上海交通大学2003微生物研究生入学考试试卷

上海交通大学2003微生物研究生入学考试试卷

一、解释名词：(每题3分)

1、立克次氏

2、同步生长

3、准性生殖

4、转化

5、固氮酶

6、反硝化作甲

7、溶源性细菌

8、朊病毒

9、转移因子

10、Hfr苗抹

二、填空：(每空1分)

1、化能异养型微生物可通过____、____和___方式获得能量；光能营养型微

生物在光照下通过___、___和___的方式获得能量。

2、纯培养是指___，在微生物实验室可通过____、____、____和____方法获得。

3、青霉素法是细菌诱变育种中常用的筛选方法之一，其作法是将诱变后的菌

株培养在____培养基中，待____长出后加入青霉素，青霉素的作用是____，

而后加入青霉素酶，再将菌涂布于____平板上，以检出____淘汰____。

4、E.coii分解葡萄糖产乙酰甲基甲醇，后者在____条件下生成的____与培养

基中____的胍基生成红色化合物，是为____试验阳性。

5、三原界学说是对各大类微生物的____进行测定后提出的，它将微生物分

为____、____和____三个原界：其主要理论为____。

6、自养微生物通过____、____和____的途径固定CO2。

7、Pseudomonas aerugmosa(Lys(-上标),Str(r上标)表示——。

8、在菌种保藏工作中，为使微生物处于休眠状态，人为地造成____、____、

____、____的环境，其中____被认为是目前较好的长期保藏方法。

9、每一种微生物的学名都依属而命名，属名在前，用____文的____词来表示，种名在后，用____词表示。

10、BOD(5下标)指____。COD(cr下标)指____。

三、判断下列题的“是”与“非”，并请写出选择的理由(每题2分，无理由不计分：

1、能分解烃类的微生物都是好氧的，而能固氮的微生物都是厌氧的。( )

2、蛭弧菌是一类可寄生在细菌细胞周质空间中的细菌。( )

3、要获得一抗药性突变菌株，可用相应的药物对出发菌株进行诱变处理。( )

4、巴斯德效应是指酵母菌优先利用葡萄糖的现象，又称二次生长观象。( )

5、霉菌和放线菌细胞均呈丝状，故其菌落干燥、不透明、不易挑起。( )

6、Bacillus sp．表示一个尚未定出菌名的芽孢杆菌。()

7、HIV是RNA病毒，其核酸复制时，以亲代RNA为模板合成子代RNA。()

8、质粒是细菌染色体外的一小段闭合环状DNA。()

9、凡能引转导的噬菌体都是温和噬菌体。()

10、以一种氨基酸为氢供体，另一种氨基酸为氢受体而产能的发酵称Stikland

反应。( )

四、问答题：

1、DAP、teichoic acid、PHB、DPA、LPS分别是什么? 这些化合物分别出现

在细菌细胞的什么结构中?有何功能? (15分)

2、什么是细菌的土长曲线？生长曲线对微生物发酵生产有何指导意义?(10分)

3、何谓病毒：试述噬菌体感染过程。(10分)

4、用代谢调控更沦解释为何用高丝氨酸缺陷型作为赖氨酸生产菌株。(10分)

天冬氨酸

↓

天冬氨酸磷酸

↓

天冬氨酸半醛

/ ↓

/ L－高丝氨酸

/ ↓ L-赖氨酸↓ L-苏氨酸

↓

L-甲硫氨酸

5、试述如何从土壤中分离出产生淀粉酶的芽孢杆菌的方法步骤。(15分)

1998年试题(A卷)

一简答题

1细菌侵袭力有哪些因素构成.

2何谓SPA.其特性与医学有何关系.

3简述致病菌的致病条件.

4简述破伤风杆菌形态结构和特征.

5二相性真菌概念.

6干扰素概念极其分类.

7简述肠道病毒共同特征.

8 何谓肿瘤病毒,举例说明.

二论述题

1 伤寒杆菌致病性有哪些,肥达氏反应结果判定应注意什么.

2试比较细菌内毒素和外毒素区别.

3何谓噬菌体及溶源性细菌.

4 乙肝病人血清中能检出HBV的抗原,抗体有哪些,试述临床意义.

5如何快速诊断病毒感染,并谈谈进展.

6 试述流感病毒结构极其变异情况.

B卷

一简答题

1什么是细胞壁缺陷细菌.

2 菌落概念是什么.

3何谓细菌的生化反应.

4何谓分枝杆菌抗酸特性.

5白色念珠菌的临床感染类型有哪些.

6什么是包涵体.

7 简述肠道杆菌的共同特点.

8病毒的感染类型有哪几种.

二论述题

1乙型溶血性链球菌致病物质及所致疾病.

2细菌群体生长繁殖过程中各期特点.

3什么上芽孢,其特征及医学意义是什么.

4试述乙肝病毒的抗原成分及医学意义.

5试述病毒的致病性.

6何谓逆转录病毒,其共同特征有哪些.

1999年试题(A卷)

一名词解释

L型细菌立克次体缺陷病毒细胞病变IFN 溶原状态衣原体包涵体二简答题

1简述血浆凝固酶实验的原理极其结果.

2简述细菌的分布情况.

3解释肥达氏实验的结果.

4简述常见深部真菌的种类及所致疾病.

5病毒感染的快速诊断方法有哪些.

6简述专性厌氧菌的厌氧机制.

三论述题

1试述病毒的致病机理.

2什么上芽孢,试述其重要特征.

3试述细菌的侵袭力极其物质基础.

4单纯疱疹病毒有哪些感染类型.

B卷

一名词解释

灭菌败血症正常菌群荚膜支原体菌丝噬菌体缺陷病毒协同凝集PCR

二简答题

1何谓结核菌素实验.

2简述细菌外毒素特征.

3专性厌氧菌的厌氧机理是什么.

4简述乙型肝炎病毒结构极其抗原成分.

三论述题

1 举例说明条件致病菌的致病条件及所致疾病.

2试述乙型链球菌生物学特性及致病性.

3何谓亚病毒,有哪几种类型.

4甲型流感病毒结构特点及与致病性的关系.

2000年试题

一名词解释

亚病毒菌群失调温和噬菌体干扰素支原体逆转录病毒二相性真菌菌毛

二简答题

1何谓质粒.试举二种质粒并简述医学意义.

2 OT实验本质及临床应用.

3何谓SPA,其特征在医学上有何应用价值.

4试述常用的病毒培养方法.

5试述细菌生长培养条件.

三论述题

1常见螺旋体有哪几种,所致疾病是什么.

2试述病毒对宿主细胞的直接作用.

3肠道病毒包括哪些类型.试述其共同特征.

4细菌合成性代谢产物有哪些,各有何医学意义

2001年试题

一名词解释

支原体亚单位疫苗溶原性噬菌体二相性真菌抗原性漂移串珠实验细菌生长曲线 SPA 细菌L型顿挫感染二简答题

1简述肠道病毒的共同特征.

2何谓侵袭力,简述其物质基础.

3何谓转位因子,有哪些类型.

4简述破伤风杆菌的形态及结构特征.

三论述题

1试述病毒的致病机理.

2试述病毒增殖过程中的导致异常增殖及干扰现象.

3试述肥达氏反应原理,在分析其结果时应注意哪些问题.

4如何进行细菌的人工培养,细菌的人工培养有哪些主要途径.

5试述结核杆菌细胞壁成分与致病性的关系.

