最新rtpcr实验步骤资料
RT-PCR实验有三步：抽提RNA，RT，PCR。
要求：
1.做RT前必需测RNA浓度，逆转录体系对RNA量还是有一些要求，常用500ng或1ug。
2. RT按要求做，一般不会出太大问题。
3. PCR，按常规。但如需扩长片段，则对前两步要求较高，需要有完整的cDNA存在，不是单改变Mg2+浓度、退火温度能解决的。
1）RT和PCR时的引物设计是不是一定要先知道目的基因的序列？必须
在RT时，引物设计有3种方法即a：Random 9mers；b：Oligo dT-Adaptor Primer；和c：特异的下游引物。如果用a和b方法，是扩增的所有的cDNA（理论上），还要用此产物做PCR 的模板继续扩增。
如果用c方法，那么要去那里查它的序列呢？https://www.wendangku.net/doc/bf7354619.html,
问题：
在做RT-PCR遇到一怪现象，即对同一动物不同组织扩增同一段基因，结果从一种组织中可以扩出我的目的基因，条带非常的好，而另
一组织在同样的条件下却得到许多非特异性的条带，尝试其他条件同样无法得到满意的结果，百思不得其解！（注：已肯定该基因在两种组织中都表达，且内参照在两种组织都可扩增出来）
从这两种组织中提取的RNA的量是不一样的，我测过吸光度，差异还很大，会不会和这有关呢？请高手指教！
解答：
1.RT-PCR有两种做法：
条件具备的话可用kit进行一步法进行；若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想，条带特异性强且无拖尾现象，我推测是体系更加单一比较利于PCR的进行，当然也可能是我买的kit不太好。（promega）。
2.RT-PCR应具备的条件
高质量的RNA（保留后可做5‘，3’RACE）；引物的（最好产物短点）；若涉及粗略定量的话还应考虑RNA的浓度或是cDNA的浓度（如果由内标分子更好，但我发现其实很不容易将RNA的浓度以及内标分子的表达量调整的完全一样）；体系的均一性等。
3.RACE
我做过RACE（3’RACE是宝生物的Kit；5‘RACE是Gibico），但现在再进行另一个同源基因的3‘RACE时却怎么也P不出来，这两个基因是由同一对引物扩增出来的，其中一个已经获得了全序列（RACE的方法），而另一个基因的3’UTR却增么也扩不出来，我推测是不是该基因的3‘UTR太长的缘故，我都快绿了，有无
RT-PCR的常用内标b－actin 和GAPDH的使用有选择性吗？比如不同的细胞，不同的刺激。
有关内参：
RT-PCR内参照可以在一个管子里做（那样也是图好看一些），最好分开两管，把除了引物之外的mixture统一配，拍照后，算目的基因和内参的比值，这就是基因表达的相对浓度。
问：我曾经作过同一管的PCR，内有actin 和目的基因引物。虽然可见到两条均一条带但图片质量不理想（而且酶量、Mg2+加倍）。请教mxbdna2003 ，你是如何处理同一管的PCR的各成分的浓度？答：it should determined the amount of RNA. but it not for the quantitity of the PCR. it just was convienent to guess the amount ot the template<(for RT and PCR) and bettrer for publication and editor if he don not know the preocedure much. but the amount just using "accurate piptte" is wrong. it shoud be remembered to do the inner control of housekeeping gene everytime.
在同一管中做RT，其实没有什么问题，不需要taq魅加量，taq酶本来就是过量的^-^，（平时做pcr的时候，完全可以再省一些taq
酶的，半斤八两就可以了，我想这肯定再很多贴子里应该都谈到了。Mg就跟不能变了，一变整个体系就变了。能看到均一条带就很好了。关键是摸，十八摸（太少，只争朝夕，开个玩笑）虽然用不着，但是摸上3、5摸总是必要的，首先遥分开摸，然后再一起摸，直到摸的好了，还要考虑比较的不同的模板中的量，所以我们不建议再同一管中进行，因为还有互相竞争抑制的问题，即使不同基因之间。
有关内参的建议：
一定要做内参的，每一次，我想。不作内参的结果是不可信的
电泳可以不一起跑，没有关系，计算的是相对表达程度，着我在好几封帖子里都谈了，再说一边我得观点，1、半定量和定量RT-PCR做的都是基因相对表达量，不是绝对表达量，除非你能准确知道来自多少细胞，但是细胞还有死的呢。2、以电泳为基础的半定量RT-PCR 本身是不可信的，作为实验的粗筛是可以的，但不能作为最终结果的，3、半定量RT-PCR应该再两管中进行，除非内参基因和目的基因表达相同，长度差不多，GC含量相似，或者实在穷的要省PCR管和taq。
关于平台期和线性期的问题，实际上线性期是指数期，只不过碰巧2的冥和2的倍数是相同的。看上去任何一个时期都可以，实际上是不对的，因为牵涉到酶促动力学的问题，这个我也不懂，有一些专门的文章，好像，涉及到很多化学的东西。我们学医的，也没必要知道那
些，但是其中主要是因为模板引物酶原料和buffer之间的关系，这种反应单靠改变其中一种成分没有用的，酶一直是过量，再加酶也没用，引物ntp都是这样。烟鬼正传，最好选线性期的开始阶段，但是要在你的凝胶成像分辨范围内，所以选一个这两种的契合点。给你一张图你就明白了，再开始的时候酸的是切线，这图我在*** 帖过。关于引物设计，再可能的情况下，除了常规要求之外，最好兼顾跨内含子（不过，根据要求，还可以专门设计隔内含子的，这样还可以用于基因组PCR）、长度小于500bp－600bp等等。
引物当然要设计成一样的退火温度，即使不再一管中，也要一样的，要在一台机器里啊。我的引物占了冰箱一格，大部分是一个温度，这样任何几个都可以拿来披，也不用查。
我反复说过了，别用软件，就用眼睛看，软件涉及的在好，有些基因在它出软件的时候，还没发现呢，跟不要说在基因组的位置和序列了，怎么考虑内含子的问题呢？
18s的引物也和著名的βactin一样是设计的，只要拿到序列就可以了，但是限制是只能用总RNA为模板，但是比actin和bubulin等可准多了，更不要说GAPDH这个破烂了。18s除了在细胞中更相同（量）外，主要是它占的比例远远高于看家基因，所以定量更加准确，我想，不知对不对，请几位主任和eeflying指教。我认为，就像你用某一种东西的数量去概括，因该选那种多的东西，说一座房子是由
2000块砖造成的，比说又29根梁更准确吧。更不要说没有看家基因不看家的缺点，因为他是服务于整个基因组表达谱什么的。
PE有专门的用于实时PCR的内参试剂盒，就是用18s，不过我们看懂使用的那条序列，不知有没有人用过，告知其序列和genbank号。正好问一下，我查了一些序列，一直没有去合成，主要是因为手上的actin的荧光探针还没有完，当初和成了一堆。
有那位高手用过18s的内参，请问您的序列（我指的是模板的序列）？原位杂交最好用RNA做探针，效果好一些，反正你有钱卖roche的盒子，而且量也能保证，因为转录过程嘛，沿着一条线突突地跑就是了。正义反义也容易理清。
我觉得做RT-PCR的方法和条件及应注意的事项就是那么几条,许多专业书都有详细的描述,但是许多人还是历经多次磨难，有时就是得不出结果。因此，我认为因为每个人所要克隆的片断不同，引物不同等，因此对不同的人来说还是有他自己的特殊性,我的以下经历说明：做实验时各人的情况不同,做不出时还是要好好动一下脑子。
记得我开始我的ＲＴ－PCR时，按常规方法，提取总ＲＮＡ后，首先用自己设计的下游引物进行逆转录，不断改变反应条件，进行了Ｎ次均没有结果。后来考虑到本人的克隆的PCR的片断位于我们实验另一位同学克隆的片断当中，而该同学已经用RT-PCR克隆出她的片断（尽管她用这些ＲＴ－ＰＣＲ产物做模版再进行ＰＣＲ时也没办法重复出她的产物），因此，我先用她的引物和条件扩增出她的片断，
然后用她的ＲＴ－ＰＣＲ产物作模板（有点改进，逆转录反应换用了９mers随机引物），用我的引进物进行一般PCR，终于得到我的产物，测序结果完全正确。尽管我的这个经历别人很人遇到，但足可以说明实验可以有自己的模式，书本的知识和别人的经验很重要，但有时也不定要受到书本框框和别人经验的限制
请问：
1 引物的特异退火温度怎样设定？可以根据gc 和at含量算出吗？可以用引物报告单上的Tm值吗？
2 PCR时20微升体系中cDNA应加多少比较合适？MgCl2应加多少？各个成分的量有无确定标准？
3 PCR结果跑电泳，actin有，但跑不出目的条带，有几种原因？与cDNA的量少有关吗？Mg离子太多是否会抑制Taqase的活性？
一般来说引物报告单伤得是对的,也可以自己算,实际上重要的各条引物一致,剩下的可以摸的.
