临床微生物实验室细菌鉴定指南汇总

临床微生物实验室细菌鉴定指南(续)

温州医学院附属第一医院实验诊断中心

潘钦石

一．细菌的鉴定步骤

1．鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进

行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。

2．对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。（我们这里一般都是预先纯化培养）3．对待鉴定的菌种进行革兰染色，观察形态（G+c，G–b，G–c，G+b），做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经

设计好，参考鉴定质控单。

4．按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。

5．复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。

⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。

首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染

料的通透性）。

第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ）

第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ）

第三步：用95%乙醇脱色（染色液Ⅲ）

第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）

⑵．触酶实验(H2O2实验)：

a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继

而形成氧分子出现气泡。

b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%

过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进

行实验。

c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃

冰箱保存。

d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，

链球菌属阴性。临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属

（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。

⑶．氧化酶实验（Kovac实验）：

a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸

酶。酶并不直接与试剂（1%盐酸四甲基对苯二胺）起反应，而是

首先使细胞色素c氧化，然后氧化型细胞色素c使对苯二胺氧化，

出现深兰色反应。

b. 方法（滤纸法，菌落法，试剂纸片法）：

一般我们采用滤纸法，取白色洁净滤纸条，沾取菌落少许，加试剂

一滴，阳性者立即呈粉红色，继而出现深兰色。结果读取在10秒

钟时为最佳，60秒内读取可靠。本实验避免接触含铁物质（假阳

性），也不能在含糖培养基上生长的菌落进行实验（假阴性）。

c. 阳性对照用铜绿假单胞菌，阴性对照用大肠埃希菌。

d. 应用：奈瑟氏属的菌种均阳性，也用于区别假单胞菌属和肠杆菌，

前者阳性，后者阴性。

二．葡萄球菌属的鉴定

葡萄球菌属主要的种有金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，腐生葡萄球菌。1．形态与染色：葡萄球菌直径0.5～1.5μm，菌体圆形，呈单个，成双以及不

规簇状排列。染色呈紫色，为革兰阳性球菌。

2．与链球菌的区别：触酶实验为阳性，而链球菌阴性；菌体形态链球菌小于葡萄球菌，呈成双和链状排列的卵圆形的革兰阳性球菌。

3．与微球菌的区别：触酶实验同为阳性，但微球菌的菌体呈四联状，要大于葡萄球菌，微球菌葡萄糖氧化发酵实验（操作方法同甘露醇OF试验）为氧化型；而葡萄球菌为发酵型。另外呋喃唑酮（即痢特灵50μg/片）敏感实

验微球菌为耐药，而金黄色葡萄球菌为敏感。

4．葡萄球菌属的种间鉴定：

⑴．菌落色素与溶血毒素：金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄色，柠檬色

或者淡黄色，而其他葡萄球菌则在血平板上菌落大多数为白色，也有

部分为柠檬色或深黄色。

⑵．溶血毒素：金黄色葡萄球菌有α﹑β﹑γ﹑δ溶血毒素，各毒素的区别

是对动物红细胞的溶血范围﹑抗原性及溶血时的温度等。其中以α溶

血毒素为主。而其他葡萄球菌大多数不产生溶血毒素，只有表葡有极

少能产生溶血毒素。

⑶．血浆凝固酶实验：用与区别金黄色葡萄球菌（阳性），表皮葡萄球菌

（阴性），腐生葡萄球菌（阴性）。血浆凝固酶是金葡菌所产生的，

有结合凝固酶和游离凝固酶两种。血浆凝固酶检测有两种方法，为玻

片法和试管法，我们一般采用玻片法。

a. 操作方法：挑取少许金黄色葡萄球菌菌落在玻片上与血浆乳化，结

合凝固酶能作用于血浆中的纤维蛋白原，从而在金黄色葡萄球菌表面

发生凝集，所以我们肉眼能看见凝集颗粒。玻片法主要由结合凝固酶

作用产生；游离凝固酶是金黄色葡萄球菌产生的胞外酶，能与血浆中

的血浆凝固反应因子（类似凝血酶的一种物质）作用，形成复合物再

使纤维蛋白原转化成纤维蛋白而发生凝集。试管法主要由游离凝固酶

作用产生。

b. 注意事项：菌落不能太多，否则会影响结果观察；凝固酶阳性要做

自凝阴性对照（用生理盐水代替血浆），只有在阴性对照也不凝集才能认为是真正的阳性，有一部分葡萄球菌有自凝现象。

⑷．新生霉素敏感实验：金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌对新生霉素纸片

（5μg/片）敏感；而腐生葡萄球菌，微球菌则对之耐药。抑菌环直径>

16mm即为新生霉素敏感。

⑸．甘露醇氧化发酵实验：

a.操作方法：取两支甘露醇微量生化管，在微量管内接种待检细菌，

然后一支加两滴石腊密封，另外一支则不加，放37℃孵箱内18～24h

后观察结果。

b.结果观察：微量生化管变黄色为阳性，也就是能利用甘露醇。若两

管都变黄色则说明是发酵型；其中加石蜡管不变色，没加石蜡管变黄

色则为氧化型；如果两管都不变色则说明该细菌是不利用甘露醇（产

碱型）。

c.应用：金黄色葡萄球菌在需氧和厌氧的条件下都能利用甘露醇（即

两管都变黄色）；表皮葡萄球菌需氧部分产酸，厌氧条件下不利用甘

露醇（即没加石蜡管有部分会变黄色，加石蜡管不变黄色）；腐生葡

萄球菌与表皮葡萄球菌类似。

三．微球菌属的种间鉴定

微球菌属主要的种有易变微球菌，藤黄微球菌，玫瑰微球菌。鉴定生化见下

表

色素产生黄色黄色粉红色

需氧葡萄糖产酸＋＋－

硝酸盐还原＋－－

脲素酶 d d ＋

氧化酶－＋－/＋（弱）

新生霉素敏感 S/R S R

d：不定 S：敏感 R：耐药

四．链球菌属

1．形态和染色：链球菌的直径为0.5～1.0μm，呈成双和链状排列的卵圆形革兰阳性球菌，菌体小于葡萄球菌，无鞭毛，没有芽胞，但有些菌株会形成荚膜。肺炎链球菌呈矛头状，宽端相对，尖端向外。

