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肺结核的实验室及其他检查

肺结核的实验室及其他检查
肺结核的实验室及其他检查

一、结核菌检查痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。痰菌阳性说明病灶是开放性的(有传染性)。若排菌量多(每毫升10万条以上),直接涂片检查易呈阳性,为社会传染源。厚涂片法能提高发现率。荧光显微镜检查适用于大量标本快速检查。无痰或儿童不会咳嗽,可采用清晨的胃洗涤液查找结核菌。成人可用纤支镜检查或从冲洗液中查找结核菌。痰菌量较少(每毫升1万条以下),可用集菌法。培养法更为精确,除能了解结核菌有无生长繁殖能力,并可作药物敏感试验和菌型鉴定。结核菌生长缓慢,使用改良罗氏培养基,一般需4-8周始能报告。使用含14C的棕榈酸作碳源底物的7H12培养基测量细菌代谢过程中所产生14C的量,即可推算出标本中是否含有抗酸杆菌(BACTEC法),在5-7天即可报告,比一般培养法缩短了时间,且可作药物敏感试验和菌型鉴定,但缺点是标本可因污染而影响检查结果。将标本在体外用聚合酶链反应(PCP)方法,使所含微量结核菌DNA得到扩增,用电泳法检出。1条结核菌约含1fgDNa ,40条结核菌即可有阳性结果。此法不用体外预培养,特异性强,2天可出报告,快速、简便,还可以作菌型鉴定,但时有假阳性或假阴性。

二、影像学检查胸部X线检查不但可早期发现肺结核,而且可对病灶部位、范围、性质、发展情况和治疗效果作出判断,对决定治疗方案很有帮助。除荧光透视和X线摄片处,必要时还可采用点片或特殊体位(如前弓位)摄片、体层摄片及支气管造影等。摄片结合透视能提高诊断的准确性,可发现肋骨、纵隔、膈肌或心脏遮盖的细小病灶,并能观察心、肺、膈肌的动态。荧光缩影X线检查适用于集体肺部健康检查。肺结核的常见X线表现有:纤维钙化的硬结病灶(斑点、条索、结节状,密度较高,边缘清晰),浸润性病灶(云雾状、密度较淡、边缘模糊)干酪性病灶(密度较高、浓度不一)和空洞(有环形边界的透光区)。肺结核病灶一般在肺的上部、单侧或双侧,存在时间较长,常有多种性质不同的病灶混合存在和肺内播散迹象。胸部CT检查对于发现微小或隐蔽性病变,了解病变范围及组成,对于诊断是有帮助的。三、结核菌素(简称结素)试验旧结素(old tuberculin,OT)是从生长过结核菌的液体培养基中提练出来的结核菌代谢产物,主要含有结核蛋白。在人群中作普查时,可用1:2000的OT稀释液0.1ml(5IU),在左前臂屈侧作皮内注射,经48-72h 测量皮肤硬结直径,如小于5mm为阴性,5-9mm为弱阳性(提示结核菌感染或非结核性分支杆菌感染),10-19mm为阳性反应,20mm以上或局部发生水泡与坏死者为强阳性反应。结素的纯蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD)为纯结素,不产生非特异性反应。PPD-PT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用,已经取代OT.我国从人型结核菌制成PPD (PPD-C),又从卡介苗制成BCG-PPD,0.1ml为5IU,用于临床诊断,硬结平均直径≥5mm为阳性反应。结素试验除引起局部皮肤反应外,还可引起原有结核病灶和全身反应。临床诊断一般使用5IU,如无反应,可在一周后再用5IU皮试(产生结素增强效应),若仍为阴性,大多可除外结核感染。结素试验阳性反应仅表示结核感染,并不一定患病。我国城市成年居民的结核感染率在60%以上,故用5IU结素进行检查,其一般阳性结果意义不大。但如用高稀释度(1IU)作皮试呈强阳性者,常提示体内有活动性结核灶。结素试验对婴幼儿的诊断价值比成年人大,因为年龄越小,自然感染率越低;3岁以下强阳性反应者,应视为有新近感染的活动性结核病,须给予治疗。结素试验阴性反应除提示没有结核菌感染外,还见于以下情况。结核菌感染后需4-8小时有变态反应充分建立;在这变态反应前期,结素试验可为阴性。在应用糖皮质激素等免疫抑制剂者,或营养不良及麻疹、百日咳等病人,结素反应也可暂时消失。严重结核病和各种危重病人对结素无反应,或仅为弱阳性,这都是由于人体免疫力连同变态反应暂时受到抑制的结果;待病情好转,又会转为阳性反应。其他如淋巴细胞免疫系统缺陷(如淋巴瘤、白血病、结节病、艾滋病等)病人和老年人的结素反应也常为阴性。四、其他检查结核病人血象一般无异常。严重病例可有继发性贫血。急性粟粒型肺结核可有白细胞总数减低或类白血病反应。活动性肺结核的红细胞沉降率(简称血沉)可增快,但对诊断无特异性价值,血沉正常也不能排除活动性肺结核。病人无痰或痰

菌阴性而需与其他疾病鉴别时,酶联免疫吸附试验(ELISA)检出结核病人血清中特异性抗体,主要对于诊断肺外结核病可提供一些参考。纤维支气管镜检查对于发现支气管结核、了解有无肿瘤、吸取分泌物、解除阻塞或作细菌及脱落细胞检查,以及摘取活组织作病理检查等,均有重要诊断价值。浅表淋巴结活组织检查,有时对结核病鉴别诊断是必要的。