20中是指体积还是量?只要不明显改变体系的离子强度,加1,2ul都可以的.mg要调的,但我总觉得没有书里讲的那么玄乎,我都是常年不变的.
如果内参照有,目的没有,至少证明不是"美丽惹"的祸.原因书里应该都说了.
在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA 的制备与分析操作难度极大。
在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大限度地抑制内源性的RNA酶。RNA酶可耐受多种处理而不被灭活，如煮沸、高压灭菌等。
外源性的RNA酶存在于操作人员的手汗、唾液等，也可存在于灰尘中。在其它分子生物学实验中使用的RNA酶也会造成污染。这些外源性的RNA酶可污染器械、玻璃制品、塑料制品、电泳槽、研究人员的手及各种试剂。而各种组织和细胞中则含有大量内源性的RNA 酶。
一、防止RNA酶污染的措施
1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。
2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。
3. 有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2 室温10min，然后用0.1% DEPC水冲洗，晾干。
4. 配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC，在37℃处理12hr以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经0.22μm滤膜过滤除菌。
5. 操作人员戴一次性口罩、帽子、手套，实验过程中手套要勤换。
6. 设置RNA操作专用实验室，所有器械等应为专用。
二、常用的RNA酶抑制剂
1. 焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。
2. 异硫氰酸胍：目前被认为是最有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来，又对RNA酶有强烈的变性作用。
3. 氧钒核糖核苷复合物：由氧化钒离子和核苷形成的复合物，它和RNA酶结合形成过渡态类物质，几乎能完全抑制RNA酶的活性。
4. RNA酶的蛋白抑制剂（RNasin）：从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。RNasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂，可以和多种RNA酶结合，使其失活。
5. 其它：SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定抑制作用。mRNA的分离与纯化
真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA 的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）
表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）琼脂糖亲合层析分离纯化mRNA 的理论基础就在于此。
mRNA的分离方法较多，其中以寡聚（dT）-纤维素柱层析法最为有效，已成为常规方法。此法利用mRNA 3’末端含有Poly（A+）的特点，在RNA流经寡聚（dT）纤维素柱时，在高盐缓冲液的作用下，mRNA被特异地结合在柱上，当逐渐降低盐的浓度时或在低盐溶液和蒸馏水的情况下，mRNA被洗脱，经过两次寡聚（dT）纤维柱后，即可得到较高纯度的mRNA。
寡聚(dT)纤维素柱纯化mRNA
一、试剂准备
1．3M醋酸钠（pH 5.2）
2．0.1M NaOH
3．1×上样缓冲液：20mM Tris-HCl(pH 7.6)；0.5M NaCl；1M EDTA （pH 8.0）；0.1%SLS(十二烷基氨酸钠。配制时可先配制Tris-HCl(pH 7.6)、NaCl、EDTA（pH 8.0）的母液，经高压消毒后按各成分确切含量，经混合后再高压消毒，冷却至65℃时，加入经65℃温育（30min）的10%SLS至终浓度为0.1%。
4．洗脱缓冲液：10mM Tris-HCl(pH 7.6)；1mM EDTA(pH 8.0)；
0.05% SDS
5．无水乙醇、70%乙醇
6．DEPC
二、操作步骤
1．将0.5-1.0g寡聚（dT）-纤维悬浮于0.1M的NaOH溶液中。2．用DEPC处理的1ml注射器或适当的吸管，将寡聚（dT）-纤维素装柱0.5-1ml，用3倍柱床体积的DEPC H2O洗柱。
3．使用1×上样缓冲液洗柱，直至洗出液pH值小于8.0。
4．将RNA溶解于DEPC H2O中，在65℃中温育10min左右，冷却至室温后加入等体2×上样缓冲液，混匀后上柱，立即收集流出液。当RNA上样液全部进入柱床后，再用1×上样缓冲液洗柱，继续收集流出液。
5．将所有流出液于65℃加热5min，冷却至室温后再次上柱，收集流出液。
6．用5-10倍柱床体积的1×上样缓冲液洗柱，每管1ml分部收集，OD260测定RNA含量。前部分收集管中流出液的OD260值很高，其内含物为无Poly(A)尾的RNA。后部分收集管中流出液的OD260值很低或无吸收。
7．用2-3倍柱容积的洗脱缓冲液洗脱Poly(A+)RNA，分部收集，每部分为1/3-1/2柱体积。
8．OD260测定Poly(A+)RNA分布，合并含Poly(A+)RNA的收集管，加入1/10体积3M NaAc（pH5.2）、2.5倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20℃放置30min。
9．4℃离心，10000g×15min，小心吸弃上清。用70%乙醇洗涤沉淀。[注意：此时Poly(A+)RNA的沉淀往往看不到]。4℃离心，10000g
×5min，弃上清，室温晾干。
10. 用适量的DEPC H2O溶解RNA。
三、注意事项
1．整个实验过程必须防止Rnase的污染。
2．步骤（4）中将RNA溶液置65℃中温育然后冷却至室温再上样的目的有两个，一个是破坏RNA的二级结构，尤其是mRNA Poly(A+)尾处的二级结构，使Poly(A+)尾充分暴露，从而提高Poly(A+)RNA的回收率；另一个目的是能解离mRNA与rRNA的结合，否则会导致rRNA的污染。所以此步骤不能省略。
3．十二烷基肌氨酸钠盐在18℃以下溶解度下降，会阻碍柱内液体流动，若室温低于18℃最好用LiCl替代NaCl。
4．寡聚（dT）-纤维素柱可在4℃贮存，反复使用。每次使用前应该依次用NaOH、灭菌ddH2O、上样缓冲液洗柱。
5．一般而言，107哺乳动物培养细胞能提取1-5μg Poly(A+)RNA，约相当于上柱总RNA量的1%-2%。
RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点：
1．检测灵敏度比Northern杂交高。由于Northern杂交步骤中转膜和洗膜都将造成样品和探针的损失，使灵敏度下降，而RPA将所有杂交体系进行电泳，故损失小，提高了灵敏度。
2．由于PCR扩增过程中效率不均一和反应“平台”问题，基于PCR
产物量进行分析所得数据的可靠性将下降，而RPA没有扩增过程，因此，分析的数据真实性较高。
3．由于与反义RNA探针杂交的样品RNA仅为该RNA分子的部分片段，因此，部分降解的RNA样品仍可进行分析。
4．步骤较少，耗时短。与Northern杂交相比，省去了转膜和洗膜的过程。
5．RNA-RNA杂交体稳定性高，无探针自身复性问题，无须封闭。6．一个杂交体系中可同时进行多个探针杂交，无竞争性问题。7．检测分子长度可以任意设置，灵活性大。
RPA的缺点是需要同位素标记探针。
一、试剂准备
1．GACU POOL：取100mM ATP、CTP、GTP各2.78μl、100mM UTP 0.06μl，加DEPC H2O至100μl。
2. 杂交缓冲液IPES 0.134g、0.5M EDTA（pH8.0）20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml，加DEPC H2O至10ml。