2．根据链球菌在血平板上溶血现象的不同分为三种：⑴甲型（α-）溶血，即菌落周围出现较窄的草绿色溶血环；⑵乙型（β-）溶血，即菌落周围出现较宽的透明溶血环；⑶丙型（γ-）溶血，即菌落周围无溶血环。3．根据抗原结构（C多糖抗原）的不同可分为A﹑B﹑C﹑D﹑E﹑F﹑G﹑H﹑K﹑L﹑M﹑N﹑O﹑P﹑Q﹑R﹑S﹑T等18个群，对人类有致病者9

0%属于A群，偶见其他群链球菌致病。

4．链球菌属的种间鉴定

⑴．乙型溶血链球菌的鉴定：

a．对杆菌肽（0.04U/片）（抑菌圈直径≥10mm）敏感：A群链球

菌（主要为化脓性链球菌）。

b．对杆菌肽不敏感，胆汁七叶苷实验阴性，但马尿酸钠水解实验﹑CAMP实验阳性：B群链球菌（主要为无乳链球菌）。

c．对杆菌肽不敏感，胆汁七叶苷实验阴性，马尿酸钠水解实验阴性，CAMP实验阴性：主要为马链球菌﹑类马链球菌﹑兽疫链球菌；对三者的区别实验要加做海藻糖和山梨醇实验。

d．CAMP实验：将能产生β-溶血的金黄色葡萄球菌在血平板上划一横线接种，再将待鉴定菌于金黄色葡萄球菌3mm处垂直种一

短线，若在有CO2条件下培养5～6小时，或无CO2条件下培养

18～24小时，在两细菌连接处出现一个半月型的加强溶血区即为

CAMP实验阳性。

⑵．甲型溶血链球菌的鉴定：

a．草绿色链球菌：对杆菌肽敏感，对奥普托欣（Optochin）不敏感，胆汁溶菌实验阴性，胆汁七叶苷实验阴性，在高盐中不生长。主

要有变异链球菌，轻型链球菌，血链球菌，唾液链球菌等。

b．肺炎链球菌：菌体呈矛头状，成双排列，钝端相对，尖端相背，较葡萄球菌，其他链球菌略大；在血平板上菌落细小﹑圆形﹑表

面光滑﹑灰白色﹑半透明，开始时菌落呈扁平状，以后中心塌陷，

呈脐窝状。与草绿色链球菌的主要区别是胆汁溶菌实验阳性，对

奥普托欣（Optochin）敏感。奥普托欣（Optochin）含量为5μg/

片，抑菌环>18mm为敏感，<15mm为不敏感，15～18mm应重

复实验。

⑶．肠球菌（D群链球菌）的鉴定：

溶血不定，主要是α-﹑γ-溶血；对杆菌肽不敏感，但其特异性实验

是胆汁七叶苷实验阳性；若能在6.5%NaCl的心浸液肉汤中生长即为

D群肠球菌，不能生长为D群非肠球菌。

⑷．链球菌属鉴定的系统生化结果判断

a．1%美兰牛乳

b．胆汁七叶苷实验：变黑为阳性。

c．PH9.6肉汤实验：变浑浊为能在碱性环境中生长（阳性）。

d．6.5%NaCl心浸液肉汤：由紫变黄为能在高盐环境中生长（阳性）。

e．精氨酸双水解酶实验：变红色（对照不变色，仍为黄色）为阳

性。

五．奈瑟氏菌属和布兰汉菌属

奈瑟氏菌属主要有脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌；布兰汉氏菌属只有卡

他布兰汉氏菌。两者系需氧革兰阴性球菌。

⑴奈瑟氏菌的生物学特性：革兰阴性球菌，需氧，卵圆形或肾形，无动

力，氧化酶及触酶均阳性。培养时对营养要求高，能在巧克力平板或有丰富营养的血平板上，在5～10%CO2环境中生长。

⑵．鉴定过程：

a．DNA酶实验阳性为布兰汉氏菌，阴性则为奈瑟氏菌。

b．能在普通血平板上生长的为其他奈瑟氏菌，在巧克力平板上生长

的主要为脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌。

c．能使麦芽糖氧化分解产酸的是脑膜炎奈瑟氏菌，不利用麦芽糖的

是淋病奈瑟氏菌。

⑶．几种主要细菌对葡萄糖﹑麦芽糖﹑蔗糖的氧化分解产酸结果如下：

氧化分解产酸

菌种葡萄糖麦芽糖蔗糖

淋病奈瑟氏菌＋－－

脑膜炎奈瑟氏菌＋＋－

粘液奈瑟氏菌＋＋＋

卡他布兰汉菌－－－

⑷DNA酶实验：

a．方法：将待鉴定细菌点种于含0.2%DNA的DNA琼脂平板上，培养后用1mmol/LHCl覆盖平板，菌落周围出现透明环者为阳性。

b．原理：某些细菌能产生DNA酶，可使DNA长链水解成由几个单核苷酸组成的寡核苷酸链；长链DNA可被酸沉淀，而水解后形成

后的寡核苷酸链则可溶于酸，故在DNA琼脂平板加盐酸，可在菌

落周围形成透明的溶血环。（肠杆菌科中只有沙雷氏菌和变形杆菌可产生DNA酶，阳性球菌中只有金葡菌能产生DNA酶。）六．肠杆菌科

肠杆菌科是一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌，其中对人致病性较强的鼠疫耶尔森菌（现已基本没有流行）和伤寒沙门菌；4类常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希氏菌﹑志贺氏菌﹑沙门氏菌﹑耶尔森氏菌）和8种常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属﹑克雷伯菌属﹑肠杆菌属﹑多源菌属﹑沙雷菌属﹑变形