结核病的实验室诊断方法及评价

耐多药结核病的实验室诊断条件:因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性, 1)需P2及以上实验室,目前我院实验室条件基本具备即将投入运行, 2)日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限,工作人员生物安全得不到保障,应定期予以更换。 耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。因此其基础是培养,只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。 1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准,是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准,是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化,其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。 2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多,抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。 3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。多种以PCR为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变,作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。这些方法具体包括:主要是DNA序列分析法,聚合链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP),另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明,检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变,但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷,检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。 结核病的实验室诊断方法及评价 (一)标本的采集 1.痰标本采集新发病人应在抗结核药物治疗前留取痰标本。治疗中的病人应停药2~3天后留取痰标本。病人于清晨漱口后,留取3~5ml合格的痰标本(深咳后吐出的黏液痰、脓样痰、干酪样痰、褐色血样痰或含少量新鲜血液的血痰),遇到唾液或口永,应重新留取。至少采集3次。WHO推荐的采集容器为国际通用的螺旋盖痰瓶、可密封塑料盒或蜡纸盒。痰容器上应标明病人姓名、编号、检查项目和容器序号。 2.胃冲洗液幼儿不会吐痰,常将痰液咽下,故可用清晨空腹胃洗出液,直接涂片染色或进行结核杆菌培养,连续作三次可提高培养阳性率。胃液结核杆菌检出率以浸润性肺结核和干酪性肺炎为最高,其次为粟粒型肺结核。胃液、痰液或其他分泌物中结核杆菌检查,有时对诊断有决定性意义。 3.支气管肺泡灌洗和支气管冲洗支气管肺泡灌洗和支气管冲洗液至少5ml并以无菌容器盛装,以用于检验。 4.病灶组织或干酷块等先用组织研磨器磨碎后再行涂片。 5.尿液留全量夜尿,静置4或5小时后,弃上清液,取沉淀部分尿液10ml,3000rpm.离心30min,取沉渣涂片。 6.体液或脑脊液无菌操作收集体液或脑脊液,放置冰箱或室温24h,待薄膜形成后

结核病临床实验室检测

结核病临床实验室检测 当前,我国结核病临床实验室检测的分类:光学检测、免疫学检测、分子生物学检测和微生物学检测,其中微生物学检测是结核病检测的金标准,也是我国疾控系统所采用的主要方法。 光学检测包括胸透和X光片,该方法主要是临床用于肺结核的筛查,发现肺部的阴影和继发性结核的病灶,是临床上用于检测继发性结核的主要方法,灵敏度和特异性都非常差。 免疫学检测包括细胞免疫和体液免疫,其中,细胞免疫是利用结核分支杆菌的特异性抗原对患者的免疫细胞进行刺激,致使患者的免疫细胞释放出γ-干扰素等细胞因子,再通过检测细胞因子的含量来间接的判断是否感染结核分枝杆菌,该方法是最近几年比较火的一个项目,特别是在一些综合性医院,因为该项目收费高,各医院开展的积极性也比较高;体液免疫就是利用结核分支杆菌特异性抗原(LAM、38KD、16KD等)来检测患者体液中的lgM或lgG,灵敏度和特异性大概都在70%左右,该方法在前几年比较流行,但现在因为WHO的文章的反驳,大部分临床医院已经放弃了这种方法,还有少量的单位在使用,主要用于临床的辅助诊断。 分子生物学检测包括结核病的临床诊断和结核分支杆菌的药敏检测,结核病的分子生物学诊断主要是通过PCR等方法来检测痰标本或胸腹水等中的DNA或RNA片段,该方法相较于传统的微生物学来说具有快速和灵敏度高的特点,缺点就是操作比较麻烦,对操作人员的要求较高。结核药敏的分子生物学检测就是检测结核分支杆菌耐药基因的突变位点,该方法也比较快速,但目前研究比较清楚的耐药基因突变位点仅限于一线抗生素中的利福平和异烟肼等仅有的几种药,而我国是一个结核分支杆菌耐药比较严重的国家,仅仅有一线抗生素还不能满足临床的需要。 微生物学检测包括染色、培养和药敏实验,微生物学检测是结核病临床检测的金标准。染色有抗酸染色和荧光染色两种,是目前我国结防系统进行结核病初期筛查的主要方法,该方法简单、快速费用低,但阳性率比较低,据统计我国根据染色法进行结核病的筛查阳性发现率还不到10%;培养法包括固体培养法和液体培养法,固体培养基分改良罗氏培养基和酸性罗氏培养基,两者的区别在于对标本的要求不同,改良罗氏培养基要求的是PH值中性的标本,酸性罗氏培养基要求接种碱性标本即痰标本经过消化后不经过中和直接接种,据临床统计固体培养的阳性率在10~15%之间,阳性报阳时间21~28天为多,临床收费在10~40元之间。液体培养是以7H9培养基为基础,添加生长因子和抑菌剂,目前市场上的液体培养基以进口的为主,辅以仪器,以BD、赛默飞世尔和梅里埃,国产试剂和仪器目前还没有,在进口仪器中以BD公司的MGIT960一家独大,在中国90%的疾控系统和临床单位都拥有该仪器,该仪器是以购买为主,不投放,价格在70万元左右,据临床统计液体培养的阳性率30~45%左右,平均报阳时间在14天左右,临床收费在100~180元之间。药敏实验目前在中国有绝对浓度法和比例法,该方法是以固体罗氏培养基为基础,分别添加一线或二线抗生素,比例法的平均出结果的时间在28天,该方法无法做结核一线抗生素中的吡嗪酰胺,液体药敏的出结果时间在7~14天,结核药敏的临床收费是按每种抗生素收费的,固体法每种药的收费在7~25元/种药物,液体全自动药敏的收费在90~120元/种药物。

结核菌的实验室检测

结核菌的实验室检测 实验室检查是确诊结核病、选择治疗方案、评价治疗效果的重要依据,也是发现传染源,控制结核病流行的重要手段。目前,结核病常用的实验室检查主要包括:痰涂片检查、痰结核菌培养及药物敏感性试验、分子生物学检查等。 1.痰涂片检查 痰标本采集: 一般应采集3种痰标本: 即时痰:就诊即时咳出的痰 清晨痰:清晨深咳出的痰 夜间痰:就诊前夜间咳出的痰。 痰标本的要求: 痰标本采集的时间、痰标本质量好坏和是否在使用抗结核药等均直接影响结核菌的检出。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。痰量为3ml~5ml。晨痰涂片阳性率比较高。当患者痰少时,可采用高渗盐水超声雾化导痰。 痰涂片结果:包括:阳性、阴性 结果的意义: 涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌存在,不能区分是结核菌还是非结核分枝杆菌。由于我国非结核分枝杆菌病较少,故检出抗酸杆菌对

