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A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays

A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays
A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays

https://www.wendangku.net/doc/c710282148.html,

Journal of Biomolecular Screening

DOI: 10.1177/1087057103256465

2003; 8; 566 J Biomol Screen Betina Kerstin Lundholt, Kurt M. Scudder and Len Pagliaro

A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays https://www.wendangku.net/doc/c710282148.html,/cgi/content/abstract/8/5/566

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A Simple Technique for Reducing

Edge Effect in Cell-Based Assays

BETINA KERSTIN LUNDHOLT,KURT M.SCUDDER,and LEN PAGLIARO

Several factors are known to increase the noise and variability of cell-based assays used for high-throughput screening.In par-ticular,edge effects can result in an unacceptably high plate rejection rate in screening runs.In an effort to minimize these vari-ations,the authors analyzed a number of factors that could contribute to edge effects in cell-based assays.They found that pre-incubation of newly seeded plates in ambient conditions (air at room temperature)resulted in even distribution of the cells in each well.In contrast,when newly seeded plates were placed directly in the CO 2incubator,an uneven distribution of cells oc-curred in wells around the plate periphery,resulting in increased edge effect.Here,the authors show that the simple,inexpen-sive approach of incubating newly seeded plates at room temperature before placing them in a 37°C CO 2incubator yields a significant reduction in edge effect.(Journal of Biomolecular Screening 2003:566-570)Key words:edge effect,cell-based assays,high-throughput screening

INTRODUCTION

C

ELL-BASED ASSA YS ARE WELL ESTABLISHED as powerful and

widely used tools for drug discovery.1They combine the bio-logical complexity of live cell responses with the scalability and process adaptation of high-throughput screening (HTS).However,the very biological complexity that imparts added value to cell-based assays also opens a Pandora’s Box of sorts—it introduces a large number of potential sources of noise and variability that can deteriorate assay performance to levels unacceptable for HTS.2These factors include variations in cell plating,differential cell growth,differential cell response,uneven response across plates,plate-to-plate variability,run-to-run variability,and edge effect.Edge effects are a class of phenomena that are widely recog-nized in fields as diverse as population biology 3and dermatology.4They are also recognized as widespread factors that contribute to the deterioration of assay performance in HTS,but they are gener-ally underaddressed in descriptions of assay procedures and in the scientific literature.There were several early reports on edge ef-fects in microplate-based adsorption assays,due to thermal

gradients 5,6and differential adsorption characteristics across the plates.7A subsequent report suggested that well-to-well variations are of greater statistical significance in plate-based assays,8but this work was also based on binding,rather than cell-based,assays.The causes of edge effect are complex,and undoubtedly a num-ber of the factors cited above are involved in any given example of edge effect.It is common for screening departments to avoid use of the peripheral wells on plates to avoid edge effects,but this ap-proach avoids,rather than solves,the problem,and it does so at the expense of capacity and throughput.Although that may be an ac-ceptable work-around in some cases,it is clearly preferable to min-imize the source of artifacts such as edge effect.Pre-incubation of plates with newly seeded cells at room temperature (RT)has been suggested as a technique to control edge effect in cell-based assays.9Here we evaluated this technique and show that it is a sim-ple,inexpensive,and practical method for reducing edge effect in cell-based assays to be used for HTS.

MATERIALS AND METHODS

Cell lines and culture conditions

Chinese Hamster Ovary (CHO)cells stably transfected with the human insulin receptor (CHO-hIR)10and an insulin receptor subtrate-1(IRS1)-GFP fusion protein,CHO-hIR IRS1-GFP ,were propagated as a monolayer culture in Ham’s F-12Nutrient Mix-ture containing L-glutamine (Gibco?,Invitrogen Corporation,

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? 2003 The Society for Biomolecular Screening

Technical Notes

BioImage A/S, Moerkhoej Bygade 28, DK-2860 Soeborg, Denmark.

Received Apr 1,2003,and in revised form Jun 5,2003.Accepted for publication Jun 7, 2003.

Journal of Biomolecular Screening 8(5);2003DOI:10.1177/1087057103256465

Published by Sage Publications in association with The Society for Biomolecular Screening

at Seoul National University on April 3, 2009

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Carlsbad,CA,USA),10%fetal calf serum (FCS,Gibco?)sup-plemented with 0.5mg/ml G418(Gibco?).The cells were grown in a humidified incubator at 37°C and 5%CO 2,and passaged twice weekly by resuspension with 0.25%trypsin/0.53mM EDTA solu-tion (Gibco?)for 3min at room temperature (RT).CHOhIR IRS1-GFP cells tested negative for Mycoplasma contamination.For all experiments,cells were seeded at 105cells/well using a Multidrop dispenser (Thermo Labsystems,V antaa,Finland)in black 96-well Packard Viewplates (Packard Bioscience,Com-pany,Meriden,CT,USA)and incubated for 24h at 37°C and 5%CO 2.

Hoechst 33258measurements

To quantify number of cells per well,the cell nuclei were stained with 10μM Hoechst 33258(Sigma-Aldrich Co.,St.Louis,MO,USA)in 0.1%formaldehyde (Bie &Berntsen Lab,R?dovre,Denmark)and 5.0%Triton X-100(Sigma)in PBS (Gibco?)for 10min at RT.The plates were then measured for Hoechst intensity (excitation 355nm,emission 460nm)using a fluorescence plate reader (SpectraFluor,Tecan Group AG,M?nnedorf,Switzerland).Crystal violet staining and imaging

The cell growth pattern was evaluated by crystal violet staining.Cells were fixed and stained with a crystal violet solution,contain-ing 0.5%(w/v)crystal violet (Sigma)in 25%(v/v)methanol

(Sigma),for 15min,followed by several washes with tap water.Plates of cells stained with crystal violet were imaged for visual-ization purposes by placing them upside down over an electrolu-minescent sheet (RS Components Ltd,Northants,UK)chosen to give extremely even illumination,and imaged from above using a CoolPix 950digital camera (Nikon,Tokyo,Japan).For quantita-tive analysis,the plates were placed upside down over the same electroluminescent sheet and imaged using 100-msec exposures and 2×2binning with an Orca-ER12-bit CCD camera (Hamamatsu Photonics,Hamamatsu City,Japan)and IPLab Spec-trum for Windows software (Signal Analytics,Fairfax,V A).A 50-mm still camera lens (Pentax,Slough,UK)with 3screw-on close-up lenses (Tayon,Japan)was used to obtain a magnified image in which 4adjacent wells filled the image field.Well-by-well analysis of cell monolayer evenness

Selected wells were analyzed in 2ways.First,the mean and standard deviation of the pixel intensities in the well were deter-mined using the public-domain image analysis package ImageJ (U.S.National Institutes of Health,available at https://www.wendangku.net/doc/c710282148.html,/ij).The standard deviation was squared to give the vari-ance for the pixel intensities in the well.Second,line plots were made from the pixel intensities along a vertical line drawn through the center of selected wells.The line plots were overlaid for com-parison of the “flatness”of the pixel intensities across the well in the vertical dimension.

RESULTS and DISCUSSION

Room temperature pre-incubation reduces edge effect

Pre-incubation of plates with newly seeded cells at room tem-perature (RT)has been suggested as a technique to control edge ef-fect in cell-based assays.9However,the technique has not previ-ously been documented in the literature.Here we have evaluated the effect of pre-incubation at RT further using a cell line derived from the CHO-hIRparent cell line.This cell line,CHO-hIRIR S1-GFP ,is stably transfected with an (IRS1)-GFP fusion protein,and it had been excluded from a cell-based HTS due to severe edge ef-fects and instability of the cell line.

