文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 干细胞

干细胞

干细胞
干细胞

专家论坛

基金项目:教育部振兴行动计划

作者简介:马爱群,男,1957年出生。博士研究生学历,教授,博士生导师。国务院特殊津贴专家,陕西省“315”人才,陕西省卫生厅“2115”人才。主要从事心力衰竭、血管相关疾病及心脏分子遗传学等方面的研究。

成体干细胞治疗缺血性心血管疾病

的现状及存在的问题

马爱群 蒋文慧 (西安交通大学第一医院心内科,教育部环境与疾病相关基因重点实验室,西安710061)

关键词 成体干细胞 缺血性心血管疾病 组织修复 

缺血性心血管疾病已成为当今世界威胁人类健康的重大疾病之一,其防治是全球性首要卫生健康问题。尽管近年来该病的治疗措施有了长足的进展,如溶栓治疗、介入和旁路移植手术等方法可明显提高患者的生活质量并延长寿命,但疗效有限,寻找新的治疗方法已成为人们关注的焦点。促进细胞和组织的再生有望成为缺血性心血管疾病治疗的新的有效方法。当前,利用各种干细胞实现心肌和血管的再生已成为世界心血管病学研究的热点之一,由于成体干细胞具有取材方便、来源广等优点,且不存在免疫排斥反应和伦理学等问题,更便于临床应用,而倍受关注1。

1 成体干细胞概述 

干细胞(Stem cell )是胚胎发育过程中产生的或在个体成长中存留的一些能无限自我更新并同时又能定向分化生成一系列组织的原始细胞。一般而言,据其来源分为胚胎干细胞(Embry onic stem cells ,ESCs )和成体干细胞(Adult stem cells ,ASCs );按其分化潜能分为全能干细胞(T otipotent stem cell )、多能干细胞(Multipotent stem cell )和专能干细胞(M onopotent stem cells )。从理论上讲,胚胎干细胞被称为全能干细胞,它可分化成几乎全身所有的组织细胞;成体干细胞则应为多能和(或)专能干细胞。然而,此种分类方法不仅受到了以“Dolly ”克隆羊为代表的核移植技术的巨大挑战,而且更受到了新近几年有关成体

组织干细胞具有“可塑性”(Plasticity )抑或“横向分

化”

(Transdifferentiation )潜能的极大挑战。成体干细胞是一个不断发展的概念,目前尚无

定论。传统的观念认为是存在于成体组织的、具有不断增殖、自我更新和组织特异性分化潜能的一类特殊的细胞群体,其基本功能是参与组织的更新、创伤修复并维持机体内环境稳定。目前,人们已发现成年动物体内几乎所有的组织器官都存在干细胞。更令人惊异的是,自二十世纪九十年代末期开始在国际最著名的学术期刊《Nature 》、《Science 》、《Cell 》报道ASCs 可分化成为在发育上无关的其他系列的细胞类型,亦即ASCs 具有“可塑性”或“横向分化”潜能。2001年斯坦福大学的Blau 2教授在《Cell 》上提出了一个全新的ASCs 的概念,即ASCs 是一种细胞功能状态。至2002年6月,《Nature 》又刊发了美国明尼苏达大学Verfaillie 3教授小组的研究结果,证实在成体的许多组织中余存着一种稀有数量的胚胎原始干细胞,其表达ESCs 的遗传标志如Oct -4,Rex -1以及SSE A -1,体外培养条件也基本类似于ESCs,被命名为多能性成体干细胞(Multipotential adult progenitor cells ,M APCs )。所谓的成体组织干细胞“可塑性”很可能是这些细胞所为,而ASCs 可能是在成体组织中余存的胚胎原始干细胞,这提示成体干细胞与胚胎干细胞可能会存在更多的相似性和同源性。由于ASCs 细胞自我更新能力强,具有多分化潜能和可塑性,且与ESCs 相比,不存在来源困难、免疫排斥、伦理道德等诸多问题,是发展细胞治疗的重要方向,因而为治疗困扰人类健康的心血管疾病提供无限契机1。

2 成体干细胞治疗缺血性心血管疾病的现状 

目前,利用成体干细胞治疗缺血性心血管疾病,多采用干细胞移植或干细胞动员的策略,以实现心肌和血管的再生,改善组织、器官的功能。2.1 干细胞移植 干细胞移植(Stem cell transplan 2

tation)用于心肌、血管再生是基于人们对干细胞生物学特性的认识,通过将某种来源的干细胞体外诱导分化为功能细胞或直接移植(导入)到病变区域,使其增殖分化为心肌细胞或血管内皮细胞,从而修复损伤4,5。

2.1.1 基础研究 干细胞移植治疗缺血性心血管疾病在动物实验中取得了令人满意的结果。移植过程中细胞类型的选择是关键,早期选用自体心肌细胞、异体胚胎心肌细胞和胚胎干细胞分化来的心肌细胞移植或干细胞的直接移植,但上述干细胞取材较困难,体外诱导分化又是个技术难点,异体移植还存在免疫排斥反应,而且胚胎干细胞尚存在一系列的伦理问题,临床应用困难5。随后人们又选择骨骼肌卫星细胞为移植细胞6,但其采集、分离和体外培养增殖过程较为繁琐复杂,并且不能分化成具有真正细胞结构和生理功能的心肌细胞,移植细胞与受体细胞不能有效整合,局部注射后可诱发恶性心律失常,因此也难以应用于临床治疗。鉴于此,人们将研究焦点集中在骨髓干细胞7(Bone marrow stem cell,BMSC)。其组分很复杂,移植的骨髓干细胞成分大体分为:骨髓单个核细胞、骨髓间质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)、造血干细胞(Hem opoietic stem cells,HSCs)、侧群细胞(Side popu2 lation cell,SPC)和特殊细胞群(c-kit+/Lin-)等,目前研究较多是MSCs和HSCs。由于骨髓干细胞取材相对方便,不存在伦理问题,自体移植不存在免疫排斥反应,因而成为缺血组织修复的首选细胞。

动物实验中移植途径的选择也是实现缺血组织修复的关键一步,目前常见的干细胞移植途径主要包括:(1)经心外膜行心肌内注射绝大多数动物研究都采用此方式,需开胸,创伤大,比较复杂,并发症多,易诱发心律失常,不是一种理想的方法;(2)经冠状动脉输注部分动物实验采用此种治疗途径,不需要开胸手术,但具有一定的技术难度;(3)经心内膜行心肌内注射应用心脏导航系统(NOG A)能够实时、准确辨认梗死或缺血心肌范围,指导下一步细胞移植,但也存在技术难度大、投入多,仅在少数动物实验中采用;(4)经静脉输注该方法是动物实验中最早采用的细胞移植途径,这种方法创伤小,但最大的不足是移植效率十分低下,目前在缺血性心血管疾病治疗中的应用较少。

干细胞移植治疗缺血性心血管疾病的机制目前尚未十分明确,可能机制:(1)分化作用8:多项研究证实移植的干细胞可向心脏的功能细胞分化,移植

细胞可分化为新生血管内皮细胞和血管平滑肌细胞,直接形成新的血管以改善血供,同时还可直接分化为心肌细胞,增加梗死区周围有功能的心肌细胞数量,甚至分化为起搏细胞9。目前认为局部微环境在干细胞的分化过程中起着重要作用,细胞间的直接接触是关键,但是否存在“横向分化”尚存争议,有关分化的调控信号尚不清楚;(2)分泌作用10:移植细胞能分泌多种细胞生长因子,如血管内皮生长因子(VEG F)、碱性成纤维生长因子(bFG F)和转化生长因子等,促进细胞的增殖和分化,利于组织细胞的再生;(3)某些移植细胞与宿主细胞建立了电-机械耦合,直接参与宿主心脏的同步收缩。

2.1.2 临床研究 干细胞移植为心血管疾病的治疗开辟了一条新的途径,近几年已由动物实验逐步应用于小样本临床治疗。临床研究中较多采用自体骨髓干细胞进行移植,由于骨髓单个核细胞分离简便,不需要体外培养和扩增,因而成为较常选用的细胞类型。移植途径有:在PTC A术成功后经冠状动脉输注;应用心脏导航系统(NOG A)经心内膜行心肌内注射;在冠脉搭桥术的同时经心外膜行心肌内注射。2001年9月德国杜塞尔多夫的医学家Strauer 等11在世界上进行了首例自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的临床实验,他们将1×107个自体骨髓干细胞在经皮冠脉介入治疗(PTC A)过程中经导管植入到梗死相关动脉,10周后,通过心肌单光子发射计算机断层(SPECT)、超声心动图和核素心室造影显示心肌梗死范围减少,心脏射血分数(EF 值)升高,舒张末压降低。日本学者Hamano等12也对5例晚期冠心病患者因不能通过C ABG手术改善心肌缺血而进行自体骨髓干细胞移植,结果显示3例心肌血流明显改善,2例无改善。2003年,Perin 等13报道了借助NOG A系统经心内膜对14例因严重心肌缺血导致心力衰竭的患者进行心肌内自体骨髓干细胞移植,术后4个月随访显示,与对照组比较,移植组左室射血分数改善9%,而左室舒张末期容积显著减少。目前,国内也有少数几家医院开始尝试此项治疗方法。这些小样本的临床试验初步肯定了自体骨髓干细胞移植治疗缺血性心脏病的有效性和临床可操作性。