以下摘自bioon

微生物。还是2002年的

一、试写出5种不同属的细胞型微生物的拉丁文种名全称和相应的中文名称（5分）

二、翻译并解释名词（25分）

1、prion

2. Glycolysis

3. Auxotroph

4 Freeze drying

5. lysogenic conversion

三、简答题（30分）

1、绘图表示PCR技术的原理及步骤

2、革兰氏染色的原理及步骤

3、请简要描述下列三种情况下生物之间的关系：真菌和藻类形成的地衣；健康人肠道中的微生物；某些专性生活在昆虫细胞中的细菌

4、试论油镜的工作原理

5、对细菌内毒素和细菌外毒素的免疫应答有和不同？根据以上分析你认为在遇到刚产生外伤的病人时应如何进行处理？

四、问答题（40分）

1、为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺？有哪些选用标准？建立16SrRNA系统发育树的意义何在？

2、营养丰富的食品容易由于微生物的污染而腐烂变质，试根据微生物学知识分析哪些方法可被用于延长食品的保存期？

3、与细胞型生物相比病毒的生长规律有何特点？是设计实验对噬菌体的生长、繁殖规律进行研究，并绘图表示。

4、作为克隆载体的质粒应具备哪些基本要求？为什么自然转化和人工转化相比在将质粒导入作为宿主的的细菌细胞时其转化率会存在很大的差异？有何对策？

中科院2003微生物考试卷

一。是病毒结构图1*10

二。名词解释：3*10

古菌，Gram染色，，，转导，真菌毒素，生物整治

三。判断1*10

四。填空3*10（很简单）

五。做图说明生物分子进化三域说10

六。做图说明IgG的结构功能10

七。问答10*5

1。核酸（DNA|RNA）中的生物信息在原核生物分类中的意义；

2。真菌实际重要性；

3。微生物在N、P循环中的作用；

4。微生物营养类型举例；

5。微生物次级代谢意义。

复旦大学2000年微生物试题

一、名解：化能异养菌富集培养生物氧化厌氧罐鳖试剂法

二、重要数据:1典型细菌的大小。重量

2霉菌，哮母菌，放线菌，细菌，病毒个体直径的大小比例

3每克较肥沃的土地中，原生动物，藻类，霉菌，哮母菌，放线菌，细菌的大体细胞数

4当今已知的微生物总数有多少，何大类最多，何大类最少

5，大肠杆菌和酿酒哮母的代时时多少

三、革兰氏染色的主要步骤及原理

四、四大类微生物的各有何特点，原因，掌握这些有何实用意义

五、何为烈性噬菌体（举两种代表）？式作图并阐明它的裂解性生活史。

六、什么叫质粒？有那几类主要质粒？他们的生理功能和实际应用如何？

七、什么是沼气？沼气发效有和生态意议？式述甲烷形成三阶段理论及其中的微生物学和生物化学原理。

八、什么是补体结合试验？它有何优点？试图示并说明其作用原理。

九、试写出以下五种微生物的学名（不可简写）

一种肠道细菌一种芽孢杆菌一种厌氧细菌一种酒精发酵菌一种重要工业霉菌

1998年试题(A卷)

一简答题

1细菌侵袭力有哪些因素构成.

2何谓SPA.其特性与医学有何关系.

3简述致病菌的致病条件.

4简述破伤风杆菌形态结构和特征.

5二相性真菌概念.

6干扰素概念极其分类.

7简述肠道病毒共同特征.

8 何谓肿瘤病毒,举例说明.

二论述题

1 伤寒杆菌致病性有哪些,肥达氏反应结果判定应注意什么.

2试比较细菌内毒素和外毒素区别.

3何谓噬菌体及溶源性细菌.

4 乙肝病人血清中能检出HBV的抗原,抗体有哪些,试述临床意义.

5如何快速诊断病毒感染,并谈谈进展.

6 试述流感病毒结构极其变异情况.

B卷

一简答题

1什么是细胞壁缺陷细菌.

2 菌落概念是什么.

3何谓细菌的生化反应.

4何谓分枝杆菌抗酸特性.

5白色念珠菌的临床感染类型有哪些.

6什么是包涵体.

7 简述肠道杆菌的共同特点.

8病毒的感染类型有哪几种.

二论述题

1乙型溶血性链球菌致病物质及所致疾病.

2细菌群体生长繁殖过程中各期特点.

3什么上芽孢,其特征及医学意义是什么.

4试述乙肝病毒的抗原成分及医学意义.

5试述病毒的致病性.

6何谓逆转录病毒,其共同特征有哪些.

1999年试题(A卷)

一名词解释

L型细菌立克次体缺陷病毒细胞病变IFN溶原状态衣原体包涵体

二简答题

1简述血浆凝固酶实验的原理极其结果.

2简述细菌的分布情况.

3解释肥达氏实验的结果.

4简述常见深部真菌的种类及所致疾病.

5病毒感染的快速诊断方法有哪些.

6简述专性厌氧菌的厌氧机制.

三论述题

1试述病毒的致病机理.

2什么上芽孢,试述其重要特征.

3试述细菌的侵袭力极其物质基础.

4单纯疱疹病毒有哪些感染类型.

B卷

一名词解释

灭菌败血症正常菌群荚膜支原体菌丝噬菌体缺陷病毒协同凝集PCR 二简答题

1何谓结核菌素实验.

2简述细菌外毒素特征.

3专性厌氧菌的厌氧机理是什么.

4简述乙型肝炎病毒结构极其抗原成分.

三论述题

1 举例说明条件致病菌的致病条件及所致疾病.

2试述乙型链球菌生物学特性及致病性.

3何谓亚病毒,有哪几种类型.

4甲型流感病毒结构特点及与致病性的关系.

2000年试题

一名词解释

亚病毒菌群失调温和噬菌体干扰素支原体逆转录病毒二相性真菌菌毛

二简答题

1何谓质粒.试举二种质粒并简述医学意义.

2 OT实验本质及临床应用.

3何谓SPA,其特征在医学上有何应用价值.

4试述常用的病毒培养方法.

5试述细菌生长培养条件.

三论述题

1常见螺旋体有哪几种,所致疾病是什么.

2试述病毒对宿主细胞的直接作用.

3肠道病毒包括哪些类型.试述其共同特征.

4细菌合成性代谢产物有哪些,各有何医学意义.

2001年试题

一名词解释

支原体亚单位疫苗溶原性噬菌体二相性真菌抗原性漂移串珠实验细菌生长曲线SPA细菌L型顿挫感染

二简答题

1简述肠道病毒的共同特征.

2何谓侵袭力,简述其物质基础.

3何谓转位因子,有哪些类型.

4简述破伤风杆菌的形态及结构特征.

三论述题

1试述病毒的致病机理.

2试述病毒增殖过程中的导致异常增殖及干扰现象.

3试述肥达氏反应原理,在分析其结果时应注意哪些问题.

4如何进行细菌的人工培养,细菌的人工培养有哪些主要途径.

5试述结核杆菌细胞壁成分与致病性的关系.

上海医科大1995年微生物（专基）

一、名词解释

1、菌毛

2、脂多糖

3、融原性转换（举实力）

4、霍乱肠毒菌

5、结核菌素试验

6、ts株

7、病毒的持续感染

8、假菌丝

二、问答题

1、试述细菌耐药性变异的遗传学机理及生化机理

2、试述大肠杆菌的致病性及其在卫生学检验上的意义？

3、试述干扰素的概念、产生、作用机理及其应用？

4、试述乙型肝炎的微生物学测验及其在判断传染性、予后等方面的意义？

天津大学1999硕士入学微生物学试题

一．填空和多项选择填空题：(每题5分，共30分)

1．在原核微生物中虽然有性繁殖方式，但仍可通过不同方式在细胞水平上实现基因重组。由部分缺陷型λ噬茵体参与实现的基因重组方式称为______。大肠杆菌可以通过接合实现基因重组，可选用大肠杆菌的______或______菌株做供体茵，______菌株做受体菌；如果要在不同种属的原核细胞之间实现基因重组，则应该采用______或______方式进行基因重组。

2．微生物可以通过形成子囊孢子进行有性繁殖，在______(芽孢杆菌属、链霉菌属、酵母菌属、毛霉属、曲霉属、脉抱霉属)中存在这种繁殖方式；于要池子是首先由两个配子接合，然后经过______、______和______形成的；通常一个子囊内总是形成______或______个子囊孢子。

3．在利用______做碳源生长的微生物中，普遍存在着乙醛酸循环途径，通过测定细胞内是否存在______酶和______酶可以判定细胞内是否存在乙醛酸循环途径；乙醛酸循环途径的生物学意义在于______和______。

4．根据微生物最适生长温度的不同，可将微生物分为______、______和______ 三种类型；在某微生物生长温度范围内，改变其培养温度，可以影响该微生物的______(茵体形态、菌体结构、代谢途径、生长速率、细胞收获量、遗传性状)；根据温度对不同微生物的不同影响，温度可以用作控制微生物生长的手段，实验室常见方法有______、______和______。

5．机体的特异性免疫反应由______引起；参与特异性免疫反应的免疫细胞有______(干细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞、单核细胞)，参与特异性免疫反应的免疫活性物质有______(抗体、补体、干扰素、白细胞介素、溶茵酶)。某些病原微生物在侵染机体的过程中，可以通过释放蛋白类的______或脂多糖类的______造成机体的伤害。

