食品中胡椒碱的高效液相色谱仪(HPLC)检测方案

食品中胡椒碱的高效液相色谱仪(HPLC)检测方案f-06 胡椒碱（piperine）是一种生物碱，分子式C17H19NO3。存在于多种胡椒属植物果实中，为其辛辣味成分之一，但胡椒的辛辣味主要来自它的异构体佳味碱。在商品黑胡椒和白胡椒中，胡椒碱的含量为5％～9％，有时高达11％。无色单斜棱柱状晶体。熔点130～133℃。溶于乙酸、苯、乙醇和氯仿，微溶于乙醚。

胡椒碱是一种广谱抗惊厥药，对小鼠实验性电惊厥有良好的对抗作用，对戊四氮、印防己毒素、士的宁，以及脑室内注射筒箭毒碱、谷氨酸等引起的惊厥发作和听源性发作，都有不同程度的对抗作用。胡椒碱对蝇类的毒性比除虫菊高。

赛智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检测可提供食品中胡椒碱的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于胡椒及胡椒制品的测定，仅供广大用户参考。

以下是食品中胡椒碱测定的详细检测方法。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

LC-10Tvp高效液相色谱仪；

Vertex 色谱柱250mm×4.6mm×5μm；

组织捣碎机；

样品筛；

万分之一天平；

棕色圆底烧瓶，配套冷凝回流装置。

1.2 试剂

甲醇：色谱纯。

乙醇：95%（质量分数）。

胡椒碱标准物质：纯度大于98%。

胡椒碱标准溶液：准确称取10.0(精确到0.1)mg胡椒碱标准物质于10mL棕色烧杯中，用乙醇溶解，转移至10mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

2 测定原理

试样中的胡椒碱用乙醇提取，用高效液相色谱紫外检测器检测，外标法定量。

3 色谱条件

色谱柱：Vertex 色谱柱250mm×4.6mm×5μm；

流动相：甲醇+水(77+23)；

流速：1 mL/min；

进样量：20μL。

检测波长：343nm

4 试样溶液的制备

用组织捣碎机将胡椒打碎，然后用样品筛将打碎的样品筛过。称取过筛的试样0.2-0.5克，置于圆烧瓶中，加入50ml乙醇，装上回流冷凝管，加热至沸，保持回流3小时，冷却至室温后，将溶液虑入棕色容量瓶中，用乙醇少量多次冲洗抽提瓶和过滤器，洗液一并虑入容量瓶中，并加乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm 微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。

从胡椒油树脂试样中称取0,05克-0.1克试料，置于100ml棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀，经0.45μm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定。

5 结果分析

在添加0.25g/kg-5.0g/kg范围内，回收率在89%-106之间，相对标准偏差小于5%。

色谱图如下图所示，其峰型较好，满足日常检测要求。

胡椒碱标准色谱图

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2012.08.11