2.2 干细胞动员 干细胞动员(Stem cell m obiliza2 tion)治疗缺血损伤的构想是基于最近人们对成体干细胞发育潜能的重新认识:骨髓起源的干细胞可以分化为多种组织细胞,在生理或病理情况下可能被“征募”到循环中参与远处多种组织的再生,其横向

分化表现为很强的环境依赖性。但这种“自发”的“征募”作用较弱,因此,可应用干细胞动员剂将骨髓干细胞“驱赶”到外周血中,从而使外周血干细胞达到治疗数量,利用干细胞“自发”地向损伤组织“归巢”,并在特定的组织微环境作用下分化为受损组织细胞的特性,达到修复缺血损伤的作用14。

2.2.1 基础研究 目前动物实验已证明骨髓干细胞动员治疗缺血性心血管疾病的有效性。使用的动员剂主要有干细胞因子(SCF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(G M -CSF)、血管内皮生长因子(VEG F)等,多选用急性缺血的动物模型,在缺血前或缺血后连续应用5~7 d。美国Orlic等15报道联合应用SCF(200μg/kg)和G-CSF(50μg/kg)动员骨髓干细胞可促进小鼠急性缺血后心肌和血管的再生,心梗面积缩小40%,并改善心功能(左室舒张末压降低70%),死亡率降低68%;我们16,17采用用G M-CSF(15μg/kg)动员BMSC治疗大鼠和兔的急性心肌缺血,发现外周血骨髓干细胞增高达正常的15倍,且动员组大鼠心肌梗死区和缺血区的血管密度增加,心梗面积缩小15%,心功能明显改善(左室舒张末压降低32%),死亡率降低36%。在下肢缺血的动物模型中应用干细胞动员剂,也发现动员组缺血区的毛细血管密度显著增加。

骨髓干细胞动员治疗缺血性心血管疾病的机制目前尚未十分清楚。“干细胞循环”理论认为18,骨髓干细胞通过血液循环这条“高速公路”,在机体不同组织中穿梭,当某一组织发出需求信号,干细胞就定居于该组织发挥作用。其过程可能包括三个重要的环节:动员—归巢—分化。目前,关于骨髓干细胞动员的机制在造血系统研究的较深入,被普遍接受的观点是:干细胞动员剂通过改变骨髓干细胞与骨髓基质间的相互作用,这一阶段涉及一系列细胞黏附分子和趋化因子等的相互调节反应,影响干细胞的黏附、迁徙和定居特性,使干细胞穿过基质膜和血管内皮层而进入循环血流中,致循环池中的干细胞数量增加;动员的骨髓干细胞需要定向迁移,才可能完成对损伤的修复,多项研究证明骨髓干细胞有向缺血损伤组织归巢的特征。组织缺血存在炎症损伤,局部细胞黏附分子、趋化因子、生长因子表达的上调可能构成了干细胞定向迁移的始动因素。我们用地塞米松抑制炎症反应发现可明显减少干细胞的归巢,SCF、S DF-1等及其配体可能参与了干细胞向缺血区的归巢调控19,归巢的干细胞数量很可能决定了损伤组织修复的程度;干细胞归巢于缺血组织后,定向分化为功能细胞才能发挥治疗作用,多项研究提示干细胞的分化表现为很强的“环境依赖性”,我们发现大鼠骨髓干细胞与平滑肌细胞和心肌细胞混合培养后可分别定向分化为平滑肌细胞和心肌细胞,但隔离培养无此作用,表明细胞的直接接触是骨髓干细胞定向分化的关键环节,但其信号调控尚不清楚。近来,有研究者提出心肌组织存在干细胞20,虽然其来源尚不清楚,干细胞动员剂是否直接激活心肌干细胞发挥治疗作用还有待探讨。

2.2.2 临床研究 目前小样本的临床实验已初步证明骨髓干细胞动员治疗方法的有效性。使用的动员剂主要有G-CSF和G M-CSF等,选择急性缺血病例,于缺血后动员治疗3~7d。瑞典Seiler等21报道采用G M-CSF(10μg/kg)动员治疗10例严重不稳定性心绞痛老龄患者,对照组11例患者仅给予安慰剂,治疗2周后观察到动员治疗组患者心脏侧枝循环较治疗前明显改善。我们也将此方法用于临床急性心肌梗死患者,经10对病例对照研究,双核素心肌显象(SPECT、PET)发现动员组成活心肌细胞明显增加,8例显示梗死区有核素充填,而对照组仅2例有核素充填,且充填的程度不如动员组。国内还有少数几家医院开始尝试此项治疗方法,初步的小样本临床研究结果亦令人鼓舞。

3 存在问题 

尽管成体干细胞为缺血性心血管疾病的治疗开辟了一个新的前景,成为较有潜力的挽救缺血损伤组织的一种治疗方法,但不论在基础研究还是在临床研究中都存在亟待解决的一些问题。

3.1 成体干细胞可塑性的质疑 目前对成体干细胞可塑性又提出相驳的观点,2002年Science杂志发表了斯坦福大学医学中心的Weissman22研究小组的工作报告,将绿色荧光蛋白标记的骨髓造血干细胞输入放射损伤的小鼠体内后追踪观察,结果显示标记细胞除了向造血细胞分化外,几乎不能分化成其他组织细胞,未发现任何“横向分化”现象。由此引发了成体干细胞横向分化是否真的存在?观察到的成体干细胞可塑性是否为实验设计不严谨或主观判断错误所致等一系列问题的讨论。同年,《Nature》又刊发了来自英国爱丁堡与牛津大学的科学家Y ing23和美国佛罗里达大学医学院的科学家T era2 da24等两组科学家惊人的共同发现和结论,也向成体干细胞可塑性的存在提出挑战。他们分别用绿色

荧光蛋白标记的小鼠神经和骨髓干细胞与无标记的胚胎干细胞在培养液中混合培养,发现带有标记的细胞显示出胚胎干细胞的特性,即分化出具有多种细胞类型的能力,进一步研究发现,它们是融合细胞。因而又提出细胞融合导致多向分化的新观点。如果观点确立,则成体干细胞的临床应用应十分慎重,因为可能存在未知疾病的危险。但细胞融合发生率只有百万分之一,不能解释大量的可塑现象。今年,Harris25在Science上报道又否定细胞融合的存在。因此有关干细胞的分化机制还有待更进一步深入研究。

3.2 干细胞移植治疗缺血性心血管疾病的相关问题 干细胞移植存在的焦点问题:(1)何种移植细胞类型最安全有效,到目前为止尚无统计学上的严格对比结果可以参照;(2)移植细胞的数量无统一标准,若数量太少,可能疗效差,若数量太多,则有可能引起细胞栓塞、沉着及增生;(3)干细胞移植的具体适应证尚无界定,目前常用的心肌缺血模型多为结扎或栓塞冠状动脉,与冠状动脉粥样硬化导致的缺血病理状态还是存在一定差异,且对慢性缺血模型目前尚无满意的研究结论;(4)缺血后进行细胞移植的最佳时期尚不明确;(5)何种导入途径的疗效和安全性最佳尚需进一步探索;(6)移植后分化出来的心肌细胞与正常心肌细胞是否有同样的生物学功能,移植后和宿主心肌细胞能否实现结构和功能的整合,尚需进一步研究观察;(7)干细胞移植后的转化效率以及组织功能重建状况是以后临床应用应该考虑的一个重要问题。(8)值得注意的是干细胞移植的安全性,移植细胞是否会成为异位兴奋点,诱发心律失常,或导致心肌纤维化、血管病变,甚至肿瘤形成,这一系列可能的负面影响还有待远期观察26-28。目前还需要大规模的临床试验来证实干细胞移植的确切疗效和安全性。