Edge effect in multiwell plates were quantified by measuring cell plating consistency (number of cells per well)by using the DNA-binding nuclear stain,Hoechst 33258.11

Figure 1shows the effect of RT pre-incubations of 60,90,and 120min,respectively,on edge effect compared to control cells not pre-incubated at RT before placed in the CO 2incubator.The data are depicted as a surface graph with each square corresponding to the fluorescence intensity value of 1well.Based on these results,we decided to use 1h of RT pre-incubation before placing plates in the CO 2incubator.

Several additional experiments (data not shown)were per-formed in an attempt to further reduce or minimize the edge effect,including different plate stacking patterns (one-by-one,normal

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A. No pre-incubation

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F l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y

C. 90 min. pre-incubation

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B. 60 min. pre-incubation

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F l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y

D. 120 min. pre-incubation

FIG.1.Time course of CHO-hIRIR S1-GFP cells pre-incubated at different time intervals.CHO-hIRIR S1-GFP cells were seeded in 96-well

plates at 105

cells/well and treated as follows:no pre-incubation (A),60min (B),90min (C),or 120min (D)RT pre-incubation before a 24h 37°C,5%CO 2incubation.Cells were then fixed in the presence of 10μM Hoechst 33258before fluorescence was measured.

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stacking vs.cross-stacking),reducing the volume/well (100μl vs.200μl),changing trypsin concentrations upon trypsinization of cells prior to seeding (0.25%vs.0.05%),wrapping the plates in Sa-ran Wrap,which is CO 2permeable,versus no wrapping,and seed-ing of cells with a Multidrop dispenser versus manual multiwell pipetting.None of these parameters significantly affected the edge effect observed in our system further.Cells in edge wells distribute more evenly in RT pre-incubated plates

We used crystal violet staining to visualize cell localization in the wells of plates that were either pre-incubated at RT or placed directly in the 37°C incubator.Crystal violet binds to DNA and

yields intense purple staining of cell nuclei.12Figure 2A shows that cells in the outer wells of plates placed directly in the incubator are localized toward the periphery of the well nearest the edge of the plate.If the plates were pre-incubated for 1h at RT (Fig.2B),this pattern disappeared and the cells plated evenly in all wells.The composite images of the corner wells of control (Fig.2C)and pre-incubated (Fig.2D)plates show this difference in more detail.A representative central well plated uniformly in both cases.These differences in cell uniformity are quantified in Figure 3.

In support of the above observations,plates incubated in a CO 2incubator without a lid had the same reduced edge effect as plates pre-incubated at RT when measured with Hoechst 33258staining.Furthermore,an even cell pattern was observed when the cells were crystal violet stained (data not shown).

Lundholt et al.

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Journal of Biomolecular Screening 8(5); 2003

A B

C D

FIG.2.Crystal violet stained 96-well plates seeded with 105

cells/well and either placed directly in CO 2incubator (A),or pre-incubated for 1h at room temperature (B).Composite images of selected wells of the same 2plates are shown in panels (C)and (D).Each composite consists of wells A1,A12,E6,H1,and H12of the control and pre-incubated plates,respectively.A more uniform distribution of cells is evident in the corner wells of the pre-incubated plates.

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We have also investigated whether edge effect was due to differ-ences in cell motility between control and pre-incubated plates,by incubating plates at 37°C with a panel of cell motility inhibitors.Neither the myosin motility inhibitor wortmannin,the tubulin in-hibitor nocodazole,the actin cytoskeleton inhibitor cytochalasin B,nor the dynein motility inhibitor EHNA (erythro-9-[3-(2-hydroxy-nonyl)]adenine)had any effect on the cell pattern ob-served when placing the cell plates directly in the CO 2incubator (data not shown).

CONCLUSIONS

Our data indicate that room temperature pre-incubation reduces edge effect by minimizing thermal gradients in the edge wells of plates during the period between dispensing of the cell suspension into the wells and subsequent settling of cells to the bottom of the well and adhesion to the surface.Thermal gradients are greatest in the edge wells of plates,and they result in uneven distribution of the cells on the well bottoms.The uneven cell distribution in turn affects cell adhesion and morphology,and response to test compounds.

The data presented here show that pre-incubation of freshly seeded multiwell plates for 1h at RT before placing them in the CO 2incubator significantly reduces the edge effect for this class of cell-based assay.Room temperature pre-incubation of assay plates is a practical,inexpensive procedure that can significantly improve screening results for cell-based assays.The degree of effectiveness of this approach is likely to vary from one cell line to another,and it should be evaluated on a case-by-case basis before adoption.

ACKNOWLEDGMENTS

We thank Dr.Bob Terry for his helpful discussions,Anette Larsen for her technical assistance,and Drs.Morten Pr?stegaard and S?ren Jensby Nielsen for critical comments on the manuscript.

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Vertical Intensity Profile Across Well

Non-Incubated Plate

200400600800100012001400

160018002000P i x e l I n t e n s i t y

A1A12H1H12E6

A

Vertical Intensity Profile Across Well

Pre-Incubated Plate

200400600800100012001400

160018002000P i x e l I n t e n s i t y

A1A12H1H12E6

B

FIG.3.Overlaid intensity profiles across the wells shown in Figure 2C (A)and 2D (B).The profiles for the pre-incubated wells (B)are indistinguish-able,whereas the profiles for the control wells (A)can be clearly distinguished based on position on the plate.

at Seoul National University on April 3, 2009

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Betina Kerstin Lundholt

BioImage A/S

Moerkhoej Bygade28

DK-2860Soeborg,Denmark E-mail:betina.lundholt@https://www.wendangku.net/doc/c710282148.html,

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教练自查报告(共4篇)

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在台里我最需要感谢的就是您了。记得刚来台里那会,您就安排一名台里最优秀的摄影师带我,使得我才能成长这么快。 其实我也很不想离开台里,但是因为台里经常要出差,这一点对我对家庭都不是很好。我明白一个道理,既然你无法改变,你就只能选择沉默和离开,我选择了 第二种。在我办理辞职手续这段时间我会交出台里的电脑和摄影器材,也希望台长给我安排一名交接工作人员,以不至于在我离开后影响到台里的工作。 最后,还是希望台里越办好,同事们事事顺心。 此致敬礼!辞职申请人:20xx年4月10日篇3尊敬的领导:您好!首先,感谢您在百忙之中抽出时间阅读我的辞职信。俗话说:天下无不散之筵席。由于个人职业规划和一些现实因素,经过深思熟虑,我决定辞去所担任的汽车教练员岗位的工作。 我很遗憾自己在这个时候向您正式提出辞职,给管理所带来不便,深表歉意!此时我选择离开汽车教练员岗位,离开朝夕相处同事和无微不至的领导,并不是一时的心血来潮,而是我经过长时间考虑之后才做出的艰难决定。相信在我目前的汽车教练员岗位上,有很多同事可以做得更好,也相信您在看完我的辞职报告之后一定会批准我的申请。 转眼之间,在工作已经年,回首汽车教练员岗位工作和生活的点点滴滴,感慨颇多,有过期待,也有过迷茫,有过欢笑,也有过悲伤。