3. RNase消化液：5M NaCl 120μl、1M Tris-HCl(pH7.4) 20μl、0.5M EDTA（pH8.0）20μl、RNase A(10mg/ml) 8μl、RNase T1(250U/μl) 1μl，加DEPC H2O至2ml
二、操作步骤
1．反义RNA可由含T7或SP6启动子的重组质粒为模板制备，也可以用含启动子的PCR产物为模板制备，本文介绍后者。
（1）设计含T7启动子的PCR引物
由于PCR产物将作为合成反义RNA的模板，所以一对引物中的下游引物5’-端要含T7启动子序列:
T7启动子序列为：5’-TAATACGACTCACTATAGGG
引物设计的其他要求与一般PCR引物的设计相同。PCR产物的长度决定了反义RNA探针的长度，具体设计时可考虑100-400bp长。最好采用巢式PCR，即先扩增出一较长的片段，再以该片段为模板扩增出较短的片段，以保证探针的特异性，如下图所示：
上游引物
下游引物ⅡT7 启动子序列
下游引物Ⅰ
（2）PCR
先用上游引物和下游引物Ⅰ进行PCR，再以PCR 产物为模板,用上游引物和下游引物Ⅱ-T7进行二次PCR(具体操作参见PCR章节)。
（3）探针合成标记与纯化
在0.5ml 离心管中加入下列试剂：
RNasin （40U/μl）0.5μl
GACU POOL GAC
（含GTP、CTP、ATP各2.75 mM,UTP 61μM）2μl
[α-32P]UTP(10μCi/μl) 2.5μl
DTT (二硫苏糖醇，0.1M) 1μl
5×转录buffer 2μl
模板（50ng/μl）1μl
T7 RNA 聚合酶(15U) 1μl
混合后，短暂离心，37OC保温1hr。
加入DNaseⅠ（10U/μl）1μl, 37OC 15min, 然后75 OC 10min以
灭活DNAseⅠ和T7 RNA 聚合酶。
加入：饱和酚50μl
氯仿50μl
酵母tRNA（2μg/μl）4μl
DEPC H2O 100μl
室温下充分混匀，离心10000g×2min。取上层液置另一0.5 ml离心管中，加入100μl氯仿，混匀，离心10000g×2min。将上层液转移至另一0.5ml 离心管中，再加入3M NaAc 10μl、预冷无水乙醇250μl，混匀后，-20OC静置30min。4OC离心13500g×10min。弃上清液，沉淀用75%乙醇100μl洗涤，4OC离心13500g×2min, 弃上清液。室温下挥发残留乙醇。加入50μl杂交缓冲液溶解沉淀，4OC下保存待用。可用尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测探针质量。（参见本节电泳步骤）。
2．杂交
（1）RNA提取后溶解在杂交缓冲液中，浓度为1μg/μl。
（2）取8μl RNA加入1-3μl探针（根据探针检测结果调整）于0.5ml 离心管中。
（2）80OC保温2min，然后40-45OC下杂交12-18hr。
3. 消化
(1) 杂交管于37 OC保温15min，加入RNase消化液，37 OC保温30min。
(2) 加入10%SDS 10μl、10μg/μl蛋白酶K 20μl，混匀，37 OC保温10min。
(3) 加入65μl饱和酚和65μl氯仿，混匀，室温离心，10000g×2min。
(4) 转移上层液到另一0.5离心管中，加入10μl酵母tRNA和3M NaAc 15μl，再加入200μl异丙醇，混匀后，置-20OC 30min，4 OC 离心,135000g×10min。
(5) 弃上清液，室温下挥发乙醇，加入5-8μl上样缓冲液溶解沉淀。
4、电泳与放射自显影
（1）配制凝胶：(50ml)
40%丙烯酰胺-亚甲双丙烯酰胺（19：1）6.25ml
5×TBE 10ml
尿素24g
加H2O至50ml
溶解后加入25%过硫酸胺50μl，TEMED 50μl，混匀，注入电泳槽中，插入梳，待胶凝固。
（2）预电泳
以1×TBE为上下槽电泳缓冲液，加上电压后进行预电泳，如果用测序电泳装置，电压应达2000v以上，功率设定为100w，温度设为50 OC。待胶板温度达50 OC时，暂停电泳，准备加样。
（3）加样
将已溶解在加样缓冲液中的样品80 OC加热2min，立即加样到胶孔中，电泳1-2hr。（电泳条件同预电泳）。
（3）电泳结束后，打开胶板，用滤纸取下胶，覆上一层保鲜膜，放置于暗盒中，暗室红光下，压上一张X片，盖上暗盒，-70OC曝光1-3天。暴光结束后，将X光片显影、定影、水洗、晾干。
三、注意事项
1．本实验大部分为RNA操作，注意RNA酶的污染。
2．RNase消化液消化未杂交的单链RNA和探针RNA，当探针与样品之间有碱基错配时，错配位点也将被消化，因此会产生片段较小的杂交片段。因此进行PCR时，采取尽量减少错配的措施。
3、同位素对RNA合成有一定影响，有时会产生非全长的探针。因此，标记时间不宜过长。
4、RNase消化液有时会产生过度消化而无检测信号，可以将消化液稀释10-100倍后使用。
可能问题出在标本的保存：一般四小时之内就应处理，分离出细胞说的是套式PCR,可以在你的第一次PCR两个引物内,再设计一对引物进行第二次PCR就行了
如果你的第一次PCR刚好包括目的片段,那只好设计个更长的了
第二次的引物设计要求可以低一点
以50μl体系为例
引物各1μl
第一次PCR产物5μl
二次PCR和巢式PCR，即设计两对引物进行扩增，不是一个概念，它是拿第一次的PCR产物，稀释100-1000倍做模板，加入底物，从新进行扩增反应，以期增加产物的量
我做RT-PCR时,提总RNA时,都是用灭菌DEPC水,按1:100稀释后测OD260和OD280,后根据公式:RNA浓度=OD260*稀释度/25(ug/ul),后用1mg total RNA分离mRNA.做逆转录及PCR,效果很好.
luoyu10 wrote:
各位大哥：
我有一个问题请教，RT-PCR要求模板RNA的260nm/280nm的比
市政工程资料表格填写范例样本
1、施管表填写 施工技术文件要按单位工程进行组卷。市政工程中的独立核算项目，应是一个单位工程。采用分期单独核算的同一市政工程，应是若干个单位工程。 1.1 施管表1的填写 文件材料部分的排列宜按以下顺序： （1）施工组织设计。 （2）施工图设计文件会审、技术交底记录。 （3）设计变更通知单、洽商记录。 （4）原材料、成品、半成品、构配件、设备出厂质量合格证书、出厂检（试）验报告和复试报告。（需一一对应）。 （5）施工试验资料。 （6）施工记录。 （7）测量复核及预检记录。 （8）隐蔽工程检查验收记录。 （9）工程质量检验评定资料。 （10）使用功能试验记录。 （11）事故报告。 （12）竣工测量资料。 （13）竣工图。 （14）工程竣工验收文件。 文件目录表中的文件编号横杠前的数字为总的卷数，横杠后的数字为本卷项目编号。页号应是本项目在卷中的页码位置，不能光写本项目的页数。类别栏应与该项表头右上方类别相同。现以道路工程为
例示范见后。 1.2 施管表2的填写 存在问题及处理意见栏中填验收检查时发现的问题，一般无什么大问题也可不填。但如工程出过事故，事故处理情况应作简要说明。验收范围及数量栏应扼要填写。本表主要强调各参与单位均应签字盖章。填法示范见后。 1.3 施管表3的填写 施工组织设计应包括下列主要内容： （1）工程概况：工程规模、工程特点、工期要求、参建单位等。 （2）施工平面布置图。 （3）施工部署和管理体系：施工阶段、区划安排；进度计划及工、料、机、运计划表和组织机构设置。组织机构中应明确项目经理、技术负责人、施工管理负责人及其他各部门主要责任人等。 （4）质量目标设计：质量总目标、分项质量目标，实现质量目标的主要措施、办法及工序、部位、单位工程技术人员名单。 （5）施工方法及技术措施（包括冬、雨期施工措施及采用的新技术、新工艺、新材料、新设备等）。 （6）安全措施。 （7）文明施工措施。 （8）环保措施。 （9）节能、降耗措施。 （10）模板及支架、地下沟槽基坑支护、降水、施工便桥便线、构筑物顶推进、沉井、软基处理、预应力筋张拉工艺、大型构件吊运、混凝土浇筑、设备安装、管道吹洗等专项设计。 这张表为施工单位内部审批表，先由施工单位内部各部门看过以
