染色体缺失易位倒位、插入、重复和环状染色体等又可分为常染色体畸变以及性染色体畸变和先天性睾丸发育不全等。 染色体异常治疗困难疗效不满意，导致的先天性智能障碍的治疗，也尚无有效药物，可尝试中药治疗与康复训练。所以该病的预防很重要，染色体发育不全治疗困难疗效不满意预防显得更为重要预防措施包括推行遗传咨询、染色体检测、产前诊断和选择性人工流产等，防止患儿出生。孕妇应该定期做产前检查，如果胎儿有问题，至少能及早发现。抽羊水诊断是能检验胎儿是否患有先天染色体缺陷的其中一个方法。

基于孕妇游离DNA的胎儿染色体非整倍体检测试剂质量控制技术评价指南(高通量测序法)征求意见稿

基于孕妇游离DNA的胎儿染色体非整倍体检测试剂质量控制技术评价指南（高通量测序法） (征求意见稿)

1.前言 对孕妇外周血中游离DNA进行高通量测序（Next Generation Sequencing, NGS)，并分析孕妇外周血中携带的胎儿的染色体突变异常风险，特别是染色体非整倍体变异的检测，是近几年出现的无创产前筛查新技术。 本指南主要是对企业研发、质检和产品应用关于质量控制和分析的指导性文件，应在遵循相关法规的前提下使用本指南。 本指南旨在规范申请人在胎儿染色体非整倍体检测试剂盒（高通量测序法）的产品设计开发、性能评价的诊断试剂技术指标和要求，并为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考，不代替注册申报资料的准备及撰写的指南和规范。 本指南仅作为技术指导性文件使用，需根据技术的发展和实际需要进行适当的更新，本指南不具有法律强制性。 2.适用范围 本指南所述的胎儿染色体非整倍体检测试剂（Noninvasive Prenatal Test, NIPT）是 采用低深度全基因组的高通量测序法，指的是直接通过对孕妇外周血中游离DNA进行文库构建、上机测序的第二代高通量测序方法，并不完全适用于高深度的目标片段测序法，SNP突变测序法和表观遗传学甲基化的测序法等其他高通量测序法。和本指南不相适应的其他高通量测序法，可以参照本指南的性能评价、质量控制的要求，并通过企业参考品，证明和本指南的要求具有实质性的等效性。 对于第三代单分子测序或其他测序方法，在文中并未涉及，但高通量测序技术发展迅速，第三代单分子测序方法在企业内部参考品设置、性能评估等，如有适用的方面，可以参照执行并证实实质性的等效性。