最新浙江大学2018年细胞生物学727和生物化学与分子生物学830真题

细胞生物学

一、名词解释（5'x10）

1.冷冻电子显微镜技术

2.蛋白质模式结合域

3.磷脂交换蛋白

4.纤连蛋白

5.核质互作

6.凋亡诱导因子

7.双信使系统

8.泛素化和蛋白酶体介导的蛋白质降解

9.胞内受体超家族

10.踏车行为

二、论述题（20'x5）

1.请描述线粒体的融合和分裂分子与细胞生物学基础

2.靶细胞信号分子脱敏机制

3.什么是细胞分化简述其分子机制、调控机制

4.如何理解高尔基体作为细胞大分子转运的枢纽

5.请描述细胞骨架的分子组成及结构特征，并简述其在细胞生命活动中的作用

生物化学与分子生物学830

一、判断20'

1.蛋白质中的稀有氨基酸是翻译后修饰而成的

2.蛋白质具有紫外吸收能力的原因是酪氨酸和色氨酸

3.肽链具有一定的刚性是因为肽键上的氧原子和氮原子共振

4.α螺旋具有电偶极，氨基端带正电，羧基端带负电

5.质子会降低血红蛋白对氧气的结合能力

6.胰凝乳蛋白的催化机理是共价键作用和金属键作用

7.酶反应动力学参数Kcat的单位是时间

8.葡萄糖在水中多为直链结构而非环状

9.阿莫西林的抗菌机理是阻止肽聚糖的合成

10.血管的弹性来自于硫酸皮肤素的蛋白聚糖、糖胺聚糖…

11.磷脂双分子层的相变温度取决于磷脂和膜蛋白的含量

12.烟酰胺乙酰胆碱受体是配体门通道

13.人对颜色的区分依靠视杆细胞而非视锥细胞

14.蚕豆病源于葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的缺失

15.细菌的抗药性来源于质粒，但没有质粒细菌也能存活

16.原核生物也有内含子，但不会出现在编码蛋白基因序列中

17.蓖麻毒蛋白能破坏真核生物的40S核糖体亚基

18.嘧啶核苷酸从头合成途径不涉及天冬酰胺

19.氟喹诺酮类抗生素如环丙沙星的作用机理是抑制DNA转录

20.人体内色氨酸可以通过两步反应转化为5羟色胺

二.选择题20'

1.组氨酸的酸碱性1’下同

2.哪个氨基酸会阻碍α螺旋的形成

3.镰刀型贫血病对何种疾病有耐性

4.Ig有几个抗原结合位点

5.过敏是由哪种抗体造成的

6.腺苷酰化通常发生在哪个氨基酸上

7.胆固醇在哪个细胞器膜中含量最高

8.下列不是还原糖的是

9.咖啡因会作用于__（信号分子）保持人兴奋

10.下列信号分子不使用cAMP作为第二信使的是

11.A TP水解发生的反应是亲核/电SN1/2

12.FAD是哪个酶的辅基

13.大肠杆菌主要的DNA聚合酶是

14.糖异生主要发生在哪个器官

15.脂肪酸合成发生在哪个细胞器

16.固氮过程一次反应消耗多少ATP

17.原核生物中谷氨酸合成什么的（色、组、苯丙、腺苷三磷酸）

18.腺嘌呤核苷酸从头合成途径原料

19.乙酰CoA合成的部位

20.哪个酶不是柠檬酸循环的调节酶

三、名词解释20'

1.凝集素

2.阻抑物

3.信号识别颗粒

4.癌基因

5.Ⅱ型限制性核酸内切酶

6.操纵基因

7.管家基因

8.剪接体

9.锌指结构

10.端粒

四、大题90'

1.肌钙蛋白有哪些肌肉收缩过程

2.转座子概念真核转座子特征

3.糖酵解过程

4.同工酶概念和生化特征

5.蛋白质合成阶段起始复合物过程组成（15'）

6.Western Blotting原理过程

7.信号转导概念显著特征

8.酶的抑制剂概念分类作用特征

9.基因克隆载体组分功能常用类型（5'）

浙江大学研究生学术规范网上考试

1、[判断题]?不得填报和提供虚假的学术经历、学术成果，不得伪造、变造专家鉴定意见、证书或其他学术能力的材料，确保证明材料的真实性。?（分值）你的答案：正确 2、[判断题]?对正式立项调查的事项，调查小组必须在5个工作日内向学院提交调查报告和认定结论。?（分值） 你的答案：错误 3、[判断题]?开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由学校发给学习证明。?（分值） 你的答案：正确 4、[判断题]?根据《中华人民共和国着作权法》等法律，教育部《关于加强学术道德建设的若干意见》等精神，制定了《浙江大学农学类研究生学术规范》。?（分值） 你的答案：正确 5、[判断题]?在进行学术活动时，在合作成果中对本人完成的部分负责，在未参加实际研究的成果中不能做第一作者，但可以署名。?（分值） 你的答案：错误 6、[判断题]?学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的陈述和申辩。?（分值） 你的答案：正确 7、[判断题]?文献综述所评述的重要论点、论据不得以非学术性文献、未发表文献作为参考文献；不得以第二手资料作为参考文献。?（分值） 你的答案：正确标准答案：错误 8、[判断题]?研究生管理处或学位办公室在接到涉嫌学术失范的举报、投诉后根据问题的性质和严重程度，决定是否对举报正式立项调查，一般不受理匿名举报。?（分值） 你的答案：正确 9、[判断题]?活体动物实验不应给实验动物造成不必要的痛苦或不适。应保证采取适当的措施防止动物在实验的全过程中遭受不必要的痛苦。?（分值） 你的答案：正确 10、[判断题]?每次记载实验结果时，在记载本下方应注明实验时间（年/月/日）。?（分值） 你的答案：错误 11、[判断题] 田间试验在必要时要详细记录所在环境的气象条件等。

