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艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保...

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艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南

(试行)

A Guideline for Quality Assurance of CD4+ T Lymphocyte Test in People Living with HIV/AIDS

中国疾病预防控制中心

2006年2月

本指南由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室组织有关专家撰写,由中国疾病预防控制中心批准执行。

编写主持人:

蒋岩

编写人员:

肖瑶蒋岩裴雪涛刘艳荣仲人前苏旭姚均尚红

于世北徐建青

编写单位:

中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心

参编单位:

军事医学科学院野战输血研究所

上海第二军医大学长征医院

北京大学人民医院血液病研究所

中国疾病预防控制中心辐射防护和核安全医学所

中国医科大学附属第一医院

顾问:

Francis F. Mandy

加拿大公共卫生局疾病预防控制中心国家免疫学实验室

Thomas J. Spira,

美国艾滋病性病与结核病预防中心免疫和诊断系临床

免疫学实验室

Trover Peter

克林顿基金中国项目实验室专家

Tao Ding

加拿大公共卫生局疾病预防控制中心国家免疫学实验室

前言

随着我国艾滋病患者抗病毒治疗和自愿咨询和检测(VCT)工作的深入开展,对CD4+T淋巴细胞的检测需求日益增加。截至2005年,全国已经有近百台各型流式细胞仪和/或CD4+T淋巴细胞计数仪直接服务于艾滋病病毒感染者和艾滋病患者,这些仪器在艾滋病防治工作中发挥着重要作用。为了保证实验室CD4+T淋巴细胞的检测质量,特制定适合我国现状的CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南。

本指南的制定以我国艾滋病防治现行政策和相关技术标准为依据,同时参考了美国、加拿大和澳大利亚等国家的现行指南。本指南适用于目前国内使用的检测CD4+T淋巴细胞的主要仪器,旨在为各地在实际工作中提高CD4+T淋巴细胞检测质量,因地制宜地建立适合当地实验室条件的质量保证规程和标准操作程序提供有益的参考。

致谢

本指南写作过程中,得到了世界卫生组织和克林顿基金的大力支持,也得到了许多病毒和免疫学领域资深专家的支持,使得本指南能在很短的时间内呈现给工作在CD4+T淋巴细胞检测一线的同仁们,为规范我国CD4+T淋巴细胞检测,保证有效治疗艾滋病做出了无私奉献,在此我们表示深深的敬意。

国家艾滋病首席专家邵一鸣教授在本指南编写过程中给予了重要的指导建议,在此特别致谢。

目录

第一章总则 (1)

第二章实验室环境与设施 (2)

第三章实验室安全 (4)

第四章质量保证 (6)

第五章室内质控 (7)

第六章外部质控 (13)

第七章标准操作程序 (SOP)模板 (15)

附表1 CD4+T淋巴细胞检测样品发送/接收单 (16)

附表2 药物及其他生物学因素对CD4+T淋巴细胞测定结果的影响 (17)

附表3 CD4+T淋巴细胞检测结果报告单 (18)

附表4 CD4+T淋巴细胞检测能力验证样品接收表 (19)

附件5 CD4+T淋巴细胞检测能力验证样品结果报告表 (20)

参考文献 (23)

第一章总则

1.1 意义

准确可靠的CD4+T淋巴细胞检测是评价HIV感染者免疫状况,预测判断疾病进程、评价抗病毒药物治疗效果和估测预后的重要指标;世界卫生组织(WHO)和欧美等国家均推荐,艾滋病病毒(HIV)感染者每3-6个月监测一次CD4+T淋巴细胞水平,并以该指标作为开始预防间质性浆细胞肺炎和其它机会性感染,以及作为开始抗逆转录病毒治疗的主要指标。依照世界卫生组织和美国CDC成年人和未成年人AIDS病例中HIV感染和病例监测分类系统定义,CD4+T 淋巴细胞水平也作为判断HIV相关临床病程的标准。我国“国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册”中也将CD4+T淋巴细胞CD4<200/mm3做为开始抗病毒治疗的标准。因而保证CD4+T淋

《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保巴细胞检测质量是非常重要的。

证指南》对保证CD4+T淋巴细胞检测质量有重要的指导意义。

1.2目的

指导我国从事HIV感染者和AIDS患者CD4+T淋巴细胞检测工作的实验室人员,规范CD4+T 淋巴细胞检测方法和程序,完善实验室质量保证与质量控制,提高检测的准确性。

1.3 适用范围

适用于我国采用单平台法检测艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞的所有实验室。

1.4 缩略语

HIV/AIDS: 艾滋病病毒感染者和艾滋病患者;HIV:艾滋病病毒; AIDS:艾滋病; SOP:标准操作程序; FCM:流式细胞术;SPT:单平台技术;ID:患者编号;PMT:光电倍增管; PT:能力验证

第二章实验室环境与设施

2.1CD4+T 淋巴细胞检测实验室设施

理想的CD4+T淋巴细胞检测实验室应该有专用实验室。如果空间有限,CD4+T淋巴细胞检测可以与HIV检测的筛查和确认实验室共享一个空间。本指南推荐的是理想的CD4+T淋巴细胞检测实验室的空间安排。样品接收、处理在一单独房间,样品检测、分析和报告在另一单独房间。该类实验室应符合国家生物安全二级 (BSL-2)实验室的有关规定。

2.2 CD4+T淋巴细胞检测实验室空间安排的一般性原则

实验室应有以下区域:

2.2.1样品接收区;

2.2.2样品存放区;

2.2.3样品处理区;

2.2.4样品检测区;

2.2.5结果分析和发布区;

2.2.6资料存放区(实验室档案)

图1 CD4+T淋巴细胞检测实验室规划图(建议)

(注: 具体空间尺寸应与设备大小相一致)

如在独立实验室进行CD4+T淋巴细胞检测,其实验室规划和工作流程应如图1所示。虚

线以上相对独立。如果属于共用实验室也应按照如图1所示的区域设计实验室。

实验室空间规划应参考仪器制造商提供的主机及其附属设备的尺寸。样品检测和数据分析可以在同一实验室或不同实验室进行。

第三章实验室安全

实验室负责人应保证所有涉及CD4+T淋巴细胞检测的检验员和管理者接受足够的生物安全培训,并接受年度复训,了解生物安全保障的一般性导则。相关人员要接受实验室安全员和实验室安全负责人的监督。所有实验室事故和意外要根据艾滋病实验室事故和意外处理的原则进行处理、记录和报告。

实验室安全负责人的责任是保证实验室处于安全状态。所有人员有责任实现自身保护和其他工作人员的安全。所有人员的安全培训均应记录在实验室和人事档案中。具体操作应遵照国家卫生部2004年4月颁布的《医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则(试行)》,2003年8月颁布的《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则(WS 233-2002)》中华人民共和国卫生行业标准,和中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范(2004版)》中的相关条文和一般性导则规定。

3.1 环境

应符合国家二级生物安全实验室(BSL-2)有关规定。

3.2 制度与管理

实验所涉及的称量器具和测试仪器均要求建立管理与登记制度。使用管理制度应参照国家生物安全相关规定,结合本实验室其他HIV检验工作安全制度,并使称量器具和测试仪器的使用规程相一致。CD4+T淋巴细胞检测最基本的管理内容应包括:移液器、细胞计数仪、冰箱、计算机及其附属设备等。使用登记内容应当尽量涵盖必要的管理要素,按执行日期登记。

3.3 样品安全

本节内容包含与CD4+T淋巴细胞检测检测相关的样品采集、包装、运输、接收、分装、测试和储存等各环节的安全要求。采集、包装、运输三部分为实验室外部过程,应遵循现场工作安全规范。

接收样品的所有措施、规程和制度均应符合国家相关规定。在实际操作中(包括各级各类筛查、确认和参比实验室)应在符合2级生物安全实验室(BSL-2)要求的实验室中进行。

3.4 废弃物处理

所有废弃物应按照HIV污染物品处理。由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒。

只有在确认彻底消毒后,才能移出污染区,妥善包装后移交专门机构进行销毁,不得循环使用。

3.4.1废弃物分类

按照物理特性分类,主要有液体、可燃性物质与不可燃性物质。不可燃性物质又可分为金属和非金属类。分类有助于选择适宜的消毒方法。

3.4.2消毒方法

液体类消毒应注意消毒剂被废液稀释后,最终稀释浓度必须保持在有效消毒浓度。

计算消毒剂用量应以需处理的废液总量为分母。可燃性物质应遵循先消毒后焚烧的程序。焚烧应由环保部门认可的专业机构进行,防止造成环境污染;不可燃物质中非一次性用品应遵循先消毒后清洗,清洗后常规消毒包装后再使用的程序。一次性用品应按照先消毒后深埋的程序进行。