杆菌属﹑普罗威登菌属和摩根菌属）。另外还有很多细菌是肠道的正常菌群，但

在一定条件下也可致病（条件致病菌）。

实验过程中对于革兰阴性杆菌首先要做氧化酶实验，阴性为肠杆菌科细菌；阳性的为非发酵菌（我们实验室还没有简单的系统鉴定方法，一般要仪器上卡检

测）或弧菌科细菌。

1．肠杆菌科的系统生化

⑴．KIA试验（克氏双糖铁）

组成：乳糖／葡萄糖=10／1（斜面／高层，其长度最好是都是2C

M）

结果判断：斜面或高层变黄色：阳性；不变色（红色）：阴性

高层中出现裂隙：产气阳性

高层中出现黑色（FeS）：产H2S阳性

⑵．苯丙氨酸脱羧酶试验

细菌产生的苯丙氨酸脱羧酶使苯丙氨酸氧化脱羧后生成苯丙酮酸，

再与10%的FeCl3试剂产成深绿色反应。（变形杆菌属﹑普罗威登

菌属和摩根菌属为阳性，其他为阴性）

⑶．枸橼酸盐试验（碳源利用实验）

在枸橼酸盐培养基中细菌能利用的碳源只有枸橼酸盐，分解后生成

碳酸钠，使培养基变碱性，pH指示剂溴麝香草酚蓝由淡绿色变为

深兰色，即为枸橼酸盐试验阳性。（埃希氏菌属，志贺氏菌属，爱

德华菌属为阴性，其他为阳性）

注意：接种时不能被糖，蛋白胨污染，要单独接种）

⑷．甲基红（MR）试验

细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步分解为甲酸、乙酸、乳

酸和琥珀酸等，使培养基的pH下降至4.5以下时，加入甲基红指

示剂由桔黄色变桔红色为弱阳性；变红色为阳性。

培养基成分：葡萄糖蛋白胨水

试剂：甲基红0.1g，酒精300ml，水200ml

主要用于大肠埃希菌（＋）和产气肠杆菌（－）的鉴别；常与V-P

实验联合使用，一般情况下两者结果正好相反，但也有例外如奇变

两者同为阳性。

⑸．MIU（动力－靛基质－尿素）试验

①．动力：在半固体培养基中穿刺接种细菌培养后，若穿刺线周围

有细菌扩散生长，则为动力（＋）；清晰则为动力（－）。

②．靛基质试验（吲哚试验）：某些细菌有色氨酸酶，能分解培养

基中的色氨酸生成吲哚。吲哚再与试剂对位二氨基苯甲醛作用

形成玫瑰吲哚而呈红色。

③．尿素试验：某些细菌能产生尿素酶，分解尿素产生大量的氨，

使培养基变碱，再使培养基中的指示剂（0.4%酚红）变红色即

为阳性。

⑹．硝酸盐还原试验

NO3ˉ→→NO2ˉ（大肠）

NO3ˉ→→NH4＋

NO3ˉ→→N2（沙雷氏菌属）

试剂甲：对氨基苯磺酸

试剂乙：α-萘胺

观察结果时甲液和乙液要等量加入，立即或10min内出现红色为阳

性。若不变色，则要加入锌粉：①变红色，说明硝还试验为真阴性

②仍不变色，说明硝还试验真阳性，但原先还原产物不是NO2ˉ。

阴性结果出现时有三种可能：①细菌不能还原硝酸盐②亚硝酸盐继

续分解生成氨或氮③培养基不适合细菌生长

肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐。

⑺．氨基酸脱羧试验

细菌产生脱羧酶分解氨基酸使其脱羧生成胺和CO2，虽然各种细菌所产生的脱羧酶不一定相同，但最后都能生成胺（赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺，

精氨酸→精胺）和CO2。然后胺能使培养基变碱性，通过指示剂（溴甲酚紫）由黄变紫即为阳性。对照管（无氨基酸）为黄色。

注意：①微量管接种好后要加石蜡，使培养基造成厌氧环境。（生成的胺更稳定，

还能诱导氨基酸脱羧酶的产生）

②对照管如果不显黄色，则结果不能判断。

应用：除伤寒沙门氏菌，鸡沙门氏菌外，其他沙门氏菌鸟AA，赖AA均为阳性；

除宋氏和鲍氏志贺菌外其他志贺菌也菌为阳性。

⑻．葡萄糖酸盐试验

微量管在培养18～24h后，加班氏试剂，水浴煮沸10min，由兰色变黄绿色到砖

红色即为阳性，不变为阴性。

1．肠杆菌的鉴定流程

⑴．根据苯丙氨酸脱羧酶实验：

（＋）：变形杆菌属，普罗威登斯菌属，摩根氏菌属（－）：埃希氏菌属，志贺氏菌属，沙门氏菌属，枸橼酸杆菌属，爱德

华菌属；克雷伯菌属，肠杆菌属，沙雷氏菌属，哈夫尼亚菌

属。

⑵．苯丙氨酸脱羧酶实验阴性，加做葡萄糖酸盐实验

（＋）：克雷伯菌属，肠杆菌属，沙雷氏菌属，哈夫尼亚菌属

（－）：普罗威登氏菌属，摩根氏菌属

普罗威登氏菌属：鸟氨酸：－；枸橼酸盐：＋（属内鉴定尿素酶及一些碳水化合物的产酸试验，如甘露醇﹑阿拉伯糖﹑

海藻糖等）

摩根氏菌属：鸟氨酸：＋；枸橼酸盐：－（只有一个种：摩氏摩

根氏菌）

⑷．志贺氏菌属和沙门氏菌属

这两种菌属在肠道选择性培养基（SS、麦康凯）形成不发酵乳糖的透明或半透明的无色菌落，但一些沙门氏能产H2S就会形成中心黑色的菌落，鉴定时在选择性培养基上挑选可疑菌落进行鉴定。

