植物无糖组培快繁装置及其环境控制系统的研制_杨其长

甘蔗组培快繁技术实验报告

甘蔗组培快繁技术 生物08本尚丽萍 34号组员：陈洁程燕娜 甘蔗是禾本科甘蔗属植物，是世界上重要的糖料作物，也是中国蔗糖工业的重要支柱。在甘蔗栽培上，通常是以蔗茎节上的腋芽繁殖，或在每年砍伐后，利用残留在土中的茎基上的腋芽作宿根繁殖。茎段繁殖速度慢，用种量大，而且种茎在远途运输中颇为不便，每年秋植蔗种来源难以解决，这对快速繁殖良种甘蔗以满足甘蔗生产的需要极为不利，因此，采用组织培养的方法，规模化生产遗传性状整齐一致的种苗供生产上应用，现将甘蔗组培快繁技术介绍如下。 1材料与方法 1.1材料 甘蔗腋芽及茎尖 1.2方法 1.2.1 材料处理 将所取外植体腋芽（带少量茎节组织）、茎尖（带部分新叶包裹）用洗衣粉水洗净，清水冲洗半小 液处理15分钟，用无菌蒸时，在消过毒的接种间超净工作台上用75%酒精浸泡30秒，再用0.1%HgCl 2 馏水冲洗4-5次后待接种。 1.2.2 培养基 诱导外植体培养基：MS+BA 1mg/L+活性炭1g/L+2%蔗糖+琼脂8g/L。 诱导腋芽增殖培养基：MS+BA 5mg/L+活性炭0.5g/L+20g/L蔗糖；MS+BA 10mg/l+活性炭0.5g/L+2%蔗糖。 诱导生根增殖培养基：1/2MS+NAA 2mg/L+IBA0.4mg/L+多效唑2mg/L。 1.2.3培养过程 将处理好的材料接入诱导外植体培养基中进行培养，光照时间10-12小时/天，光照强度（自然散射或荧光灯照明）1500-2000lux，培养温度25-30℃。培养3-5天后，若培养基出现混浊，说明已污染，应立即清除。培养10-15天，芽转绿将边缘褐色部分剥除转入同样培养基中培养，芽长到2-3cm时，转入诱导腋芽增殖培养基中，如此重复进行，直到所需数量后转入诱导生根培养基中进行生根培养，根长至3-5cm后进入炼苗阶段。 将幼苗不开口移到自然光照下锻炼2-3d，让幼苗接受强光的照射，然后再开口练苗1-2d。从试管中取出发根的幼苗，用自来水洗掉根部粘着的培养基。但要轻轻除去，应避免造成伤根。栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔，然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤，栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。保证空气湿度达90%以上。 2关键技术

《植物组织培养》课程标准

《植物组织培养》课程标准 课程名称：《园林植物植物组织培养》 课程性质：职业能力必修课 学分：3分 计划学时：45 适用专业：园艺技术、园林技术、种子生产与经营专业 1.前言 1.1课程定位 《植物组织培养技术》是一门园艺技术、园林技术等专业的基础课，也是一门实践性很强的课程。通过本门课程学习，主要培养学生将来能从事相关工作，如能够独立设计组培方案、具备培养基制备、进行无菌操作、快繁、控制污染、褐化、玻璃化等不良现象发生和分析解决问题的能力，还能够独立从事植物组织培养经营管理的工作。该课程以化学、植物学、植物生理学、遗传学等学科为基础建立起来的，为适应时代发展，结合当前高职教育改革实际，压缩理论课时，精选教学内容，增加单位时间内的知识传授量，增加实验实训课的课时。培养技能型、应用型人才，使课程教学朝着高职院校校企合作的办学模式，工学结合的人才培养模式，教学做合一的教学模式方向发展。 1.2设计思路 本课程理论课时48学时。根据植物组织培养岗位对从业人员知识、能力和素质要求，以“应用”为主旨和特征，构建课程内容模块体系。课程内容打破传统的“老三段”模式，打破学科特性，理论知识要求“必需、够用”，实践教学突出能力培养，注重知识的应用性、实践性和针对性，并以此来构建组培课结构和内容体系。在实践教学上，以“项目教学法”为主导，强化实训项目的实用性。本课程一般按照“实验室设计与培养条件要求―培养基制备―无菌操作技术―器官培养―个体植物组织培养与园艺植物栽培”的顺序进行。 2．课程目标 2.1总体目标 通过理论学习和实践锻炼，掌握植物组织培养的基本理论，能识别常见的污染、褐变、玻璃化等现象，掌握组培培养方案设计程序和器官培养要求，掌握组培各流程环节与技术要求。通过参观组培实验室，掌握组培实验室的场地选择和厂房设计的原理和方法；通过配制母液、培养基的制作、使用无菌操作技术，能熟练掌握培养基母液和激素母液的配制，并且能够独立完成培养基的制作和高压灭菌锅的使用，还要掌握不通植物材料无菌接种技术。通过个体植物组织培养的

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题 1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞， 进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件； 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞 脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的 全部操作过程。 6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。