常用消毒剂配制浓度与物理消毒方法

3.4.2.1 含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000-5000mg/L)适用于废液缸、溢出物

3.4.2.275%乙醇适用于实验室桌面、生物安全柜工作台面和仪器表(非光学部件)

3.4.2.32%戊二醛

以上浸泡消毒时间为器具保持在液面下10~30 min。

3.4.2.4高压蒸汽消毒,121℃,保持15~20min;

3.4.2.5干燥空气烘箱消毒(干烤消毒),140℃,保持2~3h。

3.4.2.6流式细胞仪内置的废液收集桶应按照HIV实验室废液处理方法和规程进行消毒。

3.4.2.7标识与登记

所有消毒剂都应明确标记浓度。配制好的消毒剂应标明配制时间。

3.5 个人防护

个人防护应符合国家有关艾滋病实验室标准的要求。

尽管流式仪激光束属于低能量激光。但在实施仪器维护和检修过程中,应注意避

免激光束对眼睛的直接照射。

3.6 人员培训与考核

CD4+T淋巴细胞检测的管理人员和检测人员应接受与工作相关的技术培训。所有工作人员必须经过HIV检测技术和省级以上艾滋病实验室安全培训,包括CD4+T淋巴细胞检测上岗培训和定期复训。接受实验室生物安全责任人和实验室管理人员的监督。实验室的安全责任人要对工作秩序和环境的安全负责,所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。

3.7 突发事件处理与报告

遵循国家HIV检测实验室有关突发性生物安全事件处理程序和认定原则进行登记上报和应急处理。

第四章质量保证

实验室的质量保证是为达到质量目标而制定的一套规范行为的标准。质量保证的目的是持续为病人提供准确可靠的检测结果。实验室的质量保证要考虑自接受样品到发出检测报告过程中所有可能影响检测结果的因素。包括行政支持、实验室管理、环境要求、人员培训和质量控制等多方面的内容(见图2)。有关行政支持、实验室管理和环境等要求按照“全国艾滋病检测技术规范”和“全国艾滋病检测工作管理办法”的规定执行。工作人员应在实验室管理、CD4+T淋巴细胞检测技术和质量保证等方面得到全面培训。

质量控制包括室内质量控制(简称室内质控)和外部质量控制(简称外部质控)。室内质控要求工作人员做好仪器质控和过程质控(详见第五章), 过程质控主要由试剂质控、样品质控和数据质控构成。外部质控主要要求CD4+T淋巴细胞检测实验室参加检验能力验证(详见第六章)。

第五章室内质控

5.1仪器质控

5.1.1 仪器应按照生产厂家的要求进行校准。正式检测样品前应先用仪器生产厂家的质控品校准仪器,质控品通过测试后方可检测样品。

5.1.1.1 通常仪器设置应当按照仪器生产厂家的要求用商业化的校准物质(如荧光微球)校准流式细胞仪并建立档案,保存记录并监测流式细胞仪的性能变化(电压,放大,补偿)。

5.1.2设置分析窗口

5.1.2.1 依据试验所用荧光单克隆抗体所带荧光素选择对应的通道,建立分析窗口。专门设置的分析窗口取决于流式细胞仪荧光性的范围通道特性与所使用的抗体组合。分析窗口的荧光范围由相应通道的特性决定。设计分析窗口在特定设置情况下,通过流式检测的荧光范围。

5.1.2.2 目的是可以达到荧光范围的重复性和细胞群位置的标准化

5.1.2.3 使用荧光微球作为参考标准。

5.1.2.4 收集每个通道的信号作为靶标,记录保存建立的分析窗口为以后分析所用。

5.1.2.5 再开机检测时用此靶值作为标准值,调节PMT电压,得到同一窗口进行样品分析。

5.1.2.6 每天对电压做Levey-Jenning图。

5.1.3 每日应校正光路,确保所有的参数都有最明亮最窄的峰。

5.1.4 进行多色分析时,颜色补偿通常由自动软件完成,自动补偿一般情况下会运行很好。通常在一至两个月中定期设置一次荧光补偿。如果变异系数(CV)有较大变化或在样品获取时出现问题要及时进行调节或校准(见图3)。在某些情况下推荐手动补偿,例如:需确认现有光学滤镜与新的荧光剂的兼容性。手动补偿即是将每一抗体在单独的试管中与正常人阴性血样结合进行每一种单一抗体的补偿,然后混合单色的样品,依照仪器生产厂家要求设置色补偿。

5.1.5 使用多色试剂( 三色和四色),可用仪器质控软件成功运行后自动生成的仪器设置文件内的荧光补偿。强力推荐每1-2个月使用正常人全血,对每一通道进行补偿和电压调节。使用单色试剂,需要调用上述文件后,依据样本情况和图4的补偿原理进行优化。

5.2 过程质控

5.2.1试剂质控

5.2.1.1 所用试剂应在有效期内。

5.2.1.2 使用不同批号试剂时,需要进行平行实验。即新批号试剂在测定质控品(已知细胞数

的商业质控品)时能够获得与原试剂相同的结果。

未补偿补偿不足正确补偿

A1–A3分布图,分别显示实验图。B1–B3是A1–A3相对应的示意图

图3 多色补偿图

此图引自《用CD45设门的单平台法检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的CD4+T淋巴细胞实验操作指南(2003年版)美国CDC》

5.2.1.3 对于同批试剂,应采用HIV阴性全血样品作为定值指标。

5.2.1.4 用CD45设门进行CD4+T淋巴细胞检测。对于不能测定进样体积的流式细胞仪,非测量体积获得细胞数的仪器,必须用微球计数T淋巴细胞各亚型的绝对数。

5.2.2样品质控

5.2.2.1样品采集

a)抗凝管的准备和标记:选择含有固态抗凝剂(KEDTA)的采血管(2ml或5 ml)作为血样采集管。应保证采血量达到但不超过抗凝管容积的水平,以保证抗凝剂的最终有效浓度。尽可能采用真空管,避免使用注射器采集血样。将被检者ID号标签贴于抗凝管上,并在CD4+T 淋巴细胞检测样品发送/接收单上注明采样日期和时间(见附表1)。

b)采血时间:鉴于CD4+T淋巴细胞数日间自然变化的个体差异,每一病人采样时间应尽可能集中在某个相同的时段。如:每次采样时间均在上午或均在下午。

c)采样量:成人采集静脉血5ml,采集儿童静脉血样品建议用儿童型注射器和小试管(2ml),采集婴儿样品较为困难,用小试管采集0.5-1ml即可。所有血样应立刻注入事先加入适当抗凝剂的试管。

d)样品混匀:采集的静脉血注入抗凝管后,立即轻轻颠倒抗凝管6-8次,使血液与抗凝剂充

分混匀,防止血液凝固。

e)影响因素: CD4+T淋巴细胞水平会受到一些因素的影响,采血前应了解患者的状况。服用肾上腺皮质激素,急性病毒感染以及术后病人等均不宜采血。参见病人用药和疾病情况可能影响CD4+T淋巴细胞检测结果简表(附表2)。

5.2.2.2样品运输

a)安全运输样品:按照国务院“病原微生物实验室生物安全管理条例”和国际传染病物质航空运输的标准,进行三层包装。参见《全国艾滋病检测技术规范(2004年版)》。

b)样品运输条件:37℃以上的温度会破坏细胞,使血液学和流式仪的检测结果受到影响。在室温(18-25℃)保存和运输样品,避免极端温度(结冰或大于37℃)。高温季节,需用隔热容器盛装样品,并将其置于有冰袋和吸热物质的容器中。如样品不能立即送达实验室或送到后不能立即检测,应存放于室温,不得冰冻保存。特殊情况下按要求保存和运输。

c)样品运输条件:样品应在48小时之内送达检测实验室。

5.2.2.3样品接收和贮存

a)样品接收:检测实验室应指定专人接受样品。收到样品后,应填写CD4+T淋巴细胞检测样品发送/接收单(见附表1)。检查样品质量、数量并核对标识。溶血、凝血或结冰的样品应视为不合格样品,不可检测。如果样品较热或较冷,但没有明显的溶血或结冰,可以进行处理检测,但要在接收记录以及结果报告表上详细注明接收时不正确的温度条件或存在溶血的程度。

b)样品贮存:样品到达后,应及时进行处理,如不能马上处理,应在室温(18-25℃)保存,避免极端温度(结冰或大于37℃)。样品应在采集后72小时内完成检测。

5.2.2.4样品处理

样品的处理和分析应遵循有关标准操作程序(SOP),并需注意下列要点:

a) 吸液: 吸液不准确是导致检测错误的最常见原因。检测前,实验人员必须经技术培训,并接受周期性测评。移液器需定期校正(见附件1)。

b) 混合: 处理样品时,应充分混合样品和试剂,再移至上样管。

c)应采用免洗法进行样品处理。

d) 所有加入抗体后的试管应避光,并按规定的时间进行孵育。

e) 经染色处理的样品应用含有多聚甲醛的固定剂(PFA)固定。以保证样品稳定并使HIV灭活。

f) 样品固定30分钟后方可上机检测,若不能即刻检测,应将染色样品储存于4-10℃冰箱。已经加入荧光微球的样品应在6小时内上机检测。如不能按时上机检测,荧光微球须在检测