a．志贺氏菌属

主要系统生化：KIA：K/A（只有福氏6型能产气），H2S（－）；

MIU：－+/-－；

苯丙：－；枸橼酸盐：－。

报告结果时要根据其血清学的结果鉴定到种，即A群（痢疾志贺氏

菌）﹑B群（福氏志贺氏菌）﹑C群（鲍氏志贺氏菌）﹑D群（宋

氏志贺氏菌）；我国主要以B群和D群为主。

b．沙门氏菌属

主要系统生化：KIA：K/AG，H2S（+/－）；MIU：＋－－；苯丙：

－；枸橼酸盐：－。

伤寒沙门氏菌的抗原结构：菌体抗原（O抗原），鞭毛抗原（H抗

原），包膜抗原（主要是Vi抗原）

根据系统生化鉴定到沙门氏菌属后，在根据其抗原结构的特点，用

血清学凝集分到种即可报告结果。

血清凝集步骤如下：

A-F多价O（＋）：

O2，Ha（＋）：A群（甲型副伤寒沙门氏菌）

O4，Hb（＋）：B群（乙型副伤寒沙门氏菌）

O6﹑7，Hc，Vi（＋）：C群（丙型副伤寒沙门氏菌）

O9，Hd，Vi（＋）：D群（伤寒沙门氏菌）

O3﹑10，Heh（＋）：E群

O11，Hi（＋）：F群

A-F多价O（－），做Vi血清因子凝集：（＋）浓菌液沸水煮沸

30min，再用A-F多价O血清定群；（－）继续以A-F以外的多

价O血清凝集分型。

血清凝集注意：确定O群后，一定要用H因子再做凝集；最终结

果要以凝到H相后才能报告。

七．非发酵革兰阴性杆菌

非发酵革兰阴性杆菌是指一群不利用葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖﹑需氧或兼性厌氧﹑无芽胞的革兰阴性杆菌。氧化酶试验一般阳性，除不动杆菌属

和嗜麦芽假单胞菌外。

非发酵菌按下列试验进行初步分属菌属氧化酶 O-F试验动力 MaCC生长情况触酶

假单胞菌属＋ O/－＋/－生长＋

无色杆菌属＋ O/－＋/－生长＋

不动杆菌属－ O/－－生长＋

产碱杆菌属＋－＋生长＋

摩拉菌属＋－－不生长＋

金氏菌属＋ F（弱）－不定－

黄杆菌属＋ F（弱）－不生长＋

下面主要讲一下铜绿假单胞菌：在血平板上形成的菌落大而扁平﹑湿润﹑有金属光泽，有生姜味的灰绿色或兰绿色的菌落，并有明显的溶血环。常有色素产生（绿脓素，青脓素，红脓素，黑脓素等），在MH平板上更加明显。

铜绿假单胞菌的最低鉴定标准：①动力＋②氧化酶＋③枸橼酸盐＋④氧化分解GLU，木糖⑤不利用麦芽糖⑥赖﹑鸟氨酸脱羧酶试验－⑦精氨酸双水解酶试验

＋⑧H2S－。

八．棒状杆菌属

棒状杆菌属是一群革兰阳性杆菌。菌体大小长短不一，常一端或两端膨大呈棍

棒状。

大多数存在于水和土壤中，其中有的是人和动物粘膜上的正常菌群，若是从无菌部位分离到棒状杆菌，应予以鉴定（如宫颈拭子）。

在血平板上能生长，但生长不良好，菌落细小，湿润。

鉴定：根据触酶和有无溶血，可分：

⑴．H2O2＋，无溶血：白喉﹑假白喉﹑溃疡﹑干燥﹑假结核﹑马棒﹑牛棒

⑵．H2O2－，有溶血：溶血棒﹑化脓棒﹑阴道棒

⑶．加做葡萄糖，麦芽糖，蔗糖产酸试验，结合⑴⑵和标本类型，基本上可以

鉴定到是哪一种棒状杆菌。

微生物实验室规章管理制度

实验室管理总则 一、实验室管理是所有实验人员共同的责任，每一位实验人员都应对实验室的 正常、高效运转尽自己的义务和责任，自觉遵守实验室的规章制度和管理办法。 二、本章程为实验人员的行为规范，目的使大家在一个有组织、有秩序的环境 下工作，在最大限度地为大家提供一个能充分发挥自己才能的空间的同时，使实验人员养成良好的工作习惯，为良好的完成工作任务打下基础。 三、实验室的管理遵循三条原则 （1）岗位责任制原则 实验室的每一项管理工作都有明确的责任要求，并有专人负责。 （2）规范化原则 管理制度化，从设备、器材、药品等的使用到实验方法、安全卫生都制 定标准化的规范，大家都按照规范执行，以确保管理工作的有效性和连 续性。 （3）记录监督原则 实验室管理的各方面都要求有及时、准确的记录，以保证实验室所有工作的可追溯性。