浙江大学生物化学丙实验报告3,4

,. 实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法 ①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法； ②掌握分光光度法制作标准曲线，准确测定未知样品的蛋白质含量； ③掌握分光光度计的使用方法。 2、蔗糖酶活力测定——3.5－二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法； ②学习酶的比活力的计算。 二、实验内容和原理 1、Folin-酚测定法 Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成，在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用，生成紫红色络合物；乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成，在碱性条件下，铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基（酚基）和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂（乙试剂）产生深蓝色（钼蓝和钨蓝的混合物），其色泽深浅与蛋白质含量成正比。可用500nm 波长比色测定，适于测定蛋白质含量0.05～0.5g/L 。 优点： 简单、迅速、灵敏度高；反应较稳定。 缺点： 该反应受多种因素的干扰。 2、蔗糖酶活力测定 蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），是一种水解酶。它能催化非还原性双糖（蔗糖）的1,2－糖苷键裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖（还原糖）。因此，每水解1mol 蔗糖，就能生成2mol 还原糖。还原糖的测定有多种方法，例如：纳尔逊－索模吉试剂比色法，斐林试剂法等。 专业： 农业资源与环境 姓名： 李佳怡 学号： 3130100246 日期： 2015.5. 26 地点： 生物实验中心310 装 订 线

浙大学术规范考试题库完整

1、[ 判断题] 在进行科研活动时，在大学学习期间完成的研究成果归属研究生 个人和大学共同所有。（分值 2.0 ） 你的答案：正确标准答案：错误 2、[ 判断题] 《大学研究生学术规》文件于发文次年起生效。（分值2.0 ） 你的答案：错误 3、[ 判断题] 《大学研究生学术规》包括五个学术规文件。（分值2.0 ）你的答案：错误 4、[ 判断题] 有关核酸序列、蛋白质序列和蛋白质晶体结构之类的研究结果 整理后，应送交相应的公共科学数据库。（分值2.0 ） 你的答案：正确 5、[ 判断题] 在进行学术活动时，不得抄袭、剽窃他人的研究成果。（分值 2.0 ） 你的答案：正确 6、[ 判断题] 对于科研结果，不能夸大其学术价值，但在经济或社会效益上可以进行适当夸大。（分值 2.0 ） 你的答案：正确标准答案：错误 7、[ 判断题] 在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或 研究成果加以保留，作为个人的成果发表。（分值 2.0 ） 你的答案：错误 8、[ 判断题] 文献综述中对在参考有关文献基础上整理而成的图、表也必须注明文献出处。 （分值 2.0 ） 你的答案：正确 9、[ 判断题] 在记载本上不得涂改数据，记录有误的，不能用橡皮擦掉，只 能用铅笔划去，再在一旁写上正确数据。（分值2.0 ） 你的答案：正确 10、[ 判断题] 开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由 学校发给学习证明。（分值 2.0 ） 你的答案：正确 11、[ 判断题] 对于违反学术道德规、受到纪律处分的在校全日制研究生，本 学年不得评定优秀奖学金、不得评定各类荣誉称号、不得申请国家助学贷款。 （分值 2.0 ） 你的答案：正确

浙江大学生物化学(乙)第1次

您的本次作业分数为：100分单选题2.生成酮体和胆固醇都需要的酶是（）。 A HMG-CoA 合成酶 B HMG-CoA还原酶 C HMG-CoA裂解酶 D 乙酰乙酰硫激酶 E 转硫酶正确答案:A 单选题 3.乳糖操纵子的调节水平在（）。 A 复制 B 转录 C 转录后 D 翻译 E 翻译后正确答案:B 单选题 4.变构效应物对酶结合的部位是（）。 A 活性中心与底物结合的部位 B 活性中心的催化基团 C 酶的-SH基 D 活性中心以外的特殊部位 E 活性中心以外的任何部位正确答案:D 单选题 5.1分子葡萄糖经糖酵解分解为2分子乳酸时，其底物水平磷酸化次数为（）。 A 1 B 2 C 3 D 4 E 5 正确答案:D 单选题 6.酶的辅基具有下述性质（）。 A 是一种结合蛋白 B 与酶蛋白结合比较疏松 C 由活性中心的若干氨基酸残基组成 D 决定酶的专一性 E 与酶蛋白亲和力较大，一般不能用透析等物理方法彼此分开正确答案:E 单选题 7.体内转运一碳单位的载体是（）。 A 生物素 B 磷酸吡哆醛