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA提取 实验七 DNA的定量 实验八 PCR基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组 实验十一动物组织细胞总RNA的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用
事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。 2. 操作程序 （1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 （2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。 （3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。 （4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。 （5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。 （6）按控制面板上的停止键，数码管显示dedT，数秒钟后即显示闪烁的转速值，这时机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 （1）离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线，机器不使用，要拔掉电源插头。
微生物实验操作步骤
微生物试验操作步骤 1.前期准备工作（红色字体需要购买） 10ml离心管（80管）、培养皿（预实验36板，正式试验648板，共计684板）、EP管（预实验36管，正式试验108管，144管）、枪头（5ml、1ml、200ul）、生理盐水现配现用（0.85）2.，灭菌处理 将离心管、枪头、生理盐水、培养基放入高压灭菌锅中灭菌处理后待用。 3.制备不同梯度的样品溶液 预实验 a.梯度稀释试验前一天晚上取置于-80℃盲肠食糜样品于4℃冰箱融化，将需要用到的离心管和EP管分别编号待用。试验期间取盲肠食糜0.5~1g于灭菌后的10ml离心管中，按1：10比例加入生理盐水，制成10-1浓度的样品溶液。然后取0.5ml10-1浓度的样品溶液于下一离心管，按1：10比例加入生理盐水，制成10-2浓度的样品溶液。然后然后取0.1ml10-2浓度的样品溶液于EP管中，按1：1010-3比例加入生理盐水，制成10-3浓度的样品溶液。然后依次如上分别配制10-4、10-5、10-6、10-7、10-8样品溶液。每一次取样前离心管和EP管都要在微型振荡器上震荡混匀。 b.接种和培养：按照平板涂布法进行。分别取各稀释管溶液100μl接种到选择性培养基，大肠杆菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。乳酸菌选择性培养基置5%CO2培养箱，37℃培养48h。双歧杆菌选择性培养基置厌氧发酵罐内，37℃培养48h。沙门氏菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。 c. 微生物计数与鉴定：采用常规微生物平板菌落计数法，选择长有30-300个菌落的平板较为合适，用每克肠道内容物中细菌个数的对数表示( 1gCFU /g) 正式试验 按照预实验操作步骤及适宜梯度进行试验。 4.培养基 总需氧菌营养琼脂（NA）34567 乳酸菌MRS琼脂碱性厌氧234567 双歧杆菌BL琼脂厌氧234567产气袋 大肠杆菌麦康凯需氧234567 沙门氏菌XLD 需氧2345
2020人教版初中物理实验考试步骤
测量小灯泡的电功率 实验器材：电池盒，1号干电池3节，2.5V小灯泡1个，小灯座1个，滑动变阻器1个（20Ω或50Ω），开关1只，导线7根，电流表1只(0-0.6-3A)，电压表1只(0-3-15V)。 操作程序： 按照如图所示的电路图连接实验电路，开关断开，电流 表、电压表连接最大量程。 实验记录:
测量石块密度 实验器材：托盘天平1架、烧杯（内装适量水）、待测石块、量筒1个（100mL）、细线操作程序： 实验记录：
测量盐水的密度 实验器材：托盘天平1架（含砝码200g) 烧杯（内装适量盐水）(50mL) 量筒1个（100mL） 操作程序： 实验记录：
测量未知电阻的阻值 实验器材：电池盒，1号干电池3节，未知电阻1个，滑动变阻器1个(20Ω或50Ω)，开关1只，导线7根，电流表1只(0-0.6-3A)，电压表1只（0-3-15V）。 操作程序： 顺序操作内容 1 观察电流变、电压表并调零，按照如图所示的电路图连接实验电路，滑动变阻器最大阻值接入电路，电流表、电压表选择最大量程。 2 闭合开关试触马上断开，观察电流表、电压表示数，换用合适量程。闭合开关，移动滑动变阻器滑片，使电压表的示数为1.5V，读出此时电流表的示数，记入表格中。 3 移动滑片，使电压表示数为2V，再次读出电流表示数,并记入对应表格。 4 移动滑片，使电压表示数为2.5V，再次读出电流表示数,并记入对应表格。 5 断开开关，根据实验数据计算出平均电阻。 6 整理器材。 实验记录: 试验次数电压U（V）电流I(A)电阻R(Ω)电阻的平均值R平均（Ω） 1 1.5
机电安装工程技术资料表格填写范例
的目录介绍 内容介绍作者介绍目录介绍商品目录：返回商品页面 第一章建筑工程技术资料管理 第一节建筑工程技术资料管理要求 第二节建筑工程技术资料编制要求 第三节建筑工程技术资料的分类与内容 第四节参与建设各方对工程资料的管理职责 第二章建筑工程施工质量验收 第一节建筑工程施工质量验收的划分 第二节建筑工程施工质量验收记录表 第三章建筑给水排水及采暖工程施工技术资料 1．室内给水管道及配件安装工程检验批质量验收记录表05010l 2．室内消火栓系统安装工程检验批质量验收记录表 3．给水设备安装工程检验批质量验收记录表 4．室内排水管道及配件安装工程检验批质量验收记录表 5．雨水管道及配件安装工程检验批质量验收记录表 6．室内热水管道及配件安装工程检验批质量验收记录表 7．热水供应系统辅助设备安装工程检验批质量验收记录表 8．卫生器具及给水配件安装工程检验批质量验收记录表 9．卫生器具排水管道安装工程检验批质量验收记录表 10．室内采暖管道及配件安装工程检验批质量验收记录表 11．室内采暖辅助设备与散热器及金属辐射板安装工程检验批质量验收记录表 12．低温热水地板辐射采暖安装工程检验批质量验收记录表 13．室外给水管道安装工程检验批质量验收记录表 14．消防水泵结合器及消火栓安装工程检验批质量验收记录表 15．管沟及井室工程检验批质量验收记录表 16．室外排水管道安装工程检验批质量验收记录表 17．室外排水管沟及井池工程检验批质量验收记录表 18．室外供热管道及配件安装工程检验批质量验收记录表（I）（主控项目） 19．室外供热管道及配件安装工程检验批质一量验收记录表（Ⅱ）（一般项目） 20．建筑中水系统安装工程检验批质量验收记录表 21．游泳池水系统安装工程检验批质量验收记录表 22．锅炉安装工程检验批质量验收记录表 23．锅炉辅助设备安装工程检验批质量验收记录表（I） 24．工艺管道安装工程检验批质量验收记录表（Ⅱ） 25．锅炉安全附件安装工程检验．批质量验收记录表 26．换热站安装工程检验批质量验收记录表 27．材料、构配件进场检验记录（表C4-1） 28．设备及管道附件试验记录（表C4-4） 29．隐蔽工程检查记录（表C5-1） 30．预检记录（表C5-2） 31．交接检查记录（表C54）
生物实验操作步骤