实验室人员行为规范 一、严格遵守“武汉烁森生物科技有限公司微生物实验室规章管理制度” 二、每位实验室成员都应以主人翁精神参与实验室的建设与管理，积极参 加实验室的各种活动和公益劳动，自觉维护本实验室的声誉。 三、对所有违规人员和行为，本室将进行登记，屡教不改者，从重处理。 四、实验室内严禁吸烟、喝酒。 五、不准在实验室大声喧哗、随地吐痰、打闹、讲粗口； 六、未经许可，不得随意带他人进入本实验室。 七、爱护仪器设备，节约用水、电及实验材料等，注意安全。 八、室内设备仪器不得擅自拆卸、挪动，与本人实验无关的设备不可随意 开启。 九、实验仪器的使用要严格遵守操作规程，并认真填写设备使用记录，设 备存放应做到整洁有序，便于检查使用。 十、必须注意实验安全，加强安全防范意识。 十一、注意公共卫生，不准随意丢弃杂物废纸等，影响实验室环境卫生。十二、高温、高压等易燃易爆实验，需要特别注意安全防范。 十三、最后离室者，做好安全检查，检查仪器电源、空调、水、气瓶、门、窗等是否关好，并在最后离室登记簿上签名。

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程 1、质量的概念和质量保证 影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。 第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。 第二类是鉴定细菌的实验。通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。 第三类是药敏实验。有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形

式报告,属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。也应以准确度和精确度衡量。 所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。 2、室内质量控制 2.1在职人员 2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。 2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。 2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。 2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。 2.2操作手册及参考书

微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术 一、形态结构和培养特性观察 １、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。 ２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。 １）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。 ２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。

革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。 该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤： （1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同。 （2）晾干：与简单染色法相同。 （3）固定，与简单染色法相同 （4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。 （5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。 （7）水洗：用水洗去碘液。 （8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。 （9）复染：滴加蕃红复染5min。 （10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 （11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。 （12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。 （13）实验完毕后的处理： ①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦 去。b.用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次。c.再用干净的擦镜纸将 镜头擦2—3次。注意擦镜头时向一个方向擦拭。 ②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干

动物病原微生物的分类

动物病原微生物的分类 根据病原微生物的传染性、感染人和（或）动物的危害程度，世界动物卫生组织（OIE）将动物病原分为1至4类。 1类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。 2类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放中有中等危险的病原微生物。 3类动物病原为外来或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。 4类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。 我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依次类推，四类最小。有少数寄生虫也列在名单之中。 中华人民共和国农业部 第 5 3号令公布动物病原微生物分类名录2005年5月24日，中华人民共和国农业部部长杜青林签署第53号令，发布《动物病原微生物分类名录》。 根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条、第八条的规定,对动物病原微生物分类如下： 一类动物病原微生物 口蹿疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。

二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘／山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌。 三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻／粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫。 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎／脑脊髓炎病毒、梅迪／维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒。 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体。 马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌。 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病／肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鲴病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹

微生物实验室管理制度

目得：规范微生物室管理规范，以保证微生物实验得顺利进行。 范围：适用于微生物实验室 依据:GB/T 1９4８9-2008《实验室生物安全通用要求》； 执行部门:化验室微生物检验室 职责：1、微生物检验员负责微生物实验室得管理。 2、实验室主管负责对微生物实验室管理情况进行检查。 内容: 本中心微生物实验室管理制度包括微生物实验室人员管理制度、微生物室出入管理制度、微生物室环境管理制度、微生物室得使用管理制度。 ??微生物实验室药品管理制度。 １、微生物实验室得人员管理 １、１微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其她人员须经主管人员批准后方可进入与使用。 1、２微生物实验室得人员需经过相关得培训。 2、微生物实验室出入管理 2、１人员出入管理： 2、1、1 人员进入微生物实验室洁净区前,需要洗手消毒;在一级缓冲室换实验服、戴帽子、换鞋后，进入风淋室，风淋后,进入二级缓冲室准备实验。 2、1、2 实验操作前须带上无菌手套与口罩. ２、２物料出入管理: 2、2、1 物料进入微生物实验室以前，脱去外包装或者用酒精棉球擦拭后,放置于传递窗中。

2、2、２物料放置于传递窗后，开启紫外0、5小时，同时将微生物实验室内得净化系统、紫外灯打开. 2、2、3紫外开启0、５小时以后，关闭紫外，并将物品转移于实验操作台上。 2、2、4 实验完毕后,微生物实验室物品经传递窗传出后，经高温灭菌后废液、废物倒入废液桶处理。 ３、微生物实验室得环境管理 3、１微生物实验室得清洁管理 微生物实验室得清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体得清洁部位、方式方法、频率见下表所示: ３、2 微生物实验室常用消毒剂及其配制 4、微生物实验室得使用管理 4、1 微生物实验室使用之前,应先开启微生物实验室自净系统30分钟.每次使用前应用消毒液擦拭超净工作台及其她一切可能引起污染得死角,