6．具有dsDNA的烈性噬茵体侵入宿主细胞后，一般早期转录和转译的产物主要是______或______，次早期转录和转译的产物主要有______和______，晚期转录和转译的主要产物是______；高感染复数的烈性噬菌体对宿主细胞进行吸附，可导致宿主发生______。

二．简单回答问题：(每题5分，共40分) 1．如何对一株细菌进行种属鉴定?请写出主要鉴定内容. 2。画出抗体的结果模式简图，标明各个组成部分;人体的抗体主要分为哪几种类型? 3．为什么在自然界清洁淡水水体中主要存在一些光能自养型和化能自养型微生物?请用微生物生态学原理简单说明。4．画出T4噬菌体的形态结构简图，标明各部分名称；简述其生物学特征。5．在微生物的培养过程中，如果要缩短其生长的延迟期，可以在菌种、培养基和其它方面采取哪些措施。6．画出大肠杆菌乳糖操纵子模型简图，标明各个部分，并简述各部分的功能。7．细菌英膜依据其存在特点可分为几种类型?分别简述其特点。8．写出固氮微生物的固氮反应式，简述固氮酶的结构组成和催化特点。

三。画出一条从葡萄糖开始的乙醇发酵代谢途径示意图，并说明该代谢途径在微生物细胞内发挥哪些生理作用。(共10分) 四。详细说明原核微生物与真核微生物在细胞结构方面有何异同。(共10分)

五。什么叫做营养缺陷型菌株?在实验室中如何从原养型菌株获得营养缺陷型菌株?请设计一个具体实验方案。(共10分)

1999年化冶所招收硕士研究生入学考试微生物学试题

一、名词解释（10分）

1. 拮抗作

2. 乳酸发酵

3. 抗体

4. 数值分类法

5. 共生固氮作用

二、图示细菌细胞和酵母的基本结构，并叙述二者在结构上的主要差异。（20分）

三、根据碳源和氮源的不同微生物可分为哪几大营养类型？请指出各类的特征及其代表微生物。（15分）

四、消毒和灭菌的概念有何不同？实验室常用消毒和灭菌的方法有那些？分别指出灭菌原理、优缺点、涉及仪器的简述操作步骤及注意事项。（20分）

五、为了获得低温碱性脂肪酶产生菌，请问1、应取什么环境条件下的样品分离，最有可能获得产该酶的菌株？若样品中所需的菌很少，应采取什么措施？请写明分离流程。2、如果所获得的菌株产酶能力不强，你将采取什么措施来提高该菌的产酶能力？请写明所采用的方法及技术路线。（20分）

六、细菌生长曲线分哪几个时期？各时期有何特征及在工业发酵中的应用。（15分）

2000年中科院化冶所招收硕士研究生入学考试微生物学试题

一、名称解释（30分，每题3分）

1. 准性生殖

2. 营养缺陷型

3. 模式菌株

4. L型细菌

5. 一步生长曲线

6. 点突变

7. 古细菌

8. 自养菌

9. 病毒10.悉生动物

二、简答题（50分，每题10分）

1. 试举出分解淀粉、纤维素能力最强的细菌和真菌各一种。

2.试从代谢途径的角度来说明发酵产生某一发酵产品的原理。

3.单细胞微生物的群体生长规律常分为哪四个时期？各有何特点？

4.简述革兰氏染色的原理。

5.青霉素、链霉素、制霉菌素、丝裂霉素在结构上的分属哪类抗生素？其作用机理如何？

三、论述题（20分，任选一题）

1.微生物学中哪几项技术是独特的？并论述其原理及对外发展现代生物学所做的贡献。

2.论述微生物在自然界物质循环中的重要作用。

浙大微生物99年研究生入学试卷

一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”）

1、自然界存在的个体最大的微生物属于真菌界。

2、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物。

3、因为碱性染料能与细胞中带正电的组成成分结合，所以，常将其用于细菌染色。

4、在碳源和氮源充足的条件下，PHB生产菌的细胞内会有大量的乙酰辅酶A缩合形成PHB。

5、因为细菌个体没有性的分化，所以，只能进行无性繁殖。而大多数酵母菌细胞有性的分化，所以，可以进行有性繁殖。

6、根据细胞壁中肽聚糖层的厚薄，可利用革兰氏染色法将细菌分成二大类。但是，放线菌细胞壁中不含肽聚糖，所以，无法采用革兰氏染色法将其分类。

7、一般认为与细菌所有性状相关的遗传信息都储存在细菌染色体上。

8、细菌进行细胞呼吸的主要部位是在线粒体内膜形成的嵴上。

9、一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶（SOD）。

? 一般认为各种抗性突变是通过适应而发生的，即由其所处的环境诱发出来的。

二填充题（20分）

1、整个肽聚糖合成过程的步骤很多，反应的部位分别发生在细胞的a、b和c ，因而可分成三阶段。青霉素对细菌的抑制作用发生在d阶段。

2、染色体内畸变包括a、b、c和d四种类型。

3、以单链DNA为遗传物质的微生物有_ a_ 等；以单链RNA为遗传物质的微生物有_ b_ 等。

4、细菌产生抗药性的三条途径分别是a、b和c。

5、目前，可在基因工程中担当外来基因载体的只能是微生物或其某一组分，它们主要有a和b等。

6、噬菌体的繁殖一般可分为五个阶段，即a、b、c、d和e。

7、获得细菌同步生长的方法主要a和b两类。

8、单细胞微生物间歇发酵的典型生长曲线可分为a、b、c和d等四个时期。

9、微生物的六大营养要素分别是a、b、c、d、e和f。

10、最常用的固体培养基的凝固剂是a 。

三简述下列概念的区别（40分）：

1 类病毒与病毒

2 蜗牛酶与溶菌酶

3 包含体与伴孢晶体

4 菌丝体与子实体

5 协同反馈抑制与合作反馈抑制

6 定向培育与诱变育种

7 真核生物和原核生物

8 光复活作用与暗修复

9 野生型与营养缺陷型

10 有性杂交与准性杂交

四问答题（30分）

1、以EMB（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。

2、某突变菌株在基本培养基上无法生长，而在添加了0.1%碱水解酵母核酸后，该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。

3、连续培养和连续发酵有何优点？但为什么连续的时间总是有限的？

4、在微生物培养过程中，引起pH改变的原因有哪些？在实践中如何保证微生物处于较稳定和合适的pH环境中？

99年答案

一是非题

1 对

2 错

3 错

4 错

5 错

6 错

7 错

8 错

9 对10 错

二填充题

1a 细胞质中；1b细胞膜中；1c细胞膜外；1d第三

2a重复；2b易位或倒位；2c缺失；2 d插入

3aF X174，M13,fd,f1,细小DNA病毒等；3b细小RNA病毒（脊髓灰质炎病毒，口蹄疫病毒）弹状病毒（狂犬病病毒）劳氏肉瘤病毒，烟草花叶病毒，MS2,f2R,17等。

4a即基因突变; 4b抗药性质粒(R因子）的转移; 4c生理上的适应。

5a 细菌质粒；5b噬菌体。

6a吸附;6b侵入; 6c增殖（复制与生物合成）; 6d成熟（装配）; 6f裂解（释放）。

7a诱导法7b筛选法

8a 延迟期；8b对数期；8c稳定期；8d衰亡期。

9a碳源; 9b氮源; 9c能源; 9d生长因子; 9e无机盐; 9f水.

