化妆品微生物检测

不同品牌的化妆品中微生物污染状况检测

[目的要求]

1、学会化妆品中菌落总数及霉菌、酵母总数的检测方法及检测原理；

2、检测市场上一些化妆品的微生物是否超标；

[实验原理]

任何一种化妆品或药物，在生产、保存、运输和使用过程中，由于各种不同的原因，其产品质量可能发生质变。这些原因其一就是由所谓微生物所造成的，微生物是一群形体极微小的生物，它一般包括细菌、酵母菌、霉菌和病毒等。化妆品或药物受到微生物的污染，可引起产品物理性状（如色泽、气味等）变化，改变产品有效成份，有的还会引起致敏、毒素和病毒感染，因此必须严格控制化妆品或药物中的微生物。

菌落总数是指检样经过处理，在一定条件下培养后(如培养基成分，培养温度，培养时间，pH值，需氧性质等)，1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。

霉菌和酵母菌总数是指检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃培养72h，计算所生长的霉菌和酵母菌数。

[实验器材]

l．培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（菌落总数）；虎红培养基（检测霉菌及酵母总数）；卵磷脂，吐温80—营养琼脂培养基

2.仪器或其他用具 90ml装无菌生理盐水；9ml装无菌生理盐水；9cm灭菌平板，锥形瓶，玻璃涂棒，移液枪；Tip头；培养箱；水浴锅；无菌棉签；超净工作台；高压蒸汽灭菌锅等。

[实验步骤]

一、化妆品的微生物学污染状况检测

1、样品采集

按无菌方法随机抽取各种品牌牙膏、成人护扶品（膏、霜、洗面奶、爽肤水、粉饼等）、婴幼儿用护扶品（爽身粉、面霜等）。

2、样品预处理

在化妆品中通常都加入了防腐剂，使化妆品能较长时间使用而不腐败变质，因此在进行化妆品卫生细菌学检验时，必须消除化妆品中的防腐剂，使长期处于濒死状态或半损伤状态的细菌被检出，从而得出正确的检验结果。

消除防腐剂抑菌作用的方法，常用的方法有：

（1）稀释法：用稀释液和培养基将样品稀释到一定浓度，使其抑菌成分的浓度减少到无抑菌作用的程度，再进行检验。

（2）中和法：在供试液或培养基中加入中和剂，以中和防腐剂的抑菌效果。防腐剂种类不同所用的中和剂亦不同。本实验采用吐温80+卵磷脂来做中和剂。

3、样品的制备

（1）液体样品

○1水溶性的液体样品，量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成1：10检液

○2油性液体样品，取样品10mL，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃～44℃水浴中预温)，在40℃～44℃水浴中乳化，制成1：10的悬液。

（2）膏，霜，乳剂半固体状样品

○1亲水性的样品，称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。.取其上清液作为1：10的检液。

○2疏水性样品，称取10g，放到灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡,研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10检液。（3）固体样品，称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。

如有均质器，上述水溶性膏，霜，粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏，霜及眉笔，口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL灭菌吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。

4、菌落总数检验

（1）用灭菌吸管吸取1：10稀释的检液2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，制成1：100检液，各吸取1mL，分别注入到两个灭菌平皿内。如样品含菌量高，还可再稀释成1：1000，1：10000，……等，每种稀释度应换1支吸管。

（2）将融化并冷至45℃～50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15mL，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入约15mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h，为空白对照。

5、霉菌和酵母菌数的检测

取1：10的检液各1mL分别注入2个灭菌平皿内, (若菌量较多时可顺序再做10倍稀释)，另取1个灭菌空平皿(作空白对照)，每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃培养箱，培养3天，计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长，为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时，于48h应及时将此平板取出计数。

6、菌落计数方法

（1）菌落总数技术

先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该

平皿不宜计数.若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全皿菌落数。

（2）霉菌和酵母菌菌落计数

先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数，求出每个稀释度的平均菌落数。判定结果时，应选取菌落数在20～100个范围之内的平皿计数，乘以稀释倍数后，即为每g(或每mL)检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。