3.3 干细胞动员治疗缺血性心血管疾病的相关问题 干细胞动员治疗缺血性心血管疾病作为一种新的治疗方法,不论从其易行性、安全性来说都有着一定的优势,但研究刚刚起步,其治疗机制和具体的治疗方案目前尚不十分清楚。基础研究有待明确干细胞动员、向特定组织器官归巢及向其功能细胞分化的确切机制,从而研制出新型的细胞因子药物以提高干细胞动员治疗的靶向性和高效性。临床研究中还需解决:(1)选择最佳动员剂;(2)确定最佳动员时机;(3)选择合适治疗对象;(4)长期观察治疗的安全性和有效性。目前也需要大规模的临床试验确证其疗效和安全性。

4 展望 

成体干细胞治疗缺血性心血管疾病的研究尚处在初期阶段,但是通过阐明干细胞定向分化调控机制,建立完整的动物模型技术平台,探索各项技术在临床应用的可能性,使成体干细胞治疗缺血性心血管疾病的手段有望成为不同于内科传统药物治疗、心血管介入治疗和外科手术治疗的又一全新治疗方法。值得注意的是干细胞动员疗法与干细胞移植相比具有无创伤、方法简便、易开展的特点,临床应用更具优势,对其治疗机制的阐明将为组织再生治疗开辟新的前景,希望将来以动员治疗代替移植不是一个梦想。21世纪是生命科学的时代,我们还要看到对于成体干细胞的基础和临床研究仍是任重而道远29。

5 参考文献

1 S trauer BE,K ornowski R.S tem cell therapy in perspective.

Circulation,2003,107(7):929-934

2 Blau H M,Brazelton TR,Weimann JM.The ev olving con2 cept of a stem cell:entity or function?Cell,2001,105:

829-841

3 Jiang Y H,Jahagirdar BN,Reinhardt R L et al.Pluripoten2 cy of mesenchymal stem cells derived from adult marrow.

Nature,2002,418:41-49

4 F orrester JS,Price M J,Makkar RR.S tem cell repair of in2 farcted my ocardium:An overview for clinicians.Circula2

tion,2003,108(9):1139-1145

5 Rafii S,Lyden D.Therapeutic stem and progenitor cell transplantation for organ vascularization and regeneration,

Nat Med,2003,9:702-712

6 Pagani FD,Dersim onian H,Z awadaka A et al.Autolog ous skeletal my oblasts transplanted to ischemia damaged my2

ocardium in humans.Histological analysis of cell survival

and differentiation.J Am C oll Cardiol,2003,41(5):879-

888

7 Israel M B,Pierre C,Jack B et al.Systemic delivery of bone marrow-derived mesenchymal stem cells to the in2

farcted my ocardium:Feasibility,cell migration,and body

distribution.Circulation,2003,108:863-868

8 E laine Fuchs E,Tumbar T,G uasch G.S ocializing with the neighbors:S tem cells and their niche.Cell,2004,116:769

-778

9 P otapova I,Plotnikov A,Lu Z J et al.Human mesenchymal stem cells as a gene delivery system to create cardiac pace2

makers.Circ Res,2004,94:952-959

10 K amihata H,Matsubara H,Nishiue T et al.Implantation of bone marrow m ononuclear cells into ischemic my ocardium

enhances collateral perfusion and regional function via side

supply of angioblasts,angiogenic ligands,and cytokines.Cir2

culation,2001,104(9):1046-1052

11 S trauer BE,Brehm M,Z eus T et al.Repair of in fracted my ocardium by autolog ous intracoronary m ononuclear bone

marrow cell transplantation in humans.Circulation,2002,

106(15):1913-1918

12 Hamano K,Nishida M,Hirata K et al.Local implantation of autolog ous bone marrow cells for therapeutic angiogenesis

in patients with ischemic heart disease clinical trialand pre2

liminary results.Jpn Circ J,2001,65:845-847

13 Perin EC,D ohmann HF,Borojevic R et al.T ransendocar2 dial,autolog ous bone marrow cell transplantation for severe

,chronic ischemic heart failure.Circulation,2003,107

(18):2294-2302

14 蒋文慧,马爱群1骨髓干细胞动员治疗缺血性心脏病研究进展1中国循环杂志,2003,83(21):1923-1925 15 Orlic D,K ajstura J,Chimenti S et al.M obilized bone mar2 row cells repair the in fracted heart,improving function and

survival.PNAS,2001,98:10344-10349

16 刘 洁,马爱群1骨髓干细胞动员治疗大鼠急性心肌梗死1中国医学科学院中国协和医科大学科学年会

学术论文集1北京:中国协和医科大学出版社,

20021375-380

17 DONG anping,Ma aiqun,H AN K e et al.G ranulocyte-macrophageclony stimulating factor improves cardiac function

in rabbits following my ocardial in farction.J Med colle P LA,

2003,18(4):251-254

18 蒋文慧,马爱群.干细胞循环及其潜在应用前景.中华医学杂志,2003,83(21):1923-192519 Y amaguchi J,K usano K F,Masuo O et al.S tromal cell-derived factor-1effects on ex viv o expanded endothelial

progenitor cell recruitment for ischemic nevascularization.

Circulation,2003,107:1322-1328

20 Beltrami AP,Barlucchi L,T orella D et al.Adult cardiac stem cells are multipotent and support my ocardial regenera2

tion.Cell,2003,114:763-776

21 Seiler C.,P ohl T,Wustmann K et al.Prom otion of collat2 eral growth by granulocyte macrophage colony-stimulating

factor in patients with coronary artery disease:a random2

ized,double-blind,placebo-controlled study.Circula2

tion,2001,104:2012-2017

22 Wagers A J,Sherw ood RI,Christensen JL et al.Little evi2 dence for developmental plasticity of adult hematopoietic

stem cells.Science,2002,297(5590):2256-2259

23 Y ing Q L,Nichols J,Evans EP et al.Changing potency by spontaneous fusion.Nature,2002,416:545-548

24 T erada N,Hamazaki T,Oka M et al.Bone marrow cells adopt thephenotype of other cells by spontaneous cell fusion.

Nature,2002,416:542-545

25 Harris RG,Herzog E L,Bruscia E M et https://www.wendangku.net/doc/c612567633.html,ck of a fusion requirement for development of bone marrow-derived ep2

ithelia.Science,2004,305(5680):90-93

26 Zhang,Y M,Hartzell C,Narlow M et al.S tem cell-de2 rived cardiomy ocytes dem onstrate arrhythmic potential.Cir2

culation,2002,106(10):1294-1299

27 Marx J.Mutant stem cells may seed cancer.Science,2003, 301:1308-1310

28 F orrester,Price M J,Makkar RR.T ransplant graft vasculopa2 thy:A dark side of bone marrow stem cells?Circulation,

2003,108:3056-3058

29 Wagers A J,Weissman I L.Plasticity of adult stem cells.

Cell,2004,116:639-648

(2004-10-21收稿,责任编辑 尤伟杰)

《武警医学》以刊授形式举办武警部队继续医学教育

经总部后勤部卫生部批准,2005年《武警医学》将继续以刊授的形式举办武警部队继续医学教育项目。读者只要完成本刊每期的武警部队继续医学教育试题卡(复印无效),并于2006年3月31日前将全年试题卡及60元工本费寄回编辑部,经审核合格后便可获继续医学教育学分(全年累计6分)。本刊将统一发放学分证书,让每位读者在博览全书,更新知识的同时,得到实实在在的回报。

地址:北京市永定路69号武警医学编辑部 邮编:100039

联系电话:(010)88276439 (010)68169765

成体组织干细胞公司项目计划书

成体组织干细胞公司项目计划书 内容提要 一、干细胞概述 二、原有技术——脐血干细胞技术应用的现状 三、真正的生命银行——成体干细胞(胎盘干细胞) 四、建立胎盘干细胞中心的重要性和必须性 五、建立胎盘血干细胞中心的可行性分析 六、项目实施方案 七、具体建设打算和资金分配 八、经济效益分析 九、新公司组建设想 十、风险分析 十一、环境爱护问题 小结 附件 内容提要: 投资项目:成体组织干细胞公司 本打算要建立一座大型的世界一流水平的干细胞提取、储存,干细胞治疗和相应的研究开发和应用公司,为所有的客人提供配型完全相符、质量可靠、数量充足

的自体成体干细胞用于治疗各种细胞损害性疾病。要在尽短的时刻内(3年)成为跨国的细胞生物上市公司。 项目的先进性: 该学科的开发能够修复、改善或取代损害、缺失、病变、衰老的组织或器官,治疗目前尚不能治愈的大多数疾病。 项目适用: 恶性肿瘤性疾病 多种缘故导致的骨髓衰竭 遗传性血液免疫系统疾病 肝坏死、脑萎缩、脊髓瘫痪,皮肤溃疡等 采纳我公司专门的国内专利和技术从人体的各种组织,专门是抛弃组织(以胎盘为例)提取干细胞,是目前在中国还未应用的技术空白,那个技术的开发和应用完全优于目前的骨髓干细胞治疗和脐带血干细胞治疗中心。 投资金额:2400万人民币 合作方式:合资 合作地点:(待定) 项目特点: 首创性:无同类产品 专利性:具有多个中国专利 有效性:临床上证明切实有效的治疗。 广泛性:产品具有美好的市场前景,适用各类人群——不论是富人,穷人,依旧病人或健康人都需要应用这些产品。 高回报性:产品的利润介于数倍到上千倍之间,在公司完全开始运作后的当年即可回收全部投资。

干细胞研究发展历程.

