几种植物内生真菌的分离及其次级代谢产物生物活性研究

工程硕士学位论文

目录

摘要...................................................................... I Abstract................................................................ III 插图索引.. (Ⅴ)

附表索引 (Ⅵ)

第1章绪论 (1)

1.1植物内生真菌的研究现状 (1)

1.1.1植物内生真菌的定义 (1)

1.1.2植物内生真菌的分布 (1)

1.1.3内生真菌的生物学作用 (2)

1.1.4植物内生真菌的多样性 (2)

1.1.5药用植物内生真菌的分离与鉴定 (2)

1.1.6植物内生真菌次级代谢产物生物活性研究 (3)

1.2本论文研究的几种植物的研究现状 (5)

1.2.1陇蜀杜鹃 (5)

1.2.2攀茎钩藤 (6)

1.2.3灰绿黄堇 (6)

1.2.4鹿蹄槖吾 (7)

1.2.5亚欧唐松草 (7)

第2章五种植物内生真菌的分离纯化 (9)

2.1引言 (9)

2.2实验材料和仪器 (9)

2.2.1实验植物样品 (9)

2.2.2实验仪器 (9)

2.2.3药品与试剂 (9)

2.2.4培养基 (10)

2.3实验方法 (10)

2.3.1内生真菌的分离纯化 (10)

2.3.2内生真菌的形态学观察及初步鉴定 (10)

2.4实验结果与讨论 (11)

2.4.1实验结果与分析 (11)

2.4.2实验讨论 (15)

第3章五种植物内生真菌次级代谢产物粗提物的生物活性研究 (16)

3.1引言 (16)

3.2实验材料 (17)

3.2.1实验菌株 (17)

3.2.2培养基 (17)

3.2.3实验材料 (17)

3.3实验方法 (18)

3.3.1内生真菌的发酵及待测样品的制备 (18)

3.3.2粗提物抗单胺氧化酶（MAO）活性测定 (19)

3.3.3粗提物抗乙酰胆碱酯酶活性测定 (20)

3.3.4粗提物杀虫活性测定 (22)

3.3.5粗提物对辣椒疫霉菌抑制活性测定 (22)

i

几种植物内生真菌的分离及其次级代谢产物生物活性研究

3.4实验结果与讨论 (23)

3.4.1结果 (23)

3.4.2讨论 (32)

第4章内生真菌代谢产物化学成分研究 (33)

4.1引言 (33)

4.2材料及仪器 (33)

4.2.1实验菌株 (33)

4.2.2培养基 (33)

4.2.3实验材料及仪器 (33)

4.3实验方法 (35)

4.3.1菌株LSDJ-J-6次级代谢产物化学成分研究 (35)

4.3.2菌株QDE-6次级代谢产物化学成分研究 (36)

4.3.3单体化合物抗单胺氧化酶活性测定 (37)

4.3.4单体化合物抗乙酰胆碱酯酶活性测定 (37)

4.4实验结果与讨论 (38)

4.4.1单体化合物的结构鉴定 (38)

4.4.2化合物的抗单胺氧化酶活性 (40)

4.4.3化合物的抗乙酰胆碱酯酶活性 (40)

4.5讨论 (41)

第5章菌株的分子生物学鉴定 (42)

5.1引言 (42)

5.2实验材料 (42)

5.2.1待测菌种 (42)

5.2.2培养基 (42)

5.2.3实验药品和试剂 (42)

5.2.4实验仪器 (43)

5.3实验方法 (43)

5.3.1菌种的活化 (43)

5.3.2菌丝体的扩大培养 (43)

5.3.3菌丝体DNA的提取 (43)

5.3.4 DNA纯度的检测 (44)

5.3.5 ITS-PCR扩增 (44)

5.3.6扩增产物检测 (45)

5.3.7扩增产物的纯化及序列的测定 (45)

5.3.8扩增产物序列的分析 (45)

5.4实验结果 (46)

5.4.1 DNA纯度的检测 (46)

5.4.2菌株分子生物学鉴定 (46)

5.5实验小结 (51)

结论 (52)

参考文献 (54)

致谢 (62)

附录A（攻读硕士学位期间所发表的论文及成果） (63)

附录B 内生真菌的的DNA序列 (64)

附录C 代表性谱图 (64)

ii