C 四氢叶酸 D 二氢叶酸 E CoA 正确答案:C 单选题 8.原核生物转录的终止因子是（）。 A α B ρ C β D σ E Γ 正确答案:B 单选题 10.下列哪一物质含有高能键？（） A 6-磷酸葡萄糖 B 1,6-二磷酸果糖 C 1,3-二磷酸甘油酸 D 烯醇式丙酮酸 E 乳酸正确答案:C 单选题 12.肝脏不能氧化利用酮体是由于缺乏（）。 A HMGCoA合成酶 B HMGCoA裂解酶 C HMGCoA还原酶 D 琥珀酰CoA转硫酶 E 乙酰乙酰CoA硫解酶正确答案:D 单选题 14.下列关于遗传密码的基本特点，哪一点是错误的？（） A 密码无标点 B 一种氨基酸只有一种遗传密码 C 有终止密码和起始密码 D 密码专一性主要由头两个碱基决定 E 病毒、原核细胞或真核细胞都利用同一套遗传密码正确答案:B 单选题 16.三羧酸循环的第一个产物是（）。 A 乙酰CoA B 草酰乙酸 C 柠檬酸 D 苹果酸

研究生 学术 规范 网上 考试

研究生学术规范网上考试
1、[判断题] 学术研究成果的署名应实事求是，只有对研究成果做出最主要贡献者才有资 格在研究成果中署名。 （分值2.0） 你的答案： 正确 标准答案： 错误 2、[判断题] 论文撰写应严格遵守学术规范，论文中若引用他人的论点或数据资料， 必须注明出处，引用合作者的观点或研究成果时，则无须说明。 （分值2.0） 你的答案： 错误 3、[判断题] 开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由学校发给 学习证明。 （分值2.0） 你的答案： 正确 4、[判断题] 对应用研究成果的评价，应注重其社会效益或经济效益。 （分值2.0） 你的答案： 正确 5、[判断题]不得编造、篡改自己或他人的研究成果、实验数据或引用的资料，禁止对原 始数据进行删裁取舍。 （分值2.0） 你的答案： 正确 6、[判断题] 合作成果应按照参与者所作贡献大小的顺序署名，没有例外。 （分值2.0） 你的答案： 正确 标准答案： 错误 7、[判断题] 在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或研究成果 加以保留，作为个人的成果发表。 （分值2.0） 你的答案： 错误 8、[判断题] 长期脱离本学科领域前沿而不能掌握最新趋势和进展的人员，不宜担任 评议专家。 （分值2.0） 你的答案： 正确 9、[判断题] 学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的陈述 和申辩。 （分值2.0）

你的答案： 正确 10、[判断题] 浙江大学工学类研究生在进行学术活动时，必须严格遵照“坚持诚实守 信，注重学术创新，倡导团队协作”的道德规范。 （分值2.0） 你的答案： 正确 11、[判断题] 不得填报和提供虚假的学术经历、学术成果，不得伪造、变造专家鉴定 意见、证书或其他学术能力的材料，确保证明材料的真实性。 （分值2.0） 你的答案： 正确 12、[判断题] 《浙江大学研究生学术规范》文件于发文次年起生效。 （分值2.0） 你的答案： 错误 13、[判断题] 对未经规定程序进行验证或者鉴定的研究成果，不得随意冠以“重大科 学发现”、“重大技术发明”或者“重大科技成果”等夸大性用于进行宣传。 （分值2.0） 你的答案： 正确 14、[判断题] 硕士论文应表明作者掌握坚实的基础理论和系统的学科知识，具有独立 从事学术研究的能力。 （分值2.0） 你的答案： 正确 标准答案： 错误 15、[判断题] 文献综述所用的文献，应主要选自专著和教材，其次是学术期刊或学术 会议的文章。 （分值2.0） 你的答案： 错误 16、[判断题] 《浙江大学研究生学术规范》包括五个学术规范文件。 （分值2.0） 你的答案： 错误 17、[判断题] 在学位论文或公开发表的作品中，如果使用他人（包括指导教师、授课 教师）的成果，要加以注明。 （分值2.0） 你的答案： 正确 18、[判断题] 本条例只适用于全日制研究生，对于已经取得学位人员在校期间的学术 行为无约束力。 （分值2.0） 你的答案： 正确 标准答案： 错误 19、[判断题] 研究生的科研成果属于浙江大学所有，但毕业以后署名“浙江大学”所发 表的学术论文，就无所谓了。 （分值2.0） 你的答案： 错误