《植物组织培养技术》组培技术研发

《植物组织培养技术》组培技术研发 模块介绍 本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。模块结构设计见表1。 表1 模块结构设计 项目1 组培试验方案设计 一、学习目标 （一）终极目标 能够根据培养对象和培养目的科学设计试验方案。 （二）促成目标 1.熟悉信息搜集途径和文献检索方法，提高信息搜集与处理能力； 2.清楚组培研究的内容与技术路线、试验方案的体例与撰写要求； 3.熟悉组培基本理论，清楚组培快繁程序、类型与试验设计方法； 4.熟悉组培苗遗传稳定的影响因素与提高措施； 5.培养团队精神、创新意识和科学思维方法。

二、学习内容 1.组培基本理论； 2.组培快繁程序； 3.组培快繁类型与再生途径； 4.提高组培苗遗传稳定性的措施； 5.信息搜集途径与方法； 6．组培研究内容（影响因素）； 7.组培研究的技术路线； 8.组培试验设计方法； 9.组培试验方案格式。 三、知识点 1.植物细胞全能性理论（植物细胞全能性理论、根芽激素理论）； 2.组培快繁程序（初代培养、继代培养、生根培养）； 3.组培快繁类型（无菌短枝型、丛生芽增殖型、器官发生型、胚状体发生型、原球茎发生型）； 4.提高组培苗遗传稳定性的措施； 5.信息搜集途径与方法； 6．组培研究内容（影响因素）； 7.组培研究的技术路线； 8.组培试验设计方法（单因子试验设计、双因子试验设计、正交试验设计）； 9.组培试验方案格式。 四、技能点 1.组培信息搜集与处理能力； 2.组培试验方案设计能力。 五、教学重点 1.细胞全能性理论； 2.组培快繁程序与快繁类型（植株再生途径）； 3.组培研究的内容与技术路线；

植物工厂,设计方案(精华)

植物工厂设计方案 目录

第一章公司介绍 (3) 第二章设计方案 (4) 一、设计依据与标准 (4) 二、概况 (5) 第三章植物工厂系统组成图 (9) 第四章项目实施方案 (10) 一、布局与工艺 (10) 二、维护结构 (10) (一) 保温板 (10) (二) 植物工厂门 (13) (三) PVC地面 (14) 三、空气调节系统 (19) (一) 温度的调控 (19) (二) 湿度的调控 (34) (三) 二氧化碳调节系统 (38) 四、补光系统 (39) (一) 设计原则 (39) (二) 培养架介绍 (40) (三) 光源设计 (41) (四) 运用案列 (42) 五、营养液施肥系统 (44) 六、营养液增氧消毒系统 (44) 七、植物工厂控制系统 (47) (一) PID控制技术 (47) (二) PLC控制系统 (49) (三) 控制系统功能及介绍 (51) (四) 现场控制箱及电料 (56) (五) 奥地利E+E温湿度传感器 (57) 八、植物工厂配套设施 (59) 九、植物栽培过程 (60)

第一章公司介绍 第二章设计方案 一、设计依据与标准 国家及行业的有关法规、规范、标准、条例、规定 1、《洁净厂房设计规范》（GB50073-2001）； 2、《环控舱施工及验收规范》（JGJ-71-1990）； 3、《采暖通风与空气调节设计规范》（GB50019-2003）； 4、《通风与空调工程施工质量验收规范》（GB50246-2002）； 5、《单元式空气调节机技术条件》（GB/T17758-1999）； 6、《组合式空调机组》（JB/14294-1993）； 7、《蒸汽压缩循环冷水（热泵）机组，工商业用和类似用途的冷水（热泵）机组》 （GB/T18430.1-2001） 8、《建筑设计防火规范》（GBJ16-87） 9、《通风与空气调节设计规范》（GBJ19-87） 10、《生物气候箱技术规范》（JBJ71-90） 11、《冷库设计规范》（GB50072-2001） 12、《制冷设备、空气分离设备安装工程施工及验收规范》（GB50274-98） 13、《建筑电气工程施工质量验收规范》（GB50303-2002） 14、《智能建筑设计标准》（GB/T50314-2006） 15、《建筑地面工程施工及验收规范》（GB50209-2002） 16、《建筑装饰装修工程施工质量验收规范》（GB50210-2001） 17、《建筑给水排水及采暖工程施工质量验收规范》（GB50242-2002） 18、《建筑工程施工质量验收统一标准》（GB50300-2001） 19、《建筑照明设计标准》（GB50034-2004）

2000年组培期终试题

2000-2001学年第一学期生物99 园艺植物组织培养期终试题 姓名：班级：学号：分数： 一、名词解释（每题4分，共20分） 1、指示植物法： 2、外植体： 3、接种： 4、去病毒原原种： 5、抗体： 二、填空（每空1分，共15分） 1、鉴定无病毒苗的常用方法有、、 。 2、病毒在感染植株上的分布是不均匀的，其中老叶及成熟的组织或器官中病毒含量，而又嫩的及未成熟的组织