生物实验操作步骤 一、安装显微镜和对光： A 、操作步骤： 1.一手握住镜臂，一手托住镜座，把显微镜轻轻地放在实验台上，镜臂靠近身体略偏左，镜座距实验台边缘约5厘米。安装好目镜和物镜。 2.转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。转动遮光器，使最大的光圈对准通光孔。 3、左眼注视目镜内，同时双手转动反光镜（光强用使用平面镜、光弱使用凹面镜），使光线反射到镜筒里，直到整个视野呈雪白色为止。 4.整理复位：把显微镜的外表擦拭干净。取下镜头放入镜盒内，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，放回原处。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）安装好物镜和目镜（1分） （2）能将显微镜对好光观察（2分） 记录：雪白色或亮白色（1分） （3）整理器材（1分） 二、制作并观察洋葱鳞片叶临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净。 2、用滴管在载玻片中央滴一滴清水。 3、用刀片在洋葱内表面划一个“井”字，用镊子撕下表皮，然后把它放在载玻片中央的水滴中，用解剖针轻轻地将其展平； 4、用镊子夹起盖玻片，使其一边接触载玻片上面的液滴，然后缓缓地盖在液滴上，盖片时要防止装片上出现气泡； 5、在载玻片的一侧滴一滴碘液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次，使染液浸润到整个标本； 6、安装显微镜和对光； 7、将制作的装片安放在显微镜的载物台上，然后将镜筒缓缓下降直到物镜接近玻片； 8、用左眼注视目镜，调节粗准焦螺旋使镜筒缓缓上升，直到在视野中看到细胞图像，然后旋转细准焦螺旋，使物像更清晰； 9、移动装片，在视野中找到一个完整的细胞进行仔细观察； 10、整理复位：取下玻片标本，平移方式（防止折断盖玻片）取下盖玻片并连同载玻片一起放回原处。取下镜头放入镜盒内，将镜筒下降到最低处，然后把显微镜放进镜箱里。把其他废弃物放入垃圾桶并把实验桌抹干净。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）用纱布将载玻片、盖玻片擦拭干净（1分） （2）在载玻片中央滴一滴清水（1分） （3）用刀片切取一块洋葱鳞片叶，用镊子撕取鳞片叶的内表皮置于载玻片上清水中并用解剖针将表皮展平，盖上盖玻片（1分） （4）将一滴碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从对侧引流使碘液扩散到整个标本（1分） （5）将制作好的临时装片放在显微镜下观察（1分） 记录：气泡（1分） 细胞核（1分） 细准焦螺旋（1分） 左上方（1分） （6）整理器材（1分） 三、制作并观察口腔上皮细胞临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净； 2、用滴管在载玻片中央滴一滴生理盐水； 3、用清水漱口，清除口腔中食物碎屑，用消毒牙签粗的一端在口腔侧壁上轻轻刮几下； 4、将牙签上附着的碎屑放在载玻片的生理盐水中涂抹几下； 用镊子夹起盖玻片让一侧先接触生理盐水在轻轻放平，避免出现 。 你观察到的细胞内染色最深的结构是 如果想让物像更清晰，应转动 。如果物像在视野的左上方，应将玻片标本向 移动，才能使物像移到视野中间。
中考物理实验操作及方法归纳
中考物理实验操作及方 法归纳 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
中考物理实验操作及方法归纳 实验步骤、操作、结论 一、力学 ?基础性 天平测质量 【实验目的】用托盘天平测质量。 【实验器材】天平（托盘天平）。 【实验步骤】 1)把天平放在水平桌面上，取下两端的橡皮垫圈。 2)游码移到标尺最左端零刻度处（游码归零，游码的最左端与零刻度线对 齐）。 3)调节两端的平衡螺母（若左盘较高，平衡螺母向左拧；右盘同理），直至 指针指在刻度盘中央，天平水平平衡。 4)左物右码，直至天平重新水平平衡。（加减砝码或移动游码） 5)读数时，被测物体质量=砝码质量+游码示数（m物=m砝+m游） 【实验记录】此物体质量如图：62 g 弹簧测力计测力 【实验目的】用弹簧测力计测力 【实验器材】细线、弹簧测力计、钩码、木块 【实验步骤】 ●测量前： 1)完成弹簧测力计的调零。（沿测量方向水平调零） 2)记录该弹簧测力计的测量范围是 0~5 N，最小分度值是 N。
测量时：拉力方向沿着弹簧伸长方向。 【实验结论】如图所示，弹簧测力计的示数F= N。 验证阿基米德原理 【实验目的】定量探究浸在液体中的物体受到的浮力大小与物体排开液体的重力之间的关系。 【实验器材】弹簧测力计、金属块、量筒、水 【实验步骤】 1)把金属块挂在弹簧测力计下端，记下测力计的示数F1。 2)在量筒中倒入适量的水，记下液面示数V1。 3)把金属块浸没在水中，记下测力计的示数F2和此时液面的示数V2。 4)根据测力计的两次示数差计算出物体所受的浮力（F浮=F1-F2）。 5)计算出物体排开液体的体积（V2-V1），再通过G水=ρ（V2-V1）g计算出 物体排开液体的重力。 6)比较浸在液体中的物体受到浮力大小与物体排开液体重力之间的关系。 （物体所受浮力等于物体排开液体所受重力） 【实验结论】液体受到的浮力大小等于物体排开液体所受重力的大小测定物质的密度 （1）测定固体的密度： 【实验目的】测固体密度 【实验器材】天平、量筒、水、烧杯、细线、石块等。 【实验原理】ρ=m/v 【实验步骤】
一整套市政工程资料填写范例1
4/4/20201、施管表填写 施工技术文件要按单位工程进行组卷。市政工程中的独立核算项目，应是一个单位工程。采用分期单独核算的同一市政工程，应是若干个单位工程。 1.1 施管表1的填写 文件材料部分的排列宜按以下顺序： （1）施工组织设计。 （2）施工图设计文件会审、技术交底记录。 （3）设计变更通知单、洽商记录。 （4）原材料、成品、半成品、构配件、设备出厂质量合格证书、出厂检（试）验报告和复试报告。（需一一对应）。 （5）施工试验资料。 （6）施工记录。 （7）测量复核及预检记录。 （8）隐蔽工程检查验收记录。 （9）工程质量检验评定资料。 （10）使用功能试验记录。 （11）事故报告。 （12）竣工测量资料。 （13）竣工图。 （14）工程竣工验收文件。 文件目录表中的文件编号横杠前的数字为总的卷数，横杠后的数字为本卷项目编号。页号应是本项目在卷中的页码位置，不能光写本项目的页数。类别栏应与该项表头右上方类别相同。现以道路工程为
例示范见后。 1.2 施管表2的填写 存在问题及处理意见栏中填验收检查时发现的问题，一般无什么大问题也可不填。但如工程出过事故，事故处理情况应作简要说明。验收范围及数量栏应扼要填写。本表主要强调各参与单位均应签字盖章。填法示范见后。 1.3 施管表3的填写 施工组织设计应包括下列主要内容： （1）工程概况：工程规模、工程特点、工期要求、参建单位等。 （2）施工平面布置图。 （3）施工部署和管理体系：施工阶段、区划安排；进度计划及工、料、机、运计划表和组织机构设置。组织机构中应明确项目经理、技术负责人、施工管理负责人及其他各部门主要责任人等。 （4）质量目标设计：质量总目标、分项质量目标，实现质量目标的主要措施、办法及工序、部位、单位工程技术人员名单。 （5）施工方法及技术措施（包括冬、雨期施工措施及采用的新技术、新工艺、新材料、新设备等）。 （6）安全措施。 （7）文明施工措施。 （8）环保措施。 （9）节能、降耗措施。 （10）模板及支架、地下沟槽基坑支护、降水、施工便桥便线、构筑物顶推进、沉井、软基处理、预应力筋张拉工艺、大型构件吊运、混凝土浇筑、设备安装、管道吹洗等专项设计。 这张表为施工单位内部审批表，先由施工单位内部各部门看过以
初中物理电学实验的基本操作
初中物理电学实验的基本操作 初中物理电学实验的基本操作 基础性 9.(1)用电流表测电流 【实验目的】用电流表测电流 【实验器材】电源、电键、小灯泡、电流表、若干导线等 【实验步骤】 1.将电源、电键、小灯泡、电流表串联起来，连接过程中电键处于断开状态。 2.电流从电流表的正接线柱流入，负接线柱流出。在未知电流大小时，电流表选择0~3A 量程。
程，然后记下电流的示数。 【实验结论】如图所示，电流表的示数为0.5 A。 (2)用电压表测电压 【实验目的】用电压表测电压 【实验器材】电源、电键、小灯泡、电压表、若干导线等 【实验步骤】 1.将电源、电键、小灯泡连接在电路中，连接过程中电键处于断开状态。 2.将电压表与小灯泡并联连接，在连接过程中，电压表的正接线柱靠近电源的正极，负接线柱靠近电源的负极，在未知电压大小时，电压表选择0~15V 量程。
程，然后记下电压的示数。 【实验结论】如图所示，电压表的示数为2.5 V。 10. 用滑动变阻器改变电路中的电流 【实验目的】练习使用滑动变阻器改变电路中的电流强度。 【实验器材】滑动变阻器、小灯泡、电流表、开关、电池组、导线若干 【实验原理】通过改变连入电路中电阻线的长度来改变电阻，从而改变电路中的电流强度。 测定性 11.用电流表、电压表测电阻(伏安法测电阻) 【实验目的】用电流表、电压表测电阻 【实验器材】电源、电键、电压表、电流表、待测电阻、滑动变