浙大生化(丙)课堂期中试卷

生物化学（丙）期中试卷 一．判断题 1.1分子的NADH+H+经呼吸链氧化可产生 2.5分子ATP。 2.蛋白质变性的本质是蛋白质分子的高级结构被破坏，一级结构则保持完整。 3.琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶的辅助因子都是FAD。 4.磺胺药可使乙酰胆碱酯酶的Km上升，Vmax不变。 5.ATP的主要功能是为机体提供能量和提供活性磷酸基团。 6.糖异生是指由丙酮酸、琥珀酸CoA、6-磷酸果糖、苹果酸等物质转变为葡萄糖的过程。 7.蛋白质三级结构的稳定力包括氢键、盐键、疏水相互作用、范德华力、二硫键、配位键 等次级键。 8.同源蛋白质的种属差异性说明一级结构的局部改变并不会影响蛋白质的功能。 9.同工酶是指功能相同，但结构和性质不同的一类酶。 10.限制性内切酶是指在一特殊序列处将DNA的两条链同时切断的一类酶。 11.ATP是磷酸果糖激酶I的底物，因此对该酶的活性起别构激活作用。 12.反馈抑制作用是指反应的产物对催化反应的酶的抑制作用。 13.硫辛酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和辅酶A都可以作为酰基的载体起传递作用。 14.酶催化高效性的机理是通过酸碱催化、温度效应、共价催化等因素降低了反应的活化能。 15.蛋白质的基本化学键是肽键、核酸的基本化学键是3’,5’-磷酸二酯键。 二．单选题 1.根据酶催化反应的性质，延胡索酸酶属于： (1)水解酶类(2)合成酶类(3)裂合酶类(4)转移酶类 2.当[S]=2Km时，V的值是： (1)2Vmax(2)2/3Vmax(3)1/3Vmax(4)1/2Vmax 3.下列酶催化的反应无CO2参与的是： (1)6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (2)苹果酸酶 (3)3-磷酸甘油醛脱氢酶 (4)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 4.1分子的F1，6-2P被彻底氧化分解为CO2和H2O可产生的高能化合物分子数为（通过 α-磷酸甘油穿梭）： (1)32(2)30(3)34(4)28 5.在2,4-二硝基苯存在下一分子FADH2通过呼吸链可产生的ATP分子数是： (1)1(2)0(3)1.5(4)2.5 6.DNA的双螺旋结构中，主要的稳定力是： (1)氢键 (2)疏水相互作用 (3)范德华力 (4)离子键 7.下列代谢途径既不发生在细胞液也不发生在线粒体中的是： (1)EMP途径(2)TCA途径(3)HMP途径(4)乙醛酸循环 8.蛋白质的特征吸收波长是：(1)260nm(2)280nm(3)340nm(4)500nm 9.下列代谢途径中能为机体提供NADPH+H+的代谢途径是： (1)糖酵解途径(2)乙醛酸循环途径(3)磷酸戊糖途径(4)呼吸链 10.在酶的活化和去活化中，磷酸化和去磷酸化常发生在那个氨基酸残基：

浙大研究生学术规范网上考试答案精篇

1、[判断题]?文献综述结果要说清前人工作的不足，指出作进一步研究的必要性和理论价值。（分值2.0）你的答案：正确 2、[判断题]对于研究成果，不可以一稿多投，但可以修改后在两种不同类型的 期刊上发表。（分值2.0） 你的答案：错误 3、[判断题]研究生如果在研究中做出主要贡献获得署名权，导师为通讯作者。 研究生在文中所负责部分，其导师不负责任。（分值2.0） 你的答案：错误 4、[判断题]对于论文和专著类成果，引用他人的成果不应构成本人研究成果的 主要部分或者核心部分。（分值2.0） 你的答案：正确 5、[判断题]对应用研究成果的评价，应注重其社会效益或经济效益。（分值 2.0） 你的答案：正确 6、[判断题] 不得编造、篡改自己或他人的研究成果、实验数据或引用的资料，禁止对原始数据进行删裁取舍。 （分值2.0） 你的答案：正确 7、[判断题]所有提到的参考文献都应和学位论文研究问题直接或间接相 关。（分值2.0） 你的答案：错误 8、[判断题]学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的 陈述和申辩。（分值2.0） 你的答案：正确 9、[判断题]根据《中华人民共和国著作权法》等法律，教育部《关于加强学术 道德建设的若干意见》等精神，制定了《浙江大学工学类研究生学术规范》。（分值2.0） 你的答案：正确

10、[判断题]在学位论文或公开发表的作品中，如果使用他人（包括指导教师、 授课教师）的成果，要加以注明。（分值2.0） 你的答案：正确 11、[判断题]对未经规定程序进行验证或者鉴定的研究成果，不得随意冠以“重 大科学发现”、“重大技术发明”或者“重大科技成果”等夸大性用于进行宣 传。（分值2.0） 你的答案：正确 12、[判断题]文献综述所用的文献，应主要选自专著和教材，其次是学术期刊或 学术会议的文章。（分值2.0） 你的答案：错误 13、[判断题]对于科研成果，可以在两种不同类型的期刊上发表自己的研究成 果。（分值2.0） 你的答案：错误 14、[判断题]作为浙江大学的研究生，在科研活动中可以无偿使用浙江大学的成 果。（分值2.0） 你的答案：错误 15、[判断题]硕士论文应表明作者掌握坚实的基础理论和系统的学科知识，具有独立从事学术研究的能力。（分值2.0） 你的答案：正确标准答案：错误 16、[判断题]在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或研究 成果加以保留，作为个人的成果发表。（分值2.0） 你的答案：错误 17、[判断题]不得填报和提供虚假的学术经历、学术成果，不得伪造、变造专家 鉴定意见、证书或其他学术能力的材料，确保证明材料的真实性。（分值2.0） 你的答案：正确 18、[判断题]文献综述的顺序要合理，只能按时间顺序进行综述。（分值2.0） 你的答案：错误 19、[判断题]论文撰写应严格遵守学术规范，论文中若引用他人的论点或数据资 料，必须注明出处，引用合作者的观点或研究成果时，则无须说明。（分值2.0）你的答案：错误 20、[判断题]对于科研结果，不能夸大其学术价值，但在经济或社会效益上可以 进行适当夸大。（分值2.0） 你的答案：错误