或器官中病毒含量，生长点（0、1-1、0mm） 则。 3、蝴蝶兰组织培养中最合适的外植体是和。 4、利用组织培养进行快繁的培养程序是、、 、、。 5、卡特兰组培最大的问题是外植体在初代培养中易。 6、多胚性植物可用方法脱毒。 三、判断改错（每小题2分，共10分） 1、在原球茎切块细小，稀疏的培养瓶内，群体生长快。（） 2、兰花种子极小，数目众多，种子中有胚乳和子叶。（） 3、茎尖培养脱毒的效果与茎尖大小呈正相关，而茎尖的成活率与茎尖大小呈反相关。（） 4、分光光度法是定性鉴定病毒的方法。（） 5、含有抗原的血清，称为抗血清。（） 四、间答题（每题5分，共25分） 1、在卡特兰继代培养时，为什么液体培养与固体培养交替进行？

2、在无病毒苗的栽培过程中，如何防止病毒的重新感染？ 3、怎样用指示植物法鉴定病毒？ 4、热处理和茎尖培养脱毒的原理是什么？各有什么优缺点？ 5、按照所给配方MS+BA1+KT 0、5+IBA0、5，如何量取6L培养基 的营养液？母液如下：大量元素10倍，铁盐100倍， 肌醇200倍，维生素1000倍， 微量元素1000倍，BA 0、5mg/ml， KT 1mg/ml ，IBA 0、5mg/ml。

花卉组培快繁技术及产业化运用

花卉组培快繁技术及产业化运用 一、组培快繁技术 组织培养的依据是植物细胞的全能性，即指具有完整细胞核的植物细胞，都具有形成完整植株所必须的全部遗传信息，从而具备发展成完整植株的能力，在适宜的培养条件下任何一个细胞都可以发育成一个新的个体。组织培养是在无菌条件下利用人工培养基培养植物的细胞、组织、器官等外植体，使其形成完整小植株的繁殖方法，根、茎、叶、花器官，甚至细胞及原生质体等均可作为组培的材料。 1.1 花卉组培概况 组培技术自20世纪60年代开始运用于生产以来，已经在农作物的脱毒、快繁、育种等各个方面取得了令人瞩目的成绩，我国20世纪70年嗲以后才开始快繁技术的研究，20世纪80年代以后开始运用。兰花是最早运用也是最成功花卉，通过原球茎的增殖，一个茎尖外植体一年可以繁殖种苗几十万株，形成了当时的“兰花工业”。之后此技术开始运用于月季、香石竹、菊花、唐菖蒲、非洲菊等许多花卉作物的种苗生产，此外在脱毒培养、种质保存、新品种培育等方面也开展了较多的工作。利用组培快繁技术能短时、高效的提供性状一致的优质种源这一特性，在加速选育种过程中获得的性状优良的品种、品系及生产过程中出现的芽变、名、优、新品种及有利用价值的野生花卉的迅速推广及运用上起到了积极的推动作用，各科研院校和企业着力于花卉的组培技术研究及生产开发，形成了一批集科研和开发于一体的大型花卉种苗企业，就云南来讲，有年产200万株以上组培室8-10家。对培养基、环境因子的影响进行了深入研究，探讨了玻璃化、畸形、黄化、变异的形成机理和防治措施，种苗快繁是组织培养技术在生产中运用最为广泛的一项技术，近几年在花卉种苗工厂化生产中广泛运用，对推动花卉产业的发展起到了积极的促进作用。 1.2 组培程序 1.2.1材料选择 首先在引种、试种及市场调查的基础上，选适栽的优良种品种，并在其中挑选花色纯正、健壮、无病虫害的优良单株作为取材母株，然后根据其组培特性取合适的部位作为外植体。 1.2.2材料消毒 将材料在洗涤剂溶液中清洗干净后，在0.1%-0.2%氯化汞中消毒10-20min，再在0.1%-0.2%次氯酸钠溶液中浸泡10min，用无菌水漂洗3次，在整个消毒过程中，要不断的摇动容器器，使其能够均匀全面的消毒。灭军剂种类和浓度是决定进种成功的关键。 1.2.3生长和分化 将外植体接种于含有各种营养物质和激素的培养基中，MS培养基是运用最为广泛和有效的培养基，它适于多数花卉作物组织培养，生长素和细胞分裂素的种类和浓度因花卉种类和品种以及诱导、增殖、生根等不同阶段而有所不同，经过愈伤组织和不定芽的诱导和分化及丛芽增添制，形成许多芽丛，最后将达到生根