诊断结核病有极重要的意义。直接涂片方法简单、快速,应作为常规检查方法。涂片阴性不能排除肺结核,连续检查3次以上,可提高其检出率。 2痰结核菌培养 确定诊断: 临床怀疑肺结核,但直接痰涂片结果为阴性,为进一步明确诊断,可进行痰培养。确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本,即夜间痰和晨痰。 耐药监测: 以耐药监测为目的的培养,主要是为了获得分枝杆菌的纯培养物用于药敏试验,所以一般选用涂片阳性的标本进行培养。 药敏试验:这是了解抗结核药物是否对结核菌敏感、诊断耐药结核以及指导结核病治疗的有效手段。 痰培养结果:包括:阳性、阴性 痰结核菌培养的灵敏度高于痰涂片检查,可直接获得菌落,便于与非结核分枝杆菌鉴别。未进行抗结核治疗或停药48-72小时的肺结核患者可获得比较高的检出率。痰结核菌培养所需时间较长,一般需培养4-8周。

宁夏地区结核病实验室检测能力及现状分析

宁夏地区结核病实验室检测能力及现状分 析 摘要:目的准确了解目前宁夏全区各市县结核病实验室的运转状况,帮助发现基层结核病实验室中应解决的问题,加大阳性痰涂片的发现力度,进一步提高宁夏结核病实验室技术水平。方法对全区各市县级实验室结核菌痰涂片开展室间质量控制(EQA)及现场评价,省级参比室进行最终质控考核,考核结果与2011年和2012年比较。结果我区EQA地区覆盖率已达100%,质控频率为省级2次/年,市级1次/季度。2013年省级EQA复检痰涂片省级EQA587张,镜检符合率98.6%,略高于2012年,但略低于2011年。肉眼观察痰涂片总体符合率较2011年和2012年略有下降。2013年现场质控发现痰片缺失21.0%,痰膜大小合格率91.9%,厚薄合格率90.8%,染色合格率92.4%,勉强达标。结论宁夏各县级实验室基本情况良好,但也存在很多不足,为了更好地了解耐多药结核病流行情况,必须加强实验室能力建设,逐步推进结核病细菌学实验室检测能力。 关键词:痰检质控;室间质量控制(EQA);现场评价 我国属于结核病高负担国家之一,结核病疫情严重,尤其是近年来耐多药结核病(MDR-TB)的发生,成为国家结

核病控制规划(NTP)的实施的重大障碍。结核病细菌学检查是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据,也是考核疗效、评价防治效果的可靠标准,对国家结核病控制项目的成功有重要作用[1]。有效的质量控制,是痰涂片镜检在结核病防治规划中发挥作用的关键。结核分枝杆菌痰涂片镜检更是发现传染源的最主要途径和手段。如何加强痰涂片质量控制,提高各级结核病实验室的痰检质量,提高肺结核病患者的涂阳发率已成为当前国家结核病控制规划实施中的重要内容。现将我区各地结核病实验室痰检EQA及现场评价结果分析报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料宁夏全区5个市、22个县2011~2013年所有结核病防治机构和医疗单位结核病实验室的阴性、阳性结核菌痰涂片和实验室登记本。 1.2方法按照盲法复检抽取2011~2013年制作的208张阳性痰涂片和1409张阴性痰涂片送至宁夏第四人民医院参比室按痰检质控标准进行复检。复检内容包括:涂片镜检和涂片质量,包括痰膜面积、大小、颜色、脱落。复检结果评价分为符合、量化误差、假阳性、假阴性四类。实验室对结核病患者的痰涂片从标本收集到制片、染色、镜检、再到结果报告,每一步骤均严格按照《痰涂片镜检质量保证手册》进行操作[2]。

结核杆菌实验室生物安全规程教程文件

结核杆菌实验室生物 安全规程

结核杆菌实验室生物安全规程 1、实验室管理制度 (1)实验室入口处必须贴上生物危险标志,注明危险因子,生物安全级别,试验室负责人和相关负责人姓名和电话。 (2)实验室应有明显的区域划分,清洁区,办污染区和污染区。 (3)无论进入实验室时间长短,必须填写工作日志。要严格遵守实验室的一切操作规程。 (4)进行结核菌操作时,需有两名工作人员同时进入实验室,尽量避免单独检验地带网工作。 (5)在对大批量的痰标本和菌株进行分离培养和药敏试验前,英语中心新主任和实验室主任讨论,必要时加强预防措施。 (6)试验室人员应做结核菌素试验,试验结果为阴性时,应接种卡介苗,并做好登记记录。 (7)外来进修,参观人员必须学习实验室的一切规章制度和有关操作规程,经试验室主任批准方可进入实验室。 2、标本采集人员安全要求 (1)标本采集人员的防护:痰标本有病人自行留取,采集咽拭子等特殊标本,采集人员应穿防护服,戴一次性口罩,帽子,戴医用手术手套。 (2)采集标本污染器材的处理:采集标本的痰盒,试管等污染器材军需高压处理。 3、标本运送安全要求 痰标本需留置在特制的痰盒内(直径4cm,高2cm的光口盖密闭的塑料盒),并放置在专用的痰标本运送箱内,运送过程中切勿倒置,严防痰液外溢。由有专人送至痰检实验室,标本送达后痰标本运送箱检验地带网及时用乙醇或是碳酸等化学消毒剂或高压的办法彻底消毒。 4、实验操作安全要求 (1)结核病细菌学实验室要求 结核病细菌学实验室应为生物安全Ⅲ级实验室,用于临床诊断,教学,属中度危险。应具备安全设备,缓冲间实验室条件应满足工作任务的要求,有完善的试验设施,试验室的环境应清洁,卫生,安静,无污染,试验室内的管线设置应整齐,要有安全管理措施和报警,应积及急救设施,房间数量不少于七间,包括实验室准备室,培养机制备室,显微镜检查