阻器、若干导线等。 【实验原理】R=U/I 【实验步骤】 1.如图所示连接电路，电键处于断开状态，滑动变阻器连入电路中的电阻处于最大值。 2.移动滑片到三个不同位置，记下相应的电流表示数和电压表示数。 3.根据公式计算三次的电阻，最后通过求平均值得到待测电阻的阻值。 滑动变阻器在实验中作用：多次测量，求平均值，减小误差。 12. 测定小灯泡电功率 【实验目的】测定小灯泡的电功率
公路工程全套资料填写范本
X X X工程资料整理 范本
目录 第一章交桩和复测报告 第一节交桩 (1) 第二节复测报告 (4) 第二章开工报告 (12) 第三章原材料出厂质量证明和工地试验报告 第一节原材料出场质量证明 (24) 第二节工地原材料抽检试验报告 (24) 第四章路基工程施工资料 第一节路基检验记录整理顺序 (26) 第二节路基排水资料整理顺序 (44) 第三节挡土墙、防护工程资料整理顺序 (52) 第四节小桥和涵洞资料整理顺序 (60) 第五章路面工程施工资料 第一节水泥稳定粒料基层（底基层）资料整理顺序 (80) 第二节沥青混凝土面层资料整理顺序 (88) 第三节水泥混凝土面层资料整理顺序 (93) 第四节路缘石资料整理顺序 (97) 第五节路肩资料整理顺序 (100) 第六章桥涵工程施工资料 第一节施工试验报告 (102) 第二节施工检验资料整理顺序 (107) 一、基础及下部构造资料整理顺序 (107) 二、上部构造预制和安装资料整理顺序 (145) 三、总体、桥面系和附属工程资料整理顺序 (157) 第三节悬索桥资料整理顺序 (181) 第七章施工检验结果汇总表 第一节施工抽检试验结果汇总表 (213) 第二节施工检验结果汇总表 (217) 第八章监理资料 第一节监理行政管理文件 (223) 第二节合同管理文件 (237) 第三节进度管理文件 (252) 第四节质量管理文件 (259) 第五节计量支付文件 (286) 第六节监理原始资料 (302)
第九章内业资料整理规定 (303) 第一节科技档案归档须知 (303) 第二节科技档案分类 (305) 第三节XXX工程竣工文件材料立卷归档管理办法 (308) 第四节河北省XXX工程竣(交)工验收办法实施细则 (320) 第五节内业资料归档程序表格 (353)
江苏建筑工程施工资料表格填写范例
江苏省建筑工程施工资料表格填写范例章建筑与结构工程施工资料第1 土建工程施工资料工程概况工程项目施工管理人员名单施工现场质量管理检查记录 施工组织设计、施工方案审批表技术交底记录 开工报告 工程竣工报告图纸会审、设计变更、洽商记录汇总表 图纸会审、设计变更、洽商记录 设计交底记录 工程定位测量、放线验收记录 钢材合格证和复试报告汇总表水泥出厂合格证、复试报告汇总表砖（砌块）检验报告汇总表 出厂检验报告和进场复验报告汇总表 防水和保温材料合格证、复试报告汇总表 （其他）建筑材料合格证、复试报告汇总表混凝土试块试压报告汇总表混凝土强度评定结构实体混凝土强度评定 砂浆强度汇总评定表 钢筋连接试验报告、焊条（剂）合格证汇总表 土壤试验记录汇总表隐蔽工程验收记录施工日志 现场施工预应力记录 地基验槽记录和地基处理记录 混凝土（其他）构件合格证汇总表钢筋保护层厚度实测表 屋面泼水、淋水、蓄水试验记录 地下室防水效果检查记录 厕所、厨房、阳台等有防水要求的地面泼水、蓄水试验记录 建筑物垂直度、标高、全高测量记录． 烟气（风）道工程检查验收记录 建筑物沉降观测记录 单位（子单位）工程质量竣工验收记录 单位（子单位）工程安全和功能检验资料核查及主要功能抽查记录 单位（子单位）工程观感质量检查记录 分部（子分部）工程验收记录 分项工程质量验收记录 土方开挖分项工程检验批质量验收记录 土方回填分项工程检验批质量验收记录 混凝土板桩制作分项工程检验批质量验收记录 锚杆及土钉墙支护分项工程检验批质量验收记录 钢或混凝土支撑系统分项工程检验批质量验收记录 地下连续墙分项工程检验批质量验收记录 沉井（箱）分项工程检验批质量验收记录
初中物理实验操作步骤说课材料
初中物理实验操作步 骤
初中物理实验操作练习题 步骤 A1.探究平面镜成虚像时物距和像距的关系1.画记录表格 2.检查器材是否够用。 3.把方格纸平铺在桌面上，用支架把玻璃板立放在方格纸上，使玻璃板的下缘与方格纸上某一条水平线对齐。 4.把一“小人”摆放在玻璃板前，使其下缘与方格纸上某一条水平线对齐，记录下物距；拿另一“小人”在玻璃板后来回移动，直到它与前面“小人”的像重合，观察并记录像距。 5.再重复步骤4一次。 6.写出实验结论。（实验结论：平面镜成像时像距和物距相等。） A2. 探究凸透镜成缩小实像的规律1.画记录表格 2.检查器材是否够用。 3.在光具座上自左向右依次放置蜡烛、透 镜和光屏，并点燃蜡烛，使烛焰、透镜和 光屏的中心大致在同一高度。 4.把点燃的蜡烛放在离透镜的距离大于2 倍焦距的地方，记录物距；沿光具座移动 光屏，直到光屏上出现清晰的倒立缩小的 实像，像的性质记录在表格中。 5.把蜡烛移向透镜，使它们的距离等于2 倍焦距，记录物距；沿光具座移动光屏， 直到光屏上出现清晰的倒立、等大的实 像，把像的性质记录在表格中。 6.写出实验结论。（实验结论：当蜡烛到 凸透镜的距离大于2倍焦距时，成倒立、 缩小的实像。） A3.用天平和量筒测量小石块的密度 1.画记录表格 2.检查器材是否够用，观察天平标尺分度 值，量筒量程和分度值。 3.双手托住底座把天平移到面前，用镊子 把游码拨到标尺左端的零刻度处（拨不动 时也可以用手），检查天平是否平衡（标 志是天平静止时指针对准分度盘的中 线）。 4.把小石块（用细线已系好，称时带线） 放入天平的左盘中，用镊子从砝码盒中夹 取砝码，按照从大到小的顺序向右盘中添 加砝码，并移动游码，使天平平衡，观察 并记录小石块的质量。先把砝码放回砝码 盒中，把游码拨到零刻度处，把小石块取 下放到桌面上，把游码拨离零刻度，双手 托住底座把天平移放到原来的位置。 5.在量筒中加入适量的水，把量筒放到桌 面上适当的位置，把刻度面向自己，观察 量筒中水的体积（视线应与水面的最低处 相平），若水面没有对准刻度线，可用滴 管向量筒中补充，直到水面对准某一刻度 线，观察并记录量筒中水的体积。 6.把小石慢慢浸入量筒中的水中，观察并 记录量筒中水面到达的刻度。 7.根据测得数据计算出小石块的密度，并 记录在表格中。 8.整理器材。把小石块从量筒中取出并用 抹布擦干放回原处，把量筒中的水倒到废 液杯中并放回原处。 A4. 用天平和量筒测量盐水的密度 1. 画记录表格 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2
建筑工程资料表格填写范例
建筑工程资料表格填写范例监理资料第1章 1.1 基本规定 1.1.1 一般规定 1.1.2 监理资料管理流程 1.2 监理管理资料 1.2.1 监理规划、监理实施细则 1.2.2 监理月报 1.2.3 监理会议纪要 1.2.4 监理工作日志监理工作总结 1.2.5 监理工作记录1.3 工程技术文件报审资料 1.3.1 施工测量放线报审资料1.3.2 报审资料1.3.3 工程进度控杀lJ 工程质量控制报审、验收资料 1.3.4 工程造价控制报审资料 1.3.5 竣工验收资料 1.4 单位工程竣工预验收资料 1.4.1 工程质量评估报告1.4.2 1.4.3 竣工移交证书 1.5 其他资料 1.5.1 工作联系单 1.5.2 工程变更单 施工资料章第2 基本规定 2.1 一般规定2.1.1 施工资料管理流程 2.1.2 工程管理与验收资料 2.2 2.2.1 工程概况表 2.2.2 工程质量事故报告 工程质量验收文件(单位子单位)2.2.3 室内环境检测报告 2.2.4 2.2.5 施工总结 2.2.6 工程竣工报告施工管理资料 2.3 2.3.1 施工现场质量管理检查记录 2.3.2 有见证取样和送检管理资料1 / 4 2.3.3 施工日志 2.4 施工技术资料 2.4.1 施工组织设计、施工方案 2.4.2 技术交底记录 2.4.3 设计变更文件 2.5 施工测量记录 2.5.1 工程定位测量记录 2.5.2 基槽验线记录楼层平面放线记录2.5.3 楼层标高抄测记录2.5.4 建筑物垂直度、标高观测记录2.5.5 沉降观测记录 2.5.6 施工物资资料 2.6 一般规定2.6.1 通用表格2.6.2 建筑与结构工程 2.6.3 建筑装饰装修工程2.6.4 预应力工程 2.6.5 钢结构工程2.6.6