1950:将骨髓细胞移植到遭受致死剂量辐射的动物,发现能够挽救生命,重建骨髓造血免疫系统 1960:真正认识和了解人和哺乳动物干细胞始于20世纪60年代 1961:Till 和Mc Culloch 提出多能干细胞概念 1967:多纳尔–托马斯完成第一例骨髓移植,后于1990年获得诺贝尔医学和生理学奖 1980:造血干细胞移植成为治疗多种疾病的重要手段 1981:Evans等首次成功建立小鼠胚胎干细胞系 1981:胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)的分离和培养首先在小鼠中获得成功 1988:美国科学家James Thomson分离出人类胚胎干细胞 1998:美国两个科研小组分别报告从胚胎和生殖脊成功建立人类胚胎干细胞系,使人类胚胎干细胞能在体外生长和增殖 同年,美国科学家在《美国科学院院刊》上报告:小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化为血液细胞”。此后,世界各国科学家相继证实,包括人类的成体干细胞具有可塑性,从而掀起了全球成体干细胞研究高潮。干细胞研究进展被《科学》杂志评选为该年度世界十大科学成就之首。人类ES (hES)细胞建系获得成功,由此推动了干细胞研究的兴起。 2000: 日本把以干细胞工程为核心技术的再生医疗列为“千年世纪工程”之一,当年投资108亿日元;同年,全世界有10622例造血干细胞移植。 成体干细胞移植使糖尿病大鼠恢复正常 神经干细胞能够进入脑组织并修复脑损伤 角膜干细胞有助于恢复视力 发现成人骨髓干细胞形成肝细胞 成人骨髓干细胞可以在合适的条件下转化为神经细胞 成人骨髓干细胞可以在体外大规模培养 证实成人骨髓干细胞可以形成多种类型组织

干细胞项目初步方案

干细胞项目 初步方案 规划设计/投资方案/产业运营

摘要说明— 从2018年开始,我国各地政府出台了一系列利好政策,促进干细胞医 疗行业的发展。2018年3月9日,广州市人民政府发布了《关于印发广州 市促进健康及养老产业发展行动计划(2017-2020年)的通知》,提及未来将重点发展肿瘤免疫细胞治疗、干细胞治疗、基因治疗等医疗技术,开展人 成体干细胞及人多能干细胞临床应用技术研究。 该干细胞项目计划总投资19078.43万元,其中:固定资产投资 14386.59万元,占项目总投资的75.41%;流动资金4691.84万元,占项目 总投资的24.59%。 达产年营业收入46062.00万元,总成本费用36421.88万元,税金及 附加397.20万元,利润总额9640.12万元,利税总额11366.99万元,税 后净利润7230.09万元,达产年纳税总额4136.90万元;达产年投资利润 率50.53%,投资利税率59.58%,投资回报率37.90%,全部投资回收期 4.14年,提供就业职位700个。 报告内容:项目概况、建设背景、产业调研分析、项目规划方案、选 址规划、土建方案、项目工艺分析、环境保护、清洁生产、生产安全保护、项目风险情况、项目节能说明、进度方案、投资方案说明、经济收益、综 合评价等。

规划设计/投资分析/产业运营

干细胞项目初步方案目录 第一章项目概况 第二章建设背景 第三章项目规划方案 第四章选址规划 第五章土建方案 第六章项目工艺分析 第七章环境保护、清洁生产第八章生产安全保护 第九章项目风险情况 第十章项目节能说明 第十一章进度方案 第十二章投资方案说明 第十三章经济收益 第十四章招标方案 第十五章综合评价

干细胞分泌因子

干细胞分泌因子五大功效以及他的运用 【干细胞分泌因子作用范围,造应症】 1.抗衰老美容治疗:衰老及亚健康导致的人体整体机能退化,再造肝脏,肾脏,心脏,肠胃,胰岛的脏器功能.修复皮肤损伤,调节肌体细胞线粒体功能,提高皮肤抗氧化能力、防辐射能力、抗过敏能力,内外整体年轻化。 2.内分泌,组织器官功能再生治疗:肝脏、肾脏、心脏、肠胃、胰岛功能再生。辅助治疗脂肪肝、肝硬化、肾炎、肾功能衰竭 3.神经系统再生修复治疗:帕金森病,老年痴呆,脑血管意外,脊髓外 伤的治疗和恢复. 4.造血及免疫功能再生治疗:抑制人体肿瘤细胞和防止肿瘤转移,扩散,造应血功能及免疫功能低下者,如肿瘤,放疗,化疗术后病人. 5.肌肉及骨骼修复再生治疗皮肤,肌肉(包括心肌),骨骼的修复再生。 【主要有以下干细胞的分泌因子】 造血干细胞分泌因子 皮肤干细胞分泌因子 神经干细胞分泌因子 肌肉干细胞分泌因子 脏器多能干细胞分泌因子 主要因子成分:

肝细胞生长因子(HGF)——促进肝实质细胞等各组织细胞的增殖。神经细胞生长因子(NGF)——促进神经细胞(知觉、交感神经节细胞)的增殖。 上皮细胞生长因子(EGF)——皮肤、肺、角膜、气管上皮细胞的增殖。 成纤维细胞生长因子(FGF)——促进人成纤维细胞、胶质细胞、血管内皮细胞的增殖。 胰岛素样生长因子(IGF)——软骨细胞、平滑肌细胞的增殖。 集落形成刺激因子(CSF)——负责免疫细胞的粒细胞、巨噬细胞等干细胞的增殖。 各类白介素(LL—1—19)——促进免疫细胞(T细胞、B细胞、NK 细胞) 以及胸腺细胞的增殖、分化,促进淋巴细胞活素产生 【干细胞分泌因子对人体的作用周期】: 第一阶段 干细胞分泌因子经血液循环进入细胞组织,开始迅速补充细胞新陈代谢所需的全部营养,使人体老化的细胞及过氧化物等代谢垃圾开始代谢排泄。同时,干细胞分泌因子开始耙向激活休眠的干细胞。 此阶段表现为:身体局部有退皮现象,皮肤斑痕初步淡化,皱纹变浅,

干细胞储存的流程介绍

中美奥奇干细胞库为您提供干细胞储存费用详解: 对于干细胞储存的费用需要多少钱,下面我们将给您做出详细的解答,让您了解整个干细胞储存的过程。 中美奥奇作为专注生命科学领域的高新技术企业,拥有广阔的国际化背景,专业致力于干细胞、免疫细胞、基因诊断等领域的基础研究,并从事临床研究与应用、干细胞储存等业务。 中美奥奇目前已经在中国北京、河北、河南、美国加利福尼亚州等地建立了总面积近万平米的数个符合国家GMP标准的万级净化实验室及细胞库,可提供每年10万份的细胞制备和保管储存服务。 中美奥奇与斯坦福大学、南加州大学、清华大学、军事医学科学院等国内外知名研究机构建立了密切的合作关系。拥有美国、英国院士领航的科学家团队,先后参加国家自然科学基金,国家863计划项目、国家973项目重大专项及省部级课题等20余项的研究工作。 中美奥奇用严谨、务实、创新的态度和国内领先的核心技术,希望通过不断的发展,探索生命奥秘,创造健康奇迹,用科技致力于人类健康的改善。 干细胞储存 所谓的干细胞储存就是:将干细胞从不同的人体组织中分离培养出来后,再经过检测鉴定,然后将其冻存于-196℃的深低温中,以便于在临床需要时可以将干细胞复苏用于给病人回输,达到治疗疾病的目的。 干细胞储存流程: 1、客户咨询 客户咨询 通过中美奥奇奥奇生物网站或、妇产科医生咨询、奥奇生物的咨询医生、奥奇