最新结核病实验室要求资料

一、各级各类实验室职责 (一)结防机构结核病实验室 1、国家结核病参比实验室 在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下,国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理,为各级提供技术支持和技术服务。 根据国家结核病控制规划的要求,组织全国结核病实验室的工作,参与国家有关技术政策的制定和组织实施。 制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。 建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统,并负责组织实施,协调、检查各省(市、自治区)结核病实验室工作。 除常规的分枝杆菌检查项目外,还应承担其它结核病诊断新技术,新方法的实施和基础研究,承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。 开展有关的实施性研究。 培训结核病实验室技术人员。 接受跨国参比实验室的质量控制。 2、省级结核病参比实验室 在国家结核病参比实验室的技术指导下,负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。 按照国家和省结核病控制规划的要求,在国家参比实验室的统一部署下,规划本省结核病实验室工作,指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求,组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作,按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估,指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。 对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准,为全省统一提供抗酸染色试剂,为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。 按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定,有条件的省参比实验室,可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。

结核病实验室检查

结核病实验室检查 一、结核病实验室检查(共100题) 1.菌株保藏至少保存()管。 A、1 ; B、2 ; C、3; D 、4。 答案:B 2.非结核分枝杆菌病系由人结核分枝杆菌、()和麻风分枝杆菌以外的非结核分枝杆菌感染造成的。 A、非洲分枝杆菌; B、耻垢结核分枝杆菌; C、牛结核分枝杆菌; D、堪萨斯结核分支杆菌; 答案:C 3.Runyon分类法将非结核分支杆菌分为四群,有光产色菌;暗产色菌;()快生长菌。 A、慢生长菌; B、不产色菌; C、产色变化菌株; D、 NTM复合群。 答案: B 4.结核分枝杆菌菌种鉴定用的培养基是()培养基和()培养基。 A、对硝基苯甲酸;

B、亚碲酸; C、芳香硫酸脂酶; D、噻吩-2-羧酸肼。 答案 A、D 5.在药敏结果()的状况下,判断为结核分枝杆菌复合群。 A、PNB长,TCH不长; B、 PNB不长,TCH不长; C、PNB长,TCH不长; D、 PNB不长,TCH长。 答案:D 6.利福平的耐药相关基因为()。 7.A、rpoB ; B、 pncA ; C、 katG; D、 inhA 答案:A 7.乙胺丁醇的耐药相关基因为()。 A、rpoB; B、 pncA ; C、 katG; D、 embB。 答案:D 8.结核抗体检测方法有哪几种()多选题。

A、酶联免疫吸附试验(ELISA); B、免疫渗滤试验(DIGFA); C、免疫层析试验(DICA) D、免疫印迹试验。 答案:ABCD 9.结核抗体检测优点有哪些()多选题。 A、简便、快速; B、灵敏; C、特异; D 、应用面广。 答案:ABCD 10.抗原进入人体后,体液中的抗原被体液中的抗体消灭,若侵入了细胞则抗体就无能为力了,只能被相应的免疫细胞消灭。前者称为(),后者称为()多选题。 A.细胞免疫; B、特异免疫; C、非特异免疫; D、体液免疫。 答案:DA 11.前处理试剂的成分()。 A、4%NaOH; B、 2%NaOH; C、 4%HCl; D、 2%HCl。 答案:A

结核病实验室要求

结核病实验室要求 LG GROUP system office room 【LGA16H-LGYY-LGUA8Q8-LGA162】

一、各级各类实验室职责 (一)结防机构结核病实验室 1、国家结核病参比实验室 在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下,国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理,为各级提供技术支持和技术服务。 根据国家结核病控制规划的要求,组织全国结核病实验室的工作,参与国家有关技术政策的制定和组织实施。 制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。 建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统,并负责组织实施,协调、检查各省(市、自治区)结核病实验室工作。 除常规的分枝杆菌检查项目外,还应承担其它结核病诊断新技术,新方法的实施和基础研究,承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。 开展有关的实施性研究。 培训结核病实验室技术人员。 接受跨国参比实验室的质量控制。 2、省级结核病参比实验室 在国家结核病参比实验室的技术指导下,负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。 按照国家和省结核病控制规划的要求,在国家参比实验室的统一部署下,规划本省结核病实验室工作,指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求,组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作,按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估,指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。 对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准,为全省统一提供抗酸染色试剂,为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。 按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定,有条件的省参比实验室,可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。

结核病实验室要求

一、实验室生物安全 实验室环境安全:根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定,结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级(Laboratory Biosafety Level 3)的环境中进行;样本检测(包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取等初步检测活动),可以在符合生物安全二级(Laboratory Biosafety Level 2)的环境中进行。实验室所用设施、设备和材料(含防护屏障)均应符合相关的标准和要求。 实验室操作安全:由具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作,实验人员应该认真负责,格按照标准化、规化的操作程序进行各项实验室操作。 菌种或样本运输安全:为保障人体健康和公共卫生安全,在运输可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本时,须按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》的要求进行包装、运输、操作、保藏和管理。 废弃物处理安全:为防止疾病传播,保护环境,保障人体健康,医疗废弃物的处理应格按照《中华人民国传染病防治法》和《中华人民国固体废物污染环境防治法》,以及《医疗废物管理条例》的相关规定妥善处理。 (一)痰涂片镜检实验室基本要求 1.实验室应分区(痰涂片染色区域和读片镜检区域),布局应符合生物安全二级防护的要求。