各个职业的辞职报告

各个职业的辞职报告 尊敬的总裁: 我是秘书处的文秘,很遗憾我递交了。我之所以辞职有以下三个原因; 第一、做为文秘,我觉得我大部分精力应该是处理文字上的东西,而不是陪客人应酬。 第二、我来公司都三年了,然而我的工资还是原地不动,我看到辞职的同事到新公司 工资都涨了很多。 第三、公司的奖罚绩效规定很不合理,罚的多,奖的少,没法做到公平。 综合以上三点,我实在无法在公司呆下去了,恳请总裁同事我的辞职申请。 辞职人:xx 尊敬的总经理: 您好!我是公关部经理,应递交到人力资源部,现公关部副经理已跟我在交接相关工作。××公司是一家纯正的公关公司,我在公司工作了五年,工作过程当中涉及范围却相 当广,所以在期间经历了很多东西,也学到了很多东西,与各位同事更是时间情意深厚, 也特别感谢陈总您提拔我为公关部经理。 公司里每一个人身上的优点及长处都值得我去学习。虽然我即将离开大家,也会到新 的公司,甚至到不同的行业,可我会一直牢记大家的教诲。 在公司期间与大家共同执行过很多的案子,影响力比较大的一个是北京车展,一个是XX年北京奥运会,然而在伦敦奥运会即将来临的案子,我却选择离开,因此深感对不起大家。希望伦敦奥会运项目的执行一切顺利,希望公司接下来的项目圆满成功! 辞职申请人:xx 台长: 您好!我是摄影师,已向人力资源部递交了。 在台里我最需要感谢的就是您了。记得刚来台里那会,您就安排一名台里最优秀的摄 影师带我,使得我才能成长这么快。其实我也很不想离开台里,但是因为台里经常要出差,这一点对我对家庭都不是很好。我明白一个道理,既然你无法改变,你就只能选择沉默和 离开,我选择了第二种。

在我办理辞职手续这段时间我会交出台里的电脑和摄影器材,也希望台长给我安排一 名交接工作人员,以不至于在我离开后影响到台里的工作。 最后,还是希望台里越办好,同事们事事顺心。 辞职人:xx 尊敬的店长: 你好!我是化妆品专柜营业员。由于受不了工作压力我不得不提出辞职,现已经在办 理辞职手续,相信也很快到店长您那儿。 在××商场工作五年,是我人生当中工作时间最长的一份工作。说实在的我离开有几 分不舍,然而现在商场竞争太激烈了,尤其化妆品这一块,销售不好,工资就上不去了, 连养活自已都成了问题,更别说养家糊口了啊。 不过还是要感谢店长您,感谢商场的全体员工,因为有你们的帮助,我的生活才会更 加的精彩。最后,希望商场能够在活动这方面多入手,增加人流量,仅此建议。 辞职申请人:xx 尊敬的话务组长: 你好!我是话务组二组,很遗憾告诉您,我要辞职了。由于一些原因未能将亲自交给您,望见谅。对待话务员这个工作,我感觉我不适合,因为我没有足够的耐心去应对客户,这也许是我辞职的主要原因,另外一个原因就是我想回重庆老家发展。不管怎么样,我在 话务组的日子还是挺开心的,虽然累点,但也知足了,希望姐妹们以后能够一样的开心。 这两天我已经把资料和电脑交给办公室保管了,等辞职手续完整了,我就离开。 辞职申请人:xx 尊敬的产品经理: 您好!我是天龙八部游戏推广二部的xx,已向人力资源部递交,现由推广二部接替我 的工作。 很感谢推广二部的全体同仁对我一直的照顾与鼓励,因为游戏推广工作压力实在太大了,要不我早就撑不住了。作为一名游戏推广者,不仅需要了解游戏,而且还需要很多营 销的技巧,个人感觉我不具备这样子的能力。对于辞职而言,我感觉对我和公司都是一件 好事,因为再这样子下去,我受不了压力,也会对公司造成不必要的损失。辞职以后我将 会交出公司给我的电脑还有文具之类的,并移交到办公室。 最后希望公司越办越好,在网游界更上一层楼。 辞职申请人:xx

驾校教练个人工作辞职报告

驾校教练个人工作辞职报告 驾校教练辞职报告1 尊敬的驾校领导: 你好!我是驾校教练,由于受不了工作压力我不得不提出辞职,现已经在办理辞职手续,相信辞职报告也很快到领导您那儿。 在驾校工作五年,是我人生当中工作时间最长的一份工作。说实在的我离开有几分不舍,然而现在驾校竞争太激烈了,尤其驾校教练这一块,学生不好,工资就上不去了,连养活自已都成了问题,更别说养家糊口了啊。 不过还是要感谢驾校领导您,感谢驾校的全体员工,因为有你们的帮助,我的生活才会更加的精彩。最后,希望驾校能够在活动这方面多入手,增加人流量,仅此建议。 此致 敬礼 ______ 日期 驾校教练辞职报告2 尊敬的驾校领导: 您好!我是驾校______,已向人力资源部递交辞职报告,现由______接替我的工作。

很感谢________的全体同仁对我一直的照顾与鼓励,因为______工作压力实在太大了,要不我早就撑不住了。作为驾校教练,不仅需要了解教学,而且还需要很多营销的技巧,个人感觉我不具备这样子的能力。对于辞职而言,我感觉对我和公司都是一件好事,因为再这样子下去,我受不了压力,也会对公司造成不必要的损失。辞职以后我将会交出公司给我的电脑还有文具之类的,并移交到办公室。 最后希望公司越办越好,在驾校界更上一层楼。 此致 敬礼 ______ 日期 驾校教练辞职报告3 敬爱的领导: 我是驾校教练______,在健身馆工作三年,现申请辞职,这份辞职报告同样也有一份交给人力资源部。近来由于馆内来学车的人较少,奖金也少,自我感觉呆不下去了,故申请辞职。 其实在馆里一直都还不错,同事之间都很融洽,可以不管怎么样,打工不都就是为了赚钱嘛,还是需要现实一点的了。最后,希望馆长尽快找教练好接替我,接着上这期学员的课。 此致 敬礼

辞职报告样本模板

辞职报告样本模板 辞职报告样本模板一 亲爱的xx领导: 您好! 去年的这个时候,一次偶然的机会来到了陌生的**、陌生的xx,那时候xx给我留下深刻的印象,oa、sap等信息化产品的实施在一个民企成功实施实属不易。就这样在三个月前,怀着美好的理想来到了xx。随着时间的推移,熟悉了宁波、熟悉了北仑、熟悉了xx,也熟悉了自己的需要。我需要的是一个更有竞争,更有压力的工作,我不想在刚毕业的时候就失去对工作的激情。前一阵子跟同学聊天,同学说我不应该选择宁波,宁波不是我的归宿,当同学滔滔不绝的说自己的工作,我显的很兴奋而又有些失落,的确,我不应该选择安稳,我需要一份充满激情的、能让自己感到无穷动力的工作。 可能刚毕业的我还有很多学生气,但是我还是坚定自己的选择。做出这个决定有着多方面的原因: 首先是个人的原因,目前女朋友在浙江大学读博士,我需要不断的补充自己的知识储备,这个在目前情况下实现不了,还有两个人距离问题现在也产生了一些问题; 第二、对于目前在车间的实习工作,我感到很不适应,跟车间的工人师傅沟通交流不畅,我是赞同必须经过车间的锻炼的,但是现在自己的效率太低,我不允许自己这样在浪费自己的青春; 第三、经过几个月的熟悉现在也明确了自己以后工作的内容,对于以后的工作我明显缺乏兴趣,这份工作激不起自己的激情,我一直想让自己兴奋起来,但是努力了还是不行; 第四、目前的工作跟我的理想有明显的差距,我感觉自己是一个能踏实工作但也在不断追求最新技术的人,学历只是判断人的一个很小的标准,但我在这里真是感觉自己不能充分的展现自己的能力,实现不了自己的人生价值,干的工作和市场