生物宣传资料等方式了解中美奥奇生物,了解干细胞和保存干细胞的意义。客户同时可以随时拨打中美奥奇生物24小时免费客服电话4000-761-561咨询中美奥奇生物干细胞保存业务,约见客户代表以及预约参观奥奇生物干细胞库。 2、客户签约 客户签约 当您最终选择了中美奥奇生物保存宝宝的干细胞时,便可联系您的客户代表,与中美奥奇生物签订干细胞保存协议。恭喜您,您和您的宝宝便成为了中美奥奇生物大家庭的一员,您做出了一个对您和您的宝宝一生有益的重要决定,您给您的宝宝做了一次生命的备份,给了他(她)第二次生命的机会。 请在预产期前最少一周与中美奥奇生物签订保存协议,办理登记手续。手续简单,只需联系客户代表或直接至客户中心进行业务登记手续。登记后,客户无需做任何准备工作,只需在预产期产生变化等特殊情况下联系中美奥奇生物客户代表或拨打客户服务热线4000-761-561我们将为您联系主治医生进行脐血/脐带/胎盘采集准备。 3、脐带/胎盘收集盒 脐带/胎盘收集盒 客户完成与奥奇生物的合同签署后,在客户生产当天,我们的客户代表会派发一个印有条形码的奥奇生物采集盒给客户。盒内有医生收集脐带/脐血/胎盘所需的用具,包括:采血袋(已消毒及存有抗凝血剂)、抽取母血的真空采血管、胎盘采集盒(已消毒)、保存液、消毒用品及其他辅助工具等;另外备有一份出生报告单及相关文件。 4、产前准备 产前准备

干细胞专业词汇

干细胞,无疑是当今生物医学研究领域中的重中之重,国内外很多生物医学研究机构都在开展着这方面的工作,与此同时,一些干细胞研究的专用术语也大量出现在相关文献中,为了使大家更好地理解这些术语的含义,李志琴博士,章静波教授从美国国立卫生院(NIH) 有关干细胞的报告中摘取了部分专有名词,并把它们译成中文,以供参考。 Adipocyte ———脂肪细胞。 Adult stem cell ———成体干细胞,存在于已分化组织中的未分化细胞,它可以自我更新,同时在一定的局限性条件下也可分化,产生其来源组织的各种特异的细胞类型。 Allogenic ———同种异体的,两个或两个以上的个体(或细胞系) ,当其在1 个或多个位点上的基因序列不相同时,则互称为同种异型的机体。 Amnion ———羊膜,最内的一层子宫内膜,包绕着胎儿和羊水。 Anterior visceral endoderm ( AVE) ———前脏内胚层,起源于早期胚胎的特异性组织结构,有助于建立起机体的前后轴向。 Antibody ———抗体,B 细胞对抗原反应而分泌的一种Y型蛋白质,抗体可与诱导其产生的抗原呈特异性结合。针对感染性生物体表面抗原产生的抗体有助于消灭体内的该生物体。

Antigen ———抗原,可以诱导抗体形成的物质,常是蛋白质。抗原通常存在于感染性生物体,输血血细胞和移植器官的表面。 Antigen presenting cells (APCs ) ———抗原递呈细胞,体内多种细胞类型中的一种,可以对抗原进行加工,并以一种可被T 细胞识别的形式展现于其表面。 Apoptosis ———细胞凋亡,遗传性的程序性细胞死亡。 Astrocyte ———星型胶质细胞,神经组织中的一种较大的神经胶质细胞。 Autoantibody ———自身抗体,一种与机体自身细胞和组织产生的抗原发生反应的抗体,自身抗体可引起自身免疫性疾病。 Autoimmune disease ———自身免疫性疾病,由于T 细胞和P或某种抗体攻击个体自身细胞或组织而引起的一种疾病。 Autologous transplant ———自身移植物,移植组织来自于接受移植的个体,这种移植可避免免疫排斥并发症。 Axis ———轴、纵轴,通过球体两极的直线;机体或其任一部分的中心线;脊柱;中枢神经系统。一条动脉当其发生并立即分为许多分枝时也可称为轴。

2020年(生物科技行业)生命科学专业普通生物学名词解释

(生物科技行业)生命科学专业普通生物学名词解释

普通生物学名词解释 湿地生态系统:它处于陆地生态系统(如森林和草地)和水生生态系统(如深水湖和海洋)之间。换言之,湿地是陆生生态系统和水生生态系统之间的过渡带 细胞学说: 1、所有生物都是由细胞和细胞产物所构成; 2、新细胞总是由原来的细胞分裂产生; 3、所有细胞都具有基本上相同的化学组成和代谢活性; 4、生物体总的活性能够见成是组成生物体的各相关细胞的相互作用和集体活动的总和。 变性:当天然蛋白质分子受到某些物理因素(热、紫外线照射、高压和表面张力等)或化学因素(有机溶剂、酸碱、重金属盐等)的影响时,其生物活性丧失、溶解度降低、不对称性增高以及其他物理化学常数发生改变的现象。 胞质溶胶:细胞匀浆经超速离心除去所有细胞器和颗粒后的上清液部分。 微丝:又称肌动蛋白丝,参和形成肌原纤维、应力纤维和微绒毛,引起胞质流动或细胞的运动 微管:由微管蛋白组成的管状结构,起支架作用、胞内运输作用和形成纺锤体。对低温、高压和秋水仙素敏感。 中间纤维:直径10nm左右,最稳定的细胞骨架成分,围绕核成束成网分布,且扩展到细胞质膜,和质膜相连结,起支持和运动功能。 细胞连接:细胞紧密靠拢的组织中,细胞膜在相邻细胞之间分化而成特定的连接。胞间连丝:植物相邻细胞的细胞膜穿过细胞壁上的孔,彼此相连,俩细胞的光面内质网也彼此相通,即成胞间连丝。直径约20~40nm。功能上和间隙连接类似,在相邻细胞间起通讯作用。

共质体:植物细胞的原生质体通过胞间连丝彼此连成壹片,称为共质体。 质外体:细胞壁连成壹片,称为质外体。 生物膜:各种细胞器的膜和核膜、质膜在分子结构上壹样. 酶:生物体内壹类具有催化活性的生物大分子,其中绝大多数是蛋白质,少数是RNA。 辅助因子:酶分子中的非蛋白质部分,按和酶蛋白结合的松紧程度不同,分为辅酶(松弛)和辅基(紧密)。 酶的抑制剂:能使酶分子上的某些重要基团发生变化,引起酶分子活力降低或丧失的物质。 不可逆的抑制作用:抑制剂和酶的必需基团以共价结合,不能用透析等物理方法使酶复活。 可逆抑制作用:抑制剂和酶以非共价结合,能用透析等物理方法除去抑制剂使酶复活。 同工酶:?催化相同的化学反应,但其蛋白质分子结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的壹组酶。 核酶:具有催化功能的RNA分子。又称核酸类酶、酶RNA、类酶RNA。 扩散:分子从相对高浓度的区域移到低浓度的区域 渗透:水分子从高浓度壹侧穿过膜而进入低浓度壹侧的扩散。 主动运输:分子从低浓度区域向高浓度区域的运输过程。 吞噬作用:细胞吞噬较大的固体颗粒,如细菌、细胞碎片等的作用。 光反应:发生水的光解、O2的释放和ATP及NADPH的生成。 暗反应:利用光反应形成的ATP和NADPH,将CO2仍原为糖。

干细胞抗衰老行业现状分析报告

目录 一、干细胞行业的“万用功能“及发展前景 (2) 二、干细胞行业相关政策分析 (4) 三、干细胞抗衰老作用机理 (4) 1.骨髓间充质干细胞 (5) 2.脐带血干细胞 (6) 3.脂肪干细胞 (7) 4.胚胎干细胞 (7) 四、干细胞产业链分析 (8) 五、干细胞国内相关企业分析 (9) 1.中源协和:中国干细胞产业链的整合者,全面布局上下游 (9) 2.北科生物:干细胞技术全球领先,有望成为中国的“苹果” (10) 3.金卫医疗:通过CCBC股权间接经营干细胞存储业务 (11) 4.冠昊生物:依托技术优势进军干细胞治疗领域 (12)

图表目录 图表1:干细胞治疗应用方向 (3) 图表2:干细胞抗衰老行业相关政策 (4) 图表3:随着年龄的增长,骨髓中干细胞数目急剧下降 (5) 图表4:小鼠骨髓间充质干细胞具有抗衰老作用 (6) 图表5:脐带血干细胞可以促进细胞增殖,修复受伤组织 (6) 图表6:肌肉注射胚胎干细胞后各系统疗效(临床改善指数) (7) 图表7:干细胞产业链 (8) 图表8:北科生物发展历程 (11) 图表9:金卫医疗发展历程 (12)