2.准入规定,在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志,未经批准任人不得进入实验室工作区域,实验室的门应随时关闭。 3.个人防护,在实验室工作时,应穿防护服、隔离衣,并佩戴口罩(面具)和手套等。 4.实验室墙壁、天花板和地板应易清洁、不渗液,并耐化学品和消毒剂的腐蚀,地面应防滑。 5.实验操作台面应耐热、防水,耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀。 6.实验室应保证操作时的照明,避免不必要的反光和闪光。 7.实验室应设置洗手池、洗眼器或喷淋设备。 8.实验室中的器具和实验台应坚固耐用,在实验台、生物安全操作柜和其他设备之间及下面,应留有足够空间,以便于清洁。 9.实验室中可开启的窗户应安装纱窗。 10.实验室应有适当的消毒设备。 11.在实验室门口处应设挂衣装置,个人便装与实验室工作服分开放置。 12.实验室应装备开展痰涂片检查所需要的仪器和设备。 (二)结核分枝杆菌培养实验室基本要求 1.满足生物安全二级的基本要求。 2.准入规定,在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志,未经批准任人不得进入实验室工作区域,实验室的门应随时关闭。 3.个人防护,在实验室工作时,应该穿防护服、隔离衣,并佩戴口罩(面具)和手套等。 4.实验室墙壁、天花板和地板应光滑、易清洁、不渗液,并耐化学品和消毒

结核病的实验室诊断技术

!!作者单位""&!!!"杭州(浙江省中西医结合医院结核病治疗中心 结核病的实验室诊断技术 李!锋!朱!敏 !!!摘!要"!由于结核菌耐药性增强(以及不少国家和地区忽视对结核病的控制(使得结核病再次成为一个严重的全球性公共卫生问题’随着免疫学&分子生物学技术的飞速发展(目前涌现出许多新型诊断技术’本文总结目前结核病实验室诊断技术(作一综述’ !关键词"!结核病% 实验室诊断!!结核病作为单因致死率最高的传染性疾病(目前疫情再次呈现上升趋势’其诊断主要依靠医生的临床经验并结合传统的结核菌检测和胸部f 线检查’由于胸部f 线的特异性不强(常给结核病的诊断和鉴别诊断带来很多干扰’结核病的实验室诊断技术近年来发展迅速(本文就其现状及展望作一概述(归纳起来大致有如下几个方面" J @C :?J :)O $也有实验室通过色谱)&* 或质谱)%*来鉴定分枝杆菌中特异性的物质(该法可从涂 片阴性的标本中检测出分枝杆菌(但需要特殊的设备且耗资巨大’I !免疫学检测 *细胞免疫学检测目前常用纯化蛋白衍生物 #) I C ;G ;>H )C :@>;C ;=B @;=>(33Y $试验’该法是向机体注射一定量的33Y 后(通过观察机体的反应来判断是否感染结核杆菌(操作时应注意正确的方法’由于简单易行(目前临床上广泛使用其进行结核病的初步诊断’但由于33Y 中含有分枝杆菌的多种蛋白(其皮试阳性并不能鉴别是97+感染或是接触环境中的9Q 77还是卡介苗接种后的致敏’而且其皮试阳性有赖于机体免疫系统正常( 通过一定的时间发生相应的免疫反应’因此其敏感性较差(特异性不高(应注意正确分析试验结果’+血清学检测是通过免疫学方法检测细菌细胞壁抗原&血清中机体产生的特异性抗体&生物活性物质的改变等(该法应用前景广泛(近年来发展十分迅速’其包括以下三种方法"第一(抗体检测针对结核杆菌不同抗原如(2P 76&9376"&9376$等(机体会产生相应的抗体’在体外通过基因工程&杂交瘤等技术获得大量单一抗原(应用酶联免疫吸附测定#(R -2P $法即可检测血清中抗体的存在’但个体对结核杆菌不同的蛋白抗原反应是不同的(而且对某一种抗原的反应存在阶段差异性(因此单一抗原的检测存在较大局限性’目前(越来越多的学者把眼光投向制备含有多种特异性抗原的联合抗原’第二(细胞因子检测基础研究已证明(结核患者#尤其是活动性结核$血清中或浆膜腔积液中的多种细胞因子包括"-R 家族及其受体&-.8/8&78./!等会发生明显的 变化)"($ *(并且会随病情的改变而改变(检测这些细 胞因子水平为评估病情提供了依据’目前多使用双抗体夹心法检测(有商品化的试剂盒使用(方便快捷(但仅供参考’第三(抗原检测单克隆抗体与免疫印记法检测不同分子质量蛋白#"#M I &$1M I 等$(通过斑点吸附免疫金标法检测脂阿拉伯甘露聚糖 #D ;) :B C B K ;<:E B <?);C (Q J @4%!!6(W :D 4%648:4&!  万方数据

实验室检查

实验室检查 1.定义:以离体的人血液、体液、分泌物、排泄物和脱落物等为标本,通过试剂、设备、仪器、技术等进行检测,并进行全面的质量控制,最终得到可靠的检测结果或数据,辅助临床诊断、治疗及预后判断等。 2.临床实验室 医院内的检验科、部分临床科室的实验室。 门诊部、诊所的实验室。 性病、结核病防治院(所)的实验室。 采供血机构的实验室。 卫生防疫部门从事人体健康检查的实验室。 卫生检疫部门对出入境人员进行健康检查实验室。 独立的临床检验机构。 3.主要内容(按学科分类) 临床基础检验(临床一般检验) 含临床输血检验、脱落细胞学检验 临床血液学检验 临床生物化学检验 临床免疫学检验 临床病原体检验(微生物与寄生虫检验) 分子生物学检验 遗传学检验 第一节临床一般检验 一、血液一般检验(血常规检查+血沉) 二、尿常规检验

三、粪便常规检验 四、体液检查(脑脊液、胸腔和腹腔积液) 五、分泌物(阴道分泌物、精液、前列腺液)一、血液一般检查 红细胞参数 红细胞计数(RBC) 血红蛋白测定(Hb) 血细胞比容测定(Hct ) 平均红细胞体积(MCV) 平均血红蛋白含量(MCH) 平均血红蛋白浓度(MCHC) 红细胞体积分布宽度(RDW) 血沉(ESR) 白细胞参数 白细胞计数(WBC) 白细胞分类计数(N , L, M, E, B) 血小板参数 血小板计数(PLT) 平均血小板体积(MPV) 血小板体积分布宽度(PDW) 白细胞分类计数(手工法)