园林植物快繁技术试卷

园林植物快繁技术（2007.9） 一、单项选择题（本大题共17小题，每小题1分，共17分） 每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，请将其代码填写在题后的括号内。错选、多选或未选均无分。 1、将培养体转移到新的培养基的过程，称为 A. 初代培养 B.继代培养 C.固体培养 D.平板培养 2、固体培养基中，常加入的凝固剂是 A.琼脂 B.活性炭 C.蔗糖 D.抗生素 3、花药和花粉培养时，对多数植物而言，花粉最容易诱导成功时期为 A.单核中期至单核晚期 B.双核期至三核期 C.三核期 D.减数分裂前期至中期 4、1960年，在快速繁殖和脱病毒上有重要贡献的法国人是 A. Murashige B. Cocking C. Morel D. Haberlandt 5、对外植表面灭菌时，较难从外植体上去除的消毒剂是 A.次氯酸钾 B.升汞 C.乙醇 D.过氧化氢 6、花药培养中，染色体加倍常用的诱变剂是 A. KT B. 蔗糖 C.聚乙二醇 D.秋水仙素 7、植物组织培养的理论基础是 A.植物细胞全能性 B.植物细胞学 C.细胞学说 D.植物生理学 8、利用母液配制MS培养基1升时，需吸取100X微量元素母液、称取0.7%琼脂的量 分别为 A.5ml;7.0g B.10ml;7.0g C10ml;0.7g D.5ml;0.7g 9、对于热不稳定物质，如IAA，常采用灭菌方式为 A.表面消毒 B.高压蒸汽灭菌 C.干热灭菌 D.过滤灭菌 10、细胞分裂素的主要作用是 A.促进细胞分裂和分化 B.促进细胞伸长和分裂 C.促进脱落和衰老 D.加速细胞的伸长生长 11、花粉培养时，小孢子的第一次分裂从不均等分裂变为均等分裂，分裂后形成两个大 小、形态和染色深浅相同的细胞，而后再继续分裂发育为花粉胚，该雄核发育途 径是 A.营养细胞发育途径 B.营养细胞和生殖细胞同时发育类型 C.生殖细胞发育类型 D.花粉均等分裂途径 12、植物无糖组织培养中，植物体的碳源是 A.蔗糖 B.氨基酸 C.CO2 D.活性炭 13、悬浮培养时，细胞数目扩增生长曲线呈 A.Z形 B.S形 C.L形 D.W形 14、配制NAA母液时，需先用下列哪种溶液溶解，再进行定容？ A.蒸馏水 B.乙醇 C.盐酸 D.丙酮 15、培养基的湿热灭菌时，一般灭菌的温度是 A.75摄氏度 B.100摄氏度 C.121摄氏度 D.160摄氏度 16、植物组织培养实验室中，接种室最常用的装置是 A.摇床 B.电子平台 C.高压蒸汽灭菌锅 D.超净工作台

【工程】植物工厂的建造是个系统而庞大的工程

【关键字】工程 植物工厂的建造是个系统而庞大的工 程 植物工厂的建造是个系统而庞大的工程，它所涉及的技术之广与所用的材料之多是常规传统农业所不能比的。其中就环境控制就需要涉及到十二大系统，风能光能发电系统、人工补光系统、微喷加湿系统、空气循环流通系统、二氧化碳补充系统、营养液自动调控系统、物理杀菌系统、温度控制系统、立体式栽培系统、视频监控图像传送系统、计算机远程控制系统、废物的再循环利用系统等；组成这些系统所涉及的学科包括生物技术、计算机环境控制技术、物理材料技术、能源综合利用技术、规划设计技术、农产品加工贮藏技术等；这么庞大的技术体系与构建工程必须对它进行科学设计，合理规划与严格实施才能得以完成，只有在科技人员、工程人员充分配合下才能建成，所以说它的建造是项庞大复杂的工程，它的建造具有农业航模一样的意义与伟大，是一般单位难以独立完成的，它必须利用各个学科各个部门的相互合作相互配合的前提下才能实施建造，所以在建造之前要让工程施工者对各个系统有个充分的认识，对各种设备与材料有个全面的了解，是十分必要的。以下就植物工厂建设所需的相关设施设备及材料采购有作些说明，这样才能在建造时能得以应手地实施，按计划如期完工。现就植物工厂所涉的各种技术与设备作些简单的介绍。1、风能太阳能发电装置：植物工厂属于电动力农业范畴，它所涉及的每一块运行系统都离不开电能，如环境模拟、工厂操作、人员管理等都需要用电，而电资源在当前这个时代又是耗能最大最匮乏的资源，如何实现电资源利用的节能化是建造植物工厂需要考虑的核心问题，所以在尽量挖掘可利用资源上进行研究与开发是极为重要的，再加上有些植物工厂是建在无电力供应的地方，更需把电摆到最首要的位置来进行科学设计，当前电资源以水资源的利用最为广泛，还有煤发电、核发电、沼气发电等发电模式，而这些发电都有它的局限性，只有太阳光发电与风力发电才具有它运用的普遍性，而且在实践上往往又是把两者结合起来设计，达到能源供应的互补，如没有光照时可利用风能发电，这些发电技术与装置投入成本又不大，而且安装简单易实施，例如在地球的南北极建造植物工厂或在月球上建造植物工厂首选的发电系统就是风太阳能发电系统，在有工业电供应区也可利用这两种发电技术进行补充供电，特别是用于通风与补光上最为经济实用。 太阳能发电原理与技术就是利用半导体材料在光照作用下发生电子跃迁位移而形成电流的原理而设计的，现在常用的半导体发电板有晶体电板与非晶体电板，这些电板在太阳照射下能产生电流，再利用贮电电瓶与逆变装置进行电的贮藏与转换，这样就构成了一个完整的太阳能发电系统；而风力发电是利用风力对风扇的带动而实现能量转换的发电方式，原理与操作都较为简单而容易掌握，在植物工厂配置太阳能或风能发电系统时，可先对补光