一、干细胞行业的“万用功能“及发展前景 干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,是机体的起源细胞,是形成人体各种组织器官的原始细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞或组织器官,医学界称其为“万用细胞”,对应干细胞治疗具有极大的潜力。干细胞按发育状态分为胚胎干细胞、成体干细胞。按分化潜能分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞。 干细胞治疗则是把健康的干细胞移植到病人或自己体内,以达到修复病变细胞或重建功能正常的细胞和组织的目的。即干细胞治疗从细胞层上治疗疾病,相较很多传统治疗方法具有无可比拟的优点: (1)安全:低毒性(或无毒性); (2)在尚未完全了解疾病发病的确切机理前也可以应用; (3)治疗材料来源充足; (4)治疗范围广阔; (5)是最好的免疫治疗和基因治疗载体; (6)传统疗法认为是“不治之症”的疾病,又有了新的疗法和新的希望。 因此干细胞治疗作为一种比较优势突出的新型治疗,临床上应用的领域包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、血液病、肝病、肾病、糖尿病、骨关节疾病等,现在比较成熟的如应用骨髓移植治疗白血病等恶性血液病,随着未来越来越多临床试验的成功,产业发展前景将十分广阔。 图表1:干细胞治疗应用方向 资料来源:银联信

干细胞生物特性及其应用

子抗体相关性研究[J ]1中国男科学杂志,2006,20(2):57~591 [7] Berger RE 1Eti ol ogy manifestati ons ang therapy of therapy of acute ep i 2 didy m itis:Pr os pective study of 50cases [J ]1J U r ol ogy,1979,750:754~7611 [8] Hales RB ,D ie mer T,Hales KH 1Role of cyt okine in tesicular functi on [J ]1Endocrine,1999,10(1):201~2071 [9] 朱应武,卢芳国,伍参荣等1解脲脲原体感染对精子质量的影响 [J ]1实用预防医学,2003,12(10):931~9331 [10]史海军,常永超1支原体感染与男性不育症患者精液质量状况分 析[J ]1中国皮肤性病学杂志,2005,19(6):358~3591 [11]Nunez CR,Caballer o P,Redondo C,et al 1U reap las ma U realyticum re 2 duces motility and induces me mbrane alterati ons in human s per mat o 2z oa [J ]1Hum Rep r od,1998,13(10):2756~27611 [12]林成楚,许恩赐,汪志伟等1解脲脲原体感染与精子凋亡的关系 [J ]1中国人兽共患病杂志,2005,21(4):3661 [13]ZiniA,FischerMA,Sharir S,et al 1Prevalence of abnor mal s per m P NA denaturati on in fertile and infertile men [J ]1U r ol ogy,2002,60(6):1069~72 [14]徐 晨1解脲支原体引起男性不育的机理研究I 1精子形态学观 察[J ]1男性学杂志,1992,6(2):661 [15]徐 晨,王一飞1支原体与男性不育的研究进展[J ]1男性学杂 志,1992,6(1):541 [16]石建莉,鲁梅格,王一飞1溶脲脲原体与人精子膜蛋白交叉反应 性抗原的研究[J ]1生殖与避孕,2003,23(3):153~1571 [17]Desil Va 1Patticja A Q 1Localizati on of endogenous activity of phos pho 2 li pases A and C in ureap las ma urealyticum [J ]1Jchn M icr obi ol,1991,29:14981 [18]胡 涛,王海燕,高美华1沙眼衣原体、溶脲脲原体感染致精浆 T NF 2a,Il 26升高在男女不育发病中的意义[J ]1生殖与避孕,1999,19(2):80~841 [19]王光荣,周曾娣,郭争鸣1精子凋亡与男性不育关系的初探[J ]1 中华男科学,2002,8(1):25~271 [20]Dousset B,Hussenet F 1Cyt olines in the human se men 1A ne w ap 2 p r oach t o male fertility [J ]1Presse Med,1997,26(1):24~291[21]Forrest VJ,Kang YH,Mcclain DE,et al .Oxidative stress 2induced ap 2 op t osis p revented by Tr ol ox [J ]1Free Radic B i olMed,1994,16(6):675~6841 [22]Halli w ell B,Gutteridge Jm,Role of free radicals and cataiytic metal 2 li ons in human disease:an overvie w methods [J ]1Enzy mol ogy,1990,186(1):1~31 [23]杨 欣,王 琦1溶脲脲原体感染与精液不液化症的相关性研究 [J ]1中国男科学杂志,1998,12(4):222~2241 [24]逯 越,陈国卫1解脲脲原体感染对附睾上皮分泌功能影响的研 究[J ]1解剖学研究,2003,25(4):277~2781 [25]马春杰,唐立新,蒋 敏1供精者解脲脲原体感染与精液参数的 相关性研究[J ]1广东医学,2006,27(1):59~611 [26]W ang Y,L iang CL,W u JQ,et al 1Do U reap las ma urealyticum infec 2 ti ons in the genital tract affect se men quality [J ].A sian J Andr ol,2006,8(5):562~568. [27]ReichartM,Levi B ,Kahane I,et al 1Dual energy metabotis m 2depend 2 ent effect of ureap las ma urealyticum infecti on on s per m activity [J ]1J Andr ol,2001,22(3):404~4121 (收稿日期:2008210206) 作者简介:余文静,泸州医学院2006级研究生 △ 通讯作者:李著华(指导老师) 干细胞生物特性及其应用 余文静  综述,李著华△  审校(泸州医学院病理生理教研室,四川泸州646000) 【摘要】 近年来人们对干细胞的认识逐渐增加,当知道干细胞具有独特的分化潜能,能治愈组织难以自愈的创伤,能治疗临床上难以治愈的疾病,甚至可以使人返老还童,让青春永驻时,人们便开始企盼着干细胞时代的到来。本文就干细胞近年来在其生物学特性及应用方面进展做一综述。 【关键词】 干细胞;生物特性;应用 【中图分类号】 R 392-33 【文献标识码】 A 【文章编号】 167227193(2009)0120094203 近年来人们对干细胞的认识逐渐增加,当知道干细胞具有独特的分化潜能,能治愈组织难以自愈的创伤,能治疗临床上难以治愈的疾病,甚至可以使人返老还童,让青春永驻时,人们便开始企盼着于细胞时代的到来。本文就干细胞近年来在其生物学特性及应用方面进展做一综述。 1 干细胞的概念 干细胞是一种具有自我复制功能和多分化潜能的早期未 分化细胞,医学界称之为“万用细胞”。按照干细胞的分化潜能,分化层次及其所具有的功能,大致可分为三种类型:胚胎干细胞、组织干细胞和专能干细胞。胚胎干细胞又称全能干细胞,是从哺乳动物包括人的早期胚胎分离培养出来的。其分化潜能大、增殖能力强,既是胚胎发育的基础,又是机体各种细胞最早的祖先,由它可形成完整的生物个体,如早期的卵裂球细胞、胚泡中的内细胞群中的细胞、早期生殖嵴的胚芽细胞等。从某种意义上说受精卵也可视为特殊的全能干细胞。胚胎干 ? 49?

(TOC约束理论)干细胞常用实验技术

实验室内部的人胚胎干细胞protocol 人类胚胎干细胞H1和H9维持方案 一、试剂配制 饲养层细胞培养基 Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM) DMEM (GIBCO 11960-044) 450ml FCS GIBCO 16000-044 50ml 10% Pen/Strep 2.5ml 50IU/ml L-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml 人类胚胎干细胞培养基 HESC-Media KO-DMED GIBCO 10829-018 480ml KOSR GIBCO 10828-028 120ml 20% 10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mM L-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mM Pen/Strep 3ml 55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mM ITS GIBCO 41400-045 6ml 4-80C避光保存。用前每50毫升加200-400ng bFGF 细胞冻存培养基 FBS-DMSO FCS GIBCO 16000-044 9ml 90% DMSO SIGMA D2650 1ml 10% 细胞消化液Trypsin-EDTA 0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mM PBS(-) 14190-144 8ml MEF细胞有丝分裂终止液Mito C Mitomycin C 0.2mg 0.05mg/ml dd-H2O 15230-162 4ml 避光保存。 Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM中。. 0.1% Gelatin(用于培养皿的包被) 1% Gelatin 40ml 0.1%

干细胞临床研究项目备案材料

附件2 干细胞临床研究项目备案材料 干细胞临床研究项目主要提交材料(一式两份): 一、项目立项申报材料诚信承诺书。 二、项目伦理审查申请表。 三、临床研究经费情况。 四、研究人员的名单和简历(包括临床研究单位和制剂研制单位),干细胞临床研究质量管理手册。 五、供者筛选标准和供者知情同意书样稿。 六、干细胞制备过程中主要原辅料标准。 七、干细胞制剂的制备工艺,质量控制标准和制定依据,以及工艺稳定性数据等。 八、干细胞制备的完整记录和干细胞制剂质量检验报告。 九、干细胞制剂的标签、储存、运输和使用追溯方案。 十、不合格和剩余干细胞制剂的处理措施。 十一、临床前研究报告,包括细胞水平和动物实验的安全性和有效性评价。 十二、临床研究方案,应当包括以下内容: 1.研究题目;