2.白细胞计数WBC的临床意义 A.白细胞WBC↑ 急性细菌感染或炎症:最常见原因 严重的组织损伤:如手术、心肌梗死 溶血、急性大出血 急性中毒 肿瘤性增多 白血病(未成熟细胞) B.白细胞WBC↓ 某些感染:病毒(最常见)、伤寒、原虫 某些血液病:再障,营养缺乏 理化因素致骨髓抑制: 射线(放化疗)、金属(铅汞)、 化学药物(镇痛药、磺胺类药的服用) 脾功能亢进:破坏增加 自身免疫性疾病:粒细胞自身抗体 3. PLT 4. 红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation, ESR) ESR: 抗凝RBC在第一小时内和1h末不同时间段内下沉的距离。 临床应用: 炎症:结核、风湿热等 组织损伤及坏死:心机梗塞↑,心绞痛- 良、恶性肿瘤鉴别:恶性↑,良性- 球蛋白增高类疾病

肺结核——不容忽视的“白色瘟疫

不容忽视的“白色瘟疫” 结核病是目前致死人数最多的传染病。为保护自己免受感染,下面我们来一起了解“白色瘟疫”——结核病。 每年3月24日是世界防治结核病日。1882年的这天,罗伯特?科赫发现了结核病的致病菌——结核杆菌。 一、流行概况 结核病困扰人类已有上万年的历史。科学家们在9000年前的以色列人遗骸和2000年前的埃及木乃伊上都发现了肺结核感染的痕迹。欧洲结核病是在工业革命后,由于社会化大生产造成结核病传播,病人因为严重贫血而脸色苍白,日渐瘦损,因此被称为痨病,或白色瘟疫(与“黑死病”相对照)。直到上世纪40年代链霉素发明之前,结核病都被视为绝症。 在很多人眼里,随着“白色瘟疫”时代的结束,结核病应该早已载入史册。但事实上,随着耐多药结核病,糖尿病、艾滋病合并结核病的增多,结核病不仅没有消失,反而成为世界公共卫生的一大难题。世界卫生组织报道,目前全球近1/3的人已感染结核杆菌,活动性肺结核病人约2000万,每年新发结核病人约800-1000万,每年约有300万人死于结核病。结核病已成为全世界成人因传染病而死亡的主要疾病之一。 我国是全球22个结核病高负担国家之一,活动性肺结核病人数居世界第二位。我国肺结核疫情有以下特点:一是感染人数多。二是发

病人数多。三是现患人数多。四是耐药患者人数多。五是结核菌/艾滋病病毒双重感染人数多。六是疫情分布不平衡。 二、结核病分类 结核杆菌可以侵入人体的任何器官,如脑、胃肠、心包、盆腔、骨、腹膜、淋巴、皮肤等,但绝大多数人感染结核杆菌后,其发病部位在肺部,称为肺结核--最常见、对人群健康威胁最大。其它部位的病变,统称为肺外结核。 三、结核菌是如何传播的? (一)传染源:正在排菌的肺结核患者。 患者痰中的结核杆菌越多,其传染的危险性越大。 (二)传播途径:一是通过呼吸道传染,以飞沫传染为最主要的方式。二是经消化道进入人体,饮用未经消毒带有结核杆菌的牛奶可能引起肠道感染。 (三)易感人群:人群对于结 核杆菌普遍易感。 四、结核病症状 (一)肺结核早期及全身症状 肺结核病人早期表现为周身不 适、倦怠、精神不振、烦躁不安,如果上述症状持续时间较长而没有特殊原因者,可能为肺结核的早期症状,应该引起重视。 午后低热:肺结核患者常有一些结核中毒症状,其中发热最常见。一般为午后37.4℃~38.0℃的低热,可持续数周,热型不规则,部分