浙江大学生物化学丙实验报告1

实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶的提取 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法； 2、巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。 二、实验内容和原理 1、实验内容： 蔗糖酶的提取、分离纯化 2、实验原理： ①酵母细胞破碎 细胞破碎的常用方法 液体剪切法固体剪切法压力和研磨 物理法、化学渗透法、酶溶 本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取出来。 ②蔗糖酶的初步分离纯化 蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。 本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集样品。 由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯 操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。 三、实验材料与试剂

1、实验材料 市售干酵母粉10g/组(3～4人） 2、实验试剂 石英砂，95%乙醇(-20℃），20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液。 四、实验器材与仪器 电子天平（称量干酵母粉）；研砵（每组一套）；50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）；高速冷冻离心机；恒温水浴箱（50℃）；量筒（50ml）、微量移液枪（1000ul)及枪头或移液管（1ml)、玻棒、滴管等;1.5ml离心管（留样品Ⅰ、Ⅱ用）及离心管架；制冰机；－20℃冰箱。 五、操作方法和实验步骤 1、酵母细胞破粹（干磨法） ①称量：称取市售干酵母粉10g+约3-5 g石英砂放入研钵 ②研磨(干磨)：至尽可能成细粉末状（约15min） ③加液+研磨：量取总体积40 ml的20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液，分2次加研磨10min， 使呈糊状液体； ④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后(托盘天平上)，离心10min （条件：4℃、12000r/min） ⑤收集+测量：收集上清液并量出体积V1（样品I），另留1ml上清液（样品I ）放置－20℃冰箱保存用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析 2、热处理 ①水浴热处理：将上步抽提液（样品I），迅速放入50℃恒温水浴，保温30min， 并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。 ②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min ③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min。 （条件：4℃，12000r/min） ④收集+测量：收集上清液并量出体积V2（样品Ⅱ），另留1ml上清液（样品Ⅱ）放置－20℃冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测定、测定蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。 3、有机溶剂（乙醇）沉淀 ①冰浴：将热处理后的上清液加入相同体积的－20℃的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，

浙江大学考研生物化学真题及答案

一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同 3 请对中心法则加以阐述 4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步骤

浙大学术规范测试题

1、[判断题] 在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或研究成果加以保留，作为 个人的成果发表。 （分值2.0） 你的答案： 错误
2、 [判断题] 发表根本没有经过实验的数据或随心所欲地篡改数据或隐瞒不利数据以适应自己主观 的需要，都属于伪造数据的范畴。 （分值2.0） 你的答案： 正确
3、[判断题] 对外文综述性文献的全盘翻译并不是文献综述。 （分值2.0） 你的答案： 正确
4、[判断题] 按学校规定保留实验记录本、其他研究数据和补充材料，比如独特的试剂，并且在外 界需要时可提供。 （分值2.0） 你的答案： 正确
5、 [判断题] 一般的科学方法的准则为： 假设的形成和检验， 控制观察或实验， 数据的分析和判断， 以口头或文字形式提交给同行们讨论，结论的形成。 （分值2.0） 你的答案： 正确
6、[判断题] 学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的陈述和申辩。 （分值2.0） 你的答案： 正确 7、[判断题] 在进行科研活动时，在浙江大学学习期间完成的研究成果归属研究生个人和浙江大学 共同所有。 （分值2.0） 你的答案： 正确 标准答案： 错误
8、[判断题] 他人的讲义和教材可以随意使用。 （分值2.0） 你的答案： 错误
9、 [判断题] 研究中所要遵循的规章制度有人体实验、 动物使用、 放射线、 化学物及其他安全问题、 转基因动物管理条案等。 （分值2.0） 你的答案： 正确
10、 [判断题] 对于科研结果， 不能夸大其学术价值， 但在经济或社会效益上可以进行适当夸大。 （分 值2.0） 你的答案： 错误

最新浙大生物化学试题

浙江大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试题 考试科目:生物化学,编号555 注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效 一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP 生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异

2017年浙江大学研究生学术规范网上考试1

1、[判断题]不得填报和提供虚假的学术经历、学术成果，不得伪造、变造专家鉴定意见、证书或其他学术能力的材料，确保证明材料的真实性。（分值2.0） 你的答案：正确 2、[判断题]对正式立项调查的事项，调查小组必须在5个工作日内向学院提交调查报告和认定结 论。（分值2.0） 你的答案：错误 3、[判断题]开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由学校发给学习证明。（分 值2.0） 你的答案：正确 4、[判断题]根据《中华人民共和国著作权法》等法律，教育部《关于加强学术道德建设的若干意见》 等精神，制定了《浙江大学农学类研究生学术规范》。（分值2.0） 你的答案：正确 5、[判断题]在进行学术活动时，在合作成果中对本人完成的部分负责，在未参加实际研究的成果中不 能做第一作者，但可以署名。（分值2.0） 你的答案：错误 6、[判断题]学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的陈述和申辩。（分值 2.0） 你的答案：正确 7、[判断题]文献综述所评述的重要论点、论据不得以非学术性文献、未发表文献作为参考文献；不得以第二手资料作为参考文献。（分值2.0） 你的答案：正确标准答案：错误 8、[判断题]研究生管理处或学位办公室在接到涉嫌学术失范的举报、投诉后根据问题的性质和严重程 度，决定是否对举报正式立项调查，一般不受理匿名举报。（分值2.0） 你的答案：正确 9、[判断题]活体动物实验不应给实验动物造成不必要的痛苦或不适。应保证采取适当的措施防止动物 在实验的全过程中遭受不必要的痛苦。（分值2.0） 你的答案：正确 10、[判断题]每次记载实验结果时，在记载本下方应注明实验时间（年/月/日）。（分值2.0） 你的答案：错误 11、[判断题] 田间试验在必要时要详细记录所在环境的气象条件等。 （分值2.0） 你的答案：正确