10a琼脂

三简述下列概念的区别

1、类病毒是当今所知道的最小、只含有RNA一种成分、专性细胞内寄生的分子生物。病毒也是一类超显微的非细胞生物。病毒比前者大，同时含有核酸和蛋白质等，一般不能通过种子传播。

2、蜗牛酶是玛瑙螺胃液制成的，内含纤维素酶、甘露聚糖酶、葡糖酸酶、几丁质酶和脂酶等，它对酵母等真菌的细胞壁有良好的消化作用。而溶菌酶广泛存在于卵清、人的眼泪和鼻涕、部分细菌和噬菌体内的一种酶，它能有效地水解细菌的肽聚糖，从而消化细菌的细胞壁。

3、包含体是某些感染了病毒的宿主细胞内出现的光学显微镜下可见，形态和数量不等的小体。而伴孢晶体是某些芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，在芽孢旁形成的一颗菱形或双锥形的碱溶性的蛋白晶体。两者都能作为生物农药。

4、菌丝体是丝状微生物相互缠绕、交织形成的结构。子实体是由气生菌丝体特化形成的，有一定形态的结构，在其里面或上面可产生孢子。

5、协同反馈抑制指分支代谢途径中的几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径的第一酶的反馈调节方式。而合作反馈抑制是指两种末端代谢产物同时存在时，可以起到比一种末端产物大得多的抑制作用。

6、定向培育是用某一特定的因素长期处理某微生物群体，同时不断地对它进行移种传代，以达到累积并选择相应自发突变株的目的。而诱变是指利用物理或化学诱变剂处理微生物群体，促进其突变率，从中挑选少数符合要求的突变株的育种方法。

7、真核生物是指其细胞具有细胞核，有核膜、核仁，有多条染色体，细胞质中有线粒体、高尔基体、内质网等细胞器，核糖体为80S；原核生物指其细胞没有真正意义的核，没有核膜、核仁，只有一条裸露的DNA，没有线粒体、高尔基体、内质网等细胞器，核糖体为70S。

8、把经紫外线照射后的微生物立即放在可见光下，可明显降低其死亡率的现象称光复活作用。经紫外线照射形成的胸腺嘧啶二聚体在黑暗下会被以种光复活酶结合，当这复合物暴露在可见光下，此酶会因获得能量而产生解离作用，将二聚体从新分解成单体。在活细胞中，还存在一种修复被紫外线等诱变剂损伤的DNA的机制。该修复作用与光无关。它涉及四种酶的参与。

9、野生型是从自然界分离到的任何微生物在其发生营养缺陷突变前的原始菌株。它能在相应的基本培养基上生长；营养缺陷型是野生型经诱变处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变形成的菌株。它只能在加入该酶合成产物的培养基中生长。10、有性杂交指性细胞间的接合和随之发生的染色体重组，并产生新遗传型后代的一种育种方法；准性杂交类似于有性杂交，但比它更原始。它可使同种生物两个不同菌株的体细胞发生融合，且不以减数分裂的方式而导致低频率的基因重组并产生重组子。

四问答题

1. 鉴别性培养基是在培养基中加入能与某菌的五色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能将其与其他外形相似的菌落区分。EMB培养基中大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+,故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，使菌落呈深紫色。从菌落表面反光还可看到绿色金属闪光。而产酸弱的菌株的菌落呈棕色。不发酵乳酸的菌落无色透明。

2. 首先，它是核酸营养缺陷型。可采用生长谱法，分别配制缺A、G、C、T和U其中一物的混合液，添加到该菌的基本培养基中，将该菌株分别接入到不同的培养基中，即可判断是哪种或哪几种核苷酸缺陷型。

3. 微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率。可简化装料、灭菌、出料和清洗发酵罐等单元操作，从而减少了非生产时间和提高设备利用率；便于自控。产品质量稳定。节约大量的人力、动力、水和蒸汽，且使水、汽、电的负荷均匀合理。恒浊法中的微生物以最高速度生长，生产中可获得大量菌体或与菌体生长相平行的代谢产物。恒化法可用于与生长速率相关的各种理论的研究。其缺点主要使菌种易退化，其次是易染菌，且染菌的危害会较大。这也是连续时间总是有限的根本原因。

4. 微生物的生命活动会引起环境pH 改变。它们将糖类发酵形成有机酸，将脂肪水解成有机酸，选择性吸收无机盐的正电部分，则会引起培养基pH下降；而蛋白质的脱羧反应形成胺类，选择性吸收无机盐的酸根，都会引起pH上升。

治标的方法是通过加酸或碱进行中和反应。治本的方法有，过酸时，加适量的氮源，提高发酵的通气量；过碱时，适当增加碳源，降低通气量。

98年研究生入学试卷

一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”）

1、大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。

2、大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。

3、当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。

4、初生F’菌株和次生F’菌株都属于部分二倍体。

5、分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。

6、渗透酶( permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。

7、恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。

8、将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则会出现TMV型病灶。若在感染前，用TMV抗体处理，则会钝化病毒，不出现TMV型病灶。

9、霉菌的基因重组常发生于准性生殖时，较少出现在有性生殖过程中。

10、营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。

二填充题（30分）

1 突变率10-10表示_ _ _ _ a_ _ _ 。

2 我们常采用_ _ a_ _ _ 浓度的NaCl 或0.1M_ _ _ b_ _ _ 来稀释菌液或清洗菌体细胞。因为_ _ c_ _ _ 。

3 在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_ _ _ _ a_ _ _ _ ；以无机氧化物为最终电子受体的称_ _ b_ _ ；以有机物为最终电子受体的称_ _ _ _ c_ _ _ _ 。

4 常见的菌种保藏方法有_ _ _ _ a_ _ _ _ 、_ _ _ b_ _ _ 和_ _ _ c_ _ _ 等，其中_ _ _ d_ _ 方法保藏菌种的时间最长久。

5 对细菌简单染色法的一般步骤是_ _ _ a_ _ _ 。常用的染料有_ _ b_ _ 和_ _ c_ _ _ 等。

6 在混合菌样中获得纯菌株的方法主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ b_ _ 等。

7 在微生物培养过程中，引起培养基pH值改变的原因主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 等。

8 实验室常用的有机氮源有_ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 等，无机氮源有_ _ c_ _ _ 和_ _ _ d_ _ 等。为节约成本，工厂中常用_ _ _ e_ _ _ _ 等做有机氮源。

9 霉菌细胞壁化学组成是a ；酵母菌细胞壁化学组成是b 和c 等；细菌细胞壁化学组成主要是d ；

10 在微生物学奠基时代（生理学期）公认的代表人物为_ _ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 。前者的主要业绩有_ _ c_ _ 等，后者的主要业绩有_ _ _ d_ _ _ 等。三简述下列概念的区别（15分）：

fed-batch culture ;continuous culture

colony ;cloning

complete medium ;minimal medium

species ;strain

COD ; BOD

四问答题（30分）

1、将色氨酸（T）营养缺陷型菌株与组氨酸（H）营养缺陷型菌株进行遗传重组后，在基本培养基上长出的菌落数8个，而在含T的基本培养基上能长出72个菌落，在含H的基本培养基上能长出68个菌落。如果互补的重组类型数相等，试计算T 与H间的重组频率。

2、为什么有些突变菌株对末端代谢产物的结构类似物具有抗性？试举例说明这些菌株对工业菌种选育的重要性。

3、何谓分解代谢物阻遏？在含乳糖和葡萄糖的培养基中，E.coli生长周期中会出现什么现象？请从操纵子模型来解释这现象。

4、用图示法表示酿酒酵母的生活史。

五推导题（15分）

在细胞的指数增长阶段细胞的传代时间tg可由下式计算：

式中：t为时间，xt为t时刻的细胞数，x0为初始细胞数

98答案

一是非题：每题1分

1 对

2 错

3 对

4 错

5 错

6 错

7 错

8 错

9 错10 错

二填充题（30分）

1a: 1010个细胞分裂成2×1010个细胞时，平均发生1次突变。

2 a：0.85%; 2b: 磷酸盐；3c：与细胞等渗，防止细胞损伤。

3a：有氧呼吸；3b：无氧呼吸；3c：发酵

4 a：斜面冰箱保藏法4b：冷冻干燥保藏法4c：石蜡油封藏法4d：冷冻干燥保藏法

5a：涂片、干燥、固定、染色、水洗、（镜检）5b：美蓝；5c：结晶紫。

6a：稀释涂布平板法；6b：划线平板法。

7a：F X174；7b：烟草花叶病毒。

8a：蛋白胨；8b：牛肉膏；8c：(NH4)2SO4；8d：Na2NO3; 8e：豆饼粉

9a:几丁质9b：甘露聚糖；9c：葡聚糖；9d：肽聚糖

10a：巴斯德；10b：柯赫；10c：巴斯德消毒法；10d：微生物纯培养法

三简述下列概念的区别：（每题5分）

1、连续培养是按特定的控制方式以一定的速度加入新鲜培养基和放出培养物的培养方法。其中微生物的生长速度稳定；补料分批培养是一种介于分批培养和连续培养之间的培养方式。它是在分批培养的过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。其中微生物的生长速度并不一定稳定。