肺结核的实验室及其他检查

一、结核菌检查痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。痰菌阳性说明病灶是开放性的(有传染性)。若排菌量多(每毫升10万条以上),直接涂片检查易呈阳性,为社会传染源。厚涂片法能提高发现率。荧光显微镜检查适用于大量标本快速检查。无痰或儿童不会咳嗽,可采用清晨的胃洗涤液查找结核菌。成人可用纤支镜检查或从冲洗液中查找结核菌。痰菌量较少(每毫升1万条以下),可用集菌法。培养法更为精确,除能了解结核菌有无生长繁殖能力,并可作药物敏感试验和菌型鉴定。结核菌生长缓慢,使用改良罗氏培养基,一般需4-8周始能报告。使用含14C的棕榈酸作碳源底物的7H12培养基测量细菌代谢过程中所产生14C的量,即可推算出标本中是否含有抗酸杆菌(BACTEC法),在5-7天即可报告,比一般培养法缩短了时间,且可作药物敏感试验和菌型鉴定,但缺点是标本可因污染而影响检查结果。将标本在体外用聚合酶链反应(PCP)方法,使所含微量结核菌DNA得到扩增,用电泳法检出。1条结核菌约含1fgDNa ,40条结核菌即可有阳性结果。此法不用体外预培养,特异性强,2天可出报告,快速、简便,还可以作菌型鉴定,但时有假阳性或假阴性。 二、影像学检查胸部X线检查不但可早期发现肺结核,而且可对病灶部位、范围、性质、发展情况和治疗效果作出判断,对决定治疗方案很有帮助。除荧光透视和X线摄片处,必要时还可采用点片或特殊体位(如前弓位)摄片、体层摄片及支气管造影等。摄片结合透视能提高诊断的准确性,可发现肋骨、纵隔、膈肌或心脏遮盖的细小病灶,并能观察心、肺、膈肌的动态。荧光缩影X线检查适用于集体肺部健康检查。肺结核的常见X线表现有:纤维钙化的硬结病灶(斑点、条索、结节状,密度较高,边缘清晰),浸润性病灶(云雾状、密度较淡、边缘模糊)干酪性病灶(密度较高、浓度不一)和空洞(有环形边界的透光区)。肺结核病灶一般在肺的上部、单侧或双侧,存在时间较长,常有多种性质不同的病灶混合存在和肺内播散迹象。胸部CT检查对于发现微小或隐蔽性病变,了解病变范围及组成,对于诊断是有帮助的。三、结核菌素(简称结素)试验旧结素(old tuberculin,OT)是从生长过结核菌的液体培养基中提练出来的结核菌代谢产物,主要含有结核蛋白。在人群中作普查时,可用1:2000的OT稀释液0.1ml(5IU),在左前臂屈侧作皮内注射,经48-72h 测量皮肤硬结直径,如小于5mm为阴性,5-9mm为弱阳性(提示结核菌感染或非结核性分支杆菌感染),10-19mm为阳性反应,20mm以上或局部发生水泡与坏死者为强阳性反应。结素的纯蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD)为纯结素,不产生非特异性反应。PPD-PT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用,已经取代OT.我国从人型结核菌制成PPD (PPD-C),又从卡介苗制成BCG-PPD,0.1ml为5IU,用于临床诊断,硬结平均直径≥5mm为阳性反应。结素试验除引起局部皮肤反应外,还可引起原有结核病灶和全身反应。临床诊断一般使用5IU,如无反应,可在一周后再用5IU皮试(产生结素增强效应),若仍为阴性,大多可除外结核感染。结素试验阳性反应仅表示结核感染,并不一定患病。我国城市成年居民的结核感染率在60%以上,故用5IU结素进行检查,其一般阳性结果意义不大。但如用高稀释度(1IU)作皮试呈强阳性者,常提示体内有活动性结核灶。结素试验对婴幼儿的诊断价值比成年人大,因为年龄越小,自然感染率越低;3岁以下强阳性反应者,应视为有新近感染的活动性结核病,须给予治疗。结素试验阴性反应除提示没有结核菌感染外,还见于以下情况。结核菌感染后需4-8小时有变态反应充分建立;在这变态反应前期,结素试验可为阴性。在应用糖皮质激素等免疫抑制剂者,或营养不良及麻疹、百日咳等病人,结素反应也可暂时消失。严重结核病和各种危重病人对结素无反应,或仅为弱阳性,这都是由于人体免疫力连同变态反应暂时受到抑制的结果;待病情好转,又会转为阳性反应。其他如淋巴细胞免疫系统缺陷(如淋巴瘤、白血病、结节病、艾滋病等)病人和老年人的结素反应也常为阴性。四、其他检查结核病人血象一般无异常。严重病例可有继发性贫血。急性粟粒型肺结核可有白细胞总数减低或类白血病反应。活动性肺结核的红细胞沉降率(简称血沉)可增快,但对诊断无特异性价值,血沉正常也不能排除活动性肺结核。病人无痰或痰