华南紫萁组培快繁途径研究

2019年第14期现代园艺 华南紫萁（），又名贯众、大凤尾蕨，真蕨目紫萁科紫萁属蕨类植物，原产于亚热带湿润地区，常野生于山地、草丛或溪边。该种是薄囊蕨类中最原始的类群，也是现存厚囊蕨纲和薄囊蕨纲过渡的少数种类之一[1]。植株高1~2m，树形美观、姿态优雅、终冬不凋，可供庭园、绿化带栽植或室内盆栽观赏，在植物造景和生态绿化中的作用日益凸显。其嫩苗、根茎、叶柄髓部还可入药，具有清热解毒、止血生肌、健脾利湿、舒筋活络等功效。 华南紫萁普遍采用分株和孢子繁殖进行人工繁育，对环境条件要求高，且繁殖周期长，受季节限制，不能满足日益增长的市场需求。李杨介绍并提出蕨类组培存在的问题[2]；葛佳等以扇蕨茎尖为外植体，通过绿球体（GGB）途径获得了再生植株[3]；王淼等研究了不同培养基和激素配比对东北蕨菜组培快繁的影响[4]。本研究旨在探索出适宜华南紫萁离体诱导的快繁方法，为促进其高频、稳定、产业化生产提供参考依据，对缓解野生资源压力，满足市场需求，丰富生态内涵具有重要意义。 1外植体选择及预处理 以徐州生物工程职业技术学院琴湖基地成功引种的健康华南紫萁种苗为试验材料，采集带有幼孢子囊群，未完全展开的叶片作外植体。用软毛刷轻轻去除外植体表面污垢，流水冲洗30min后，转入75%乙醇浸泡20s，0.1%氯化汞振荡清洗4min，无菌水冲洗5~7次，得华南紫萁无菌幼叶孢子囊外植体。 2GGB诱导培养 将外植体首尾切除，剪成2cm小段，按照极性方向接种到B5+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA培养基中，培养基添加30g/L蔗糖和7.5g/L琼脂，每瓶1个外植体，共接种60瓶，置于光照度2000~3000Lx，14h/d，温度23~27℃，湿度75%~85%的环境下培养。10d后观察发现，培养基表面有许多散落下来的绿色小孢子，其渐渐膨大，从基部产生不规则的突起，形成绿色球状体（GGB）。培养30d，GGB诱导率可达66.67%。 3GGB的增殖与分化培养 将诱导出的GGB分割成直径为3~5mm的绿球体小块，重新接种到B5+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA培养基中继续培养。培养30d后发现，GGB增殖膨大明显，平均直径为2.15cm，增殖率达79.8%，但是未见有不定芽分化现象产生。将增殖后的GGB接种至1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+1.5g/L活性炭分化培养基中，培养过程中观察到有不定芽的分化，60d产生的平均芽数可达35个，分化率达58.3%，且叶平展健壮，生长速度较快。 4壮苗生根培养 当新生不定芽长到约2cm，带2~3片健康平展叶片时，切下单芽接种至生根培养基中进行不定根诱导。生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA+1.5g/L活性炭。30d更换1次培养基，60d后观察有数条不定根产生，生长状况良好，生根率达100%，平均根数达3.5条。若将NAA浓度继续提高，不定芽基部有愈伤化趋势，生根的小苗长势缓慢、叶片发黄、状态不佳。 5炼苗移栽 将高3~4cm，具3~4根健康根系的组培苗置于温度为20~25℃、光强2000Lx，12h/d的条件下进行驯化炼苗。之后小心取出，去除根部培养基，用质量分数为0.125%多菌灵溶液清洗根部，种植于泥炭∶火山岩配比为3∶1的基质中，用薄膜和透光率30%的遮阳网覆盖，30d后统计成活率达91.8%，小苗生长健壮。 我国蕨类植物资源丰富，种类繁多，约有2600多种，占全世界的1/5以上。多数蕨类因其高雅飘逸的体态、碧绿青翠的叶色、精美的羽片图案、精致的脉序以及别致的孢子囊群排列[5]，已成为现代园林绿化行业的一个重要组成部分。本研究提出了一种以幼孢子囊群诱导，GGB途径的华南紫萁组培繁殖方法，初步建立了其离体再生体系，有效解决了现有繁殖方法的弊端，为优质华南紫萁商品种苗生产提供了方法和途径。 GGB，又称绿色球状体（），是指由蕨类植物外植体诱导得到的绿色球状分生组织集合体，接种于分化培养基上，可以获得大量蕨类植物幼苗。通过GGB诱导再生获得优质种苗，已是蕨类植物组培一种常见的研究途径。本试验以华南紫萁幼孢子囊叶为外植体，在B5+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA培养基上，成功诱导出GGB，继续培养可对GGB进行有效增殖，但未见不定芽分化。1/2MS配合1.0mg/L6-BA、0.1mg/L NAA及1.5g/L活性炭的情况下，分化率可达58.3%，说明低盐条件对不定芽分化的促进较明显。生根培养以1/2MS+0.1mg/L NAA+1.5g/L活性炭的培养基效果最好。在泥炭∶火山岩配比为3∶1的基质中，组培苗成活率达91.8%，是华南紫萁组培苗移栽驯化的最佳基质。 华南紫萁组培快繁途径研究 陶佩琳1马新永2高政平1 （1徐州生物工程职业技术学院，江苏徐州221000；2徐州市铜山区大彭镇农机服务中心） 摘要:以华南紫萁幼孢子囊叶为外植体，研究不同培养基对GGB诱导、增殖、分化及组培苗生根移栽的影响，初步建立了华南紫萁离体快繁体系。 关键词:华南紫萁；组培；快繁 基金项目：2017年徐州市推动科技创新项目《观赏蕨类引种驯化和商品化繁殖技术研究》，（项目编号：KC17056）。 作者简介：陶佩琳（1984-），女，汉族，江苏南通人，硕士，副教授，研究方向：植物组织培养。 试验研究 7 --