开发部的本科生没有差别; 第五、我相信您给我的年薪承诺,但是现在在华远的本科生的月薪居然比研究生还高,我感觉自己的自尊心受到了打击。的确,目前自己还没有为公司创造价值,一个月拿xx多块钱似乎也有点多的,但是xx钱对于离我的目标和能力是有较多的差距的。 虽然只有匆匆的三个多月时间,我还是有幸得到了各位领导和同事的倾心指导和热情帮助,学到了一些科研经验和实践技能。在这里特别感谢华远技术部的xx 领导、康盛姐、叶冠密姐和市场开发部的阎伟领导、郑波、盛俊姐。感谢所有给予过我帮助的同事们。 再次表示非常的抱歉,在公司面临严峻挑战的时刻离开xx公司。祝您身体健康,事业顺心。并祝xx公司事业蓬勃发展。 此致 敬礼! 辞职申请人: XX年XX月XX日 辞职报告样本模板二 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,获得x总和集团的理解和批准,并于12月9日老xx先生莅临之高级经理全体会议中宣布。很荣幸再次获得老xx总裁对我过去近7年贡献的褒奖,感谢和祝福。我想这也是对所有同仁和代理商及客户朋友的荣誉。在此我想感谢各位这么多年一直忠诚地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的支持! 年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成为一家 ! 我要感谢上帝的赐福有6年的平顺和今年的艰难,让我学习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。 在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,盼望生喜乐,喜乐生

驾校教练辞职报告8篇

驾校教练辞职报告8篇 驾校教练辞职报告1 尊敬的驾校领导: 你好!我是驾校教练,由于受不了工作压力我不得不提出辞职,现已经在办理辞职手续,相信辞职报告也很快到领导您那儿。 在驾校工作五年,是我人生当中工作时间最长的一份工作。说实在的我离开有几分不舍,然而现在驾校竞争太激烈了,尤其驾校教练这一块,学生不好,工资就上不去了,连养活自已都成了问题,更别说养家糊口了啊。 不过还是要感谢驾校领导您,感谢驾校的全体员工,因为有你们的帮助,我的生活才会更加的精彩。最后,希望驾校能够在活动这方面多入手,增加人流量,仅此建议。 此致 敬礼 xxx 日期 驾校教练辞职报告2 尊敬的驾校领导: 您好!我是驾校XXX,已向人力资源部递交辞职报告,现由xxx接替我的工作。 很感谢xxxx的全体同仁对我一直的照顾与鼓励,因为xxx工作压力实在太大了,要不我早就撑不住了。作为驾校教练,不仅需要了解教学,而且还需要很多营销的技巧,个人感觉我不具备这样子的能力。对于辞职而言,我感觉对我和公司都是一件好事,因为再这样子下去,

我受不了压力,也会对公司造成不必要的损失。辞职以后我将会交出公司给我的电脑还有文具之类的,并移交到办公室。 最后希望公司越办越好,在驾校界更上一层楼。 此致 敬礼 xxx 日期 驾校教练辞职报告3 敬爱的领导: 我是驾校教练XXX,在健身馆工作三年,现申请辞职,这份辞职报告同样也有一份交给人力资源部。近来由于馆内来学车的人较少,奖金也少,自我感觉呆不下去了,故申请辞职。 其实在馆里一直都还不错,同事之间都很融洽,可以不管怎么样,打工不都就是为了赚钱嘛,还是需要现实一点的了。最后,希望馆长尽快找教练好接替我,接着上这期学员的课。 此致 敬礼 xxx 日期 驾校教练辞职报告4 尊敬XXX 你好! 我很遗憾自己在这个时候向公司提出辞职。 天下没有不散的宴席,在此,我不想过多的煽情,我为我曾经是

辞职报告 2020学校体育老师述职报告

2020学校体育老师述职报告 xx学校体育老师述职报告一 德:一年来,能积极参与学校组织的政治学习,业余时间也能通过报纸、电视、网络等多种媒体学习了解党和国家的方针政策,关心国家大事,并力所能及的积极参与到其中。在教师职业道德建设、爱心奉献战胜雪灾、迎接奥运维护稳定、凝心聚力支援抗震救灾等活动中能做到一名党员教师应尽的义务,积极参与各种活动并积极工作。教育教学中能恪守教师职业道德,遵守学校的管理制度,以庐中主人翁的精神积极工作,团结每一名同事,关爱每一名学生,没有和任何教师有工作之外的任何矛盾,没有任何体罚或者变相体罚学生的现象,尊重领导,尊敬同事,平等等待学生,也因此获得了领导的信任、同事的协作、学生的敬重,此为在庐中工作的最大收获。 能:本年度除了担任八年级五个班的体育教学之外,还在学校教导处的组织下与罗春光老师结成对子开展教学互进活动。一年来我和罗老师虽然很少开展坐下来共同探讨教学方略的正规活动,但基本上做到了上课互听,随时互助,即使反馈。我的教学经验帮助了罗老师快速成长,罗老师的年轻活力和新思维也促进了我能保持更新理念去审视自己的教学,真正起到了教导处开展结对子的预期目的。在学校艺体教研组中,自认为能起到一名教学经验丰富一些的年长教师的核心作用,无论是学校田径运动会、创编操比赛以及其他教研活动,都能团结协助教研组长开展工作,积极出谋划策,尤其是在九年级课

余体育锻炼中起到带头作用,促进了艺体教研组的强大凝聚力和战斗力的形成。五个班的体育教学工作应该说已然驾轻就熟,学生上课的积极性和各项身体素质的不断提高给了我最大的教学热情。教学的同时我很重视教育的引领作用,不让课堂发生的一些教育问题过夜,更不会随便让这些问题转交到班主任手中去处理,平时注意保持和班主任的交流,全方位多角度去了解认识自己的学生,避免了很多因为教师主观而导致的师生对立的情况发生,再此,我要衷心感谢和我搭班的各位班主任,因为你们的积极协作,才让我的课堂成为学生放松精神娱乐身心锻炼身体的场所。 勤:一年来能做到早到迟走,能遵守学校各项规章制度,有事必事先请假,遇到工作和家庭冲突的时候,能在保证圆满完成工作的前提下协调好二者的关系,所以在面对母亲患病住院和孩子生病的特殊情况下,本年度也只断断续续请假四天半。在校期间,无论是否自己值班,都能保持每天巡视学校几次,观察学校整体情况,发现问题能积极和相关部门反映并协助处理。身为工会副主席,能在第一时间对教师发生的婚丧嫁娶生病住院等情况进行了解,并能组织学校行政进行相应的慰问。面对我校首届毕业班,能根据自己的教学经验积极帮助毕业班开展体育中考的训练工作,不计报酬不计时间按照计划不折不扣的去完成各项工作。 绩:教师的成绩就是学生的不断成长和提高。一年来各项工作不能说取得了什么成绩,只是基本上达到了预定的工作目标。八年级的体育教学起到了促进健康增强体质提高技能的效果,相对于7年级,