每g(或每mL)化妆品含霉菌和酵母菌数以CFU/g(mL)表示。

7、评定标准

化妆品的微生物学质量应符合下述规定：

（1）眼部、口唇、口腔粘膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品细菌总数不得大于500/ml或500/g。（2）其它化妆品细菌总数不得大于1000/ ml或1000/g。

[注意事项]

（1）所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。

（2）供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。

（3）制成供试液后，应尽快稀释，注皿。一般稀释后应在1小时内操作完毕。

（4）注意抑菌现象。由于防腐剂未被中和，往往使平板计数结果受影响，如低稀释时菌落少。而高释释度时菌落数反而增大。

（5）在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。

二、口服药物的微生物学污染状况检测

1、样品采集

按无菌方法随机抽取各种品牌牙膏、成人护扶品（膏、霜、洗面奶、爽肤水、粉饼等）、婴幼儿用护扶品（爽身粉、面霜等）。

2、样品的制备

按无菌方法取药粒10g或10ml投入到装有90ml的无菌生理盐水中，摇动至完全溶解，即为1：10样品液，按前述方法相应可制备1：100、1：1000的稀释液。

2、菌落总数检验

将融化并冷至45℃～50℃的营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15mL，随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h。另取一个不加样品的灭菌空平皿，加入约15m营养琼脂培养基，待琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h，为空白对照。

4、霉菌和酵母菌数的检测

取1：10的检液各1mL分别注入2个灭菌平皿内, (若菌量较多时可顺序再做10倍稀释)，另取1个灭菌

空平皿(作空白对照)，每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃培养箱，培养3天，计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长，为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时，于48h应及时将此平板取出计数。

5、评定标准

口服生化药品卫生标准：细菌总数＜1000cfu/g，霉菌数＜100cfu/g

[实验报告]

1、分别将实验测出的样品数据以表格方式报告结果。（水、食品各1个表格）

2 、对样品菌落总数作出是否符合卫生要求的结论。

[思考题]

从你所检测的化妆品和药物的各指标的结果来看，是否符合国家的卫生标准？如果有超标情况，你认为主要由哪些因素造成？

化妆品微生物检验方法

化妆品微生物检验方法https://www.wendangku.net/doc/c01153372.html,work Information Technology Company.2020YEAR

一、总则 1.范围 本规范规定了化妆品微生物检验的基本要求。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2.仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 琉璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3.培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分： 氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90 mL，103.43kPa (121℃ 15 lb)20min高压灭菌。 3.2 SCDLP液体培养基 成分： 酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3分装，103.43 kPa (121℃ 15 lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4.样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。

化妆品微生物检验培训考试试卷A

微生物室上岗人员操作技术基础测试卷A(化妆品） 说明：1.本试卷命题范围为化妆品微生物检测标准汇编·操作规程及相关专业基础知识 2.本测试为闭卷考试，满分为120分，时间为120分钟 3.本测试在人员入职后进行，以检验人员对工作的掌握程度。 姓名：测试时间：年月日 阅卷：成绩： 一、填空题（44*1） 1. 化妆品微生物检验项目包括：、、 、、。 液体供检样品前处理时，水溶性样品用溶解，油溶性样品用溶解。 4.在测定霉菌和酵母菌时，虎红培养基中含有，以抑制其他细菌的生长。 5. 化妆品粪大肠菌群检测时，报告被检样品中检出粪大肠菌群应符合的条件：、、 、。 6.金黄色葡萄球菌革兰氏染色镜检结果为：革兰氏，排列成 状，芽孢，荚膜，致病性葡萄球菌。 7.在电压220V时，普通30W直管型紫外线灯，在室温为20~25℃的使用情况下，紫外线辐射强度（垂直1m处）应≥ 8.卵磷脂吐温80培养基灭菌条件为℃高压灭菌分钟. 9.金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上, 菌落直径为 ,颜色呈 ,边缘为色 ,周围为一带 ,在其外层有一 .圈。一般认为阳性的金黄色葡萄球菌菌株有致病力. 10.检测粪大肠菌群时，所用的双料乳糖胆盐培养基中，溴甲酚紫的作用是 培养基原理是：蛋白胨提供源和源；糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是；琼脂是培养基凝固剂； 伊红和美蓝是剂和剂，可抑制革兰氏阳性菌，在酸性条件下产生沉淀，形成色菌落或具黑色中心的外围的菌落。 12.高压灭菌锅必须每个月进行一次灭菌效果评价，用菌进行评价检验，而平时也要用进行检测。 13. 10-1 和10-2两个稀释度每ml的菌落数分别是260,28，则菌落总数报告值为