前加入。检测时间必须遵循不同仪器的相关标准操作程序。

5.2.2.5样品分析

a)样品分析应遵循与仪器相应的标准操作程序(SOP)。

b)如果利用CD45单克隆抗体和侧向光设门(见图4),可检测放置72小时的样品,并可用于检测6岁以下儿童CD4+T淋巴细胞占淋巴细胞总数的百分率。

c)每份待检样品应保证收集足够的T淋巴细胞数(至少2000-2500个)。分析所收集到的荧光微球,至少要大于荧光球的数目。通过分析所收集到的荧光微球量计算CD4+和CD8+T淋巴细胞的绝对数量。

5.2.2.6每日质控

a)稳定的全血样品可用于室内质控。在CD4+T淋巴细胞测定过程中,同时使用室内质控品,可帮助分析和判断仪器的准备和分析是否均处于最佳状态。

b)实验室需绘制每日质控图。

c)每日质控图应由参加CD4+T淋巴细胞检测的工作人员绘制。绘制质控图(Levey-Jenning)均值和标准差来自商用质控品或CDC提供的质控品。该质控品提供CD4+T淋巴细胞数的均值和标准差。实验室将每次测定的CD4+T淋巴细胞计数点在上述质控图内。实验者必须检查各点是否在2倍标准差之内。使用该图的目的是每日检查实验质量,发现并及时改正不良操作。此外,当改用不同厂家试剂或改变质控品时须重新绘制质控图(Levey-Jenning)。

5.2.3数据质控

5.2.3.1数据分析

a)用高亮度的CD45和低亮度的侧向散射光确定淋巴细胞。用CD45设门确定淋巴细胞的单平台(SPT)分析方法如图4所示。

b)对淋巴细胞进行设门时,单核细胞不能超过3%,设门不能过小,应保证门内有97%以上的淋巴细胞。

5.2.3.2结果报告

a)结果报告时间及复检:按照报告单内容填写结果,接受样品后72小时之内出具CD4+T淋巴细胞检测结果报告。CD4+T淋巴细胞检测结果报告单应由检测者和主管共同签字。见附表三。b)正常值范围:成人和儿童的参考范围应该由国家或省市级实验室制定,结果报告单中应附有参考范围(例如,CD4+T淋巴细胞绝对数和百分数)。

c)各项检测指标的含义:CD4+T淋巴细胞是T辅助淋巴细胞。报告该值的正确细胞是CD3和CD4全部双阳性的细胞,未使用CD3抗体时,正确细胞应是高表达CD4受体的细胞。同样,CD8+T淋巴细胞是T抑制淋巴细胞/细胞毒细胞和CD3,CD8都为阳性的细胞。在识别CD4和CD8中应不包括

其他细胞型别的非T淋巴细胞。

5.2.3.3 数据储存

a)尽可能对所有分析过的样品都存储成原始数据文件(data file)格式,这样可以对原始数据进行分析。

b)保留所有的原始文件、报表和报告。保存期至少两年,或按照当地政府或有关部门规定要求保留更长的时间。数据可以电子版存放。保存期限过后由实验室主任决定如何处理。

5.2.3.4可靠性分析

CD3+CD4+%与CD3+CD8+%总和等于CD3+%加减5%。两管都有CD3的三色试剂检测CD3+CD4+与CD3+CD8+T淋巴细胞时变异性应小于等于2%。用新方法或改变操作者时建议每一个实验室应进行不少于5次重复检测和分析来确定检测的变异性。实验结果的变异性应小于10%(CD4+T 淋巴细胞应大于50个细胞/ul)。

图4. 流式细胞仪显示屏上所示4色单平台法图像

点分布图的1–3分别显示CD45侧向散射,CD4/CD3和CD8/CD3的图像。点分布图中4、5用来确定荧光微球数目。图中4、5中荧光微球分别被定位在R2和M1区域内。此图引自《用CD45设门的单平台法检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的CD4+T淋巴细胞实验操作指南(2003年版)美国CDC》

第六章外部质控

6.1 外部质控

外部质控是有组织地系统质控测量。是由具有外部考核经历,并且检测质量获得改进的实验室之间进行相互质量参比,从而提高实验室结果的可比性(国内的外部质控流程参见图

5)。

6.1.1 外部质控的目的: 确保在所有实验室CD4+T淋巴细胞检测都有良好的高度一致的结果。

6.1.2 参与者: 所有用单平台方法进行CD4+T 淋巴细胞检测的实验室。

6.2 组织者

国家艾滋病参比实验室负责制订和发展外部质控相关技术标准,并负责组织检验能力验证(PT)计划的实施。有条件的实验室可参加国际认可机构的质控。

6.2.1 PT频率: 每年至少2次,每次2-5支质控品。

6.2.2 参评单位职责: 参评单位实验室应在指定期间分析测定质控品,并填写结果报告单。按规定时间将填写完整并经单位审核的报表上交国家艾滋病参比实验室或相应的国际认可机构。

图5 国内CD4+T淋巴细胞检测实验室参加能力验证流程图

6.3 PT样品来源及要求

PT样品由中国疾病预防控制中心艾滋病参比实验室提供或国际认可机构。

PT样品的保存、运输:运输应遵守其特殊要求,通常运输温度应保持4℃。到达参加能力验证实验室的PT样品应在4℃保存,并应于收到之日后下一个工作日进行检测分析。结果一般要求在完成检测后次下一个工作日,通过电子邮件、互联网或传真尽快上报。如参加能力验证实验室遇到特殊情况,不能检测(如仪器故障等),可暂时将PT样品保存在4℃,待故障排除后再进行检测。需要指出的是,PT样品的稳定期在3周之内,自接到样品之日超过3周的样品即不能检测。

6.4 PT样品的检测

6.4.1 PT样品的接收:要求参加能力验证的实验室收到PT样品后,立即进行清点、检查,填写接收表(见附件4),如发现缺失、空管、溶血、凝血、结冰等情况,应及时向国家艾滋病参比实验室或相应国际机构报告,并要求补寄或更换。

6.4.2 PT样品的检验:PT样品应按常规操作与日常样品一同进行检测,以反映实验室日常检测质量。不能对PT样品给与特殊待遇,不可修改检测结果。

6.4.3 结果报告:实验人员完成PT样品检测后,应填写结果报告表(见附件5),经实验人员及实验室负责人审核后签字。

6.5 外部质控数据管理

参加能力验证实验室经传真或电子邮件将数据发送至国家艾滋病参比实验室或国际认可机构,由中国疾病预防控制中心艾滋病参比实验室或相应的国际认可机构进行数据分析。

中国疾病预防控制中心艾滋病参比实验室或国际认可机构将根据所有参加能力验证实验室总的结果进行评分。如果某实验室结果超出两倍标准差指数(SDI),则必须进行及时质量改进,中国疾病预防控制中心艾滋病参比实验室提供质量改进建议。

SDI=(某实验室试验结果-所有参加实验室试验结果的平均值)/所有参加实验室试验结果的标准差.