医学微生物学各个细菌形状的总结

1 葡萄球菌属链球菌属肺炎球菌属脑膜炎奈氏球菌形状球球矛头状肾形 排列葡萄状链状成双成双 染色G- 特殊结 构 无幼龄、有荚膜有荚膜有荚膜及菌毛 营养普通需含溶血素、葡萄糖、 血清等 需含血巧克力营养基 气体需氧或兼性需氧需CO25%-20%CO2温度37（28—38） PH7.3-7.4 菌落有色素，B溶血环ABC溶血环A溶血环露滴状 变异耐药性 抗原葡萄球菌抗原 （SPA） c抗原，表面抗原（含 M蛋白） 分类金黄色，表皮，腐 生 甲型，乙型，丙型（据 溶血现象）；19个血清 型（据C抗原） 84个血清型 抵抗力较强，耐药较弱，首选青霉素较弱极弱，耐药 致病物质凝固酶，葡萄球菌 溶血素，沙白细胞 素，肠毒素，表皮 溶解毒素，毒性休 克综合征1 脂磷壁酸（LPA），M 蛋白，侵袭性酶，链球 菌溶血素（SLO，SLS） 致热外毒素 荚膜（最主要），溶血 素，紫点形成因子，神 经氨酸酶 菌毛，荚膜，内毒素 疾病化脓性炎症，食物 中毒，烫伤样皮肤 综合征，毒性休克 综合征，葡萄球菌 性肠炎 甲型，化脓性感染，猩 红热，丹毒，蜂窝组织 炎，急性肾小球肾炎， 风湿热，毒性休克样综 合征；乙型，新生儿败 血症，脑膜炎 大叶性肺炎，支气管肺 炎，中耳炎，脑膜炎 流行性脑脊髓炎 血症败血症，脓毒血症败血症败血症菌血症 免疫不强无交叉免疫，可反复感 染 特异性免疫较强

生化反 应 备注不耐高温传染源 2 淋球奈氏菌大肠埃希菌伤寒沙门菌霍乱弧菌形状椭圆形、肾形杆状杆状弯曲型排列成双 染色 特殊结构有夹膜及菌毛 有周鞭毛、普通菌毛、性 菌毛，有荚膜 有周鞭毛，多有菌毛单端有鞭毛，菌毛 营养巧克力营养基普通普通碱性蛋白胨水 气体5%-20%CO2兼性厌氧，氧充足更好 温度35-36 PH8.9菌落半透明，光滑有些有溶血环 变异 耐药性H-O，S-R，V-W，位相变异 抗原O、K、H O，K O，H 分类ETEC（产毒性）EHEC（出 血性），EIEC（侵袭性） EPEC（致病性）EAggEC （聚集性） 痢疾致贺菌，福氏致贺 菌，鲍氏致贺菌。宋内 致贺菌 O1群，不典型O1 群，非O1群，血清 型 抵抗力弱较其他肠道杆菌强不强 致病物质菌毛 定居因子（菌毛）肠毒素 （LT，ST），细胞毒素， 脂多糖，K抗原，载铁体 内毒素，外毒素 鞭毛，菌毛霍乱肠毒 素

检验科上墙制度_微生物实验室管理规章制度

微生物实验室质量与安全管理制度 1、实验室内物品要摆放整齐，试剂要有明晰的标签。 2、禁止在实验室内吸烟、饮食和会客。 3、做好检样的登记、编号、明确检验目的，不符合要求的样品必要时应重新采样。 4、无菌室操作前用消毒液擦试，桌面及工作台面，开紫外灯消毒30~60分钟，开启超净台 紫外线灯。 5、进无菌室操作前洗手。 6、操作过程严格执行无菌操作。 7、操作时关紫外线灯，开日光灯﹑风门及点燃酒精灯或煤气，并用75%酒精棉球拭手。 8、工作结束，关风门、电源、酒精灯、处理污物、台面，将超净台内物品摆放整齐。 9、定期检查温箱、水浴箱、冰箱及低温冰箱等的性能。 10、各种玻璃容器量杯、烧杯、量筒、刻度吸管等应校正后使用，细菌接种环直径3~5mm， 长6~8cm，接种针6~8cm。 11、试剂的质控应要求按照实验要求分别选用（AR）、（GR）等级，所用溶液应用去离子水 或蒸馏水。 12、定期对实验进行彻底的消毒清洗。 微生物实验室卫生与安全管理制度 1、实验室所有工作场所均需指定专人负责环境的卫生与安全工作。 2、实验室人员每天工作前后要做好实验室清洁工作。定期对超净工作台和无菌室用适宜的 消毒液清洗，以保证其洁净度符合要求。 3、实验室人员在日常工作中要维护工作场所环境整洁。测试人员在测试过程中要保持工作 场所环境卫生整洁。 4、实验室人员在每天工作结束后要检查工作场所的水、电、门、窗的安全情况。 5、实验室应配备必要的防火用具，如灭火器等。

6、要在实验室安放废液、废弃物的回收装置，测试人员要把废液、废弃物放入回收装置， 污染的废液和废弃物，必须经过高压灭菌后方可处置。按《废弃物品处理规定》处理废液和废弃物。 7、实验室人员要定期检查实验室卫生安全落实情况，发现问题及时处理。 8、实验室人员要对环境条件进行定期的监测、控制，并做好记录。 9、与检验无关人员不得进入实验室，因特殊情况需要进入实验室时，必须穿工作服、带鞋 套，离开时将工作服放在指定的位置，鞋套放在指定的存放容器内。 10、无菌室使用前必须打开紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开风机进行吹风。操 作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 11、工作人员进入无菌室必须更换工作服、鞋、帽子、口罩。 12、无菌室应备有工作浓度的消毒液，如70%的酒精，0.1%的新洁尔灭，5%的来苏儿溶液 等等。 微生物实验室仪器配备、管理使用制度 1、实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 2、实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，由经理同意填报修理申请、送仪器维修部门。 3、各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 4．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 5、仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 6、使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏， 要追究当事者责任。 微生物室菌种保存与使用管理制度

微生物检验常规鉴定技术

第一章微生物检验常规鉴定技术 课堂教学计划（1学时） 第一章微生物检验基本知识 包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。 接种、分离纯化和培养技术

一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 １、接种工具和方法 接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 常用的接种方法有以下几种： １）划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。 ２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。 ３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。 ４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C 左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。 ５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。 ６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至

实验动物的分级

．实验动物分级及其标准 根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级： 一级普通动物（CV），系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果）。 二级清洁动物（CL），要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物（GF）或悉生动物（GN）。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述，对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统 是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度，但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统 把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室，主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理，如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统