《化妆品微生物标准检验方法》GB 79181～5——87

一、总则 General Principle 1 范围 本规范规定了化妆品微生物学检验总则。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存、供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 刻度吸管。 2.8 研钵。 2.9 均质器。 2.10 恒温水浴箱。 2.11 采样用具：不锈钢勺，剪刀，开罐器等。 3 培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分：氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000 mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa(15 lb)20min高压灭菌。3.2 SCDLP液体培养基 成分：酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3，分装，103.43kPa(15lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4灭菌吐温80。

4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量应适量增加，其总量应大于16g。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态，进口产品应为市售包装。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一份样品而同时需做多种分析，如微生物、毒理、化学等，应先做微生物检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用采样用具、器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成1:10检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品10mL，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃～44℃水浴中预温)，在40℃～44℃水浴中乳化，制成1:10的悬液。 5.2 膏、霜、乳剂半固体状样品 5.2.1 亲水性的样品，称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。取其上清液作为1:10的检液。 5.2.2 疏水性样品，称取10g，放到灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1:10检液。 5.3 固体样品，称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1:10的检液。 如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL灭菌吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。

化妆品微生物检验方法

一、总则 1.范围 本规范规定了化妆品微生物检验的基本要求。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2.仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 琉璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3.培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分： 氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90 mL，103.43kPa (121℃15 lb)20min高压灭菌。 3.2 SCDLP液体培养基 成分： 酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3分装，103.43 kPa (121℃15 lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4.样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。

4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 4.6 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月。 5.供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，如样品少于10mL，仍按10倍稀释法进行。如为5mL则加到45mL灭菌生理盐水中，混匀后制成1：10检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80,在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10检液。 5.3 固体样品 称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。 如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加入10mL灭菌液体石蜡，10mL吐温80,70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。 二、菌落总数 1.范围 本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。 本规范适用于化妆品菌落总数的测定。 2.定义 本规范采用下列定义 菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生总评价的综合依据。 3.仪器和设备 3.1 三角瓶，250mL。 3.2 量筒，200mL。 3.3 pH计或精密pH试纸。 3.4 高压灭菌器。 3.5 试管：15×150mm。 3.6 灭菌平皿：直径9cm。