植物组织培养试题与答案集合版

植物组织培养试题与答 案集合版 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】

植物组织培养练习题 1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞，进行离体 培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件；植物体的任何一部 分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞脱分化形成 愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质体等。 4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的全部操作 过程。 6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，这种 致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。 11、液体培养是将培养物方在液体培养基中培养，又称为液体震荡培养。 三、

蓝莓组培快繁技术实例 · 附配方

蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。

2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养

温室技术最高阶段 植物工厂解决方案

〖植物工厂〗 1.技术介绍 植物工厂是指利用环境控制和自动化高新技术在全封闭式或半封闭式空间内进行植物周年工厂化安全生产的一种体系。它是现代生物技术、环境工程、机械传动、自动化控制等高新技术综合集成的产物。 它的主要特征是：精确可控环境设施、工厂化作业、卫生安全、绿色环保、高密度生产，植物工厂是设施农业发展的高级阶段，代表未来设施农业的发展方向，是一个高技术、高投入、高产出的新兴产业。 植物工厂综合应用了多学科高技术手段，形成高度集约化生产系统，不仅可以大幅度提高作物产量和品质，提高土地利用率，减轻劳动强度，而且对解决粮食危机、资源短缺、环境污染问题乃至宇宙空间的开发利用都具有十分重要的价值。它的诞生是对人类社会的重要贡献，随着社会的不断进步，植物工厂的独特魅力将会得到更大体现，其优越性主要表现在以下几个方面： 1)作物生产的计划性，周年生产的均衡性，产量和品质的稳定性； 2)作物生长周期短，设施利用率高，单位面积产量高，产值高； 3)机械化、自动化程度高，劳动强度低，用工少，工作环境轻松； 4)不施农药，产品无污染； 5)多层式，立体栽培，大大节省土地； 6)不受地理、气候等自然条件的影响，甚至可在极端气候区、外层空间及其它星球上进行农业生产； 7)与现代生物技术紧密结合，可以生产出稀有、价高、富含营养的植物产品。 植物工厂可以根据建设规模、研究对象、生产功能、光源利用等方式进行分类，主要类型如下：

①从规模上分为：大型（建设面积1000 m以上）、中型（300～ 1000m）、小型（300 m以下）。 ②从研究对象的层次上分为：A、以研究植物体为主的植物工厂；B、以研究植物组织为主的组培植物工厂；C、以研究植物细胞为主的细胞培养植物工厂。 ③从生产功能上分为：种苗植物工厂与商品菜（果、花）植物工厂。 222④从光能的利用方式上分，共有三种类型：A、人工光利用型，B、太阳光利用型，C、太阳光和人工光并用型。 2.发展历史 植物工厂的诞生是从20世纪40年代开始的。第一座植物工厂是在1957年丹麦约克里斯顿农场里建成。早期的植物工厂建设规模小，主要局限在实验室内，且种植作物品种单一，采用人工气候室进行完全控制，运行成本较高。在20世纪70年代初至80年代中期，植物工厂真正开始发展起来。在这一时期，世界上许多国家如美国、日本、英国、挪威、希腊、利比亚等国家的企业都纷纷投入巨资与科研机构联手进行植物工厂关键技术的开发，为植物工厂的快速发展奠定了坚实的基础。此时的植物工厂应用范围较广，自动化控制系统逐渐完善，示范效果明显。进入20世纪80年代以后，植物工厂迅速发展起来，一些发达国家相继成立了植物工厂协会，极大地推动了植物工厂的普及与发展。目前，植物工厂已成为21世纪高科技农业的重要发展领域。 进入21世纪以来，我国一些科教单位先后在无土栽培和植物工厂方面进行了一些研究与开发，并取得了阶段性的成果。随着京鹏植物工厂的建成，我国植物工厂将进入崭新的阶段，它标志着我国农业进入工厂化种植的时代。 3.京鹏植物工厂介绍 京鹏植物工厂主体结构采用单层轻钢结构，总建筑面积为1289m2，形状像一艘航空母舰，象征着我国农业率先向现代农业最先进技术扬帆起航，象征着京鹏公司沿着产学研相结合的方向驶向成功的彼岸。