=残差(Residual )/ 标准差(SD)

当SDI 值超出±1.5 时系统处于告警状态,应予注意,

当SDI 值超出±2.0时整个系统处于失控状态,提示存在较大的问题,检验结果无效。

第七章标准操作程序 (SOP)模板

7.1 SOP的定义

SOP是实验室内部以文件的形式对质量活动用规定的方法进行连续而恰当的控制。应包括对试验中每项工作所拟定的标准或所规定的途径。

7.2 SOP的作用

为保证某个特定活动进程的一致性而制定的详细指令。实验室的SOP应涵盖所有的质量活动,包括检测或校准计划、管理性程序、技术性程序、项目操作程序和记录表格等。由于影响每个实验室的质量活动的条件和因素不一样,一个SOP只在某个实验室内有效,不一定适用于其他实验室。

7.3 SOP的一般性原则

?由实验室相关人员书写

?实验室人员能够方便查取

?所有程序要符合实验室情况

?SOP由作者和/或主任签署并标明日期

?可随时根据实验室变化修改

?任何变动要签字

7.4 SOP至少包含以下内容

(1)目的(2)范围

(3)职权和授权(4)定义

(5)背景(6)程序

(7)质量控制(8)安全操作和防护

(9)参考文献(10)相关文件

(11)附录

艾滋病知识竞答题

艾滋病知识问答 一、选择题 1、艾滋病的英文缩写是(B) A、HIV B、AIDS C、HBV D、SARS 2、艾滋病病毒的英文缩写是(A) A、HIV B、AIDS C、HAV D、HBV 3、艾滋病的医学全名为(B) A、免疫缺陷综合征 B、获得性免疫缺陷综合征 C、先天性免疫缺陷综合征 D、继发性免疫缺陷综合征 4、艾滋病是由下列哪种病毒引起的?( C ) A、先天性免疫缺陷病毒 B、获得性免疫缺陷病毒 C、人类免疫缺陷病毒 D、动物免疫缺陷病毒 5、我市目前艾滋病传播方式中所占比例最高的是(A) A、性接触 B、母婴传播 C、输血 D、共用针具注射毒品 6、感染艾滋病病毒的妇女会通过什么途径将病毒传染给婴儿(C) A、妊娠,分娩,亲吻 B、哺乳,亲吻,妊娠 C、妊娠,分娩,哺乳 D、搂抱,亲吻,呼吸 7、下例哪项预防艾滋病的方法是不正确的?( D ) A、性关系专一 B、对被艾滋病毒感染者的血液污染的物品及时消毒 C、感染的妇女不怀孕可防止后代感染 D、将艾滋病人隔离起来保护大家 8、以下哪种接触不会感染艾滋病?(A) A、共用餐饮具,共同进餐 B、同性性行为 C、共用被艾滋病病毒污染的注射器 D、使用被艾滋病病毒污染的血液制品 9、综合防治艾滋病都有哪些措施(D) A、宣传教育 B、行为干预 C、关怀救助 D、以上都是 10、下列哪项是预防经性途径感染艾滋病的有效措施( A )

A、坚持正确使用安全套 B、拒绝毒品 C、到正规医院拔牙 D、不与人共用牙刷 11、艾滋病病毒感染者是指(D) A、感染了艾滋病病毒而且已经出现AIDS临床症状和体征的人 B、接触过艾滋病病人的人 C、接触过艾滋病病毒的人 D、感染了艾滋病病毒但还没出现AIDS临床症状和体征的人 12、以下哪种情况会感染艾滋病(C) A、与艾滋病病毒感染者共用餐饮具,共同进餐 B、与艾滋病病毒感染者一起上班 C、与艾滋病病毒感染者共用注射器 D、与艾滋病病毒感染者一起游泳 13、请说出艾滋病发病后的典型症状( D ) A、长期低热,咳嗽 B、体重下降 C、慢性腹泻 D、以上都是 14、当HIV侵入机体后,未进入发病期者被称为( B ) A、艾滋病病人 B、艾滋病病毒感染者 C、窗口期 D、艾滋病期 15、感染艾滋病病毒后,到血液中能检测出艾滋病病毒抗体的这段时间,称为什么期( D ) A、急性感染期 B、无症状感染期 C、临床症状前期 D、窗口期 16、下列哪项不是艾滋病的传播途径( D ) A、性传播 B、母婴垂直传播 C、血,血制品,器官移植和污染的注射器 D、蚊虫叮咬 17、HIV传播必须具备的条件有哪些? ( D ) A、有大量的病毒从感染者体内排出 B、排出的病毒要经过一定方式传递给他人 C、有足量的病毒进入体内 D、以上都是

免疫细胞表面标志Mark

辅助性T细胞的典型表面标志:CD3+CD4+CD8-。(Th1主要分泌IL-2,IFN-γ或TNF-β等辅助细胞免疫或参与迟发型超敏反应;Th2主要分泌IL-4/5/6/10等辅助体液免疫、参与速发型超敏反应) 细胞毒性T细胞的典型表面标志是CD3+CD4-CD8+。(CD3+CD8+CD30-可认定为Tc1细胞;CD3+CD8+CD30+可认定为Tc2) 调节性T细胞:自然存在的,其典型标志为CD4+CD25+Foxp3+ (最重要的分子标记是一种转录因子Foxp3) 成熟B细胞均表达CD19,B1细胞CD19+CD5+,B2细胞CD19+CD5- NK细胞的典型标志:CD3-CD16+CD56+。 单核-巨噬细胞的典型表面标志为CD14。 人成熟DC的主要特征表面标志为CD1a、CD11c和CD83,但不表达MPS T/B/NK细胞的典型表面标志(CD14/3/19和CD20/16/56)。

小结 淋巴细胞并不是功能单一的群体,但其在光学显微镜下的形态基本是一样的,因此要对其进行进一步的分类和观察就不能采用形态学的方法, 而要依靠对其表面标志的检测。常用于鉴定和检测计数淋巴细胞的表面 标志是CD抗原。 进一步区分淋巴细胞亚群可使某一类淋巴细胞的功能趋向一致和单一。 但目前看来,还很少有只通过一个CD抗原就能将某一类淋巴细胞亚群 指示出来的CD抗原,CD抗原指示出来的淋巴细胞亚群多数都是相对特 异。 根据T细胞的免疫效应功能和表面CD分子表达至少可以分为:辅助性T 细胞、细胞毒性T细胞和调节性T细胞;SmIg为B细胞所特有,是鉴定B 细胞可靠的指标,以CD5和CD19为标志可将B细胞分为B1和B2两个亚群; 目前多以CD3一、CD16+、CD56+作为NK细胞的典型标志。