2、菌落指单个细胞在有限空间中发展成肉眼可见的细胞堆。cloning指从同一祖先产生同一DNA（目的基因）分子群体或细胞群体的过程。或指将外源基因引入到宿主菌体内，并使其大量扩增的过程。

3、完全培养基是能满足一切营养缺陷型菌株营养要求的培养基。是天然或半合成的培养基。基本培养基仅能满足某野生型菌株生长需要的最低成分培养基。

4、是由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其后代。一种菌的每一不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。所以，属于同一菌种的菌株是无数的。菌种是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其相近、与同属内其实种有明显差异的菌株的总称。

5、化学耗氧量反映有机物进入水体后，在一般情况下氧化分解所需的氧量。反映水体总的污染程度。生物耗氧量水体中有机物经生物氧化至简单终产物是所需的氧量。反映水中有机物含量的间接指标。COD数值一般高于BOD。

四问答题（30 分）

2×8/（68+72）=11.4%

1、解除了末端代谢产物反馈抑制或和阻遏。A调节亚基发生变异。B操纵子的控制基因发生变异，产生的调节蛋白对类似物

不敏感。

2、结构类似物会与调节酶的调节亚基或和阻遏酶的原阻遏物结合，从而发生反馈抑制或和阻遏。结构类似物不能参与正常代谢，所以会使未突变细胞饥饿而死。而解除了反馈调节的菌株对结构类似物就具有“抗性”。以此为筛子可筛选到大量积累末端代谢产物的菌株。

3、分解代谢物阻遏指细胞内同时存在两种分解底物时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶的合成的现象。会出现二次生长现象。

二、单项选择题

1、下列细菌中，属于 Archaea一类的为( )

A Klebsiella pneumoniae

B Neurospora crassa

C Staphylococus aureus

D Methanobacterium

2、具有周生鞭毛的细菌如E.coli，在下列哪种情况下呈直线运动一段时间( )

A 朝着营养物质浓度高的地方，顺时针转动。

B 朝着营养物质浓度高的地方，逆时针转动。

C 朝着有毒物质方向，顺时针转动。

D 朝着有毒物质方向，逆时针转动。

3、某细菌悬液经100倍稀释后，在血球计数板上，计得平均每小格含菌数为7.5个，则每毫升原菌悬液的含菌数为( )

A 3.75×107个

B 2.35×107个

C 3.0×109个

D 3.2×109个

4、可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基为( )

A 完全培养基

B 基本培养基

C 补充培养基 D鉴别培养基

5、Saccharomyces cerevisiae最适生长pH值为( )

A 4.0-5.0

B 5.0-6.0

C 6.0-7.0

D 7.0-7.4

6、专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少（），从而不能解除分子氧对细胞的毒害。

A BOD

B COD

C NO

D D SOD

7、下列微生物中，哪一种能产生伴孢晶体( )

A Bacillus subitis

B Bacillus magaterium

C Bacillus thuringiensis

D Clostridium botulinum

8、下列微生物中，具有周生鞭毛的是( )

A Vibrio cholerae

B Bacillus subitis

C Staphylococcus aureus

D Spirillum rubrum

9、革兰氏染色的关键操作步骤是( )

A 初染

B 媒染

C 脱色

D 复染

10、Zymomonas mobiles 的同型酒精发酵通过下列哪个途径进行( )

A EMP途径

B ED途径

C HMP途径

D Sticland反应

11、细菌的O抗原即( )

A 鞭毛抗原

B 表面抗原

C 菌体抗原

D 菌毛抗原

12、在下列微生物中，哪一种能进行产氧的光合作用( )

A Anabaena

B Nocardia

C Azotobacter

D Rhodospirillum

13、下列能产子囊孢子的霉菌是 ( )

A Mucor和Rhizopus

B Aspergillus和Penicillium

C Neurospora和Gibberella

D Achlya和Agaricus

14、Adenovirus的基因组由( )组成。

A dsRNA

B ssRNA

C ssDNA

D dsDNA

15、直接显微镜计数用来测定下列所有微生物群体的数目，除了( )之外。

A 原生动物

B 真菌孢子

C 细菌

D 病毒

16、深层穿刺接种细菌到试管固体培养基中( )

A 增加氧气

B 提供厌氧条件

C 除去代谢废物

D 增加营养物质

17、微生物在稳定生长期( )

A 细胞分裂速率增加

B 细胞分裂速率降低

C 群体生长最旺盛

D 是用作代谢、生理研究的好材料。

18、某些微生物光合作用从叶绿素分子丢失的电子复原于( )

A ATP分子

B 细胞色素分子

C 水分子

D 含氮碱基分子

19、细菌转化过程不需要( )

A 受体细胞处于感受态

B 裂解的供体细胞

C 病毒

D 一系列酶

20、在沼气发酵中，S菌株与MOH菌株间的关系为( )

A 共生

B 寄生

C 互生

D 拮抗

三、问答题

1、试论述微生物和生物工程之间的关系。

2、试从能源、碳源的角度来比较Anabaena、Rhodospirillum、Nitrobacter、E.coli四种微生物的营养类型。

3、在赖氨酸的发酵中，如何应用营养缺陷型突变菌株解除正常的反馈调节。

4、试述用Ames法检测致癌剂的理论依据和方法概要。

5、试设计一个从土壤中分离能分解并利用苯酚的细菌纯培养物的实验方案。

6、某同学在实验室因操作不慎，所保藏的Bacillus subitis和Lentinus edodes菌种被E.coli污染了，请问他应该如何将这两种菌种纯化？

7、微生物在自然界氮素循环中起着哪些作用？

8、好氧菌的固氮酶避氧害机制有哪些？

9、某发酵工厂的生产菌株疑为溶源菌，试设计一个鉴定该菌株是否为溶源菌的实验方案。

10、芽孢在微生物学的研究上有何意义？试用渗透调节皮层膨胀学说解释芽孢耐热机制。

11、微生物培养过程中pH值变化的规律如何？如何调整？

12、控制有害微生物生长有哪些方法，写出利用热力灭菌时的灭菌条件。

13、试绘图说明单细胞微生物的生长曲线，并指明第三个时期的特点，及如何利用微生物的生长规律来指导工业生产？

14、某水厂供应的自来水，消费者怀疑其大肠杆菌数和细菌总菌数超标，请问如何检测？

15、试以G+细菌Streptococcus pneumoniae为例，说明转化过程。

16、在筛选营养缺陷型时，抗生素法为何能浓缩营养缺陷型突变株？

17、何谓基因工程？阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中，如何筛选含有目的基因的宿主细菌？

18、试设计一个从土壤中分离高效防治水稻白叶枯病的抗生菌纯培养物的方案。

19、在培养E.coli时，培养基中同时加入葡萄糖和乳糖两种碳源，请问该菌的生长表现出一种什么样的形式？为什么？请从基因表达的水平加以解释。

20、何为抗体？简述免疫球蛋白的基本结构。

21、根据F质粒在细胞内的存在方式不同，E.coli的接合型菌株有哪些类型？图示它们相互之间的联系。

22、大肠杆菌在37℃的牛奶中每12.5分钟繁殖一代，假设牛奶消毒后，大肠杆菌的含量为1个/100ml，请问按国家标准（30000个／ml），该消毒牛奶在37℃下最多可存放多少时间(分钟)？

23、测定微生物的生长有哪些方法？各有何优缺点？

24、试述诱变育种的方法步骤和注意事项。

25、yeast类微生物的繁殖方式有哪些类型？图示Saccharomyces cerevisiae的生活史。

26、什么叫呼吸和呼吸链？呼吸链由哪些组成？

27、扼要说明酵母菌一型、二型和三型发酵，并指出它们的最终产物各是什么？

28、16SrRNA被认为是一把好的谱系分析“分子尺”，其主要依据是什么？

29、Hfr×F-和F+×F-杂交得到的接合子都有性菌毛产生吗？为什么？

30、有哪些试验方法可以证明某一细菌存在鞭毛？

31、控制微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些？

参考答案

一、名词解释

1、菌株(strain)：又称品系，在非细胞型的病毒中则称毒株或株，是单个细胞或单个病毒粒在人工培养基上繁殖而来的纯遗传型群体及其一切后代。

2、饰变(modification)：指外表的修饰性改变，意即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的变化。