高中学校老师辞职报告2020.doc

高中学校老师辞职报告2020 尊敬的领导: 您好! 我是高三年级xx班级和xx班级的体育老师,我叫xx。我在学校里面工作已经快三年了的时间了。我很感激当初学校领导能给我进行当一名体育老师的机会,让我又能回到学校,感受青春的气息,虽然我的身份不再是一名学生,但是作为一名老师,能陪着同学们一起成长,我也感觉很开心。只是开心和快乐是一回事情,挣钱养家就是另外一件事情了。因为在学校里作为一名体育老师的工资并不是很高,虽然够我一个人吃喝是够用,但是今年却不同于往年。今年我结婚了,并且我的妻子已经怀孕五个月了。这不仅是我一个人要吃喝,我还要肩负起我整个家庭生活开销的重担。 以前我挣点钱随便花花都行,但是我现在我有了老婆,有了家,我就要开始为我的家庭着想,为我们以后的生活着想。现在物价又这么高,随便买点吃的穿的就可以花掉我大半个月的工资,更何况还过几个月,我儿子就要出生了。他的奶粉钱,准备他的尿不湿钱都是一笔不小的开销,更何况以后他还要读书,还要交学费等等这些,我都不得不去考虑,不得不去提前为他去准备好。所以仅仅靠我在学校里面的工资是不太可能攒到我儿子以后读书要用到的钱,连维系我们以后一家人的生活开销都有点困难,所以面对这个无情的现实生活,我不得不辞掉我喜爱的教师工作,不得不去换一份更高薪,更有前途的工作。 我是这样考虑的,等我辞职以后,我会利于我自身的一个优势去找到一个健身房教练这样的职位,或者是私人教练这样的职位。然后通过我自己的宣传和销售,拿到健身房的高额提成。这样我的工资不仅能提高,我还能积攒到很多人脉资源。等到在健身房干了几年后,我的经验有了,我的客户资源也有了,到了那个时候,我就会开始着手合伙和朋友开健身房的事情。

领导辞职报告三篇

领导辞职报告三篇 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,获得x总和集团的理解和批准,并于12月9日老XX先生莅临之高级经理全体会议中宣布。很荣幸再次获得老xx总裁对我过去近7年贡献 的褒奖,感谢和祝福。我想这也是对所有同仁和代理商及 客户朋友的荣誉。在此我想感谢各位这么多年一直忠诚 地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的支持! 6年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成为“ 一家”!我要感谢上帝的赐福有6年的平顺 和今年的艰难,让我学习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,盼望生喜乐,喜乐生力量。感谢神常保守我的心思意念能平衡和平安喜乐。说这些不是我已完全得着,乃是仍在学习中,更愿大家共勉之,生出 信心、盼望和力量来面对困难。记住“我们的队伍只要目 标明确,一定可以达成的”。这6年来工作确实辛苦,但心中一直是热情洋溢的,好像在打篮球比赛一样,回想起

来,初时我打中锋或大前锋,带领大伙冲锋陷阵,3xxe文档频道远投近切,直闯禁区,屡屡得分,其次我换位成控球后卫,组织全场攻防战术及实施。之后,我自觉地开始打“教练”了,最大的不同在教练不只关心赢每一场球,更关心他的球员在各方面的成熟与成长,以及真团队的建立。因为这才是立于不败之地的关键,也是人生最丰富有趣的部分。 最终,我再一次换位了,这次我选择坐在观众席上,成为球迷啦啦队的一员,不时向场中投以关注的眼神和喝彩,只要大家认真尽力了,不论输赢,我保证给予所有的队员最温暖的怀抱。 这个工作我很清楚是上帝赏赐的,而今年以来,内、外部环境的变化令我心生倦怠,很多地方实际上也使不上力,因此常切切向神祷告,求问神兴起这样的环境是不是要我离开的意思? 终于神依我祷告的要求,给我清楚的印证,我 知道是我该下台一鞠躬的时候了。很快地我就向x总提出 了辞呈,但为了让x总有时间空间来处理,以及尽量降低不必要的震荡,我很抱歉在未得公司许可之前,我不能向各位透露,请诸位谅解谅解。 xx这列快速火车正缓缓进站,我听到了广播,知道我的目的地已到,我将直奔家门,正可多陪陪家人,休养休养身体,等待上帝带领我乘下一次列车,展开惊喜丰盛之旅;就在下火车门之前蓦然回首,3xxe文档频道瞥见同车的诸多患

部门经理辞职报告范本

The laborer applies to the employer to terminate the labor relationship and both parties negotiate to terminate labor contract. 姓名:___________________ 单位:___________________ 时间:___________________ 部门经理辞职报告

编号:FS-DY-44263 部门经理辞职报告 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,获得x总和集团的理解和批准,并于12月9日老xx先生莅临之高级经理全体会议中宣布。很荣幸再次获得老xx总裁对我过去近7年贡献的褒奖,感谢和祝福。我想这也是对所有同仁和代理商及客户朋友的荣誉。在此我想感谢各位这么多年一直忠诚地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的支持! 年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成为一家! 我要感谢上帝的赐福有6年的平顺和今年的艰难,让我学习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。 在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,

盼望生喜乐,喜乐生力量。感谢神常保守我的心思意念能平衡和平安喜乐。说这些不是我已完全得着,乃是仍在学习中,更愿大家共勉之,生出信心、盼望和力量来面对困难。 记住我们的队伍只要目标明确,一定可以达成的。这6年来工作确实辛苦,但心中一直是热情洋溢的,好像在打篮球比赛一样(我喜欢打篮球嘛!),回想起来,初时我打中锋或大前锋,带领大伙冲锋陷阵,办公之家远投近切,直闯禁区,屡屡得分,其次我换位成控球后卫,组织全场攻防战术及实施。 之后,我自觉地开始打教练了,最大的不同在教练不只关心赢每一场球,更关心他的球员在各方面的成熟与成长,以及真团队的建立。因为这才是立于不败之地的关键,也是人生最丰富有趣的部分。最终,我再一次换位了,这次我选择坐在观众席上,成为球迷啦啦队的一员,不时向场中投以关注的眼神和喝彩,只要大家认真尽力了,不论输赢,我保证给予所有的队员最温暖的怀抱。 这个工作我很清楚是上帝赏赐的,而今年以来,内、外部环境的变化令我心生倦怠,很多地方实际上也使不上力,

驾校教练协议书(完整版)

(声明:所提供的标准合同或协议文本及具体条款,不是最终法律文本,仅供参考,不建议直接使用,建议根据实际情况,在法律专业人士的指导下进行修改后再使用,就该合同不承担任何法律责任。) 驾校教练协议书 甲方:_________________________________________________ 乙方:_________________________________________________ 安全是人民家庭生活幸福的前提和基础,是社会稳定和发展的保障。构建无交通安全事故的和谐社会,是我们每个人的愿望。 一、教练员宗旨: 倡导安全驾驶,责任如山! 提高从业素质,以身作则! 提供优质服务,诚实守信! 教学时间:8:00-11:30 14:00-18:00(场地和路训可以此时间为参照,根据天气 情况进行微调,但是必先汇报领导和通知学员) 二、教练车辆管理: 1、每个教练负责一部车辆的使用和管理,要求教练车要保持干净整洁,正常保养。 2、每部车管理到位以便减少非必要的磨损和维修。若因教练管理和跟踪不到位造成损坏,该车负责的教练员承担相应的损失。 3、教练车主要是用于教学之用,若是有需要用车的教练员,需要提前向相关领导申请汇报,经批准后才能领用车辆。若本公司教练员未经同意私自用车,本公司有权追究并警告处

分,及罚款该教练员500-1000元,并在公司做通告批评。 三、教练员的职责和职业规范: 1、本公司所有教练员不得受贿于学员,不得向学员收取礼物、烟酒等礼品,不得向学员收取任何不合理的费用。若有违规行为,经公司查实,处于罚款1000元,影响严重者直接辞退。 2、教练员的教学要认真、严格、耐心教学,不可马虎大意,因学员的年龄、性格、文化水平各不相同,教练应针对性因材施教,正确教学。 3、教学中,教练员应规范教学、尊重学员、保证学员学习时间、服务学员以便提高教学质量和效率。 4、关于学员投诉问题,经本公司管理人员查实,有权对教练员进行停职再教导,若是屡教不改,本公司有权对该教练员进行警告处分并罚款100-500元或辞退。 5、本公司若有召开会议,所有职员必须到场,无故缺席者,罚款100元/次。 6、本公司职员要辞职,需要提前一个月提交辞职信,并移交相关资料和财物。若是没有提前请辞,本公司有权扣留相应工资做抵押。 7、作为本公司教练员,应严格遵守公司规章制度,严格遵守法律法规,若有违规驾驶、酒驾、醉驾等行为,该教练员应负全部责任,情节严重者,公司有权直接辞退,永不聘用。 8、教练员应对本公司的政策、工资待遇及相关内部资料进行保密。若有泄密者,公司有权罚款500-1000元,情节严重者,直接送公安机关处理。 本协议本着双方友好合作签订(签订日期起生效),一式两份,双方各执一份。如果产生关于本协议存在、效力、履行、解释、终止的争议,双方通过友好协商解决,如果争议不能决解或一方拒绝协商,则任何一方均可诉请本协议鉴定地人民法院裁决。 甲方:年月日 乙方:年月日