检测痰中结核杆菌几种方法的对照

检测痰中结核杆菌几种方法的对照 发表时间:2011-07-14T08:06:36.360Z 来源:《中外健康文摘》2011年第15期供稿作者:苏京华王茶花[导读] 目的探讨建立快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。 苏京华王茶花(上饶县人民医院江西上饶 334100) 【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)15-0168-02 【摘要】目的探讨建立快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。方法采用直接涂片抗酸染色法、离心沉淀集菌法和结核菌培养法对痰结核分枝杆菌进行检测,并对其检出率进行比较。结果培养法检出率最高为14.8%。但检测时间较长,离心沉淀集菌法次之为14.5%,直接涂片抗酸染色法检出率最低为10.1%。结论离心沉淀集菌法找痰结核分枝杆菌快速、安全、简单易行,在肺结核的早期诊断中能发挥重 要作用。 【关键词】结核杆菌方法对照 近年来,伴随着经济发展,生活水平提高,人们对健康已普遍重视。然而随着全球人口流动性的增加、艾滋病的流行以及耐药结核菌株的出现,结核病的发病率不断增加,已成为严重威胁人类生命健康的传染性疾病,受到世界各国的广泛关注。肺结核如果没有及早得到确诊,一方面会危及患者生命;另一方面又会感染周围的人。“在我国结核病是国家重点控制的传染病,但结核病的疫情依然相当严重。部分地区有蔓延趋势。结核病的患者人数在世界各国中居于第二位。” [1] 面对这样一个严峻的客观情况,找到一种准确、快速的结核病检查方法是必需的。 检查肺结核,实验室诊断是主要的途经和手段,是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据,也是考核疗效、评价治疗效果的可靠标准。痰中结核杆菌的检测方法常规采用痰涂片及痰培养。涂片虽简单易行,但阳性率低,培养虽为金标准,但周期太长,均难以满足临床需要。分子生物学虽敏感高、检出率也高,但在基层医疗单位中,由于条件、设备的限制,尚不能开展。本实验室通过对痰直接涂片法、痰离心沉淀浓集涂片、痰培养法三种方法进行对照。 1 材料与方法 1.1标本来源 2009年1月至2010年12月,本院住院和门诊疑似肺结核病人1042例,其中男性560例,女性482例,年龄10-81岁。嘱患者清晨嗽口,然后从深部咳痰2-4口分别于两个一次性塑料盒中送检。 1.2试剂萋尼氏染色试剂(按文献[2]的方法自行配制)、4%NaOH(自配)、痰前处理液和改良罗琴氏培养基均采用珠海贝索生物技术有限公司。 1.3 方法 1.3.1 直接涂片法:把专用瓶收集的痰液用接种环挑取选取标本一环,约为0.1ml,直接均匀涂在载玻片右2/3处,涂抹大小为10mm×20mm的卵圆形痰膜,连续送检三天。 1.3.2 离心沉淀集菌法将直接涂片用剩的痰液加1-2倍(视标本性状)痰前处理液(破坏痰液粘性,杀灭结核杆菌),混匀震荡数分钟,使标本充分液化,然后倒入一根试管里,3000r/min离心20分钟,弃去上清液,将沉淀用接种环取出均匀地涂到玻片上,与前面涂的片子一同干燥,固定,抗酸染色,镜检。连续送检三天。 1.3.3 培养法把收集的另一盒痰液加1-2倍的4%NaOH(液化痰液和杀死痰液的杂菌有利于结核菌生长),同上述一样混匀震荡数分钟,使标本充分液化,然后倒入一根试管里,3000r/min离心20分钟,弃去上清液,将沉淀接种于改良罗氏斜面培养基,35度培养2-8周,每周观察一次生长情况,8周仍未生长则报告阴性。 2 结果 按痰检质量保证手册中规定的标准判断结果。300 个油镜视野内见不到结核分枝杆菌时为-,见到1~8 条结核分枝杆菌时为±,3~9条/100 视野为1+,1~9 条/10 视野为2+,1~9 条/ 每视野为3+,≥10条/ 每视野为4+[1]。 1042例标本检测结果见表一,直接涂片法阳性105例,阳性率为10.1%,离心沉淀涂片也阳性,无漏检,但其中有46例直接涂片阴性的标本,沉淀检出结果为阳性,从而使阳性率提高到14.5%,而培养法的阳性154例,其中包括离心集菌的151例,阳性率为14.8%。 表一 3 讨论 结核病是一种感染性疾病,病因很明确,实验室诊断是确诊的主要依据。对肺结核诊断最有价值的是细菌学检查,由于菌阴肺结核在肺结核中占相当大的比例,抗酸染色阳性率低,灵敏度和特异性也很差,并受送检标本质量影响较大,结核菌培养所需时间较长,给肺结核的早期诊断带来困难。检查痰液中是否含有结核杆菌,是临床诊断或鉴别肺结核与其他肺部疾病的重要依据。本文结果表明: 3.1痰液直接涂片镜检法:是各级医院检验科的临床实验室都在使用的常规抗酸性杆菌检查法。其特点是简便、快速和价格便宜,但痰涂片阳性的病人的含菌量每毫升痰在5000-50000个,而涂在涂片上的细菌数就比较少了,因为在涂片时只是在载坡片上,只涂上薄薄一层,所以敏感度低,造成一部分病人漏检,因此检出率较低,且容易造成检验人员交叉感染,不是一种理想的方法。 3.2 痰结核菌培养法:是最可靠的方法,被誉为“黄金标准”,每毫升痰100个菌就能培养阳性,缺点是时间一般需要2~8周才能得出结果,影响病人的治疗时间,而且敏感度低。但培养法的优点是,其药敏实验结果,能为临床用药及细菌耐药性等方面提供准确有效的重要参考;结核菌的培养对临床上的难治病例,耐药病例意义较大,可以帮助医生正确选择敏感药物制订有效的治疗方案。 3.3离心沉淀集菌法:本文通过用痰前处理液,既能杀死结核菌又液化痰液,便于离心沉淀集菌,通过离心沉淀,将整个标本的抗酸杆菌全部浓缩在一张玻片上,从而提高了标本的阳性率,从10.1%提高到1 4.5%,方法简单易掌握,设备也简单、结果快速,且降低了工作人员感染结核病的机率,因此它对进一步提高肺结核病的实验室诊断水平具有重要的临床意义。

全国各级结核病实验室能力合格评定方案1

全国各级结核病实验室能力合格评定方案 前言 结核病实验室检查是发现传染源的最主要手段,是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效的主要依据。质量保证体系是确保实验室检查结果可靠、准确的必要环节。为了保护操作者、环境和受试标本,结核病实验室各项操作应该在符合相应生物安全等级的环境中进行。 根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定,结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级(Laboratory Biosafety Level 3,BSL-3)的环境中进行;样本检测(包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取等初步检测活动)可以在符合生物安全二级(Laboratory Biosafety Level 2,BSL-2)的环境中进行;实验室所用设施、设备和材料(含防护屏障)均应符合国家相关的标准和要求。实验室操作安全:具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作,实验人员应该认真负责,严格按照标准化、规范化的操作程序进行各项实验室操作。 近年来,我国实验室生物安全管理工作逐步加强,相关法规、规章相继出台,对于规范实验室工作发挥了重要作用。随着结核病防治工作的进展,在目前实验室体系建设中部分地区将痰培养和药敏实验工作不断下沉到基层实验室,但一些实验室并不完全符合二级生物安全标准。另外,有些省级实验室加大了科研工作,需要更高的生物安全级别,对原有的实验室合理改造提出了新的要求。随着我国结核病控制工作阶段性目标的全面实现,我国结核病防治工作迈上了一个崭新的、更高的台阶,同时也将面临更大的挑战。耐药结核病控制工作,事关我国结核病控制目标的最终实现,对全国结核病实验室也提出了新的挑战,为进一步完善我国结核病实验室服务网络,加强实验室能力建设,提高实验室服务质量,规范实验室基础建设和服务水平,特制定本实施方案。 一、结核病实验室设计和建设方案 1.标准装配图建议 (1)围护结构 (2)空调通风、三级过滤、温度控制。 (3)高效送风,管道总成,配套高效箱。 (4)高效排风,排风系统总装部件。 (5)自控、电气。 (6)实验室内部配置。 (7)显示、报警、弱电控制。 (8)地面、墙体联接设施。 2.结核病实验室的主要技术参数建议 (1)符合国标基本要求,GB19489-2008 GB50346-2004 (2)尽量采用自然采光。 (3)模块式生产、加工、制造、形成标准格式(现场拼装)。 (4)统一验收标准、测试手段。 (5)交钥匙安装工程。 3.结核病实验室的设备标准配置建议 ?生物安全柜,II级A2型(单人或双人,单人1200mm,双人1800mm) ?高压灭菌器,单缸。 ?洗手池 ?洗眼器,可采用生理盐水瓶装型。

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