2.研究目的; 3.立题依据; 4.预期效果; 5.研究设计; 6.受试者纳入、排除标准和分配入组方法; 7.所需的病例数; 8.干细胞制剂的使用方式、剂量、时间及疗程,如需通过特殊手术导入治疗制剂,应当提供详细操作过程; 9.中止和终止临床研究的标准; 10.疗效评定标准; 11.不良事件的记录要求和严重不良事件的报告方法、处理措施; 12.病例报告表样稿; 13.研究结果的统计分析; 14.随访的计划及实施办法。 十三、临床研究风险预判和处理措施,包括风险评估报告、控制方案及实施细则等。 十四、临床研究进度计划。 十五、资料记录与保存措施。 十六、受试者知情同意书样稿。 十七、研究者手册。 十八、相关知识产权证明文件。

十九、其他相关材料。 (注:专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注)

干细胞培养

造血干细胞的特性与应用 姓名: 学号: xx大学生命科学学院,2010生物科学 摘要: 关键词: 造血干细胞;生物学特性;应用 1造血干细胞的来源 胚胎造血与出生后的较单一、固定的骨髓造血不同,它伴随着生长发育而不断变换造血部位。一般认为,随着胚胎发育过程中造血中心的转移,其造血过程相继分为三个阶段,即胚胎外造血期——卵黄囊造血期(人胚第13~16天)、胎肝造血期(人胚第6周至第5个月)和骨髓造血期(胚胎第四4个月开始至终生)。但有学者认为成体造血干细胞来源于胚胎的背主动脉区,因为能够重建成体各系造血的造血干细胞最早出现在鼠胚第10天的主动脉-性腺-中肾(AGM)区。 而卵黄囊只是一种一过性的造血组织,不是胚胎发育过程中的第一个造血中心。至于骨髓造血干细胞,有人认为其来源于胎肝造血干细胞的迁移,也有人认为其来源于上述的AGM区,目前尚无定论。 2造血干细胞的特性与鉴定 2.1造血干细胞的生物学特性 2.1.1造血干细胞的活化 1986年Lemischka等通过对移植小鼠血液细胞DNA分析所做的克隆研究发现,在小鼠接受移植后的造血恢复期,植入的造血干细胞不是被平均使用,一部分克隆逐渐消退;以移植小鼠的骨髓做二次移植后,二次移植的小鼠造血由在

一次移植中与造血无关的另一部分克隆来维持。结果提示,造血干细胞并非全部处于增殖分化周期中。一般情况下,大部分造血干细胞处于静止期,在必要时才进入细胞周期进行细胞分裂。造血干细胞分裂后,其子代细胞一个通过自我复制维持造血干细胞的特性,另一个则通过分化成为多能性造血祖细胞。造血干细胞的活化机制尚不明确,但至少其中一个机制是通过各种细胞因子来调节。人们推测,造血干细胞的活化,需要多种刺激因子的协同作用。在细胞刺激因子之外,细胞抑制因子也能调节造血干细胞的活化。 2.1.2造血干细胞的自我更新 造血干细胞最为基本的生物学特征是其具有高度的自我更新能力(Self-re-newal),即它能通过自我复制方式使子代细胞与亲代细胞具有完全相同的特征。造血干细胞的这种高度的自我更新能力,在维持机体一生的造血过程中具有重要意义。因为,造血干细胞如果不能通过自我复制进行自我更新,随细胞的增殖分化成熟,干细胞池即会被耗尽而导致难以维持造血。大量研究证实,造血干细胞经分裂后其子代细胞基本上能够保持与亲代细胞完全相同的特性。但也有学者认为,即使是造血干细胞,只要行分裂,从严格的意义上来讲,就不存在完全的自我复制,而已进入了分化阶段。造血干细胞是否确实能够进行完全的自我复制,尚存争议。但具有长期体内外造血重建能力这一特征是造血干细胞所必备的。 2.1.3造血干细胞的多向分化 通过放射线照射,诱导细胞产生染色体异常,然后将具有这种染色体异常的造血干细胞移植给小鼠,在小鼠体内可以看到含淋巴细胞在内的所有血液细胞均具有相同的染色体异常,说明造血干细胞可以形成含淋巴细胞在内的各种血液细胞。现已明确,造血干细胞向成熟细胞分化过程中受到多种正负造血因子的作用,形成一种较为复杂的调控网络。在综合因素作用下,造血干细胞可以分化形成红系、髓系、巨核系成熟血液细胞,也是淋巴系干细胞的来源。除造血系细胞外,近年还发现造血干细胞可以分化形成一些非造血细胞,如破骨细胞、表皮生发层细胞等。新近在一例作异性间骨髓移植后的病人,发现受者肝细胞具有供者的染色体核型,提示其来源于供者的造血干细胞。 而近

生物科技有限公司专业专门提供各种细胞原代细胞肿瘤细胞肿瘤

韵涵生物科技有限公司专业专门提供各种细胞、原代细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞、正常遗传变异细胞。配套专业培养基:上皮细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、微血管、神经元细胞、系膜细胞、胶质细胞、成纤维细胞、心肌细胞、低血清无血清无动物成分细胞培养基等等;传统的常用培养基:DMEM、IMDM、M199、CMRL、BME、MEM等等;以及细胞培养用的相关试剂:赖氨酸、血清、胎牛血清、细胞冻存培养基、消化液、中和液等等。 一、原代细胞 第一篇:人正常细胞 https://www.wendangku.net/doc/c612567633.html,S Cell System 1000 HBMEC (Human Brain Microvascular Endothelial Cells) 人脑微血管内皮细胞 1100 HBVSMC (Human Brain Vascular Smooth Muscle Cells) 人脑血管平滑肌细胞 1200 HBVP (Human Brain Vascular Pericytes) 人脑血管周边细胞 1300 HCPEC (Human Choroid Plexus Endothelial Cells) 人脉络丛内皮细胞 1310 HCPEpiC (Human Choroid Plexus Epithelial Cells) 人脉络丛上皮细胞 1320 HCPF (Human Choroid Plexus Fibroblasts) 人脉络丛纤维原细胞 1400 HMC (Human Meningeal Cells) 人脑膜细胞 1520 HN (Human Neurons) 人神经元细胞 1530 HCGC (Human Cerebellar Granule Cells) 人小脑颗粒细胞 1600 HOPC (Human Oligodendrocyte Precursor Cells) 人少突先驱胶质细胞 1610 HOPC-os (Human Oligodendrocyte Precursor Cell-oligospheres) 人少突先驱胶质细胞(状态:球形) 1800 HA (Human Astrocytes) 人星形胶质细胞 1810 HAc (Human Astrocytes-cerebellar) 人小脑星形胶质细胞 1900 HM (Human Microglia) 人小胶质细胞 2.PNS Cell System700 HSC (Human Schwann Cells) 人雪旺细胞 1710 HPNC (Human Perineurial Cells) 人周神经细胞 3.Cardiac Cell System 6000 HCMEC (Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells) 人心脏微血管内皮细胞 6100 HAEC (Human Aortic Endothelial Cells) 人大动脉内皮细胞 6110 HASMC (Human Aortic Smooth Muscle Cells) 人大动脉平滑肌细胞 6200 HCM (Human Cardiac Myocytes) 人心肌细胞 6210 HCMa (Human Cardiac Myocytes-adult) 成人心肌细胞 6300 HCF (Human Cardiac Fibroblasts) 人心脏纤维原细胞 6310 HCFav (Human Cardiac Fibroblasts-adult ventrical) 人心脏纤维原细胞(来源:成人心室)6320 HCFaa (Human Cardiac Fibroblasts-adult atrial) 人心脏纤维原细胞(来源:成人心房)Coming Soon:HCVSMC (Human Cardiac Vascular Smooth Muscle Cells)! 人心血管平滑肌细胞4.Pulmonary Cell System(肺部) 3000 HPMEC (Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells) 人肺微血管内皮细胞 3100 HPAEC (Human Pulmonary Artery Endothelial Cells) 人肺动脉内皮细胞 3110 HPASMC (Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells) 人肺动脉平滑肌细胞 3120 HPAF (Human Pulmonary Artery Fibroblasts) 人肺动脉纤维原细胞 3200 HPAEpiC (Human Pulmonary Alveolar Epithelial Cells) 人肺齿槽上皮细胞 3210 HBEpiC (Human Bronchial Epithelial Cells) 人支气管上皮细胞 3300 HPF (Human Pulmonary Fibroblasts) 人肺纤维原细胞