实用的销售辞职报告三篇

实用的销售辞职报告三篇 实用的销售辞职报告三篇 企业员工离职,属于一种正常的现象,可能会由于某些问题而辞职,这时就要思考一下写辞职报告的事情了。你想知道辞职报告怎么写吗?以下是小编收集整理的销售辞职报告3篇,欢迎阅读,希望大家能够喜欢。销售辞职报告篇1 尊敬的公司领导:您们好!在经过我的考虑和公司的实际情况之后,我决定向公司提出辞职申请。递交这份辞呈时,我的心情十分沉重。现在公司的发展需要大家竭尽全力,由于我身体状态不佳,和一些个人原因的影响,无法为公司做出相应的贡献,自已心里也不能承受现在这样坐在公司却无所作为,因此请求允许离开。面对房地产冰期的阴霾,为了节约成本与人力支出,并消除职场疲钝所产生的“7年之痒”,在第一个法定xx节刚刚结束之时,我不得不遗憾而凄婉地正式向xx地产提出辞呈。在过去的6年中,xx地产给予了我很多很多,尤其是把我从一个房地产门外汉培养成了业内的专业人士。为此,我将永远对xx地产充满感激之情,这种情愫亦将永远伴随我未来的人生旅程。 xx年x月x日,是我永生难忘的日子,因为这一天是我到xx地产报到的日子,它将永远定格在我的记忆深处。20xx年x月x日,也将是我不会忘记的日子,因为这一天我正式向xx地产提出辞呈,它同样会铭刻在我的脑海之中。除了父母与自己的生日以外,我还将永远记住前述两个日子。因为这几个日子,要么赋予我生命,要么改变我人生,要么使我懂得为人的基本准则—孝道。尽管如此,天下没有不散的宴席,世上没有不谢的花朵,为了自己自以为是的未来,我也必须向xx地产提出辞呈,并按公司的规定办理离职手续。在xx地产的6年,是我努力的6年、学习的6年、进步的6年、感动的6年,也是刻骨铭心的6年。多少风雨历程,多少日日夜夜,多少同仁们夜以继日、日以追夜的共同作战场面,多少始于惊心动魄终于喜笑颜开的事件,多少……令人数不胜数的感人场景,一出出、一幕幕,似乎随时都在我的眼前闪现,让人荡气回肠,令人浮想联翩。人生没有多少6年,也没有多少能有深刻记忆的6年,但在xx地产的6年,也许将成为我生命中最为闪光和值得回味的6年。xx地产的未来还很漫长,我的人生也还很漫长。

【实用】销售辞职报告范文汇总5篇

【实用】销售辞职报告范文汇总5篇 【实用】销售辞职报告范文汇总5篇 在一个职场工作几年后,我们或许会因为寻求更好的地方而选择离职,为此很有必要写好辞职报告。你想知道辞职报告怎么写吗?下面是WTT为大家整理的销售辞职报告5篇,供大家参考借鉴,希望可以帮助到有需要的朋友。 销售辞职报告篇1 在××公司整整4年半的光阴,今天,我还是遗憾地向公司提出了辞职! 辞职对我而言是种近乎挣扎与痛苦的抉择,销售辞职报告。自20xx年8月加入公司,几年来,我从一个普通职员成长为一名管理者,其中,接受到的公司文化魅力、生活理想和强大的团队力量,使我如此不舍和铭记,还有简单不过的人际关系和温情的工作氛围。 但是,在长期的纷繁复杂的品牌管理及媒体公共关系维护工作中,让我这个销售的老兵都感到个人身心已陷入极度的疲乏,各种方式的自我调节仍然无法做到像4年前那样畅快淋漓地工作,谓之的“战斗”。大量的媒体关系和品牌利弊带来的丝毫反应,都让我充满焦灼、烦躁、紧张、下班后的抑郁……甚至恐惧这类工作带来的自我迷失与内心膨胀,虽然,我敬畏于我的工作及关联的一切。

我想,这应该是一名品牌管理者怀揣的责任和对置信品牌的热爱,这应该是一名普通职员的诚实与真实面对。 感谢××,感谢董事长,感谢公司的全体同仁。希望我的辞职申请董事长能够批准。 辞职申请人: 年月日 销售辞职报告篇2 张总: 非常感谢您在我人生最困难的时候给了我这个平台,让我能在宝马这样一个优秀汽车品牌中学习和成长。在过去两个工作过程中我给公司添了很多麻烦,大部分都是由于自身能力不足造成的,在此深表抱歉!这个也是我辞职最主要原因。 过去,我总是把自己的挫折和失败归结于命运,经过这一段时间的反思和总结,我觉得是性格和品格的问题。张总,那天打电话给您,您以长者的身份对我的批评和指正,给了我很大的触动。是的,一个连责任感都没有的人是不可能完成永久的事业的。我一定会谨记您给我的教诲,努力将自己塑造成一个有责任感并具有高尚道德情操的人。为了给公司一个说法,我自已提出辞职。 祝公司汽车销售再创佳绩,祝张总以及张总家人身体健康、万事如意! 敬礼!

教练辞职报告范例

教练辞职报告范例 篇1 尊敬的领导: 您好! 首先,感谢您在百忙之中抽出时间阅读我的辞职信。俗话说:天下无不散之筵席。由于个人职业规划和一些现实因素,经过深思熟虑,我决定辞去所担任的机动车驾驶教练员岗位的工作。我很遗憾自己在这个时候向您正式提出辞职,给×××管理所带来不便,深表歉意!此时我选择离开机动车驾驶教练员岗位,离开朝夕相处同事和无微不至的领导,并不是一时的心血来潮,而是我经过长时间考虑之后才做出的艰难决定。相信在我目前的机动车驾驶教练员岗位上,×××有很多同事可以做得更好,也相信您在看完我的辞职报告之后一定会批准我的申请。 转眼之间,在×××工作已经×年,回首机动车驾驶教练员岗位工作和生活的点点滴滴,感慨颇多,有过期待,也有过迷茫,有过欢笑,也有过悲伤。 ×××机动车驾驶教练员岗位工作是我职业生涯中珍贵而十分有意义的开端。在领导、同事的关怀指导和帮助下,使我成为一名具有一定实际工作能

篇2 台长: 您好!我是摄影师XXX,已向人力资源部递交了辞职报告。 在台里我最需要感谢的就是您了。记得刚来台里那会,您就安排一名台里最优秀的摄影师带我,使得我才能成长这么快。其实我也很不想离开台里,但是因为台里经常要出差,这一点对我对家庭都不是很好。我明白一个道理,既然你无法改变,你就只能选择沉默和离开,我选择了第二种。在我办理辞职手续这段时间我会交出台里的电脑和摄影器材,也希望台长给我安排一名交接工作人员,以不至于在我离开后影响到台里的工作。最后,还是希望台里越办好,同事们事事顺心。 此致 敬礼! 辞职申请人: 20xx年4月10日 篇3 尊敬的'领导: 您好! 首先,感谢您在百忙之中抽出时间阅读我的辞职信。俗话说:天下无不散之筵席。由于个人职业规划和一些现实因素,经过深思熟虑,我决定辞去所担任的汽车教练员岗位的工作。