组培期末考试试题

（一）一、最佳选择题（每题1分，共20分）1．下列哪一项不是被覆上皮的特点（）A．分布于有腔器官的腔面 B．细胞有极性 C．含丰富的血管和神经 D．有保护，吸收，分泌作用 E．相邻细胞侧面可见细胞连接 2．关于肝小叶的结构，错误的是（）A．呈多角棱柱体 B．肝血xx与胆小管互不相通 C．中央静脉汇合成小叶下静脉 D．肝板之间分布有胆小管 E．肝血xx内含动静脉混合血 3．关于浆细胞的描述错误的是（）A．胞质强嗜碱性 B．核偏位，染色质呈车辐状 C．电镜下可见密集的粗面内质网 和发达的xx复合体 D．由单核细胞受抗原刺激产生 E．分布于全身易受抗原入侵的部位

4．淋巴结和脾内发生细胞免疫应答时，明显增大的结构分别是（） A．浅层皮质和动脉周围淋巴鞘 B．副皮质区和动脉周围淋巴鞘 C．浅层皮质和脾小体 D．副皮质区和脾小体 E．副皮质区和边缘区 5．下列不属于单核吞噬细胞系统的细胞是（）A．小胶质细胞 B．破骨细胞 C．巨噬细胞 D．中性粒细胞 E．肺泡巨噬细胞 6．关于神经胶质细胞，错误的是（） A．数目较神经元为多 B．有分裂增殖能力 C．不传导兴奋 D．有综合分析等功能 E．有支持、营养、保护、绝缘功能 7．下列哪项不是正常受精的条件（） A．合格的配子

B．生殖管道通畅 C．精子获能 D．精卵受精能力有效时间内 E．处于分泌期的xx粘膜B．贲门腺底部 C．幽门腺底部 D．小肠腺底部 E．大肠腺底部 9．对肌原纤维的描述错误的是（）A．是骨骼肌纤维内纵行排列的结构B．三种肌纤维内均含有肌原纤维C．由肌丝组成 D．肌丝规则排列构成肌节 E．可见明暗相间的横纹 10．关于皮肤的描述,哪些不正确A．皮肤由表皮和真皮构成 B．表皮内含丰富的毛细血管 C．乳头层内含触觉小体 D．真皮由结缔组织构成 E．表皮由角质形成细胞和非角质形成细胞组成11．卵泡闭锁可以发生在（） A．原始卵泡阶段 B．初级卵泡阶段 C．次级卵泡阶段 D．卵泡发生的任何阶段

苹果树组培快繁技术实例 · 含配方

苹果的组织培养是采用无菌培养技术，将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、鳞片、块根和球茎等器官以及它们的组织切片进行离体培养，使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。由于离体技术处理严格，所以很容易脱除一些细菌病原及病毒，是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。苹果矮化砧、抗寒砧的组织培养也已成功。苹果脱毒组培技术流程具体如下。

一 外植体材料选择与处理 早春，将上年芽接或切接的盆栽长富2号苹果苗移人温室，待新梢长出3～5片新叶时，放入热处理箱中，37℃恒温热处理30d或32℃与37℃每8h变换一次，变温热处理60d。脱毒率可达80％以上。热处理结束后，从盆栽苗嫩梢上采集生长旺盛、长约2～3cm顶梢，流水冲洗10min，去掉小叶。70％乙醇浸泡30s，蒸馏水冲洗后放入0.1％HgCI。中消毒10min，无菌水冲洗3～5次，解剖镜下迅速剥取1.0mm的茎尖进行分离培养，接种于起始培养基上。

二 培养基制备 1.1 芽诱导 适宜苹果芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。诱导的芽生长正常可发育成新梢。 1.2 继代培养 选择诱导的芽丛切割成单芽茎段，转接于设计的继代培养基上。适宜的苹果继代培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+琼脂0.36mg/L。培养条件：光照强度2000～ 2500lx，光照时间14～16h/d，适宜温度为25℃±2.0℃。40d后增殖6.1倍。 1.3 生根培养 选择生长正常的继代培养苗，剪成单芽茎段，插入生根培养基中，苹果适宜的生根培养基为：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+琼脂0.36％。培养30d后，平均4～6条根／苗，长达0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于茎基部。