化妆品备案卫检需要进行的检测项目

化妆品备案卫检需要进行的检测项目 化妆品一般要进行微生物检验、卫生化学检验、pH值测定、毒理学安全性实验、人体安全及功能试验。检验时间一般在2-4个月，有些特殊功能化妆品因为要做人体试验，时间稍长。 1、微生物学检验：包括菌落总数、粪大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、霉菌和酵母菌等检验项目 2、卫生化学检验：包括汞、铅、砷等卫生化学指标的检测，斑蟊、氮芥、巯基乙酸、性激素、甲醛等禁、限用物质含量的检测，以及 pH 值等其他检测； 3、毒理学试验：普通化妆品需要做急性皮肤刺激性试验、急性眼刺激性试验、多次皮肤刺激性试验；特殊用途化妆品除以上三项试验外，还需要做皮肤变态反应试验、皮肤光毒性试验、回复突变试验、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验； 4、特殊用途化妆品人体安全性和功效性评价：包括人体斑贴试验、人体试用试验、SPF 值测定、PA值测定、防水性能测定等。 ●检验中特殊情况要求： 1、凡宣称含有α-羟基酸或不宣称含有α-羟基酸，但其含量≥3%的产品需测定α-羟基酸，同时测定pH值，测α-羟基酸1000元，测pH值100元。 2、凡紫外线吸收剂（二氧化钛和氧化锌除外）含量≥%的产品，需加测紫外线吸收剂、皮肤变态反应试验和皮肤光毒性试验。 3、宣称祛痘、除螨、抗粉刺等功能的产品需要测抗生素和甲硝唑指标，费用1000元。 4、宣称去屑功能的产品需要测去屑剂指标，费用1000元。 5、凡含滑石粉的产品，需加测石棉，费用1000元 6、Ames试验可选用体外哺乳动物细胞基因突变试验替代。 7、凡需进行人体试验的，请先在省级检验机构完成毒理学检验，结果合格者方能送到我单位检测；并于送检时提供毒理学报告。 8、样品每包装需大于25克，有些彩妆类产品含量小于10克的，提供的样品总量不少于150克。 9、防晒类只在产品标识SPF值时测定，或根据企业需要；检验以SPF值15为基数，5000元/个，SPF值大于15，每增加5，测定费用再加1000元。 10、防晒类只在产品标识PA+++值时测定，或根据企业需要；检验以PFA值3为基数，3以下，可标注PA+，11000元；PFA

化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解

化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解 化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解 中华人民共和国国家标准 化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 UDC 668：576 .85.07 (GB7918.2－87) Standard methods of microbiological examination for cosmetics Standard plate count 细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。 本标准采用标准平板计数法。 1 方法提要 化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理物质性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群嗜中温的需氯及兼性厌氧的细菌总数。 2 培养基和试剂 2.1 生理盐水：见GB 7918-87《化妆品微生物标准检验方法总则》。 2.2 卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基 成分：蛋白胨 20g

牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000ml 制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为7.1～7.2，加入琼脂，121℃(15 1b)20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。 3 仪器 3.1 锥形烧瓶。 3.2 量筒。 3.3 pH计或精密pH试纸。 3.4 高压消毒锅。 3.5 试管。 3.6 灭菌平皿：直径9cm。 3.7 灭菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml。 3.8 酒精灯。 3.9 恒温培养箱。

化妆品微生物标准检验方法

化妆品微生物标准检验方法 总则（GB7918.1—87）? 1?样品的采集及注意事项 1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月奋查。 2?供检样品的制备 2.1培养基和试剂 ：氯化钠?8.5g，蒸馏水?1000m溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃（151b）20min高压灭菌。,成分：?酪蛋白胨?17g，大豆蛋白胨?3g，氯化钠?5g，磷酸氢二钾?2.5g，葡萄糖?2.5g，卵磷脂?1g，吐温80?。7g，蒸馏水?1000ml，制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2？.3分装，121℃（151b）20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的法温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.2.仪器： 2.3不同类型样品的检样制备。 ： 。 n。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标准主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。?

化妆品微生物标准检验方法定稿版

化妆品微生物标准检验 方法精编W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】

化妆品微生物标准检验方法 总则（GB7918.1—87） 1?样品的采集及注意事项 1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6如检出粪大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月奋查。 2?供检样品的制备 2.1培养基和试剂

：氯化钠?8.5g，蒸馏水?1000m溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃（151b）20min高压灭菌。 ,成分：酪蛋白胨17g，大豆蛋白胨?3g，氯化钠?5g，磷酸氢二钾?2.5g，葡萄糖?2.5g，卵磷脂?1g，吐温80?。7g，蒸馏水?1000ml，制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH 为7.2. 3分装，121℃（151b）20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的法温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.2.仪器： 2.3不同类型样品的检样制备。 ： 。 n。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。 本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。 本标准主要起草人周淑玉。 本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。