教育机构辞职报告

教育机构辞职报告 教育机构辞职报告(一)——市场部经理/主管 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,在此我想感谢各位这么多年一直忠诚地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的 支持! xx年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成 为“一家”!我要感谢上帝的赐福有xx年的平顺和今年的艰难,让 我学习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多 何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对 每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。 在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,盼望生喜乐,喜乐生力量。说这些不是我已完全得着,乃是仍在学习中, 更愿大家共勉之,生出信心、盼望和力量来面对困难。记住“我们 的队伍只要目标明确,一定可以达成的”。这xx年来工作确实辛苦,但心中一直是热情洋溢的,好像在打篮球比赛一样(我喜欢打篮球 嘛!),回想起来,初时我打中锋或大前锋,带领大伙冲锋陷阵,远 投近切,直闯禁区,屡屡得分,其次我换位成控球后卫,组织全场 攻防战术及实施。之后,我自觉地开始打“教练”了,最大的不同 在教练不只关心赢每一场球,更关心他的球员在各方面的成熟与成长,以及真团队的建立。因为这才是立于不败之地的关键,也是人 生最丰富有趣的部分。最终,我再一次换位了,这次我选择坐在观 众席上,成为球迷啦啦队的一员,不时向场中投以关注的眼神和喝彩,只要大家认真尽力了,不论输赢,我保证给予所有的队员最温 暖的怀抱。 今年以来,内、外部环境的变化令我心生倦怠,很多地方实际上也使不上力,我知道是我该下台一鞠躬的时候了。

驾校教练辞职报告8篇

驾校教练辞职报告8篇 驾校教练辞职报告1尊敬的领导: 您好! 由于你对我能力的信任,自20xx年x月份进入XX驾校,到现在已有一年多的时间,我一直都很享受这份工作。 在驾校的过去一年多的时间里,利用驾校给的良好学习和锻炼时间,我学到了很多新东西充实了自己,并增加自己的一些知识和实践经验。我对于驾校的照顾表示真心的感谢!今天我选择离开并不是我对现在的工作的畏惧,承受能力不行。经过这阵的思考,我觉得离我所追求的目标越来越远。人如果没有追求,她的生活很乏味,相信公司领导会给予谅解。 此致 敬礼 xxx 日期 驾校教练辞职报告2驾校校长: 您好!我是驾校XXX,已向人力资源部递交了辞职报告。 在台里我最需要感谢的就是您了。记得刚来台里那会,您就安排一名台里最优秀的驾校教练带我,使得我才能成长这么快。其实我也很不想离开驾校里,但是因为台里经常要出差,这一点对我对家庭都不是很好。我明白一个道理,既然你无法改变,你就只能选择沉默和

离开,我选择了第二种。在我办理辞职手续这段时间我会交出教练车,也希望台长给我安排一名交接工作人员,以不至于在我离开后影响到台里的工作。 最后,还是希望驾校里越办好,同事们事事顺心。 此致 敬礼 xxx 日期 驾校教练辞职报告3尊敬的驾校领导: 你好!我是驾校教练,由于受不了工作压力我不得不提出辞职,现已经在办理辞职手续,相信辞职报告也很快到领导您那儿。 在驾校工作五年,是我人生当中工作时间最长的一份工作。说实在的我离开有几分不舍,然而现在驾校竞争太激烈了,尤其驾校教练这一块,学生不好,工资就上不去了,连养活自已都成了问题,更别说养家糊口了啊。 不过还是要感谢驾校领导您,感谢驾校的全体员工,因为有你们的帮助,我的生活才会更加的精彩。最后,希望驾校能够在活动这方面多入手,增加人流量,仅此建议。 此致 敬礼 xxx 日期

辞职报告范文辞职信

辞职报告范文辞职信 导读:范文辞职报告范文辞职信 【篇一:银行信贷员辞职报告】 敬的中国银行领导: 您好! 我带着复杂的心情写这封辞职信。由于中国银行对我能力的信任,使我得以加入中国银行,并且在这段时间里我获得了许多机遇和挑战。在中国银行从事工作的日子里,我学到了很多知识、积累了一定的经验。对此我深怀感激! 记得我刚刚来中国银行的时候,一点经验都没有,都是中国银行领导的耐心教导下,我才会一点一点地在进步。也许、我会经历过很多的困难,但我都会努力克服它。 现在,由于工作压力太大,我想休息一段时间,特向您提出辞职,望能谅解,请批准。 在此,我祝中国银行事事顺利!

至此 敬礼! 辞职人:XXX 20XX年X月X日 【篇二:销售经理辞职报告】 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,获得X总和集团的理解和批准,并于12月9日老XX先生莅临之高级经理全体会议中宣布。很荣幸再次获得老XX总裁对我过去近7年贡献的褒奖,感谢和祝福。我想这也是对所有同仁和代理商及客户朋友的荣誉。在此我想感谢各位这么多年一直忠诚地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的支持! 6年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成为“一家”!我要感谢上帝的赐福有6年的平顺和今年的艰难,让我学

习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,盼望生喜乐,喜乐生力量。感谢神常保守我的心思意念能平衡和平安喜乐。说这些不是我已完全得着,乃是仍在学习中,更愿大家共勉之,生出信心、盼望和力量来面对困难。记住“我们的队伍只要目标明确,一定可以达成的”。这6年来工作确实辛苦,但心中一直是热情洋溢的,好像在打篮球比赛一样,回想起来,初时我打中锋或大前锋,带领大伙冲锋陷阵,远投近切,直闯禁区,屡屡得分,其次我换位成控球后卫,组织全场攻防战术及实施。之后,我自觉地开始打“教练”了,最大的不同在教练不只关心赢每一场球,更关心他的球员在各方面的成熟与成长,以及真团队的建立。因为这才是立于不败之地的关键,也是人生最丰富有趣的部分。最终,我再一次换位了,这次我选择坐在观众席上,成为球迷啦啦队的一员,不时向场中投以关注的眼神和喝彩,只要大家认真尽力了,不论输赢,我保证给予所有的队员最温暖的怀抱。 这个工作我很清楚是上帝赏赐的,而今年以来,内、外部环境的变化令我心生倦怠,很多地方实际上也使不上力,因此常切切向神祷告,求问神兴起这样的环境是不是要我离开的意思?终于神依我祷告的要求,给我清楚的印证,我知道是我该下台一鞠躬的时候了。很快地我就向X总提出了辞呈,但为了让X总有时间空间来处理,以及尽