浙大学术规范考试题库完整

1、［判断题］在进行科研活动时，在大学学习期间完成的研究成果归属研究生个人和大学共同所有。（分值2.0 ）你的答案：正确标准答案：错误 2、［判断题］《大学研究生学术规》文件于发文次年起生效。（分值2.0 ）你的答案：错误 3、［判断题］《大学研究生学术规》包括五个学术规文件。（分值2.0）你的答案：错误 4、［判断题］有关核酸序列、蛋白质序列和蛋白质晶体结构之类的研究结果整理后，应送交相应的公共科学数据库。（分值2.0 ）你的答案：正确 5、［判断题］在进行学术活动时，不得抄袭、剽窃他人的研究成果。（分值2.0）你的答案：正确 6、［判断题］对于科研结果，不能夸大其学术价值，但在经济或社会效益上可以进行适当夸大。（分值2.0 ）你的答案：正确标准答案：错误 7、［判断题］在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或研究成果加以保留，作为个人的成果发表。（分值2.0 ）你的答案：错误 8、［判断题］ 文献综述中对在参考有关文献基础上整理而成的图、表也必须注明文献出处。（分值2.0 ） 你的答案：正确 9、［判断题］在记载本上不得涂改数据，记录有误的，不能用橡皮擦掉，只能用铅笔划去，再在一旁写上正确数据。（分值2.0 ）你的答案：正确 10、［判断题］开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由学校发给学习证明。（分值2.0 ）你的答案：正确 11、［判断题］对于违反学术道德规、受到纪律处分的在校全日制研究生，本学年不得评定优秀奖学金、不得评定各类荣誉称号、不得申请国家助学贷款。（分值2.0 ）你的答案：正确 12、［判断题］不得填报和提供虚假的学术经历、学术成果，不得伪造、变造专家鉴定意见、证书或其他学术能力的材料，确保证明材

浙江大学生物化学丙实验报告1

专业：农业资源与环境 姓名：李佳怡 ____________ 学号：_J6 _______________ 日期： __________________ 地点：生物实验中心310课程名称：生物化学实验（丙） 实验名称：蔗糖酶的提取 一、实验目的和要求（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 七、实验结果与分析（必填） .指导老师：方祥年 成绩:_ _同组学生姓名：金宇尊、鲍其琛 二、实验内容和原理（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 六、实验数据记录和处理 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、 学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法; 2、 巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。 二、实验内容和原理 订 1、实验内容: 线 蔗糖酶的提取、分离纯化 2、实验原理: ① 酵母细胞破碎 液体剪切法―超声波法.机械搅拌法.高压匀浆法 固体剪切法一压力和研磨 非机械法——> 物理法.化学渗透法.酶溶 本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取岀 来。 ② 蔗糖酶的初步分离纯化 蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。 本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集 样品。 由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯 操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。 实验报告 细 胞 破碎 的 常 用 方 法

三、实验材料与试剂 1、实验材料 市售干酵母粉10g/组（3?4人） 2、实验试剂 石英砂，95%乙醇（-20*0,20mmol/L Tris-HCl 缓冲液。 四、实验器材与仪器 电子天平（称量干酵母粉）：研碎（每组一套）：50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）：高速冷冻离心机：恒温水浴箱（50°C）；量筒（50ml）、微量移液枪（lOOOu 1）及枪头或移液管（1ml）、玻棒、滴管等;离心管（留样品I、II用）及离心管架：制冰机：一20°C冰箱。 五、操作方法和实验步骤 1、酵母细胞破粹（干磨法） ①称量：称取市售干酵母粉10計约3-5 g石英砂放入研钵 ②研磨（干磨）：至尽可能成细粉末状（约15min） ③加液+研磨：呈:取总体积40 ml的20mmol几Tris-HCl缓冲液，分2次加研磨lOmin, 使呈糊状液体； ④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后（托盘天平上），离心lOmin （条件:4°C、12000r/min） ⑤收集+测量：收集上淸液并量出体积VI （样品I）,另留1ml上淸液（样品I ）放置一20°C冰箱保存 用于蔗糖酶蛋白含量测眾、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析 2、热处理 ①水浴热处理：将上步抽提液（样品I）,迅速放入50°C恒温水浴，保温30min, 并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。 ②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min ③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min a （条件：4°C, 12000r/min） ④收集+测量：收集上淸液并量出体积V2 （样品II）,另留1ml上淸液（样品II ）放宜一20°C冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测左、测左蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。 3、有机溶剂（乙醇）沉淀 ①冰浴：将热处理后的上淸液加入相同体枳的一20°C的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，