化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 PDF

化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 Standard methods of microbiological examination for determination of aerobic bacterial count 中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定UDC 668：576 .85.07GB7918.2－ 87Standard methods ofmicrobiological examination for cosmetics Standard plate count The people's Republic of China National Standard for cosmeticsstandard methods of microbiological examination for UDC 668:576methods of microbiological examination for.85.07GB7918.287Standard cosmetics Standard plate count 细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。本标准采用标准平板计数法。1 方法提要化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理物质性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群嗜中温的需氯及兼性厌氧的细菌总数。2 培养基和试剂2.1 生理盐水：见GB 7918-87《化妆品微生物标准检验方法总则》。2.2 卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基成分：蛋白胨 20g牛肉膏3g氯化钠 5g琼脂 15g卵磷脂 1g吐温80 7g蒸馏水 1000ml制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为7.1～7.2，加入琼脂，121℃(15 1b)20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。3 仪器3.1 锥形烧瓶。3.2 量筒。3.3 pH计或精密pH试纸。3.4 高压消毒锅。3.5 试管。3.6 灭菌平皿：直径9cm。3.7灭菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml。3.8 酒精灯。3.9 恒温培养箱。3.10 放大镜。 4 操作步骤4.1 用灭菌吸管吸取1:10稀释的检样2ml，分别注入到两个灭菌平甲内，每皿1ml。另取1ml 注入到9ml灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，使成1:100稀释液。吸取2ml,分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。如样品含菌量高，还可再稀释成1:1000， 1:10000，??????等，每种稀释度应换1支吸管。4.2 将熔化并冷至45～50℃的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15ml，另倾注一个不加样品的灭菌空平皿，作空白对照。随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待不琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h。5 菌落计数方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后。求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半，面其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数。6 菌落计数及报告方法6.1 首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数（见表中例１）。6.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于或等于2应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数(见表中例2及例3)。6.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。6.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。6.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6)。6.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10个。6.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见下表报告方式栏)。在报告菌落

化妆品微生物标准检验方法总则及注解

化妆品微生物标准检验方法总则及注解 中华人民共和国国家标准 化妆品微生物标准检验方法 UDC 668：576 .85.07 总则 (GB7918.1－87) Standard methods of microbiological examination for cosmetics General rules 1 样品的采集及注意事项 1.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。包装量小的样品，取样量可酌减。 1.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。 1.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放不室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 1.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。 1.5 在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 1.6 如检出烘大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月备查。 2 供检样品的制备 2.1 培养基和试剂 2.1.1 生理盐水 氯化钠 8.5g 蒸馏水 1000ml

溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃(15 1b)20min高灭菌。 2.1.2 SCDLP液体培养基 成分：酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000ml 制法：将上述成分混合后，加热溶解，凋pH为7.2～7.3分装，121℃(15 1b)20min 高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。 2.1.3 灭菌液体石蜡。 2.1.4 灭菌吐温80。 2.2 仪器 2.2.1 天平。 2.2.2 灭菌锥形瓶：内含玻璃珠及90ml稀释液。 2.2.3 灭菌刻度吸管：10ml、5ml。 2.2.4 水浴箱。 2.2.5 灭菌研钵及灭菌研棒。 2.2.6 均质器。 2.3 不同类型样品的检样制备 2.3.1 液体样品