干细胞项目投资分析报告

干细胞项目投资分析报告 投资分析/实施方案

承诺书 申请人郑重承诺如下: “干细胞项目”已按国家法律和政策的要求办理相关手续,报告内容及附件资料准确、真实、有效,不存在虚假申请、分拆、重复申请获得其他财政资金支持的情况。如有弄虚作假、 隐瞒真实情况的行为,将愿意承担相关法律法规的处罚以及由 此导致的所有后果。 公司法人代表签字: xxx(集团)有限公司(盖章) xxx年xx月xx日

项目概要 从2018年开始,我国各地政府出台了一系列利好政策,促进干细胞医疗行业的发展。2018年3月9日,广州市人民政府发布了《关于印发广州市促进健康及养老产业发展行动计划(2017-2020年)的通知》,提及未来将重点发展肿瘤免疫细胞治疗、干细胞治疗、基因治疗等医疗技术,开展人成体干细胞及人多能干细胞临床应用技术研究。 该干细胞项目计划总投资19863.29万元,其中:固定资产投资13720.63万元,占项目总投资的69.08%;流动资金6142.66万元,占项目总投资的30.92%。 达产年营业收入43343.00万元,总成本费用34129.82万元,税金及附加341.84万元,利润总额9213.18万元,利税总额10825.80万元,税后净利润6909.89万元,达产年纳税总额3915.92万元;达产年投资利润率46.38%,投资利税率54.50%,投资回报率34.79%,全部投资回收期4.37年,提供就业职位656个。 依据国家产业发展政策、相关行业“十三五”发展规划、地方经济发展状况和产业发展趋势,同时,根据项目承办单位已经具体的资源条件、建设条件并结合企业发展战略,阐述投资项目建设的背景及必要性。

干细胞项目运营方案

项目运营方案 目录 一.市场环境 二.管理架构 三.年度经营指标和经营成本 四.营销策划 五.工作展开 六.分段实施 七.配套支持 八.今年发展计划 一.市场环境 1.中国美容整形市场概况 随着国内消费水平的不断提高,新一代的微雕,面雕,抗衰老为主流的美容市场获得了突破性的机遇。微整形在即将过去的2012年里已经成为全国各个整形美容机构收益最大的增长亮点,有赶超传统美容整形之势头。据中国整形门户网站统计的数据,截止到2012年6月,中国已经成为全球第三大整容大国,其中整容人数达到1000万例,比2010年的300万例增长了300%,整容收入达到了8000亿,比2010年的3000亿增长了265%,以华美,阳光国际,伊美尔,新

时代,曙光等为主流的整形连锁医院在近几年内迅速扩张,发展非常 迅速。也给美容行业的市场发展带来的新的思考及市场。 部门定位:负责南方医科大学微整形项目的市场开拓,渠道代理,终 端销售。 部门职责:见附件(营销中心岗位职责) 二.年度经营指标和经营成本 1.月度实施概况 目标 10月 1.完成团队组建及培训 2.网站设计及制作 3.内部提成方案的制作及落实 4.爱福来(国际)健康养生产业集团合作接待 11月 1.洽谈邀约机构3家,会议合作商5家,拓店3家 2.开始筹备11月份营销会议 3.内部管理工作的梳理,现有合作商参观考察的接待,中瑞生物科技公司合作接待12月 1.12月中旬第一场招商会及终端会合作召开,成交金额200万,代理商5-8家。 2.营销思路总结,调整方向 3.开始打造品牌推广计划 1月 1.1月下旬召开第二场招商会及终端会,预计招代理商8-10家,终端15-30个,成交金额300万 2.尝试性与邀约机构合作,解决终端客户问题 3.网络营销成交客户3-5个,成交金额60万

2020年(生物科技行业)基础生物学作业

(生物科技行业)基础生物 学作业

摘要:随着生物技术的不断发展和成熟,基因遗传学领域研究的深入,基因治疗这壹新的医学手段走进了我们的生活。它能够纠正和补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以人体的靶细胞为工程载体,对其基因进行基因置换或增补,使其在体内表达达到治疗目的。基因治疗能够治疗许多以往医学不能解决的问题,为癌症等绝症的治疗开辟了新天地。 关键字:生物技术;基因治疗;研究;靶细胞;癌症; 一、什么是基因治疗 1.基因治疗的定义 狭义的概念: 指用具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因,因而达到治疗疾病的目的。广义的概念: 指把某些遗传物质转移到患者体内,使其在体内表达,最终达到治疗某种疾病的方法。 基因治疗(genetherapy)是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中,使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说,基因治疗仍可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。 2.遗传病的基因治疗的定义 遗传病的基因治疗(genetherapy)是指应用基因工程技术将正常基因引入患者细胞内,以纠正致病基因的缺陷而根治遗传病。纠正的途径既能够是原位修复有缺陷的基因,也能够是用有功能的正常基因转入细胞基因组的某壹部位,以替代缺陷基因来发挥作用。基因是携带生物遗传信息的基本功能单位,是位于染色体上的壹段特定序列。将外源的基因导入生物细胞内必须借助壹定的技术方法或载体,目前基因转移的方法分为生物学方法、物理方法和化学方法。腺病毒载体是目前基因治疗最为常用的病毒载体之壹。基因治疗目前主要是治疗那些对人类健康威胁严重的疾病,包括:遗传病(如血友病、囊性纤维病、家庭性高胆固醇血症等)、恶性肿瘤、心血管疾病、感染性疾病(如艾滋病、类风湿等)。

第三代生命科学论之——干细胞再生医学的理论存在严重缺陷

《第三代生命科学论》之 ——干细胞再生医学的理论存在严重缺陷 作者:颜丙强张涛 单纯的向人体内输入大量的干细胞,虽然患者会感觉像是被“打了鸡血”一样兴奋,短期内会出现某些症状的改善,但是长期看来会造成整体机体的代谢负担,引发代谢系统的进一步失调。 目前,干细胞再生医学遇到发展瓶颈与科研困难的根本,是因为他们有一个基础性的认知是有缺陷的。在科学研究中,确实观察到了人体细胞在新旧代谢的过程中,人体内的干细胞不断的进行多种转化与分化,在组织器官的新旧更替中起到至关重要的作用。于是就想当然的认为,人体内受损的组织器官不能被修复与再生的根源是人体中的干细胞数量不足所导致。于是,就开始在体外培养与富集大量的自体的或异体的干细胞,然后把他们再注射到人体中去。他们认为,只要是补充了足够数量的干细胞,那些损伤的组织与器官就会获得修复与再生。 他们这种思想认知的根源,是由于还原论思维的定式造成的,把人体看作是一个机械式的组合式整体。他们认为人体出现问题的根源是因为这个组合整体的一个要素缺少了、不足了,只要通过外援补充这个要素,就是可以起到恢复组合整体的效果。 但是,其实人体是从一个单细胞原始整体开始分化的分化式整体,是一个元整体,是一个无比复杂的巨系统。人体组织器官损伤后不能被修复的根源,不仅仅是一个干细胞数量多少的要素,还与许许多多的的其他要素共同相关。只有众多的要素都具备了,机体才能对被损伤的组织器官进行修复与再生。而让众多要素都具备的最佳方式,一定不是一味地补充注射干细胞,而是要想方设法的启动起人体本自具足的自组织机制。只有人体的自组织机制,才能把众多的要素备齐,并能进行有机的调度与分配。因此,研究如何依靠和推动机体进行自主调理,发挥机体的自组织机制和能力,才是再生医学的第一基本原理。 美国哈佛大学心脏干细胞研究的丑闻事件,即证实了心脏中根本不存在心脏干细胞,也证实了并不是直接向心脏里注射干细胞就会起到修复与再生的作用。2019年12美国辛辛那提儿童医院在《自然》杂志发表的那片论文称“干细胞心脏疗法”的背后机制或与“干细胞”无直接联系,而是由注射时导致了伤口或损伤,是由伤口愈合反应诱导引起的心脏向好反应。因此,事实已经一再证明,研究如何诱导人体的自组织系统启动,才是回归真正再生医学的必由之路。 作者简介: 颜丙强,男,山东省济南人,中国共产党党员,《第三代生命科学论》作者。2007年博士毕业于山东大学生命科学学院,2009年9月份得到国家主席党总书记胡锦涛同志的亲切接见与勉励,并在中央电视台《新闻联播》节目中播出,一直致力于坚持利用钱学森先生的人体复杂系统论思想,思考与重建当代生命科学技术体系,总结分析了人体生命系统的六大基本原理。 颜丙强博士领导的团队在系统论思想与理论的指导下,充分论证了“癌症是一种代谢性疾病”,应主要遵循代谢调理的治疗思路,并研究出了一套综合调理方案;在利用中草药提取成份诱导人体组织器官原位再生领域取得巨大突破,实现了人体多组织器官的原位修复与

相关文档