浙江大学考博生物化学03-13年试卷

2003年秋 一、名词 变性与复性构型和构象Km 氧化磷酸化脂肪酸ß-氧化核糖体中心法则辅酶与辅基人类基因组计划和后基因组计划分子伴侣 二、论述 1 生物大分子中结构与功能的关系（10） 2 糖酵解过程（10） 3 选择一种分离方法，叙述其原理和操作过程（15） 4 生物化学的最新前沿进展（15） 2004年春 一、名词 ATP 构型和构象Km 分解与合成代谢核糖体中心法则Sanger 反应变性与复性启动子基因表达 二、论述 1．生物中大分子物质构成的基本结构（10） 2葡萄糖转化二氧化碳和水过程中相应步骤和酶（10） 3凝胶电泳的原理及应用（15） 4．生物化学的最新前沿进展（15） 2004年秋 论述 1.蛋白质模体和结构域（15） 2.生物膜结构特征和生物学功能（15） 3.生物体在同化和进化中能量的转化形式与关系（15） 4. DNA复制和转录的原理（15） 5.真核生物基因的表达和表达的调节（20） 6.比较离子交换、分子排阻、和亲和层析的分离原理（20） 2005年春 论述 1蛋白质模体和结构域（15） 2生物膜结构特征和生物学功能（15） 3生物体在同化和进化中能量的转化形式与关系（15） 4 DNA复制和转录的原理（15） 5真核生物基因的表达和表达的调节（20） 6比较离子交换、分子排阻、和亲和层析的分离原理（20） 2006年 论述 1．生物化学研究的内容与目标 2．生物膜及其功能 3．蛋白膜质体与结构域 4．水对生物体的重要作用 5．DNA复制和转录的原理

6．氨基酸以R基分几类，写出其三字母、单字母的缩写 7．比较亲和层析、离子交换、分子排阻的原理 8．举例说明四种非共价键在蛋白质、核酸分子中的作用 9．构型与构象10. 生物体能量转化及其关系 未知年份 论述题 1.双向电泳的原理及步骤 2.单克隆抗体与多克隆抗体的定义 3.生物化学的定义与研究内容 4.蛋白质中二、三结构域的定义 5. DNA 的复制过程 2007年 一、名词解释 氧化磷酸化、折叠、第二信使、沉默子、反义RNA、胴体、一碳单位、别构酶、冈崎片段、基因文库 二、论述题 1.乙酰COA在脂肪氧化中的作用 2. RNA的分离纯化与鉴定 3.乳糖操纵子 4.真核生物基因表达的调控因子及其作用 5.肝糖原的激素影响及分子原理 6.生物重大研究进展与动物科学对其的指导意义 2008 年 论述 1.生物膜的组成及其功能 2.脂类的功能 3.蛋白质合成过程中和DNA复制过程中的化学防错 4.血红蛋白和BPG的结构和功能 5. ATP和NAD+的结构和功能 6.名词解释：糖酵解、乙醛酸循环、卡尔文循环、TCA循环 7.设计动力学试验，验证反应实质 2010年生物化学真题回忆版： 20种氨基酸的分类，简写 实验题2个关于分子实验和蛋白质实验的 电泳的原理和分类层析 化学渗透学说 蛋白组学和研究进展 c3植物和c4植物的区别 G蛋白介导的信号转导机制 生化题都是大题，回忆出大概内容，题目记不住了。 祝大家考博成功！

研究生学术规范网上考试答案

研究生学术规范网上考试 1、[判断题]学校在对研究生做出处分决定之前，应当听取其本人或其代理人的陈述和申辩。 2、[判断题]研究生的科研成果属于浙江大学所有，但毕业以后署名“浙江大学”所发表的学术论文，就无所谓了。 3、[判断题]对于已获得学位人员，如果违反学术道德规范，要递交校学位委员会讨论，但学位一般不会被撤销。 4、[判断题] 不得编造、篡改自己或他人的研究成果、实验数据或引用的资料，禁止对原始数据进行删裁取舍。 5、[判断题]对应用研究成果的评价，应注重其社会效益或经济效益。 6、[判断题]在学位论文或公开发表的作品中，如果使用他人（包括指导教师、授课教师）的成果，要加以注明。 7、[判断题]文献综述结果要说清前人工作的不足，指出作进一步研究的必要性和理论价值。 8、[判断题]对未经规定程序进行验证或者鉴定的研究成果，不得随意冠以“重大科学发现”、“重大技术发明”或者“重大科技成果”等夸大性用于进行宣传。 9、[判断题]《浙江大学研究生学术规范》包括五个学术规范文件。 10、[判断题]作为浙江大学的研究生，在科研活动中可以无偿使用浙江大学的成果。 11、[判断题]为了论文的需要，在发表论文时可以适当涉及一些应保密的学术事项。 12、[判断题]在进行科研活动时，在浙江大学学习期间完成的研究成果归属研究生个人和浙江大学共同所有。 13、[判断题]对基础研究成果的评价，应以学术积累和学术创新为主要尺度。 14、[判断题]合作成果应按照参与者所作贡献大小的顺序署名，没有例外。