医学微生物学简答题(详细答案

微生物根据大小、结构、化学组成分为哪3大类微生物？各大类微生物有何特点？包裹哪些种类的微生物？ 1.原核细胞型微生物：仅仅只有原始的核质，无核膜、核仁，缺乏完整的细菌器，只有核糖体，DNA和RNA同时存在。它包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体和螺旋体。 2.真核细胞型微生物：细胞核的分化程度高，有核膜和核仁，胞质内细胞器完整。如真菌属于此类。 3.非细胞型微生物：是最小的一类微生物，结构简单，只有一种核酸（DNA或RNA）存在。缺乏完整的酶系统，必须要在活细胞内增殖。如病毒属于此类。 G+菌与G－菌细胞壁的异同点？ 肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构 细胞壁强度较坚韧较疏松 细胞壁厚度 20～80nm 10～15nm 肽聚糖层数多，可达50层少，1～2层 脂类含量少，1%～4% 多，11%～22% 磷壁酸有无 外膜无有 细胞壁共同的主要功能 （1）维持形态、抵抗低渗作用，保持菌体完整 （2）屏障作用

（3）物质交换作用 （4）抗原性 （5）致病作用 （6）细胞分裂中的作用 细菌的特殊结构有哪些？有何功能及意义？ 1.荚膜功能：①抗吞噬②抗有害物质损伤③抗干燥。 2.鞭毛功能：是细菌的运动器官。 3.菌毛功能：①普通菌毛：与细菌粘附有关。②性菌毛：具有传递遗传物质作用。 4.芽胞功能：芽胞对理化因素（热、干燥、辐射、化学消毒剂等）具有高强度的抵抗力。此外，当芽胞成为繁殖体后，能迅速大量繁殖而致病。 细菌的生长繁殖分为几个时期，每个时期的特点是什么，有什么意义？ 细菌群体的生长繁殖：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期 特点 生长时期迟缓期对数期稳定期衰亡期 维持时间 1-4h 4-8h 10h 活菌数量恒定，增加很少对数增长维持平衡逐步减少 生长速率零最大速率速率降低死亡速率增加 细胞代谢非常活跃活性高而稳定活性稳定活性降低衰老 意义

微生物实验室要求

微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、

普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。 2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。 4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。 三、药品管理、使用制度 1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立帐目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。 2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。

微生物学检验题库及答案

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调： 12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作 18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。

动物病原微生物分类名录

动物病原微生物分类名录 （2005年农业部令第53 号） 依照《病原微生物实验室生物安全治理条例》第七条、第八条的规定，对动物病原微生物分类如下： 一、一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。 二、二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘/山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌。 三、三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、

牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻/粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫。 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎/脑脊髓炎病毒、梅迪/维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒。 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁育与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体。 马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌。 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病/肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传

微生物实验室安全管理制度

微生物实验室安全管理制度 一、生物安全管理 1、实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。 2、实验室安全主管（向实验室主任汇报）提供常规的实验室安全培训。 3、将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，要求他们阅读生物安全或操作手册，并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。实验室内应备有可供取阅的安全或操作手册。 二、实验室生物安全规程 （一）进入规定 1、在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物的实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。 2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。 3、实验室的门应保持关闭。 4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。 （二）操作规范 1、严禁用口吸移液管。 2、严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。 3、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。 4、出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室安全主管报告。 5、必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序，并予以遵守执行。 （三）人员防护 1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着工作服。 2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完摘除后必须洗手。 3、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 4、有喷溅的可能时，为了防止眼睛或面部受到泼溅物的伤害，应戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。 5、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。 6、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。

2020年(生物科技行业)微生物常规鉴定技术

（生物科技行业）微生物常 规鉴定技术

微生物常规鉴定技术 壹、形态结构和培养特性观察 １、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。 ２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同壹种的细菌在壹定条件下，培养特征却有壹定稳定性。，以此能够对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的壹项重要内容。 １）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性仍是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。 ２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如

青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。 革兰氏染色: 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）俩大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。 该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这俩类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色步骤： （1）涂片：涂片方法和简单染色涂片相同。 （2）晾干：和简单染色法相同。 （3）固定，和简单染色法相同 （4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。 （5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。 （7）水洗：用水洗去碘液。

动物病原微生物分类名录

根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条、第八条地规定，对动物病原微生物分类如下： 一、一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原. 资料个人收集整理，勿做商业用途 二、二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌. 资料个人收集整理，勿做商业用途 三、三类动物病原微生物 多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体. 资料个人收集整理，勿做商业用途 牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻粘膜病病毒、牛生殖器弯曲杆菌、日本血吸虫. 资料个人收集整理，勿做商业用途 绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎脑脊髓炎病毒、梅迪维斯纳病病毒、传染性脓疱皮炎病毒. 猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪密螺旋体. 资料个人收集整理，勿做商业用途马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌. 资料个人收集整理，勿做商业用途 禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡马立克氏病病毒、禽白血病肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫. 资料个人收集整理，勿做商业用途 兔病病原微生物：兔粘液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫. 水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒医学教`育网整理、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鮰病毒、病毒性脑病和视网膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹彩病毒、中肠腺坏死杆状病毒、传染性皮下和造血器官坏死病毒、核多角体杆状病毒、虾产卵死亡综合症病毒、鳖鳃腺炎病毒、综合症病毒、对虾白斑综合症病毒、黄头病病毒、草鱼出血病毒、鲤春病毒血症病毒、鲍球形病毒、鲑鱼传染性贫血病毒. 资料个人收集整理，勿做商业用途 蜜蜂病病原微生物：美洲幼虫腐臭病幼虫杆菌、欧洲幼虫腐臭病蜂房蜜蜂球菌、白垩病蜂球囊菌、蜜蜂微孢子虫、跗腺螨、雅氏大蜂螨. 资料个人收集整理，勿做商业用途 其他动物病病原微生物：犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、猫泛白细胞减少综合症病毒、水貂阿留申病病毒、水貂病毒性肠炎病毒. 资料个人收集整理，勿做商业用途 四、四类动物病原微生物 是指危险性小、低致病力、实验室感染机会少地兽用生物制品、疫苗生产用地各种弱毒病原