植物工厂设计方案

植物工厂设计方案 一种新型农业模式，是通过设施内高精度环境控制实现农作物周年连续生产的高效农业系统，是利用计算机对植物生育的温度、湿度、光照、CO2浓度以及营养液等环境条件进行自动控制，使设施内植物生育不受或很少受自然条件制约的省力型生产。以节能植物生长灯和LED为人工光源，采用制冷—加热双向调温控湿、光照—二氧化碳耦联光合与气肥调控、营养液在线检测与控制等13个相互关联的控制子系统，可实时对植物工厂的温度、湿度、光照、气流、二氧化碳浓度以及营养液等环境要素进行自动监控，实现智能化管理。 一、总体说明 我公司拟在朱家山村建设一个小型的植物工厂和3个蔬菜大棚，总建筑面积，雾培温室平方米，水培室平方米，展示厅及控制中心平方米。宽约20m，长约31m，高约6m。 结构形式：建筑主体采用钢结构，其中有全日光型雾培温室，大跨度人字梁钢结构，屋顶5mm钢化玻璃覆盖，四周5+6+5mm钢化玻璃；人工光培室四周内立面用50机制岩棉夹心彩钢板，外立面用EPS75机制泡沫夹心彩钢板，吊顶用50手工岩棉夹心彩钢板，屋面顶板用EPS75瓦楞隔热彩钢夹芯板；展示厅及控制中心，钢结构，屋顶覆盖采用5+1.14+5玻璃覆盖，四周采用5+9A+5中空透明钢化玻璃； 系统配置包括：温室主体、自然通风系统（顶、侧窗）、遮阳系统、保温系统、控温系统、湿帘风机降温系统、循环风机系统、湿帘外翻窗系统、照明系统、给排水系统、雨水回收系统、配电系统。 二、温室主结构 本工程主结构材质为Q345B及Q235B，次结构为Q235B，全日光型雾培室主骨架采用国产热镀锌H型钢（规格为300×150×8×12mm）制成，镀锌层厚度≥275g/m2。展示区及控制中心主骨架采用国产热镀锌H型钢（规格为400×300×

组培期末考试试题

一、最佳选择题（每题 1 分，共20 分） 1.下列哪一项不是被覆上皮的特点（） A .分布于有腔器官的腔面 B .细胞有极性 C .含丰富的血管和神经 D .有保护，吸收，分泌作用 E.相邻细胞侧面可见细胞连接 2.关于肝小叶的结构，错误的是（） A .呈多角棱柱体 B .肝血窦与胆小管互不相通 C.中央静脉汇合成小叶下静脉 D .肝板之间分布有胆小管 E .肝血窦内含动静脉混合血 3.关于浆细胞的描述错误的是（） A .胞质强嗜碱性 B .核偏位，染色质呈车辐状 C ?电镜下可见密集的粗面内质网和发达的高尔基复合体 D?由单核细胞受抗原刺激产生 E. 分布于全身易受抗原入侵的部位 4.淋巴结和脾内发生细胞免疫应答时，明显增大的结构分别是（） A .浅层皮质和动脉周围淋巴鞘 B .副皮质区和动脉周围淋巴鞘 C .浅层皮质和脾小体 D .副皮质区和脾小体E.副皮质区和边缘区 5.下列不属于单核吞噬细胞系统的细胞是（ A ?小胶质细胞 B .破骨细胞 C .巨噬细胞 D .中性粒细胞E.肺泡巨噬细胞 6.关于神经胶质细胞，错误的是（） A .数目较神经元为多 B .有分裂增殖能力 C .不传导兴奋 D .有综合分析等功能 E .有支持、营养、保护、绝缘功能 7.下列哪项不是正常受精的条件（） A .合格的配子 B .生殖管道通畅 C .精子获能 D.精卵受精能力有效时间内 E.处于分泌期的子宫粘膜 8.消化管的潘氏细胞分布在（） A .胃底腺底部 B .贲门腺底部 C ?幽门腺底部 D .小肠腺底部 E.大肠腺底部9.对肌原纤维的描述错误的是（） A .是骨骼肌纤维内纵行排列的结构 B .三种肌纤维内均含有肌原纤维 C .由肌丝组成 D .肌丝规则排列构成肌节 E.可见明暗相间的横纹 10.关于皮肤的描述,哪些不正确 A .皮肤由表皮和真皮构成 B ?表皮内含丰富的毛细血管 C .乳头层内含触觉小体 D.真皮由结缔组织构成 E.表皮由角质形成细胞和非角质形成细胞组成 11.卵泡闭锁可以发生在（） A .原始卵泡阶段 B .初级卵泡阶段 C .次级卵泡阶段 D .卵泡发生的任何阶段 E.以上都不是 12.呼吸系统导气部终止于（） A .终末细支气管 B .细支气管 C ?呼吸性细支气管 D .小支气管 E.肺泡管 13.肾实质由大量（）构成 A .泌尿小管 B .肾小管 C .肾小体 D .集合管 E.肾单位 14.生殖细胞，哪项正确（） A .均从青春期开始发育。 B .只有在受精时，卵细胞才能完成减数分裂。 C .精子在睾丸内发育成熟，并具有活动能力。 D .每一个月经周期都有一个卵细胞完成减数分裂并排出卵巢。 E.所有生殖细胞均为二倍体。 15．对刷状缘描述中正确的是（） A .可以摆动 B .有清除颗粒作用 C .可扩大细胞的吸收面积 D .内含微管