3、原生型(prototroph)：一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上与野生型相同。

4、深层液体培养：将菌种培养在发酵罐或圆锥瓶内，通过不断通气搅拌或振荡，使菌体在液体深层处繁育的方法。

5、类毒素(toxoid)：用0.3-0.4%甲醛溶液对外毒素进行脱毒处理，获得的失去毒性但仍保留其原有免疫性(抗原性)的生物制品。

6、特异性免疫(specific immuneity)：也称获得性免疫或适应性免疫，是相对于非获得性免疫而言的，其主要功能是识别非自身和自身的抗原物质，并对它产生免疫应答，从而保证机体内环境的稳定状态。

7、芽孢(spore)：细菌在生长发育后期在细胞内形成的一种厚壁的抗逆性的休眠体。

8、鞭毛(flagella)：生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物，称为鞭毛，其数目为一至数十条，

具有运动功能。

9、抗生素(antibiotics)：是一类由微生物或其它生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或干扰它种生物的生命活动。

10、支原体(mycoplasma)：是一类无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小原核生物。

11、菌核(scleraotium)：在不良外界条件下，菌丝相互紧密缠结在一起形成的坚硬、能抵抗不良环境的块状、头状的休眠体。

12、噬菌斑(plaque)：当寄主细胞被噬菌体感染后细胞裂解，在菌苔上出现的一些无色透明空斑（负菌落）。

13、温和噬菌体(temperate phage)：凡吸附并侵入细胞后。噬菌体的DNA只整合在宿主的染色体上，并可长期随寄主DNA的复制而进行同步复制，不进行增殖和引起寄主细胞裂解的噬菌体，称为温和噬菌体。

14、局限转导(specialized transduction)：通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因整合、重组，形成转导子的现象。

15、选择性培养基(seclected media)：一类根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选领域。

16、反硝化作用(denitrification)：在无氧条件下，某些兼性厌氧微生物利用硝酸盐作为呼吸链的最终氢受体，把它还原成亚硝酸、NO、N2O直至N2的过程，称为异化型硝酸盐还原作用，又称硝酸盐呼吸或反硝化作用。

17、石炭酸系数(phenol coefficient)：指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释与达到同样效果的石炭酸的最高稀释度的比例。一般规定处理时间为十分钟。

18、富营养化(eutrophication)：是指水体中因氮、磷等元素含量过高而引起水体表层的蓝细菌和藻类过度生长繁殖的现象。

19、条件致死突变型(conditional lethal mutant)：某菌株或病毒经基因突变后，在某种条件下可正常地生长、繁殖并呈现其固有的表型，而在另一种条件下却无法生长、繁殖，这种突变类型称为条件致死突变型。20、细菌素(bacteriocin)：某些细菌产生的能抑制或杀死其他近缘细菌或同种不同菌株的代谢产物，是一种由质粒编码的蛋白质，不像抗生素那样具有很广的抗菌谱。

21、初次应答：指用适量抗原给动物免疫，当抗原初步进入机体后需经一定的替伏期才能在血清中出现抗体，维持时间短，其产生的免疫球蛋白是IgM。

22、再次应答：指对抗原发生初次应答时，当相同的抗原再次进入机体，发现产生抗体的潜伏期明显缩短，且抗体维持时间长的特异性应答。

二、选择

1、D

2、B

3、C

4、A

5、B

6、D

7、C

8、B

9、C 10、B

11、C 12、A 13、C 14、D 15、D 16、B 17、B 18、C 19、C 20、A

三、问答题

1、答：生物工程包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程四大领域。其中，前两者的作用是将常规菌或动植物细胞株作为特定遗传物质的受体，使它们获得外来基因，成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”，后两者的作用则是为这一新物种提供良好的生长、繁殖条件，进行大规模的培养，为人们提供巨大的经济效益和社会效益。在基因工程中，微生物可提供①基因的供体和受体。②产生各种工具酶③基因的载体是病毒、噬菌体、质粒；在细胞工程中，正是由于微生物学独特的实验技术如显微技术、无菌操作技术、消毒灭菌技术、纯种分离和克隆化技术、深层液体发酵技术、原生质体制备和融合技术以及各种DNA 重组技术向生命科学的其它领域渗透才产生了细胞工程；在发酵工程中，发酵的主体是微生物；在酶工程中，所用的酶大多数是由微生物所产生的。因此，微生物是生物工程的基础，有着突出的不可替代的地位。

2、答：鱼腥蓝细菌属Anabaena属于光能自养型微生物，它的能源是光，氢供体是无机物，基本碳源是CO2，红螺菌属Rhodospirillum 属于光能异养型微生物，它的能源是光，氢供体是有机物，碳源为CO2和简单的有机物；硝化细菌属Nitrobacter属于化能自养型微生物，它依靠氧化NH4、NO2等无机物获得能量，氢供体为还原态无机物，碳源为CO2；大肠杆菌E.coli属于化能异养型微生物，它依靠氧化有机物获得能量，氢供体为有机物，碳源也是有机物如葡萄糖等。

3、答：在许多微生物中，可用天冬氨酸作原料，通过分支代谢途径合成出赖氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸。但在代谢过程中，一方面由于赖氨酸对天冬氨酸激酶有反馈抑制作用，另一方面，由于天冬氨酸除用于合成赖氨酸外，还要作为合成甲硫氨酸和苏氨酸的原料，因此，在正常细胞内，就很难累积较高浓度的赖氨酸。工业上利用谷氨酸棒杆菌的高丝氨酸缺陷型菌株作为赖氨酸的发酵菌种。由于它不能合成苏氨酸脱氢酶，故不能合成高丝氨酸，也不能产生苏氨酸和甲硫氨酸，在补以适量高丝氨酸的条件下，可在较高糖浓度和铵盐的培养基上，产生大量的赖氨酸。

4、答：1)Ames试验是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变株来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的方法。

其原理是：鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变变成原养型后则能生长。

2)方法大致是在含有可疑化学致癌剂的试样中加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于基本培养基平板中央。经培养后，出现3种情况：1)在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含致癌剂；2)在纸片周围有一抑制圈，其外周有大量菌落，说明试样中有较高浓度致癌剂存在；3)在纸片周围有大量菌落，说明试样中有适量致癌剂存在。

5、答：1)查资料，找出检测苯酚的标准测定方法。2)采样，在被苯酚污染的土壤中取土。3)富集培养，将采到的土样进行驯化，不断提高苯酚的浓度，使苯酚降解菌在数量上占优势。4)取适量富集后的菌液在以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐培养基中培养，设对照，生长后测富集液中苯酚的浓度，观察降解效果。5)纯种分离和性能测定，将富集后的菌液稀释涂布，挑取单菌落，在以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐培养基中培养，测定降解效果，从中选出高效降解菌。

6、答：Bacillus subitis的纯化1)制备无菌水和牛肉膏蛋白胨培养基平板，将菌苔刮下，用无菌水制成菌悬液；2)将菌悬液置于100℃沸水浴中，保温5分钟；3)将保温后的菌悬液按倍比稀释，使每ml稀释菌悬液中含菌约200-300个，吸取0.1ml稀释菌悬液涂平板，置于30℃下培养2天；4)待平板上长出菌落后，挑取表面干燥的菌落，镜检并革兰氏染色鉴定该菌落为Bacillus subitis菌；5)挑出该单菌落，进一步采用平板划线分离纯化。

Lentinus edodes的纯化：将菌丝连同培养基一起挖出，制备PDA平板，在平板中央放置一个已灭菌的牛津杯或空心玻璃管，在牛津杯或空心玻璃管中央接种，待菌丝长出后，切取菌丝尖端纯化，转管。或配制Martin 培养基，加入链霉素，配成30μg/mL浓度，接种后取单菌落转管。

7、答：图解如下：

1)生物固氮：常温常压下，固氮生物通过体内固氮酶的催化作用，将大气中游离的分子态N2还原为NH3的过程。

2)硝化作用：土壤中由氨化作用生成的NH3，经硝化细菌氧化生成亚硝酸、硝酸的过程。

3)同化型硝酸盐还原作用：以硝酸盐作营养，合成氨基酸、蛋白质和核酸等含氮物的过程。

4)氨化作用：含氮有机物通过各类微生物分解、转化成氨的过程。

5) 反硝化作用：微生物还原NO3－产生气态N2的过程。即硝酸盐的异化还原。

8、答：(1)好气性的固氮菌通过呼吸作用和构象保护来实现。(2)蓝细菌的固氮场所在异形胞，不含光合系统Ⅱ，不产O2；异形胞的外膜起到阻止O2进入的作用；异形胞内氢酶活跃，使异形胞能维持很高的还原状态。

