大肠杆菌检测方法

大肠菌群coliforms
一群在36℃ 条件下培养48h 能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。
2.2
最可能数most probable number ; MPN
基于泊松分布的一种间接计数方法。
3 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
3.1 恒温培养箱：36℃±1℃ 。
3.2 冰箱：2℃-5℃ 。
3.3 恒温水浴箱：46℃±1℃ 。
3.4 天平：感量0.1g
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管：1mL（具0.01ml刻度）、10ml（具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量500ml。
3.9 无菌培养皿：直径90 mm 。
3.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3.11 菌落计数器或PetrifilmTM自动判读仪。


4 培养基和试剂
4.1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（lauryl sulfat .tryptose , LST ）肉汤：见第A.1 章。
4.2 煌绿乳糖胆盐（brilliant grecn lactose bile , BGLB ）肉汤：见第A.2 章。
4.3 结晶紫中性红胆盐琼脂（violet red bile agar , VRBA )
4.4 磷酸盐缓冲液
4.5 无菌生理盐水：称取8.5g 氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，121℃ 高压灭菌15 min 。
4.6 1mol/L氢氧化钠（NaOH ) ：称取40g 氢氧化钠溶于1000ml蒸馏水中。
4.7 1mol/L 盐酸（HCI ) ：移取浓盐酸90ml，用蒸馏水稀释至1000ml。
4.8 Petrifiltm大肠菌群检验测试片和压板。