化妆品中微生物的控制指标和检测标准

化妆品中微生物的控制指标和检测标准 微生物对化妆品的污染，不仅影响产品本身的质量，而更严重的是它危及消 费者的健康和安全。因此世界各国极为重视，各国都制定了化妆品中微生物的卫生标准，将化妆品中微生物的污染状况作为产品的一个质量指标，以防止和控制微生物对化妆品的污染，这对提高化妆品的质量和保证化妆品的安全性具有重要的意义。 (1)化妆品中微生物的控制指标关于化妆品中微生物的控制指标，世界上并无统一标准，各国都是依据本国的情况自己制定化妆品的微生物指标。需要说明两点： ①在各国关于化妆品中微生物控制指标的第一项是细菌总数指标，如我国规定在眼部、口唇、口腔粘膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品细菌总数不得大于500个／ml或500个／8，其他化妆品细菌总数不得大于1000个／mi或1000个屯。它是指在单位容量(m1)(或单位重量(g))中的细菌个数，这里讲的细菌计数单位是个。而在实际检测化妆品的细菌总数时，活的细菌总数是通过对检测试样处理后，在一定条件下培养生长出来的细菌菌落形式单位(colony—formingunits，以cfu表示)的个数。 菌落(colony)它是微生物细菌存在的一种特有形式，是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚积而成的，，故又有细菌集落之称。所以菌落总数是指每g或每m1化妆品中所含的活菌 能于固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。基于化妆品 中心以化工行业技术需求和科技进步为导向，以资源整合、技术共享为基础，分析测试、技术咨询为载体，致力于搭建产研结合的桥梁。以“专心、专业、专注“为宗旨，致力于实现研究和应用的对接，从而推动化工行业的发展。

化妆品产品微生物检验方法

GMP-WI-09 化妆品产品微生物检验方法 目录 1.微生物检验方法总则 2.菌落总数检验方法 3.霉菌和酵母菌检验方法

微生物检验方法总则 1 范围 本部分规定了化妆品微生物学检验的基本要求。 本部分适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平，0-200g，精确至 0.1g。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL、150mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 灭菌刻度吸管，10mL、1mL。 2.8 恒温水浴箱。 2.9 均质器或研钵。 2.10 灭菌均质袋。 3 培养基和试剂 3.1生理盐水 成分：氯化钠 8.5g

蒸馏水加至 1000mL 制法：溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶 90mL，121℃高压灭菌 20min。 3.2 SCDLP 液体培养基 成分：酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂 1g 吐温 80 7g 蒸馏水 1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其他成分混合，加热溶解，调 pH为7.2—7.3分装，每瓶90mL，121℃高压灭菌20min。注意振荡，使沉淀于底层的吐温 80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 制法：取液体石蜡 50mL，121℃高压灭菌 20min。 3.4 灭菌吐温 80。 制法：取吐温 80 50mL，121℃高压灭菌 20min。

4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应从不少于 2 个包装单位的取样中共取 10g 或 10mL。包装量小于 20g 的样品，采样时可适当增加样品包装数量。 4.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应置于室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如微生物、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做微生物检验，再将剩余样品做其他分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，用灭菌吸管吸取 10mL 样品加到 90mL 灭菌生理盐水中，混匀后，制成 1：10 检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品 10g，先加 5mL 灭菌液体石蜡混匀，再

化妆品微生物标准检验方

化妆品微生物标准检验方法 总则 1 范围 本标准规定了化妆品微生物学检验的基本要求。 本标准适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平，0.01g 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶，250mL。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 刻度吸管，1mL、10mL。 2.8 研钵或均质器。 2.9 恒温水浴箱。 3 培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分：氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌。 3.2 SCDLP 液体培养基 成分：酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾2.5g 葡萄糖2.5g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH 为7.2～7.3 分装，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的 吐温80 充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。 3.4 灭菌吐温80。 4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包4 装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g 的样品，采样时可适当增加样品包装数量。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防 止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品 做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散， 所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL 加到90mL 灭菌生理盐水中，混匀后，制成1：10 检液。