(3)根瘤菌和高等植物形成共生体系，根瘤菌处于泡膜内，有阻止O2进入的作用；木栓层和细胞间隙有阻碍作用；根瘤内的豆血红蛋白可以为根瘤菌提供高流量、低浓度的O2。

9、答：将供试菌株制成菌悬液，置于低剂量紫外线下照射处理后，与营养琼脂培养基混匀后倒平板，经培养后观察平板上长出的菌落情况，由于溶源菌细胞内的前噬菌体经低剂量紫外线下照射处理后，会转变成裂性噬菌体，进入裂解性循环，使细胞破裂，即诱发裂解，这时便会在菌苔上形成噬菌斑。如果出现噬菌斑，则证明该菌株为溶源菌。

10、答：1)研究细菌的芽孢有重要的理论和实践意义。芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要形态学指标。在实践上，芽孢的存在有利于提高菌种的筛选效率，有利于菌种的长期保藏，有利于对各种消毒、杀菌措施的优劣的判断等等，当然芽孢的存在也增加了医疗器械使用上以及食品生产、传染病防治和发酵生产中的各种困难。2) 渗透调节皮层膨胀学说认为：芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差，而皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核心的水分，结果造成皮层的充分膨胀，核心部分的细胞质却变得高度失水，正是由于这种失水的核心造成了芽孢具有极强的耐热性。

11、答：1)在微生物的培养过程中，培养基中的糖类、脂肪等有机物经微生物分解，氧化成有机酸，使pH值下降，蛋白质脱羧成胺类而使pH值上升。硫酸铵等无机盐在微生物代谢过程中由于铵离子被选择吸收，留下硫酸根而使pH值下降，硝酸钠等无机盐在微生物代谢过程中由于硝酸根离子被选择吸收，留下钠离子而使pH 值上升。在一般培养过程中，随着培养时间的延长，pH值会下降，在碳氮比高的培养基中尤为明显。2)调节措施：治标：中和反应，加NaOH、HCl等；治本：过酸时，加适当氮源，，提高通气量；过碱时，加适当碳源，

降低通气量。

12、答：包括灭菌、消毒、防腐和化疗。灭菌和消毒的方法有物理因素灭菌，包括紫外线、可见光、辐射、高温、过滤等；化学因素有使用有机化合物如醇类、酸类、醛类、表面活性剂，无机物如重金属、卤化物、氧化剂，染色剂如结晶紫以及其它化学治疗剂如抗生素等。

干热灭菌：烘箱内热空气灭菌（160℃，2小时）或火焰灼烧干热灭菌。

湿热灭菌法：巴氏消毒法：60—85℃15秒至30分钟；煮沸消毒法：100℃，数分钟；间歇灭菌法：100℃灭菌8小时，搁置过夜，再100℃灭菌8小时；常规加压蒸汽灭菌法：121℃，半小时；连续加压蒸汽灭菌法：135℃—140℃，5—15秒。

13、答：⑴生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期四个时期。

⑵稳定期的特点是细胞死亡数与增长数平衡，积累、合成代谢产物，菌体产量最高。

(3)生产上常需要缩短延滞期，延长稳定期。缩短延滞期措施：a以对数期种龄菌种接种。b增大接种量。c营养条件适宜。d通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短；延长稳定期措施：生产上常通过补充营养物质（补料）或取走代谢产物、调节pH、调节温度、对好氧菌增加通气、搅拌或振荡等措施延长稳定生长期。

14、答：1)制备伊红美蓝琼脂培养基(EMB)和牛肉膏蛋白胨培养基，分别倒平板；将滤膜(醋酸纤维薄膜)制成圆片，取1000ml自来水，无菌条件下过滤；将滤膜取下，贴在EMB平板，37℃下培养48小时后，观察并计菌落数。如果发现在透射光下呈紫色，反射光下呈绿色金属闪光的菌落有3 个或3 个以上，则该自来水大肠杆菌数超标。

2)另用无菌移液管吸取1 ml自来水，涂布于牛肉膏蛋白胨平板上，37℃下培养24小时后，观察并计菌落数。如果菌落数超过100个，则该自来水细菌总数超标。

15、答：肺炎链球菌Streptococcus pneumoniae转化过程如下：1)供体菌(strR即存在抗链霉素的基因标记)的dsDNA片段与感受态受体菌(strS有链霉素敏感型基因标记)细胞表面的膜连DNA结合蛋白相结合，其中一条链被核酸酶水解，另一条进入细胞；2)来自供体菌的ssDNA片段被细胞内的特异性蛋白RecA结合，并使其与受体菌核染色体上的同源区段配对、重组，形成一小段杂合DNA区段；3)受体菌染色体开始进行复制，于是杂合区也跟着得到复制；4)细胞分裂后，形成一个转化子strR和一个仍保持受体菌原来基因型strS的后代。

16、答：在这一方法中提到的所谓“浓缩”营养缺陷型突变株，裨是淘汰野生型，剩下营养缺陷型，因而，在一个群体的营养缺陷型突变株的比例明显提高。在培养环境中加抗生素为何能“浓缩”营养缺陷型突变株？这是因为一般抗生素的作用机制是抑制正在生长的生物细胞的某一或几步生物合成反应，致使细胞生长繁殖必需的细胞组成成分与相应功能缺失，最终导致细胞死亡或丧损生长繁殖能力。只有野生型菌株才能在基本培养基上生长，一旦生长，即被加入培养基中的抗生素“击中”，而营养缺陷型突变株由于在基本培养基中不能生长，因而，抗生素对这不起作用。最终通过终止法或稀释法消除抗生素的作用后，把有限的幸存的营养缺陷型突变株置于完全培养基中培养扩增，从而达到“浓缩”的目的。

17、答：基因工程是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计操纵改造和重建细胞的遗传核心——基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得，载体系统的选择，目的基因与载体重组体的构建，重组载体导入受体细胞，工程菌株的表达和检测等。

大肠杆菌的pBR322质粒上有两个抗药性标记，即氨苄青霉素抗性和四环素抗性标记，限制酶BamHⅠ在该质粒上的插入点在四环素抗性基因上，当外源DNA片段插入后会引起四环素抗性基因失活。制备四环素平板、氨苄青霉素平板，将已转化的宿主细胞涂布，若在四环素平板上不能生长，在氨苄青霉素平板上能生长，则证明该菌已含有目的基因；若在两种平板上都能生长，则该菌不含目的基因。

18、答：水稻白叶枯病的病原菌是一种革兰氏阴性杆菌，其抗生菌多为放线菌。操作步骤：1)在已患病的植株上分离水稻白叶枯病原菌。2)取土样，制备含玻璃珠无菌水，将土样制成菌悬液。3)制备高氏一号平板，将土壤悬液作连续稀释至10-3，吸取1ml菌悬液涂平板。待菌落长出后纯化备用。4)制备牛肉膏蛋白胨培养基，与水稻白叶枯病菌混匀后倒平板。5)在上述平板上点接已纯化的放线菌，37℃培养48小时，观察有无抑菌圈，并比较抑菌圈大小。6)取抑菌圈较大的菌株进一步作拮抗试验，进行复筛。

19、答：1)该菌的生长曲线表现为二次生长曲线。在培养液中同时存在两种均能为微生物利用的主要营养物时，微生物将首先利用较易利用的营养物，进入稳定期后再利用第二营养物，再次开始新的对数期、稳定期，从而表现出二阶式的双峰生长曲线。对于大肠杆菌来说，葡萄糖代谢酶类总是不断合成，而乳糖代谢酶则只有当代谢底物存在时才会合成。

2)大肠杆菌的乳糖操纵子依次是启动子P、操纵基因lacO以及三个结构基因：lacZ基因，编码β-半乳糖苷酶，催化乳糖分解为葡萄糖和半乳糖；lacY编码透性酶，将乳糖转动到细胞内；lacA基因编码转乙酰酶。在启动子上游有调节基因i。调节基因在细胞中被不断转录出mRNA，并翻译成阻遏蛋白。当培养基中存在葡萄糖时，阻遏蛋白结合在lacO上，这时lacZYA的转录被阻止。当培养基中无葡萄糖而有乳糖时，扩散到细胞内的少量乳糖可同阻遏蛋白结合，使之改变构型，于是不能再同lacO结合，这时阻遏状态解除，lacZYA得以转录，大肠杆菌开始利用乳糖，这一现象称为葡萄糖效应。

