DEAE-纤维素 HP
一、 简介
离子交换色谱是最常用的生物大分子分离纯化手段,但是普通的离子交换填料颗粒大,分离效果不理想。
DEAE-Resin HP FF是刚合成的新一代的离子交换填料,它采用平均粒径为50μm的颗
粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼
容性,它在高流速下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗
脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好,使用寿命长,操作方便。良好的批次重复性,放大容易,所以无论是研发还是生产都是理想的选择,完全和进口兼容。
二、 填料特征:
特点载量大,分辨率好,流速高,使用方便。
基质高度交联纤维素
配基二乙基氨基乙基
配基密度40μmol /ml
吸附载量180mg HSA/ml
填料的颗粒大小 50μm
最大流速300cm/h
pH范围 3-10,在位清洗时pH范围可到2-11
化学稳定性各种缓冲液及盐,0.5M NaOH及醋酸,8M脲,6M盐酸胍,乙醇,异丙醇等物理稳定性 0.1M中性缓冲液中,120℃30min
保存温度 +4~30℃
保存干粉,1g=3-4ml
三、 应用的注意事项:
1) 色谱柱装填
1、所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可
直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可.
2、在柱子下端加入20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少
量的20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加1%吐温避免气泡产生。也可以
换成纯水装柱子,但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积
的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的20%乙醇,再换成5倍体积的纯
水,反复沉淀去上清,5次左右就可以用于装柱子。
3、此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,不能漏,也可以取点
填料加到筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱
子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和
上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体
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积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。
4、在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时,这样避免装柱子时由
于温度变化而使柱子中产生气泡。
2) 蛋白的结合
样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者pH带低也许挂不上,所以要根据自己的样品做适当调整。
3) 蛋白的洗脱
1、这个填料如果采用线性梯度洗脱,柱子的直径和高度比最好是大于10,数值越大
越有利于分离,而且样品最好别上太多,可以按约10mg/ml上样,如果采用阶段洗脱的方法,装短粗柱子就可以,上样量也没有限制。阶段洗脱容易放大,重复性好,如果洗脱条件好完全可以得到和线性梯度一样或者更好。采用什么方法完全根据自己需要。
四、 再生清洗
1、每次用完最好用0.5MNaOH含2M NaCl洗5个床体积,再用水洗5个柱床体积,
然后用20%乙醇保存,使用3-5次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%异丙醇都含1%吐温洗5个柱床体积,最后20%的乙醇流洗5个柱床体积。
2、有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以把配好的有机溶剂在
室温放置过夜,再使用,这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。
七、保存
在20%乙醇中,4℃下长期保存。
本产品有严格的生产质量控制标准,我们力求为您提供最满意的产品、最完备的技术支持和服务,欢迎业内朋友交流合作。
除了为您提供各种包装规格的DEAE-纤维素 HP外,我们还提供其它各种填料、柱子和其他服务,包括:
1、填料和柱子选择以及预实验
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4、按客户要求提供各种填料及规格的预装柱,并配相应接口用于各种纯化设备。
5、代理各种进口填料,为客户提供最专业的售前和售后服务。
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产品目录:
产品序列号 产品名称 包装 载量(BSA) 应用 粒径μm 耐压MPa 最大流速CS-I03-00 DEAE-纤维素 HP
10g 150mg/ml 生物大分子50 0.3 4ml/min CS-I03-01 DEAE-纤维素 HP 25g 150mg/ml 生物大分子50 0.3 15ml/min CS-I03-02 DEAE-纤维素 HP 100g 150mg/ml 生物大分子50 0.3 15ml/min CS-I03-03 DEAE-纤维素 HP 500g 150mg/ml 生物大分子50 0.3 300cm/h CS-I03-04
DEAE-纤维素 HP
大包装
150mg/ml
生物大分子
50
0.3
300cm/h
北京韦氏博慧色谱科技有限公司
电话:010-********或51029828 139********:联系人:韦新桂 E-mail: weixingui@https://www.wendangku.net/doc/c32169019.html, 公司网站:https://www.wendangku.net/doc/c32169019.html, 传真:010-********。
定货请参考光盘中的定货须知。购买本公司产品获得一张内容非常丰富的纯化光盘,包括表达,提取,分离,酶切等操作指南以及各公司纯化产品的说明书及手册,是生物大分子分离纯化难得的学习材料。