15、[判断题]硕士论文应表明作者掌握坚实的基础理论和系统的学科知识，具有独立从事学术研究的能力。 16、[判断题]在进行学术活动中，可以把集体研究中自己注意的研究发现或研究成果加以保留，作为个人的成果发表。 17、[判断题]文献综述的顺序要合理，只能按时间顺序进行综述。 18、[判断题]所有提到的参考文献都应和学位论文研究问题直接或间接相关。 19、[判断题]开除学籍的研究生，其善后问题按照教育部有关规定处理。由学校发给学习证明。 20、[判断题]学校对违纪研究生作出的处分，应予以保密。而且，所有涉及人员不得泄露调查和处理情况。 21、[判断题]文献综述所用的文献，应主要选自专着和教材，其次是学术期刊或学术会议的文章。 22、[判断题]对于科研成果，可以在两种不同类型的期刊上发表自己的研究成果。 23、[判断题] 附录主要包括：正文内所有的公式推导；供读者阅读方便所需的辅助性数学工具、重复性数据图表；本专业内具有参考价值的资料；论文使用的符号意义、单位缩写、程序全文及其它有关说明等。 24、[判断题]研究生如果在研究中做出主要贡献获得署名权，导师为通讯作者。研究生在文中所负责部分，其导师不负责任。 25、[判断题]对于科研结果，不能夸大其学术价值，但在经济或社会效益上可以进行适当夸大。 26、[判断题]在进行学术活动时，在合作成果中对本人完成的部分负责，在未参加实际研究的成果中不能做第一作者，但可以署名。 27、[判断题]对正式立项调查的事项，调查小组必须在5个工作日内向学院提交调查报告和认定结论。 28、[判断题]浙江大学工学类研究生在进行学术活动时，必须严格遵照“坚持诚实守信，注重学术创新，倡导团队协作”的道德规范。 29、[单选题]__________负责受理专业学位研究生、同等学力申请学位的研究生以及已经取得学位人员在校期间的学术失范问题的举报、投诉和处理。

浙江大学生物化学丙实验报告5

实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称：蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析及蛋白质相对分子质量测定 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE)的基本原理和操作方法 2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析 3、学习测定蛋白质相对分子质量(Mr)的方法 二、实验内容和原理 （1）实验内容 1、SDS －PAGE 凝胶制作； 2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 电泳分离； 3、洗脱测定并计算相对分子质量。 （2）实验原理 1、电泳 是带电颗粒在电场作用下，作定向运动即向着与其电荷相反的电极移动的现象。 2、电泳法分离、检测蛋白质混合样品 主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所产生的电泳迁移率的差别。 3、区带电泳 是样品物质在一惰性支持物上进行电泳,因电泳后，样品不同组分形成带状区间，故称区带电泳。 4、聚丙烯酰胺凝胶（PAG) 由丙烯酰胺和交联试剂N,N ’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在有催化剂（如过硫酸铵或核黄素）和增速剂（如N,N,N ’,N ’-四甲基乙二胺，TEMED ）的情况下聚合而成的。

5、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 是在恒定的、非解离的缓冲系统中来分离蛋白质，这主要是由蛋白质样品所带的电荷和分子质量的差异性进行分离；在电泳过程中仍保持蛋白质的天然构象、亚基之间的相互作用及其生物活性。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为 ⑴连续系统凝胶缓冲液的pH值及凝胶浓度不变。该电泳系统具有电荷效应、分子筛效应； ⑵不连续系统凝胶缓冲离子成分、pH值、凝胶浓度、电位梯度不连续，由浓缩胶和分离胶组成。由于浓缩胶的堆积（浓缩）作用，可使样品（即使是稀释样品）在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带，然后在一定浓度（或一定浓度梯度）的凝胶上进行分离。该电泳系统具有浓缩效应、电荷效应、分子筛效应。 7、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 以PAG为支持物的电泳，由于各种蛋白质所带静电荷、分子量大小和形状不同而有不同的迁移率。为消除静电荷对迁移率的影响，在整个电泳体系中加入一定量的阴离子去污剂“十二烷基硫酸钠（简称SDS）”和“强还原剂（巯基乙醇）”后，蛋白质样品就会与SDS结合形成带负电荷复合物，而SDS作为一种变性剂和助溶剂，它能破坏蛋白质分子内和分子间的非共价键，并结合到蛋白质分子上，使分子去折叠，破坏蛋白质分子内的二级和三级结构，使蛋白质变性而改变原有的空间构象。另外，SDS－蛋白质复合物在强还原剂（巯基乙醇）存在下，可打开蛋白质分子内或肽链间的二硫键，并能避免重新氧化，这样分离出的谱带即为蛋白质亚基。蛋白质亚基的电泳的迁移率主要取决于亚基的相对分子质量大小，而电荷的因素可以忽略。 8、蛋白质亚基相对分子质量的测方法 在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量的SDS时，蛋白质－SDS复合物在水溶液中的形状，近似于雪茄烟形的长椭圆棒。不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样，约为1.8nm，而长轴则随蛋白质的分子量成正比变化。这样的蛋白质-SDS复合物在凝胶中的迁移率，不再受蛋白质原有电荷和形状的影响，而只主要取决于它的椭圆棒的长度即蛋白质的相对分子质量的大小，而其他因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。由于蛋白质的相对分子质量不同，所形成复合物的相对分子质量不同，在电泳中反映出不同的迁移率。当蛋白质或亚基的相对分子质量在15,000～200,000之间时，电泳迁移率与相对分子质量的