人脐血及骨髓淋巴细胞免疫表型的比较及其意义

人脐血及骨髓淋巴细胞免疫表型的比较及其意义 郭 荣,邹 萍,邹典斌1 (华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所,武汉430022; 1郑州大学医学院第一附属医院血液科,郑州450052) 摘要 为比较脐血和骨髓淋巴细胞及祖细胞分化抗原,通过流式细胞术(FCM)双标法对38份脐血及10份骨髓免疫细胞表型进行了分析研究。研究发现:①脐血及骨髓淋巴细胞中均测到幼稚淋巴细胞(CD3-CD4+),且前者中含量较多,但脐血细胞毒T细胞含量(CTL,CD3+CD16+56+)低于骨髓;②脐血中N K细胞(CD3-CD16+56+)比例高于骨髓;③脐血有核细胞中CD34+细胞的比值接近于骨髓,但脐血CD34+细胞中髓系祖细胞(CD34+ CD13+,CD34+HLA2DR+)及淋巴系祖细胞(CD34+CD19+)含量均低于骨髓。结论:①脐血免疫细胞具有不成熟性,这估计是脐血移植后GVHD程度轻的主要原因;②脐血淋巴细胞中N K细胞含量较高,推测脐血移植后移植物抗白血病效应(GVL)并不会降低;③脐血CD34+细胞中髓系祖细胞及淋巴系祖细胞比例均低于骨髓,可能是脐血移植后造血及免疫重建速度较慢的原因之一。 关键词 脐血;骨髓;淋巴细胞;免疫表型 中图分类号 R33111;R331.2 A Comparison bet w een Immunophenotypes of Lymphoid Cells from H uman Umbilical Cord Blood and Bone Marrow and Its Signif icance GUO Rong,ZOU Ping,ZOU Dian2Bin1 (Instit ute of Hematology,The A f f iliated U nion Hospital,Tongji Medical College,Huaz hong Science and Technology U niversity, W uhan430022,Chi na;1Depart ment of Hematology,The Fi rst A f f iliated Hospital of Medical College of Zhenz hou U niversity, Zhenz hou450052,Chi na) Abstract To compare the expression of CD antigens on immune cells from umbilical cord blood(UCB)and bone marrow(BM)and analyze its clinical significance,the phenotypes of lymphoid cells and nucleated cells from38UCB and 10BM samples were investigated by flow cytometry with double labeling monoclonal antibodies.The results showed that the immature lymphocytes(CD3-CD4+)were detedcted in UCB and higher than those in BM;cytotoxic T lymphocytes (CD3+CD16+CD56+)in UCB were significantly lower than those in BM.N K cells(CD3-CD16+CD56+)in UCB were higher than those in BM.The ratio of CD34+cells in nucleated cells of UCB was similar to that of BM,however,both the contents of myeloid(CD34+CD13+and CD34+HLA2DR+)and lymphoid(CD34+CD19+)progenitor cells in UCB were lower than those in BM.It is concluded that the immune cells in UCBpossess immaturity,which might lead to mild GVHD after UCB trans plantation.It is infered from the higher ratio of N K cells in UCB,GVL will not decrease after UCB transplantation.The lower contents of myeloid and lymphoid progenitor cells in UCB probably accounted for the slow hematopoiesis and immune reconstitution following UCB transplantation. K ey w ords umbilical cord blood;bone marrow;lymphoid cell;immunophenotype 脐血具有经济、来源广、采集方便、无采集并发症,移植后移植物抗宿主病(graft versus host dis2 ease,GV HD)程度轻,移植物抗白血病(graft versus leukemia,GVL)效应不降低等优点。但是脐血也存在造血重建速度慢,易合并感染的问题。本研究应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)对脐血和骨髓免疫细胞分化抗原进行检测,比较二者在淋系祖细胞、髓系祖细胞、幼稚淋巴细胞及N K细胞含量方面有无差别,旨在分析二者免疫表型差异,探讨其在扩大脐血应用范围中的作用和意义。 材料与方法 标本采集 无菌条件下采集正常足月分娩新生儿脐血38份。母亲年龄24-35岁,平均(29.3±3.3)岁。新生儿娩出后,立即(不超过30秒)用止血钳在距脐轮2-3cm处夹住脐带,在两钳间剪断脐带,用含少许肝素的注射器抽取脐血,加入离心管中混匀。骨髓  通讯作者:郭荣 电话:(027)85730575.E2mail:gh7311@yahoo. https://www.wendangku.net/doc/c113198820.html, ? 9 1 5 ? 中国实验血液学杂志 Journal of Ex perimental Hem atology2002;10(6):519-522

2018全国大学生预防艾滋病知识竞赛试题(样题)

2018全国大学生预防艾滋病知识竞赛试题(样题) 2 2018全国大学生预防艾滋病知识竞赛试题(样题) 判断题: 1. 我国首个艾滋病患儿学校是临汾红丝带学校。(对) 2. 如果身边发现了艾滋病病毒感染者,应远离他们。(错) 3. 在日常生活中,使用公共设施不会传播艾滋病病毒。(对) 4. 如果必须输血时,有权了解血液是否经过艾滋病病毒抗体检测。(对) 5. 通常艾滋病感染者在4个月后能检出抗HIV阳性。(错) 6. 中国现有艾滋病病毒感染者约近千万人。(错) 7. 艾滋病抗病毒治疗的最终目标是延长患者生命,提高生活质量。(错) 8. 安全套只要没有损坏就可以重复使用。(错) 9. 红丝带的含义是唤起全社会对艾滋病事业的关注,并用心参与。(对) 10. 广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋病防治的公益宣传。病防治的公益宣传。(对)

11. 安全套预防艾滋病、性病的效果是100%。(错) 12. 关心关怀艾滋病病毒感染者和病人不属于国家“四免一关怀”政策的内。(错) 13. 对于HIV/AIDS的诊断最重要的依据是经确认HIV抗体阳性。(对) 14. 当HIV侵入机体后,未进入发病期者被称为窗口期。(错) 15. 《中华人民共和国传染病防治法》将艾滋病列入丙类传染病(错) 16. 艾滋病病毒抗体确诊试验检查能够最终确定病人感染了艾滋病病毒。(错) 17. 到公共泳池游泳、照顾艾滋病患者、与艾滋病病毒感染者握手、拥抱。(对)18. 既能避孕又能预防艾滋病病毒和性病传播的措施是结扎。(错) 19. 艾滋病感染者和艾滋病患者的区别是严重程度不同。(错) 20. 预防艾滋病的错误方法是远离艾滋病感染者和艾滋病患者,不与他们接触。(对) 21. 艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的以机会性感染和机会性肿瘤为特征的一种传染病,又称为获得性免疫缺陷综合征。(对) 22. 保护HIV/AIDS患者的合法权益,是做好预防控制艾滋病的重要内容之一。(对) 23. 于HIV感染者及AIDS病人日常生活和工作会感染艾滋病。

CD和CDT淋巴细胞检测

C D和C D T淋巴细胞 检测 集团档案编码:[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]

CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测?? ? 1? 范围 本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和 CD8+ T淋巴细胞。 ? 2?? 规范性引用文件 1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR 46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。 ? 3? 实验室条件 3.1 人员 进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。 3.2? 设施和设备 3.2.1? 样品处理区:生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器(5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl)。 3.2.2? 流式细胞仪检测区:流式细胞仪 3.3? 功能分区 实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是: 3.3.1? 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级(BSL-2)实验室要求,用于样品处理、流式检测样品制备。 3.3.2? 流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。

? 4? 样品采集、运输和接收 4.1? 样品的采集 4.1.1? 选择合适的抗凝剂,分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。 4.1.1.1? 用于血液学检测的抗凝剂 (1) EDTA(1.5±0.15mg/ml血液)。 (2)在血球分析仪生产商允许的时间范围内检测,不超过30h,不检测超出抗凝时间范围的样品。 4.1.1.2? 用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂 (1)用K3EDTA抗凝,收集样品应在30h以内,尽早(8h以内)处理。 (2)用ACD或肝素抗凝,收集样品在48h以内,尽早(8h以内)处理。 4.1.2? 静脉采血收集血样,将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管(用真空试管)。 4.1.2.1? 当收集儿童样品时,采用儿童用注射器、小试管。 4.1.2.2? 采血后立即握住试管两端,颠倒混匀数次,将血液与抗凝剂混匀,以防止凝固。 4.1.3? 准备适当数量的样品管 4.1.3.1? 当同一样品的血球检测和流式细胞仪免疫表型检测在不同实验室内进行时,用2个装有K3EDTA的试管即可。 4.1.3.2? 在所有其它条件下用2个试管(用K3EDTA作血球检测,用K3 EDTA、ACD或肝素作流式细胞仪免疫表型检测)。 4.1.4 ?对所有样品编号,并写明日期和收集时间。 4.2? 样品运输