《化妆品微生物标准检验方法》

一、总则 令狐采学 General Principle 1范围 本规范规定了化妆品微生物学检验总则。 本规范适用于化妆品样品的采集、保存、供检样品制备。 2 仪器和设备 2.1 天平。 2.2 高压灭菌器。 2.3 振荡器。 2.4 三角瓶。 2.5 玻璃珠。 2.6 玻璃棒。 2.7 刻度吸管。 2.8 研钵。 2.9 均质器。 2.10 恒温水浴箱。 2.11 采样用具：不锈钢勺，剪刀，开罐器等。 3 培养基和试剂 3.1 生理盐水 成分：氯化钠8.5g 蒸馏水加至1000 mL 溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa(15 lb)20min高压灭菌。 3.2 SCDLP液体培养基 成分：酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂1g 吐温80 7g 蒸馏水1000mL 制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3，分装，103.43kPa(15lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。 注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 3.3 灭菌液体石蜡。

3.4灭菌吐温80。 4 样品的采集及注意事项 4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量应适量增加，其总量应大于16g。 4.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态，进口产品应为市售包装。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。 4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。 4.4 若只有一份样品而同时需做多种分析，如微生物、毒理、化学等，应先做微生物检验，再将剩余样品做其它分析。 4.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用采样用具、器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 5 供检样品的制备 5.1 液体样品 5.1.1 水溶性的液体样品，量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成1:10检液。 5.1.2 油性液体样品，取样品10mL，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL(在40℃～44℃水浴中预温)，在40℃～44℃水浴中乳化，制成1:10的悬液。 5.2 膏、霜、乳剂半固体状样品 5.2.1 亲水性的样品，称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。取其上清液作为1:10的检液。 5.2.2 疏水性样品，称取10g，放到灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1:10检液。 5.3 固体样品，称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1:10的检液。 如有均质器，上述水溶性膏、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL灭菌吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。 二、菌落总数

化妆品微生物检验作业指导书(实用型)

1、目的 为微生物检验员作业提供指引，以保证微生物检验结果的准确性和可信性。 2、适用范围: 适用于质检部微生物检验员进行细菌总数测定和霉菌总数测定，其它菌的检验方法参照GB/T 7918执行。 3、职责： 质检部微生物检验员负责本文件的执行，质检部主管负责对本文件执行情况进行监督。 4、内容 4.1样品的采集及注意事项： 1、所采集的应有代表性，一般视每批化妆品数量的大小，随机抽取相应数量的包装单位。 2、供检样品应严格保持原有包装状态。 3、接到检验样品后，应立即登记，编写检验编号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放置在室温阴凉干燥外，不要冷藏或冷冻。 4、在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所有器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 5、如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存1个月备查。 4.2检验前的配制、灭菌准备工作 1、配制生理盐水：按8.5g的氯化钠溶于1L的去离子水的配比进行配制，配制好的生理盐水现按每个锥形瓶45ml进行分装，分装包扎好后待灭菌。 2、配制培养基：按照营养琼脂33g溶于1L去离子水、虎红琼脂31.6g溶于1L去离子水配比进行配制，配制包扎好后待灭菌。 3、包扎：包括培养皿、移液管、金属小勺等检验所需用具。 4、灭菌：将包扎好的生理盐水、培养基、培养皿、移液管、金属小勺等放入高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20分钟。 4.3检验前超净工作台和微检室的消毒工作 1、检验前需对超净台台面进行紫外线消毒30min，参照《超净工作台的标准操作规程》要求进行。 2、检验前需对微检室进行30min以上紫外线照射消毒。 3、每周至少1次用甲醛溶液对微检室进行薰蒸消毒。 4.4微生物检验操作 1、取5g或5ml样品溶于45ml消毒好的生理盐水的锥形瓶中，充分摇匀，静置。（根据样品污染程度，有时需做10倍梯度稀释）