江苏省建筑工程施工资料表格填写范例
江苏省建筑工程施工资料表格填写范例 第1章建筑与结构工程施工资料 土建工程施工资料 工程概况 工程项目施工管理人员名单 施工现场质量管理检查记录 施工组织设计、施工方案审批表 技术交底记录 开工报告 工程竣工报告 图纸会审、设计变更、洽商记录汇总表 图纸会审、设计变更、洽商记录 设计交底记录 工程定位测量、放线验收记录 钢材合格证和复试报告汇总表 水泥出厂合格证、复试报告汇总表 砖（砌块）检验报告汇总表 出厂检验报告和进场复验报告汇总表 防水和保温材料合格证、复试报告汇总表 （其他）建筑材料合格证、复试报告汇总表 混凝土试块试压报告汇总表 混凝土强度评定 结构实体混凝土强度评定 砂浆强度汇总评定表 钢筋连接试验报告、焊条（剂）合格证汇总表 土壤试验记录汇总表 隐蔽工程验收记录 施工日志 现场施工预应力记录 地基验槽记录和地基处理记录 混凝土（其他）构件合格证汇总表 钢筋保护层厚度实测表 屋面泼水、淋水、蓄水试验记录 地下室防水效果检查记录 厕所、厨房、阳台等有防水要求的地面泼水、蓄水试验记录 建筑物垂直度、标高、全高测量记录
烟气（风）道工程检查验收记录 建筑物沉降观测记录 单位（子单位）工程质量竣工验收记录 单位（子单位）工程安全和功能检验资料核查及主要功能抽查记录单位（子单位）工程观感质量检查记录 分部（子分部）工程验收记录 分项工程质量验收记录 土方开挖分项工程检验批质量验收记录 土方回填分项工程检验批质量验收记录 混凝土板桩制作分项工程检验批质量验收记录 锚杆及土钉墙支护分项工程检验批质量验收记录 钢或混凝土支撑系统分项工程检验批质量验收记录 地下连续墙分项工程检验批质量验收记录 沉井（箱）分项工程检验批质量验收记录 灰土地基分项工程检验批质量验收记录 砂和砂石地基分项工程检验批质量验收记录 土工合成材料地基分项工程检验批质量验收记录 粉煤灰地基分项工程检验批质量验收记录 强夯地基分项工程检验批质量验收记录 注浆地基分项工程检验批质量验收记录 预压地基分项工程检验批质量验收记录 振冲地基分项工程检验批质量验收记录1 高压喷射注浆地基分项工程检验批质量验收记录 水泥土搅拌桩地基分项工程检验批质量验收记录 土和灰土挤密桩复合地基分项工程检验批质量验收记录 水泥粉煤灰碎石桩复合地基分项工程检验批质量验收记录 夯实水泥土桩复合地基分项工程检验批质量验收记录 砂桩地基分项工程检验批质量验收记录 模板分项工程（现浇结构模板安装）检验批质量验收记录 模板分项工程（模板拆除）检验批质量验收记录 钢筋分项工程（原材料、钢筋加工）检验批质量验收记录 钢筋分项工程（钢筋连接、钢筋安装）检验批质量验收记录 混凝土分项工程（原材料、配合比设计）检验批质量验收记录 混凝土分项工程（混凝土施工）检验批质量验收记录 现浇结构分项工程（结构施工）检验批质量验收记录 现浇结构分项工程（设备基础）检验批质量验收记录 砖砌体分项工程检验批质量验收记录 防水混凝土分项工程检验批质量验收记录
初中生物实验操作步骤
实验名称：观察植物细胞 1、用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净 2、把载玻片放在试验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 3、①用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜内表皮。②把撕下的内表皮浸入载玻片的水滴中，用镊子把它展平。 4、用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上。 5、把一滴稀碘液滴在盖玻片的一侧。染 6、用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。 观察人的口腔上皮细胞 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。 2、把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴生理盐水 3、用凉开水把口漱净。用消毒牙签从口腔侧壁处轻轻刮几下，牙签上就附着了一些碎屑。把牙签放在载玻片的生理盐水滴中均匀地涂抹几下。 4、用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片上的液滴，然后缓缓放平。 5、在盖玻片的一侧滴加稀碘液（染），另一侧用吸水纸吸引，使染液浸润到标本的全部。 观察鸡卵的结构 1.取一个鸡卵，观察其外部形态。（放大镜，气孔） 2.将鸡卵的钝段轻轻敲出裂纹，将碎裂的卵壳连同紧贴壳的膜除去，观察鸡卵的气室。（镊子，卵壳，外卵壳膜和气室） 3.用剪刀将气室下的内卵壳膜剪破。（剪刀） 4.将卵壳膜内的卵白和卵黄转移到培养皿中，卵黄完整。（培养皿） 5.观察鸡卵的结构。若未见胚盘，可用镊子夹起细系带把卵黄轻轻翻转。 观察种子的结构 1.观察菜豆种子的结构 ⑴取一粒浸软的菜豆种子，观察它的外形[来源:学|科|网Z|X|X|K] ⑵剥去种子最外面的一层薄皮-------种皮，分开合拢着的两片子叶。 ⑶用放大镜仔细观察子叶.胚根.胚轴和胚芽，看看它们各有什么特点？ 2观察玉米种子的结构 ⑵一粒浸软的玉米种子，观察它的外形。 ⑵用刀片将这粒种子从中央纵向剖开。 剖面上滴一滴碘液，在用放大镜仔细观察被碘液染成蓝色的胚乳以及未被染成蓝色的果皮和种皮，胚芽，胚根，胚轴和子叶，看看它们各有什么特点？ 测定某种食物中的能量 1．取一只锥形瓶（50毫升），量筒量取30毫升水注入其中，再将它固定在铁架台上。 2.再锥形瓶里放入一支温度计（温度计下端要浸入水中，但不要接触锥形瓶的瓶底） 3.参照右图安装好试验装置，并测定水温。 4.称出一粒干燥花生种子的质量，将这粒种子放倒火焰上点燃， 5.将刚刚燃烧的花生种子尽快放倒锥形瓶底部。待这粒花生种子完全燃烧后，测量水温。 6.计算：Q=CM△T=30×4.2×（t2－t1）(把测量的温度代入，得出数据)
建筑工程资料表格填写范例
建筑工程资料表格填写范例 第1章监理资料 1.1基本规定 1.1.1一般规定 1.1.2监理资料管理流程 1.2监理管理资料 1.2.1监理规划、监理实施细则 1.2.2监理月报 1.2.3监理会议纪要 1.2.4监理工作日志 1.2.5监理工作总结 1.3监理工作记录 1.3.1工程技术文件报审资料 1.3.2施工测量放线报审资料 1.3.3工程进度控杀IJ报审资料 1.3.4工程质量控制报审、验收资料 1.3.5工程造价控制报审资料 1.4竣工验收资料 1.4.1单位工程竣工预验收资料 1.4.2工程质量评估报告 1.4.3竣工移交证书 1.5其他资料 1.5.1工作联系单 1.5.2工程变更单 第2章施工资料 2.1基本规定 2.1.1一般规定 2.1.2施工资料管理流程 2.2工程管理与验收资料 2.2.1工程概况表 2.2.2工程质量事故报告 2.2.3单位（子单位）工程质量验收文件 2.2.4室内环境检测报告 2.2.5施工总结
2.2.6工程竣工报告 2.3施工管理资料 2.3.1施工现场质量管理检查记录
2.3.2有见证取样和送检管理资料2.3.3 施工日志 2.4施工技术资料 2.4.1施工组织设计、施工方案2.4.2技术交底记录 2.4.3设计变更文件 2.5施工测量记录 2.5.1工程定位测量记录 2.5.2基槽验线记录 2.5.3楼层平面放线记录 2.5.4楼层标高抄测记录 2.5.5建筑物垂直度、标高观测记录2.5.6 沉降观测记录 2.6施工物资资料 2.6.1一般规定 2.6.2通用表格 2.6.3建筑与结构工程 2.6.4建筑装饰装修工程 2.6.5预应力工程 2.6.6钢结构工程 2.6.7木结构工程 2.6.8幕墙工程 2.6.9建筑给水、排水及采暖工程2.6.10建筑电气工程 2.6.11智能建筑工程 2.6.12通风与空调工程 2.6.13电梯工程 2.7施工记录 2.7.1通用表格 2.7.2建筑与结构工程 2.7.3电梯工程 2.8施工试验记录 2.8.1通用表格