泰安市艾滋病病毒感染者

泰安市艾滋病病毒感染者/艾滋病患者生存状况 了解泰安市HIV/AIDS患者的生存状况,为制定相关的救治救助政策和干预措施提供科学依据。方法使用自行设计的调查问卷、焦虑自评量表、抑郁自评量表和社会支持评定量表对本地区能随访到的全部HIV/AIDS患者进行面对面的问卷调查。结果调查的36例HIV/AIDS 患者感觉自己生活质量很好或较好的仅占22.22%,4/36评定有焦虑,13/36评定有抑郁,家庭收入低于当地农民平均水平;年龄小于30岁、最近1个月参与社交活动多、最近1次CD4细胞检测结果高、没有接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者自我感觉生活状况较好,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HIV/AIDS患者自我感觉生活状况差,部分存在心理问题,经济收入较低,应进一步加大心理支持和社会救助。 泰安市自1995年发现首例艾滋病病毒感染者以来,目前感染已遍布6个县市区。国家“四免一关怀”及相关救助政策已落实多年,为深入了解本市艾滋病病毒感染者和艾滋病患者(HIV/AIDS患者)的生存状况,探讨生存质量的影响因素,为制定相关的干预措施和救治救助政策提供依据,2009-11/2010-01对该市的HIV感染者和AIDS患者的生存现况进行了调查,结果如下。 1对象与方法 1.1调查对象泰安市目前存活且能随访到的全部HIV感染者和AIDS患者。 1.2调查方法由经统一培训的调查员在取得调查对象知情同意的情况下对其进行“一对一的”问卷调查,1名儿童由其监护人协助回答。调查内容包括4种量表和问卷:①自制的一般情况记录表:主要包括自我感觉的心理状况、日常交往、经济状况和抗病毒治疗情况等; ②社会支持评定量表(SSRS):评估被调查者的社会支持情况,评分指标包括SSS总分和3个维度(客观支持3条、主观支持4条、社会支持利用度3条)的得分;③焦虑自评量表(SAS):标准分总分低于50为正常,50分以上评定为有焦虑症状存在;④抑郁自评量表(SDS);标准分总分低于50为正常,50分以上评定为有抑郁倾向。 1.3统计分析所有资料经EPI data 3.02进行双录入校对后,用SPSS 11.5进行统计分析。 2结果 2.1一般人口学特征共获得有效调查问卷36份,男女性别比为1.4:1;最小的5岁,最大的57岁,年龄平均值35岁;农民及民工共占86.11%;已婚/同居的占72.22%;有91.67%的人学历在初中及以下(表1)。 2.2 感染特征与抗病毒治疗情况36例调查对象中主要传播途径为异性性传播(20人),异性性传播中65%(13/20)是配偶间性传播。感染地点在本省的为23人,在外省的11人,不确定2人。确认时CD4细胞水平低于350的11人(30.56%)。15名女性HIV感染者中有13人有孕产史,均存活,没有发生母婴传播,其中8名女性HIV感染者是来自艾滋病高流行省份的外来妇女。调查5岁感染儿童1例,其母亲为外来妇女,已死亡。 调查对象中有12名AIDS患者正在接受抗病毒治疗,另有1人因严重副反应退出抗病毒治疗。服药期间发生副反应8人(61.53%),主要副反应是恶心呕吐和疲倦感;2人有漏服情况,漏服原因是工作忙和副作用太大;未按时服药3人,未按时服药的原因主要是服药时外人在场和药品不在身边。服药保障措施分别是家人定期提醒8人、自己重视3人、督导员随时提醒2人;坚持服药原因主要是家庭支持、认为服药有利和遵照医生建议。13例AIDS 患者中有9人目前希望得到专科医生的帮助。抗病毒治疗后治疗艾滋病及相关疾病一年花费

中国人血液淋巴细胞免疫表型参考值调查

中国人血液淋巴细胞免疫表型参考值调查 来源:https://www.wendangku.net/doc/c113198820.html,时间:2007-10-06 字体:[大中小] 收藏我要投稿 文章出处:朱敏转载请注明出处 【摘要】目的建立健康中国成人血液淋巴细胞免疫表型分析参考值。方法用Simultest IMK-Lymphocyte试剂盒的荧光抗体对102例健康中国成人血液进行染色,以FACSort流式细胞仪进行分析,Simulset程序获取数据并分析结果,SPSS软件进行统计。结果18~65岁健康中国成人淋巴细胞参考值范围CD+3细胞是50%~84%(955~2 860/μl),CD-3CD+19细胞为5%~18%(90~560/μl),CD+3CD+4细胞为27%~51%(550~1 440/μl),CD+3CD+8细胞为15%~44%(320~1 250/μl),CD-3、CD+16和/或CD+56细胞为7%~40%(150~1 100/μl),CD+3CD+4/CD+3CD+8比值为0.71~2.87。随着年龄增长CD+3CD+4细胞略有升高,CD+3CD+8细胞略有降低。NK细胞在大年龄组女性低于男性,且有统计学差异(P<0.05)。与高加索人和美国人相比,中国人的CD+3CD+8细胞和NK细胞(CD-3,CD+16和/或CD+56)的相对值(百分率)与绝对值均高,CD-3CD+19细胞和CD+3CD+4细胞仅相对值较低,但绝对值不少。CD+3CD+4/CD+3CD+8比值向低值漂移。结论种族、性别、年龄和环境因素可影响健康人淋巴细胞表型分布。 Reference values on blood lymphocyte immunophenotype in healthy Chinese adult Zhu Lihua, Wang Jianzhong, First Hospital, Beijing Medical University, Beijing,100034 【Abstruct】Objective To establish the reference values on blood lymphocyte immunophenotype in healthy Chinese adults.Method Staining whole blood with fluorescein-conjugated monoclonal antibodies supplied by simultest TM IMK lymphocyte kit, we analyzed 102 healthy Chinese residents (age range 18~65 years) by FACSort flow cytometer, acquired results by Simultest programme, and performed statistical analysis by SPSS software.Results The 95% reference ranges in absolute counts per microliter of whole blood (percentage of lymphocytes) for CD+3, CD+3CD+4, CD+3CD+8, CD-3CD+19, CD-3/CD+16 and/or CD+56 cells were 955 to 2 860 (50% to 84%), 550 to 1 440 (27% to 51%), 320 to 1250 (15% to 44%), 90 to 560 (5% to 18%), 150 to 1 100 (7% to 40%) respectively. The CD+3CD+4/CD+3CD+8 ratio was 0.71 to 2.87. CD+3CD+4 cells increased and CD+3CD+8 cells decreased slightly with age. Women were compared to men in old age group, NK cells (CD-3/CD+16 and/or CD+56) were lower (P<0.05). Compared with Caucasians and Americans, Chinese had higher percentage and absolute numbers of CD+3CD+8 and NK cells, but had lower percentage of CD-3CD+19 and CD+3CD+4 cells without absolute number change. So CD+3CD+4/CD+3CD+8ratio skew to the lower values.Conclusion The race, age and environment could influence the reference value of lymphocyte immunophenotype. 【Key words】Lymphocyte immunophenotype Reference value Flow cytometry 淋巴细胞免疫表型分析在原发或获得性免疫缺陷病、自身免疫性疾病的辅助诊断和移植免疫的监测中具有重要作用。随着流式细胞仪的广泛应用,采用流式细胞术进行淋巴细胞免疫表型分析已逐渐成为临床检验的常规工作之一。各国的流式细胞术实验室均建立了自己的参考值,并对其种族、性别、年龄等影响因素进行了探讨。目前我国还没有用流式细胞术、采用双染色分析淋巴细胞免疫表型参考值的报告。为此我们对102例健康成人进行了淋巴细胞免疫表型分析,现报告如下。材料和方法 一、研究对象 102例标本均取自于无免疫性疾病、无现症、不吸烟、体检健康、血细胞计数及肝、肾功能检查正常的成人。年龄18~65岁,其中男性54人,女性48人。首先按男女性别分为两大组,每组中又以40岁为界,≤40岁者为小年龄组(男24人,女19人),>40岁者为大年龄组(男30人,女29人)。

第十五章 T淋巴细胞对抗原的识别及应答

第十五章T淋巴细胞对抗原的识别及应答 复习要点: 掌握免疫应答的概念及类型、Th1细胞和Th2细胞的功能、Tc细胞的杀伤作用特点。熟悉免疫应答的三个阶段和T淋巴细胞对抗原识别、活化、增殖及分化的过程。了解T细胞活化信号传导的主要途径。 一、单项选择题 1.抗原提呈细胞所不具备的作用是: A.促进T 细胞表达特异性抗原受体 B. 降解抗原为小分子肽段 C. 使MHC 分子与抗原肽结合 D. 将抗原肽– MHC 复合物呈递给T 细胞 E. 为T 细胞活化提供第二信号 2.下面哪种免疫作用在无抗体存在时仍可发生? A. ADCC 作用 B. 补体经典途径激活时对靶细胞的溶解 C. 病毒中和作用 D. 毒素中和作用 E. NK 细胞对靶细胞的杀伤作用 3.关于细胞免疫,下列哪项是错误的? A. 由TD 抗原诱导 B. T 细胞介导,抗原提呈细胞参与 C. IL-1 为T 细胞活化第二信号 D. 致敏Tc 细胞特异性杀伤靶细胞 E. Th1 细胞释放细胞因子引起迟发型超敏反应 4.Th1 细胞可通过下列哪种作用产生免疫效应? A. 非特异性直接杀伤靶细胞 B. 分泌抗体 C. 特异性直接杀伤靶细胞 D. 释放细胞因子产生免疫效应 E. ADCC 作用 5.下列哪种细胞能特异性杀伤靶细胞? A. LAK 细胞 B. 活化的Th细胞 C. 致敏Tc 细胞 D. Th2 细胞 E. NK 细胞 6.细胞间相互作用不受MHC 限制的是: A. Tc 细胞与肿瘤细胞 B. NK 细胞与肿瘤细胞 C. Th 细胞与B 细胞 D. 巨噬细胞与Th 细胞 E. 树突状细胞与Th 细胞 7.与细胞免疫无关的免疫反应是: A. 外毒素中和作用 B. 抗肿瘤免疫作用 C. 移植排斥反应 D. 接触性皮炎 E. 结核空洞形成 8.Tc 细胞活化、增殖、分化与下列哪种分子无直接关系? A. 协同刺激分子受体 B. MHC II 类分子 C. IL-12 D. IFN- E. IL-2 9.穿孔素与补体系统的哪种成分具有结构同源性?