化妆品微生物检测岗位习题

一填空题 1.培养基按其性状分、和三种；按用途分营养培养基，基础培养基，，，。 固体；液体；半固体；选择培养基；鉴别培养基；增菌培养基 2.实验室一般高压蒸汽灭菌的压力是，其温度达到，维持时间为，即可杀灭所有微生物（包括细菌的芽胞） 0.1Mpa；121.5℃；20分钟 3.革兰染色的染料第一液为、第二液是，第三液是，第四液为，革兰阳性菌染成色，革兰阴性菌染成色 结晶紫；卢戈碘液；95%乙醇；稀释石炭酸复红；紫色；红色 4.紫外线的杀菌机理是，导致细菌变异和死亡。但因紫外线的穿透力弱，不能透过玻璃、纸张等，因而紫外线常用于空气和物体表面的消毒灭菌。无菌室空气消毒常采用法和。 吸收紫外线使DNA变性；紫外线照射灭菌；臭氧消毒 5.目前我们公司采用的空气检测法是。 沉降法 6.生产用水主要检测；和。致病菌培养时间为。 细菌、真菌、致病菌；48H 7.生产车间洁净度是级的有灌装间；；净化储膏间和 。 10万；消毒包材暂存间；普通储膏间

8.金黄色葡萄球菌检测通过SCDLP增菌液增菌，接种到培养基分离培养，再染色观察可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为，显微镜下呈葡萄状排列。 Baird-Parker培养基；革兰氏阳性 9.实验室检测真菌使用，在温度下培养小时。虎红培养基；28℃；72 10. 5S是指；；；和 五方面，6S在其基础上增加了。 整理；整顿；清扫；清洁；素养；安全 二选择题 1.下列微生物特征中正确的是（ ABCD ） A.个体微小 B.种类繁多 C.分布广泛 D.需借助光学显微镜或电子显微镜放大后才能观察到 E.只能在活细胞内生长繁殖 2.生物安全柜在放置时应与墙面至少保持多少距离（ B ） A. 20cm B. 30cm C.40cm D.50cm 3.消毒包材及生产人员手部微生物细菌数量控制标准（B ） A.小于等于15 B.小于等于5 C.小于10 D.小于等于10 4.生产用水微生物细菌数量控制标准（D ） A. 小于等于15 B.小于等于5 C.小于10 D.小于等于10 5. 下面说法错误的是（A）

化妆品微生物检验方法

一、总则 1、范围 本规范规定了化妆品微生物检验得基本要求. 本规范适用于化妆品样品得采集、保存及供检样品制备。 2、仪器与设备 2、１天平。 2、2 高压灭菌器。 2、３振荡器。 ２、4三角瓶,２５０mL。 2、５玻璃珠。 ２、6 琉璃棒。 2、7刻度吸管，１ｍL、10mＬ. 2、8 研钵或均质器。 2、９恒温水浴箱. ３、培养基与试剂 3、1 生理盐水 成分： 氯化钠8、5g 蒸馏水加至100０ｍL 溶解后,分装到加玻璃珠得三角瓶内，每瓶90 mL,1０3、43kPａ（121℃1５lb）2０min高压灭菌。 ３、２SCDLP液体培养基 成分： 酪蛋白胨17g 大豆蛋白胨3g 氯化钠5g 磷酸氢二钾2、５g 葡萄糖1g 吐温80 ７g 蒸馏水１000ｍL 制法:先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后,再与其它成分混合,加热溶解，调pH为7、2~７、3分装，103、４３ｋPａ（1２１℃15lb)2０ｍｉn高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层得吐温80充分混合,冷却至２5℃左右使用. 注：如无酪蛋白胨与大豆蛋白胨,也可用多胨代替。 3、３灭菌液体石蜡。 3、4 灭菌吐温80。 4、样品得采集及注意事项 4、１所采集得样品，应具有代表性,一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量得包装单位.检验时，应分别从两个包装单位以上得样品中共取１0g或10mL。包装量小于20g得样品，采样量可适当增加样品包装数量。 4、2 供检验样品，应严格保持原有得包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开,防止样品被污染。 ４、3 接到样品后,应立即登记,编写检验序号,并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处,不要冷藏或冷冻。 4、4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等,则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。 4、5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束,均须防止微生物得再污染与扩散,所用器皿及材料均应