生物实验操作步骤
生物 一、A类实验操作练习题 1.用显微镜观察洋葱鳞片叶表皮细胞 实验器材及设置：显微镜、载玻片、盖玻片、吸水纸、纱布、滴管、单面刀片、镊子、清水、稀碘液、解剖针、小块木板、洋葱鳞片叶、擦镜纸（备用）。 [附]显微镜状态:目镜已安装好，最大光圈对准通光孔，转换器上两个物镜位于通光孔两侧，呈外八字形，镜筒降到最低处。 实验要求：（1）制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片； （2）用显微镜观察洋葱鳞片叶表皮细胞。 方法步骤： （一）、制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片 1. 准备用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净；用滴管在载玻片中央滴1-2滴清水。 2. 取材用刀片切取一块洋葱鳞片叶（大约0.5cm2），用镊子撕取洋葱鳞片叶的内表皮；把撕取的表皮浸入载玻片上的水滴中，并展平。 3.盖盖玻片用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上
的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上。 4.染色把一滴碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本全部。 （二）、用显微镜观察洋葱鳞片叶表皮细胞 1.取镜与安放一手握镜臂，一手托镜座，把显微镜放在实验台中央略偏左，距实验台边缘约7cm。 2.对光上升镜筒，转动转换器，使低倍物镜对准通光孔；一只眼注视目镜，另一只眼睁开，同时转动反光镜，使视野明亮。 3.安放玻片将玻片轻放载物台上，标本正对通光孔的中心，用压片夹压住玻片的两端。 4.调焦双手转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，同时眼睛从侧面看着物镜下降，直到物镜接近玻片；一只眼注视目镜，同时转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升至视野中出现物像，微调细准焦螺旋使物像清晰。 5.观察移动玻片，将物像移到视野中央，在低倍镜下观察洋葱鳞片叶表皮细胞。 2.用显微镜观察人的口腔上皮细胞 实验器材及设置：显微镜、载玻片、盖玻片、吸水纸、纱布、滴
初中物理实验操作步骤
小石块的质量m/g 量筒中水的 体积V1/cm3 水和小石块的总 体积V2/cm3 小石块的 体积V/cm3 小石块的密度 ρ/(g﹒cm-3)
探究：杠杆的平衡条件 一、探究目的：杠杆的平衡条件 二、实验器材：杠杆、钩码盒一套、弹簧测力计、细线、刻度尺 三、探究假设：杠杆的平衡可能与“动力和力臂的乘积”、“阻力和阻力臂的乘积”有关。 四、实验步骤： 步骤1、调节杠杆两端的平衡螺母，使横梁平衡。 步骤2、在杠杆的左右两端分别用细线依次悬挂个数不同钩码【每一个钩码 50g=0.05kg，重为：G=mg=0.05kg×10N/kg=0.5N】，（假设左端砝码的重力产生的拉力为阻力F2，右端钩码的重力产生的拉力为动力F1，）先固定F1大小和动力臂l1的大小，再选择适当的阻力F2，然后移动阻力作用点，改变阻力臂l 2大小，直至杠杆平衡，分别记录下此时动力F1、动力臂l1、阻力F2和阻力臂l 2的数值，并将实验数据记录在表格中。 步骤3、固定F1大小和动力臂l1的大小，改变阻力F2的大小，在移动阻力作用点，改变阻力臂l 2大小，直至杠杆平衡，记录下此时的阻力F2和阻力臂l 2的数值，并填入到实验记录表格中。 步骤4、改变动力F1的大小，保持动力臂l1的大小以及阻力F2大小不变，再改变阻力F2作用点，直至杠杆重新平衡，记录下此时动力F1大小和阻力臂l 2的大小，并填入到实验数据记录表。 步骤5、整理实验器材。 五、数据记录：实验数据记录表如下： 六、分析论证：根据实验记录数据，探究结论是：动力×动力臂=阻力×阻力臂公式表示： F1L1=F2L2 思考：在上述探究实验中，为什么每次都杠杆在水平位置保持平衡？ 答：可以方便用刻度尺来直接测出实验中杠杆的力臂大小
桩基工程施工资料表格填写范例
建筑工程施工质量验收资料 （ZJ：桩基部分） 档号 档案馆代号 案卷题名 编制单位 编制日期 密级保管期限 共卷第卷 省建设工程质量监督站编印
省建设厅文件 建质（2002）332号 关于统一使用“建筑工程施工质量验收资料”的通知 市建委、建工局，各市建设局，有关单位： 为贯彻落实国家标准《建筑工程施工质量验收统一标准》（GB50300-2001）及配套工程质量验收规，保证工程施工质量验收资料统一、规、完整，我厅根据《建筑工程施工质量验收统一标准》（GB50300-2001）及配套工程质量验收规组织编制了《建筑工程质量验收资料》，并于2002年11月1日起在新开工的工程中统一使用。原省建设工程质量监督站印发的《单位工程质量检验评定资料》废止。现将有关事项通知如下： 一、各地要认真组织监理（建设）单位、施工企业等认真学习掌握《建筑工程施工质量验收资料》，要求《建筑工程施工质量验收资料》表格中的签字者必须具有相应的资料并持有相应证书方可签字，并对签字的容负责。 二、在收集、整理、填写该资料时，必须与施工工序同步，以保证其真实性，不得弄虚作假。各工程质量监督站在工程抽查、核查资料过程中应认真把关，一经发现有弄虚作假的应予以查处。 三、《建筑工程施工质量验收资料》由省建设工程质量监督站统一印刷。 四、在使用《建筑工程施工质量验收资料》时，如有意见或建议请及时向省建设工程质量监督站反映。 二○○二年十月二十日
建筑工程施工质量验收资料使用说明 为认真贯彻执行国家《建筑工程施工质量验收统一标准》（GB50300-2001）及其相应的规，促进施工企业做好资料的收集和整理工作，使工程技术资料管理工作做到规化、标准化、系统化。我站依据《建筑工程施工质量验收统一标准》（GB50300-2001）及其相应的规编制了《建筑工程施工质量验收资料》。全套共8个分册。本册是桩基部分，另7册分别是土建部分、玻璃幕墙部分、钢结构部分、给水排水及采暖卫生部分、建筑电气部分、通风空调及电梯部分。现将使用中应注意事项说明如下： 一、建筑工程质量验收资料的收集 （一）分项工程检验批 1、各分项工程检验批在班组自检合格的基础上，由企业专职质检员根据国家规中相应条款在下道工序施工前进行验收，填写验收记录并经监理工程师（建设单位项目专业技术人员）确认。 2、分项工程检验批质量验收记录，应按下列要求填写： ①分项工程检验批质量验收记录表中“主控项目”的质量情况，应简明扼要地说明该项目实际达到的质量状况，填写质保书编号和试验报告编号，避免填写“符合规要求”、“符合质量要求”等空洞无物的笼统结论。 ②“一般项目”的质量情况，如有具体数据的就写数据。无数据的，填写实际情况。当分项工程检验批检查时发现不合格者必须进行处理。否则，不得进行下一道工序的施工。 ③施工单位检查评定结果栏目由项目质量检查员填写。监理（建设）单位验收结论栏由监理工程师在核查资料、现场实测旁站后填写。未实行监理的工程由建设单位项目专业技术负责人在核查资料、现场实测旁站后填写。 ④如果分项工程检验批的主控项目的检测数据如混凝土强度不能及时按验收批提供时，可先根据该检验批的检验结果以及施工现场的质量情况，先进行验收，但其强度应大于验收批规定的最低强度的要求，检测数据提供后再对其强度进行验收。 ⑤分项工程及检验批项数，本资料中表格不够可复印，无此项及多余的部分应抽掉。 3、分部工程质量应由总监理工程师（建设单位项目负责人）组织施工单位项目负责人和技术、质量负责人等进行验收；地基与基础、主体结构分部工程的勘察、设计单位工程项目负责人和施工单位质量部门负责人也应参加相关分部工程验收。 4、如有特殊分项工程，由施工企业按有关或技术标准自制表格进行评定，并将验收资料移交总包单位归入工程质量验收资料中。 （二）隐蔽工程验收自试验记录 1、隐蔽工程完工后，按相应《施工质量验收规》规定的容进行检查验收，签证要齐全。 2、各项试验与测试记录，必须按相应的《施工质量验收》及有关标准进行，记录的数据真实无误，注明测试依据，签证要齐全。 （三）工程质量的验收 工程质量验收是应核查下列文件：