文档库

最新最全的文档下载
当前位置:文档库 > 关于CK与CKMB

关于CK与CKMB

对于CK和CKMB检测的简单认识

肌酸激酶(CK)广泛分布于体内需要大量能量供应的组织内,如心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要的能量调节酶,它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。CK有M和B两个亚基组成,并以此分为三个最基本的同工酶:肌肉型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型(CK-MB),另外还存在线粒体型(CK-MiMi)。CK-MM与CK-MB主要存在于肌肉组织中,骨骼肌中(除外腓肠肌)98%-99%为CK-MM,1%-2%为CK-MB。心肌中主要也是CK-MM,但CK-MB占到15%~25%.。CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道、子宫平滑肌中,脑组织中几乎全为CK-BB。在正常血清中,主要为CK-MM和少量的CK-MB,几乎不见CK-BB。

CK与CK-MB在临床运用中价值最大的就是诊断急性心肌梗死,在AMI发生后4~6小时即可出现增高,24小时达峰,48~72小时回复正常,若未回复,表明梗死持续发展,两者结合使用即可用于AMI的较早期诊断,还可用于评估梗死范围或判断再梗死,以及观察再灌注的效果(冲洗现象)。临床应用中除测定CK和CK-MB的活性外,还注意CK-MB占总CK的比值,在两者增高的情况下,该比值在4%~25%时,则AMI可能大。CK增高还可见于进行性肌营养不良、横纹肌溶解症、剧烈活动后、脑血管意外、呼吸道感染、病毒性腹泻等,特别是呼吸道感染、病毒性腹泻等疾病时,CK-MB也常增高。我室所采用测试方法的参考范围为CK<190u/l(男)、<167u/l(女),CK-MB 0~24u/l。

在临床生物化学实验室内,CK测试大多采用DGKC法,ADP和肌酸磷酸在CK催化下,生成ATP 与肌酸,ATP在己糖激酶的催化下,生成葡萄糖-6-磷酸,该物质在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的催化下与NADP+反应生成NADPH,NADPH在340nm处有特异吸收峰,通过测定NADPH的生成速率来计算CK 的活性。而对于CK-MB则是事先用抗人CK-MM抗体封闭M亚基,再测定B亚基的活性,其结果乘以2就是CK-MB的活性。

鉴于方法学的原因,CK-MB会出现假阳性,甚至于CK-MB活性超过总CK活性,这在理论上是不应该的。归纳原因,抛除试剂失效、定标失败等质量控制原因和偶然误差,可见于1:血清中存在多量CK-BB,如颅脑损伤时,CK-BB中B亚基的活性同CK-MB中B亚基活性累加并被乘以2,其干扰被放大两倍,造成CK-MB检测假性增高,但其数值绝不可能大于2倍的总CK活性。2:血清中存在巨CK,其M亚基不能被抗人CK-MM抗体封闭,其活性累加于B亚基,造成CK-MB假性增高。见于恶性肿瘤、肝硬化等。同样其数值绝不可能大于2倍的总CK活性。3:见于一些O型或B型血的癌症患者,原因可能是其免疫系统紊乱,其中的一些免疫球蛋白充当辅酶的作用。4:溶血因素,这是一个非常普遍的问题,红细胞中含有大量的腺甘酸激酶,催化ADP生成ATP,从而对CK和CK-MB产生正干扰,但是由于CK-MB的参考范围较CK狭窄,并且在CK-MB的检测中,干扰被放大2倍,因此溶血对CK-MB的影响远显著于对CK的影响,但CK-MB测定值绝不可能大于CK测定值的2倍。5:严重的脂血因为其增加漫反射,使透光度减低,对所有的以比色法为基础的实验都会产生影响,即便是速率法也难以摒除干扰。6:CK过高,不能完全被抗人CK-MM抗体封闭,从而造成CK-MB测定值高于其真值。因此当出现CK-MB活性/总CK活性>25%,应当考虑干扰的存在。

另外上文所述无论CK-MB绝对活性增高还是百分CK-MB界限值对于诊断心肌梗死、心肌病均不适用于14岁以下病员,因为婴幼儿和儿童的CK-MB活性均高于成人,有文献报道,3岁及以下小儿CK-MB参考范围为9.5~36.5u/l,4至14岁儿童参考范围为7.1~28.9u/l。

传统的CK和CK-MB活性作为经典的心肌损伤标志物因为其对6小时内AMI和心肌微小损伤敏感性差以及特异性差或干扰因素多,已经越来越多的被心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌红蛋白(Mb)、CK-MB质量所替代,Mb在AMI发生后2小时内即出现升高,是最早出现的心肌损伤标志物,在胸疼发作2~12小时内,若Mb阴性可排除AMI。而cTnI则具有无与伦比的敏感性和特异性,可检出微小的心肌损伤,具有较强的预测能力。

检验科骆文军