急性淋巴细胞白血病免疫表型特点及其临床意义

急性淋巴细胞白血病免疫表型特点及其 临床意义 (作者:___________单位: ___________邮编: ___________) 【摘要】目的为探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)的免疫表型特征及与治疗的关系。方法采用流式细胞仪对77例ALL患者进行免疫表型分析。结果① 77例ALL中L1型44.16%,L2型50.65%,L3型 5.19%;B淋巴细胞性ALL(B-ALL)80.52%,T淋巴细胞性ALL(T-ALL)15.58%。② 77例ALL中髓系抗原(My)阳性率为57.14%;其中表达CD13的阳性率最高,为84.09%,其次为CD33和CD15;My+ B-ALL占B-ALL的58.06%,My+ T-ALL占T-ALL的50%,两组比较差别无统计学意义(P0.05);My+ ALL组CR率为81.82%,略低于My-ALL 组(88.24%),但差异无统计学意义(P0.05)。③ CD34表达阳性率为49.35%,B-ALL中为56.45%,明显高于T-ALL的25%(P0.05);My+ ALL 中CD34表达阳性率为71.05%,高于My-ALL的33.33%(P0.05);CD+34 ALL组CR率为76.47%,低于CD-34ALL组的90.91%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 ALL免疫分型与FAB分型变化无相关性;My+ ALL 患者中CD34表达阳性率高于My-ALL患者;CD34和髓系抗原的表达与CR率无相关性。

【关键词】急性淋巴细胞白血病;免疫表型 急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的免疫分型对其诊断、治疗及预后判断有重要意义,而ALL不同的恶性克隆来源存在着显著不同的生物学特征及预后因素。为进一步探讨ALL各亚型免疫表型的特点及其与预后的关系,我们对本院77例ALL患者资料进行了研究,现报告如下。 1 资料和方法 1.1 病例资料 宁夏医科大学附属医院血液科及儿科2002-2008年间的住院初治ALL患者77例。男54例,女23例,年龄2.2~72岁,其中14岁儿童患者42例,中位年龄5.6岁,≥14岁患者35例,中位年龄23岁。所有病例均根据临床表现、骨髓细胞形态学、细胞化学染色及免疫分型而确诊。细胞形态学诊断根据FAB分型标准[1],对于免疫分型诊断ALL又同时存在髓系抗原表达阳性,但又不够急性混合细胞白血病诊断标准,视为伴髓系抗原表达的ALL(My+ ALL)[2]。 1.2 免疫表型分析 受检者抽取骨髓或外周血经肝素抗凝,采用活细胞三色免疫荧光法标记,流式细胞仪检测,通过二维点图分析抗原表达情况。流式细胞仪型号为FACS Calibur,美国Becton-Dickinson公司生产,所用单克隆抗体亦均为美国BD公司产品。B淋巴细胞系单抗:CD10、CD19、CD20、CD22;T淋巴细胞系单抗:CD3、CD5、CD7;髓系单抗:CD13、CD14、CD15、CD33、CD117;造血干/祖细胞单抗:CD34。结果判定用

艾滋病防治知识试题

艾滋病防治知识试题 单项选择题 1、艾滋病病毒的英文缩写是(C) A、HAV B、AIDS C、HIV D、HBV 2、艾滋病的医学全名为(B) A、免疫缺陷综合征 B、获得性免疫缺陷综合征 C、先天性免疫缺陷综合征 D、继发性免疫缺陷综合征 3、我国目前艾滋病传播方式中所占比例最高的是(A) A、性接触 B、母婴传播 C、输血 D、共用针具注射毒品 4、感染艾滋病病毒的妇女会通过什么途径将病毒传染给婴儿(C) A、妊娠,分娩,亲吻 B、哺乳,亲吻,妊娠 C、妊娠,分娩,哺乳 D、搂抱,亲吻,呼吸 5、下列哪项是预防经性途径感染艾滋病的有效措施( A ) A、坚持正确使用安全套 B、拒绝毒品 C、到正规医院拔牙 D、不与人共用牙刷 6、艾滋病病毒感染者是指(D) A、感染了艾滋病病毒而且已经出现AIDS临床症状和体征的人 B、接触过艾滋病病人的人 C、接触过艾滋病病毒的人 D、感染了艾滋病病毒但还没出现AIDS临床症状和体征的人 7、感染艾滋病病毒后,到血液中能检测出艾滋病病毒抗体的这段时间,称为什么期( D ) A、急性感染期 B、无症状感染期 C、临床症状前期 D、窗口期 8、下列哪项不是艾滋病的传播途径( D ) A、性传播 B、母婴垂直传播 C、血,血制品,器官移植和污染的注射器 D、蚊虫叮咬

9、HIV传播必须具备的条件有哪些? ( D ) A、有大量的病毒从感染者体内排出 B、排出的病毒要经过一定方式传递给他人 C、有足量的病毒进入体内 D、以上都是 10、艾滋病的治疗原则是(D) A、抗感染 B、免疫调节和免疫重建 C、抗病毒、抗肿瘤治疗 D、以上各项均是 11、已怀孕妇女预防艾滋病母婴传播的有效措施是( D ) A.给孕妇注射疫苗 B.鼓励母乳喂养 C.替婴儿注射疫苗 D.母亲在妊娠期及围产期、婴儿在出生后应用抗HIV药物 12、以下吸毒行为中最容易传播艾滋病病毒的是( D ) A、鼻吸入毒品 B、口服毒品 C、静脉注射吸毒 D、数人共用注射针具静脉注射毒品 13、预防经性途径传染艾滋病的根本措施是( D ) A、坚持使用安全套 B、拒绝毒品 C、避免与艾滋病病人发生性关系 D、洁身自爱、遵守性道德 14、我国预防控制艾滋病的工作机制是(A) A、政府组织领导、部门各负其责、全社会共同参与 B、政府组织领导、卫生部门负责、全社会共同参与 C、政府组织领导、加强宣传教育、全社会共同参与 D、以上都不是 15、我国预防控制艾滋病的工作方针是( A ) A、预防为主,防治结合,综合治理 B、政府主导,全社会参与 C、广泛发动群众,全社会动员 D、标本兼治,综合治理 16、下列哪种行为有传染艾滋病的危险( A ) A、共用剃须刀 B、共用毛巾、马桶 C、共用茶杯和餐具 D、蚊

2017年全国大学生预防艾滋病知识竞赛试题附答案

2017年全国大学生预防艾滋病知识竞赛试题附答案判断题: 1. 我国首个艾滋病患儿学校是临汾红丝带学校。(对) 2. 如果身边发现了艾滋病病毒感染者,应远离他们。(错) 3. 在日常生活中,使用公共设施不会传播艾滋病病毒。(对) 4. 如果必须输血时,有权了解血液是否经过艾滋病病毒抗体检测。(对) 5. 通常艾滋病感染者在4个月后能检出抗HIV阳性。(错) 6. 中国现有艾滋病病毒感染者约近千万人。(错) 7. 艾滋病抗病毒治疗的最终目标是延长患者生命,提高生活质量。(错) 8. 安全套只要没有损坏就可以重复使用。(错) 9. 红丝带的含义是唤起全社会对艾滋病事业的关注,并用心参与。(对) 10. 广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋广播、电视、报刊、互联网等新闻媒体应当开展艾滋病防治的公益宣传。病防治的公益宣传。(对) 11. 安全套预防艾滋病、性病的效果是100%。(错) 12. 关心关怀艾滋病病毒感染者和病人不属于国家“四免一关怀”政策的内。(错) 13. 对于HIV/AIDS的诊断最重要的依据是经确认HIV抗体阳性。(对) 14. 当HIV侵入机体后,未进入发病期者被称为窗口期。(错) 15. 《中华人民共和国传染病防治法》将艾滋病列入丙类传染病(错) 16. 艾滋病病毒抗体确诊试验检查能够最终确定病人感染了艾滋病病毒。(错) 17. 到公共泳池游泳、照顾艾滋病患者、与艾滋病病毒感染者握手、拥抱。(对)18. 既能避孕又能预防艾滋病病毒和性病传播的措施是结扎。(错) 19. 艾滋病感染者和艾滋病患者的区别是严重程度不同。(错) 20. 预防艾滋病的错误方法是远离艾滋病感染者和艾滋病患者,不与他们接触。(对) 21. 艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的以机会性感染和机会性肿瘤为特征的一种传染病,又称为获得性免疫缺陷综合征。(对) 22. 保护HIV/AIDS患者的合法权益,是做好预防控制艾滋病的重要内容之一。(对) 23. 于HIV感染者及AIDS病人日常生活和工作会感染艾滋病。(错) 24. 避免不必要的输血和注射可以减少感染艾滋病的危险。(对) 25. 每个人都有感染艾滋病的可能性。(对) 26. 正确使用安全套可以减少感染性病和艾滋病的危险。(对) 27. 使用安全套可以很大程度上预防艾滋病的传播。(对) 28. 目前仍缺乏根治HIV 感染的药物,多采用综合治疗:包括心理治疗、抗HIV 病毒治疗、预防和治疗机会性感染、支持疗法等,其中以抗病毒治疗最为关键。(对) 29. 艾滋病目前不能治愈,提高病人生存质量和延长生存期是治疗的最终目标。(对) 30. 因为艾滋病毒只感染少数有危险行为的人,因此我们需要进行大量的健康教育。(对) 31. 没有症状的带病毒者可以将病毒传染给他人。(对) 32. HIV 急性感染期中,患者不具备传染性,无任何症状。(错) 33. 与艾滋病患者共同进餐不可以感染艾滋病毒。(对) 34. 抗病毒治疗主要是抑制病毒在体内复制,目前不主张联合用药。(错) 35. 如母亲为艾滋病人,其新生儿血中HIV 抗体阳性,即可确诊是感染了HIV。(错) 单选题 36. PCP首选治疗是:

艾滋病试题

2018年第一期艾滋病防治知识 测试题 科室姓名得分 一、单选题(每题4分,共32分) 1、艾滋病是一种:( ) A.呼吸道疾病 B.消化道疾病 C.性传播疾病 D皮肤病 2、在世界范围内,艾滋病的主要传播途径是:( ) A.性传播 B.血液传播 C.母婴传播 3、艾滋病病毒入侵人体后,主要破坏人体的哪个系统?( ) A生殖系统 B.骨骼肌肉系统 C.免疫系统 D. 神经系统 4、确定一个人是否感染了艾滋病病毒主要是依靠:( ) A.临床表现 B.窗口期后血液中艾滋病病毒抗体检测 C.是否有高危行为 5、“世界艾滋病日”是每年的( ) A.4月1日 B.6月1日 C.9月1日 D.12月1日 6、在下列哪个年龄组的人群中艾滋病病毒感染率最高:( ) A.儿童 B.青壮年 C.中年 D 老年 7、艾滋病不会经哪种途径传播( ) A、无保护措施的同性或异性性行为 B 、输入未经HIV检测的血液或血液制品 C、 HIV感染者怀孕、生产

D、与HIV感染者拥抱、握手 8、人体感染HIV后到外周血液中产生足够量的、能用常规方法检测出艾滋病病毒抗体之间的这段时期称为:( ) A.急性期 B.潜伏期 C.临床期 D.窗口期 二、多选题(每题4分,共28分) 1、艾滋病的三种传播途径是( ) A.血液传播 B.握手、拥抱传播 C.性行为传播 D. 通过空气、蚊虫叮咬传播 E.母婴传播 2、国际上艾滋病预防干预的成功经验包括:( ) A.政府重视、全社会动员、多部门参与、密切配合 B. 公布病人和感染者的姓名、住址等,以便使公众更容易防范 C. 大力在目标人群中推广和增加安全套的使用 D. 在艾滋病预防控制工作中改进性病的医疗保健服务 3. HIV主要存在于人的体液中,在这些体液中,可能造成传播 的是( ) A.血液 B.唾液 C.乳汁 D.精液 4 预防艾滋病应做到( ) A.不输入被艾滋病病毒污染的血液或血液制品 B.不共用注射器、针头、牙刷、剔须刀等可能被血液污染的物 品 C. 不以任何方式吸毒 D .性行为中坚持全程正确使用质量合格的安全套

艾滋病知识试卷

1.《中华人民共和国传染病防治法》将艾滋病列入哪类传染病?(B ) A.甲类 B.乙类 C.丙类 D.丁类 2 .当HIV侵入机体后,未进入发病期者被称为:( B) A.艾滋病病人 B.艾滋病病毒感染 C.窗口期 D.艾滋病 3.对于HIV/AIDS的诊断最重要的依据是:(B ) A.临床表现 B.经确认HIV抗体阳性 C.具有高危行为 D.免疫功能下降 4.某人到卫生疾病预防控制机构进行检测,初筛结果HIV抗体阳性,则可以判定为( C) A.感染了HIV B.没有感染HIV C.怀疑感染了HIV,需要确认实验才能判断 D.不能确定 5.我国预防控制艾滋病的基本原则是:(A ) A.预防为主、防治结合、综合治理 B.政府主导,全社会参与 C.广泛发动群众,全社会动员

D.标本兼治,综合治理 6.下列哪一项不属于国家“四免一关怀”政策的内容?( A ) A.对所有艾滋病病人实行免费抗艾滋病病毒药物治疗 B.为自愿咨询检测的人员免费提供咨询和初筛检测;对艾滋病病人的遗孤实行免费上学 C.对孕妇实施免费艾滋病咨询、筛查和抗病毒药物治疗,减少母婴传播 D.关心关怀艾滋病病毒感染者和病人 7.艾滋病病毒通过血液和血液制品传播的概率大约是:(D) A.40% B.60% C.80% D.100% 8.艾滋病患者常见的肿瘤是(C) A.霍奇金病 B.淋巴肉瘤 C.卡波氏肉瘤 D.非霍奇金淋巴瘤 9.艾滋病最常见的机会性感染是:(A) A.肺结核病 B.肝炎 C.感冒 D.心肌炎 10.我国于哪一年发现首例艾滋病?(B) A.1981年 B.1985年 C.1990年

11.我国艾滋病的流行现正处于:(C) A.传入期 B.扩散期 C.快速增长期 12、当HlV侵入机体后,未进入发病期者被称之为(B) A、艾滋病病人 B、艾滋病病毒感染者 C、窗口期 13、一般用于乙型肝炎的消毒药物,完全可以用于艾滋病病毒的消毒。(对) 14、PCP首选治疗是: B A、氟康唑 B、复方新诺明 C、戊烷脒 D、乙胺嘧啶 15、对艾滋病病毒易感的人群是。D A、静脉吸毒者 B、性乱者 C、同性恋者 D、每个人 16、我国HIV-l主要流行株是HIV-l的B,E亚型。(错) 17、从感染艾滋病病毒到抗体可测出的这段时间称为窗口期。 4、目前预防艾滋病病毒最好的办法是:(B) A、注射疫苗 B、改变危险行为 C、吃保健品

第十一章 淋巴细胞抗原识别受体的编码基因及多样性的产生

第十一章淋巴细胞抗原识别受体的编码基因及多样性的产 生 复习要点: 1.了解BCR、TCR基因结构和发生重排的一般特点。 2.了解BCR、TCR多样性产生的机制。 一、单项选择题 1.B淋巴细胞膜表面具有的抗原识别受体是 A.TCR B.CR2 C.FcR D.CR1 E.BCR 2.T淋巴细胞膜表面具有的抗原识别受体是 A.FcR B.mIg C.BCR D.TCR E.CR1 3.受体基因重排的重组信号序列是★ A.5核苷酸-间隔序列-9核苷酸 B.7核苷酸-间隔序列-7核苷酸 C.7核苷酸-间隔序列-9核苷酸 D.7核苷酸-间隔序列-5核苷酸 E.9核苷酸-间隔序列-9核苷酸 4.受体基因重排时,重组信号间隔序列片段结合的规则是★ A.13-23 B.12-23 C.13-25 D.23-25 E.25-12 5.BCR的V H-D H-J H基因片段组合后编码的产物是★ A.CDR1 B.CDR2 C.CDR3 D.FR1 E.FR2 二、多项选择题 1.编码人BCR重链V区的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 2.编码人BCR κ链的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 3.编码人BCR λ链的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 4.编码人TCR α链的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 5.编码人TCR β链的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 6.编码人TCR γδ链的胚系基因有★ A.V基因片段B.D基因片段C.J基因片段 D.C基因片段E.L基因片段 7.编码人TCR δ链的胚系基因有★

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