医学微生物学名词解释总结

第一二章细菌的形态结构与生理 1、微生物：（P1）存在于自然界形体微小，数量繁多，肉眼看不见，必须借 助与光学显微镜或电子显微镜放大数百倍甚至上万呗，才能观察的一群微小低等生物体。 2、微生物学：（P2）用以研究微生物的分布、形态结构、生命活动（包括生 理代谢、生长繁殖）、遗传与变异、在自然界的分布与环境相互作用以及控制他们的一门科学 3、医学微生物学：（P3）主要研究与人类医学有关的病原微生物的生物学症 状、对人体感染和致病的机理、特异性诊断方法以及预防和治疗感染性疾病的措施，以控制甚至消灭此类疾病为的目的的一门科学 4、代时：细菌分裂倍增的必须时间 5、细胞壁：包被于细菌细胞膜外的坚韧而富有弹性的膜状结构 6、肽聚糖或粘肽：原核细胞型微生物细胞壁的特有成分，主要由聚糖骨架、 四肽侧链及肽链或肽键间交联桥构成 7、脂多糖：（P13）LPS 革兰阴性菌细胞壁外膜伸出的特殊结构，即细菌内 毒素。由类脂A、核心多糖和特异多糖3个部分组成 8、$ 9、质粒：（P15）是细菌染色体外的遗传物质，双链闭合环状DNA结构，带 有遗传信息，具有自我复制功能。可使细菌或的某些特定形状，如耐药、毒力等 10、荚膜：（P16）某些细菌能分泌粘液状物质包围与细胞壁外，形成一层和 菌体界限分明、不易着色的透明圈。主要由多糖组成，少数细菌为多肽。 其主要功能是抗吞噬，并有抗原性 11、鞭毛：（P16）从细菌细胞膜伸出于菌体外的细长弯曲的蛋白丝状物，是 细菌的运动器官，见于革兰阴性菌、弧菌和螺菌。 12、菌毛：（P17）是存在于细菌表面，由蛋白质组成的纤细、短而直的毛状 结构，只有用电子显微镜才能那个观察，多见于革兰阴性菌 13、芽孢：（P18）那个环境条件下，某些革兰阳性菌能在菌体内形成一个折 光性很强的不易着色小题，成为内生孢子，简称芽孢 14、细菌L型：（P14）即细菌缺陷型。有些细菌在某些体内外环境及抗生素 等作用下，可部分或全部失去细胞壁。 15、磷壁酸：（P12）是由核糖醇或甘油残基经磷酸二酯键互相连接而成的多 聚物。为大多数革兰阳性菌细胞壁的特有成分。有两种，即壁磷壁酸和膜磷壁酸 16、细菌素：（P25）是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质或蛋 白质与脂多糖的复合物 17、/ 18、专性需氧菌：（P 23）此类细菌具有较完善的呼吸酶系统，需要分子氧作 为受氢体，只能在有氧的情况下生长繁殖。 19、热原质：（P25）是细菌产生的一种脂多糖，将它注入人体或动物体内可 引起发热反应 20、专性厌氧菌：（P23）此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，只能在无氧条件 下生长繁殖 21、抗生素：（P25）为某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些

病原微生物实验室消毒管理制度

病原微生物实验室消毒管理制度 1. 工作人员要求 (1)工作人员应穿戴整洁,工作服一般每周更换2次; (2) 实验室接触标本均为可疑污染物,操作前均做好相应防护,手套破损要及时更换, 工作后脱手套用手消毒液消毒双手, 用流动水洗净; (3) 离开实验室的工作人员必须脱掉手套;不能穿工作服到实验室外活动。 2.. 重复使用检验器材处理 (1) 重复使用的器材用后应浸入含有效氯2000mg/l消毒液4小时, 再清洗干净; (2) 浸入重络酸钾(50克溶于100毫升水)浓硫酸(1000毫升) 溶液, 24小时; (3) 取出,蒸馏水冲洗10遍以上; (4) 烘干,备用。 3. 各种物面及地面消毒 (1)台面每日用300-500mg/l含氯消毒剂擦拭;用紫外线消毒时, 灯管离台面不宜超过1米,消毒有效区域为灯管周围1.5-2.0米,每次时间不少于30分钟; (2)地面用浸有500-1000mg/l有效氯消毒液或0.1-0.2%过氧乙酸的拖把拖地; (3)生物安全柜每次使用后用75%酒精擦拭表面,作用20分钟以上;然后紫外线作用20分钟以上。 4. 空气消毒 (1)用紫外线灯照射,每次时间均应大于30分钟,每天不少于1小时; (2)当发生较严重污染时,可用低温蒸气甲醛熏蒸,作用时间6小时以上。 5.及时消毒与日常消毒 当实验室发生小型感染性材料泄露时,应及时消毒,可用2000mg/L 次氯酸钠, 由外向内进行消毒, 作用20分钟以上 . 每次试验后应对生物安全柜、工作台面、室内空气、仪器表面、地面等进行常规消毒。 6.彻底消毒 根据实验室的使用情况,每两周至少对实验室进行一次彻底消毒,包括台面、地面、室内空气、仪器表面、生物安全柜、检毕废弃物等。 7.每月对消毒器材、物品的状态进行核查。