2020年优秀的辞职报告范文

2020年优秀的辞职报告范文 尊敬的领导: 我很遗憾自己在这个时候向公司正式提出辞职申请。来到福建宁德核电有限公司已经 两年了,正是在这里我开始踏上了社会,完成了自己从一个学生到社会人的转变。有过欢笑,有过收获,也有过泪和痛苦。公司平等的人际关系和开明的工作作风,一度让我有着 找到了依靠的感觉,在这里我能开心的工作,开心的学习。 然而工作上的毫无归属感总让自己彷徨。记得有位智者曾说过,工作上如果两年没起 色就该往自己身上找原因了。或许这真是对的,由此我开始了思索,认真的思考。尽管我 一思考,上帝便会发笑,但这笑带着一丝苦涩,思考的结果连自己都感到惊讶DD或许自 己并不适合这项工作,连续的倒班已经使我的身体吃不消。否定自己让自己很痛苦,然而 人总是要面对现实的,自己的兴趣是什么,自己喜欢什么,自己适合做什么,这一连串的 问号一直让我明白该怎么做,也让我萌发了辞职的念头,并且让我确定了这个念头。或许 只有重新再跑到社会上去遭遇挫折,在不断打拼中去寻找属于自己的定位,才是我人生的 下一步选择。 从小到大一直过得很顺,这曾让我骄傲,如今却让自己深深得痛苦,不能自拔,也许 人真的要学会慢慢长大。我也很清楚这时候向公司辞职于公司于自己都是一个考验,公司 正值用人之际,一号机组刚刚大修结束,接着便是二号机组大修以及三号机组的热试、装料,所有的工作在公司上下极力重视下一步步推进。也正是考虑到公司今后发展的合理性,本着对公司负责的态度,为了不让公司因我而造成损失,我郑重向公司提出辞职。能为公 司效力的日子不多了,我一定会把好自己最后一班岗,做好项目开始前的属于自己的所有 工作。 非常感谢领导给予在××工作的机会以及在这两年里对我的帮助和关怀!由于某些原因,今天我在这里提出辞职申请,希望我的辞职申请能够得到公司的批准。 离开公司,离开这些曾经同甘共苦的同事,很舍不得,舍不得领导们的谆谆教诲,舍 不得同事之间的那片真诚和友善。也愿公司在今后的工作中发挥优势,扬长避短,多为员 工着想,祝愿公司兴旺发达! 此致 敬礼 在此期间深知背后领导的信任与栽培,同事们的支持与帮助。转眼在公司已有一年多 时间,不管是工作实践还是工作技能培训让我受益颇深,各方面能力都得到了很大的提高,对于公司领导对员工的技能培训表示感谢。在公司的工作很充实、愉快,同事们的支持与 帮助在此表示感谢。尤其是杜总平时的教导与栽培,平时工作中的不足,还望谅解。

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亲爱的朋友,很高兴能在此相遇!欢迎您阅读文档汽车4s 店辞职报告范文,这篇文档是由我们精心收集整理的新文档。相信您通过阅读这篇文档,一定会有所收获。假若亲能将此文档收藏或者转发,将是我们莫大的荣幸,更是我们继续前行的动力。 汽车4s店辞职报告范文 在现实生活中,越来越多的事务都会使用到报告,报告中提到的所有信息应该是准确无误的。我敢肯定,大部分人都对写报告很是头疼的,下面是我收集整理的汽车4s店辞职报告范文,欢迎大家分享。 汽车4s店辞职报告范文1 尊敬的公司领导: 我于XX年3月15日进入4S公司工作,到目前为止已近两年半的时间了,期间,我从对公司熟悉到基本熟悉,从不适应到基本适应,走过了一段学习和认识,锻炼提高,努力提升自我的艰难过程。 但是很遗憾,我在这个时候要向公司提出辞职申请了。不是我对公司有多少不满,而是自己的问题,我感到的生活的压力,我开始在生活面前有了退缩的时刻。曾经的我一直对生活和前进感到十分的满意,可是实际情况很多时候都会狠狠的抽自己一嘴

巴。现在的我感受到了生活的压力,而且十分大! 原来,我只是对公司三位老总有所耳闻,到公司后我才耳闻又目染,刚刚知道什么叫创业,什么叫经营,什么叫管理。又或多或少明白了一点怎么当企业领导,如何做事业,怎么样搞发展。哲人讲;要想成功就要跟成功的人在一起。事业就象一本书,每个人都是一本故事。我读了三位老总的书,看了三位老总的故事。我受益匪浅。我真诚的感谢你们,给我提供了机会,提供了时间和空间。也提供了我学习的场所。 人们常说,说到不如做到,做就要做到最好。我信奉这是一条为人做事哲学。先做人后做事。只有先做好人,才能做出好事。也同样包含着辩证的观点。是一条经久不衰的普遍真理。这些我都在老总身上得到了印证,受到了启发。留下了不可磨灭的印象。公司要发展,肯定会发展,我将引以为荣,对于我来说,山不在攀而在观,观山而壮志,海不在游,而在于望,望海而阔怀。如今我观过了山,也望见了海。亲自体验了公司的建设与成长。使我将来要做什么多了几分勇气,少了几分气馁。心胸亦开阔了几分,少了一些气怨。这是金钱所买不到的。也不用金钱来衡量的。 能为公司效力的日子不多了,我一定会把好自己最后一班岗,做好工作的交接工作,尽力让项目做到平衡过渡。离开这个

辞职报告 部门经理辞职报告范文

部门经理辞职报告范文 部门经理辞职报告范文篇1 亲爱的各位同仁、代理商朋友们: 我很遗憾向公司提出离职申请,获得x总和集团的理解和批准,并于12月9日老xx先生莅临之高级经理全体会议中宣布。很荣幸再次获得老xx总裁对我过去近7年贡献的褒奖,感谢和祝福。我想这也是对所有同仁和代理商及客户朋友的荣誉。在此我想感谢各位这么多年一直忠诚地、同心地和非常勤奋地和我一起打拼以及在方方面面对我的支持! 年多共同努力的结果,大家有目共睹,更可贵的是,我们成为一家! 我要感谢上帝的赐福有6年的平顺和今年的艰难,让我学习不骄傲、不气馁、不暴躁、不求自己的私利和荣耀;体会更多何为真团队,何为公义正直与慈爱怜悯的平衡,为何信仰和榜样对每一个人的重要,人和事何者更重要和优先等课题。 在困难中也学习患难生忍耐,忍耐生老练,老练生盼望,盼望生喜乐,喜乐生力量。感谢神常保守我的心思意念能平衡和平安喜乐。说这些不是我已完全得着,乃是仍在学习中,更愿大家共勉之,生出信心、盼望和力量来面对困难。 记住我们的队伍只要目标明确,一定可以达成的。这6年来工作确实辛苦,但心中一直是热情洋溢的,好像在打篮球比赛一样(我喜欢打篮球嘛!),回想起来,初时我打中锋或大前锋,带领大伙

冲锋陷阵,办公之家远投近切,直闯禁区,屡屡得分,其次我换位成控球后卫,组织全场攻防战术及实施。 之后,我自觉地开始打教练了,最大的不同在教练不只关心赢每一场球,更关心他的球员在各方面的成熟与成长,以及真团队的建立。因为这才是立于不败之地的关键,也是人生最丰富有趣的部分。最终,我再一次换位了,这次我选择坐在观众席上,成为球迷啦啦队的一员,不时向场中投以关注的眼神和喝彩,只要大家认真尽力了,不论输赢,我保证给予所有的队员最温暖的怀抱。 这个工作我很清楚是上帝赏赐的,而今年以来,内、外部环境的变化令我心生倦怠,很多地方实际上也使不上力,因此常切切向神祷告,求问神兴起这样的环境是不是要我离开的意思? 终于神依我祷告的要求,给我清楚的印证,我知道是我该下台一鞠躬的时候了。很快地我就向x总提出了辞呈,但为了让x总有时间空间来处理, 以及尽量降低不必要的震荡,我很抱歉在未得公司许可之前,我不能向各位透露,请诸位谅解谅解。 xx这列快速火车正缓缓进站,我听到了广播,知道我的目的地已到,我将直奔家门,正可多陪陪家人,休养休养身体,等待上帝带领我乘下一次列车,展开惊喜丰盛之旅;就在下火车门之前蓦然回首,办公之家瞥见同车的诸多患难、欢欣与共的朋友们,弟兄姊妹们,心中不免几许惆怅和不舍! 不久这列车加好油、充好气即将依既定轨道向前再度飞驰,只有默默祝福各位一路平安,万事顺利。 敬礼!

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