20、答：抗体是指机体在抗原物质刺激下所形成的一类与抗原特异性结合的血清活性成分，又称免疫球蛋白。免疫球蛋白(Ig)分子是由两两对称的四条多肽链借二硫键和非共价键连接而成。其中两条长的多肽链称为重链H，短的两条多肽链称为轻链L，重链与轻链，重链与重链之间均由二硫键相连，组成的Ig单体分子通式写作H2L2。Ig每条肽链的基本结构是由约100个氨基酸长的肽段经β折叠由链内二硫键拉近连成的环状构型，称为功能区。轻链由二个功能区组成，N端区其序列多变称为可变区VL，C端区序列保守称为稳定区CL。重链由一个N端V区和3-4个C端稳定区组成。轻链的V区和重链的V区共同组成了抗体的抗原结合部位，一个Ig 单体有两个抗原结合部位，称为两价。

21、答：共有4种：a）F-菌株：不含F因子，没有性菌毛，但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株（F+）； b）F+菌株：F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 c）Hfr菌株：F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。d）F′菌株：Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F′因子，细胞表面同样有性菌毛。其相互联系如图。

22、解：设每100ml初始菌数为N0＝1，经过t时间后菌数为Nt=3╳106，代时G=12.5分钟

Nt= N0╳2n，两边取对数后则lg Nt= lg N0+n╳lg2

繁殖代数n=( lg Nt–lg N0)/ lg2=3.322╳(6+0.47-0)=21.49代

保藏时间t = G╳n=21.49╳12.5≈274分钟

答：最多可保持274分钟。

23：答：常用测定微生物生长的方法有：1)称干重法。可用离心法或过滤法测定。优点：可适用于一切微生物，缺点：无法区别死菌和活菌。2)比浊法。原理：由于微生物在液体培养时，原生质的增加导致混浊度的增加，可用分光光度计测定。优点：比较准确。3)测含氮量，大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致，根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量。4)血球计数板法。优点：简便、快速、直观。缺点：结果包括死菌和活菌。5)液体稀释法。对未知菌样作连续的10倍系列稀释，经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查MPN表，再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量。优点：可计算活菌数，较准确。缺点：比较繁琐。6)平板菌落计数法。取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基，经培养后计算原菌液的含菌数。优点，可以获得活菌的信息。缺点：操作繁琐，需要培养一定时间才能获得，测定结果受多种因素的影响。

24：答：诱变育种的一般程序如下：出发菌株----菌种纯化(出发菌株性能测定)----制备斜面孢子----制备单孢子悬液(悬液进行活菌计数)----诱变剂处理(存活菌数的测定并计算存活率)----平板分离(测定变异

率)----挑取变异菌落并移植至斜面上----初筛(初筛数据分析，生产性状的粗测)----斜面传代----复筛(复筛数据分析，精确测定生产性状)----变异菌株(菌株参数分析)----小型或中型投产试验----大型投产试验。

诱变育种应把握的主要原则有以下几点：1)选择简便有效的诱变剂。在选用理化因素作诱变剂时，在同样效果下，应选用最简便的因素；在同样简便的条件下，应选用最高效的因素。2)挑选优良的出发菌株。最好采用生产上已发生自变的菌株，选用对诱变剂敏感的菌株，选取有利于进一步研究或应用性状的菌株。4)处理单细胞或孢子悬液。单细胞悬液应均匀而分散，孢子、芽孢等应稍加萌发。5)选用合适的诱变剂量。一般正变较多出现在低剂量中，负变较多地出现在高剂量中。6)选用高效的筛选方法。

25、答：包括无性繁殖和有性繁殖两大类：1)无性繁殖：芽殖：主要的无性繁殖方式，成熟细胞长出一个小芽，到一定程度后脱离母体继续长成新个体；裂殖：少数酵母菌可以象细菌一样借细胞横割分裂而繁殖，例如裂殖酵母(Schizosaccharomyces)。产无性孢子：产节孢子：如地霉属(Geotricum)等，产掷孢子如掷孢酵母属(Sporobolomyces)等；产厚垣孢子如白假丝酵母(Candida albicans)等。2)有性繁殖：酵母菌以形成子囊和子囊孢子的形式进行有性繁殖。

Saccharomyces cerevisiae的生活史如右图所示。

26、答：呼吸是一种最普遍和最重要的生物氧化方式，其特点是底物按常规方式脱氢后，质子经完整的呼吸链传递，有氧条件下以分子氧作质子的最终受体产生水和释放能量ATP，或无氧条件下以含氧化合物作质子的最终受体形成还原性化合物、水和释放能量。

呼吸链是指位于原核生物细胞膜上或真核生物线粒体膜上的由一系列氧化还原势不同的氢传递体或电子传递

体组成的一组链状传递顺序，它能把氢或电子从低氧化还原势的化合物传递给高氧化还原势的分子氧或其他无

机、有机氧化物，并使它们还原。在氢或电子的传递过程中，通过与氧化磷酸化反应发生偶联就可产生ATP形式的能量。呼吸链的酶系是定向有序的，又是不对称地排列在真核微生物的线粒体内膜上，或排列在原核微生物的细胞质膜上。

以下几种组成呼吸链的氢或电子载体最为重要：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）；黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）和黄素单核苷酸（FMN）；铁硫蛋白（FeS）；泛醌（辅酶Q）；细胞色素系统。

27、答：一型发酵：酵母菌在乙醇发酵中，将葡萄糖经EMP途径降解为两分子丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙醛，乙醛作为氢受体最后生成乙醇的过程。

其最终产物是乙醇。

二型发酵：当环境中存在亚硫酸氢钠时，它先与乙醛反应生成难溶的磺化羟基乙醛，迫使磷酸二羟丙酮代替乙醛作为受氢体，生成α—磷酸甘油，最后生成甘油的过程。其最终产物是甘油三型发酵：在弱碱性条件下（PH7.6），乙醛因得不到足够的氢而积累，两个乙醛分子间会发生歧化反应，一分子乙醛被还原成乙醇，另一分子被氧化为乙酸，且需磷酸二羟丙酮担任氢受体，生成甘油的过程。

其最终产物是甘油、乙醇、乙酸

28、答：其依据是：

1）rRNA具有重要且恒定的生理功能；

2）在16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域

3）16SrRNA分子量大小适中，便于序列分析；

4）rRNA在细胞中含量大(约占细胞中RNA的90%)，也易于提取；

5）16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中(真核生物中其同源分子是18SrRNA)。

因此它可以作为测量各类生物进化的工具。

29、答：不一定。因为F- 菌株不含有F质粒（或致育因子），故F- 菌株没有性菌毛；而F+菌株是长有性菌毛，当F+ ×F-杂交时，其得到的接合子都是呈F+菌株，故都有性菌毛，但当Hfr × F-杂交时，F因子的先导区(leading region)结合着染色体DNA向受体细胞转移，F因子除先导区以外，其余绝大部分是处于转移染色体的末端，由于转移过程常被中断，因此F因子不易转入受体细胞中，故Hfr×F-杂交后的受体细胞(或接合子)大多数仍然是F-。即当F因子全部导入的接合子才有性菌毛产生。

30、答：1）水浸片或悬滴标本，在显微镜暗视野中观察；

2）用半固体穿刺接种培养观察；

3）可直接用鞭毛染色法染色后在显微镜下直接观察；

4）电子显微镜直接观察。

31、答：（1）灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失繁殖能力的措施，称为灭菌，例如各种高温灭菌措施等。

（2）消毒：指采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。

（3）防腐：利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。其主要措施有：①低温。利用4℃以下低温可以保藏食物、药品。②缺氧。采用在密闭的容器中加入除氧剂来有效地防止食品和粮食等的霉腐、变质，达到保鲜的目的。③干燥。采用晒干或红外线干燥等方法对粮食、食品等进行干燥保藏是最常见的防止霉腐的方法。④高渗。通过盐腌和糖渍等高渗措施来保存各种食物的防腐方法。

⑤高酸度。用高酸度也可达到防腐的目的。⑥防腐剂。在有些食品、调味品、饮料或器材中，可以加入适量的防腐剂以达到防霉腐的目的。